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Efecto antágonico y biocontrolador de algunos microorganismos saprofíticos contra Rhizoctonia solani un patógeno causante del (damping off) en plantas de tomate

Rodríguez Limach, Verónica Julia January 2002 (has links)
El presente trabajo consistió en evaluar la actividad antifungica de seis cepas de microorganismos propios del suelo (Trichoderma harzianum T , Bacillus subtilis B, Pseudomonas fluorescens P y tres especies de Actinomycetos G,3,29) frente a cepas de Rhizoctonia solani R, un fitopatogeno causante de muchas enfermedades en plantas de interés económico. Se empleo para ello la Técnica de enfrentamientos Duales y la Técnica de Excavación-Placa-Cultivo para demostrar el grado de antagonismo con cada una de las cepas elegidas productoras de sustancias antifungicas frente al fitopatogeno antes mencionado, resultando que el tratamiento R+T (Rhizoctonia solani y Trichoderma harzianum)con un 71% de efectividad, R+P(Rhizoctonia Solani y Pseudomonas fluorescens) con un 70%, siendo estos dos valores porcentuales cercanos al 100% en el tratamiento testigo. Con la finalidad de que los resultados en laboratorio puedan reproducirse a niveles de campo se realizaron los ensayos en invernadero con siete tratamientos y 10 repeticiones respectivamente, orientándose de esta manera a la elección de cepas más eficientes y más prolíficas como hiperparasitos o antagonistas frente al fitopatogeno in situ. Se identifico que en el tratamiento R+P resulto más benéfico como hiperparasito, observándose una mayor longitud y peso en las plántulas de tomate que se utilizaron en el presente trabajo, consiguientemente Pseudomonas fluorescens contrarresto al fitopatogeno eficientemente y a su vez estimulo el crecimiento de la planta comparado con el testigo R-M-(R. solani sin el microorganismo antagónico). Así mismo los ensayos se dirigieron a la obtención de los metabolitos activos de las seis cepas por el método Excavación-Placa-Cultivo respectivamente frente a Rhizoctonia solani. Identificándose que los tratamientos R+P y R+T mostraron mayor actividad inhibitoria. Por lo cual nosotros identificamos a la cepa Pseudomonas fluorescens como el que presenta mayor capacidad antagónica. Seguidamente se empleo Cromatografía en Silica Gel, y se determino los compuestos implicados en tal inhibición, y una prueba mucho más precisa la Bioautocromatografia donde nos reconfirma la actividad antimicrobiana de dos metabolitos activos y finalmente se utilizo Espectroscopia Infrarroja para determinar los grupos funcionales de tales metabolitos que se determinaron en el presente trabajo. El presente trabajo se llevo a cabo en el Instituto de Microbiología “Simón Pérez Alva” de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos entre Abril del 2000 y Agosto del 2001. / The present work consisted on evaluating the activity antifungica of six stumps of microorganisms characteristic of the soil (Trichoderma harzianum T, Bacillus subtilis B, Pseudomonas fluorescens P and three species of Actinomycetos G,3,29) in front of stumps of Rhizoctonia solani R, a causing fitopatogeny of many deseases in plants of economic interest. It was used the Technique of Dual confrontations and the Technique of Excavation-badge-cultivation to demonstrate the degree of antagonism with each one of the stumps elected producers of substances antifungicas in front of the fitopatogeno before mentioned, being that the treatment R+T (Rhizoctonia solani and Trichoderma harzianum con 71% of effectiveness, R+P(Rhizoctonia Solani and Pseudomonas fluorescens) with 70%, being these two near percentage values to 100% in the treatment witness. With the purpose that the results in laboratory can reproduce at field levels they were carried out the rehearsals in hothouse with seven treatments and ten repetitions respectively, being guided this way to the election of more efficient and more fruitful stumps as hiperparasitos or antagonistic in front of the fitopatogenous in situ. You identifies that in the treatment R+P is more beneficent as hiperparasito, being observed a bigger longitude and weight consequently in the tomato plántulas that were used work presently, Pseudomonas fluorescens counteraction to the fitopatogeno efficiently and in turn I stimulate the growth of the plant compared with the witness R-M-(R. solani without the antagonistic microorganism). Likewise the rehearsals went respectively to the obtaining of the active metabolites of the six stumps for the method Excavation-badge-cultivation in front of Rhizoctonia solani. Being identified that the treatments R+P and R+T showed bigger inhibitoria activity. Reason why we identify to the stump Pseudomonas fluorescens like the one that presents bigger antagonistic capacity. Subsequently it was used Cromatography in Silica Gel, and you determines the compounds implied in such an inhibition, and a much more precise test the Bioautocromatography where it reconfirms us the antimicrobial activity of two active metabolitos and finally it was used Infrared Espectroscopy to determine the functional groups of such metabolites that were determined work presently. The present work carries out in the Institute of Microbiology “Simón Pérez Alva” of the Universidad National Mayor de San Marcos between April 2000 and August 2001
