Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Determina la correlación entre la presencia de genes de virulencia específicos y su expresión fenotípica en Escherichia coli diarreogénicas, mediante PCR múltiple usando una combinación de 6 pares de cebadores específicos para E.coli diarreogénicas y un medio selectivo nuevo diferencial para el aislamiento de E-coli STEC noO157, EPEC y ETEC. De 100 cepas analizadas, el 31 % correspondieron a E.coli EPEC atípicas, mientras el 5 % fueron típicas porque evidenciaron la presencia del gen eae, y genes eae + bfp respectivamente. De las cepas STEC el 32 % presentaron el gen Stx1, 4 % el gen Stx1 +eae y solo 2 % el gen Stx1+Stx2 y eae. En ETEC el 24 % poseían el gen est que codifica para la enterotoxina termoestable (ST) y 1% poseía los genes est y elt. Los ensayos para determinar la expresión fenotípica de Escherichia coli con genes de virulencia en medios de cultivo diferenciales de Posse nos permitieron identificar Escherichia coli STEC O26 (15%) que crecieron dando colonias purpura como consecuencia de fermentar sacarosa y sorbosa, O111 (14 %) y O103 (1 %) dieron colonias azul purpura por la fermentación de sacarosa y O114 (9 %) que no fermentan sorbosa, así como los serotipos EPEC (36 %) y ETEC (25 %) tampoco fermentaron sorbosa dando colonias rojas. Se determinó que no existe correlación entre la cepas STEC sorbosa negativas y la presencia de genes para la producción de toxinas Shx, así como la presencia de genes est y elt para la producción de enterotoxinas ST y LT en cepas ETEC demostrando que el método de la sorbosa puede ser un marcador fenotípico para la rutina en los laboratorios para la selección de estos patógenos en productos alimenticios, muestras clínicas humanas y de animales. / Tesis

Determina los niveles de cadmio, plomo, arsénico, níquel y cromo en cigarrillos con filtro que son expedidos en Lima Metropolitana por el método de espectrometría de absorción atómica, motivo por el cual se determinó los niveles de concentración promedio de cadmio, plomo, arsénico, níquel y cromo de los cigarrillos que se expenden en Lima Metropolitana, en comparación con los niveles de concentración de los metales pesados en las investigaciones realizadas en Brasil, Polonia y Arabia Saudita. Se realizó un estudio de tipo aplicado y correlacional (comparativo), de diseño no experimental, transeccional y correlacional con una muestra de 58 variedades de cigarrillos que son expendidos en Lima Metropolitana, cuyos niveles de concentración promedio de los metales pesados referidos, se compararon con estudios previos realizados en otros países. Los resultados de la investigación de los cigarrillos que son expendidos en Lima Metropolitana señala que los niveles de concentración promedio, para arsénico es 0,0566 μg/g, para cadmio es 0,3122 μg/g (inferior a los de Arabia Saudita 1,81 μg/g y Polonia 0,68401 μg/g, y superior a Brasil 0,09 μg/g), para cromo es 0,7098 μg/g (inferior al de Brasil 1,43 μg/g), para níquel es 20,6412 μg/g (superior al de Brasil 0,449 μg/g) y para plomo es 3,9407 μg/g (superior a los de Arabia Saudita 2,46 μg/g, Brasil 0,27 μg/g y Polonia 0,6853 μg/g), estas concentraciones presentan alta dispersión o variabilidad y existe una correlación significativa, al 5 % de confianza, entre las concentraciones de cromo y plomo (r = 0,842) y entre las concentraciones de níquel y plomo (r = 0,442). De esta manera, se concluye que con un 5 % de confianza, las diferencias entre las concentraciones de cadmio, plomo, arsénico, níquel y cromo de los cigarrillos que se expenden en Lima Metropolitana y las concentraciones de dichos metales determinadas en las investigaciones realizadas en Brasil, Polonia y Arabia Saudita son estadísticamente significativas. / Tesis

Desarrolla una propuesta para implementar un sistema de calidad mediante la aplicación de las 5 S (la primera letra de las palabras en japonés seiri, seiton, seiso, seiketsu y shitsuke) en el CICOTOX y así tener una organización ordenada, limpia y con disciplina. Para ello, se realizó la evaluación en las diversas áreas del CICOTOX, reuniones de sensibilización con los directivos y equipo de trabajo, obteniéndose su compromiso de ser partícipes de la implementación de la propuesta. Primero se hizo un análisis FODA, luego se realizó un diagnóstico en las 8 áreas del CICOTOX antes de la implementación, se planificó un cronograma de actividades para la implementación de las 5 S, se diseñó el comité de las 5 S y para cada implementación se realizó capacitaciones de cómo implementar cada S, luego