O hormônio progesterona é utilizado para tratamento de infertilidade, anticoncepção e problemas ovarianos. Na medicina veterinária, além dessas aplicações, a progesterona é utilizada para a sincronização do ciclo estral das fêmeas economicamente exploráveis, otimizando as técnicas de reprodução, como a inseminação artificial e a transferência de embriões. Devido à sua baixa capacidade imunogênica, atoxicidade e abundância na natureza, o colágeno é um biopolímero que têm sido amplamente empregado para fins biomédicos. Neste trabalho obteve-se matrizes de colágeno e colágeno contendo progesterona nas proporções de 5% e 10% sobre a massa de colágeno (m/m), estudou-se a interação entre o hormônio e o biopolímero e a liberação de progesterona. Analisou-se, também, nas matrizes: estabilidade térmica, por TG e DSC; capacidade de hidratação por tampão PBS; morfologia, por microscopia eletrônica de varredura e estabilidade biológica, por ensaios in vitro de hidrólise enzimática do colágeno por colagenase. Observou-se que a presença de progesterona nas matrizes de colágeno não alterou a capacidade de hidratação por tampão, aumentou a resistência frente à degradação enzimática e diminuiu a temperatura de degradação do colágeno. A incorporação manual do hormônio apresentou cerca de 88% de eficiência e os ensaios de liberação mostraram que a incorporação a 5% (m/m) libera mais rapidamente que a incorporação a 10%, sugerindo a dispersão do hormônio nas matrizes colagênicas. Os dados obtidos apontam a possibilidade da construção de um sistema de liberação usando colágeno aniônico para liberar a quantidade necessária de progesterona por períodos de até 10 dias, tempo necessário para a sincronização do ciclo estral em fêmeas bovinas / Progesterone is an hormone used for treatment of infertility, contraception and to control ovarian problems in some species. In veterinary medicine, beyond these applications, progesterone is also used for estral cycle synchronization, and to optimizing reproduction tecniques, like artificial insemination and embryos transfer in the economically explored species. Due to its low immunogenic capacity, low toxicity and abundance in the nature, collagen is a biopolymer that have been widely used for biomedical purposes. In this work collagen matrices with progesterone loadings of 5% and 10% (w/w) were prepared and characterized by thermal stability (TG and DSC), hydration capacity (PBS buffer), morphology by electronic microscopy, biological stability by in vitro hydrolysis of collagen by colagenase, and in vitro progesterone release assays. It was observed that the progesterone did not modify the hydrate capacity, increased the resistance to enzymatic degradation and diminished degradation temperature of the collagen. Manual incorporation of the hormone presented about 88% of efficiency and the release assays had showed that 5% (w/w) loading matrix liberates more quickly the hormone than 10% loading matrix, suggesting the dispersion of the hormone in the collagen. Obtained results pointed to the possibility of using anionic collagen in the development of a release system that could potencialy be used to deliver progesterone over an extend period of about 10 days, an ideal period for estral cycle synchronization in calves

Orientador: Maria Cecilia Ferraz de Arruda Veiga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-12T22:19:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Botelho_AnaPaula_D.pdf: 8511872 bytes, checksum: 1e5be1866e7b4068c85b6bce372dfa1f (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: As disfunções têmporo-mandibulares são mais prevalentes em mulheres e a influência dos hormônios gonadais sobre estas disfunções ainda não estão totalmente esclarecidas. Uma vez que a exposição tanto ao estresse agudo quanto ao crônico podem apresentar diferentes respostas comportamentais; o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do estresse agudo, sub-crônico e crônico sobre a ansiedade e nocicepção induzida pela injeção de formalina na articulação temporomandibular (ATM) de ratas nas fases de estro e proestro. Foi avaliada também a relação entre os níveis sanguíneos de corticosterona após os diversos protocolos de estresse. Ratas Wistar nas fases de estro ou proestro foram submetidas a uma sessão de estresse agudo por imobilização (15 min, 30 min ou 1 h), ou expostas ao estresse sub-crônico (3 dias - 1 h/dia), ou crônico (40 dias - 1 h/dia). Logo depois, foram (1) submetidas ao teste da formalina na ATM para avaliação da nocicepção; ou (2) submetidas ao teste do labirinto em cruz elevado para a avaliação da ansiedade; ou (3) mortas imediatamente para coleta de sangue e mensuração hormonal da corticosterona plasmática por radioimunoensaio. Finalmente, foi avaliado o papel do receptor kapa-opióide nas alterações nociceptivas induzidas pelo estresse. Para isso, o antagonista seletivo ?