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Efectividad de ocho especies parasitoides del género trichogramma (hymenoptera: trichogrammatidae) sobre copitarsia corruda (lepidoptera: noctuidae)

Ninahuanca Rojas, Carlos January 2014 (has links)
Animal and Plant Health Inspection Service (APHIS), la primera autoridad encargada del control sanitario del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos de Norteamérica, en el 2000 notificó la detención de embarques de espárrago fresco procedente de Perú con infestaciones de huevos y larvas de Copitarsia sp., ante este acontecimiento se estableció la fumigación con Bromuro de Metilo como requisito fitosanitario de los embarques de espárrago fresco peruano antes de su ingreso a los Estados Unidos. Sin embargo su uso excesivo está originando a la industria del espárrago fresco costos estimados de US$ 2.6 millones, pérdidas de calidad, reducción de tiempo de vida útil del producto y ruptura de la cadena de frío. Pogue y Simmons en el 2008 dieron a conocer una nueva especie, Copitarsia corruda, antes considerada Copitarsia decolora (Simmons y Pogue 2004), debido a que son especies crípticas, pero en la morfología interna (genitalia) y a nivel molecular, son distintas. Por tanto se busca implementar alternativas de control de esta especie, usando un controlador biológico del género Trichogramma, parasitoide principalmente de huevos de Lepidópteros. Por tal razón, en el presente trabajo de investigación se propuso realizar pruebas experimentales en el Laboratorio de Ensayos bajo condiciones ambientales normales para determinar la actividad parasítica del género Trichogramma sobre huevos de Copitarsia corruda, ya que tiende a matar a la plaga antes de que cause daño sobre los cultivos de espárrago. El objetivo principal de la investigación es evaluar la eficiencia de ocho especies de Trichogramma (T. atopovirilia, T. cacoeciae, T. dendrolimi, T. exiguum, T. galloi, T. nerudai, T. pintoi y T. pretiosum) sobre huevos de Copitarsia corruda. Por tanto, los resultados sugieren que T. nerudai y T. galloi son los más eficientes en comparación al resto de especies parasitoides del mismo género. Palabras claves: Copitarsia corruda, Trichogramma, Parasitoide, Espárrago, eficiente, oviposición. / *** Animal and Plant Health Inspection Service (APHIS), the First Authority of sanitary control of the Department of Agriculture of the United States of North America, in 2000 reported the detention of shipments of fresh asparagus from Peru with infestations of eggs and larvae of Copitarsia sp., before this event to established the fumigation with methyl bromide as phytosanitary requirement shipments of Peruvian fresh asparagus before coming to the United States. But overuse is giving rise to fresh asparagus industry estimated costs of $ 2.6 million, loss of quality, reduction of shelf life of the product and rupture of the cold chain. Pogue and Simmons in 2008 released a new species, Copitarsia corruda, once considered Copitarsia decolora (Simmons y Pogue 2004), because they are cryptic species, but internal morphology (genitaly) and molecular level are different. Therefore seeks to implement alternative control of this species, using a biological control agent of the genus Trichogramma parasitoid of eggs lepidoptera mainly. For this reason, in this research work is proposed to realize some experimental testing at the Test Laboratory under normal environment conditions to determine the parasitic activity of the genus Trichogramma on eggs Copitarsia corruda, as it tends to kill the pest before it causes damage on crops of asparagus. Therefore, the main objective of the research is to evaluate the efficiency of eight species of Trichogramma (T. atopovirilia, T. cacoeciae, T. dendrolimi, T. exiguum, T. galloi, T. nerudai, T. pretiosum and T. pintoi) on eggs Copitarsia corruda. The results suggest that T. nerudai and T. galloi are more efficient compared to other parasitoid species of the same genus. Keywords: Copitarsia corruda, Trichogramma, parasitoid, Asparagus, efficient. Oviposition.
