Resumo: Os ossos são compostos por um tipo mineralizado de tecido conjuntivo, constituído principalmente pelos elementos químicos cálcio (Ca) e fósforo (P) que se organizam formando cristais de hidroxiapatita. Patologias ou condições que afetem o tecido podem alterar a quantificação destes elementos e consequentemente a composição estequiométrica da hidroxiapatita. Estudos recentes sugerem que, tanto o alcoolismo crônico, quanto a deficiência estrogênica, podem afetar os ossos em geral, inclusive o osso alveolar, e aumentar a suscetibilidade do indivíduo à progressão da doença periodontal. O principal objetivo deste trabalho foi verificar possíveis alterações na relação Ca/P, na região da crista óssea alveolar, em ratas submetidas ao alcoolismo crônico e/ou a deficiência estrogênica induzida por ovariectomia. Cinquenta e quatro ratas, (Rattus norvegicus, variação albinus, Wistar), foram inicialmente divididas em dois grupos: ovariectomizadas (Ovz) ou Sham operadas. Um mês após as cirurgias, os grupos foram subdivididos, de acordo com a dieta, e receberam os seguintes tratamentos: a) álcool a 20% b) dieta isocalórica e c) dieta livre. Oito semanas depois do início do tratamento dietético, os animais foram sacrificados e as mandíbulas removidas. As amostras foram cortadas no sentido longitudinal, na região da crista óssea alveolar, entre o primeiro e o segundo molar, para verificação das concentrações de Ca, P e da relação Ca/P mediante a utilização de um espectrofotômetro de microfluorescência de raios-X (EDX). Os dados obtidos pela espectrometria foram avaliados pela análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey com nível de significância de 5%. Os grupos com dieta livre apresentaram os maiores valores médios na relação Ca/P, e os com controle dietético, os menores. O grupo Ovz dieta livre foi o que mais ganhou peso, mais consumiu ração... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Bones are composed of mineralized tissue constituting mainly of calcium (Ca) and phosphorous (P). These elements are organised forming crystals of hydroxyapatite. Some conditions or pathologies affecting this tissue, may alter the quantitative distribution (or presence) of these elements; and consequently the stoichiometric composition of hydroxyapatite. Recent studies suggest that chronic alcoholism as well as estrogenic deficiencies may affect bones in general (including alveolar bone), and in doing so increases individuals' susceptibility in developing progressive periodontal disease. The main objective of this research was to verify possible alterations in Ca/P ratios (in the alveolar bone crest region), in laboratory rats subjected to chronic alcoholism and/or estrogen deficiency induced by ovariectomy. Fifty four rats (Rattus norvegicus, of the albinus, Wistar variety), were initially divided into two groups: ovariectomized (Ovz), and Sham operated (Sham). A month after surgery the two groups were sub-divided (according to their diet), and received the following dietary intervention: (a) alcohol at 20%, (b) isocaloric diet and (c) free diet. Eight weeks after the commencement of the dietetic treatment, the animals were sacrificed and their jaws removed. Samples were then cut in a longitudinal direction, in the alveolar bone crest region (between the first and second molar), in order to verify Ca and P concentrations and Ca/P ratios using microfluorescence X ray spectrometry (EDX). Data obtained with spectrometry were evaluated by analysis of variance (ANOVA) and Tukey tests with significance levels of 5%. The free diet groups presented the highest average values of Ca/P ratios, and the groups with diet restrictions presented the smallest average values. The Ovz free diet group was the group with the greatest weight gain, a greater consumption of food volume and presented... