Arthritis is a pathological condition whereby a persistent inflammatory response leads to breakdown of articular cartilage in synovial joints. Cartilage is a specialised avascular tissue containing chondrocytes embedded in an extracellular matrix. The cartilage matrix is composed of collagen to provide strength with aggregated proteoglycan to facilitate hydration. Cartilage has been reported to loose proteoglycans with concordant loss of integrity observed in arthritic disease pathology. Proteoglycans loss from cartilage has also been reported in in vitro models. Application of interleukin-1 (lL-1β) to cartilage in vitro has been demonstrated to increase loss of proteoglycans and modulate production of inflammatory mediators such as Nitric Oxide (NO) and Prostaglandin-E2 (PGE2). NO and PGE2 have also been associated with cartilage breakdown. Other cytokines such as colony stimulating factors (CSFs) may regulate cartilage function. The aim of this study was to select a cartilage explant system and compare the effects of interleukin-1 (lL-1) with those of colony stimulating factors (CSFs) by measuring the production of NO and PGE2 and release of proteoglycans. It was found that IL-1β increased PGE2 and NO production, but not loss of proteoglycans from rat cartilage explants. Granulocyte-CSF (G-CSF) and lL-3 increased production of NO and PGE2, respectively. When combined, IL-1β / Granulocyte-Macrophage (GM-CSF) increased production of PGE2 and G-CSF / IL-1β produced increased proteoglycan loss from explants. The model was then modified by integrating Swiss 3T3 Fibroblasts monolayers with explants. Fibroblasts were initially screened to determine their separate response to these cytokines. Fibroblasts did not release proteoglycans into the culture media, but produced elevated concentrations of NO and PGE2 in response to IL-lβ.·Fibroblast-cartilage co-cultures treated with IL-lβ produced increased NO, PGE2 and proteoglycan release. G-CSF, GM-CSF and IL-3 caused increased levels of PGE2 in co-cultures, however, IL-1β was required to generate significant proteoglycan loss from cartilage explants. Finally, extra-cellular signal related protein kinases I and 2 (ERK 1&2) and p38 intracellular signalling pathways were shown to be involved in IL-1β mediated production of NO fibroblasts and explants. These studies show that IL-1β has increased potential to mediate cartilage breakdown when interacting with other cytokines, such as G-CSF, and other cell types, such as Swiss 3T3 fibroblasts. IL-1β has defined intracellular signalling pathways that may produce a range of responses in cartilage explants and fibroblasts. These studies may relate to production of inflammatory processes and loss of cartilage integrity and function in pathological conditions.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A moringa, Moringa oleifera L., Ã uma Ãrvore da famÃlia Moringaceae, destacando-se pelo uso intensivo das propriedades quÃmicas de suas sementes. O presente trabalho objetivou estabelecer um protocolo bÃsico para a micropropagaÃÃo da moringa. Os Ãpices caulinares utilizados na micropropagaÃÃo foram retirados de plÃntulas germinadas in vitro cultivadas em meio MS. Ãpices caulinares de plantas adultas tambÃm foram isolados e cultivados em meio WPM. A desinfestaÃÃo das sementes e dos Ãpices caulinares de plantas adultas foi realizada com diferentes concentraÃÃes de hipoclorito de sÃdio (NaOCl) sendo que a 