de la implementación de cada una de las S se volvió a realizar un diagnóstico que se comparó con el antes y después. Para verificar el efecto de las 5 S se midió los indicadores de ambiente laboral mediante una encuesta que dio como resultado en cada uno de los trabajadores un mejor confort en sus áreas, también se midió el tiempo en tres áreas y se obtuvo como resultado una disminución en el tiempo en las áreas de dirección, recepción, toma de muestra, laboratorio central y absorción atómica. De esta forma reducimos la cantidad de artículos que son innecesarios, mejoramos la ubicación de los artículos necesarios, mejoramos la administración de los espacios y ambientes más limpios. / Tesis

Se pretende la obtención de un extracto de semillas de P.angolensis (PASE) para determinar su capacidad protectora contra el daño inducido por rayos X, así como compararla con otros radioprotectores utilizados en radioterapia y en radiobiología. PASE presentó una capacidad genoprotectora significativa (p<0,001) frente al daño inducido por rayos X con un factor de protección del 25-35% y factor de reducción de dosis entre 2,5-3,7, dependiendo del momento de administración. La supervivencia celular tras la exposición a 10Gy de rayos X mostró un factor de protección del 86% en las células epiteliales de próstata (PNT2) (p<0,001) y un factor de protección del 41% (p<0,001) en las células de melanoma B16F10 tras exposición a 10Gy de rayos X y 48h de incubación. El PASE demuestra una capacidad radioprotectora significativamente mayor que otros agentes radioprotectores utilizados en oncología radioterápica y similar a otras sustancias consideradas como radioprotectoras en modelos radiobiológicos. / This study aims at obtaining an extract from the seeds of P.angolensis (PASE) suitable for use in radioprotection assays in order to establish its radioprotective capacity against damage induced by X rays, as well as compare it with other radioprotective antioxidants used in radiotherapy and different radiobiological models PASE showed a significant genoprotective capacity (p<0.001) against X-rays with a protection factor of 25-35% and a dose reduction factor of 2.5-3.7, depending on the time of administration. Cell survival obtained with PASE after exposure to 10 Gy of X-rays showed a protection factor of 86% in normal prostate epithelial cells (PNT2) (p<0.001) and a protection factor of 41% (p<0.001) in the metastatic B16F10 melanoma cells after 48h of incubation and exposure to 10 Gy of X-rays. PASE demonstrated a significant radioprotective capacity higher than other radioprotective agents used in radiation oncology and similar to other substances tested in different radiobiological models.

Analizar la contribución relativa de factores ambientales y genéticos al consumo de psicofármacos y determinar la prevalencia de dicho consumo relacionándolo con variables sociodemográficas y trastornos mentales. Método: Cohorte, de base poblacional, formada por 794 parejas de gemelos nacidos entre 1940 y 1966. Se utilizan modelos de regresión logística y se aplica el diseño clásico de estudios de gemelos. Resultado: En el último mes, el 23.3 % habían consumido algún tipo de psicofármaco. El consumo aumenta con la edad, en mujeres, en inactivos laboralmente y amas de casa, menopáusicas, y en los que refieren haber padecido trastorno mental. La heredabilidad es de un 48 % para el consumo en general y un 40 % para el de tranquilizantes. Conclusiones: El consumo es elevado y se asocia a la presencia de trastornos mentales, sexo y edad. Aproximadamente la mitad de la variación interindividual es atribuible a factores genéticos. / Objective: To examine the relative contribution of environmental and genetic factors to the use of psychotropic drugs and to determine the prevalence of this consumption, relating it with sociodemographic variables and mental disorders. Method: A population-based cohort, comprising 794 pairs of twins born between 1940 and 1966. We used logistic regression models and applied the classic twin design. Results: In the last month, 23.3 % had used some kind of psychotropic drug. Consumption increases with age, in women, the unemployed, housewives, menopausic women, and those who reported having suffered from mental disorder. Estimated heritability is 48 % for general consumption and 40% for the use of tranquilizers. Conclusions: The use is remarkable and it is associated with the presence of mental disorders, the sex and the age. Roughly half of the interindividual variation is attributable to genetic factors.