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Rosilene Fernandes da Rocha / Coorientador: Ana Maria do Espírito Santo / Banca: Emilia Angela Loschiavo Arisawa / Banca: Yasmin Rodarte Carvallho / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-03Bitstream added on 2014-06-13T20:17:31Z : No. of bitstreams: 1 marchini_amps_me_sjc.pdf: 461513 bytes, checksum: 08faa091c1d605e0d172a36dd8b821ac (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os ossos são compostos por um tipo mineralizado de tecido conjuntivo, constituído principalmente pelos elementos químicos cálcio (Ca) e fósforo (P) que se organizam formando cristais de hidroxiapatita. Patologias ou condições que afetem o tecido podem alterar a quantificação destes elementos e consequentemente a composição estequiométrica da hidroxiapatita. Estudos recentes sugerem que, tanto o alcoolismo crônico, quanto a deficiência estrogênica, podem afetar os ossos em geral, inclusive o osso alveolar, e aumentar a suscetibilidade do indivíduo à progressão da doença periodontal. O principal objetivo deste trabalho foi verificar possíveis alterações na relação Ca/P, na região da crista óssea alveolar, em ratas submetidas ao alcoolismo crônico e/ou a deficiência estrogênica induzida por ovariectomia. Cinquenta e quatro ratas, (Rattus norvegicus, variação albinus, Wistar), foram inicialmente divididas em dois grupos: ovariectomizadas (Ovz) ou Sham operadas. Um mês após as cirurgias, os grupos foram subdivididos, de acordo com a dieta, e receberam os seguintes tratamentos: a) álcool a 20% b) dieta isocalórica e c) dieta livre. Oito semanas depois do início do tratamento dietético, os animais foram sacrificados e as mandíbulas removidas. As amostras foram cortadas no sentido longitudinal, na região da crista óssea alveolar, entre o primeiro e o segundo molar, para verificação das concentrações de Ca, P e da relação Ca/P mediante a utilização de um espectrofotômetro de microfluorescência de raios-X (EDX). Os dados obtidos pela espectrometria foram avaliados pela análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey com nível de significância de 5%. Os grupos com dieta livre apresentaram os maiores valores médios na relação Ca/P, e os com controle dietético, os menores. O grupo Ovz dieta livre foi o que mais ganhou peso, mais consumiu ração... / Bones are composed of mineralized tissue constituting mainly of calcium (Ca) and phosphorous (P). These elements are organised forming crystals of hydroxyapatite. Some conditions or pathologies affecting this tissue, may alter the quantitative distribution (or presence) of these elements; and consequently the stoichiometric composition of hydroxyapatite. Recent studies suggest that chronic alcoholism as well as estrogenic deficiencies may affect bones in general (including alveolar bone), and in doing so increases individuals’ susceptibility in developing progressive periodontal disease. The main objective of this research was to verify possible alterations in Ca/P ratios (in the alveolar bone crest region), in laboratory rats subjected to chronic alcoholism and/or estrogen deficiency induced by ovariectomy. Fifty four rats (Rattus norvegicus, of the albinus, Wistar variety), were initially divided into two groups: ovariectomized (Ovz), and Sham operated (Sham). A month after surgery the two groups were sub-divided (according to their diet), and received the following dietary intervention: (a) alcohol at 20%, (b) isocaloric diet and (c) free diet. Eight weeks after the commencement of the dietetic treatment, the animals were sacrificed and their jaws removed. Samples were then cut in a longitudinal direction, in the alveolar bone crest region (between the first and second molar), in order to verify Ca and P concentrations and Ca/P ratios using microfluorescence X ray spectrometry (EDX). Data obtained with spectrometry were evaluated by analysis of variance (ANOVA) and Tukey tests with significance levels of 5%. The free diet groups presented the highest average values of Ca/P ratios, and the groups with diet restrictions presented the smallest average values. The Ovz free diet group was the group with the greatest weight gain, a greater consumption of food volume and presented... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-31Bitstream added on 2014-06-13T18:49:58Z : No. of bitstreams: 1 leite_nb_me_sjrp.pdf: 1707233 bytes, checksum: a9b663e6312a6e9e7f0d5b241ce03ac1 (MD5) / Peptídeos bioativos são de elevado interesse como substitutos de antibióticos convencionais já que alguns destes apresentam atividade antimicrobiana. Eles são predominantemente catiônicos e tem sido mostrado que sua atividade antimicrobiana é modulada por interações eletrostáticas, hidrofóbicas e por características elásticas das membranas, seu alvo. Neste trabalho analisou-se a importância da carga elétrica líquida (Q) e hidrofobicidade na