Memoria para optar al título profesional de Ingeniera Agrónoma / Al desarrollarse en el suelo, las larvas de Agrotis bilitura (Lepidoptera: Noctuidae) se alimentan tanto de plántulas como de las partes subterráneas de plantas en cultivos hortícolas. Los estadíos L3-L6 son los más dañinos, provocando pérdidas de hasta el 100% en ataques severos. El control de esta plaga con insecticidas es ineficiente, debido a los refugios que ofrece el suelo. En este contexto, los nematodos entomopatógenos (NEP) pueden ser una alternativa de gran valor en el control de ésta y otros insectos plaga que utilizan este hábitat, por su habilidad de moverse activamente en el perfil del suelo en busca de hospederos. Los NEP del género Steinernema (Steinernematidae) cuentan con un estado infectivo (IJ), el que ingresa al cuerpo del hospedero por heridas o aberturas naturales, liberando en su interior una bacteria simbionte del género Xenorhabdus (Enterobacteriaceae), la cual provoca la muerte del insecto por septicemia en un período de 24 a 48 horas.

En el presente trabajo de investigación, se mejoró la sensibilidad del método desarrollado para la detección de poblaciones de Ralstonia solanacearum en suelo naturalmente infestado. La efectividad de la etapa de enriquecimiento en un nuevo caldo semi-específico desarrollado en el Centro Internacional de la Papa (CIP), permitió incrementar la población bacteriana hasta límites detectables, logrando la semi-cuantificación de las mismas y la detección de niveles tan bajos como 16 cél/g suelo (80 cél/g suelo en promedio). La técnica de inmunoabsorción con conjugado enzimático del tipo sándwich de doble anticuerpo (ELISA-DAS) post-enriquecimiento, ha sido evaluada utilizando muestras de suelo de la rizósfera de plantas con síntomas de Marchitez Bacteriana de la papa (con altos niveles poblacionales) y desde allí en muestras distantes cada 15 cm. y en muestras de plantas circundantes, llegando a dispersarse hasta en 0.75m y 1.5m alrededor de la planta sintomática, respectivamente. La sensibilidad de la técnica utilizada ha sido demostrada en mezclas de suelo infestado con bajas concentraciones del patógeno (2.0x102 a 1.1x105 unidades formadoras de colonias /g suelo) y suelo no-infestado en proporciones de 1:2 a 1:6. Además, se desarrolló una estrategia de muestreo capaz de detectar la bacteria en campos de papa con bajos niveles de incidencia de la enfermedad. La supervivencia de Ralstonia solanacearum en suelo fue determinada después de 8 meses de barbecho o un descanso y una rotación con maíz hasta después de 3 meses de la cosecha del mismo (un total de 9 meses después de la cosecha de papa). La presencia de R. solanacearum en suelo procedente de plantas asintomáticas donde se cosecharon tubérculos latentemente infectados fue demostrada con la técnica ELISA-DAS post-enriquecimiento y confirmada por la Prueba de patogenicidad en tomate. En los campos de producción de semilla de zonas alto andinas (superior a 3 000 m.s.n.m) de 0.25 – 0.5 ha, el número de muestras necesarias para el análisis cualitativo en un 95 y 99% de posibilidades de detección fue de 20 y 31, respectivamente. Los resultados obtenidos bajo dos diferentes condiciones de campo permiten señalar que la técnica utilizada es altamente sensible e importante para su aplicación en el control de la Marchitez Bacteriana de la Papa en zonas paperas andinas de la provincia de Cajamarca. / In this investigation, the sensibility of method developed for detection of Ralstonia solanacearum populations in naturally infested soil has been improved. The effectiveness of the stage enrichment in a new semi-specific broth developed at the International Potato Center (CIP), allowed to increase bacterial populations until detectable boundary, achieved semi-quantification of the same and the levels as few as 16 cell/g soil (averaging 80 cells/g soil) were detected. DAS-ELISA (double antibody sandwich enzyme – linked immunoassay) post-enrichment technique has been evaluated in soil samples from the rhizosphere of bacterial wilt potato