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Estudio de la incidencia de hongos toxicogénicos en uvas destinadas a la producción de vinos

Vargas Trinidad, Andrea Susana January 2014 (has links)
Existen muy pocos datos sobre la incidencia de hongos toxicogénicos en uvas cultivadas en Sudamérica. Los estudios realizados son orientados principalmente a la determinación de especies potenciales productoras de OTA, principal micotoxina regulada en vinos a nivel mundial. Así mismo, es escasa la información sobre la incidencia de otras especies toxicogénicas y sus toxinas en uvas, jugos y vinos de la región. El objetivo de la investigación consistió en aislar e identificar hongos potencialmente toxicogénicos de uvas cultivadas en la provincia de Río Negro, Argentina y determinar la capacidad toxicogénica de los mismos. Se analizaron 10 muestras de uvas de variedad Malbec de los viñedos de las localidades de Villa Azul y Maiqué en la Provincia de Río Negro. Se aislaron 441 cepas de hongos, de los cuales el 40.8% pertenece al género Penicillium y el 21.8% al género Alternaria. Se realizó la identificación a nivel grupo-especie de los aislamientos pertenecientes éstos géneros. Se obtuvieron 85 aislamientos pertenecientes al género Alternaria, de los cuales 5 pertenecían al grupo-especie A. alternata, 5 al grupo-especie A. arborescens y 75 al grupo-especie A. tenuissima. Así mismo, se determinaron los perfiles de producción (AOH, AME y AT) de los aislamientos, encontrándose que todos produjeron al menos una toxina y el 66% produjeron tres toxinas. Del mismo modo, se identificaron 43 cepas de Penicillium expansum, evaluándose la capacidad de producir patulina, resultando todos productores de la toxina en medio de cultivo. Todos los aislamientos produjeron la lesión característica al ser inoculados en manzanas y el 95% produjo patulina en este sustrato. La alta incidencia de especies toxicogénicas de Alternaria y de Penicillium expansum en uvas de la región patagónica representa un riesgo que debe ser evaluado. No se encontraron cepas del género Aspergillus, lo que permitiría inferir que esta región presenta una ventaja competitiva, ya que el riesgo toxicológico atribuible a la presencia de OTA en los vinos estaría muy disminuido y al ser esta la única micotoxina regulada a nivel global, es de interés que los productos de la región cumplan con los estándares internacionales de calidad. La metodología desarrollada en el presente trabajo podría ser aplicada para determinar el potencial riesgo de contaminación con micotoxinas de uvas y subproductos en países de Sudamérica, como el Perú, donde existen escasos datos sobre dicha contaminación.
