61 |
Germinação conidial em Metarhizium anisopliae (Metsch.) SorokinMatos, Admir Josafa Arrais de 10 August 1988 (has links)
Orientador : Claudio Luiz Messias / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T19:58:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Matos_AdmirJosafaArraisde_D.pdf: 6171342 bytes, checksum: cf3f04c36c690924ab8bb219c92f8fc0 (MD5)
Previous issue date: 1988 / Resumo: Estudou-se a germinação e alguns aspectos da morfologia e fisiologia de Metarhizium anisopliae (METSCH.) SOROKIN, utilizando-se meios de cultura de diversas composições e também substâncias inibidoras de diversas naturezas. Observou-se a formação e o crescimento de tubos germinativos em conidios de linhagens selvagens, mutantes e diplóides. Verificou-se nos estudos iniciais que quando os conidios de M.anisopliae produzidos em meio mínimo, em culturas de superfície, eram expostos a ambiente ventilado, perdiam cerca de 50% de seu peso, pela evaporação da água em 6 horas. Verificou-se também que quando conídios produzidos de igual modo eram inoculados em meio completo líquido aumentavam seu volume em mais de 6 horas.Os estudos subsequentes mostraram que em 12 horas de incubação, mais de 85% de conídios germinaram nos vários meios testados, tanto sólidos como liquidas. Este tempo pode ser considerado como o tempo mínimo de germinação (TGm), para a variedade anisopliae. Os estudos também sugeriram que em meio liquido e à temperatura ambiente, uma concentração de 10_ conidios/ml, parece ser em algumas situações a mais indicada. Houve variabilidade quanto ao número de tubos germinativos em conídios de M.anisopliae num determinado tempo. A germinação e o crescimento de tubos germinativos podem ser representados por um modelo exponencial. Considerando também os vários meios de cultura testados, o meio mínimo + extrato de levedura se mostrou um meio basal para a germinação de conidios e crescimento de co1ônias. Foram ensaiadas várias substâncias inibidoras da germinação de conídios como, glicerol, polietilenoglicol, benzeno, clorofórmio, m-cresol, álcool éter + alquil-sulfato de sódio e cicloheximida, cujos efeitos permitiram em muitos casos um maior sincronismo na germinação. Algumas destas substancias além de osmoreguladoras, também produziram efeitos morfogênicos, aumentando o número de tubos germinativos dentro de um determinado tempo. Com m-cresol, o efeito morfogênico foi mais duradouro. Os mutantes da 1inhagem E9 não diferiram no modo de germinação quando comparados com a linhagem selvagem de origem, o mesmo não acontecendo com os mutantes de F84. A germinação de conídios dos diplóides, revelou cada um deles germinando de maneira diferente. O trabalho permitiu concluir que a germinação de conídios é um processo extremamente complexo, que segue um programa genético, o qual se expressa no tempo e no espaço e influenciado por diversos fatores ambientais / Abstract: Were studied on the germination of the Metarhizium anisopliae (METSCH) SOROKIN, and several aspects the morphology and physiology, utilizing culture media of various compositions and also inhibiting substances of various natures. The formation and growth of germinative tubes were observed in conidia of wild strains, mutant and diploid. The initial studies showed that when conidia the M.anisopliae produced in a minimum medium, in superficial cultures, were exposed to a ventilated environment they would loose 50% of their weight, by water evaporation in 6 hours. It was noticed also that when conidia produced in an equal manner were inoculated in a complete liquid medium they would increase their volume to more than 50% in 6 hours.The subsequent studies showed that in 12 hours of incubation more than 85% of the conidia germinated in the various tested media, such as for solids, as for liquids. This length can be considered as the minimum time for germination (TGm), for the anisopliae variety. The studies also suggested that in a liquid medium at the environmental temperature, a concentration of 10_ conidia/ml, it seems to be in some situations the most indicated. There was variability as to the number of germinative tubes in M.anisopliae conidia in a determined period of time. The germination and growth of germitiative tubes can be represented by an exponential model. Considering also the various tested culture media, the minimum + yeast extract demonstrated to be a basal medium for germination of conidia and growth of colonies. Various inhibiting substances of the conidia germination were tested, as glycerol, poliethileneglycol, benzene, chloroform, m-cresol, alcohol ether + alquil-sulphate of sodium and