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Análise in vitro da proliferação celular e produção de mediadores inflamatórios por células da conjuntiva estimuladas por materiais utilizados na confecção de próteses oculares /Silva, Emily Vivianne Freitas da. January 2015 (has links)
Orientador: Marcelo Coelho Goiato / Coorientador: Sandra Helena Penha de Oliveira / Banca: Aimée Guiotti / Banca: Rafael Consani / Resumo: A prótese ocular é utilizada para a reabilitação estética e funcional da ausência ocular. O conhecimento da sua biocompatibilidade é importante para a utilização sem reações danosas aos usuários. O objetivo neste estudo foi avaliar a citotoxicidade de materiais utilizados na confecção de próteses oculares, por meio da análise da proliferação celular e da produção de citocinas pró-inflamatórias e de proteínas de matriz extracelular por células da conjuntiva humana. Inicialmente, foi analisada a influência de diferentes períodos de formação e de exposição dos extratos de resina acrílica branca (N1), termopolimerizada em água aquecida, sobre culturas de células da conjuntiva. Foram confeccionados 24 corpos de prova em resina, sendo 12 para cada período de exposição de células da conjuntiva aos extratos da resina testada (24 e 72 horas). Após a formação dos extratos por 24, 48 e 72 horas de imersão em meio de cultura e, 24 horas em água seguido de 24 horas de imersão em meio, os ensaios propostos foram realizados (n=3). Em seguida, foi avaliado o efeito citotóxico de diferentes métodos de polimerização de resina acrílica N1 em células da conjuntiva. Foram confeccionados 9 corpos de prova em resina (n=3), termopolimerizados em água aquecida, por energia de microondas ou ativados quimicamente, utilizados para a formação dos extratos dessas resinas. Os extratos foram obtidos após 72 horas de imersão dos corpos de prova em meio de cultura e, então, expostos às células da conjuntiva por 72 horas para a realização dos ensaios propostos. Adicionalmente, foi analisada a influência da presença do pigmento acrílico na confecção da prótese de resina acrílica N1, termopolimerizada em água aquecida... / Abstract: Ocular prosthesis is a treatment option for esthetical and functional rehabilitation of ocular absence. The knowledge of ocular prosthesis material's biocompatibility is important to ensure a safe use in patients. The aim of this study was to evaluate the cytotoxic effect of ocular prosthesis materials, through the analysis of the cell proliferation, and the production of proinflammatory cytokines and extracellular matrix proteins by a human conjunctival cell line. Initially, the influence of different preparation and exposition periods of eluates from heat-polymerized ocular prosthesis N1 color acrylic resin in human conjunctival cell line was evaluated. A total of 24 acrylic resin samples were manufactured and divided into 2 groups, according to the eluate exposition period to conjunctival cell line (24 and 72 hours). Eluates corresponding to 24, 48 and 72 hours of resin sample immersion in medium and, 24 hours of resin sample immersion in water followed by 24 hours of immersion in medium, were prepared (n=3) for the proposed tests. Then, the cytotoxic effect of different polymerization methods of ocular prosthesis N1 color acrylic resin was analyzed. A total of 9 acrylic resin samples were manufactured (n=3), according to the polymerization method: heat-polymerization in water bath, polymerization by microwave energy and auto-polymerization. Eluates corresponding to 72 hours of resin sample immersion in medium were prepared for proposed tests and exposed to conjunctival cell line for 72 hours. Additionally, the influence of pigment incorporation on the cytotoxicity of heat-polymerized ocular prosthesis N1 color acrylic resin was evaluated... / Mestre
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Análise in vitro da proliferação celular e produção de mediadores inflamatórios por células da conjuntiva estimuladas por materiais utilizados na confecção de próteses ocularesSilva, Emily Vivianne Freitas da [UNESP] 07 April 2015 (has links) (PDF)
