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Análise proteômica diferencial da levedura Saccharomyces cerevisiae após mutações sítio-específicas de resíduos de Cys do Proteassomo 20S: implicações com a expectativa de vida celular. / Differential proteomic analysis in the yeast Saccharomyces cerevisiae after stie-specific mutations of Cysteine residues in the 20S proteasom: Implications in the life span.

Santiago, Verônica Feijoli 17 September 2018 (has links)
A oxidação de proteínas é um fenômeno metabólico e a degradação de proteínas oxidativamente modificadas confere uma proteção para a célula, evitando acúmulo e a agregação das mesmas. A ineficiência na remoção destas proteínas está relacionada ao processo de envelhecimento e ao aparecimento de doenças neurodegenerativas. A unidade catalítica do proteassomo, denominada de 20S (PT20S), é a principal via de degradação de proteínas danificadas pela oxidação sem que haja gasto de ATP, acoplamento de subunidades regulatórias ou poli-ubiquitinação do substrato proteico. A unidade PT20 por sua vez, pode sofrer modificação pós-traducional chamada de S-glutationilação, que aumenta a velocidade degradação proteica por processo independente de poli-ubiquitinação. Em levedura (Saccharomyces cerevisiae), foram identificados apenas dois resíduos de Cys glutationilados, ambos na subunidade α5 (α5-76 e α5-221). A S-glutationilação ocasiona a abertura da câmara catalítica e uma maior eficiência na degradação de proteínas. Mutações sítio-específicas foram realizadas nessas Cys pela substituição por Ser. As consequências estruturais e funcionais dessas mutações foram o aumento da frequência da conformação fechada da câmara catalítica no α5-76S-PT20S e α5-221S-PT20S. As linhagens que carregam essas mutações apresentaram menor tempo de vida cronológico. Uma dupla mutação randômica na subunidade α5 (S35P / C221S) induziu a abertura da câmera catalítica do 20SPT e esta linhagem apresentou tempo de vida cronológico significativamente aumentado e , aumento na resistência ao estresse oxidativo em paralelo ao aumento da atividade catalítica do 20SPT. O objetivo neste projeto de pesquisa foi realizar uma análise proteômica quantitativa no extrato celular das linhagens mutantes, com o objetivo de identificar proteínas que possam estar relacionadas com a regulação da longevidade celular. Foram selecionadas as linhagens que carregam as mutações: α5-76S e α5-S35P/C221S uma vez que apresentaram expectativa de vida oposta em relação à linhagem selvagem, além de queda e aumento da frequência da conformação aberta da câmera catalítica, respectivamente. A partir da quantificação sem marcação (Label-free quantification), foram identificadas 723-1000 proteínas nas amostras das linhagens selvagem e mutantes. Dentre elas, destacam-se as proteínas 3-isopropilmalato isomerase e argininossuccinato sintase, envolvidas na síntese de leucina e arginina, respectivamente, aumentadas na linhagem mutante C76S e reduzidas na linhagem S35P/C221S. O metabolismo de ambos os aminoácidos está relacionado com a via de sinalização TOR que, por sua vez, está envolvida com o tempo de vida cronológico em levedura. / The protein oxidation is a metabolic phenomenon and the degradation of oxidatively modified proteins confers a protection to cell, avoiding accumulation and aggregation of these proteins. The inefficiency in the removal of these proteins is related to aging process and neurodegenerative diseases. The catalytic unit of the proteasome, named 20S (PT20S) is the main degradative pathway of oxidized proteins in an ATP-independent manner, without proteasomal regulatory units assembly or protein poliubiquitination. The PT20 unit undergoes a post-translational modification named S-glutationilation, which increases the protein degradation by the ATP-independent process. In yeast, only two Cys residues were identified glutationilated, both in the α5 subunit (α5-C76 e α5-C221). The S-glutationilation causes opening of the catalytic chamber and higher efficiency of protein hydrolysis. Site-specific mutations were performed in those Cys residues by their replacement to Ser. The structural and functional consequences of mutations were the increasedfrequency of theclosed conformation of the catalytic chamber in