interação de quatro peptídeos com membranas modelo de caráter aniônico e zwitteriônico utilizando medidas de potencial eletrocinético, dicroísmo circular e espectroscopia de fluorescência. Estes peptídeos denominados mastoparanos apresentam carga liquida de +1 a +4, devido à presença de resíduos ácidos e básicos, foram extraídos do veneno de vespas, três dos quais de espécie nativa da bodiversidade nacional, mostraram intensa atividade antimicrobiana. Nos peptídeos com Q = +1 e +2 predomina o caráter hidrofóbico enquanto nos demais o caráter hidrofílico; o peptídeo com Q = +4 tem sua estrutura resolvida por NMR e devido à alta homologia entre essa seqüência e dos demais se supõe que eles também sejam anfipáticos. A atividade lítica é caracterizada por uma razão [P]/[L] crítica entre as concentrações totais de peptídeo e lipídeo, acima da qual ocorre um processo cooperativo de liberação de corante do interior das vesículas. A razão crítica, a eficiência do vazamento e a cooperatividade mostraram ser dependentes na densidade superficial de carga da vesícula e da carga liquida do peptídeo. Observaram-se razões [P]/[L] críticas da ordem de sub-micromolar tanto em vesícula zwitteriônica quanto em vesícula aniônica. As curvas dose-resposta tornaram-se menos cooperativas com o aumento da carga líquida dos peptídeos, mostrando que a razão crítica aumenta com a carga. Os espectros... / Bioactive peptides are of high interest as substitutes of conventional antibiotics since some of them present antimicrobial action. They are predominantly cationic and it has been shown that their antimicrobial activity is modulated by electrostatic interactions, hydrophobic contributions and the elastic features of the membranes they target. In this work we analyzed the importance of charge and hidrofobicity to the interaction of four peptides with anionic and zwitterionic model membranes using electrokinetics potential, circular dicrohism and fluorescence spectrsocopy. These peptides named mastoparans, have exhibit a net charge ranging from +1 to +4 due to the presence of acidic and basic residues, and three of them, extracted from the venom of wasps native of the brazilian biodiversity showed intense antibacterial activity. The peptides with Q= +1 and +2, are hydrophobic and the other two are hydrophilic. Lytic activity of peptides, accessed by the release of fluorescent dye entrapped in lipid vesicles, showed sigmoid dose-response curves either in zwitterionic or in anionic vesicles with sub-micromolar threshold ratios. The lytic activity was characterized by a threshold [P]/[L] value, above which cooperative dye release takes place. The threshold ratio, the leakage efficiency and cooperativity were found to be dependent on the vesicle surface charge density and on the peptide net charge. Roughly the threshold ratios increase with the peptide net charge and as the net charge increases the dose response curves become less cooperative. Circular dichroism spectra of the peptides in vesicles exhibit two negative dichroic bands at 222 and 208 nm characteristic of helical structure, while they were observed to be random coil in buffer. At peptide and lipid concentrations near the threshold ratio the CD spectra have the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-03-23Bitstream added on 2014-06-13T19:51:23Z : No. of bitstreams: 1 silvajunior_me_me_arafo.pdf: 2446187 bytes, checksum: 4940ef85084ff4a7125abaa690d00b5c (MD5) / Com o desenvolvimento dos aparelhos LEDs para fotopolimerização de resinas compostas, intensidades maiores puderam ser atingidas sem grandes elevações de temperatura na massa da resina composta e na estrutura dental decorrentes da irradiância em comparação a aparelhos halógenos. Esse novo cenário foi o ponto de partida para o desenvolvimento desse trabalho que utilizou variadas temperaturas de cura (Tcura) (0, 25, 50, 75, 100°C) para a fotopolimerização de uma resina composta (Filtek Z250, 3M ESPE) por 40 e 60 segundos, utilizando o aparelho halógeno Gnatus Optilight Digital (halógeno) e dois LEDs que empregam uma nova tecnologia de montagem de diodos: LEC 1000 e Bright LEC (MM Optics)(LED 1 e LED2 respectivamente). A influência da temperatura de cura somada a outras variáveis estudadas foram avaliadas utilizando uma metodologia desenvolvida e aprimorada no IFSC/USP em que a penetração de um corante