Estágio realizado na EuroResinas-Indústrias Químicas, S.A. e orientado pelo Dr. João Paulo Liberal / Tese de mestrado integrado. Engenharia Química. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2008

Tese de doutoramento. Engenharia Química. 2006. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto

Devido ao crescimento da produção e do consumo de biocombustíveis em todo o mundo, a quantidade gerada de glicerina, principal co-produto da cadeia produtiva do biodiesel, vem aumentando consideravelmente. Com isso, há a necessidade de pesquisar novas utilizações para este composto. Um dos principais derivados do glicerol é o monoacilglicerídeo, que é um monoéster de ácido graxo com glicerol muito utilizado em diversos setores da indústria devido às suas propriedades emulsificantes e tensoativas. Visando obter monoglicerideos derivados de ésteres etílicos de ácidos graxos, foi investigada neste trabalho a reação de glicerólise destes ésteres com o uso de catalisador alcalino NaOH, avaliando a influência da temperatura, do tempo de reação e da concentração do catalisador. Foram comparados os resultados obtidos com diferentes condições de reação em relação à conversão dos ésteres etílicos, rendimentos dos possíveis produtos e seletividade ao monoglicerídeo. As análises quantitativas foram realizadas por cromatografia a gás com detector de ionização em chama. Uma conversão da ordem de 87% foi alcançada em 6 horas de reação, com 5% em massa de catalisador e a 130 °C, apresentando rendimento de 65% em monoglicerídeos e 20% em diglicerídeos, com uma seletividade aos monoésteres de 75%. Esta composição satisfaz as diretrizes estabelecidas pela Organização Mundial da Saúde para o uso de emulsificantes na indústria de alimentos, a qual determina que estas misturas devem ter no mínimo 30% de monoglicerídeo e no mínimo 70% na soma de mono e diglicerídeo. / Due to the continuous growth of biofuel production and consumption worldwide, the amount of glicerin, the main co-product of biodiesel industrial chain, has increased considerably. Thus, there is a need in researching new applications for this compound. One of the most valuable derivative of glycerol is monoacylglyceride, which is a monoester of fatty acid with glycerol very used in several industry fields because of its emulsifying and surfactants properties. In order to obtain monoglycerides from fatty acid ethyl esters, was investigated in this work the glycerolysis reaction of these esters with alcali catalyst NaOH, in which the influence of the temperature, reaction time and catalyst concentration were evaluated. The results were compared between the different reaction conditions regarding ethyl esters conversion, products yield and monoglyceride selectivity. The quantitative analysis were performed in a gas chromatographer with flame ionization detector. The convertion about 87% was achieved in a 6-hour reaction, with 5% (w/w) of the catalyst under 130 °C, resulting in a yield of 65% of monoglyceride and 20% of diglyceride, and a selectivity of 75% in monoester. This composition satisfies the values established by World Health Organization, who determines the minimum of 30% monglyceride and 70% mono plus diglyceride in these mixtures in order to apply them in the food industry.