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000847893.pdf: 1252256 bytes, checksum: 1fd716895e2784e4359da8659fd760e0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A prótese ocular é utilizada para a reabilitação estética e funcional da ausência ocular. O conhecimento da sua biocompatibilidade é importante para a utilização sem reações danosas aos usuários. O objetivo neste estudo foi avaliar a citotoxicidade de materiais utilizados na confecção de próteses oculares, por meio da análise da proliferação celular e da produção de citocinas pró-inflamatórias e de proteínas de matriz extracelular por células da conjuntiva humana. Inicialmente, foi analisada a influência de diferentes períodos de formação e de exposição dos extratos de resina acrílica branca (N1), termopolimerizada em água aquecida, sobre culturas de células da conjuntiva. Foram confeccionados 24 corpos de prova em resina, sendo 12 para cada período de exposição de células da conjuntiva aos extratos da resina testada (24 e 72 horas). Após a formação dos extratos por 24, 48 e 72 horas de imersão em meio de cultura e, 24 horas em água seguido de 24 horas de imersão em meio, os ensaios propostos foram realizados (n=3). Em seguida, foi avaliado o efeito citotóxico de diferentes métodos de polimerização de resina acrílica N1 em células da conjuntiva. Foram confeccionados 9 corpos de prova em resina (n=3), termopolimerizados em água aquecida, por energia de microondas ou ativados quimicamente, utilizados para a formação dos extratos dessas resinas. Os extratos foram obtidos após 72 horas de imersão dos corpos de prova em meio de cultura e, então, expostos às células da conjuntiva por 72 horas para a realização dos ensaios propostos. Adicionalmente, foi analisada a influência da presença do pigmento acrílico na confecção da prótese de resina acrílica N1, termopolimerizada em água aquecida... / Ocular prosthesis is a treatment option for esthetical and functional rehabilitation of ocular absence. The knowledge of ocular prosthesis material's biocompatibility is important to ensure a safe use in patients. The aim of this study was to evaluate the cytotoxic effect of ocular prosthesis materials, through the analysis of the cell proliferation, and the production of proinflammatory cytokines and extracellular matrix proteins by a human conjunctival cell line. Initially, the influence of different preparation and exposition periods of eluates from heat-polymerized ocular prosthesis N1 color acrylic resin in human conjunctival cell line was evaluated. A total of 24 acrylic resin samples were manufactured and divided into 2 groups, according to the eluate exposition period to conjunctival cell line (24 and 72 hours). Eluates corresponding to 24, 48 and 72 hours of resin sample immersion in medium and, 24 hours of resin sample immersion in water followed by 24 hours of immersion in medium, were prepared (n=3) for the proposed tests. Then, the cytotoxic effect of different polymerization methods of ocular prosthesis N1 color acrylic resin was analyzed. A total of 9 acrylic resin samples were manufactured (n=3), according to the polymerization method: heat-polymerization in water bath, polymerization by microwave energy and auto-polymerization. Eluates corresponding to 72 hours of resin sample immersion in medium were prepared for proposed tests and exposed to conjunctival cell line for 72 hours. Additionally, the influence of pigment incorporation on the cytotoxicity of heat-polymerized ocular prosthesis N1 color acrylic resin was evaluated...
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Avaliação da integração de implantes de silicone com superfícies lisa, texturizada e de poliuretano em cavidades anoftálmicas evisceradas de coelhosAbreu, Cristiano Ricardo de [UNESP] 26 May 2014 (has links) (PDF)
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000816204.pdf: 522472 bytes, checksum: 25779cbe8f027d47edb97dfc753e8174 (MD5) / Objetivo: Visando acrescentar novos conceitos na área da reconstrução da cavidade anoftálmica e utilizando conhecimento adquirido na Cirurgia Plástica, o presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a integração dos implantes hemi-esféricos de silicone em gel coesivo com três diferentes tipos de superfície (lisa, texturizada e de poliuretano), empregados para devolução do volume perdido de cavidades evisceradas de coelhos. Método: Foram utilizados 45 coelhos albinos, machos, espécie Orictolagus cuniculus, que tiveram o olho direito eviscerado, sendo feita a colocação de implantes hemi-esféricos de silicone em gel coesivo na cavidade orbitária. Os implantes diferiram entre si pelos revestimentos, que foram de três tipos: liso (Grupo (GI)), texturizado (GII) ou de poliuretano (GIII). Cada grupo foi constituído por 15 animais, sendo que 5 animais de cada grupo foram sacrificados 7 (M7), 30 (M30) ou 90 (M90) dias após a cirurgia de evisceração e colocação do implante. Foram realizadas avaliações clínica, laboratorial (exame de creatinina sérica e de 2,4 toluenodiamina - TDA), tomográfica usando o programa OsiriX® (posição e área do implante), histológica e