fluorescente no corpo da resina composta polimerizada é quantificada utilizando espectroscopia de fluorescência. De acordo com os dados finais submetidos à análise de variância, pode-se averiguar a presença de dois grupos de resultados: entre 0 e 25°C em que ambas obtiveram uma maior porcentagem de pentração do corante comparado às outras Tcura com uma variação na penetração de 69,26 +/- 8,19% até 90,99 +/- 3,38%. Na análise desse grupo o efeito tempo e temperatura foram significativos (p<0,05) sendo que a menor penetração de corante ocorreu com 60 segundos de fotoativação e esta penetração foi em média, menor com a Tcura de 25°C. Algumas interações mostraram que houve dependência entre aparelho e tempo e entre tempo e temperatura; o outro grupo refere-se as Tcura de 50, 75 e 100°C em que apesar do valor-p próximo de 0,05, o efeito temperatura foi significativo. A penetração do corante variou de 8,87 +/- 3,55 até 39,47 +/- 8,9%. Os efeitos... / With the development of the LED equipment to photopolimerization of composite resin, greater intensities could be reach without greater elevation of temperature in the mass of the composite resin and in the dental structure arisen from the irradiance in comparison to halogens equipments. This new scenario was the beginning for the development of this work that used a variety of cure temperatures (Tcure)(0, 25, 50, 75, 100°C), to a photopolymerization of a composite resin (Filtek Z250, 3M ESPE) for 40 and 60 seconds, using the halogen equipment Gnatus Optilight Digital (halogen) and two LEDs that use a new technology of assembly diodes: LEC 1000 and Bright LEC (MM Optics)(LED 1 and LED 2 respectively). The influence of cure temperature added by other variables studied were evaluated using a methodology developed and improved in the IFSC/USP in that the penetration of a fluorescent dye in the body of the photopolimerized composite resin is quantified using fluorescence spectroscopy. According to the final data submitted to an analysis of variance, it could verify the presence of two groups of results: between 0 and 25 °C both had a great percentage of the dye penetration compared to other Tcure with a variation in penetration from 69,26 +/- 8,19 % up to 90,99 +/- 3,38 %. In this analysis the effect time and temperature were highly expressive (p<0,05) and the smaller dye penetration happened to 60 seconds of photoactivation and this penetration were in media, smaller with the Tcure of 25°C. The results showed that there was interaction between the equipment and time and between time and temperature; the other group is concerning the Tcure from 50, 75 and 100°C in spite of the p-value near 0,05 the effect temperature were expressive. The penetration of the dye ranged from 8,87 +/- 3,55 up to 39,47 +/- 8,9 %. The effect equipment and time were highly expressive. The penetration with the time of 60... (Complete abstract click electronic access below)

Construiu-se um protótipo de um sistema de análise de composição por dispersão em energia de raios X fluorescentes, para investigar as vantgens e limitações desta técnica e determinar os parâmetros importantes do sistema. Utilizou-se radioisótopos como fonte de excitação, um detetor semicondutor de Ge, um amplificador e um ADC acoplado a um minicomputador, programado como multicanal. Foi desenvolvido um programa de análise quantitativa baseado no uso dos coeficientes de absorção de massa e rendimentos de fluorescência ("método teórico") suficientemente simples e compacto para ser usado em minicomputadores. Foram realizadas análises qualitativas e quantitativas com ligas a base de Fe, Ni, Ca e Cr. / A prototype system for compositional analysis using X-ray fluorescence studied by energy dispersion was constructed and used te evaluate the advantages and disadvantages of this technique as well as determining the more important parameters of such a system. The prototype system consists of a radioisotope excitation source, a Ge semiconductor detector, an amplifier and on ADC coupled to a minicomputer, programmed as a multichannel. A quantitative analysis program was developed based on the use of absorption coefficient and fluorescence yields ("theoretical method") which proved to be sufficiently simple and compact to be used in minicomputers. Qualitative and quantitative analysis were made with Fe Ni, Cu and Cr based alloys.