O presente trabalho versa sobre o desenvolvimento de dois métodos quantitativos para determinação de dimeticona em matéria-prima de simeticona emulsão 30% e simeticona 100% por cromatografia gasosa com detecção de ionização de chama. Essas matérias-prima são utilizadas em várias áreas, na farmacêutica podem ser empregadas como princípios ativos em medicamentos, como agente diminuidor de bolhas no trato gastrointestinal. Para garantir que os métodos de cromatografia gasosa, de fato, eram para a finalidade para a qual foram desenvolvidos, foi utilizado o processo de validação de metodologia analítica, baseado na resolução 899 da ANVISA. Para melhor acompanhamento foi realizada, concomitantemente, a validação do método farmacopeico para quantificação de dimeticona em simeticona emulsão, encontrado na farmacopéia americana USP 29, 2006 pela técnica de espectroscopia de absorção molecular no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). O parâmetro de linearidade apresentou coeficiente de correlação acima de 0,99 para os quatro métodos validados, os teores de recuperação do analito para os parâmetros de exatidão, precisão e robustez ficaram entre 93% e 107%. Os desvios-padrão relativos calculados para as figuras de mérito de exatidão, precisão e robustez foram inferiores a 5%. Esses resultados indicam que todos os métodos estudados podem ser utilizados de acordo com os critérios de aceitação estipulados. Para aumentar a confiabilidade dos métodos cromatográficos e espectroscópico fez-se uso de alguns testes estatísticos como: teste de validade da regressão, análise de variâncias e teste para dados discrepantes no parâmetro de linearidade; teste t-Student para exatidão e precisão; e planejamento fatorial para o teste de robustez, calculando-se a significância dos efeitos dos fatores. Por fim, analisaram-se algumas amostras de matéria-prima de simeticona emulsão 30% e simeticona 100%, para teste em amostras reais, obtendo-se valores entre 90 e 102% (m/m) de dimeticona em matéria-prima de simeticona. / The aim of the present research was the development of two quantitative methods for dimethicone determination in simethicone emulsion 30% and simethicone 100% raw material by gas chromatography with flame ionization detector. These raw materials are used in the manufacture of several pharmaceuticals such as an active ingredient to inhibit flatulence due to excess of gastrointestinal gas. In order to guarantee that the developed methods were suitable for the purpose, an analytical process validation based on the resolution no. 899 from ANVISA was carried on. The concomitant evaluation was performed taking into account the pharmacopeia method validation grounded on simethicone monograph (USP 29, 2006) by Fourier Transform infrared spectroscopy (FTIR). The validation parameters of linearity presented correlation coefficient of 0.99 for all four validated methods. The values of the analyte recovery in terms of precision, accuracy and robustness lain between 93% and 107%. The relative standard deviation for the figures of merit validation was below 5%. The results demonstrated that all tested methods can be used to the purpose they were intended, according to the established acceptance criteria. To increase the chromatography and spectroscopic method confiability, some statistical tests were used, such as: regression validation, analysis of variance and outliers test to linearity; t-Student test to accuracy and precision, factorial experiment design to robustness. Finally, some real samples raw materials were analyzed and the results lain between 90 and 102% (w/w) of dimethicone in simethicone raw material.

