Orientador: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Resumo: A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (Antimicrobial Photodynamic Therapy - aPDT), tem sido utilizada como um tratamento complementar na doença periodontal (DP). Ela combina um fotossensibilizador (FS) com uma fonte de luz que induz a produção de espécies reativas de oxigênio que elimina células microbianas. O objetivo deste trabalho foi avaliar, in vivo, os efeitos da aPDT (com o FS ftalocianina de zinco tetracarboxi-N-metilglucamina - 10μg/mL e luz LED vermelho - 655mn, 0,45W de potência), coadjuvante a Raspagem e Alisamento Radicular (RAR) e como monoterapia, além de verificar as respostas e alterações teciduais da DP induzida em ratos, pelas avaliações: microtomográfica, histométrica, estereométrica e histológica. Ligaduras foram inseridas nos sulcos dos segundos molares superiores para indução da DP. No Estudo 1, as ligaduras permaneceram por 15 dias e foram removidas para aplicar os tratamentos e no Estudo 2, as ligaduras foram colocadas por 7 dias e continuaram em posição por todo o experimento. 40 animais foram utilizados no Estudo 1 e distribuídos em 4 grupos: DP (Somente indução da doença, sem tratamento); RAR (Indução e tratamento básico periodontal); aPDT (Indução e aplicação da aPDT - FS ftalocianina de zinco tetracarboxi-N-metilglucamina e luz LED vermelho); RAR+aPDT (Indução, tratamento básico periodontal e aplicação da aPDT). 42 animais foram utilizados no Estudo 2 e divididos também em 4 grupos: FS (Tratamento somente com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Antimicrobial Photodynamic Therapy (PDT) is a minimally invasive method consisting in the application of a photosensitive dye, which is subsequently stimulated by a light source and reacts with oxygen, producing reactive species. The aim of this study was to evaluate in vivo, the aPDT effects (with the PS zinc tetracarboxy-N-metylglucamine phthalocyanine 10μg/mL, and red LED light with 655nm), as adjuvant treatment to Scaling Root and Planing (SRP) and as monotherapy and verify the responses and tissue changes after aPDT application in PD-induced rats by microtomographic, histometric, stereometric and histological evaluations. Ligatures were placed around the second maxillary molars for PD induction. In Study 1, the ligatures were placed for 15 days and then they were removed. On the following day the treatments were performed. In Study 2, the ligatures were placed for 7 days and remained in position throughout the periods. Forty animals were used in Study 1 and they were divided into 4 groups: PD (disease induction only, without treatment); SRP (induction and basic periodontal treatment); PDT (Induction and application of photodynamic therapy); SRP+PDT (induction, application of photodynamic therapy and basic periodontal treatment). Forty-two animals were used in Study 2 and they divided into 4 groups: PS (Treatment with zinc tetracarboxy-N-metylglucamine phthalocyanine only); Light (Treatment with red LED light irradiation only); aPDT (Treatment with photodynamic therapy - ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ana Cláudia Pavarina / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da terapia fotodinâmica antimicrobiana associada (aPDT) ao metronidazol (MTZ) em biofilmes periodontopatogênicos. Para tal finalidade, foram realizadas as seguintes etapas: (1) determinação do tempo de adesão (24 e 48 horas) e formação de biofilme mono e duo-espécie (3, 5 e 7 dias) de Fusobacterium nucleatum (NCTC 11326) e Porphyromonas gingivalis (ATCC 33277); (2) aplicação da aPDT mediada por PDZ associada ao MTZ em biofilmes mono-espécie de F. nucleatum e P. gingivalis. Foram avaliadas diferentes concentrações do PDZ (50, 75 e 100 mg/L) e dose de luz de 50 J/cm2 (660nm). Após a aplicação da aPDT, os biofilmes foram incubados com diferentes concentrações do MTZ (MIC, 50x MIC e 100x MIC) por 24 horas. Os grupos controles positivos (L-F-) não receberam fotossensibilizador e não foram iluminados. A viabilidade dos microrganismos após os tratamentos foi avaliada por meio da contagem de UFC/ml. Os resultados demonstraram que o período de