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Caracterización de tres cepas de Beauveria brongniartii (Saccardo) Petch y su virulencia en Phthorimaea operculella (Zeller) y Symmetrischema tangolias (Gyen)

Vargas Flores, Melisa Elisée January 2003 (has links)
Se realizó la caracterización morfológica, fisiológica y molecular de tres cepas de Beauveria brongniartii: CIPCa18(85), CIPCu1(44) y CIPH1(1), además de evaluar su actividad entomopatógena en Phthorimaea operculella y Symmetrischema tangolias. La cepa CIPCu1(44) presentó conidias redondas, pequeñas y la formación de sinemas, diferenciándose de las cepas CIPCa18(85) y CIPH1(1) que presentaron conidias elipsoidales. El análisis molecular mediante la técnica RAPD permitió determinar que esta cepa estaba genéticamente más relacionada con la cepa de Beauveria bassiana CIPLM1 (50.4% de similaridad). Al evaluar la actividad entomopatógena de las tres cepas en larvas de primer estadío de P. operculella y S. tangolias, se encontró que utilizando 1 x 109 conidias/ml el porcentaje de mortalidad fue hasta del 100%. Se determinó que para P. operculella la CL50 de las cepas CIPCa18(85), CIPCu1(44) y CIPH1(1) fue 2.71 x 105, 5.53 x 105 y 5.19 x 105 conidias/ml y la CL90 fue 6.81 x 106, 1.22 x 107 y 5.97 x 106 conidias/ml, mientras que para S. tangolias la CL50 para las cepas CIPCa18(85), CIPCu1(44) y CIPH1(1) fue 1.16 x 106, 9.37 x 106 y 4.52 x 106 conidias/ml y la CL90 fue 6.01 x 107, 1.46 x 109 y 2.17 x 108 conidias/ml respectivamente. En ensayos posteriores se determinó que la cepas de B. brongniartii necesitaron mayor tiempo (9-10 días) para que las CL50 pudieran causar el 50% de mortalidad a las larvas de primer estadío de S. tangolias mientras que sólo necesitaron 3 a 5 días para causar el 50% de mortalidad en P. operculella. Posteriormente se evaluó cada CL50 y CL90 en huevos, larvas de último estadío y pupas de P. operculella y S. tangolias, encontrándose que todos los estados de desarrollo fueron susceptibles con diferente grado de infección. En todas estas evaluaciones, la cepa CIPCa18(85) presentó la mejor actividad entomopatógena para el control de P. operculella y S. tangolias. / --- The objective of this research was to carry out morphological, phisiological and molecular characterization of three isolates of Beauveria brongniartii: CIPCa18(85), CIPCu1(44) y CIPH1(1). In addition, entomogenous activity was tested in Phthorimaea operculella y Symmetrischema tangolias. Isolate CIPCu1(44) showed shorter and spherical conidia while isolates CIPCa18(85) y CIPH1(1) showed tipical elipsoidal conidia. RAPD technique showed a relation between isolates CIPCu1(44) and CIPLM1 (B. bassiana) with 50.4% of similarity. Patogegenicity test showed that isolates were effective to first instar larves, the use of 1 x 109 conidia/ml caused until 100% mortality for both insects. CL50 for isolates CIPCa18(85), CIPCu1(44) and CIPH1(1) obtained in P. operculella larves were 2.71 x 105, 5.53 x 105 and 5.19 x 105 conidias/ml and CL90 for each isolate were 6.81 x 106, 1.22 x 107 and 5.97 x 106 conidias/ml respectively. CL50 for isolates CIPCa18(85), CIPCu1(44) and CIPH1(1) obtained in S. tangolias were 1.16 x 106, 9.37 x 106 and 4.52 x 106 conidias/ml and CL90 for each isolate were 6.01 x 107, 1.46 x 109 and 2.17 x 108 conidias/ml respectively. In other essays, isolates of B. brongniartii needed more time to kill 50% of S. tangolias larves (9 to 10 days) while isolates of B. brongniartii needed only 3 to 5 days to kill 50% of P. operculella. With CL90, isolates needed about 3 days for both insects. Finally, each CL50 y CL90 of three isolates were tested in eggs, last instar larves and pupae, results showed that all develop stages were susceptible to B. brongniartii. Isolate CIPCa18(85) showed the best entomogenous activity to make control of P. operculella y S. tangolias because it came of the same insect order, we suggest more studies with this isolate in greenhouse.