OBJETIVOS Las reacciones adversas a medicamentos suponen un aumento de morbilidad que lleva asociado un alto coste socioeconómico mal evaluado. A esa morbilidad, se le añade la posibilidad del compromiso de la vida del paciente. Dada la magnitud y prospectiva de este creciente problema de salud, hemos decidido estudiarlo en la Región de Murcia, donde no hay datos publicados de alergia a los antibióticos betalactámicos. El objetivo de esta investigación es conocer los datos reales y las características de las reacciones adversas debidas al uso de antibióticos betalactámicos en el área Este de la Región de Murcia. Estos datos podrán ayudar a desarrollar medidas de prevención oportunas para disminuir la incidencia, así como servir de base para formular nuevas hipótesis que puedan aclarar los factores implicados en la aparición de este problema de salud. METODOLOGÍA Fueron seleccionados todos los pacientes asistidos entre Enero de 2001 y Diciembre de 2010, en la Sección de Alergología del Hospital Universitario Reina Sofía, refiriendo alguna reacción adversa compatible con etiología alérgica y relacionada con algún antibiótico betalactámico. El área atendida por este hospital es el área VII (Murcia/Este). Se incluyeron 435 pacientes. A esos pacientes, siguiendo el protocolo establecido en la Sección de Alergología, se les realizó una exhaustiva anamnesis que abarcaba desde antecedentes personales y familiares hasta las características de la reacción adversa. Posteriormente, se realizaron determinaciones de Ig E específica (Penicilina G, Penicilina V, Amoxicilina, Cefalosporinas); pruebas cutáneas (prick-tests e intradermoreacciones con los reactivos PPL (Peniciloil polilisina) y MDM (Mezcla de determinantes menores), Penicilina G, Amoxicilina y, en caso de ser otro antibiótico betalactámico el sospechoso, ese mismo antibiótico). En los casos necesarios se realizó un test de exposición controlada con el medicamento sospechoso. Al concluir el estudio, los pacientes fueron catalogados como alérgicos o no alérgicos a los antibióticos betalactámicos. CONCLUSIONES 1.- Se diagnosticó de alergia a los antibióticos betalactámicos a 54 pacientes, un 13,71% de los que completaron el estudio. 2.-Los antibióticos betalactámicos implicados en las reacciones adversas con mayor frecuencia fueron amoxicilina-clavulánico, penicilina y amoxicilina, por este orden. 3.- La mayoría de los pacientes se estudiaron transcurridos más de 2 años desde que ocurrió la reacción. 4.- Las reacciones adversas con betalactámicos predominan en el sexo femenino (63,45%). 5.-La vía oral fue la implicada con mayor frecuencia (65,17%) en la reacción adversa. 6.- Las reacciones inmediatas supusieron el 51,47% de los casos. 7.- Los síntomas cutáneos son los más referidos por los pacientes, principalmente urticaria-angioedema y exantema generalizado. 8.- Solamente hubo una determinación de IgE específica positiva de 1209 realizadas. 9.- La técnica diagnóstica positiva más frecuente entre los diagnosticados de alergia a los antibióticos betalactámicos fue la intradermorreacción, seguida por la provocación controlada. 10.- Los 6 pacientes diagnosticados de anafilaxia por penicilinas presentaron intradermorreacciones positivas, y las intradermorreacciones positivas con amoxicilina se relacionan significativamente con la anafilaxia como síntoma de presentación. 11.- El diagnóstico más frecuente (44,44 %) fue el de urticaria/angioedema por sensibilización a penicilinas, seguido por el de exantema general por sensibilización a penicilinas (16,67 %). 12.- El diagnóstico de urticaria/angioedema por sensibilización a penicilinas se relaciona significativamente con las intradermorreacciones con PPL y con amoxicilina positivas y con la provocación con amoxicilina positiva. / BACKGROUND Adverse drug reactions causes high morbility and socioeconomic costs that are poor evaluated. Sometimes, this high morbility can be associated with mortality. Ought to this growing health problem, we have decided to study it in Murcia, where there is no information about allergy to betalactams antibiotics. The aim of this study was to know the characteristics of adverse drug reactions to betalactams in the East area of Murcia. This information could be useful to decrease the incidence of this health problem and to reduce its costs. METHODS Patients who attended to Allergy Section (Reina Sofia Hospital) from January 2001 to December 2010 and who had suffered from adverse drug reaction to betalactams were included. The reaction must be compatible with an allergic reaction. 