Micropartículas de quitosana contendo DMAE foram preparadas utilizando o método de coacervação simples. A morfologia das partículas foi observada utilizando um Microscópio Eletrônico de Varredura. O tamanho das partículas foi medido por técnica de espalhamento de luz. As partículas obtidas possuem forma esférica e superfície irregular. Apresentaram uma distribuição de tamanho entre 419 e 528 nm. O pequeno índice de polidispersividade sugere que a distribuição do tamanho de partícula é homogêneo. O rendimento do processo e eficiência de encapsulação foram de 90% e 63%, respectivamente. O desenvolvimento de um novo sistema de liberação requer uma metodologia analítica para a identificação e quantificação do fármaco. Neste trabalho um método simples por cromatografia de fase reversa desenvolvido para a análise do DMAE é apresentado. O DMAE foi analisado utilizando- se uma coluna Merck RP 18 column 5 m (125 x 4 mm D.I.). A fase móvel foi tampão fosfato pH 7,4; acetonitrila (99,5:0,5 v/v) a um fluxo de 0,5 mL.min-1. O comprimento de onda de detecção foi de 208nm à temperatura ambiente (25oC). Linearidade foi obtida para uma faixa de 1,5x10-4 a 6,0x10-4 mol.L-1. Para os ensaios intra e inter dia o coeficiente de variação foi menor que 10%. Este novo método desenvolvido para a quantificação do DMAE apresentou sensibilidade e seletividade, demonstrando ser um método vantajoso e confiável para a realização dos estudos propostos. O método de encapsulação mostrou-se adequado para a preparação de micropartículas de quitosana contendo DMAE, porque apresentou alto rendimento e excelente eficiência de encapsulação. / Chitosan microparticles containing DMAE were prepared by using the simple coacervation method. A scanning electron microscopy (SEM) was used to observe microparticles morphology. Particle size was measured by laser light scattering. Particles presented spherical shape, irregular surface and size distribution between 419 and 528 nm. The small polydispersity index suggested that size distribution is homogeneous. Process yield and encapsulation efficiency were 90% and 63%, respectively. The development of a new drug delivery system requires analytical methods for identification and quantification of this drug. In the present study a simple reversed-phase high performance liquid chromatography developed for DMAE assay is presented. The DMAE was analyzed using/by means of a 5 ?m Merck RP 18 column (125 x 4 mm I.D.). The mobile phase was phosphate buffer pH 7,4; acetonitrile (99,5:0,5 v/v) at a flow rate of 0,5 mL.min-1. Detection was carried out at 208nm at room temperature (25oC). Linearity was obtained from 1,5x10-4 to 6,0x10-4 mol.L-1. Intra and inter- assay coefficient of variation was less than 10 %. This new method developed to assay DMAE presented sensibility and selectivity, providing a useful and reliable means to perform the proposed studies. The encapsulation method was proven suitable to the preparation of chitosan microparticles containing DMAE because it presented high yields and excellent encapsulation efficiency.