cicloheximide, being that the effects served in many cases to increase synchronism in germination. Some of these substances, besides being osmoregulators, also produced morphogenic effects, increasing the number of germinative tubes within a certain period of time. With m-cresol the morphogenic effect lasted longer.The mutants of strain E9 did not differ in the germination manner when compared to a wild origen, the same did not occur with the mutants F84. The germination of diploids conidia showed each of them germinating in a different manner. It was concluded by the study that the germination of the conidia is an extremely complex process, following a genetic program, which express in time and space and it is influenced by several environmental factors / Doutorado / Doutor em Ciências
|
62 |
Avaliação do potencial de infecção micorrízica e caracterização genético-citológica de isolados de Pisolithus tinctorius / Potential of mycorrhizal infection, genetic and cytological characterlzation of isolates of PisoJithus tinctoriusMitsunaga, Liliana Keiko 12 December 1991 (has links)
O presente trabalho foi realizado com a finalidade de estudar alguns isolados de Pisolithus tinctorius quanto aos aspectos básicos de crescimento, características citológicas, padrão de esterases e obtenção de protoplastos e quanto ao potencial de infecção desses isolados em espécies de eucalyptus. A caracterização do crescimento em diferentes meios de cultura mostrou que os isolados AC 12, PI 314 e PI 203 apresentaram um bom crescimento em todos os meios testados e não apresentaram diferenças quanto a produção de biomassa nos diferentes meios. Na analise citológica, verificou-se que cada célula micelial possui dois núcleos e a presença de pontes de conexão entre as células. A mitose e similar a que ocorre em outros fungos com agregação dos cromossomos formando duas barras paralelas. Os isolados obtidos de pinus apresentaram um padrão eletroforético de esterases com quatro bandas. Quanto à obtenção de protoplastos, fez-se a avaliação de algumas condições para o isolamento dos mesmos. Quanto aos aspectos mais práticos, foram obtidos e selecionados novos isolados. O problema da falha de micorrização foi eliminado inoculando-se plântulas ao invés de sementes / The present research was carried out in order basic of growth, characteristics, aspects patterns of esterases and cytological protoplast isolation of some isolates of Pisolithus tinctorius as well as their potential of mycorrhizal infection in Eucapyptus. Growth characteristics in different media has shown that the isolates AC 12, PI 314 and PI 203 had good growth in alI of them, while the other ones showed changes in mycelium growth and didn't show a difference in the biomass production. Cytological analysis of these isolates indicated that the hyphae had different widths, each mycelial cell had two nuclei with a diameter of 2.439 μm and the presence of clamp connexion between the cells. The study of the nucIei during the division of somatic cells showed that the mitosis is similar to that which occurs in other fungi, with the chromossomes forming two paraIleI bars.The cromossome number could not be determinated. Pisolithus tinctorius isolated from Pinus showed an eletrophoretic pattern of esterase with four bands. For the Eucalyptus isolates, there were no satisfactory results. An evaluation of different conditions was made for the isolation of protoplasts. Optimal yield were obtained with four day old mycelia, Novozym 234 and the osmotic stabilizer, mannitol. For practical aspects, some strains were evaluated for their potential in mycorrhizal infection on Eucalyptus species in different concentrations of iron. The results were not satisfactory because of the failure to obtain infection of the plants. New strains were isolated and among them AT 501 and AT 502 were selected for Eucalyptus urophylla and E. paniculata and AT 502 and AT 508 for E. torelliana. The other strains did not infect more than 50% of the plants. In order to try to overcome problem the inoculation of a few plants instead inoculation of seeds, was made. With this alteration, problem of non infection was solved, probably because this of the fungi grown on particles of vermiculite were not able to survive during the period of root formation, when inoculated on seeds
|
63 |
Isolamento de uma sequência genômica de Phanerochaete chrysosporium homóloga ao gene de β-glucosidase de Trichoderma reesei / Isolation of a genomic sequence from Phanarochaete chrysosporimu with homology to the β-glucosidase gene from Trichoderma reeseiVallim, Marcelo Afonso 25 February 1994 (has links)