435 patients were included. Following current protocols, we performed a clinical history (including clinical and family antecedents and characteristics of drug reaction), blood tests (specific Ig E to penicillin G, penicillin V, amoxicillin and cefaclor) and skin tests (prick and intradermal test to PPL (Penicilloyl-polylysine), MDM (minor determinant mixture), penicillin G, amoxicillin and the betalactam that caused the reaction). Drug provocation test were done when it was necessary. At the end of the investigation, patients were diagnosed from allergy or not allergy to betalactams antibiotics. CONCLUSIONS 1.- Fifty-four patients (13,71% of those who finished the study) were diagnosed from allergy to betalactams antibiotics. 2.-Amoxicillin-clavulanic, penicillin and amoxicillin were the most implicated betalactams in drug reactions following this order. 3.- Most patients were studied more than 2 years since the reaction happened. 4.- Drug reactions to betalactams were more frequent in women (63,45%). 5.-Oral administration was the most common in drug reactions (65,17%). 6.- Inmediate reactions reached 51,47%. 7.- Cutaneous reaction was the most frequent, mainly, urticaria-angioedema and generalized exanthema. 8.- We only found a positive specific Ig E out of 1209 performed. 9.- The most useful diagnosis test was the intradermal test followed by drug provocation tests. 10.- Six patients were diagnosed from anaphylaxis due to penicillins. All of them presented positives intradermal tests. On the other hand, positive intradermal test to amoxicillin is statistically related to anaphylaxis. 11.- Urticaria-angioedema due to allergy to penicillins was the most common diagnosis (44,44%), followed by generalized exanthema due to penicillins (16,67%). 12.- The diagnosis of urticaria/angioedema due to sensitization to penicillins is statistically related to intradermal test positive to PPL and amoxicillin and also to positive amoxicillin provocation test.

Numerosos estudios y estimaciones de la utilización de medicamentos por pacientes no hospitalizados sugieren que el 50% de éstos emplean su medicación de manera incorrecta. A pesar de que no todos los errores son lo bastante serios como para dañar y deteriorar la salud, los estudios realizados ponen de manifiesto que el mal uso de los medicamentos representa para el 25% de esos pacientes una verdadera amenaza para su salud. A su vez, los elevados costos de las medicinas exigen hoy en día acciones coordinadas entre los distintos profesionales de la salud, encaminados a minimizar las pérdidas y a acrecentar al máximo los beneficios de los tratamientos farmacológicos. El motivo que nos llevó a realizar el presente trabajo, fue el alto índice de personas que padecen de presión arterial alta y la poca información que disponen de su enfermedad y tratamiento. La HTA se caracteriza por ser una enfermedad crónica y de mal pronóstico cuando el paciente no recibe tratamiento oportuno y monitoreo adecuado de la terapia prescrita. Por lo tanto, frente a esta realidad, consideramos adecuado y necesario implantar un programa de Atención Farmacéutica en una farmacia comunitaria. De esta manera poder beneficiar al paciente mediante mejoras tanto en la calidad de los tratamientos terapéuticos como en su calidad de vida. Este trabajo se desarrolló en forma prospectiva desde Octubre del año 2000 a Mayo del año 2001; en la cual se trabajó con un total de 38 pacientes a los cuales se les brindó Atención Farmacéutica. A pesar que el trabajo realizado es el primero en su tipo, los resultados son alentadores. Los pacientes, en su