Com a crescente demanda de substâncias enantiomericamente puras e na busca por métodos que demandem menor tempo e custo, algumas metodologias preparativas, envolvendo separação quiral, sobressaem-se à síntese enantiosseletiva. A cromatografia contracorrente de alta eficiência (HPCCC) é uma técnica de separação líquido-líquido baseada nas diferenças de partição dos componentes de uma mistura, entre duas fases líquidas imiscíveis, e possui vantagens distintas na separação quiral. O anti-helmíntico praziquantel (PZQ) é obtido como mistura racêmica, sendo que o enantiômero R-(-)-PZQ é ativo, enquanto o S-(+)-PZQ está associdado aos efeitos colaterais e ao sabor amargo. O isolamento do enantiômero R-(-)-PZQ levaria a redução da dose nas formulações, além de promover redução no sabor amargo de preparações líquidas, fator importante para a adesão ao tratamento, principalmente por crianças. O objetivo deste estudo foi o emprego da técnica de HPCCC e, com auxílio de modelagem molecular, a avaliação de diferentes seletores quirais (SQs) na separação enantiomérica do PZQ. Diversos sistemas de solventes bifásicos (SSBs) foram avaliados, através da determinação do coeficiente de partição (K) do PZQ, do tempo de separação das fases e das condições cromatográficas de operação, na ausência e presença de SQs. Também foi desenvolvida metodologia analítica por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), com fase estacionária quiral, para análise complementar das frações coletadas por HPCCC. Os SQs hidroxipropil-β- ciclodextrina (HP-β-CD), hidroxipropil-ɣ-ciclodextrina e ácido L-(+)-tartárico foram avaliados experimentalmente e/ou empregando modelagem molecular. O método de CLAE quiral foi considerado adequado para o uso pretendido, fornecendo tempo de retenção de 9,24 e 10,16 minutos para o (S)-PZQ e o (R)-PZQ, respectivamente, com resolução de 1,7 entre os enantiômeros e pratos teóricos superiores a 4000 para ambos. O SQ HP-β-CD, a partir da concentração de 100 mmol/L, dissolvido no SSB composto por hexano/acetato de etila/metanol/água, nas proporções 1:1:1:1 e 1,2:0,8:1,2:0,8 (v/v/v/v), resultou em indício de separação dos enantiômeros de PZQ, estando de acordo com os resultados de modelagem molecular, os quais não evidenciaram elevado poder discriminatório deste SQ em relação aos isômeros. O conjunto de parâmetros da modelagem molecular indicaram a carboximetil-β- ciclodextrina como o SQ mais promissor para a separação enantiomérica de PZQ. / With the increasing demand of enantiomerically pure substances and in the search for methods that require less time and cost, some preparative methodologies, involving chiral separation, stand out for the enantioselective synthesis. High performance countercurrent chromatography (HPCCC) is a liquid-liquid separation technique based on the partition differences of the components in a mixture, between two immiscible liquid phases, and has distinct advantages in the chiral separation. The antihelmintic praziquantel (PZQ) is obtained as racemic mixture, whereas the R-(-)- PZQ enantiomer is active, while S-(+)-PZQ is associated with side effects and bitter taste. Isolation of the R-(-)-PZQ enantiomer would lead to dose reduction in the formulations, besides promoting bitter taste reduction of liquid preparations, an important factor for treatment adherence, especially for children. The aim of this study was the employment of the HPCCC technique and, with the aid of molecular modeling, the evaluation of different chiral selectors (CSs) in the enantiomeric separation of PZQ. Several biphasic solvent systems (BSSs) were evaluated by partition coefficient (K) determination of the PZQ, the settling time and the operating chromatographic conditions, in the CSs absence and presence. It was also developed an analytical methodology by high performance liquid chromatography (HPLC), with chiral stationary phase, for complementary analysis of the HPCCC fractions. Hydroxypropyl- β-cyclodextrin (HP-β-CD), hydroxypropyl-ɣ-cyclodextrin and L-(+)-tartaric acid were evaluated experimentally and/or using molecular modeling. The chiral HPLC method was considered suitable for the intended use, providing retention time of 9.24 and 10.16 minutes for (S)-PZQ and (R)-PZQ, respectively, with a resolution of 1.7 between the enantiomers and theoretical plates above 4000 for both. HP-β-CD, above 100 mmol/L, dissolved in the BSS composed of hexane/ethyl acetate/methanol/water, in the proportions 1:1:1:1 and 1.2:0.8:1.2:0.8 (v/v/v/v), resulted in separation indication of the enantiomers of PZQ, being in agreement with the results of molecular modeling, which did not show a high discriminatory power of this CS in relation to the isomers. The set of molecular modeling parameters indicated carboxymethyl-β-cyclodextrin as the most promising CS for the enantiomeric separation of PZQ.