0,25 % por 10 minutos, proporcionou os melhores resultados para o estabelecimento das culturas. Os Ãpices caulinares, excisados de plantas cultivadas em meio MS apÃs, 12 dias da germinaÃÃo, foram submetidos a diferentes combinaÃÃes de 6-benzilaminopurina (BAP) (0,0; 0,05; 0,25; 1,25 e 6,25 μM). No meio com 1,25 μM de BAP verificou-se uma taxa de multiplicaÃÃo de 8,9. A fim de maximizar a regeneraÃÃo de plantas in vitro, foram realizados experimentos para avaliar as concentraÃÃes de BAP e de Ãcido indol-3-butÃrico (AIB) no meio de cultivo com diferentes concentraÃÃes e combinaÃÃes. A melhor taxa de regeneraÃÃo e alongamento de brotaÃÃes foi obtida com o meio MS contendo 0,25 μM de BAP e 0,25 μM de AIB. Contudo apÃs o subcultivo neste mesmo meio, observou-se uma reduÃÃo na taxa de multiplicaÃÃo de 8,95 para 5,08. Para os Ãpices provindos de plantas adultas foi realizado um ensaio testandose diferentes meios de cultura. O meio com os sais WPM promoveu um melhor estabelecimento para os Ãpices, visto que os mesmos se apresentavam menos vitrificados se comparados aos demais meios. Definido o meio WPM realizou-se um ensaio com diferentes combinaÃÃes de BAP (0,0; 0,05; 0,25; 1,25 e 6,25 μM). O meio com 6,25 μM promoveu a formaÃÃo de calo seguida da formaÃÃo de brotaÃÃes. Estas foram subcultivadas em meio contendo 0,25 μM de BAP onde se desenvolveram sem a formaÃÃo de brotaÃÃes laterais. / Moringa Moringa oleifera Lam is a tree plant belonging to the family Moringaceae widely used for the chemical properties its seeds. In this work, we attempted to develop a basic protocol for the micropropagation of the plant. Shoot apexes originating from in vitro germinated seedlings on Murashige and Skoog (MS) medium were used as primary explants. Adventitious shoots obtained from field growing trees were also isolated and inoculated on Wood Plant Medium (WPM) for the same purpose. Subjecting the seeds to various regimes and sequences of surface sterilization using sodium hypochlorite (NaOCl) showed that the best regime is the use of 0.25% NaOCl for 10 minutes. In an attempt to micropropagate Moringa, excised adventitious shoots were cultured on MS medium for 12 days, following which they were transferred to MS medium supplemented with varying concentrations (0.0,0.05,1.25 and 6.25uM) of 6-Benzylaminopurine (BAP). Explants subjected to the medium containing 1.25uM BAP demonstrated the highest rate of multiplication of 89%. In order to optimize the regeneration of plants from the primary explants, they were subjected to combinations of BAP and Indol-3-butyric acid at various concentrations. Although the highest rate of regeneration and shoot elongation was obtained when equimolar concentrations of BAP and IBA of 0.25uM was supplemented in an MS medium, there was a sharp decrease in the rate of multiplication from 89.5% to 50.8% when the shoots were sub cultured onto the same medium after 28 days. Subjecting shoot apexes obtained from field growing plants to WPM and MS based medium formulations, it was discovered that WPM promoted better proliferation of the explant compared to all other medium. Using WPM supplemented with different concentrations of BAP (0.0,0.05,0.25,1.25), the medium containing 6.25uM BAP was found to result in formation of callus followed by shoot formation. Transferring the proliferating shoots to a medium containing 0.25uM BAP led to their development without formation of adventitious shoots.