Micropartículas de quitosana contendo DMAE foram preparadas utilizando o método de coacervação simples. A morfologia das partículas foi observada utilizando um Microscópio Eletrônico de Varredura. O tamanho das partículas foi medido por técnica de espalhamento de luz. As partículas obtidas possuem forma esférica e superfície irregular. Apresentaram uma distribuição de tamanho entre 419 e 528 nm. O pequeno índice de polidispersividade sugere que a distribuição do tamanho de partícula é homogêneo. O rendimento do processo e eficiência de encapsulação foram de 90% e 63%, respectivamente. O desenvolvimento de um novo sistema de liberação requer uma metodologia analítica para a identificação e quantificação do fármaco. Neste trabalho um método simples por cromatografia de fase reversa desenvolvido para a análise do DMAE é apresentado. O DMAE foi analisado utilizando- se uma coluna Merck RP 18 column 5 m (125 x 4 mm D.I.). A fase móvel foi tampão fosfato pH 7,4; acetonitrila (99,5:0,5 v/v) a um fluxo de 0,5 mL.min-1. O comprimento de onda de detecção foi de 208nm à temperatura ambiente (25oC). Linearidade foi obtida para uma faixa de 1,5x10-4 a 6,0x10-4 mol.L-1. Para os ensaios intra e inter dia o coeficiente de variação foi menor que 10%. Este novo método desenvolvido para a quantificação do DMAE apresentou sensibilidade e seletividade, demonstrando ser um método vantajoso e confiável para a realização dos estudos propostos. O método de encapsulação mostrou-se adequado para a preparação de micropartículas de quitosana contendo DMAE, porque apresentou alto rendimento e excelente eficiência de encapsulação. / Chitosan microparticles containing DMAE were prepared by using the simple coacervation method. A scanning electron microscopy (SEM) was used to observe microparticles morphology. Particle size was measured by laser light scattering. Particles presented spherical shape, irregular surface and size distribution between 419 and 528 nm. The small polydispersity index suggested that size distribution is homogeneous. Process yield and encapsulation efficiency were 90% and 63%, respectively. The development of a new drug delivery system requires analytical methods for identification and quantification of this drug. In the present study a simple reversed-phase high performance liquid chromatography developed for DMAE assay is presented. The DMAE was analyzed using/by means of a 5 ?m Merck RP 18 column (125 x 4 mm I.D.). The mobile phase was phosphate buffer pH 7,4; acetonitrile (99,5:0,5 v/v) at a flow rate of 0,5 mL.min-1. Detection was carried out at 208nm at room temperature (25oC). Linearity was obtained from 1,5x10-4 to 6,0x10-4 mol.L-1. Intra and inter- assay coefficient of variation was less than 10 %. This new method developed to assay DMAE presented sensibility and selectivity, providing a useful and reliable means to perform the proposed studies. The encapsulation method was proven suitable to the preparation of chitosan microparticles containing DMAE because it presented high yields and excellent encapsulation efficiency.

La DMAE es la principal causa de ceguera en pacientes por encima de los 65 años. La investigación de esta enfermedad está adquiriendo gran importancia desde hace años por su alta prevalencia a nivel mundial. Desde la introducción de los fármacos anti-VEGF ha mejorado de manera sustancial el pronóstico de los pacientes afectos por la forma húmeda de esta enfermedad. El propósito de esta tesis es evaluar nuestra experiencia en un centro terciario de referencia con el uso de los anti- VEFG en la práctica clínica diaria para el tratamiento de esta enfermedad. En concreto nuestros objetivos son estudiar los resultados anatómico funcionales con nuestra pauta de tratamiento basada en 2+ PRN, comparar los principales fármacos utilizados ( Bevacizumab y Ranibizumab) y evaluar algunos factores de riesgo generales, locales y maculares para predecir si los mismos pueden influir en el resultado funcional final. Inicialmente se realiza una revisión de la literatura. Se profundiza en la etiopatogenia, epidemiología, factores de riesgo y clasificación de la enfermedad, para terminar revisando de manera amplia la evolución de los diferentes tratamientos utilizados para el tratamiento de la DMAE neovascular. El estudio diseñado es prospectivo, intervencional, comparativo y no randomizado y comprende una muestra de 94 ojos, homogénea a nivel de características demográficas y oculares basales, con valores medios en cuanto a las características poblacionales coincidentes con los de la típica población utilizada en la mayoría de los grandes estudios randomizados, todos los casos cuentan con un seguimiento mínimo de 6 meses. Se utiliza en todos los pacientes una pauta de 2+ PRN y como tratamiento se administra