Orientador: Maria José Tavares Ranzani de Paiva / Banca: Claudinei da Cruz / Banca: Luciana Posele / Banca: Elisabeth Romagosa / Banca: Leonardo Tachibana / Resumo: Anestésicos são utilizados para anestesiar peixes para facilitar o manejo, evitar ferimentos e reduzir o estresse desses animais. Sabendo-se que a aplicação de eugenol em peixes resulta em baixos tempos de indução anestésica, objetivou-se, avaliar diferentes concentrações do fármaco e sua ação sucessiva sobre os estágios anestésicos; testar a eficácia do produto como mitigador dos parâmetros hematológicos, em alta concentração (aplicada para anestesia profunda) e em pequenas concentrações (aplicadas no transporte de peixes); otimizar e validar um método determinação de resíduos de eugenol em músculo, fígado e plasma; e avaliar os resíduos anestésicos dos peixes submetidos à concentrações de anestesia profunda e de transporte, ao longo de 24 horas de depuração. Para isso, utilizaram-se exemplares de tilápia do Nilo Oreochromis niloticus, provenientes do Pólo Regional da APTA do Vale do Ribeira, município de Pariquera-Açu/SP. A concentração de eugenol, considerada mínima necessária para produzir anestesia profunda, foi de 100 mg L-1. Em relação à ação sucessiva do fármaco, pode-se observar que não houve diferença significativa (p>0,05) entre os estágios anestésicos. O produto aplicado como anestésico não teve interferência sobre os parâmetros hematológicos de tilápia, em todas concentrações testadas. Para avaliar o residuos de eugenol em amostras biológicas, a técnica escolhida foi cromatografia em fase gasosa (CG) utilizando-se coluna capilar e detector de ionização de chama (DIC). Com esse instrumento, obtiveram-se picos cromatográficos com resolução apropriada e ampla faixa de linearidade, permitindo quantificar com segurança, desde baixas concentrações até níveis elevados do produto. A partir da concentração de 100 mg L-1 de anestésico, analisou-se resíduos em amostras de tilápia e, após 24 horas de depuração... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available / Doutor

SOARES, Marco Antonio Botelho. Estudo do efeito do gel de alecrim pimenta (lippia sidoides) roeira (myracrodruon urundeuva) e seus princípios ativos isolados na doença periodontal experimental. 2007. 98 f. Tese (doutorado) - Universidade Federal do Ceará, Pós-Graduação em Ciências Médicas, Fortaleza-CE, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-10-06T12:30:49Z No. of bitstreams: 1 2007_tese_mabsoares.pdf: 6421394 bytes, checksum: 6fde296f04ba9966d2b744055a0d0157 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-10-07T16:33:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_tese_mabsoares.pdf: 6421394 bytes, checksum: 6fde296f04ba9966d2b744055a0d0157 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-07T16:33:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_tese_mabsoares.pdf: 6421394 bytes, checksum: 6fde296f04ba9966d2b744055a0d0157 (MD5) Previous issue date: 2007 / Periodontitis is a chronic inflammatory disease in which alveolar bone resorption and cementum associated with collagen fibers destruction are important events. It configures as a serious problem of public health in the world, being an important risk factor for cardiovascular diseases and to teeth loss in adults. Bacteria and host factors are necessary to the development of this pathology. The natural products can constitute a new alternative of treatment, being described to be effective as a natural mouthrinse by our research group. The objective of the present study was to investigate the mechanisms involved on the effect of gels based on natural products and its derivatives in the experimental periodontal disease (EPD): gel elaborated from the essential oil of Alecrim pimenta 0.5% (GAl) (Lippia sidoides), associated (GAA) or not to the gel of the extract of the Aroeira 5% (GAr) (Myracrodruon urundeuva); gel elaborated from carvacrol 300µg/g (GCa), associate (GCC) or not to the gel of Dimeric Chalcones 600µg/g (GCh); comparing its effects with the doxycycline, used as positive control (GDX). Periodontitis was induced by a nylon thread ligature surgically placed around the cervix of the second left maxillary molars of male Wistar rats. Animals were treated with locally applied gels in the gingival region immediately after the EPD induction three times a day