the α5-76S-PT20S and α5-221S-PT20S. The strains carrying those mutations presented shorter chronological life span. A double random mutation in the α5 subunit (S35P / C221S) induced the opening of 20SPT catalytic chamber together toextended chronological life span and, increased resistant to oxidative stress in parallel to increased catalytic activity of the 20SPT. The goal of this project was to perform a label-free quantitative proteomic analysis in the mutant strains to identify proteins that could be related with the regulation of cellularlifespan. From that quantification, 723 - 1000 proteins were identified in the samples of the wild-type and mutant strains. Among these proteins, 3-isopropylmalate isomerase and argininesuccinate sintase, involved in the leucine and arginine biosynthesis, respectively, were found increased in the C76S mutant strain and reduced in the S35P/C221S mutant strain. The metabolism of both amino acids is related with TOR signallingthat, in turn,modulates chronological lifespan in yeast
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A representação do tempo no romance Der Zauberberg  de Thomas Mann / Die zeitdarstellung im Roman Der Zauberberg von Thomas Mann

Menaldo Augusto da Silva Rodrigues 06 November 2008 (has links)
Gegenstand der Arbeit ist die Behandlung der Zeit als der zentralen Thematik im Roman Der Zauberberg von Thomas Mann, wo durch die Erzählstruktur des Werkes selbst die Zeiterfahrung des Helden in eine ästhetische Erfahrung für den Leser umgesetzt wird. Die Untersuchung beginnt bei der Genese der in dem Roman präsenten Zeitbegriffe vor allem unter Bezug auf die Tagebücher des Autors , um daran anschließend die Analyse einiger ausgewählter Unterkapitel vorzunehmen, in denen die Zeit nicht nur thematisiert wird sei es durch digressive Einschübe des Erzählers, sei es durch Wiedergabe von Dialogen oder Gedanken der Hauptfigur , sondern wo ihre Wahrnehmung zuweilen in der erzählerischen Gestaltung der Abschnitte dieser Unterkapitel zur Darstellung kommt. Als eine der grundlegenden Erzählstrategien des Romanautors zu der von ihm beabsichtigten Aufhebung der messbaren Zeit im Bewusstsein des Helden und der Übertragung dieser Erfahrung auf den Leser fungiert das in dem Buch betont ungleiche Verhältnis zwischen den beiden Zeitebenen der erzählten Zeit und der Erzählzeit, wie sie ursprünglich von Günther Müller theoretisch gefasst und von Paul Ricoeur in Zeit und Erzählung erneut behandelt wurden. Die zudem in dieser Abhandlung vorgenommene Analyse der problematischen Verschränkung von psychologischer (subjektiver/qualitativer) und chronologischer (objektiver/quantitativer) Zeit in der Welt des Berges wird ergänzt durch einen Kommentar zu den mythischen Konturen, die der Zeit in diesem Roman zukommen. / Esta dissertação tem como objetivo investigar o tratamento do tempo como temática central no romance Der Zauberberg (A montanha mágica) de Thomas Mann, em que a experiência temporal do herói é transformada em experiência estética para o leitor mediante a própria estrutura narrativa da obra. Para isso, e depois de um estudo da gênese dos conceitos de temporalidade presentes no romance com base sobretudo nos diários do autor, realiza-se uma análise de subcapítulos selecionados, em que o tempo não é apenas tematizado, seja por intrusões digressivas do narrador, seja por reproduções de diálogos ou pensamentos do protagonista, mas também onde sua percepção é por vezes representada narrativamente na construção dos parágrafos desses subcapítulos. Como uma das estratégias narrativas fundamentais aplicadas pelo romancista a fim de representar sua almejada suspensão do tempo mensurável na consciência do herói e transmitir essa mesma vivência ao leitor figura a relação marcadamente desigual no livro entre os dois planos temporais: o tempo narrado (erzählte Zeit) e o tempo do narrar (Erzählzeit), assim como teorizados originalmente por Günther Müller e retomados por Paul Ricoeur em seu Tempo e Narrativa. A análise que ainda se realiza nesta monografia da problemática imbricação entre o tempo psicológico (subjetivo/qualitativo) e o tempo cronológico (objetivo/quantitativo) no universo da montanha é complementada por um comentário dos contornos míticos atribuídos ao tempo no romance.