Este trabalho descreve o isolamento e purificação de uma sequência genômica de Phanerochaete chrysosporium. Esta sequência mostrou alta homologia a um fragmento de 860 pb do gene de β-glucosidase de Trichoderma reesei que foi amplificado através da técnica de reação de polimerização em cadeia (PCR). Os ensaios de hibridização contra o DNA genômico de P. chrysosporium digerido com enzimas de restrição (HindIII, SalI, PstI, EcoRI e BamHI) mostraram várias bandas. Uma única banda de, aproximadamente, 6Kb foi verificada na digestão com EcoRI. Essa banda foi isolada e clonada no sítio de EcoRI do bacteriófago λgt11. Desta forma, foi feito um banco genômico enriquecido. Através da triagem deste banco foi possível isolar e purificar clones com alta homologia a sonda molecular. / This work describes the isolation and purification of a genomic sequence from Phanerochaete chrysosporium. This sequence has shown a high homology to an 860 bp β-glucosidase gene fragment from Trichoderma reesei which was amplified through polymerase chain reaction technique and employed as probe. The hybridization assays against Phanerochaete chrysosporium genomic DNA digested with restriction enzymes (Hind 111, SalI, PstI, EcoRI, BamHI) showed several bands. A unique band, about 6 Kb, was verified within the digestion with EcoRI. This band was isolated and cloned into λgt11 bacteriophage EcoRI cloning site, so, this way, an enhanced genomic library was made. Throughout the screening of this library was possible to isolate and purify clones with high homology to the probe.
|
64 |
Efeitos do uso de herbicidas em solo cultivado com citros (Citrus sinensisL. Osbeck) sobre a população de fungos micorrízicos vesículo-arbusculares / Effects the use of herbicides in soils cultivated of with citrus (Citrus sinensisL. Osbeck) on the vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi populationSantos, Cosme Damião dos 28 June 1989 (has links)
A presente pesquisa foi instalada com o objetivo de verificar o efeito do uso de herbicidas residuais bem como os de pós-emergência sobre o número de esporos e índice de colonização de fungos micorrízicos vesículo-arbusculares num Latossolo Vermelho Amarelo, cultivado com citrus (Citrus sinensis L. Osbeck.). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso com 12 tratamentos e 3 repetições. Os tratamentos utilizados com as respectivas doses de i.a./ha foram: bromacil (3.2 kg), terbacil (3.2), simazine (4.0), ametryne (2.25) + secbumetone (2.25), dichlobenil (5.0); diuron (3.2) e bromacil (2.13) + diuron (1.07) aplicados em pré-emergência e paraquat (0.6), glyphosate (1.61) e MSMA (1.77) aplicados em pós-emergência e os tratamento controles. A amostragem do solo foi feita antes da aplicação dos herbicidas pós-emergentes e após a aplicação dos mesmos, aos 2 e 31 dias. Com relação aos herbicidas pré-emergentes, a amostragem do solo foi feita aos 37, 65 e 94 dias após a aplicação dos mesmos. Os esporos de fungos endomicorrízicos foram obtidos através de peneiramento por via úmida. As raízes das plantas foram separadas, coradas e observadas para avaliação de índice de colonização. Para as condições do presente trabalho, não se detectaram diferenças significativas entre o controle e os tratamentos com herbicidas para número de esporos por unidade de solo e índice de colonização de fungos. / This research was carried with the aim to verify the effect of the use of residual herbicides as well as the post-emergence ones over the spores number and colonization rate of V.A. mycorrhizal fungi in a Red Yellow Latosol cultivated with Citrus (Citrus sinesis L. Osbeck). The experimental design used was randomized blocks being 12 treatments and 3 replications. The treatment utilized and the respective doses of a.i./ha were: bromacil (3.2 kg), terbacil (3.2), simazine (4.0) ametryn (2.25) + secbumetone (2.25), dichlobenil (5.0), diuron (3.2) and bromacil (2.13) + diuron (1.07) applied in pre-emergence and paraquat (0.6), glyphosate (1.61) and MSMA (1.77) applied in post-emergence and the controls treatments, without herbicide. The soil sampling was done before the application of the post-emergence herbicide and 2 and 31 days after their application. In relation to the pre-emergence ones the soil sampling was done 37, 65 and 94 days after their application. The spores were collected from the soil samples by wet sieving. The citrus roots were separated, stained and observed for colonization rate evaluation. For the condition of this experiment there was no significative differences among the control and the herbicides treatments for spores number by soil unit and colonization rate.