during 11 days. The parameters analysed were alveolar bone loss, histopathologic and microbiological analysis, myeloperoxidase (MPO); levels of TNF-α and IL-1β (by ELISA) and body mass variation. GAA and GCC reduced the alveolar bone loss similar to GDX. Histopatologically, the periodontium of animals treated with GAA and GCC showed preservation of alveolar bone, cementum and collagen fibers of periodontal ligament and reduced neutrophilic and mononuclear cell infiltrate. The effect on neutrophilic infiltrate was confirmed by MPO. There was a significant reduction of TNF-α and IL-1β levels in the group treated with GAA compared to the vehicle group. All natural gels inhibited the growth of bacteria involved in periodontitis and were able to increased body mass compared to vehicle group. These results support clinical trials of these phytochemicals in the treatment of periodontal disease / A periodontite se configura como um grave problema de saúde pública no mundo, sendo um importante fator de risco para doenças cardiovasculares contribuindo de sobremaneira na perda de dentes em adultos. Bactérias periodontopatogênicas e fatores do hospedeiro são necessários para o desenvolvimento e progressão desta patologia. Os produtos naturais podem constituir uma nova alternativa de tratamento, sendo descrito a eficácia de colutórios a base de óleo essencial pelo nosso grupo. O objetivo do presente estudo foi investigar os mecanismos envolvidos no efeito de géis a base de produtos naturais e seus derivados na doença periodontal experimental (DPE): gel elaborado a partir do óleo essencial de Alecrim pimenta (Lippia sidoides 0,5%) (GAl ), associado (GAA) ou não ao gel do extrato da Aroeira (Myracrodruon urundeuva 5%); (GAr), gel elaborado a partir de carvacrol 300µg/g (GCa), associado (GCC) ou não ao gel de Chalconas Diméricas 600µg/g (GCh); comparando seus efeitos com a doxiciclina, controle positivo (GDX). A DPE foi induzida passando-se fio de náilon 3.0 em torno do segundo molar superior esquerdo de ratos Wistar machos, permanecendo durante 11dias. Os géis foram aplicados topicamente na região gengival imediatamente após a indução da doença e três vezes ao dia durante 11 dias. Os parâmetros avaliados foram: índice de perda óssea (IPO), análise microbiológica, histopatológica, dosagem de citocinas (TNF-α; IL-1β), mieloperoxidase (MPO) por ELISA e variação da massa corpórea. Tanto o GAA e o GCC reduziram o IPO comparavelmente à doxiciclina. Na análise histopatológica, o periodonto dos animais tratados com GAA e GCC mostrou a preservação do osso alveolar, cemento e das fibras colágeno, além de mostrar a redução do infiltrado inflamatório gengival. A inibição da infiltração neutrofílica foi confirmada através da MPO. A dosagem de citocinas mostrou que o GAA reduziu os níveis de TNF-α e IL-1β no tecido gengival no 11º dia. Todos os géis inibiram o crescimento de bactérias características da periodontite e promoveram um aumento na massa corpórea em relação ao grupo veículo. Esses resultados mostram que os géis testados possuem importante atividade na DPE, sugerindo a relevância de testes clínicos destes fitofármacos no tratamento da doença periodontal

O presente trabalho versa sobre o desenvolvimento de dois métodos quantitativos para determinação de dimeticona em matéria-prima de simeticona emulsão 30% e simeticona 100% por cromatografia gasosa com detecção de ionização de chama. Essas matérias-prima são utilizadas em várias áreas, na farmacêutica podem ser empregadas como princípios ativos em medicamentos, como agente diminuidor de bolhas no trato gastrointestinal. Para garantir que os métodos de cromatografia gasosa, de fato, eram para a finalidade para a qual foram desenvolvidos, foi utilizado o processo de validação de metodologia analítica, baseado na resolução 899 da ANVISA. Para melhor acompanhamento foi realizada, concomitantemente, a validação do método farmacopeico para quantificação de dimeticona em simeticona emulsão, encontrado na farmacopéia americana USP 29, 2006 pela técnica de espectroscopia de absorção molecular no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). O parâmetro de linearidade apresentou coeficiente de correlação acima de 0,99 para os quatro métodos validados, os teores de recuperação do analito para os parâmetros de exatidão, precisão e robustez ficaram entre 93% e 