plants (high level populations) and, since then from soil samples each 15cm and neighbouring plants samples, arriving spread until 0,75cm and 1.5m around the wilted plant, respectively. The technique sensibility utilized in soil samples containing concentrations of the pathogen (2.0x102 to 1.1x105 ufc/g of soil) were selected and mixed with has been demostrated for the detection in diluted soil samples with non-infested soil in proportions of 1:2 to 1:6 has been demostrated. Furthermore one strategy sampling was able to detect bacteria in potato fields with low bacterial wilt incidences has been developed. Survival of Ralstonia solanacearum in soil was determined in field after 8-months fallow or a fallow and one rotation with maize, until 3 months after harvesting the same (a total of 9-months after potato harvest). The presence of Ralstonia solanacearum in soil samples of plants without visible bacterial wilt symptoms, but which test positive for latent infection in tubers for DAS-ELISA post-enrichment technique has been demostrated and confirm by the tomate bioassay patogeniticity. In each of the three seed-multiplication fields andean highlands (over 3000 m a.s.l.) of 0.25-0.5 ha, at 95% and 99% probabilities of detection, the number n of composite samples necessary to be analysed would be 20 and 31, respectively. The results obtained in two different sets of field conditions, allowed to show that the technique utilized is highly sensible and important for application in the control potato bacterial wilt in andean potato zones at Cajamarca province.

En el año 2000, Animal and Plant Health Inspection Service (APHIS) notificó la atención de embarques de espárrago fresco procedente de Perú con infestaciones de huevos y larvas hasta el segundo estadío de Copitarsia sp., ante lo cual se estableció como requisito fitosanitario, la fumigación con Bromuro de Metilo de los embarques de espárrago fresco peruano antes de su ingreso a los Estados Unidos. Sin embargo la fumigación con Bromuro de metilo actualmente esta originando a la industria del espárrago fresco; costos estimados de US$ 2.6 millones, pérdidas de calidad, reducción de tiempo de vida útil del producto y ruptura de la cadena de frío. En el presente trabajo se propone el uso de la irradiación gamma en espárrago como alternativa de tratamiento cuarentenario con la finalidad de asegurar la no emergencia de adultos de Copitarsia decolora al 100% sobre las larvas de segundo estadio. Asimismo, se identificó a la especie Copitarsia decolora en los valles de Ica, Cañete y Lurin; las identificaciones se basaron en la genitalia extraído de los machos adultos obtenidos del material colectado en los cultivos de espárrago. Realizada las identificaciones, se estableció una crianza de C. decolora con la finalidad de obtener larvas del segundo estadío para las pruebas de irradiación. Asimismo previamente a las irradiaciones se realizó dosimetría Fricke sobre las larvas II de C. decolora con la finalidad de determinar la dosis absorbida. La dosimetría Fricke puede determinar dosis bajas entre 0.04-0.4KGy. por ello su elección entre las dosimetrías químicas. Las larvas II de C decolora fueron expuestas entre un rango de dosis de 30Gy - 100Gy, en esta etapa preliminar se determina que la dosis mínima efectiva que asegura la no emergencia de adultos es de 100Gy. Determinada la dosis mínima efectiva se procedió a realizar la prueba confirmatoria que consistió en 10 réplicas cada uno de ellas con 1000 larvas del segundo estadío, obteniendo como resultado 100% de mortandad. El efecto de la irradiación de Copitarsia decolora se ve reflejado con la mayor mortandad en el proceso de la muda y a la vez se observa un retardo en el ciclo biológico de las larvas tratadas con irradiación. Se demuestra que la irradiación es una buena alternativa de tratamiento cuarentenario al Bromuro de metilo. / In 2000, Animal and Plant Health Inspection Service (APHIS) notified the detection of infected fresh Peruvian asparagus shipments with eggs an larvae of Copitarsia sp., due