adesão de 24 horas, seguido de 5 dias de formação de biofilme foi satisfatório para a obtenção de biofilmes maduros mono-espécie. Para F. nucleatum, os resultados demonstraram que aPDT 75 mg/mL associado com MTZ 100x MIC e aPDT 100 mg/L associado com MTZ nas concentrações de 50x MIC e 100x MIC reduziu significativamente o número de UFC/mL, 2,99; 2,9 e 3,94 Log10 respectivamente. Para P. gingivalis, a redução mais significativa de UFC/mL foi obtida quando a associação de aPDT 100 mg/L e MTZ 100x MIC ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the efficacy of metronidazole (MTZ) associated antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) on periodontopathogenic biofilms. For this purpose, the following steps were performed: (1) determination of adhesion period (24 and 48 hours) and single and duo species biofilm formation (3, 5 and 7 days) of Fusobacterium nucleatum (NCTC 11326) and Porphyromonas gingivalis (ATCC 33277); (2) Photodithazine ® (PDZ)- mediated aPDT in association with MTZ in single-specie biofilms of F. nucleatum and P. gingivalis. Different concentrations of PDZ (50, 75 e 100 mg/L) and light dose of 50 J / cm2 (660nm) were evaluated. After application of aPDT, the biofilms were incubated with different concentrations of MTZ (MIC, 50x MIC and 100x MIC) for 24 hours. Positive control groups (L-F-) received no photosensitizer and were also not illuminated. The viability of the microorganisms after the treatments was evaluated by counting CFU/ml. The results demonstrated that the 24 hours adhesion period followed by 5 days of biofilm formation was satisfactory for obtaining a mature biofilm in single-specie. For F. nucleatum, the results demonstrated that 75 mg/L aPDT associated with MTZ 100x and 100 mg/mL aPDT associated with MTZ at 50x MIC and 100x MIC concentrations significantly reduced the number of CFU/mL, 2.99; 2.9 and 3.94 Log10 respectively. For P. gingivalis, the greatest reduction of CFU/mL was obtained when the association of aPDT 100 mg/L and MTZ 100x MIC was p... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ana Claudia Pavarina / Resumo: O estudo tem como objetivo avaliar a susceptibilidade ao fluconazol e a expressão de genes de virulência e envolvidos na síntese de ergosterol de cepa de Candida albicans resistente a fluconazol (ATCC 96901) presentes nas línguas de camundongos submetidos à aPDT associada a Nistatina. Para isso, colônias recuperadas de animais submetidos ao tratamento com aPDT e Nistatina (NIS) bem como a associação (NIS+aPDT e aPDT+NIS), foram armazenadas em glicerol 50% e utilizadas para o Teste de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM). Além disso, as línguas dos animais submetidos aos tratamentos foram armazenadas em RNAlater (RNAlater Tissue Collection: RNA Stabilization Solution Protocol Ambion®) em freezer -80°C para avaliação da expressão gênica. Para realização do teste CIM, as cepas foram reativadas em placas de Ágar Sabouraud Dextrose (SDA), cultivadas em estufa 35°C por 48 h e avaliadas seguindo o método de microdiluição em caldo (CLSI) com algumas modificações. Foram realizadas diluições seriadas de fluconazol (variando de 2 a 1024 μg/ml) em meio RPMI 1640 (2 x concentrado), em suspensões (0,5x103 a 2,5x103 UFC/mL). As placas foram incubadas a 35°C e observadas quanto à presença ou ausência de crescimento após 24 h, além disso, foi realizado plaqueamento (CFM). Foram consideradas as menores concentrações de fluconazol que resultaram em inibição de pelo menos 50% do crescimento. A quantificação da expressão gênica foi realizada por meio da técni... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the susceptibility to fluconazole and the expression of virulence genes and involved in ergosterol synthesis of fluconazole resistant strain of Candida albicans (ATCC 96901) present in the mouse's thongue submitted to aPDT associated with Nystatin. For this, colonies recovered from animals submitted to treatment with aPDT and Nystatin (NIS) as well as their association (NIS + aPDT and aPDT + NIS) were stored in 50% glycerol and used for the Minimum Inhibitory Concentration Test (MIC) and Minimum Fungicidal Concentration (MFC). In addition, part of the tongue of the treated animals were stored in RNAlater (RNAlater Tissue Collection: RNA Stabilization Solution Protocol Ambion®) in -80 °C freezer for evaluation of gene expression. To accomplish the MIC test, the strains were reactivate in Sabouraud Dextrose Agar (SDA) plates, grown in a 35 °C oven for 48 h and evaluated using the broth microdilution method (CLSI) with some modifications. Serial dilutions of fluconazole (ranging from 2 to 1024 μg / ml) in RPMI 1640 medium (2x concentrate) were performed in suspensions (0.5x103 to 2.5x103 CFU / ml). The plates were incubated at 35 ° C and observed for presence or absence of growth after 24 h, plating was also performed (CFM). The lowest concentrations of fluconazole that resulted in inhibition of at least 50% growth were consider. The quantification of the gene expression was performed using quantitative Reverse Transcription-quantitative pol... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Ana Claudia Pavarina / Resumo: O fungo Candida albicans, em situações de desequilíbrio imunológico no hospedeiro, pode se tornar um patógeno oportunista e provocar infecções. Tendo em vista a resistência que os microrganismos desenvolveram a fármacos convencionais, a Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (aPDT) vem apresentando resultados promissores como uma terapia alternativa. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial que aPDT possuiu em desenvolver resistência, tolerância ou susceptibilidade em C. albicans em associação com o Photodithazine (PDZ- 25 µg/L; 660 nm; 18 J/cm2) e Curcumina (CUR- 40 µg/L; 455 nm; 18 J/cm2) plaqueados em meio sem e com suplementação de Fluconazol (8 µg/L). C. albicans (ATCC 90028) em culturas planctônicas e biofilme foram submetidas à aplicações sucessivas de aPDT (10 aplicações), como também, a ciclos de recuperação e re-cultivo das colônias que sobreviveram ao tratamento até o momento que não houvesse mais células viáveis para a recuperação e continuação das aplicações. O plaqueamento foi realizado em placas de Ágar Sabourand Dextrose suplementadas ou não com Fluconazol, e os valores das unidades formadoras de colônia por mililitro (UFC/mL) foram determinados. O teste de produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) foi realizado nos primeiros e últimos ciclos de aPDT. O perfil biomolecular das células sobrevivetes as aplicações 1, 4 e 7 de aPDT mediada por PDZ foi investigado através do teste de RT-qPCR. Foi observado no grupo tratamento de aPDT (P+L+) mediada por P... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The fungus Candida albicans, in situations of immune imbalance in the host, can become an opportunistic pathogen and cause infections. Because of the resistance that microorganisms have developed to conventional drugs, Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) has shown promising results as an alternative therapy. The main goal of this study was to evaluate the potential of aPDT to develop resistance in C. albicans in association with Photodithazine (PDZ-25 µg/L; 660 nm; 18 J/cm2) and Curcumin (CUR-40 µg/L; 455 nm; 18 J/cm2) grown with and without Fluconazole (8 µg/L). C. albicans (ATCC 90028), in planktonic and biofilm cultures, were submitted to successive applications of aPDT (10 applications), as well as cycles of recovery and re-cultivation of colonies that survived treatment until no longer viable cells were present for application recovery and continuation. Plating was performed on Sabourand Dextrose Agar plates supplemented or not with Fluconazole, and values of colony forming units per milliliter (CFU/mL) were determined. The reactive oxygen species (ROS) production test was performed in the first and last cycles of aPDT. The biomolecular profile of surviving cells as applications 1, 4 and 7 of PDZ-mediated aPDT was investigated using the RT-qPCR test. PDZ-mediated treatment of aPDT (P+L+) was observed to reduce approximately 6.8 log10 in planktonic cultures and approximately 6.2 log10 in C. albicans biofilm in both methodologies used. In the aPDT (C+L+) treatment gr... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Alessandra Nara de Souza Rastelli / Resumo: A inativação fotodinâmica é descrita como terapêutica promissora na inativação de micro-organismos bucais. A curcumina é um fotossensibilizador com característica hidrofóbica, e que pode comprometer a sua eficiência. Dessa forma, torna-se relevante o desenvolvimento de estudos que verifiquem o seu efeito quando conjugada a micelas poliméricas. O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade da inativação fotodinâmica em biofilme de Streptococcus mutans utilizando-se curcumina, conjugada ou não, a micelas como fotossensibilizador, irradiado por luz LED. Realizou-se a caracterização das micelas poliméricas nas concentrações de 0.1 e 0.5% de curcumina, por meio do Potencial Zeta, determinação do espalhamento de luz dinâmico, microscopia eletrônica de transmissão e a investigação dos mecanismos envolvidos na reação fotodinâmica. Após, foi selecionada a melhor concentração a ser utilizada na inativação fotodinâmica sobre biofilme de Streptococcus mutans. As concentrações inibitória mínima (CIM) e bactericida mínima (CBM) foram determinadas. Foram induzidos em placa de 96 poços biofilmes single espécie. Os biofilmes foram irradiados uniformemente com sistema de iluminação a LED (Biotable, MMO) em comprimento de onda de 460 nm com dose/densidade de energia de 15 J/cm2 . Unidades formadoras de colônia (UFC/mL), a partir da CIM e CBM foram obtidas. Por meio de microscopia confocal utilizando-se corante BacLight® LIVE/DEAD foi avaliado a viabilidade celular nos biofilmes. Diferente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Photodynamic inactivation is described as promising therapy in the inactivation of oral microorganisms. Curcumin is a hydrophobic photosensitizer, which can compromise its efficiency. Thus, the development of studies that verify its effect when conjugated to polymeric micelles becomes relevant. The objective of this study was to evaluate the effectiveness of photodynamic inactivation in Streptococcus mutans biofilm using curcumin, conjugated or not, to micelles as photosensitizer, irradiated by LED light. The characterization of the polymeric micelles in the 0.1% and 0.5% concentrations of curcumin was carried out by Zeta Potential, determination of dynamic light scattering, transmission electron microscopy and investigation of the mechanisms involved in the photodynamic reaction. After that, the best concentration to be used in photodynamic inactivation on Streptococcus mutans biofilm was selected. Minimum inhibitory concentrations (MIC), minimal bactericidal (MBC) were determined. Single-species biofilms were induced in 96-well plate. The biofilms were uniformly irradiated with a LED illumination system (Biotable, MMO) at wavelength of 460 nm with dose or energy density of 15 J/cm2. Colony forming units (CFU / mL) from CIM and CBM were obtained. By means of confocal microscopy using BacLight® LIVE/DEAD dye, cell viability in biofilms was evaluated. Different groups were analyzed: FSM+L+ (Photosensitizer conjugate micelles Pluronic + Light), FSD+L+ (Photosensitizer in 10% DM... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Coorientador: Valdir Gouveia Garcia / Coorientador: Letícia Helena Teodoro / Banca: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Alvaro Francisco Bosco / Banca: Cláudio Aparecido Casatti / Banca: João Batista César Neto / Banca: Márcio Zaffalon Casati / Resumo: Este estudo avaliou histomorfometricamente, imunoistoquimicamente e pela reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa em tempo real (qRT-PCR) os efeitos da Terapia com Laser em Baixa Intensidade (LLLT) e da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) adjuvantes ao tratamento mecânico da periodontite experimental (PE) em ratas com deficiência de estrógeno e sob influência sistêmica da nicotina. Foram utilizadas 360 ratas, divididas em 4 grupos: Grupo A (SH-vei) normais, Grupo B (SH-nic) - normais tratadas com nicotina, Grupo C (OVX-vei) - ovariectomizadas e Grupo D (OVX-nic) - ovariectomizadas tratadas com nicotina. A administração de nicotina foi iniciada nos animais do Grupo B (SH-nic) e Grupo D (OVX-nic) 30 dias antes da indução