Construiu-se um protótipo de um sistema de análise de composição por dispersão em energia de raios X fluorescentes, para investigar as vantgens e limitações desta técnica e determinar os parâmetros importantes do sistema. Utilizou-se radioisótopos como fonte de excitação, um detetor semicondutor de Ge, um amplificador e um ADC acoplado a um minicomputador, programado como multicanal. Foi desenvolvido um programa de análise quantitativa baseado no uso dos coeficientes de absorção de massa e rendimentos de fluorescência ("método teórico") suficientemente simples e compacto para ser usado em minicomputadores. Foram realizadas análises qualitativas e quantitativas com ligas a base de Fe, Ni, Ca e Cr. / A prototype system for compositional analysis using X-ray fluorescence studied by energy dispersion was constructed and used te evaluate the advantages and disadvantages of this technique as well as determining the more important parameters of such a system. The prototype system consists of a radioisotope excitation source, a Ge semiconductor detector, an amplifier and on ADC coupled to a minicomputer, programmed as a multichannel. A quantitative analysis program was developed based on the use of absorption coefficient and fluorescence yields ("theoretical method") which proved to be sufficiently simple and compact to be used in minicomputers. Qualitative and quantitative analysis were made with Fe Ni, Cu and Cr based alloys.

Neste trabalho, o corante 9-aminoacridina foi derivatizado com compostos vinílicos que possuem grupos retiradores de elétrons. A incorporação destes leva à mudanças nas propriedades fotofísicas dos derivados, tais como deslocamentos para regiões de menor energia nos espectros de absorção e emissão, sugerindo a presença de transferência de carga intramolecular (ICT). Os estudos de fluorescência resolvida no tempo confirmam este processo para os derivados. Este estado ICT possui um tempo formação na faixa de 150 – 300 ps e um tempo de vida entre 1 – 3 ns, que depende do solvente. Os derivados que apresentam pelo menos um grupo carbonila como retirador de elétron, possuem um tempo de vida longo na faixa de 8 –10 ns, atribuído à emissão do enol, formado a partir da conjugação estendida por ponte de hidrogênio. A polimerização destes derivados com o ácido metacrílico promoveram mudanças em suas propriedades fotofísicas estacionárias e resolvidas no tempo devido à quebra da conjugação &#61552; estendida. Este fato é ilustrado pelos espectros de absorção e emissão que mostram bandas estruturadas, deslocadas para a região de maior energia e um decaimento monoexponencial, semelhante ao observado com 9-aminoacridina. Anisotropia de fluorescência resolvida no tempo mostra que nos copolímeros o tempo de relaxação rotacional do corante é muito sensível à mudança conformacional do poli (ácido metacrílico) com o pH, possibilitando assim o estudo da dinâmica deste polímero em solução aquosa. / In this work, the dye 9-aminoacridine was derivatized with vinylic compounds containing electron withdrawing groups. The incorporation of these groups leads to changes in the photophysical properties of the dye, such a red shift in the absorption and emission spectra, suggesting the presence of intramolecular charge transfer (ICT) effect. Time-resolved studies have confirmed such process in all derivatives. This ICT state has a risetime in the range 150 – 300 ps and a fluorescence lifetime between 1 – 3 ns, that depends of the solvent. The derivatives with at least one carbonyl group as electron withdrawing, have an additional lifetime in the range of 8 –10 ns, attributed to the enol emission formed by the extended conjugation. The polimerization of these derivatives with methacrylic acid induces changes in the stationary and time-resolved properties of the dye due to the breaking of the extended &#61552;&#61472;conjugation. This fact is illustrated by the absorption and emission spectra that show structured bands with a blue shift, and a monoexponencial decay, similar to the behavior of 9- aminoacridine. Time-resolved fluorescence anisotropy of the bound dye shows that the copolymers have a segment relaxation of the chain is very sensitive to the change in the conformational shape of poly (methacrylic acid) with pH, and such a process is well indicated by following the rotational relaxation of the dye.