to this, it was a phytosanitary requirement to fumigate with methyl bromide the fresh Peruvian asparagus shipments before their admission in the United States. In the present research, it is propose the use of gamma irradiation in asparagus as an alternative quarantine treatment with the purpose of assure the no emergency of adults of Copitarsia sp. in 100 %. Here, was identified was identified the species Copitarsia decolora in the Ica, Cañete and Lurin valleys; the identification was based in the genitalia extracted from adult males obtained from collected material of asparagus crops. Done the identifications, was established a breeding of C. decolora with the purpose of obtain second instar larvae to the irradiation tests. Previously to the irradiations, the Fricke dosimetry was done on larvae II of C. decolora, with the purpose of determine the absorbed dose. The Fricke dosimetry can determine low doses between 0.04 – 0.4 KGy and due to this, is chosen as a better option against chemical dosimetries. The C. decolora’s larvae II were exposed to a dose of 30Gy – 100 Gy, in this preliminary stage was determinated the minimum effective dose that assure no emergency of adults, and this was 100 Gy. Determinated the minimum effective dose a confirmatory test was done, it consisted in 10 replicas each one with 1000 larvae on second instar, obtained a mortality of 100%. The irradiation effect of C. decolora is reflected with a high mortality in the moulting process and at the same time present a lag in the biological cycle of larvae treated with irradiation. Is demonstrated that irradiation is a good alternative of quarantine treatment besides Methyl bromide.

En las zonas productoras de papa (Solanum tuberosum Linneo) del Perú, una especie de polilla de la papa (PTM): Symmetrischema tangolias Gyen (Lepidoptera: Gelechiidae) viene desplazando en predominancia a Phthorimaea operculella Zeller (Lepidoptera: Gelechiidae). El objetivo de esta investigación fue desarrollar una fórmula bioinsecticida eficaz contra ambas plagas, basado en PoGV, Btk o la combinación de ambos. El tratamiento de tubérculos de papa (cv. “Peruanita”) con fórmulas de patógenos fue por inmersión o impregnación; e inoculadas con larvas neonatales de ambas especies. Los bioensayos se desarrollaron a: 25°C (P. operculella), 20°C (S. tangolias) y condiciones naturales en almacenes de papa. Las fórmulas en talco mejoraron la eficacia de los patógenos, alcanzando niveles CL50 con menores concentraciones de PoGV (16 veces) y Btk (5-6 veces) al compararse con sus respectivas aplicaciones acuosas (1,55×107 gránulos/mL; IC95%: 1,26×107-2,14×107 y 1321 mg/L; IC95%: 1084-1555) obtenidas contra P. operculella; asi mismo fueron 2-4 veces menores respecto a aplicaciones acuosas de Btk (3095 mg/L; IC95% 1711 - 3575) en S. tangolias. La interacción PoGV-Btk contra P. operculella fue mixta, tendiendo al antagonismo ante concentraciones altas de ambos patógenos y sinérgicos a bajas concentraciones. Dos fórmulas: Btk y Btk+PoGV, desarrollados y aplicados en almacenes de papa, permitieron incrementos poblacionales, 90 días después, solo en S. tangolias (3,0 y 2,7%) (larvas-pupas/100 tubérculos); luego de disminuirlos a niveles de 1,7% (30 días). No resulta conveniente utilizar fórmulas combinadas de Btk+PoGV por no conseguirse sinergísmos importantes; recomendándose el producto Btk en talco, por su efectividad contra ambas especies de PTM. / In the areas of potato productions (Solanum tuberosum Linneo) from Peru, a species of potato tuber moth (PTM): Symmetrischema tangolias Gyen (Lepidoptera: Gelechiidae) it comes displacing in predominance to Phthorimaea operculella Zeller (Lepidoptera: Gelechiidae). The objective of this investigation was to develop an effective bioinsecticide formule against both pests, based on PoGV, Btk or the combination of both. The treatment of the potato tubers (cv. “Peruanita”) was realized by immersion when was used one solution formulated or by covers when the powder formulation was, over, which was, inoculated the