-opióide, nor-BNI (200 µg/ 25 µl) ou salina foi administrado 24 h antes da avaliação da nocicepção. Os resultados mostraram que todos os protocolos de estresse aumentaram significativamente os níveis de corticosterona, não apresentando diferença em relação às fases do ciclo estral. Em relação à nocicepção, os animais submetidos ao estresse agudo (1 h), tanto na fase de estro quanto na fase de proestro, apresentaram diminuição nas respostas comportamentais nociceptivas (analgesia) quanto comparados ao controle. A injeção local de nor-BNI reverteu parcialmente a analgesia induzida pelo estresse na fase proestro, mas não em estro. Quanto à ansiedade, houve um aumento significativo da ansiedade nas ratas submetidas ao estresse agudo (1 h) e um aumento da atividade locomotora nas ratas estressadas cronicamente quando comparadas ao controle. Concluiu-se que: 1) o estresse agudo (1 h) causa analgesia em ratas nas fases de estro e proestro, sendo este efeito maior em proesto; 2) o receptor ?-opióide reverte parcialmente a analgesia induzida pelo estresse em fêmeas na fase de proestro; e 3) o estresse agudo (1 h) aumenta o nível de ansiedade em fêmeas nas fases de estro e de proestro / Abstract: Temporo-mandibular disorders are more prevalent in women and the influences of gonadal hormones on these disorders are not fully clarified. Since the exposure to both acute and chronic stress may have different behavioral responses; the purpose of this study was to evaluate the effects of acute, sub-chronic and chronic stress on behavioral nociceptive responses induced by the injection of formalin in the temporomandibular joint (TMJ) of rats in the phases of estrus and proestrus. It was also assessed the relationship between blood levels of corticosterone after the various protocols of stress. Wistar female rats in estrus or proestrus were submitted to a session of acute stress by immobilization (15 min, 30 min or 1 h), or exposed to sub-chronic stress (3 days - 1 hr / day) or chronic (40 day - 1 hr / day). Soon after, they were (1) submitted to the formalin test to evaluate the nociception, or (2) submitted to the elevated plus-maze test for the evaluation of anxiety, or (3) killed immediately to collect blood and measure hormonal plasma corticosterone by radioimmunoassay. Finally, was assessed the role of kappaopioid receptor on nociceptive alterations induced by stress. For this, the antagonist selective ?-opioid nor-BNI (200µg/ 25 µl) or saline was administered 24 hours before the evaluation of nociception. The results showed that all protocols of stress significantly increased levels of corticosterone, but there were no significant difference in relation to the phases of the estrous cycle. In relation to the nociception, animals submitted to acute stress (1 h), both in estrus and in proestrus phases, showed a decrease in the nociceptive behavioral responses (analgesia) when compared to control. The local injection of nor-BNI partially reverted the analgesia induced by stress in proestrus phase, but not in estrus. As for anxiety, there was a significant increase in anxiety levels in rats submitted to acute stress (1 h) and an increase in locomotor activity in chronically stressed rats when compared to control. It was concluded that: 1) the acute stress (1 h) induce analgesia in rats in the estrus and proestrus phases, being this effect higher in proestrus, 2) the receptor ?-opioid partially reverses the analgesia in females in proestrus phase, and 3) acute stress (1 h) increase the anxiety levels in females in estrus and proestrus phases / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutor em Odontologia

O hormônio progesterona é utilizado para tratamento de infertilidade, anticoncepção e problemas ovarianos. Na medicina veterinária, além dessas aplicações, a progesterona é utilizada para a sincronização do ciclo estral das fêmeas economicamente exploráveis, otimizando as técnicas de reprodução, como a inseminação artificial e a transferência de embriões. Devido à sua baixa capacidade imunogênica, atoxicidade e abundância na natureza, o colágeno é um biopolímero que têm sido amplamente empregado para fins biomédicos. Neste trabalho obteve-se matrizes de colágeno e colágeno contendo progesterona nas proporções de 5% e 10% sobre a massa de colágeno (m/m), estudou-se a interação entre o hormônio e o biopolímero e a liberação de progesterona. Analisou-se, também, nas matrizes: estabilidade térmica, por TG e DSC; capacidade de hidratação por tampão PBS; morfologia, por microscopia eletrônica de varredura e estabilidade biológica, por ensaios in vitro de hidrólise enzimática do colágeno por colagenase. Observou-se que a presença de progesterona nas matrizes de colágeno não alterou a capacidade de hidratação por tampão, aumentou a resistência frente à degradação enzimática e diminuiu a temperatura de degradação do colágeno. A incorporação manual do hormônio apresentou cerca de 88% de eficiência e os ensaios de liberação mostraram que a incorporação a 5% (m/m) libera mais rapidamente que a incorporação a 10%, sugerindo a dispersão do hormônio nas matrizes colagênicas. Os dados obtidos apontam a possibilidade da construção de um sistema de liberação usando colágeno aniônico para liberar a quantidade necessária de progesterona por períodos de até 10 dias, tempo necessário para a sincronização