[pt] O tema da dissertação, Caracterização de Áreas Contaminadas Através de Ensaios in Situ, aponta o estado-da-arte dos sensores que estão sendo adaptados ao conepenetrômetro, permitindo a detecção e o registro do poluente no subsolo e lençol freático.Talvez como uma conseqüência da atual conscientização da sociedade para o caráter emergencial no enfrentamento dos problemas relacionados à contaminação do subsolo,tem-se exigido uma significativa demanda de serviços especializados na caracterização dos agentes e processos de contaminação e nos procedimentos de remediação. A pesquisa apresenta técnicas de ensaio in situ para a caracterização de áreas contaminadas em função do contaminante que se quer detectar. O primeiro grande grupo abrange as tecnologias utilizadas na detecção dos hidrocarbonetos, em seguida estão agrupadas as técnicas de detecção dos compostos orgânicos voláteis e, finalmente, o terceiro grande grupo enfoca as técnicas utilizadas na detecção de metais pesados.Neste trabalho ensaios foram feitos em duas etapas: com o LIDAR-PUC e com o Fluorímetro, e são apresentados seus resultados, bem como as conclusões da pesquisa e algumas sugestões para estudos futuros, destacando-se as potencialidades e limitações de cada ensaio realizado. / [en] The subject of the research, Characterization of Contaminated Areas by in Situ Tests, shows the state-of-art of the sensors that are being adapted to the conepenetrometer system, allowing for the detection and register of the polluent in the subsurface and water table.Perhaps as a consequence of the new conscientization of the society about the emergencial character in facing problems related to subsurface contamination, it has been claimed such a significative demand forward specialized services in characterization of agents and contamination processes, besides remediation procedures.In situ sampling techniques for the characterization of contaminated areas related to the targeted polluents are presented in this study. The first group covers technologies used in the detection of hydrocarbons, furthermore there are some techniques for the detection of volatiles organic compounds and, finally, the third group focuses the techniques used in the detection of heavy metals. In this work tests were done in two parts: with the LIDAR- PUC and with the Fluorimeter, and their results are presented as well the conclusions of the research and some suggestions for future works, principally the potentialities and limitations of each test done.