da PE. Os animais dos Grupos OVX-vei e OVX-nic foram submetidos à ovariectomia (OVX) bilateral 21 dias antes da PE realizada por adaptação de fio de algodão ao redor dos primeiros molares inferiores direitos e esquerdos. Após 7 dias, a ligadura foi removida e os animais subdivididos de acordo com os seguintes tratamentos locais realizados nos molares inferiores direitos e esquerdos: RAR - Raspagem e alisamento radicular e irrigação com soro fisiológico; LLLT - RAR e irrigação com soro fisiológico associada à LLLT; aPDT- irrigação com azul de toluidina-O (TBO) e após 1 minuto, irradiação com laser em baixa intensidade. Foram eutanasiados 10 animais de cada subgrupo, aos 7, 15 e 30 dias após o tratamento local. A perda óssea (PO) na furca foi avaliada por meio de análises histomorfométrica e imunoistoquímica. A expressão gênica das citocinas TNF-α, IL-1β e IL-6 foram avaliadas pela qRT-PCR. Os dados foram submetidos à análise estatística (α = 5%). Os animais do Grupo OVX-nic apresentaram maior PO comparativamente ao grupo SH-vei (p<0,05). O tratamento... / Abstract: This study evaluated histomorphometrically, immunohistochemically and by polymerase chain reaction via real-time reverse transcriptase (qRT-PCR) the effects of Laser Therapy in Low Intensity (LLLT) and antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) adjuncts to mechanical treatment of periodontitis experimental (PE) in rats with estrogen deficiency and under the influence of systemic nicotine. It was used 360 rats divided into 4 groups: Group SH-veh: sham treated with saline (vehicle); Group SH-nic: sham treated with nicotine; Group OVX-veh: ovariectomized treated with saline (vehicle) and Group OVX-nic: ovariectomized treated with nicotine. Nicotine was administered to groups SH-nic and OVX-nic 30 days before the induction of PE. The animals in Groups OVX-veh and OVX-nic underwent ovariectomy (OVX) bilaterally 21 days before PE performed by adaptation of cotton thread around the first molars right and left. After 7 days, the ligature was removed and the animals divided according to the following local treatments performed in the right and left molars: RAR - Scaling and root planing and irrigation with saline; LLLT - RAR and irrigation with saline associated with LLLT; aPDT - irrigation with toluidine blue O (TBO) and after 1 minute irradiation with LLLT. Ten animals were euthanized of each group at 7, 15 and 30 days after treatment site. Bone loss (BL) in the furcation was evaluated by histomorphometric and immunohistochemical analyzes. The gene expression of TNF-α, IL-1β and IL-6 were measured by qRT-PCR. Data were subjected to statistical analysis (α = 5%). The animals of the OVX-nic group showed higher BL group compared with SH-vei (p <0,05). Local treatment with aPDT showed BL reduced, decreased expression of RANKL and the number of TRAP-positive cells and increased the expression of OPG and the number... / Doutor

O objetivo do estudo foi avaliar o efeito de repetidas aplicações da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) adjuvante ao tratamento periodontal não cirúrgico em pacientes fumantes. Foram selecionados 20 indivíduos fumantes com diagnóstico clínico de periodontite crônica. O estudo foi do tipo boca dividida, sendo um lado utilizado a TFDa associada à raspagem e alisamento radicular (RAR) e no outro apenas RAR. Foi utilizado laser com 660nm de comprimento de onda associada ao fotosensibilizador fenotiazida e as aplicações foram realizadas em 4 episódios (dias 0, 2, 7 e 14). Todos os pacientes foram acompanhados por 90 dias. As avaliações clínicas de índice de placa (IP), profundidade de sondagem (PS), nível clínico de inserção (NCI), sangramento à sondagem (SS) e sangramento marginal (SM) foram realizadas no baseline, 0, 30 e 90 dias após a execução do tratamento. Foi realizada análise microbiológica para contagem de 40 espécies bacterianas da amostra subgengival da placa bacteriana (Checkerboard DNA-DNA hybridization). Níveis das citocinas do fluido crevicular gengival foram avaliados (Interleucina-1&beta;, Interleucina-10 e Fator de Necrose Tumoral Alpha). Os dados obtidos foram analisados estatisticamente. Em