do ciclo estral em fêmeas bovinas / Progesterone is an hormone used for treatment of infertility, contraception and to control ovarian problems in some species. In veterinary medicine, beyond these applications, progesterone is also used for estral cycle synchronization, and to optimizing reproduction tecniques, like artificial insemination and embryos transfer in the economically explored species. Due to its low immunogenic capacity, low toxicity and abundance in the nature, collagen is a biopolymer that have been widely used for biomedical purposes. In this work collagen matrices with progesterone loadings of 5% and 10% (w/w) were prepared and characterized by thermal stability (TG and DSC), hydration capacity (PBS buffer), morphology by electronic microscopy, biological stability by in vitro hydrolysis of collagen by colagenase, and in vitro progesterone release assays. It was observed that the progesterone did not modify the hydrate capacity, increased the resistance to enzymatic degradation and diminished degradation temperature of the collagen. Manual incorporation of the hormone presented about 88% of efficiency and the release assays had showed that 5% (w/w) loading matrix liberates more quickly the hormone than 10% loading matrix, suggesting the dispersion of the hormone in the collagen. Obtained results pointed to the possibility of using anionic collagen in the development of a release system that could potencialy be used to deliver progesterone over an extend period of about 10 days, an ideal period for estral cycle synchronization in calves

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência do controle da ovulação através da aplicação de PMSG, GnRH, Benzoato de Estradiol e PGF2a junto ao protocolo comercial Crestar®, para viabilizar a IA em tempo fixo. Foram utilizadas 348 vacas multíparas, cruzadas Nelore (Bos taurus indicus) X Charolês (Bos taurus taurus), divididas em dois grupos: 179 vacas paridas com bezerros de 90 a 120 dias de idade e outras 169 vacas solteiras. Estes animais foram submetidos a cinco tratamentos de controle farmacológico do ciclo estral e ovulação para a inseminação artificial em tempo fixo. Dentro dos cinco tratamentos todas as vacas receberam o protocolo Crestar â como agente sincronizador do crescimento folicular. Este protocolo consiste na colocação implante subcutâneo com 3mg de norgestomet e na injeção 3mg de norgestomet + 5mg de valerato de estradiol (i.m. - simultânea a colocação do implante). Após a remoção do implante (9 dias), as vacas foram submetidas aos cinco tratamentos de controle da ovulação: T1 - (n=70): uma injeção de solução fisiológica 48h após a retirada do implante (D 11); T2 - (n=68): 0,75mg de benzoato de estradiol 24h após a retirada do implante (D 10); T3 - (n=70): aplicação de 7,5mg de PGF2a, no dia da retirada (D 9) e 0,75mg de benzoato de estradiol 24h após a retirada do implante (D 10); T4 - (n=70): 500 UI de PMSG na retirada do implante (D 9) e T5 - (n=70): 500mg de GnRH 48h após a retirada dos implante (D 11). Todos os animais foram inseminados 54-56h após a retirada do implante. As taxas de prenhez foram analisadas estatisticamente por regressão logística. Não houve diferença entre os tratamentos (p>0,05) onde: 35,7, 31,4, 22,0, 37,0 e 42,8% para T1, T2, T3, T4 e T5 respectivamente. Entretanto a taxa de prenhez das vacas solteiras foi maior (39,6% - P<0,05) do que aquela das vacas com bezerro ao pé (28,4%). / The objective of this study was to evaluate the effects of ovulation using PMSG, GnRH, Estradiol Benzoate and PGF2a in combination with Crestar â protocol and AI at fixed time. Three hundred forty eight multiparous cows, crossbreed Nelore (Bos taurus indicus) X Charolais (Bos taurus taurus) were divided in two groups: 179 suckling cows with calves between 90 to 120 days of age and 169 non-suckling cows. Those cows received a Crestar® protocol for follicular growth synchronization consisting of a subcutaneous implant with 3mg of norgestomet and 3mg of norgestomet plus 5mg of estradiol valerate injection (day of implant insert). The implant was removed after nine days. Cows were submitted to five treatments for pharmacological control of ovulation and were artificially inseminated at fixed time. After follicular growth synchronization cows received the treatments for control of ovulation: T1 - (n=70): injection of physiological solution 48h after implant removal (D 11); T2 - (n=68): 0.75mg of estradiol benzoate 24h after implant removal (D 10); T3 - (n=70): 7.5mg of PGF2a at same day of implant removal (D 9) and 0.75mg of estradiol benzoate 24h after implant removal (D 10); T4 - (n=70): the cows received 500 UI of PMSG at implant removal (D 9) and T5 - (n=70): cows received 500mg of GnRH 48h after implant removal (D 11). Those cows were artificially inseminated 54-56h after implant removal. Pregnancy rate was analyzed by logistical regression program. There were no differences among treatments (P>0.05) 35.7, 31.4, 22.0, 37.0 and 42.8% for T1, T2, T3, T4 and T5, respectively. However, there was difference (p<0,05) between suckling and non-suckling cows (28.4, 39.6%).