neonatal larvae. The laboratory bioassays were developed at control condition 25°C (P. operculella), 20°C (S. tangolias) and at room condition for the potato storage. Due the effects of some inert material over the mortality, the talcum formulation of both pathogens tested showed better efficacy than aqueous solution formulated. Reaching the CL50 level using less concentration of PoGV (16 times) and Btk (5 to 6 times) in comparison with the respective aqueous applications (1,55×107 granules/mL; IC95%: 1,26×107- 2,14×107 and 1321 mg/L; IC95%: 1084-1555) against P. operculella. The difference was 2 to 4 time minor in S. tangolias concerning aqueous applications of Btk (3095 mg/L; IC95% 1711-3575). The PoGV-Btk interaction against P. operculella results mixed, reaching to the antagonism in front of high concentrations of both pathogens and synergistic to low concentrations. Two formulations: Btk and Btk+PoGV was developed and applied in potato storage, permitting increments populations 90 days later, only in S. tangolias (3,0 2,7%) (larvae and pupae/100 tubers), then of diminishing them to levels of 1,7% (30 days). With this results is not recommended the use formulations combined of Btk+PoGV by not getting important synergism; recommending the use of the talcum Btk product, for their high affectivity against both species of potato tuber moth.

Las Moscas de la Fruta en especial la Ceratitis capitata Wiedemann es una de las plagas más dañinas del mundo, ataca a más de 250 especies frutícolas y hortalizas, constituyendo la principal restricción fitosanitarias para su exportación. El Organismo Internacional de Energía Atómica dentro del PROYECTO RLA/5/043 (ARCAL XXXIII) “REGLAMENTO CUARENTENARIO ARMONIZADO PARA LA IRRADIACIÓN DE FRUTAS FRESCAS” y la participación de Argentina, Brasil, Cuba, Chile, México, Perú y Venezuela inician investigaciones para demostrar la viabilidad y validar la irradiación como tratamiento cuarentenario. Perú inicia las investigaciones a través del Instituto Peruano de Energía Nuclear, dando lugar a esta investigación, realizado en el Centro de Producción de Moscas de la Fruta Estériles del SENASA y el laboratorio de la PIMU supervisado por el experto del OIEA Ing. Guy Hallman. La investigación consistió en dos etapas: 1° determinar la dosis mínima efectiva de irradiación a la cual no haya emergencia de mosca adulta (prueba de bioensayo), 2° la evaluación de 30000 individuos a la dosis mínima efectiva, que proporciona datos estadísticamente confiables (prueba confirmatoria); confirmándose que a 0,1kGy no hay emergencia; de la evaluación química y organoléptica se determinó que no existe diferencia significativa frente a los mangos que no fueron tratados. / Tephritidae fruit flies are among the most damaging pests of fruit crops worldwide. Ceratitis capitata wiedemann, for instance, can infest more than 250 fruit and vegetable crop species, and constitutes the main phytosanitary constrain for export purposes. The International Atomic Energy Agency through the Project RLA/5/043 (ARCAL XXXIII) “ARMONIZED QUARANTINE REGULATION FOR THE IRRADIATION OF FRESH FRUITS”, along with Argentina, Brazil, Cuba, Chile, Mexico, Peru, and Venezuela, initiated investigations to demonstrate viability of irradiation as a quarantine treatment and to validate it as such. Besides, Peru began investigations through the Peruvian Institute of Nuclear Energy by carrying out a research at both SENASA’s Production Center of Sterile Fruit Flies and PIMU’s laboratory; it was supervised by Dr. Guy Hallman, an OIEA’s irradiation expert. This research comprised two stages: 1) Determine the minimum irradiation dose to avoid emergence of fruit fly adults (bioassay test), and 2) Evaluate 30,000 individuals (having been exposed to the minimum effective dose) to provide statistically reliable data (confirmatory test). It was confirmed that no adult emergence occurred at 0.1 kGy, and no significant differences were found between treated and non-treated mangoes when both chemical and organoleptic tests were applied.