geral não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos (p &lt0,05) nos parâmetros clínicos, microbiológicos e imunológicos 90 dias após o tratamento. O tratamento periodontal com RAR + TFDa em múltiplos episódios não promoveu benefícios adicionais à RAR no tratamento não cirúrgico da periodontite crônica em fumantes sem o uso de antibióticos sistêmicos / The aim of this study was to investigate the additional influence of multiple applications of antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) in smokers without use of systemic antibiotics. Twenty smokers with chronic periodontitis were treated in a split-mouth design study with aPDT adjunct to Scaling and Root Planing (SRP) or SRP only. aPDT was performed by using a laser light source with 660 nm wavelength associated with a photosensitizer. The applications were performed in four episodes (at days 0, 2, 7 and 14). All patients were monitored for 90 days. Plaque index, probing depth, clinical attachment level, bleeding on probing and marginal bleeding were performed at baseline, 0, 30 and 90 days after the SRP. Counts of 40 subgingival species in plaque samples were monitored (Checkerboard DNA-DNA hybridization). Gingival crevicular fluid and subgingival plaque samples were collected (Interleukin 1&beta;, Interleukin 10 e Tumor necrosis factor. Data obtained were statistically analyzed. aPDT as an adjunct to SRP did not demonstrate statistically significant advantages on clinical parameters when compared with SRP alone. In general no statistic significant differences between groups were observed (p &lt0.05). Levels of anti-inflammatory cytokines and bacterial species were comparable in both groups at day 90 after treatment. Periodontal treatment with SRP + aPDT in multiples episodes was not able to improve results in the non-surgical treatment of chronic periodontitis in smokers when compared SRP alone, without the use of systemic antibiotics

Orientador: Celso Valentim Santilli / Resumo: A incidência de infecções cutâneas causadas por agentes bacterianos resistentes ao tratamento convencional com antibióticos tornou-se um grande problema de saúde pública. Algumas abordagens terapêuticas alternativas têm sido propostas, dentre elas a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) e hipertermia magnética (HM). A aPDT envolve a geração de espécies reativas de oxigênio (EROs) por meio da combinação de luz, oxigênio molecular e um agente fotossensibilizador (FS), e a HM promove o aumento da temperatura de uma região anatômica submetendo nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro (SPIONPs) a um campo magnético alternado (CMA). O FS de escolha para este estudo foi a curcumina (CUR), muito usado em aPDT, porém tem a fotoavidade fortemente afetada em meios aquosos devido à tendência a agregação. Visando evitar isto, além de promover a melhoria da administração da CUR e a combinação de aPDT e HM num único material foi proposto neste trabalho a síntese de conjugados SPIONP-curcumina (Magh-CUR), assim como a sua avaliação em aPDT e HM contra Staphylococcus aureus em fase planctônica. Este material magnético foi preparado por uma metodologia de coprecipitação alcalina seguida por uma etapa de conjugação com a CUR. Os conjugados foram caracterizados por difração de raios X, microscopia eletrônica de transmissão, potencial zeta, espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier, termogravimetria, magnetometria e ensaios de HM. Os resultados evidenciaram que ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The incidence of cutaneous infections caused by bacteria resistant to conventional antibiotic treatment has become a major public health problem. Some alternative therapeutic approaches have been proposed, among them antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) and magnetic hyperthermia (MH). The aPDT involves the generation of reactive oxygen species (ROS) by using the combination of light, molecular oxygen and a photosensitizing agent (PS), and MH promotes temperature increase of an anatomic region by subjecting superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPIONPs) to an alternating