Le guidage axonal est un processus très important dans le développement du cerveau, permettant de lui donner sa structure et son organisation. La communauté scientifique des neurosciences lui porte un intérêt grandissant ces dernières années. Plusieurs outils appartenant au domaine des microtechnologies, que sont la microfluidique et le micropatterning, sont d’une aide importante pour étudier le guidage axonal in vitro. Ils permettent de confiner les neurones et leurs axones et de leur appliquer des gradients de molécules de guidage. Lors de ce travail de thèse, j’ai voulu développer un système pour étudier l’effet de gradients de molécules de guidage sur le guidage axonal. J’ai pour cela testé plusieurs configurations de dispositifs microfluidiques, de micromotifs (micropatterns) et de combinaisons de ces derniers.Nous avons d’abord utilisé deux approches pour isoler les axones de neurones dissociés de leurs somas afin de pouvoir étudier, à haut débit, l’effet de l’environnement moléculaire sur les cônes de croissance des neurones. La première approche consistait à faire pousser des neurones sur des motifs (patterns) de différentes protéines. Elle a permis de montrer leur capacité d’adhésion spécifique sur ces motifs. La seconde consistait à ensemencer des neurones dans un dispositif microfluidique dans lequel, lors de leur pousse, les axones sont séparés des somas par des microcanaux. Nous avons ensuite étudié l’effet, sur les axones, de gradients de molécules de guidage. Pour commencer, nous avons mesuré l’effet de deux molécules de guidage : l’éphrine et la sémaphorine, en cultivant des neurones en présence de gradients patternés de ces deux molécules. Par la suite, nous avons étudié un autre modèle où les neurones sont plus proches de leur environnement in vivo, des explants poussant sur des motifs de laminine contenant un gradient. Pour aider au positionnement de l’explant, nous avons polymérisé des hydrogels. Ensuite, nous avons mis des explants à côté de gradients patternés d’éphrine. Enfin, nous avons cherché à obtenir un gradient soluble de molécules de guidage entretenu sur des temps longs, plus proche des gradients existant in vivo. Dans ce but, nous avons voulu fabriquer un dispositif microfluidique permettant d’appliquer un gradient soluble de molécules de guidage sur des neurones. Pour obtenir un gradient stable dans le temps, nous avons aussi cultivé des neurones à côté de cellules exprimant la nétrine, une autre molécule de guidage. Pour finir, nous avons cultivé des neurones et des glies dissociés pour étudier leurs interactions.L’ensemble de ces recherches n’a pas permis d’obtenir un dispositif fiable pour étudier l’effet de molécules sur la pousse et le guidage des axones. Néanmoins, la configuration consistant en une coculture de neurones à proximité de cellules relargant de la nétrine nous a permis d’obtenir des premiers résultats encourageants. Nous avons ainsi mis au point un ensemble de méthodes qui pourront nous permettre de finaliser le développement d’un système pour étudier le guidage axonal, fonctionnel et efficace. / Axonal guidance is a very important process during brain development, allowing to give it its structure and organization. The neuroscience scientific community has a growing interest in it during the last years. Several tools belonging to the field of microtechnologies, microfluidics and micropatterning are of important help to study axonal guidance in vitro. They allow to confine neurons and their axons and to apply gradients of guidance molecules. During this thesis, my goal was to develop a system to study the effect of guidance molecules gradients on axonal guidance. For that, I tested several configurations of microfluidic devices, micropatterns and combinations of both.First, we used two approaches to isolate dissociated neurons axons from their somas. Our goal was to study the effect of the molecular environment on neurons growth cones, with a high throughput. The first approach consisted in growing neurons on different proteins patterns. It also allowed to show their capacity to adhere on these patterns. The second one consisted in seeding neurons in a microfluidic device in which, during their growth, axons are separated from somas by microchannels. Then we studied the effect, on the axons, of guidance molecules gradients. To begin, we measured the effect of two guidance molecules: ephrin and semaphorin, by culturing neurons in the presence of patterned gradients of these two molecules. After that, we studied another model where neurons are closer from their environment in vivo, explants growing on laminin patterns containing a gradient. To help the explant positioning, we polymerized hydrogels. Then, we put explants next to patterned gradients of ephrin. Finally, we tried to obtain a soluble gradient of guidance molecules, over a long period of time (days), closer to existing gradients in vivo. In that goal, we wanted to build a microfluidic device enabling the application of a soluble gradient of guidance molecules on neurons. To obtain a constant gradient, we also cultured neurons next to cells expressing netrin, another guidance molecule. Finally, we cultured dissociated neurons and glial cells to study their interactions.All these experiments did not allow to obtain a reliable device to study the effect of molecules on axons growth and guidance. Nevertheless, the configuration consisting in a coculture of neurons next to cells releasing netrin allows us to obtain promising preliminary results. We thus drew up a group of methods that will enable us to finalize the development of a system to study axonal guidance, functional and efficient.