[pt] Clorpromazina (CPZ), flufenazina (FPZ) e trifluperazina (TFP) são derivados de fenotiazinas que, sob irradiação UV, geram fotoprodutos. Observouse que CPZ desenvolve três fotoprodutos fluorescentes em diferentes condições. A promazina (PZ) se forma da fotólise de CPZ pela quebra da ligação com o cloro. A saída do cloro é um dos principais caminhos para a formação de outros fotoprodutos, sendo também um requisito para formação de dímeros e trímeros de CPZ. O segundo produto fluorescente é a espécie sulfóxida, que se desenvolve em presença de oxigênio somente em meio ácido e tem pico de fluorescência em (aproximadamente) 370 nm. A terceira espécie, com pico triplo de emissão e máximo em 352 nm, se desenvolve predominantemente em ausência de oxigênio. Observou-se que as taxas de formação dos fotoprodutos fluorescentes são maiores em meio ácido. FPZ e TFP apresentaram o mesmo fotoproduto fluorescente (emissão (aproximadamente) 410 nm), espécie que se desenvolve em presença de O2 com as mesmas características da espécie sulfóxida. A fluorescência do fotoproduto da TFP foi testada como sensor de radiação UV e para detecção de pequenas quantidades de oxigênio. Estudando as interações com membranas contendo a enzima Na(+), K(+)-ATPase, mostrou-se que as fenotiazinas alteram a estrutura lipídica da membrana, já que aumentam a anisotropia de fluorescência da sonda de membrana DPH. Os resultados da interação das fenotiazinas com resíduos de triptofano da proteína mostraram supressão de fluorescência de mais da metade dos triptofanos, sem transferência de energia. A estrutura local do sítio de ATP na proteína Na(+), K(+)-ATPase, marcado com a sonda fluorescente FITC, não foi afetada pela interação com as fenotiazinas, sugerindo que a localização do sítio de ligação das fenotiazinas com a enzima fica longe do sítio de ATP. / [en] Chlorpromazine (CPZ), fluphenazine (FPZ) and trifluoperazine (TFP) are phenothiazine derivatives, which generate photoproducts under UV irradiation. We observed that CPZ develops three fluorescent fotoproducts under different conditions. Promazine (PZ) that forms from the CPZ photolysis. The chlorine loss is one of the main pathways for photoproduct formation and it seems to be a requirement for development of CPZ dimers or trimers. The sulfoxide species with fluorescence peak at (aprroxomately) 370 nm develops in the presence of oxygen only in acid conditions. Another fluorescent species with structured emission and maximum at 352 nm develops primarily in the absence of oxygen. It was observed that the development rates of all fluorescent photoproduct are greater under acidic conditions. FPZ and TFP presented the same fluorescent photoproduct (emission (approximately) 410 nm), which develops in the presence of O2 with the same characteristics as the sulfoxide derivative. The fluorescence of the TFP photoproduct was tested as a UV sensor and a sensor for detection of small amounts of oxygen. Studying the interactions with Na+, K+-ATPase enriched membranes, phenothiazines were shown to modify the membrane lipid structure since they increased the fluorescence anisotropy of the membrane probe DPH. The results of phenothiazine interaction with tryptophan residues of the enzyme showed fluorescence quenching of (approximately) 50% of the tryptophan residues, without energy transfer. The local structure of the Na(+), K(+)-ATPase ATP binding site, labeled with FITC, was not affected by the interaction with the phenothiazines, suggesting that the phenothiazine sites are far from the ATP binding site.

[pt] Norfloxacina (NOR) é um antibiótico e antitumoral sintético da classe das fluorquinolonas. A carga elétrica de seu íon molecular é determinada principalmente pelo estado de protonação de dois grupos funcionais: o grupo carboxílico no anel quinolônico e a amina do grupo piperazinil. O equilíbrio de espécies com diferentes estados de protonação influencia tanto as propriedades espectroscópicas quanto a atividade farmacológica da droga. NOR apresenta-se positivamente carregada em meio ácido, neutra ou zwiteriônica em meio neutro e negativamente carregada em meio básico. No presente trabalho, investigamos as propriedades espectroscópicas da norfloxacina, através de absorção ótica e de fluorescência estacionária e resolvida no tempo, em soluções aquosas de diferentes pH e em diferentes solventes orgânicos. Parâmetros fotofísicos como coeficiente de absorção molar, deslocamento de Stokes, rendimento quântico, e tempo de vida de fluorescência foram obtidos. O deslocamento de Stokes e a frequência de emissão foram analisados em 16 solventes, agrupados principalmente em solventes próticos e apróticos, levando em consideração efeitos gerais, como a