|
65 |
Isolamento e biologia de novos fungos celulolíticos / Isolation and biology of new cellulolytic fungiBertolin, Aparecido Osdimir 02 October 1987 (has links)
Para viabilizar o aproveitamento da celulose, e necessário sua hidrólise obtendo-se resíduos de glicose; esta hidrólise pode ser ácida ou enzimática. A hidrólise enzimática apresenta algumas vantagens sobre a ácida, embora microrganismos utilizados até agora não sejam extremamente eficientes na produção de celulases. Com o interesse de explorar melhor a nossa microbiota, o presente trabalho se propôs a busca de fungos com alta capacidade de hidrolisar celulose, isolados a partir de duas regiões geográficas diferentes. Foram assim obtidos 20 isolados que foram analisados e comparados com um padrão o Trichoderma reesei QM 9414 considerado como alto produtor de celulases. Foi feito um estudo de aspectos biológicos dos 20 isolados, fixando assim bons parâmetros para estudos posteriores no tocante a classificação e melhoramento genético destes isolados. Especialmente um dos isolados classificado como Trichoderma pseudo conjngii foi considerado promissor por apresentar uma alta taxa de produção de celulases além de apresentar outras características favoráveis para futuros estudos de genética e melhoramento. / For better uses for cellulose it must be partetioned in to glucose residues and this can be done by the acid or by enzymatic hydrolysis. Some advantages can be pointed out in using the enzymatic process although strains of microorganisms used until now can still be improved to produce higher amounts of cellulases. The main goal of this work was to explore our microbiota aiming to find out new fungi with high ability in breaking down 'cellulose. Tow different geographic regions were select and from them 20 isolateds were obtained and tested. Trichoderma reesei QM 9414 was used a standard for comparing the performance of the isolated fungi strains. Morphological and biological parameters were stablished for the 20 strains providing informations for future classification and genetic improvement programs. One of the isolates classified as Trichoderma pseudo coningii, was shown to be the most promessing one giving high rates of cellulases production; it also presented favorable characteristics for genetic and breeding studies.
|
66 |
Isolamento e seleção de fungos lignocelulolíticos / Isolation and selection of lignocellulolytic fungiVicente, Vânia Aparecida 14 November 1989 (has links)
No presente trabalho foram avaliados os aspectos biológicos básicos e as atividades lignocelulósicas de fungos isolados a partir de indústrias de celulose. Para o isolamento foi descrito um método seletivo, obtendo um total de 115 isolados, dos quais 12 foram selecionados quanto a produção de celulase. Todos os isolados selecionados apresentavam atividades β-glicosidase (Salicinase), Exoglucanase (Avicelase) e Endoglucanase (CMCase) semelhantes à linhagem QM9414 de T. reesei. Quanto a atividade ligninolítica foi estabelecido um método preliminar identificando as linhagens de Aspergillus fumigatus e Fusarium solani, como capazes de degradar lignina. Os isolados selecionados foram classificados e caracterizados biologicamente envolvendo observações citológicas e avaliação do desenvolvimento, estabelecendo o período e as condições adequadas para o cultivo. Entre as linhagens analisadas somente Trichoderma pseudokoningii e Fusarium solani apresentaram conídios uninucleados. A avaliação do crescimento e esporulação das linhagens selecionadas em diferentes meios de cultivo demonstrou que o pH é um fator limitante em meio contendo celulose como fonte de carbono e que todas as linhagens selecionadas podem ser utilizadas para se obter mutações auxotróficas, uma vez que se desenvolvem bem em meio mínimo. Os padrões eletroforéticos para α e β esterase das linhagens selecionadas apresentaram diferentes perfis de bandas, permitindo correlacioná-los com as características morfológicas dos esporos das linhagens e serem utilizados como um dos parâmetros auxiliares na classificação dos fungos isolados. Entre as linhagens selecionadas, a Fusarium solani foi considerada a melhor quanto a produção de enzimas lignocelulolíticas e se mostrou promissora para estudos genéticos e de melhoramento, uma vez que esta linhagem apresenta conídios brancos e uninucleados, facilidade na obtenção de mutantes morfológicos com luz ultra-violeta e crescimento