Le développement de nouvelles stratégies vaccinales et le traitement de nombreuses pathologies dermatologiques font partis des enjeux majeurs des années à venir. L'étude et la compréhension des mécanismes de réponses immunitaires cutanées sont ainsi essentielles. Les cellules de Langerhans épidermiques et les cellules dendritiques dermiques jouent un rôle central dans l'immunité adaptative spécifique à un pathogène, et dans l'immunité innée, de par leur fonction de présentation des antigènes (APC), mais également d'activateur et de régulateur de l'action des autres cellules immunitaires. Durant ce travail de recherche, nous avons mis au point et testé plusieurs modèles d'étude des mécanismes de l'immunité cutanée. Un premier modèle de " souris humanisées " a été mis au point, à partir de souris immunodéprimées NSG HLA-A2 tg et de greffes de peau humaine. Une fois le modèle techniquement mis au point, nous avons vérifié de la conservation et de la fonctionnalité des APC. La faible conservation des APC au-delà de plusieurs semaines, nous a conduit à mettre au point un deuxième modèle de " souris humanisées " qui bénéficiaient d'injections intra-hépatiques de progéniteurs hématopoïétiques humains. La colonisation en APCs cutanées humaines n'étant pas suffisante, il a fallu injecter aux souris des APCs provenant du même sang que les progéniteurs hématopoïétiques afin d'obtenir une réponse immunitaire suffisante. La faible concentration en APC cutanées de ce modèle, la lourdeur et le coût de mise au point sont des limites non négligeables pour l'utilisation de ce support d'étude. Ces souris humanisées sont d’excellents modèles d’étude, mais ils présentent chacun leurs limites. Lorsque cela est possible il est ainsi plus simple d’utiliser des explants cutanés frais. Nous avons quantifié les APC cutanées en fonction du site d’origine (abdomen, seins…) et de l’âge du donneur de ces explants issus de chirurgie plastique. Sur les 21 explants testés, nous n’avons pas retrouvé de différence significative dans la concentration en APC quel que soit le site et l’âge du donneur. Ces 3 modèles offrent des possibilités d’étude des mécanismes de l’immunité cutanée, nous les utilisons actuellement au sein du laboratoire pour des tests vaccinaux, et pour l’étude du rôle de l’IL-32 produite par les kératinocytes impliqués dans l’activation des cellules de Langerhans. / The development of new vaccination strategies and the treatment of many dermatological pathologies are among the major challenges of the years to come. The study and understanding of the mechanisms of cutaneous immune responses are thus essential. Epidermal Langerhans cells and dermal dendritic cells play a central role in pathogen-specific adaptive immunity, and in innate immunity, by their antigen presenting function (APC), but also as an activator and regulator of the action of other immune cells.During this research, we developed and tested several models for the study of the mechanisms of cutaneous immunity. A first model of "humanized mice" was developed from immunosuppressed NSG HLA-A2 tg mice and human skin grafts. Once the model was technically developed, we verified the conservation and functionality of the APCs. The low PCA retention beyond several weeks, led us to develop a second model of "humanized mice" that benefited from intrahepatic injections of human hematopoietic progenitors. Since colonization in human skin APCs was not sufficient, it was necessary to inject the APCs from the same blood as the hematopoietic progenitors to obtain a sufficient immune response. The low concentration of skin APCs in this model, the cumbersomeness and the cost of development are not insignificant limits for the use of this study support.These humanized mice are excellent models of study, but they each have their limitations. Where possible, it is thus easier to use fresh skin explants. We quantified the cutaneous APCs according to the site of origin (abdomen, breasts ...) and the age of the donor of these explants resulting from plastic surgery. Of the 21 explants tested, there was no significant difference in APC concentration at any site and age of the donor.These three models offer possibilities for studying the mechanisms of skin immunity, we are currently using them in the laboratory for vaccine tests, and for studying the role of IL-32 produced by the keratinocytes involved in l activation of Langerhans cells.