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Presencia de enteroparasitos en lechuga (Lactuca sativa) en establecimientos de consumo público de alimentos del distrito de Cercado de Lima

Tananta Varela, Iris Violeta January 2002 (has links)
Las Enfermedades Transmitidas por Alimentos (ETA) y dentro de ellas las parasitarias constituyen un grave problema de salud pública por la alta morbilidad que generan a nivel mundial y por sus repercusiones económicas, con mayor énfasis en países en desarrollo como el Perú. En nuestro país, las enteroparasitosis presentan alta prevalencia y dentro de ellas las producidas por protozoos que afectan a niños y a inmunosuprimidos por ser los más susceptibles; debido a la naturaleza de su mecanismo de transmisión que por lo general es fecal-oral, interviniendo para ello el agua y alimentos contaminados con las formas parasitarias infectantes de estos protozoos. El presente estudio tuvo como objetivo determinar el grado de contaminación por enteroparásitos en verduras crudas expendidas en establecimientos de consumo público de alimentos del Distrito de Cercado de Lima. Se recolectaron al azar 105 muestras de lechuga (Lactuca sativa) de restaurantes, cebicherías y pollerías de la zona en estudio. Las muestras fueron procesadas por el método directo de observación y por la técnica de coloración de Ziehl Neelsen modificado, encontrándose un porcentaje de 12.38 ± 6.29 % de contaminación enteroparasitaria, obteniéndose 1.9 % para Giardia sp, 3.81% para Isospora sp, 6.67 % para Cryptosporidium parvum. Por los resultados hallados en el presente estudio se recomienda el monitoreo continuo a todo establecimiento de consumo público de alimentos a cargo de entidades competentes como las municipalidades y Ministerio de Salud. Así como el diseño de sistemas de prevención y control.
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Presencia de enteroparasitos en lechuga (Lactuca sativa) en establecimientos de consumo público de alimentos del distrito de Cercado de Lima

Tananta Varela, Iris Violeta January 2002 (has links)
Las Enfermedades Transmitidas por Alimentos (ETA) y dentro de ellas las parasitarias constituyen un grave problema de salud pública por la alta morbilidad que generan a nivel mundial y por sus repercusiones económicas, con mayor énfasis en países en desarrollo como el Perú. En nuestro país, las enteroparasitosis presentan alta prevalencia y dentro de ellas las producidas por protozoos que afectan a niños y a inmunosuprimidos por ser los más susceptibles; debido a la naturaleza de su mecanismo de transmisión que por lo general es fecal-oral, interviniendo para ello el agua y alimentos contaminados con las formas parasitarias infectantes de estos protozoos. El presente estudio tuvo como objetivo determinar el grado de contaminación por enteroparásitos en verduras crudas expendidas en establecimientos de consumo público de alimentos del Distrito de Cercado de Lima. Se recolectaron al azar 105 muestras de lechuga (Lactuca sativa) de restaurantes, cebicherías y pollerías de la zona en estudio. Las muestras fueron procesadas por el método directo de observación y por la técnica de coloración de Ziehl Neelsen modificado, encontrándose un porcentaje de 12.38 ± 6.29 % de contaminación enteroparasitaria, obteniéndose 1.9 % para Giardia sp, 3.81% para Isospora sp, 6.67 % para Cryptosporidium parvum. Por los resultados hallados en el presente estudio se recomienda el monitoreo continuo a todo establecimiento de consumo público de alimentos a cargo de entidades competentes como las municipalidades y Ministerio de Salud. Así como el diseño de sistemas de prevención y control.