En las zonas productoras de papa (Solanum tuberosum Linneo) del Perú, una especie de polilla de la papa (PTM): Symmetrischema tangolias Gyen (Lepidoptera: Gelechiidae) viene desplazando en predominancia a Phthorimaea operculella Zeller (Lepidoptera: Gelechiidae). El objetivo de esta investigación fue desarrollar una fórmula bioinsecticida eficaz contra ambas plagas, basado en PoGV, Btk o la combinación de ambos. El tratamiento de tubérculos de papa (cv. “Peruanita”) con fórmulas de patógenos fue por inmersión o impregnación; e inoculadas con larvas neonatales de ambas especies. Los bioensayos se desarrollaron a: 25°C (P. operculella), 20°C (S. tangolias) y condiciones naturales en almacenes de papa. Las fórmulas en talco mejoraron la eficacia de los patógenos, alcanzando niveles CL50 con menores concentraciones de PoGV (16 veces) y Btk (5-6 veces) al compararse con sus respectivas aplicaciones acuosas (1,55×107 gránulos/mL; IC95%: 1,26×107-2,14×107 y 1321 mg/L; IC95%: 1084-1555) obtenidas contra P. operculella; asi mismo fueron 2-4 veces menores respecto a aplicaciones acuosas de Btk (3095 mg/L; IC95% 1711 - 3575) en S. tangolias. La interacción PoGV-Btk contra P. operculella fue mixta, tendiendo al antagonismo ante concentraciones altas de ambos patógenos y sinérgicos a bajas concentraciones. Dos fórmulas: Btk y Btk+PoGV, desarrollados y aplicados en almacenes de papa, permitieron incrementos poblacionales, 90 días después, solo en S. tangolias (3,0 y 2,7%) (larvas-pupas/100 tubérculos); luego de disminuirlos a niveles de 1,7% (30 días). No resulta conveniente utilizar fórmulas combinadas de Btk+PoGV por no conseguirse sinergísmos importantes; recomendándose el producto Btk en talco, por su efectividad contra ambas especies de PTM. / In the areas of potato productions (Solanum tuberosum Linneo) from Peru, a species of potato tuber moth (PTM): Symmetrischema tangolias Gyen (Lepidoptera: Gelechiidae) it comes displacing in predominance to Phthorimaea operculella Zeller (Lepidoptera: Gelechiidae). The objective of this investigation was to develop an effective bioinsecticide formule against both pests, based on PoGV, Btk or the combination of both. The treatment of the potato tubers (cv. “Peruanita”) was realized by immersion when was used one solution formulated or by covers when the powder formulation was, over, which was, inoculated the neonatal larvae. The laboratory bioassays were developed at control condition 25°C (P. operculella), 20°C (S. tangolias) and at room condition for the potato storage. Due the effects of some inert material over the mortality, the talcum formulation of both pathogens tested showed better efficacy than aqueous solution formulated. Reaching the CL50 level using less concentration of PoGV (16 times) and Btk (5 to 6 times) in comparison with the respective aqueous applications (1,55×107 granules/mL; IC95%: 1,26×107- 2,14×107 and 1321 mg/L; IC95%: 1084-1555) against P. operculella. The difference was 2 to 4 time minor in S. tangolias concerning aqueous applications of Btk (3095 mg/L; IC95% 1711-3575). The PoGV-Btk interaction against P. operculella results mixed, reaching to the antagonism in front of high concentrations of both pathogens and synergistic to low concentrations. Two formulations: Btk and Btk+PoGV was developed and applied in potato storage, permitting increments populations 90 days later, only in S. tangolias (3,0 2,7%) (larvae and pupae/100 tubers), then of diminishing them to levels of 1,7% (30 days). With this results is not recommended the use formulations combined of Btk+PoGV by not getting important synergism; recommending the use of the talcum Btk product, for their high affectivity against both species of potato tuber moth. / Tesis

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención Sanidad Vegetal / En marzo de 2014, se estudió el efecto del aceite mineral (Elf Purespray 15 E) y el aceite vegetal de Linaza (BIOIL spray) a concentraciones de 0,5 %, 0,7 % y 1 % v/v sobre la fijación de ninfas de escama blanca de la Hiedra en kiwis variedad JB Y 374. El estudio se efectuó en un huerto comercial perteneciente a la frutícola Viconto ubicada en la comuna de Buin, Región Metropolitana.