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A velhice e o envelhecimento: seus significados na vida de um grupo de jornalistas com mais de 60 anos de idade

Pagenotto, Maria Lígia Mathias 17 May 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-27T18:47:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Ligia Mathias Pagenotto.pdf: 922652 bytes, checksum: e1b82af543602e5172552dbbb66d5e19 (MD5) Previous issue date: 2011-05-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aims to discuss old age and aging as personal condition and sociocultural process. It focuses on the passage of time in people‟s life, considering the articulation of chronological time and kairos time. The researcher who has been a journalist since the 1980s interviewed six journalists with the written press of the city of São Paulo; firstly, with the purpose of analyzing, through the testimonies and her own experience, the relationship between these communication professionals and the way they age in the professional environment; secondly, in order to understand in a broader way the meanings of old age and aging in the social context. In the case of Journalism, in the 1980s and 1990s, the researcher could witness, in the condition of a novice in the area, remarkable events in the history of the press in Brazil, not only from the political point of view (post-dictatorship), but also from the technological standpoint, with a series of changes in the printed media sector, especially with the inclusion, in large newspaper companies, of digital machines, and, consequently, with the replacement of many editing professionals in a broader way. The tensions of that moment were observed in her working environment, and they led her to think for the first time about her aging and that of the group in which she was entering as a novice. A group of journalists that was divided in a sharp way, mainly due to the difference in generations that of the younger journalists (between 25 and 40 years of age) and that of the older journalists (50 years and older). In addition, the researcher could take a close look on how the journalists, mainly the older ones, dealt with the imposition of new technological equipment in the newsrooms and how they were seen and treated when they were not familiarized with the new working tools. As investigation strategy, a qualitative methodology was used, with semi-structured interviews directed at these six professionals, who were freely chosen by the researcher. The only criterion that was followed was that of interviewing people who are active in their professional career of journalist and aged 60 or older - the elderly person standard established by the UNO (United Nations Organization) / Neste trabalho, pretende-se discutir a velhice e o envelhecimento como condição pessoal e processo sociocultural. Toma-se como foco a passagem do tempo na vida de pessoas, considerando aí a articulação do tempo cronológico e do tempo kairós. A pesquisadora jornalista de profissão desde a década de 1980 entrevistou seis jornalistas da imprensa escrita da cidade de São Paulo; primeiramente, com o intuito de poder analisar, por intermédio dos depoimentos e de sua própria experiência, a relação entre esses profissionais da comunicação e o modo de envelhecerem no meio profissional; e, num segundo momento, com o objetivo de compreender, de forma mais abrangente, os significados da velhice e do envelhecimento no contexto social. No caso do Jornalismo, nas décadas de 1980 e 1990, a pesquisadora pôde presenciar, na condição de recém-formada da área, acontecimentos bem marcantes na história da grande imprensa no País, não somente do ponto de vista político (pós-ditadura), como do ponto de vista tecnológico, com uma série de mudanças no setor da mídia impressa, especialmente com a inserção, nas empresas de jornal de grande porte, de máquinas digitais e, por conseguinte, com a substituição de vários profissionais da edição de um modo mais amplo. As tensões daquele momento foram observadas no seu ambiente de trabalho, levando-a a pensar, pela primeira vez, no seu envelhecimento e o do grupo em que adentrava como recém-formada. Um grupo de