mayoría, acudieron a su cita periódicamente, aprendieron que el Farmacéutico puede intervenir positivamente en beneficio de su salud y no sólo dispensarle medicamentos; mejoramos su calidad de vida. Al final se observo un cambio en la imagen del Químico Farmacéutico en la comunidad. / The most important reason why we carried this project out was the work the high index of people who suffer of high arterial pressure and have not enough information about their illness. The HTA is characterized to be a chronic illness, with a bad prognosis, when the patient doesn't receive an opportune treatment and an appropriate monitoreo of the prescribed therapy. Nowadays, many studies and estimates about use of medications for not hospitalized patients suggest that 50% of these use its medication in an incorrect way. Although not all the errors are the quite serious one to damage or to deteriorate the health, the carried out studies show that the wrong use of the medications represents to 25% of those patients a true threat for its health. Meanwhile, the expensive costs of the medicines demand us an action coordinated among the different professionals of the health, to minimize the loss and to increase in a maximum way the benefits of the treatments. Therefore, we realized that the moment was appropriate to implant a program of Pharmaceutical Attention at community level; consequently we will be able to benefit the patient so much in this way by improving of the quality of life and quality of the therapeutic treatment. This project was developed in a prospective method from October 2000 to May 2001; in which we have worked with a total of 38 patients whom were offered Pharmaceutical Attention. Even though this project was the first of it's type, the results were encouraging; the patients went to pharmaceutical appointment periodically; beside they learned that the pharmacists Chemist play an important rol into the integral treatment to take care the patient's health. improving the quality of their life; also, it started to change the image of Pharmacist Chemist into the community. The results and comments are shown in this project.

Existen numerosas evidencias de que la enzima Poli-ADP-ribosa polimerasa-1 (PARP-1) desempeña un importante papel en la modulación de la expresión génica durante el desarrollo y en respuesta a señales celulares específicas, ejerciendo su acción a diferentes niveles. PARP-1 pertenece a una familia de enzimas (PARP) que, usando NAD+ como sustrato, sintetizan y transfieren homopolímeros de ADP-ribosa en residuos de ácido glutámico en proteínas aceptoras principalmente involucradas en la estabilidad de la cromatina y en el metabolismo del DNA. La actividad de PARP-1, responsable de casi el 90% de la poli-ADP-ribosilación en las células, podría modular la expresión génica a través de la poli-ADP ribosilación de otras proteínas o por asociación física con proteínas relevantes como son los factores de transcripción. En este trabajo nos hemos centrado en poner a punto un método cuantitativo de medida de la actividad poli-ADP-ribosa polimerasa en células permeabilizadas utilizando 3H-NAD+ como sustrato. Durante su caracterización, el método ha demostrado tener una buena sensibilidad, precisión, especificidad y exactitud. Una vez optimizado, dicho método se ha empleado en el estudio de las reacciones de poli-ADP-ribosilación mediadas por las enzimas PARP en células del sistema inmune.El estudio de la actividad PARP en timocitos procedentes de ratones deficientes para PARP-1 (Parp-1-/-) y de ratones Parp-2-/- frente a los timocitos procedentes de ratones no modificados genéticamente pone de manifiesto que la actividad de poli-ADP-ribosilación mediada por PARP-2 no sería responsable de la mayor susceptibilidad a apoptosis detectada en los timocitos de los ratones Parp-2-/-, aunque el incremento significativo de la actividad PARP en ausencia de PARP-2 sí que podría, de alguna forma, afectar al fenotipo observado. Dicho incremento de actividad nos sugiere también un efecto de PARP-2 en una posible regulación negativa de la actividad