107%. Os desvios-padrão relativos calculados para as figuras de mérito de exatidão, precisão e robustez foram inferiores a 5%. Esses resultados indicam que todos os métodos estudados podem ser utilizados de acordo com os critérios de aceitação estipulados. Para aumentar a confiabilidade dos métodos cromatográficos e espectroscópico fez-se uso de alguns testes estatísticos como: teste de validade da regressão, análise de variâncias e teste para dados discrepantes no parâmetro de linearidade; teste t-Student para exatidão e precisão; e planejamento fatorial para o teste de robustez, calculando-se a significância dos efeitos dos fatores. Por fim, analisaram-se algumas amostras de matéria-prima de simeticona emulsão 30% e simeticona 100%, para teste em amostras reais, obtendo-se valores entre 90 e 102% (m/m) de dimeticona em matéria-prima de simeticona. / The aim of the present research was the development of two quantitative methods for dimethicone determination in simethicone emulsion 30% and simethicone 100% raw material by gas chromatography with flame ionization detector. These raw materials are used in the manufacture of several pharmaceuticals such as an active ingredient to inhibit flatulence due to excess of gastrointestinal gas. In order to guarantee that the developed methods were suitable for the purpose, an analytical process validation based on the resolution no. 899 from ANVISA was carried on. The concomitant evaluation was performed taking into account the pharmacopeia method validation grounded on simethicone monograph (USP 29, 2006) by Fourier Transform infrared spectroscopy (FTIR). The validation parameters of linearity presented correlation coefficient of 0.99 for all four validated methods. The values of the analyte recovery in terms of precision, accuracy and robustness lain between 93% and 107%. The relative standard deviation for the figures of merit validation was below 5%. The results demonstrated that all tested methods can be used to the purpose they were intended, according to the established acceptance criteria. To increase the chromatography and spectroscopic method confiability, some statistical tests were used, such as: regression validation, analysis of variance and outliers test to linearity; t-Student test to accuracy and precision, factorial experiment design to robustness. Finally, some real samples raw materials were analyzed and the results lain between 90 and 102% (w/w) of dimethicone in simethicone raw material.

GONDIM, D. R. Quitosana/Alginato epoxilado com corantes imobilizados como potencial fase estacionária para purificação de IgG do soro humano. 2012. 100 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química) - Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2013-06-12T17:31:11Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_drgondim.pdf: 1175183 bytes, checksum: 1278c231c2ae3ebf81390678403ecbb4 (MD5) / Approved for entry into archive by Marlene Sousa(mmarlene@ufc.br) on 2013-06-13T17:28:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_drgondim.pdf: 1175183 bytes, checksum: 1278c231c2ae3ebf81390678403ecbb4 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-13T17:28:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_drgondim.pdf: 1175183 bytes, checksum: 1278c231c2ae3ebf81390678403ecbb4 (MD5) Previous issue date: 2012-07-27 / As imunoglobulinas são proteínas do soro humano que despertam maior interesse em sua utilização devido às inúmeras funções diagnósticas e terapêuticas. Pesquisas nessa área contemplam assuntos de âmbito técnico científico, beneficiando setores carentes no nosso país no quesito da saúde humana. Nesse contexto, o presente trabalho teve por finalidade avaliar o potencial da matriz quitosana/alginato epoxilado (QAE) com corantes reativos imobilizados, na purificação de IgG humana utilizando a técnica por cromatografia de afinidade. Os corantes Cibacron Blue F3GA, Reativo Verde 5 (Procion HE-4G) e o Reativo Azul 4 (Procion Blue MX-R) foram imobilizados nas partículas de quitosana/alginato epoxilada e não foi observado desprendimentos desses corantes nos ensaios cromatográficos. A matriz de QAE com e sem corantes imobilizados foram caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) visando verificar os grupos específicos dos corantes na superfície da matriz. Foi investigado a influência do tipo