morfométrica (medida da espessura da pseudocápsula e da celularidade). Os resultados obtidos foram submetidos à avaliação estatística comparando-se os grupos com diferentes tipos de revestimentos dos implantes, nos três momentos de sacrifício. Resultados: Houve boa evolução em todos os grupos experimentais, não se observando extrusão ou processos infecciosos ao longo do período experimental. A avaliação histológica mostrou que os implantes de superfície lisa (GI), texturizada (GII) ou de poliuretano (GIII) tiveram boa integração tecidual, com maior reação inflamatória e espessura da pseudocápsula nos implantes de GIII. No exame tomográfico, os implantes de GI mudaram mais de posição e foram evidenciadas deformidades nos ... / Purpose: In order to add new concepts in the area of the anophthalmic socket reconstruction and using knowledge acquired in Plastic Surgery, this study was developed to evaluate the integration of hemi-spherical cohesive gel silicone implants coated by three different surfaces (smooth, textured and polyurethane) used to replace the missed volume in eviscerated cavities of rabbits. Methods: Forty-five albino male rabbits of the specie Oryctolagus cuniculus had their right eye eviscerated and hemi-spherical cohesive gel silicone implants were inserted in the orbital socket to replace volume. The implants were coated by three different types of surfaces: smooth (Group (IG)), textured (GII) or polyurethane (GIII). Each group was composed by 15 animals and five of them in each group were sacrificed seven (M7), 30 (M30) and 90 (M90) days after evisceration surgery and implant placement. Clinical and laboratorial assessments (creatinine test and 2,4 toluene diamine- TDA), histologic and morphometric exam (measurement of the thickness of pseudocapsule and cellularity) and tomographic (CT scan) evaluation using the OsiriX program (position and area of the implant) were performed. The results were analyzed statistically comparing groups that differ by the coating of implants in the three moments of sacrifice. Results: There was good evolution in all experimental groups and extrusion or infectious processes was not observed throughout the experimental period. Histological evaluation showed that implants with a smooth (GI), textured (GII) or polyurethane surface (GIII) had good tissue integration and GIII implants showed greater inflammatory reaction and thickness of the pseudocapsule. On CT scan, the GI implants changed over position and deformities were observed in the GIII implants. Using OsiriX® program was possible to evaluate the area of the implants. The 2,4 TDA was not found in any of the experimental groups. Conclusion: Cohesive gel ...
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Avaliação da integração de implantes de silicone com superfícies lisa, texturizada e de poliuretano em cavidades anoftálmicas evisceradas de coelhos /Abreu, Cristiano Ricardo de. January 2014 (has links)
Orientador: Silvana Artioli Schellini / Banca: Mariangela Marques / Banca: Suzana Mayayoshi / Banca: Giovanni Viana / Banca: Aristides Palhares / Resumo: Objetivo: Visando acrescentar novos conceitos na área da reconstrução da cavidade anoftálmica e utilizando conhecimento adquirido na Cirurgia Plástica, o presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a integração dos implantes hemi-esféricos de silicone em gel coesivo com três diferentes tipos de superfície (lisa, texturizada e de poliuretano), empregados para devolução do volume perdido de cavidades evisceradas de coelhos. Método: Foram utilizados 45 coelhos albinos, machos, espécie Orictolagus cuniculus, que tiveram o olho direito eviscerado, sendo feita a colocação de implantes hemi-esféricos de silicone em gel coesivo na cavidade orbitária. Os implantes diferiram entre si pelos revestimentos, que foram de três tipos: liso (Grupo (GI)), texturizado (GII) ou de poliuretano (GIII). Cada grupo foi constituído por 15 animais, sendo que 5 animais de cada grupo foram sacrificados 7 (M7), 30 (M30) ou 90 (M90) dias após a cirurgia de evisceração e colocação do implante. Foram realizadas avaliações clínica, laboratorial (exame de creatinina sérica e de 2,4 toluenodiamina - TDA), tomográfica usando o programa OsiriX® (posição e área do implante), histológica e morfométrica (medida da espessura da pseudocápsula e da celularidade). Os resultados obtidos foram submetidos à avaliação estatística comparando-se os grupos com diferentes tipos de revestimentos dos implantes, nos três momentos de sacrifício. Resultados: Houve boa evolução em todos os grupos experimentais, não se observando extrusão ou processos