enzimática de PARP-1. Por otra parte los estudios de estimulación de linfocitos T con PMA+ionomicina y anticuerpos anti-CD3 solos y en combinación con anticuerpos anti-CD28, nos han permitido demostrar la activación de PARP en linfocitos T tras la respuesta a estímulos que no producen daño aparente en el DNA.Sin duda alguna, la aplicación de la metodología optimizada en este trabajo puede ser de gran ayuda en el campo de la investigación de las reacciones de poli-ADP-ribosilación y a nivel clínico, si finalmente los ensayos clínicos con inhibidores de PARP en diferentes patologías resultan de utilidad clínica. / Several works report the importance of polyADPribose polymerase-1 in genic expression modulation during development and as an answer of specific cellular signals. PARP-1 is the founder member of a family, the PARP family, that synthesize ADP-ribose homopolymers to modify acceptor proteins related to chromatin stability and DNA metabolism. PARP-1 activity , representing 90% of poly-ADP-ribosilation in cells, could be able to modulate genic expression through ribosilation of other proteins, or by interaction with some other proteins as transcription factors. The aim of this work was the optimization of a quantitative method for measuring PARP activity in permeabilized cells, using NAD+-H-3 as substrate. During the optimization, the method showed good sensibility, accuracy and specificity. Once optimized, we run the method for measurement of PARP activity in inmune cells. The results of PARP activity in thymocytes of Parp-1-/- and Parp-2-/- mice show PARP-2 polyADPribosilation is not the cause of the increased sensibility to apoptosis detected in Parp-2-/- mice, even this increase of PARP activity in ausence of PARP-2 could in some way afect the phenotype observed. Stimulation studies of T lymphocytes with PMA+ionomicine and antibobies anti-CD3 and anti CD-28, demonstrated that PARP activation in T lymphocytes does not damage DNA. The method developed in this work could be very helpful in polyADPribosilation in the field of basic investigation and in a clinical level, if finally clinical trials with PARP inhibitors show clinical application

Entre els diferents trastorns neurodegeneratius, la malaltia d’Alzheimer (MA) es caracteritza per la pèrdua progressiva de les funcions cognitives i l’alteració del comportament, essent el sistema colinèrgic central el principal sistema afectat. S’estima que hi ha més de 20 milions de persones que pateixen l’MA al món i s’espera que el 2050 la xifra augmenti fins a 135 milions, convertint-se així en la pròxima epidèmia dels països desenvolupats (Sabharwal & Wisniewski 2014). La seva importància mèdico-sanitària i socio-econòmica, i el fet que no existeixin fàrmacs prou eficaços per frenar-ne el seu progrés, ha provocat que el desenvolupament de nous compostos hagi esdevingut un tema de gran interès científic. Fins a dia d’avui, els únics fàrmacs aprovats pel tractament de l’MA són els anticolinesteràsics donepezil, rivastigmina i galantamina, i la memantina, un inhibidor dels receptors NMDA (àcid N-metil-D-aspàrtic) del glutamat. A partir d’aquestes molècules, i considerant que l’acetilcolinesterasa (AChE) desenvolupa moltes altres funcions a més d’hidrolitzar l’acetilcolina (ACh), s’han sintetitzat nous inhibidors de l’AChE (IAChE) capaços no només d’inhibir l’activitat catalítica de l’enzim, sinó també d’actuar com a modificadors de l’MA. Així doncs, alguns d’aquests compostos impedeixen l’agregació del pèptid β-amiloide (Aβ) induïda per la pròpia AChE, bloquegen i potencien determinades vies pro- i antiapoptòtiques, estimulen la neurogènesi i disminueixen la inflamació, entre altres accions. S’ha descrit que les funcions no catalítiques de l’AChE estan relacionades de forma específica a dues de les variants de l’enzim: la isoforma S o sinàptica (cervell i múscul), i la isoforma R o readthrough (cèl·lules embrionàries i tumorals). S’ha demostrat que ambdues són induïbles per lesions neuronals i/o per determinats IAChE. D’aquesta manera, l’expressió de l’AChE-R s’associa als processos