Memoria para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo / Los nematodos fitoparásitos continúan siendo un gran problema en muchos cultivos, siendo el control químico, prácticamente la única forma utilizada. En el presente estudio se evaluó el efecto de dos formulados en base a bacterias del género bacillus y pseudomonas nativas, en diferentes concentraciones, para control de nematodos fitoparásitos en plantas de vid. Para ello se realizaron dos ensayos en macetas, bajo condiciones de invernadero, utilizando suelo naturalmente infestado principalmente con los géneros Xiphinema y Meloidogyne. En el primer ensayo se evaluaron dos tipos de formulados, arcilla y líquido, comparándolos con dos productos comerciales, de origen químico (Rugby) y biológico (Bafex-N). En el segundo ensayo, se evaluaron tres concentraciones bacterianas de ambos formulados.

Memoria para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo / En un huerto comercial de granados cv. Wonderful (plantados en 2010 a 3 x 5 m), con infestación de S. phillyreae, se evaluó el efecto de seis insecticidas: los detergentes TS-2035® y Tecsa Fruta® y el aceite mineral Winspray®, todos al 1 % v/v; el entomopatógeno Mycotrol® (Beauveria bassiana (V.)) y dos insecticidas convencionales, Nuprid® (imidacloprid) y Applaud® (buprofezin), en dosis recomendadas. Los tratamientos se dispusieron en un diseño completamente aleatorizado con 4 repeticiones, además de un control sin tratar. Se hicieron muestreos previos a las aplicaciones para estimar el grado de infestación. Las aspersiones se hicieron con una nebulizadora con un gasto equivalente de 3000 L∙ha-1. Inmediatamente antes de la aplicación y a los 7 y 14 días después (dda) se colectaron 5 ramillas por planta y se evaluó la mortalidad (%) de S. phillyreae en cada estadío ninfal y en huevos. Los porcentajes de mortalidad fueron transformados a grados Bliss, y sometidos a ANDEVA y al test de Tukey (5 % de significancia). Además, se evaluó visualmente la posible fitotoxicidad de los productos aplicados, en follaje y frutos.

Tesis presentada como parte de los requisitos para optar al Grado de Magíster en Ciencias Agropecuarias con Mención Sanidad Vegetal / Botrytis cinerea Pers. es uno de los patógenos fúngicos más interesante por sus características particulares, puede vivir como patógeno; pero también saprofíticamente, se puede encontrar en todo el mundo y puede infectar un gran número de especies de plantas y sus diferentes partes. B. cinerea pertenece al phylum Ascomycota, clase Leotiomycetes, orden Helotiales (Hibbett et al., 2007). B. cinerea es el nombre de la fase asexual y en su fase teleomórfica corresponde a Botryotinia fuckeliana (de Bary) Whetzel (Groves and Loveland, 1953), presenta un micelio con hifas septadas, con poros simples, su crecimiento hifal es en ramificaciones con abundante producción de conidias heterocarióticas hialinas a levemente coloreadas formadas sobre conidióforos (Agrios, 1997). En un comienzo el micelio es hialino y luego se torna gris, debido a ello es que se ha denominado a la enfermedad con el nombre de “pudrición gris” (Harvey, 1955).