de tampão e pH na adsorção de IgG de alta pureza. Os materiais apresentaram elevada capacidade de adsorção para diferentes sistemas tamponantes: MOPS (ácido morfolinopropanosulfônico), HEPES (ácido N-2-hidroxietilpiperazino-N’-2-etanosulfônico), MES (4 – ácido morfolinoetanosulfônico) e FS (Fosfato de Sódio). As isotermas de adsorção foram obtidas em sistemas em batelada e os dados experimentais foram bem correlacionados pelos modelos de Langmuir e Langmuir-Freundlich. O adsorvente quitosana/alginato epoxilado com corante Reativo Azul 4 imobilizado apresentou quantidade máxima de adsorção de IgG superior a 180 mg/g, superando os outros materiais. Os três adsorventes apresentaram constantes de dissociação (KD e KDLF) entre 10-5 e 10-6 mol/L. Os ensaios cromatográficos foram realizados com IgG de alta pureza e soro humano diluído 10 vezes e realizaram-se balanços de massas, análises de eletroforeses e quantificação de proteínas totais pelo método de Bradford. Nos ensaios em leito fixo com soro humano necessitou-se de 15,0 mL de soro diluído para a saturação do leito e as amostras coletadas das frações cromatográficas indicaram a purificação de IgG do soro humano através da eletroforese. Entre os três ligantes pseudobiespecíficos (corantes) estudados no presente trabalho, o corante Cibacron Blue F3GA apresentou maior potencial para purificar IgG do soro humano em todos os três tampões analisados, devido a maior seletividade deste por IgG comparado aos demais corantes imobilizados. / As imunoglobulinas são proteínas do soro humano que despertam maior interesse em sua utilização devido às inúmeras funções diagnósticas e terapêuticas. Pesquisas nessa área contemplam assuntos de âmbito técnico científico, beneficiando setores carentes no nosso país no quesito da saúde humana. Nesse contexto, o presente trabalho teve por finalidade avaliar o potencial da matriz quitosana/alginato epoxilado (QAE) com corantes reativos imobilizados, na purificação de IgG humana utilizando a técnica por cromatografia de afinidade. Os corantes Cibacron Blue F3GA, Reativo Verde 5 (Procion HE-4G) e o Reativo Azul 4 (Procion Blue MX-R) foram imobilizados nas partículas de quitosana/alginato epoxilada e não foi observado desprendimentos desses corantes nos ensaios cromatográficos. A matriz de QAE com e sem corantes imobilizados foram caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) visando verificar os grupos específicos dos corantes na superfície da matriz. Foi investigado a influência do tipo de tampão e pH na adsorção de IgG de alta pureza. Os materiais apresentaram elevada capacidade de adsorção para diferentes sistemas tamponantes: MOPS (ácido morfolinopropanosulfônico), HEPES (ácido N-2-hidroxietilpiperazino-N’-2-etanosulfônico), MES (4 – ácido morfolinoetanosulfônico) e FS (Fosfato de Sódio). As isotermas de adsorção foram obtidas em sistemas em batelada e os dados experimentais foram bem correlacionados pelos modelos de Langmuir e Langmuir-Freundlich. O adsorvente quitosana/alginato epoxilado com corante Reativo Azul 4 imobilizado apresentou quantidade máxima de adsorção de IgG superior a 180 mg/g, superando os outros materiais. Os três adsorventes apresentaram constantes de dissociação (KD e KDLF) entre 10-5 e 10-6 mol/L. Os ensaios cromatográficos foram realizados com IgG de alta pureza e soro humano diluído 10 vezes e realizaram-se balanços de massas, análises de eletroforeses e quantificação de proteínas totais pelo método de Bradford. Nos ensaios em leito fixo com soro humano necessitou-se de 15,0 mL de soro diluído para a saturação do leito e as amostras coletadas das frações cromatográficas indicaram a purificação de IgG do soro humano através da eletroforese. Entre os três ligantes pseudobiespecíficos (corantes) estudados no presente trabalho, o corante Cibacron Blue F3GA apresentou maior potencial para purificar IgG do soro humano em todos os três tampões analisados, devido a maior seletividade deste por IgG comparado aos demais corantes imobilizados.