neurogènics, protectors i de reparació, en canvi l’AChE-S sembla intervenir en les vies apoptòtiques i en l’augment de la neurotoxicitat (Zimmermann 2013; Soreq & Seidman 2001). D’acord amb això, la present tesi doctoral s’ha centrat en l’avaluació dels efectes dels anticolinesteràsics huprina X (HX) i AVCRI104P3 sobre l’expressió de les isoformes S i R de l’AChE, i altres proteïnes implicades en la regulació dels processos neurotòxics i neurogènics, en diferents condicions experimentals in vitro i ex vivo, com a models dels estats de neurodegeneració i d’envelliment. S’han escollit aquests compostos, donat que diferents estudis previs realitzats en el nostre departament han demostrat que presenten un ampli perfil farmacològic, ja que són antiagregants d’Aβ, inhibidors de la BACE (β-site APP cleaving enzyme 1), agonistes nicotínics i muscarínics M1 i neuroprotectors. Els resultats obtinguts en aquesta tesi mostren que ambdós anticolinesteràsics indueixen accions antiapoptòtiques i neuroprotectores i que, aquestes, segueixen patrons diferents, depenent no només del model experimental, sinó també de les característiques estructurals dels compostos, malgrat que ambdós són inhibidors de l’AChE. / Among the different neurodegenerative disorders, Alzheimer’s disease (AD) is characterized by the progressive loss of cognitive function and the altered behaviour, being the central cholinergic system the main affected. It’s estimated that there are more than 20 million people who suffer from AD worldwide currently and about 135 million people expected to develop it by 2050, so it can be identified as the next health epidemic in developed countries (Sabharwal & Wisniewski 2014). Its medical-sanitary and socio-economic importance, and the fact that there are no drugs effective enough to stop its progress, has caused that the development of new compounds has become a subject of great scientific interest. Until today, the only drugs approved for the treatment of AD are the acetylcholinesterase inhibitors (IAChE) donepezil, rivastigmine and galantamine, and memantine, a glutamate NMDA (N-methyl-D-aspartate acid) receptors inhibitor. On the basis of these molecules, and considering that AChE carries out many other functions in addition to hydrolyse acetylcholine (ACh), new IAChE capable of not only inhibiting catalytic activity of the enzyme, but also acting as AD modifiers have been synthesized. Thus, some of these compounds prevent amyloid-β (Aβ) peptide aggregation induced by AChE itself, block and enhance certain pro- and antiapoptotic pathways, stimulate neurogenesis and decrease inflammation, among other actions. It has been described that the non-catalytic functions of AChE are specifically related to two variants of the enzyme: S or synaptic isoform (brain and muscle) and R or readthrough isoform (embrionary cells and tumours). It has been shown that both are inducible by neural injury or by certain IAChE. In this way, AChE-R expression is associated with neurogenic, protective and repair processes, whereas AChE-S seems to intervene in apoptotic pathways and in neurotoxicity increased (Zimmermann 2013; Soreq & Seidman 2001). It was on this basis that the present thesis has focused on the evaluation of the IAChE huprine X (HX) and AVCRI104P3 effects on the expression of AChE isoforms (S and R), and other proteins involved in the neurogenic and neurotoxic processes regulation, in different experimental conditions in vitro and ex vivo, as neurodegenerative and aging models. These compounds were chosen, given that several previous studies performed in our Department have shown that they present a broad pharmacological profile: they are Aβ aggregation and BACE (β-site APP cleaving enzyme 1) inhibitors, nicotinic and muscarinic M1 agonists and neuroprotective. The results obtained in this thesis show that both IAChE induce antiapoptotic and neuroprotecitve actions and that these, follow different patterns, depending not only on the experimental model, but also on the compounds structural characteristics, although they are both AChE inhibitors.