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Caracterización de tres cepas de Beauveria brongniartii (Saccardo) Petch y su virulencia en Phthorimaea operculella (Zeller) y Symmetrischema tangolias (Gyen)

Vargas Flores, Melisa Elisée January 2003 (has links)
Se realizó la caracterización morfológica, fisiológica y molecular de tres cepas de Beauveria brongniartii: CIPCa18(85), CIPCu1(44) y CIPH1(1), además de evaluar su actividad entomopatógena en Phthorimaea operculella y Symmetrischema tangolias. La cepa CIPCu1(44) presentó conidias redondas, pequeñas y la formación de sinemas, diferenciándose de las cepas CIPCa18(85) y CIPH1(1) que presentaron conidias elipsoidales. El análisis molecular mediante la técnica RAPD permitió determinar que esta cepa estaba genéticamente más relacionada con la cepa de Beauveria bassiana CIPLM1 (50.4% de similaridad). Al evaluar la actividad entomopatógena de las tres cepas en larvas de primer estadío de P. operculella y S. tangolias, se encontró que utilizando 1 x 109 conidias/ml el porcentaje de mortalidad fue hasta del 100%. Se determinó que para P. operculella la CL50 de las cepas CIPCa18(85), CIPCu1(44) y CIPH1(1) fue 2.71 x 105, 5.53 x 105 y 5.19 x 105 conidias/ml y la CL90 fue 6.81 x 106, 1.22 x 107 y 5.97 x 106 conidias/ml, mientras que para S. tangolias la CL50 para las cepas CIPCa18(85), CIPCu1(44) y CIPH1(1) fue 1.16 x 106, 9.37 x 106 y 4.52 x 106 conidias/ml y la CL90 fue 6.01 x 107, 1.46 x 109 y 2.17 x 108 conidias/ml respectivamente. En ensayos posteriores se determinó que la cepas de B. brongniartii necesitaron mayor tiempo (9-10 días) para que las CL50 pudieran causar el 50% de mortalidad a las larvas de primer estadío de S. tangolias mientras que sólo necesitaron 3 a 5 días para causar el 50% de mortalidad en P. operculella. Posteriormente se evaluó cada CL50 y CL90 en huevos, larvas de último estadío y pupas de P. operculella y S. tangolias, encontrándose que todos los estados de desarrollo fueron susceptibles con diferente grado de infección. En todas estas evaluaciones, la cepa CIPCa18(85) presentó la mejor actividad entomopatógena para el control de P. operculella y S. tangolias. / The objective of this research was to carry out morphological, phisiological and molecular characterization of three isolates of Beauveria brongniartii: CIPCa18(85), CIPCu1(44) y CIPH1(1). In addition, entomogenous activity was tested in Phthorimaea operculella y Symmetrischema tangolias. Isolate CIPCu1(44) showed shorter and spherical conidia while isolates CIPCa18(85) y CIPH1(1) showed tipical elipsoidal conidia. RAPD technique showed a relation between isolates CIPCu1(44) and CIPLM1 (B. bassiana) with 50.4% of similarity. Patogegenicity test showed that isolates were effective to first instar larves, the use of 1 x 109 conidia/ml caused until 100% mortality for both insects. CL50 for isolates CIPCa18(85), CIPCu1(44) and CIPH1(1) obtained in P. operculella larves were 2.71 x 105, 5.53 x 105 and 5.19 x 105 conidias/ml and CL90 for each isolate were 6.81 x 106, 1.22 x 107 and 5.97 x 106 conidias/ml respectively. CL50 for isolates CIPCa18(85), CIPCu1(44) and CIPH1(1) obtained in S. tangolias were 1.16 x 106, 9.37 x 106 and 4.52 x 106 conidias/ml and CL90 for each isolate were 6.01 x 107, 1.46 x 109 and 2.17 x 108 conidias/ml respectively. In other essays, isolates of B. brongniartii needed more time to kill 50% of S. tangolias larves (9 to 10 days) while isolates of B. brongniartii needed only 3 to 5 days to kill 50% of P. operculella. With CL90, isolates needed about 3 days for both insects. Finally, each CL50 y CL90 of three isolates were tested in eggs, last instar larves and pupae, results showed that all develop stages were susceptible to B. brongniartii. Isolate CIPCa18(85) showed the best entomogenous activity to make control of P. operculella y S. tangolias because it came of the same insect order, we suggest more studies with this isolate in greenhouse.