jornalistas que se segmentava de forma contundente, cada vez mais, sobretudo, no referente à diferença de gerações a dos jornalistas mais jovens (entre 25 a 40 anos de idade) e a dos mais velhos (dos 50 anos em diante). Além disso, a pesquisadora pôde observar de perto como os jornalistas, em sua maioria os mais velhos, lidavam com a imposição das novas aparelhagens tecnológicas nas redações de jornal e como esses eram vistos e tratados quando não se familiarizavam com os novos instrumentos de trabalho. Como estratégia de investigação, optou-se por uma metodologia qualitativa, com o uso de entrevistas semiestruturadas, dirigidas a esses seis profissionais escolhidos pela pesquisadora de maneira livre, seguindo apenas o critério de reunir pessoas que se encontram na ativa de sua carreira profissional de jornalista e com mais de 60 anos de idade, padrão de pessoa idosa estabelecido pela ONU (Organização das Nações Unidas)
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A representação do tempo no romance Der Zauberberg  de Thomas Mann / Die zeitdarstellung im Roman Der Zauberberg von Thomas Mann

Rodrigues, Menaldo Augusto da Silva 06 November 2008 (has links)
Esta dissertação tem como objetivo investigar o tratamento do tempo como temática central no romance Der Zauberberg (A montanha mágica) de Thomas Mann, em que a experiência temporal do herói é transformada em experiência estética para o leitor mediante a própria estrutura narrativa da obra. Para isso, e depois de um estudo da gênese dos conceitos de temporalidade presentes no romance com base sobretudo nos diários do autor, realiza-se uma análise de subcapítulos selecionados, em que o tempo não é apenas tematizado, seja por intrusões digressivas do narrador, seja por reproduções de diálogos ou pensamentos do protagonista, mas também onde sua percepção é por vezes representada narrativamente na construção dos parágrafos desses subcapítulos. Como uma das estratégias narrativas fundamentais aplicadas pelo romancista a fim de representar sua almejada suspensão do tempo mensurável na consciência do herói e transmitir essa mesma vivência ao leitor figura a relação marcadamente desigual no livro entre os dois planos temporais: o tempo narrado (erzählte Zeit) e o tempo do narrar (Erzählzeit), assim como teorizados originalmente por Günther Müller e retomados por Paul Ricoeur em seu Tempo e Narrativa. A análise que ainda se realiza nesta monografia da problemática imbricação entre o tempo psicológico (subjetivo/qualitativo) e o tempo cronológico (objetivo/quantitativo) no universo da montanha é complementada por um comentário dos contornos míticos atribuídos ao tempo no romance. / Gegenstand der Arbeit ist die Behandlung der Zeit als der zentralen Thematik im Roman Der Zauberberg von Thomas Mann, wo durch die Erzählstruktur des Werkes selbst die Zeiterfahrung des Helden in eine ästhetische Erfahrung für den Leser umgesetzt wird. Die Untersuchung beginnt bei der Genese der in dem Roman präsenten Zeitbegriffe vor allem unter Bezug auf die Tagebücher des Autors , um daran anschließend die Analyse einiger ausgewählter Unterkapitel vorzunehmen, in denen die Zeit nicht nur thematisiert wird sei es durch digressive Einschübe des Erzählers, sei es durch Wiedergabe von Dialogen oder Gedanken der Hauptfigur , sondern wo ihre Wahrnehmung zuweilen in der erzählerischen Gestaltung der Abschnitte dieser Unterkapitel zur Darstellung kommt. Als eine der grundlegenden Erzählstrategien des Romanautors zu der von ihm beabsichtigten Aufhebung der messbaren Zeit im Bewusstsein des Helden und der Übertragung dieser Erfahrung auf den Leser fungiert das in dem Buch betont ungleiche Verhältnis zwischen den beiden Zeitebenen der erzählten Zeit und der Erzählzeit, wie sie ursprünglich von Günther Müller theoretisch gefasst und von Paul Ricoeur in Zeit und Erzählung erneut behandelt wurden. Die zudem in dieser Abhandlung vorgenommene Analyse der problematischen Verschränkung von psychologischer (subjektiver/qualitativer) und chronologischer (objektiver/quantitativer) Zeit in der Welt des Berges wird ergänzt durch einen Kommentar zu den mythischen Konturen, die der Zeit in diesem Roman zukommen.