em meio mínimo. / This work was carried out aiming to eva1uate the basic bio1ogica1 aspects and the 1ignocellulolytic activities in fungi isolated from cellulose industries. It was described a selective isolation method and from a total of 115 isolates, 12 of them were selected according to their cellu1ase production. All the selected isolates showed β-glicosidade (salicinase), exog1ucanase (avicelase) and endoglucanase (CMCase) activities similar to Trichoderma reesei QM94l4 strain. A preliminary method was stablished for testing ligninolytic activity and according to it, strains of Aspergillus fumigatus and Fusarium solani are invo1ved in the degradation of lignin. The selected isolates were classified and bio1ogically characterized according to cytologica1 observations and their deve1opment eva1uation leading to stablish the best cultivation conditions. Among the ana1ysed strains only Trichoderma pseudokoningii and Fusarium solani showed 100% uninucleated conidia. The evaluation of growing and sporulation of the selected strains ln different culture media showed that pH is the limiting factor in a medium containing cellulose as the sole carbon source. All the selected strains grow well in minimal medium and can be used to get auxotrophic mutants. The α and βesterase electrophoretic patterns of the selected strains were shown to have different band profiles and it allows to correlate them with the spore morphological characteristics, and to be used as one of the useful parameters in classifying the isolated fungi. Among the selected strains, Fusarium solani was considered to be the best lignocellulolytic enzymes producer and it might be very useful for further genetics and breeding studies since it has uninucleated white conidia, it is easy to induce UV morphological mutants and it grows very well in minimal medium.
|
67 |
Evolução de O2, viabilidade e virulência de Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin, durante armazenamento / not availableDestéfano, Ricardo Henri Rodrigues 09 December 1993 (has links)
No presente trabalho estudou-se a performance da linhagem E9 durante um processo de armazenamento, no qual conídios foram mantidos à -20°C com glicerol e sem glicerol. Esta linhagem foi alvo desse estudo por ser amplamente utilizada em nosso laboratório e por diversos laboratórios brasileiros, servindo como referência em estudos sobre entomopatógenos. Nestas condições os objetivos foram estimar as características do fungo quanto à evolução de O2, a variação na viabilidade determinada pela capacidade germinativa dos conídios, e a expressão de virulência, durante o processo. Na avaliação da evolução de O2, testes de respirometria foram realizados, utilizando-se a glicose como única fonte de carbono em um meio de cultivo simplificado. A virulência foi testada em bioensaios realizados com ninfas de 3 e 4 estágios do vetor da doença de Chagas Panstrongylus megistus; e a viabilidade foi obtida comparando-se conídios germinados e não germinados. Os resultados obtidos mostraram a necessidade de uma melhor compreensão, para que estes testes realizados se interajam mais efetivamente, pois foi observado que os dados relativos a viabilidade e o quociente de oxigênio (Q O2) do fungo isoladamente, não fornecem subsídios suficientes para se avaliar a capacidade entomopatogênica de uma dada linhagem. A ação do glicerol como crioprotetor, não foi eficiente no sentido de se representar diferenças significativas com relação à performance do entomopatógeno, uma vez que os valores de LT50 não foram muito divergentes. / not available
|
68 |
Efeitos do uso de herbicidas em solo cultivado com citros (Citrus sinensisL. Osbeck) sobre a população de fungos micorrízicos vesículo-arbusculares / Effects the use of herbicides in soils cultivated of with citrus (Citrus sinensisL. Osbeck) on the vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi populationCosme Damião dos Santos 28 June 1989 (has links)