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Caracterización genética y fenotípica de aislados chilenos de Botrytis cinerea de diferente grado de sensibilidad a Boscalid

Román Ramos, Andrea Elizabeth January 2013 (has links)
Tesis para optar al grado de Magíster en Ciencias Agropecuarias Mención Sanidad Vegetal / Botrytis cinerea produce importantes pérdidas en uva de mesa en Chile. En el control químico de este patógeno se utiliza entre otras moléculas a boscalid, carboxamida que actúa inhibiendo la enzima succinato deshidrogenasa. En aislados de Botrytis recolectados de cultivos sometidos a un uso intensivo del fungicida, se ha demostrado la asociación entre la pérdida de sensibilidad con mutaciones en el gen sdhB, en donde se han identificado las mutaciones P225F/L/T y N230I asociadas a aislados resistentes y en mayor frecuencia las mutaciones H272R/Y/L asociadas a aislados resistentes y moderadamente resistentes. Durante las últimas dos temporadas (2011-2012 y 2012- 2013), en la zona Central de Chile, se ha reportado una baja sensibilidad a boscalid. El objetivo de la presente investigación fue determinar la presencia de mutaciones en el gen sdhB en aislados chilenos de Botrytis cinerea de distinto nivel de sensibilidad a boscalid. Con este propósito, 50 aislados monoconidiales fueron caracterizados genética y fenotípicamente. Para la caracterización fenotípica se verificó la sensibilidad a boscalid mediante evaluación del comportamiento de germinación conidial, determinándose 4 categorías según valores EC50: Sensible (S) (>0,05-1,37μg.mL-1), Levemente Resistente (LR) (1,38-7,80μg.mL-1), Moderadamente Resistente (MR) (7,81-50μg.mL-1) y Resistente (R) (>50μg.mL-1). Aislados R y MR con mutaciones se compararon con sensibles, según parámetros como: crecimiento miceliar, esporulación, sensibilidad osmótica, capacidad formadora de esclerocios y virulencia. La detección de mutaciones se realizó mediante la técnica PCR-PIRA (Primer-Introduced Restriction Enzyme Analyses) y el uso de partidores específicos H272Y/R-fw y H272- rev, cuyos productos fueron digeridos con las enzimas de restricción EcoRV y HhaI respectivamente. Los aislados de Botrytis cinerea mostraron niveles de sensibilidad a boscalid variables entre 0,13 μg.mL-1 (S) y 1,1*109 μg.mL-1 (R). La utilización del PCR-PIRA, permitió identificar las mutaciones H272Y/R en el gen sdhB que resultaron ser inespecíficas de un determinado nivel de sensibilidad a boscalid. De acuerdo a los parámetros de adaptabilidad evaluados tales como crecimiento miceliar, capacidad formadora de esclerocios y esporulación de aislados resistentes con mutaciones H272Y/R respecto de los sensibles fueron significativamente diferentes (p<0,05), lo cual implicaría que las mutaciones detectadas y asociadas a la resistencia a boscalid generarían un costo metabólico en los aislados de Botrytis. / Botrytis cinerea produces serious losses in table grapes in Chile. In the chemical control of this pathogen is used among other molecules like boscalid, carboxamide that inhibits the succinate dehydrogenase enzyme. Botrytis isolates collected from different crops subjected to intensive fungicide application has shown an association between sensitivity loss and mutations in the sdhB gene, where P225F/L/T and N230I mutations have been identified in resistant isolates and most frequently mutations like H272R/Y/L on moderately resistant and resistant isolates. During the past two seasons (2011-2012 and 2012-2013) in the central Chile, has reported a low sensitivity to boscalid. The objective of this research was determine the mutations presence in the sdhB gene of Botrytis cinerea isolates with different sensitivity levels to boscalid. For this purpose, 50 monoconidial isolates were characterized genetically and phenotypically. For phenotypic characterization was verified the sensitivity to boscalid by conidial germination, were classified into four resistance phenotypes based on the EC50 values them: Sensitive (S) (>0.05-1.37 μg.mL-1), Low resistant (LR) (1.38-7.80 μg.mL-1), moderately resistant (MR) (7.81-50μg.mL-1) and resistant (R) (>50μg.mL-1). Isolate R and MR with mutations were compared with sensitive isolates, with parameters such as mycelial growth, sporulation, osmotic sensitivity, sclerotia production and virulence. Mutations detection was performed by PIRA-PCR (Primer- Introduced Restriction Enzyme Analyses) with specific primers H272-rev H272Y/R-fw whose products were digested with restriction enzymes EcoRV and HhaI respectively. Botrytis cinerea isolates showed different sensitivity levels between 0.13 μg.mL-1 boscalid (S) and 1.1*10-9 μg.mL-1 (R). The PIRA-PCR method has detected H272Y/R mutations, none were specific a sensitivity level to boscalid. According to adaptability parameters evaluated such as mycelial growth, sclerotia production and sporulation of resistant isolates with mutations H272Y/R compare with sensitive were significantly different (p <0.05), which imply that the mutations detected generate a metabolic cost in Botrytis cinerea isolates to boscalid.