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Maria Teresa Leon, une écrivaine de la Géneration 1927 / Maria Teresa Leon, a writer of the Generation 1927 / María Teresa León, una escritora del 27

Fernández-Ventura Alvarez, Lourdes 18 December 2018 (has links)
Dans ce travail de recherche, il s'agit de mettre en lumière la qualité littéraire et la personnalité de l'écrivaine Marie Thérèse León (1903-1988), exilée après la Guerre Civile espagnole avec son mari, le poète Raphaël Alberti, et de montrer la place qu’elle mérite dans la lignée des auteurs de la bien connue “Generación del 27”, parmi lesquels on compte des figures-phares de la poésie espagnole telles que Lorca, Alberti, Aleixandre, Cernuda et d'autres.Cette étude essaie de faire sortir de l’oubli Marie Thérèse León, qui a été eclipsée par la renommée de son partenaire , Raphaël Alberti, lequel avait obtenu, après la mort de Franco, sa réhabilitation en tant que poète de renom. Dans cet objectif , la thèse identifie d'abord les caractéristiques communes des auteurs canoniques du groupe 1927 et, en deuxième lieu, démontre combien Marie Thérése Léon partage les traits qui leurs sont communs ainsi que des concours de circonstances similaires. La thèse aborde également la situation des femmes intellectuelles de l'époque et met en lumière nombre d'autres femmes de lettres de la génération 1927, telles que Rosa Chacel, Ernestina Champourcin, María Zambrano, dont les œuvre respectives ont autant de valeur que celles de leurs collègues masculins.Une place particulière est accordée à l'oeuvre capitale de Marie Thérèse Léon, « Mémoire de la mélancolie », laquelle révèle au mieux la qualité littéraire et l'originalité structurelle de son auteure. Ce livre dresse, à travers sa beauté de prose poétique, non seulement le panorama espagnol précédant la Guerre Civile, mais aussi, l’expérience terrible des expatriés politiques de l’Espagne. / In this research, it is a question of claiming the literary quality and the rich personality of the writer Maria Teresa León (1903-1988), exiled after the Spanish Civil War together with her husband, the poet Rafael Alberti, and of showing her place deserved between the authors of the well known “Generación del 27”, among whom we count key figures of the spanish poetry such as Lorca, Alberti, Aleixandre, Cernuda and others.The study tries to repair the oblivion into which had fallen Maria Teresa León, darkened by the fame of his partner, Raphael Alberti, who had obtained , after the death of Franco, its rehabilitation as big poet. In this objective, the work identifies, at first, the common characteristics of the canonical authors of the group 1927, and, in the second place, demonstrates the sharing by Maria Teresa of the same common features and social circumstances.The research also approaches the situation of the intellectual women of the period, and highlights number of the other women of letters of the generation 1927, such as Rosa Chacel, Ernestina Champourcin, Zambrano, whose work has at least so much value as that of their colleagues men.A particular place is granted to the Maria Teresa León's major work, " Memory of the melancholy ", which reveals at best the literary quality and the structural originality of the author. This book raises, through the beauty of its poetic prose, not only the Spanish panorama preceding the Civil War, but also ,the terrible experience lived by the political expatriates of Spain. / Este trabajo de investigación pretende reivindicar la calidad literaria y la activa personalidad cultural de la escritora María Teresa León (1903-1988), exiliada tras la Guerra Civil, junto con su marido el poeta Rafael Alberti, y reivindicar su lugar merecido entre el grupo de los grandes creadores de la conocida «Generación de 1927 » , entre quiénes estaban las figuras fundamentales de la poesía española, Lorca, Alberti, Aleixandre, Cernuda y otros.El estudio trata de reparar el olvido que cayó sobre María Teresa León, eclipsada por la fama de su compañero, Rafael Alberti, que si pudo obtener, después de la muerte de Franco, su reconocimiento como gran poeta.Con ese objetivo, la tésis identifica, primeramente, las características comunes de los autores canónicos del grupo de 1927 y, en segundo lugar, se demuestra cómo la obra de María Teresa León comparte muchos rasgos comunes y , por supuesto, el peso de las circunstancias sociales.La tésis aborda igualmente la situacion de las mujeres intelectuales de la época y pone en relieve a algunas otras autoras de la generación del 27 como Rosa Chacel, Ernestina Champourcin, Zambrano , cuyas obras tienen por lo menos el mismo valor que las de sus colegas varones. Un lugar muy especial se dedica en este trabajo a la obra fundamental de María Teresa León, su Memoria de la melancolía, que muestra a la autora en toda su magnitud, destacando el brillo de su calidad literaria y su riqueza estructural. El libro traza , a tráves de la belleza de su prosa poética, no sólo el panorama español inmediatamente anterior a la Guerra Cívil, sino también la terrible experiencia de los expatriados españoles tras la guerra.

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