La performance du couple prothétique tête fémorale/cupule impacte fortement la durée de vie d’une prothèse totale de hanche. Les céramiques affichent une excellente combinaison de propriétés de biocompatibilité, mécaniques et tribologiques. Les composites ZTA formés d’une matrice d’alumine renforcée en zircone sont optimisés pour offrir le meilleur compromis de dureté, stabilité chimique, ténacité et résistance mécanique. La prédiction de la performance de ces matériaux doit prendre en compte les trois principaux modes de dégradation identifiés en configuration céramique/céramique (CoC) : le choc avec décoaptation, le frottement et le vieillissement à basse température. Ces modes sont susceptibles d’être simulés in vitro à partir de tests expérimentaux, respectivement, sur une machine de chocs, un simulateur de marche et en autoclave. L’objectif de ce projet est de combiner ces tests afin de mieux résoudre l’équation in vitro = in vivo. Les chocs dominent les processus de dégradation avec la formation de bandes d’usure. Le matériau testé a montré une excellente résistance au vieillissement. La dégradation induite par le test d’usure standard sur simulateur de marche est négligeable et pose la question de la pertinence de ce test pour les couples CoC. L’importance de la prise en compte des chocs dans les tests expérimentaux a été confortée grâce à une analyse d’explants. Une transformation de phase de la zircone a été mécaniquement induite dans les bandes d’usure créées in vitro et in vivo. Un mécanisme de dégradation a été suggéré au sein de ces bandes. La réponse du matériau est en partie déterminée par la force appliquée au cours des chocs. / The performance of the prosthetic couple (femoral head/cup) influences strongly the lifetime of a total hip prosthesis. Ceramics exhibit an excellent combination of biocompatibility, mechanical resistance and tribological properties. Zirconia toughened alumina (ZTA) composites are made of an alumina matrix and well dispersed zirconia particles. They are tailored in order to offer the best compromise of hardness, chemical stability, toughness and mechanical resistance. The prediction of the performance of such materials must take into consideration the three main sources of degradation identified for Ceramic-on-Ceramic (CoC) bearings: shocks due to micro-separation, friction and low temperature degradation (LTD). Experimental tests on a shock machine, a hip-walking simulator and in an autoclave are able to simulate in vitro each of these sources of degradation, respectively. The aim of the project is to combine these tests in order to solve better the equation in vitro = in vivo. Shocks dominate the processes of degradation with the formation of wear stripes. The tested material showed an excellent resistance to LTD. The damage induced by the standard wear test on a hip-walking simulator is negligible, which raises the question about the relevance of this test for CoC couplings. An analysis of explants confirmed the decisive role of shocks in experimental tests. Zirconia phase transformation was mechanically induced within both in vitro and in vivo wear stripes. A degradation mechanism was suggested within the stripes. The material response is partly determined by the force applied during shocks.

L'excellente biocompatibilité et les remarquables propriétés mécaniques font des biocéramiques une des meilleures options pour les prothèses totales de hanche (PTH). Jusqu'à récemment, le seul dispositif qui permettait d'estimer la durée de vie des PTH était le simulateur de marche. Les PTH ne sont pas uniquement sollicitées en fatigue mais aussi en chocs. Dans ce travail nous avons évalué la durabilité des prothèses de hanche en biocéramique testées sur une machine de chocs. Deux couples tête/cupule ont été testés : alumine/alumine et composite alumine-zircone/alumine. Les essais se sont déroulés à sec et en solution avec une inclinaison de 45° qui correspond à la position anatomique standard de cette articulation. Des bandes d'usure apparaissent sur la tête. Leur localisation et leur rugosité sont similaires à celles retrouvées ex vivo. La machine de chocs reproduit les mécanismes de dégradation des PTH in vivo. L'influence du vieillissement sur la résistance aux chocs a été étudiée. Afin de mieux comprendre la transformation de phase in vivo de la zircone, une grande série d'explants a été analysée. Aucune corrélation entre la transformation de phase et l'augmentation de la rugosité n'a été observée. La transformation de phase de la zircone serait liée aux processus de fabrication (polissage, usinage..). Ce travail constitue une base de données pour les couples zircone/UHMWPE. De la même façon, l'analyse d'explants composites permettrait de valider nos résultats in vitro pour les composites.

Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiami lelijos (Lilium L.) morfogenezės indukcijos in vitro tyrimų duomenys. Darbo objektas: lelijų (Lilium L.) veislės ˈRed Beautyˈ, ˈWiener Blutˈ, ˈSėkmėˈ, ˈNoLimitˈ. Darbo metodai: lelijų (Lilium L.) izoliuoti eksplantai – svogūnėlių žvyneliai – auginti modifikuotoje MS maitinamojoje terpėje, kurios makro druskų koncentracija sumažinta iki 0,5 pradinio koncentracijos lygio, su skirtingais augimo reguliatorių deriniais. Vertintas mikrosvogūnėlių ir šaknų susiformavimo dažnis (%) bei mikrosvogūnėlių kiekis iš eksplanto (vnt.). Darbo rezultatai. Lelijų mikrosvogūnėlių formavimosi dažnį in vitro lemia augimo reguliatorių ir genotipo sąveika. Tos pačios lelijų veislės pasižymi skirtinga regeneracine galia, priklausomai nuo maitinamosios terpės sudėties. Iš tirtų veislių didžiausia regeneracine galia pasižymėjo veislės ˈRed Beautyˈizoliuoti eksplantai. Veislių ˈWiener Blutˈ ir ˈNo Limitˈ mikrosvogūnėlių regeneracijai in vitro maitinamąją terpę tikslinga papildyti 1,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D deriniu. Augimo reguliatorių derinys 2,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D labiausiai skatino veislės ˈRed Beautyˈ mikrosvogūnėlių susiformavimą. Veislės ˈSėkmėˈ izoliuoti eksplantai mikrosvogūnėlius formavo intensyviau augimo reguliatorių derinio 3,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D poveikyje. Intensyviausiai šaknis in vitro formavo veislių ˈRed Beautyˈ ir ˈWiener Blutˈ mikrosvogūnėliai. / The master work presents the results of increasing of lilies induction of morphogenesis in vitro studies. Object of the work: lilies (Lilium L.) cultivars of ˈRed Beautyˈ, ˈWiener Blutˈ, ˈSėkmėˈ, ˈNo Limitˈ. Methods of the work: Explants were cultured on the MS regeneration medium supplemented with macro salt concentration which is reduced to 0.5 of the initial concentration level, with different combinations of growth regulators. Evaluated for micro bulbs and root formation rate (%) and micro bulbs quantity of explant (units). The results of work. Lilies microbulbs formation in vitro is determined by the frequency of growth regulators and genotype interactions. The same varieties of lilies are characterized by different regenerative capacity, depending on the composition of the nutrient medium. Among investigated cultivars the highest morphogenic potention distinguished isolated explants of ˈRed Beautyˈ. For micropropagation of cultivars ˈWiener Blutˈ and ˈNo Limitˈ most suitable is medium supplement by 1,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D combination. Growth regulators combination 2,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D influenced cultivar ˈRed Beautyˈ. All isolated explants of cultivar ˈSėkmėˈ formed microbulbs on medium with 3,0 mg l-1 BAP + 0,3 mg l-1 2,4-D. The most intensive roots in vitro formed microbulbs varieties of ˈRed Beautyˈ and ˈWiener Blutˈ.