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Determinación de nemátodos del género Pratylenchus en un huerto de manzanos de bajo vigor y evaluación del control químico / Determination of nematodes Pratylenchus an apple orchard in low force and evaluation of chemical control

Córdova Zúñiga, Karla Giannina January 2012 (has links)
Memoria para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo / Se realizó un estudio para determinar el estado sanitario de un huerto de manzanos (Malus domestica Borkh.) cultivar Brookfield sobre patrón M26, con alta infestación de nemátodos fitoparásitos, ubicado en la comuna de Las Cabras, Región del Libertador Bernardo O'Higgins, durante la temporada 2010-2011. Se tomaron muestras de suelo y raíces. Los individuos del suelo se extrajeron mediante el método de tamizado y en raíces mediante la incubación de tejidos. La determinación de géneros y especies, indicó la presencia dominante de Pratylenchus, y otros géneros en bajas poblaciones, tales como Mesocriconema, Helicotylenchus, Hemicycliophora, Tricodorus y Xiphinema. La identificación de especies de Pratylenchus spp. se realizó con claves taxonómicas, en base a caracteres morfométricos y morfológicos de la hembra, como la región labial, estilete y estructuras asociadas, intestino medio y recto, sistema excretor y órganos reproductivos, y presencia o ausencia de machos. Las mediciones correspondieron a los índices propuestos por de Man. Se estudiaron además los efectos de dos nematicidas granulares, oxamil (Vydate 10G) y cadusafos (Rugby 10G), en dosis de 30 kg/ha, sobre las poblaciones de nemátodos fitoparásitos, siendo aplicados en dos oportunidades, diciembre de 2010 y abril de 2011.
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Estudio de la Variabilidad Genética del Sweet potato feathery mottle virus (SPFMV) y virus relacionados existentes en camote [Ipomea batatas (L.)]

Untiveros Lázaro, Milton January 2010 (has links)
En el Perú son varios los potyvirus que se encuentran infectando el camote (Ipomoea batatas), siendo el mas común el Sweet potato feathery mottle(SPFMV). Sin embargo, actualmente no existen datos de secuencia nucleotídica par estos virus. En el presente estudio, se determinaron y analizaron los datos de la secuencia nucleotídica de la región 3’ terminal (~1800 pb) de 17 aislamientos de potyvirus colectados de campos que se encuentran en las seis principales zonas de cultivo de camote en el Perú. Los resultados de la comparación de secuencias y análisis filogenéticos mostraron que tres de las cuatro cepas que son reconocidas dentro del SPFMV, se encuentran en el Perú, incluyendo la cepa Este de Africa. Del mismo modo, se encontraron aislamientos pertenecientes de otros dos potyvirus denominados sweet potato virus G(SPVG) y sweet potato virus 2 (SPV2). Análisis posteriores revelaron que SPFMV, SPVG y SPV2 son virus relacionados y forman una línea filogenética dentro del genero Potyvirus que tienen como hospederos a plantas del genero Ipomoea. El estudio también reporta la ocurrencia de eventos de recombinación entre aislamientos de diferentes cepas de SPFMV. / Several potyviruses are found infecting sweet potato (Ipomoea batatas) in Peru, of which sweet potato feathery mottle virus (SPFMV, genus Potyvirus) is the most common. However, sequence data for these viruses are not available from Peru. In this study, the 3’-terminal ~1,800 nucleotide sequences of 17 potyvirus samples collected from the six main sweet potato-producing areas of Peru were determined and analyzed. Results of sequence comparisons and phylogenetic analysis showed that three of the four recognized SPFMV strain groups, including the East African strain, are established in Peru as well as two other potyviruses: sweet potato virus G (SPVG) and sweet potato virus 2 (SPV2). The analysis further revealed that SPFMV, SPVG and SPV2 are related and form an Ipomoea-specific phylogenetic lineage within the genus Potyvirus and identified for the first time recombination events between viruses from different strain groups of SPFMV. / Tesis

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