polarizabilidade de orientação dos solventes, e efeitos específicos. Foi observado que, apesar de os espectros de absorção UV-visível não apresentarem diferenças substanciais na maioria dos solventes, o deslocamento de Stokes e, especialmente, o rendimento quântico de fluorescência são fortemente afetados pelo solvente. Foram construídos gráficos de Lippert, do desvio de Stokes ou da frequência de emissão como função da polarizabilidade de orientação do solvente. Mesmo introduzindo correção para transferências de carga fotoinduzidas, segundo a teoria de Weller, não foram obtidas boas correlações. Por outro lado, para a maioria dos solventes, encontrou-se correlação entre os desvios de Stokes e os valores do parâmetro ET(30) da escala empírica de polaridades elaborada por Reichardt e baseada no forte solvatocromismo da absorção do corante betaína 30. Decaimentos de fluorescência de NOR nos diferentes solventes foram obtidos por contagem de fótons e foram ajustados com expressão para distribuição de tempos de vida em torno de um único tempo, ou de múltiplas exponenciais no caso de mais de um tempo de vida. Foram também estudadas absorção e fluorescência de NOR em misturas binárias de solventes: etanol-tampão e DMSO-tampão, com tampões de pH 4.2 e 7.5. As curvas obtidas para as modificações no rendimento quântico em função da proporção de tampão na mistura são características de efeitos específicos de solventes e apontam o equilíbrio de protonação-desprotonação dos grupos amina e carboxílico como tendo papel fundamental no rendimento quântico e no deslocamento de Stokes. Os resultados mostraram que, sendo a fluorescência de NOR particularmente sensível a pequenas quantidades de solventes orgânicos, especialmente em pH fisiológico, constitui um importante sensor espectroscópico para sondar interações do antibiótico com moléculas biologicamente relevantes. / [en] Norfloxacin (NOR) is a synthetic antibiotic and antitumoral drug of the class of fluoroquinolones. The electric charge of this molecular ion is mainly determined by the protonation equilibrium of two functional groups: the carboxyl of the quinolone heterocycle, and the distal amine of the piperazinyl group. The equilibrium of species with different charge distributions influences both the spectroscopic properties and pharmacological activity of the drug: NOR is positively charged in acidic medium, neutral or zwitterionic in neutral medium, and negatively charged in basic medium. In the present work, we investigated the spectroscopic properties of norfloxacin using UV-vis optical absorption, and steady state and time-resolved fluorescence in different aqueous solutions and organic solvents. Photophysical parameters such as molar absorption coefficients, Stokes shifts, quantum yields, and fluorescence lifetimes were obtained. The Stokes shift and the emission frequency were analyzed in 16 solvents, mainly grouped as protic and aprotic solvents, taking into account general effects of the solvents, such as orientation polarizability, and specific effects. It was observed that, although the UV-vis absorption spectra do not present substantial difference in most solvents, the Stokes shift and specially the fluorescence quantum yield are strongly affected by the solvent. Lippert plots of the Stokes shift and the emission frequency versus solvent orientation polarizability were constructed. Even introducing a correction for photoinduced charge transfer, according to the Weller’s theory, a good correlation was not found. On the other hand, a good correlation was found between the Stokes shift and the parameter ET(30), of the empirical scale developed by Reichardt and based on the strong solvatochromism of the betain 30 dye. Fluorescence decays in different solvents were obtained using time correlated single photon counting (TCSPC) and were fitted with the expression for lifetime distribution around a single lifetime, or using a multiexponential expression in the case of more than one lifetime. Optical absorption and fluorescence of NOR were also studied in binary mixtures of solvents: ethanol-buffer and DMSO-buffer, with pH 4.2 and 7.5 buffers. The curves of the fluorescence intensity as a function of the proportion of buffer in the mixture are characteristic of specific solvent effects, and point out that the protonation-deprotonation equilibrium of the amine and carboxylic groups plays a fundamental role in determining the quantum yield and the Stokes shift. The results showed that the fluorescence of NOR is an important spectroscopic sensor to explore interactions with biologically relevant molecules, since it is particularly sensitive to small amounts of organic solvents, especially at physiological pH.