L’excellente biocompatibilité et les remarquables propriétés mécaniques font des biocéramiques une des meilleures options pour les prothèses totales de hanche (PTH). Jusqu’à récemment, le seul dispositif qui permettait d’estimer la durée de vie des PTH était le simulateur de marche. Les PTH ne sont pas uniquement sollicitées en fatigue mais aussi en chocs. Dans ce travail nous avons évalué la durabilité des prothèses de hanche en biocéramique testées sur une machine de chocs. Deux couples tête/cupule ont été testés : alumine/alumine et composite alumine-zircone/alumine. Les essais se sont déroulés à sec et en solution avec une inclinaison de 45° qui correspond à la position anatomique standard de cette articulation. Des bandes d’usure apparaissent sur la tête. Leur localisation et leur rugosité sont similaires à celles retrouvées ex vivo. La machine de chocs reproduit les mécanismes de dégradation des PTH in vivo. L’influence du vieillissement sur la résistance aux chocs a été étudiée. Afin de mieux comprendre la transformation de phase in vivo de la zircone, une grande série d’explants a été analysée. Aucune corrélation entre la transformation de phase et l’augmentation de la rugosité n’a été observée. La transformation de phase de la zircone serait liée aux processus de fabrication (polissage, usinage..). Ce travail constitue une base de données pour les couples zircone/UHMWPE. De la même façon, l’analyse d’explants composites permettrait de valider nos résultats in vitro pour les composites. / Because of the excellent biocompatibility and great mechanical properties, bioceramics are the best choice for total hip replacement (THR). When hip is replaced, a microseparation could appear between the head and the cup leading to a shock limiting the lifetime of ceramics. Classic tests on hip simulator partly allow estimating the lifetime of ceramics.Ceramics materials are subjected to shocks. In this work we evaluated the reliability of bioceramics for hip replacement tested in a shock machine. Two bearing surfaces were studied (head/cup): alumina/alumina and composite alumina-zirconia/alumina. Tests were carried out in dry and in solution with an inclination of 45° to respect the standard anatomical position. Femoral heads exhibited two wear stripes of similar location and roughness to those found ex vivo. Shock device reproduces in vivo degradation. The influence of aging on the shocks degradation was also studied for composites alumina-zirconia. Artificial ageing did not affect the shock-induced wear resistance. Further analysis of retrieved composite would be interesting for comparison of experimental results.Also, ex vivo analyses were made. A large number of retrieved zirconia femoral heads were analyzed in order to understand the phase transformation of zirconia in vivo. Any correlation between the phase transformation and the increase in roughness was found. We might suggest that phase transformation is activated during the fabrication process (sintering, polishing, machining) and is not accelerated in vivo.

Darbo objektas – Alyvmedinių (Oleaceae) šeimos uosinių (Fraxinus) genties medis - paprastasis uosis (Fraxinus excelsior L.). Darbo tikslas – Išauginti in vitro paprastųjų uosių (Fraxinus excelsior L.), besiskiriančių džiūvimo laipsniu, palikuonis ir atlikti genetinės įvairovės įvertinimą. Darbo metodai – regeneravusių mikroūglių įvertinimas, palikuonių DNR nustatymas. Darbo rezultatai. Atlikus tyrimus įvertintos paprastojo uosio išauginimo in vitro sąlygos ir nustatyta genetinė įvairovė. Eksplantų sterilinimui tikslinga naudoti aseptinių tirpalų kombinaciją su „ACE“ ir AgNO3 0,2 proc., kad užtikrinti gyvybingų ir be užkrato eksplantų išlikimą. Aktyviausiai mikroūgliai regeneravo WPM (Woody Plant Medium) terpėje, kurios pH 5,0. Gyvybingiausi regenerantai atitinka mažiausiai pažeistą uosį pagal džiūvimo laipsnį. Sveikiausio genotipo uosių ex vitro sąlygomis adaptavosi 92 proc., labiausiai pažeisto - 53 proc. Tirtų dviejų paprastojo uosio individų turėjo skirtingus APPD fenotipus su naudotais dviem informatyviais pradmenimis. / The research object. – Oleaceae (Oleaceae) family of Ash (Fraxinus) tree of the genus - ash (Fraxinus excelsior L.). The aims of the study – Grown in vitro for common ash (Fraxinus excelsior L.), distinguished by the degree of drying, and a descendant of the genetic diversity assessment. Methods – regenerant microshoots evaluation of DNA detection. The results. After the tests evaluated in plain ash grown in vitro conditions and the genetic diversity. For explants sterile appropriate to use a combination of aseptic solutions with ACE and 0.2 percent AgNO3. to ensure the viability and survival of the explants without contamination. The most active shoots regenerate WPM (Woody Plant Medium) medium with pH 5.0. The most lively regenerants the least damaged ash according to the degree of drying. Healthiest genotype ashes of ex vitro specialized 92 percent. The most damaged - 53 percent. The results from two-ordinary ash individuals had different phenotypes APPD to use two informative primers.

Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiami sėjamosios kanapės eksplanto tipo ir maitinamosios terpės sudėties poveikio mofogenezei in vitro tyrimų rezultatai. Darbo objektas – sėjamosios kanapės stiebo ir lapkočio segmentai. Darbo metodai: Sėjamosios kanapės eksplantai auginti MS, B5 ir White maitinamosiose terpėse, papildytose įvairiais augimo reguliatorių deriniais. Vertintas kaliaus susiformavimo dažnis (%), ūglių susiformavimo dažnis (%) ir šaknų susiformavimo dažnis (%). Darbo rezultatai. Sėjamosios kanapės morfogenezės procesas didžiąja dalimi priklauso nuo bazinės maitinamosios terpės sudėties. Izoliuoti stiebo segmentai intensyviausiai kalių indukavo bazinėje B5 maitinamojoje terpėje, o lapkočio segmentai − B5 maitinamojoje terpėje, papildytoje 1,0 mg l-1 TDZ + 0,5 mg l-1 NAR arba 1,0 mg l-1 KIN + 0,5 mg l-1 NAR. Pridėtinių ūglių formavimasis intensyviausiai vyko bazinėje B5 maitinamojoje terpėje, papildytoje 1,0 mg l-1 TDZ + 0,5 mg l-1 NAR (iš stiebo segmento audinių) ir 1,0 mg l-1 KIN + 0,5 mg l-1 NAR (iš lapkočio audinių). Izoliuoti stiebo segmentai didžiausiu dažniu šaknis formavo B5 maitinamojoje terpėje, papildytoje 1,0 mg l-1 KIN + 0,5 mg l-1 NAR, o lapkočio segmentai − 1,0 mg l-1 TDZ + 0,5 mg l-1 NAR. Tirti stiebo segmentai pasižymėjo didesne geba formuoti kalių, pridėtinius ūglius ir šaknis nei izoliuoti lapkočio segmentai. / The master work presents the effect of explants type and medium composition on morphogenesis in vitro of hemp. Object of the research – stem segments and leafstalk of hemp. Research methods. To study hemp morphogenesis in vitro hypocotyls and leafstalk were used as explants. Explants were placed on MS, B5 and White media supplemented with different combinations of growth regulators. The percentage of callus formation, shoot induction and root formation were evaluated. Research results. The current study indicates that there is strong medium composition effect on morphogenesis in vitro of hemp. From tested media most intensive callus genesis was observed on B5 medium, but from leafstalk – on B5 medium with 1.0 mg l-1 TDZ + 0.5 mg l-1 NAA or 1.0 mg l-1 KIN + 0.5 mg l-1 NAA. The growth regulators combination 1.0 mg l-1 TDZ + 0.5 mg l-1 NAA on B5 media was the most suitable for stem segments shoots induction while growth regulators combination 1.0 mg l-1 KIN + 0.5 mg l-1 NAA promoted the highest frequency of shoots induction from leafstalk segments. The highest root formation frequency was observed on the same basal medium supplemented with 1.0 mg l-1 KIN + 0.5 mg l-1 NAA from stem segments, but from leafstalk – on B5 medium with 1.0 mg l-1 TDZ + 0.5 mg l-1 NAA. Generally, the stem segments exhibited a higher morphogenic response than leafstalk of hemp.