magnetic field (AMF). The PS of choice for this study was curcumin (CUR), widely used in aPDT, but still has its photoactivity strongly affected in aqueous media due to the tendency of aggregation. In order to solve this problem and to promote the improvement of the administration of CUR, we propose the combination of CUR and SPIONPs of maghemite in a single material. Therefore, the objective of this work was to synthesize a SPIONPs-curcumin conjugate (Magh-CUR) and, mediated by the aPDT, to evaluate it against Staphylococcus aureus in the planktonic phase. This magnetic material was prepared by an alkaline coprecipitation method followed by a conjugation step with CUR. The conjugates were characterized by X-ray diffraction, electron transmission microscopy, zeta potential, infrared spectroscopy with Fourier transform, thermogravimetry, magnetometry, MH assays. The characterizations showed that the ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A técnica do enxerto de granulação óssea tem demonstrado bons resultados na recuperação do periodonto e na melhora dos parâmetros clínicos dos dentes com comprometimento periodontal. Pouco se sabe porém, a respeito de qual tipo de tratamento de superfície radicular se faz mais condizente com o emprego dessa técnica. O objetivo dessa pesquisa foi avaliar a proliferação de células de granulação óssea sobre fragmentos radiculares com os seguintes tratamentos de superfície: Controle - somente raspagem, EDTA, terapia fotodinâmica (PDT- laser InGaAIP - 30mW, 30s, 45J/cm², 660nm + azul de toluidina), e ácido cítrico com tetraciclina. Todos os grupos teste receberam previamente tratamento com raspagem e alisamento com 20 golpes de cureta. Células de granulação óssea foram cultivadas em quadruplicata sobre os fragmentos por um período de 24, 48 e 72 horas. Após esse período de cultivo os fragmentos foram fixados para análise em microscópio eletrônico de varredura (MEV). Cinco campos por fragmento foram usados para a visualização e contagem de células aderidas a superfície radicular (centro, campo superior direito e esquerdo e campo inferior direito e esquerdo). A análise da calibração do examinador foi feita através de uma combinação de testes estatísticos como erro casual de Dahlberg, erro sistemático e correlação de Pearson (p<0,05). A análise da amostra foi realizada através do ANOVA de medidas repetidas complementado por Tukey, com nível de significância de 5% (p<0,05). Os resultados demostraram diferenças estatisticamente significantes, quanto ao numero de células, para as superfícies tratadas com terapia fotodinâmica no período de 72 h (p<0,05). Através de nossos resultados concluímos que o tratamento radicular com terapia fotodinâmica favorece a proliferação de células de granulação óssea humanas in vitro. / The osseous granulation graft has been demonstrating good results on the periodontal healing, resulting the improvement of clinical periodontal parameters. There are very few knowledge about what kind of dental surface would be more proper for the application of this technique. The aim of this study was to evaluate the proliferation of osseous granulation cells on human root fragments treated by different techniques as scaling and root planning (control), citric acid plus tetracycline, EDTA and photodynamic therapy (PDT InGaAIP, 45J/cm², 30mW, 30s, 660nm, toluidine blue O). All test groups were previously treated which 20 curette strikes. Osseous granulation cells was culture in quadruplicate on these fragments for 24h, 48h and 72h. After that, all fragments were fixed and prepared for analysis in Scanning Electron Microscopy (SEM). Aiming to counting the cells adhered on the roots, we obtained electron micrographs of 5 areas (center, upper right and left field, lower right and left field). The examiner calibration was analyzed by Dahlberg Casual Error measurement, systematic error test and Pearson correlation test (p<0.05). Statistical analysis was performed by ANOVA, followed by Tukey test, with a 5% level of significance (p<0.05). There were significant differences in cell number after 72h culture in favor of PDT group (p<0,05). We can conclude that the surface treatment of roots which PDT favor the proliferation of osseous granulation cells in vitro.