Bevacizumab, Ranibizumab o bien tratamiento combinado. Como conclusión los resultados obtenidos nos muestran que nuestra pauta utilizada de 2 inyecciones en la fase de carga presenta mayor número de recidivas y peores resultados visuales finales que las pautas de 3 inyecciones +mantenimiento usadas en la mayoría de series publicadas y que no hay diferencias entre los dos fármacos principales a estudio Ranibizumab y Bevacizumab a nivel de resultados anatómicos y funcionales finales, pero parece que el Ranibizumab es más efectivo a corto plazo. En cuanto al estudio de los factores de riesgo, se observa que la hipertensión arterial, el colesterol total y la edad son los factores que influyen de manera directa en el pronóstico funcional final. / AMD is the leading cause of blindness in patients over 65 years. The investigation of this disease has gained considerable importance over the years by its high prevalence worldwide. Since the introduction of anti-VEGF drugs have substantially improved the prognosis of patients affected by the wet form of the disease. The purpose of this thesis is to evaluate our experience in a tertiary referral center with the use of anti-VEGF in clinical practice for the treatment of this disease. Specifically our objectives are to study the functional anatomical results with our treatment regimen based on 2 + PRN, comparing the main drugs used (Bevacizumab and Ranibizumab) and evaluate some general risk factors, local and macular to predict whether they can influence the final functional outcome. Initially we review the literature. It delves into the pathogenesis, epidemiology, risk factors and disease classification, to finish reviewing comprehensively the evolution of the different treatments used to treat neovascular AMD. The study design is prospective, interventional, nonrandomized comparative and includes a sample of 94 eyes, homogeneous level of baseline demographic and ocular, with mean values, in terms of population characteristics, that match those of the typical population used in most of large randomized studies, all cases have a follow up 6 months or more. It is used in all patients a pattern of 2 + PRN and as treatment is administered Bevacizumab, Ranibizumab or combination therapy. In conclusion the results show that our regimen of 2 injections used in the loading phase shows more relapses and worse final visual results than patterns of 3 injections + manteinance used in most published series. They also indicate that there is no difference between the two main drugs Lucentis and Avastin in late anatomical and functional results, but it seems that Ranibizumab is more effective the short-term. As for the study of risk factors, we observe that high blood pressure, total cholesterol and age are factors that directly influence the functional prognosis.

Las enfermedades neurodegenerativas cursan con la degeneración y muerte de las neuronas las cuales son incapaces de suplir su propia muerte. Debido a esta característica enfermedades como el Alzheimer, el Parkinson o el Glaucoma no tienen cura en la actualidad. La retina es una proyección del sistema nervioso central (SNC) encapsulada en el globo ocular y aislada del resto del SNC, lo que la hace fácilmente accesible a la manipulación experimental. En este trabajo estudiamos las alteraciones funcionales de la retina con el electrorretinograma de campo completo (ERG), técnica basada en el registro de la respuesta eléctrica retiniana tras la presentación de un estímulo de luz homogéneo. Así hemos estudiado los efectos de la sección del nervio, del aumento de presión intraocular y de la fototoxicidad, dichas lesiones afectan selectivamente a determinadas poblaciones neuronales retinianas e imitan enfermedades neurodegenerativas como el Glaucoma o la Degeneración Macular Asociada a la Edad. / Neurodegenerative diseases are characterized by degeneration and death of neurons which are unable to recover after a given insult, thus impairing functional recuperation. Because of this, there is no cure for diseases such as Alzheimer, Parkinson or Glaucoma. The retina is a projection of the central nervous system (CNS) located in the eye and therefore, isolated from the rest of the CNS. This makes the retina a very good model for experimental manipulation. In this work we have studied the functional changes in the retina by full field electroretinograme (ERG). This technique records the electric response of the retina after presentation of homogeneous light stimuli. We have studied the effects that optic nerve sections, increase of the intraocular pressure and phototoxicity have on ERG recordings. These lesions impair selectively certain retinal neuronal populations and imitate neurodegenerative diseases as Glaucoma or Age-related Macular Degeneration.