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-15T04:08:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334383.pdf: 1406901 bytes, checksum: fcd9366f961eb87f32d56ddc63e4857d (MD5) Previous issue date: 2015 / Neste trabalho avaliou-se a eficiência da extração de derivados fenólicos de lignina, mais especificamente, os compostos acetossiringona, acetovanilona, os ácidos p-cumárico, ferúlico, p-hidróxibenzóico, síringico e vanílico, vanilina e siringaldeído através da pré-concentração destes analitos em uma fibra de poliacrilato (85 µm) seguido da análise por cromatografia a gás com detecção por ionização em chama (SPME-GC/FID). Devido à massa molar dos derivados de lignina ser relativamente alta (por exemplo, acetossiringona 196,2 g mol-1) fez-se necessária uma adequação do método para a análise por GC/FID. Os compostos foram submetidos a uma reação de derivação com o agente silanizante N,O-bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida (BSTFA). As etapas de extração e derivação dos compostos a partir de uma solução aquosa seguiram dois procedimentos: o primeiro, extração seguido de derivação; o segundo, sorção do agente derivatizante na fibra e posterior extração dos analitos. O objetivo principal foi desenvolver uma metodologia analítica capaz de proporcionar a determinação dos derivados de lignina em amostras de sedimentos. Tais compostos são uma subclasse dos biomarcadores geoquímicos de grande importância em estudos sobre transporte de matéria orgânica na interface continente-oceano. Em relação às variáveis estudadas, para se obter as melhores condições de extração e separação, verificou-se a influência do volume de agente silanizante, sendo o mais adequado 60 µL de BSTFA por amostra. Para os parâmetros temperatura, tempo de extração e de sorção em BSTFA na fibra, as melhores respostas foram obtidas com os valores de 80 °C, 35 e 15 min., respectivamente. Aplicou-se o método proposto em matrizes sedimentares, o qual apresentou boa linearidade em uma faixa de 75 a 225 µg g-1 para a acetossiringona, acetovanilona, vanilina e o siringaldeído e de 3000 a 9000 µg g-1 para os demais analitos. Os limites de quantificação obtidos variaram entre e 73 e 2471 µg g-1, para a vanilina e para o ácido vanílico, respectivamente. O método mostrou-se adequado para a determinação desses derivados fenólicos em matrizes ambientais reduzindo consideravelmente o grande volume do solvente utilizado nos procedimentos convencionais de extração e análise por GC-FID.<br> / Abstract : In this study it has been assessed the efficiency of extraction of phenolic lignin derivatives, namely, acetosyringone, acetovanillone, p-coumaric, ferulic, p-hydroxybenzoic, vanillic and syringic acids, as well as syringaldehyde and vanillin by pre-concentration of the analytes in a polyacrylate fiber (85 µm) followed by analysis with gas chromatography with flame ionization detection (SPME-GC/FID). Due to the relatively high molar mass of some lignin derivatives (i.e. acetosyringone 196.2 g mol-1) it was required changes in the method procedure previous the GC/FID analysis. Compounds were subjected to a derivatization reaction in which N,O-bis(trimethylsilyl) trifluoroacetamide (BSTFA) was used as a silylation agent. The extraction and derivatization steps of the compounds from a sediment solution were carried out according to two procedures; first, derivatization flowed by extraction; and the second, sorption of the derivatizing agent on the fiber and subsequent extraction. The main objective was the development of an analytical methodology able to provide a simple and fast procedure for the determination of lignin derivatives in soil samples. Such compounds are a subclass of geochemical biomarkers of great importance in studies of transport of organic matter across the continent-water interface. The best conditions for the extraction and separation conditions were obtained with the volume of BSTFA derivatizing reagent of 60 µL per sample. For the parameters temperature, extraction time and BSTFA sorption on the fiber, the best results were achieved with values of 80 °C, 35 and 15 min, respectively. We applied the proposed method in sedimentary matrix, which showed good linearity in a range 75 - 225 µg g-1 for acetosyringone, acetovanilona, vanillin and syringaldehyde and 3000 - 9000 µg g-1 for the other analytes. The quantification limit obtained ranged between and 72 and 2470 µg g-1, for vanilin and acid vanilic, respectively. The method was suitable for the determination of the phenolic derivatives in environmental matrices with a considerable reduction of the large volume of solvent conventionally used in extraction procedures and analysis by GC-FID.