A candidose bucal acomete grande número de pessoas mundialmente, sendo associada a condições como imunossupressão, radioterapia, tabagismo, higiene bucal, idade, xerostomia e uso de próteses removíveis. Uma importante abordagem terapêutica para essas infecções consiste nos medicamentos antifúngicos, que podem apresentar efeitos colaterais e resultar na resistência dos patógenos. Nesse contexto, a terapia fotodinâmica (PDT) faz-se interessante como alternativa capaz de minimizar essas limitações. Protocolos de PDT poderão ser mais facilmente assimilados à prática clínica se empregarem materiais já aprovados para uso odontológico. Sendo assim, este estudo propõe avaliar o uso de PDT com eritrosina como fotossensibilizador, irradiada por um LED azul, usando-se um modelo animal. Quarenta camundongos tiveram candidose induzida sobre o dorso da língua por meio de imunossupressão e inoculação com Candida albicans. Após estabelecimento da lesão durante cinco dias, os animais receberam um dentre quatro tratamentos possíveis: aplicação da eritrosina 5% seguida de irradiação pelo LED (E+L+); aplicação de eritrosina, somente (E+L-); salina seguida pela irradiação (EL+); e somente salina (E-L-). A fim de distinguir possíveis efeitos colaterais, os mesmos tratamentos foram aplicados em 12 camundongos sem a indução de candidose. O número de unidades formadoras de colônia de C. albicans foi contado após o tratamento, e a mucosa foi submetida à análise histológica para determinar o grau de inflamação. Os dados dos grupos foram comparados por meio de ANOVA e teste de Kruskal-Wallis, (&alpha;=0,05). Não foram detectadas diferenças significativas entre os grupos testados quanto à contagem de colônias de C. albicans e o grau de inflamação. O infiltrado inflamatório foi classificado como discreto na maioria dos casos. Os animais com candidose bucal induzida e os saudáveis que foram submetidos aplicação de eritrosina 5% e irradiação pelo LED apresentaram infiltrado inflamatório mais acentuado e lesões mais evidentes na camada epitelial, sugerindo que este protocolo ocasionou danos aos tecidos orais. / Oral candidosis affects many people worldwide and is associated with conditions such as immunosuppression, radiation, smoking, oral hygiene, age, xerostomia and use of removable prostheses. An important therapeutic approach for these infections consists of antifungal drugs, which have side effects and can result in the resistance of pathogens. In this context, photodynamic therapy (PDT) is an interesting alternative able to overcome those limitations. PDT protocols can be more easily assimilated in clinical practice if they employ materials already approved for use in dentistry. Thus, this study evaluate the PDT with the use of erythrosine as a photosensitizer, irradiated by a blue LED light, using an animal model. Forty mice had candidosis induced on the tongue by the immunosuppression and inoculation with Candida albicans. After five days that the lesion is established, the animals received one of four possible treatments: application of 5% erythrosine and irradiation by the LED (E+L+); erythrosine application, only (E+L- ); saline followed by irradiation (E-L+); and only saline (E-L-). In order to distinguish potential side effects, the same treatments were applied in 12 mice without induced candidosis. Colony-forming units (CFU) of C. albicans were counted after treatment, and the mucosa was subjected to histological analysis to determine the degree of inflammation. The data of the groups were compared using ANOVA and Kruskal-Wallis test (&alpha;=0.05). No significant difference was detected among the groups tested for the number of CFU of C. albicans and the degree of inflammation. The inflammatory infiltrate was classified as mild in most cases. Animals with induced oral candidosis and the healthy ones exhibited more pronounced inflammatory infiltrate and lesions in the epithelial layer following PDT by 5% erythrosine and irradiation by the LED light. Such findings suggest that this protocol resulted in damage to oral tissues.