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência do controle da ovulação através da aplicação de PMSG, GnRH, Benzoato de Estradiol e PGF2a junto ao protocolo comercial Crestar®, para viabilizar a IA em tempo fixo. Foram utilizadas 348 vacas multíparas, cruzadas Nelore (Bos taurus indicus) X Charolês (Bos taurus taurus), divididas em dois grupos: 179 vacas paridas com bezerros de 90 a 120 dias de idade e outras 169 vacas solteiras. Estes animais foram submetidos a cinco tratamentos de controle farmacológico do ciclo estral e ovulação para a inseminação artificial em tempo fixo. Dentro dos cinco tratamentos todas as vacas receberam o protocolo Crestar â como agente sincronizador do crescimento folicular. Este protocolo consiste na colocação implante subcutâneo com 3mg de norgestomet e na injeção 3mg de norgestomet + 5mg de valerato de estradiol (i.m. - simultânea a colocação do implante). Após a remoção do implante (9 dias), as vacas foram submetidas aos cinco tratamentos de controle da ovulação: T1 - (n=70): uma injeção de solução fisiológica 48h após a retirada do implante (D 11); T2 - (n=68): 0,75mg de benzoato de estradiol 24h após a retirada do implante (D 10); T3 - (n=70): aplicação de 7,5mg de PGF2a, no dia da retirada (D 9) e 0,75mg de benzoato de estradiol 24h após a retirada do implante (D 10); T4 - (n=70): 500 UI de PMSG na retirada do implante (D 9) e T5 - (n=70): 500mg de GnRH 48h após a retirada dos implante (D 11). Todos os animais foram inseminados 54-56h após a retirada do implante. As taxas de prenhez foram analisadas estatisticamente por regressão logística. Não houve diferença entre os tratamentos (p>0,05) onde: 35,7, 31,4, 22,0, 37,0 e 42,8% para T1, T2, T3, T4 e T5 respectivamente. Entretanto a taxa de prenhez das vacas solteiras foi maior (39,6% - P<0,05) do que aquela das vacas com bezerro ao pé (28,4%). / The objective of this study was to evaluate the effects of ovulation using PMSG, GnRH, Estradiol Benzoate and PGF2a in combination with Crestar â protocol and AI at fixed time. Three hundred forty eight multiparous cows, crossbreed Nelore (Bos taurus indicus) X Charolais (Bos taurus taurus) were divided in two groups: 179 suckling cows with calves between 90 to 120 days of age and 169 non-suckling cows. Those cows received a Crestar® protocol for follicular growth synchronization consisting of a subcutaneous implant with 3mg of norgestomet and 3mg of norgestomet plus 5mg of estradiol valerate injection (day of implant insert). The implant was removed after nine days. Cows were submitted to five treatments for pharmacological control of ovulation and were artificially inseminated at fixed time. After follicular growth synchronization cows received the treatments for control of ovulation: T1 - (n=70): injection of physiological solution 48h after implant removal (D 11); T2 - (n=68): 0.75mg of estradiol benzoate 24h after implant removal (D 10); T3 - (n=70): 7.5mg of PGF2a at same day of implant removal (D 9) and 0.75mg of estradiol benzoate 24h after implant removal (D 10); T4 - (n=70): the cows received 500 UI of PMSG at implant removal (D 9) and T5 - (n=70): cows received 500mg of GnRH 48h after implant removal (D 11). Those cows were artificially inseminated 54-56h after implant removal. Pregnancy rate was analyzed by logistical regression program. There were no differences among treatments (P>0.05) 35.7, 31.4, 22.0, 37.0 and 42.8% for T1, T2, T3, T4 and T5, respectively. However, there was difference (p<0,05) between suckling and non-suckling cows (28.4, 39.6%).