Orientadores: Angelo Zanaga Trape, Thomas Manfred Krauss / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T19:02:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Braga_AnaMariaChebleBahia_D.pdf: 1900359 bytes, checksum: 79e7312e2649cd6e41634906f1302f41 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O presente estudo é pioneiro no Brasil e ganha relevância tendo em vista as várias possíveis fontes antropogênicas de PCBs, PCDDs e PCDFs ainda não mapeadas, da ocorrência de acidentes com exposição a produtos clorados em populações brasileiras e da presença, de detecção recente, na ração animal aqui produzida e exportada para a Europa. O objetivo principal foi avaliar a exposição da população geral, utilizando-se o leite humano como bioindicador, com vistas a subsidiar ações de prevenção e controle de emissões destes poluentes para o meio ambiente, como forma efetiva de minimizar a exposição humana. Sendo também parte da terceira rodada dos estudos de exposição organizada pela OMS, a metodologia utilizada seguiu seu protocolo já validado. Em cada uma das 10 áreas amostradas, nas diferentes regiões do país, foram coletadas 10 amostras individuais, conformando uma amostra composta que foi enviada para análise no laboratório de referência da OMS na Alemanha. As amostras de leite humano foram coletadas, em sua maioria, em bancos de leite humano integrantes da Rede Nacional de Bancos de Leite Humano, usando critérios pré-definidos para a seleção das mães doadoras. Ao nível mundial, dos 24 países participantes do estudo, as concentrações encontradas no Brasil foram as mais baixas. Propõe-se um programa de monitoramento destas substâncias e outros Poluentes Orgânicos Persistentes em leite humano e em amostras ambientais como ação preventiva e de controle, incrementando o conhecimento a respeito da ocorrência destes compostos no Brasil, para subsidiar o gerenciamento das substâncias químicas e os acordos internacionais como a Convenção de Estocolmo / Abstract: The presented research is pioneer in brazil and its relevance is due to the various unmapped possible anthropogenic sources of PCBs, PCDDs and PCDFs, to the occurrence of accidents with chlorinated products exposing brazilian populations and the recent episode related to the presence of such contaminants in feedstuff exported to europe. The main objective of this study was to evaluate the exposure of the general population considering human milk as good indicator. Moreover, the study may subsidize future preventing actions and emission control of these pollutants to the environment as an effective manner to minimize human exposure. being also part of the third round of exposure studies organized by WHO, the used methodology followed the validated WHO¿s protocol, as well. In each of the ten sampled areas from different brazilian regions, it was collected ten individual samples to form one pooled sample which was sent to the WHO¿s reference laboratory in Germany. Human milk samples were mostly collected from human milk banks which are part of the National Human Milk Bank Network. Donors were selected considering the prior defined eligibility criteria. On worldwide level, the concentrations found in brazil were the lowest among the 24 participant countries. A monitoring program of these substances e others Persistent Organic Pollutants in human milk and environmental samples is proposed as prevention and control actions. Besides extending the knowledge about the occurrence of these compounds in Brazil, the study may subsidize international programs such as the Stockholm Convention and improve the management of chemical substances / Doutorado / Saude Ambiental / Doutor em Saude Coletiva

Els contaminants ambientals capaços d’unir-se al Receptor d’hidrocarburs d’Aril i induir la seva activació ectòpica són molt diversos i es troben àmpliament distribuïts per tota la biosfera. L’exposició continuada a aquest tipus de compostos s’ha vist relacionada amb l’augment de malalties cardiovasculars i càncer, entre d’altres efectes adversos. D’aquesta manera, la seva monitorització en zones amb fonts de contaminación continues és necessària per tal d’assegurar que no es sobrepassen els límits establerts. La utilització de bioassaigs per a determinar l’activitat tipus dioxina dels contaminants. a més de la seva composició química, permet una valoració més acurada dels riscos que representen. Aquesta tesis presenta com a objectius el disseny i la validació de bioassaigs basats en un llevat recombinant i embrions de peix zebra que permeten, en el cas dels llevat, una valoració ràpida i econòmica i, en el cas de l’embrió de peix zebra, un estudi més complert i amb la possibilitat d’observar efectes adversos directes. Per tal de dur a terme la seva validació. aquests bioassaigs es van utilitzar en diversos estudis medi ambientals de zones possiblement contaminades per compostos tipus dioxina (PAHs, Organoclorats, etc.) que representen les diferents tipus de matrius on es solen trobar aquests contaminants: sediment fluvial (part baixa del riu Ebre, des de l’Embassament de Flix fins a la desembocadura) i marí (Estuari d’Urdaibai), particulat de l’aire (Vall del Po, al nord d’Itàlia) i sòl (residus miners al districte de Datong a Xina). Els resultats d’aquests estudis han permès establir els nivells de contaminació de cada zona així com observar que la resposta obtinguda pels nostres bioassaigs té un perfil similar a l’observada per altres bioassaigs ja establerts així com amb la composició química. A més, destaquen la importància de combinar l’anàlisi química amb l’activitat biològica per tal d’obtenir una informació més complerta sobre compostos que no s’han tingut en compte o que es desconeix la seva presència a les mostres. / Title: Development and application of bioassays for environmental monitoring Aryl hydrocarbon Receptor ligands (AhR, dioxin-like compounds). Environmental pollutants able to bind and induce ectopic activation of the Aryl hydrocarbon Receptor (AhR) are diverse and widely distributed throughout the biosphere. Continuous exposure to these compounds has been associated with increased cardiovascular disease and cancer, among other effects. Thus, their monitoring in potentially polluted areas is still necessary to ensure that safety limits are not exceeded. The use of bioassays to determine dioxin-like activity, along with chemical analysis, allow an accurate assessment of the risks they represent. This thesis presents the design, objectives and validation of bioassays based on a recombinant yeast and zebrafish embryos that allow, in the case of yeast, a rapid and economic assessment and, in the case of the zebrafish embryo, a more complete one and with the possibility of observing direct effects. To perform validation, these bioassays were used in studies of environmental areas presumably contaminated by dioxin-like compounds (PAHs, Chlorinated, etc..) that represent different types of matrices where these contaminants are found: fluvial sediment (lower part of the river Ebro, from the Flix Dam to the mouth) and marine (estuary Urdaibai), particulate air (Po Valley, northern Italy) and soil (mining waste in the district of Datong in China). The results of these studies have established pollutions levels present in each area and show a correlation with chemical data as well as a similar response between our bioassays and other more standardized. Besides, those results highlight the importance of combining chemical and biological analysis in order to obtain a complete information of the samples.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4321.pdf: 5011742 bytes, checksum: 61d67530b35683f34c3ef4b4e30917aa (MD5) Previous issue date: 2012-03-30 / Financiadora de Estudos e Projetos / Sugarcane bagasse ash is a byproduct of sugar and alcohol industry with potential for field application. However, the presence of organic contaminants such as dioxins turns necessary the development of strategies for removal of those pollutants, such as bioremediation. Because of the high toxicity of dioxins, it is wise to develop effective and low risk methods for initial evaluation of microbial degradation capacity of those compounds by using less dangerous alternatives such as screening tools to select possible microorganisms as candidates for bioremediation. In such context, this work aimed to apply statistical models to evaluate microbial growth capacity under influence of components of a compost windrow already used for other sugarcane industry residues, and also development of qualitative and quantitative methods to evaluate microbial degradation of the dye RBBR and 1,2,3,4-TCDD, molecules selected as model compounds. The Scott-Knott method grouping multiple means showed good results, indicating microbial growth inhibition of all fungi in culture medium with compost windrow, and microbial growth promotion for Aspergillus strains in sugarcane ash doped medium. Furthermore, quantification of RBBR dye in liquid broth was developed, validated and applied through a dilute-and-shoot technique followed by LC-MS/MS, where it was possible to detect up to 4,8pM of dye, being observed a degradation from 40-99% of dye over 30 days. In a similar way, it was developed and validated a GC-MS method to quantify 1,2,3,4-TCDD in liquid broth after extraction, with detection limits of 10ppb, observing a removal of up to 20% of dioxin after 30 days. Another point evaluated was the identification of RBBR degradation products, where it was observed the presence of four dye metabolites during the course of the experiment, which allowed us to propose a degradation pathway of RBBR dye by Aspergillus flavus. / A cinza do bagaço da cana-de-açúcar é um subproduto da indústria sucroalcooleira que apresenta potencial para aplicação no campo. Porém, a presença de contaminantes orgânicos como dioxinas torna necessário o desenvolvimento de estratégias para a remoção destes poluentes, como a biorremediação. Por serem as dioxinas extremamente tóxicas, é sensato o desenvolvimento de métodos eficazes e de baixo risco para avaliação inicial da capacidade microbiana de degradação destes compostos usando alternativas menos perigosas como ferramentas de triagem e seleção de micro-organismos candidatos à biorremediação. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo o uso de modelos estatísticos para avaliação do crescimento microbiano em componentes de uma composteira já utilizada para tratamentos de outros resíduos sucroalcooleiros, bem como o desenvolvimento de métodos analíticos qualitativos e quantitativos de avalição da capacidade microbiana de degradação do corante RBBR e da 1,2,3,4-TCDD, moléculas selecionadas como modelos. O agrupamento de médias por Scott-Knott apresentou bons resultados na avaliação do crescimento microbiano, apontando inibição do crescimento de todos os fungos pela composteira, e promoção de crescimento das cepas de Aspergillus no meio com cinza. Ademais, foi desenvolvido e validado um método para quantificação do corante RBBR direto do meio de cultura líquido usando a técnica dilute-and-shoot seguido por LC-MS/MS, onde foi possível detectar até 4,8pM de corante, sendo observada uma degradação entre 40-99% do corante em 30 dias. Da maneira similar, foi desenvolvido e validado um método por GC-MS para quantificação da 1,2,3,4-TCDD em meio líquido após extração, com limites de detecção de 10ppb, onde foi observada uma remoção de até 20% da dioxina em 30 dias de cultivo. Outro ponto avaliado foi a identificação dos produtos de degradação do RBBR durante o experimento, sendo observada a presença de quatro metabólitos do corante nas amostras, o que nos permitiu propor a rota de degradação do corante por Aspergillus flavus.