The aim of this study was to establish the population pharmacokinetics of amikacin in newborns from serum concentration data obtained during the routine therapeutic drug monitoring and to explore the influence of patient covariates on drug disposition. To validate the developed model in into a external dataset, belonging to the same population as the development group, to evaluate the current dose regimen and to optimize the first dose recommendations, were also aims of the study. Data were retrospectively collected for a study in newborns with postnatal age less than 90 days admitted in the neonatal unit of Vall Hebron (July 2000 to July 2006) who were treated with amikacin and with at least two serum concentration data of the aminoglycoside. Amikacin was administered as an i.v. infusion over 30 or 60 min. Blood samples were collected just before (“through”) and 1h after start of the infusion (“peak”). Demographic, clinical and amikacin dosing and concentration data were collected. Amikacin serum concentration measurements were done using fluorescence polarization immunoassay (TDx; Abbott Laboratories). Population PK analysis was performed from 149 newborns using the non linear mixed-effect approach (NONMEM version VII). The First order conditional estimation method (FOCE) with interaction was used throughough all the model bulding process.The PK of amikacin after iv administration was best described by a two-compartment linear disposition model. Between-patient variabilities expressed as coefficient of variation (CV%) were associated to total plasma clearance (CL) (16.39%) , central compartment distribution volume (V1) (25.23%) and distributional clearance (Q) (40.08%). Residual variability, modelled as a combined error model (proportional + additive), was 6.97% and 15.37%, respectively. Creatinine Clearance (CLCR) and body weight (WGT) were the most influential covariates in CL, and WGT was in V1. The final population model is: TVCL=0.133•(CLCR/31.97)0.649•x(WGT/1880)0.752 and TVV1=0.837•(WGT/1880)1.09. The external validation as well as th internal validation either through bootstrapping, or by Visual Predictive Check, prediction-corrected visual predictive check, posterior predictive check, or by normalised prediction distribution errors, suggested a good predictive ability for the developed model. The several simulations based on the final pharmacokinetic estimates of the model showed the influence of the covariates identified as significant in the serum amikacin concentrations, demonstrating the ability of the model to stablish optimal initial doses of amikacin for the treatment of neonatal sepsis. Due to the possibility of including the model in clinical pharmacokinetic software, the use of this model could improve the design of initial amikacin dosage in neonate populations and provide feedback adjustments of dosage regimens to achieve desired serum concentrations. / L’amikacina és un antibiòtic amb un efecte bactericida concentració depenent, inhibint la síntesi proteica, que és àmpliament utilitzat en el tractament de les sèpsies greus causades per bacils gram negatius. L’objectiu principal d’aquest estudi fou establir els paràmetres farmacocinètics de l’amikacina en nounats a partir de les dades de concentració sèrica obtingudes en la monitorització rutinària del fàrmac i identificar la influència de covariables i la variabilitat interindividual (VII) associada. Validar el model desenvolupat en una població externa, avaluar el règim de dosificació utilitzat i optimitzar les recomanacions de dosis inicials a administrar, van ser altres objectius. L’anàlisi farmacocinètic es va realitzar en una població de 149 individus utilitzant el programa NONMEM VII. La farmacocinètica de l’amikacina es va descriure amb un model bicompartimental amb entrada de fàrmac d’acord amb una cinètica d’ordre zero i eliminació de primer ordre. La VII va ser inclosa tant en l’aclariment (CL) com en el volum de distribució en el compartiment central (V1) i en el volum de distribució intercompartimental (Q), coeficient de variació (CV) del 16.39%, 25.23% i 40.08%, respectivament. El CV de l’error residual, modelitzat amb un component additiu i un proporcional, va ser del 6.97% i 15.34%, respectivament. El pes actual (WGT) i l’aclariment de creatinina (CLCR) van demostrar ser variables predictores del CL, i el WGT també del V1. Els valors estimats finals de l’CL i del V1 venen donats per TVCL=0.133•(CLCR/31.97)0.649•x(WGT/1880)0.752 i TVV1=0.837•(WGT/1880)1.09. L’avaluació del model final en una població externa, com a través de tècniques de validació internes, van demostrar la seva robustesa i capacitat de predicció. Diferents simulacions basades en les estimes farmacocinètiques finals del model van posar de manifest la influència de les covariables identificades en les concentracions sèriques d’amikacina, i van demostrar la capacitat del model per a establir dosis inicials òptimes del fàrmac pel tractament de les sèpsies neonatals. Aquest model podrà ser introduït en un programa Bayesià de farmacocinètica utilitzat en la pràctica clínica que permetrà optimitzar les dosis inicials a administrar i realitzar ajustos de dosi durant el tractament.