infecciosos ao longo do período experimental. A avaliação histológica mostrou que os implantes de superfície lisa (GI), texturizada (GII) ou de poliuretano (GIII) tiveram boa integração tecidual, com maior reação inflamatória e espessura da pseudocápsula nos implantes de GIII. No exame tomográfico, os implantes de GI mudaram mais de posição e foram evidenciadas deformidades nos ... / Abstract: Purpose: In order to add new concepts in the area of the anophthalmic socket reconstruction and using knowledge acquired in Plastic Surgery, this study was developed to evaluate the integration of hemi-spherical cohesive gel silicone implants coated by three different surfaces (smooth, textured and polyurethane) used to replace the missed volume in eviscerated cavities of rabbits. Methods: Forty-five albino male rabbits of the specie Oryctolagus cuniculus had their right eye eviscerated and hemi-spherical cohesive gel silicone implants were inserted in the orbital socket to replace volume. The implants were coated by three different types of surfaces: smooth (Group (IG)), textured (GII) or polyurethane (GIII). Each group was composed by 15 animals and five of them in each group were sacrificed seven (M7), 30 (M30) and 90 (M90) days after evisceration surgery and implant placement. Clinical and laboratorial assessments (creatinine test and 2,4 toluene diamine- TDA), histologic and morphometric exam (measurement of the thickness of pseudocapsule and cellularity) and tomographic (CT scan) evaluation using the OsiriX program (position and area of the implant) were performed. The results were analyzed statistically comparing groups that differ by the coating of implants in the three moments of sacrifice. Results: There was good evolution in all experimental groups and extrusion or infectious processes was not observed throughout the experimental period. Histological evaluation showed that implants with a smooth (GI), textured (GII) or polyurethane surface (GIII) had good tissue integration and GIII implants showed greater inflammatory reaction and thickness of the pseudocapsule. On CT scan, the GI implants changed over position and deformities were observed in the GIII implants. Using OsiriX® program was possible to evaluate the area of the implants. The 2,4 TDA was not found in any of the experimental groups. Conclusion: Cohesive gel ... / Doutor
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Influência da rugosidade de superfície e ação de diferentes desinfetantes na formação de biofilme em resina acrílica para prótese ocular e sua biocompatibilidade em contato com células da conjuntiva humana / Influence of surface roughness and action of different disinfectants on the formation of biofilm in acrylic resin for ocular prosthesis and their biocompatibility in contact with cells human conjunctiva cellsAndreotti, Agda Marobo [UNESP] 31 August 2017 (has links)
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TESE DOUTORADO AGDA MAROBO ANDREOTTI.pdf: 5621947 bytes, checksum: ad2de971e6e9dcd6b35700dd4f7bc0d1 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-10-23T18:36:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2017-08-31 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O controle da formação de biofilme é essencial para manter a saúde da cavidade anoftálmica dos portadores de prótese ocular. As propriedades físicas da resina acrílica, como a sua rugosidade, podem interferir na adesão de microrganismos nas próteses e na formação de biofilmes. Sendo assim, é necessário utilizar soluções de limpeza eficazes e que não causem irritação tecidual na conjuntiva ocular. O objetivo desse trabalho foi verificar a influência da rugosidade de superfície da resina acrílica utilizada na confecção de próteses oculares na formação de biofilme bacteriano, bem como avaliar a eficácia antimicrobiana e citotoxicidade de diferentes soluções para desinfecção de próteses oculares. Para a análise da rugosidade, corpos de prova de resina acrílica foram confeccionados e divididos em 5 grupos de acordo com a granulação de lixa de polimento utilizada: 120, 400, 800, 1200 e 1200S (lixa + sílica). A rugosidade dos corpos de prova foi mensurada por meio de perfilômetro e imagens de Microscopia de Força Atômica foram obtidas para cada grupo. O crescimento das espécies Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis sobre os corpos de prova foi avaliado após 4 e 24h, por meio da contagem das Unidades Formadoras de Colônia (UFC)/mL. O efeito dos seguintes tratamentos: soro fisiológico, sabão neutro, clorexidina 4%, pastilhas efervescentes Efferdent®, triclosan 1% e citronela sobre biofilme formado sobre os corpos de prova de resina acrílica também foi avaliado por meio da determinação do número de UFC/mL. A citotoxicidade dos agentes antimicrobianos foi avaliada por meio dos testes de MTT e Neutral Red, após tratamento dos corpos de prova, diariamente, por 1, 7, 15, 30, 60 e 90 dias com as soluções já citadas, sendo avaliados ao fim de cada período. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística adequada, considerando se provinham de dados paramétricos ou não paramétricos. Os resultados demonstraram que os menores valores de rugosidade foram encontrados no grupo 800, 1200 e 1200S. A contagem microbiana foi menor no grupo 1200S e esta diferiu estatisticamente (p>0,05) do controle para ambos os tempos de avaliação e bactérias. Na análise da ação antimicrobiana das soluções para desinfecção, todos os protocolos promoveram redução do crescimento dos microrganismos testados comparados ao controle (crescimento sem a presença do antimicrobiano), sendo que os grupos submetidos ao tratamento com clorexidina 4%, pastilhas efervescentes Efferdent® e triclosan 1% eliminaram o biofilme (p>0,01). Ainda nos ensaios de citotoxicidade, em todos os grupos foi observada proliferação celular das células da conjuntiva acima de 84% (p>0,05). Dessa forma, conclui-se que a rugosidade não interfere significativamente na adesão bacteriana e formação de biofilme, exceto para o grupo 1200S, e que os protocolos de limpeza com imersão em clorexidina 4%, pastilhas efervescentes Efferdent® e triclosan 1% são totalmente eficazes na desinfecção e não apresentam citotoxicidade para com as células da conjuntiva humana, sugerindo sua indicação para desinfecção de próteses oculares. / The control of biofilm formation is essential to maintain the health of anophthalmic cavity of ocular prosthesis wearers. The physical properties of the acrylic resin, such as surface roughness, may interfere with the adhesion of microorganisms to the prostheses. Therefore, it is necessary to use cleaning solutions that are effective and do not cause tissue irritation in ocular conjunctiva. The aim of this study was to verify the influence of surface roughness of the acrylic resin used in the preparation of ocular prosthesis in the formation of bacterial biofilm, as well as to evaluate the antimicrobial efficacy and cytotoxicity of different disinfectants in ocular prostheses. For roughness analysis, acrylic resin samples were prepared and divided into 5 groups according to the granulation of polishing sandpaper used: 120, 400, 800, 1200 and 1200S (sandpaper + silica). The roughness of the samples was measured using a profilometer and Atomic Force Microscopy images were obtained for each group. The microbial growth for Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis on the samples was evaluated after 4 and 24 h by counting the Colony Forming Units (CFU)/mL. The effect of the following solutions was also evaluated by CFU/mL: non treated group (immersed in saline solution), neutral soap, 4% chlorhexidine, Efferdent® effervescent tablets, 1% triclosan and citronella. The cytotoxicity of the solutions was evaluated by MTT and Neutral Red after treating the samples daily for 1, 7, 15, 30, 60 and 90 days with the solutions already mentioned, being evaluated at the end of each period. Data were submitted to proper statistical analysis, considering whether data were parametric or non-parametric. The results showed that the lowest roughness values were found in groups 800, 1200 and 1200S. 1200S group also presented the lowest values of microbial growth statistically different from control group (p>0,05), for both periods and bacteria evaluated. In the analysis of the solutions, compared to the control group (microbial growth without the presence of the antimicrobial), all protocols promoted a reduction in the growth of the microorganisms, and the groups submitted to disinfection with 4% chlorhexidine, Efferdent® effervescent tablets and 1% triclosan eliminated the biofilm (p>0,01). In addition, all groups showed cell proliferation of conjunctival cells above 84% in the cytotoxicity assays (p>0,05). Thus, it was concluded that the roughness does not significantly interfere in the adhesion of the microorganisms, except for group 1200S, and that the cleaning protocols with 4% chlorhexidine, Efferdent® effervescent tablets and 1% triclosan are totally effective in the disinfection and do not present cytoxicitiy with human conjunctive cells, what suggests their indication for cleaning of ocular prosthesis. / CNPq: 141722/2015-0
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