A presente pesquisa foi instalada com o objetivo de verificar o efeito do uso de herbicidas residuais bem como os de pós-emergência sobre o número de esporos e índice de colonização de fungos micorrízicos vesículo-arbusculares num Latossolo Vermelho Amarelo, cultivado com citrus (Citrus sinensis L. Osbeck.). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso com 12 tratamentos e 3 repetições. Os tratamentos utilizados com as respectivas doses de i.a./ha foram: bromacil (3.2 kg), terbacil (3.2), simazine (4.0), ametryne (2.25) + secbumetone (2.25), dichlobenil (5.0); diuron (3.2) e bromacil (2.13) + diuron (1.07) aplicados em pré-emergência e paraquat (0.6), glyphosate (1.61) e MSMA (1.77) aplicados em pós-emergência e os tratamento controles. A amostragem do solo foi feita antes da aplicação dos herbicidas pós-emergentes e após a aplicação dos mesmos, aos 2 e 31 dias. Com relação aos herbicidas pré-emergentes, a amostragem do solo foi feita aos 37, 65 e 94 dias após a aplicação dos mesmos. Os esporos de fungos endomicorrízicos foram obtidos através de peneiramento por via úmida. As raízes das plantas foram separadas, coradas e observadas para avaliação de índice de colonização. Para as condições do presente trabalho, não se detectaram diferenças significativas entre o controle e os tratamentos com herbicidas para número de esporos por unidade de solo e índice de colonização de fungos. / This research was carried with the aim to verify the effect of the use of residual herbicides as well as the post-emergence ones over the spores number and colonization rate of V.A. mycorrhizal fungi in a Red Yellow Latosol cultivated with Citrus (Citrus sinesis L. Osbeck). The experimental design used was randomized blocks being 12 treatments and 3 replications. The treatment utilized and the respective doses of a.i./ha were: bromacil (3.2 kg), terbacil (3.2), simazine (4.0) ametryn (2.25) + secbumetone (2.25), dichlobenil (5.0), diuron (3.2) and bromacil (2.13) + diuron (1.07) applied in pre-emergence and paraquat (0.6), glyphosate (1.61) and MSMA (1.77) applied in post-emergence and the controls treatments, without herbicide. The soil sampling was done before the application of the post-emergence herbicide and 2 and 31 days after their application. In relation to the pre-emergence ones the soil sampling was done 37, 65 and 94 days after their application. The spores were collected from the soil samples by wet sieving. The citrus roots were separated, stained and observed for colonization rate evaluation. For the condition of this experiment there was no significative differences among the control and the herbicides treatments for spores number by soil unit and colonization rate.
|
69 |
Isolamento e biologia de novos fungos celulolíticos / Isolation and biology of new cellulolytic fungiAparecido Osdimir Bertolin 02 October 1987 (has links)
Para viabilizar o aproveitamento da celulose, e necessário sua hidrólise obtendo-se resíduos de glicose; esta hidrólise pode ser ácida ou enzimática. A hidrólise enzimática apresenta algumas vantagens sobre a ácida, embora microrganismos utilizados até agora não sejam extremamente eficientes na produção de celulases. Com o interesse de explorar melhor a nossa microbiota, o presente trabalho se propôs a busca de fungos com alta capacidade de hidrolisar celulose, isolados a partir de duas regiões geográficas diferentes. Foram assim obtidos 20 isolados que foram analisados e comparados com um padrão o Trichoderma reesei QM 9414 considerado como alto produtor de celulases. Foi feito um estudo de aspectos biológicos dos 20 isolados, fixando assim bons parâmetros para estudos posteriores no tocante a classificação e melhoramento genético destes isolados. Especialmente um dos isolados classificado como Trichoderma pseudo conjngii foi considerado promissor por apresentar uma alta taxa de produção de celulases além de apresentar outras características favoráveis para futuros estudos de genética e melhoramento. / For better uses for cellulose it must be partetioned in to glucose residues and this can be done by the acid or by enzymatic hydrolysis. Some advantages can be pointed out in using the enzymatic process although strains of microorganisms used until now can still be improved to produce higher amounts of cellulases. The main goal of this work was to explore our microbiota aiming to find out new fungi with high ability in breaking down 'cellulose. Tow different geographic regions were select and from them 20 isolateds were obtained and tested. Trichoderma reesei QM 9414 was used a standard for comparing the performance of the isolated fungi strains. Morphological and biological parameters were stablished for the 20 strains providing informations for future classification and genetic improvement programs. One of the isolates classified as Trichoderma pseudo coningii, was shown to be the most promessing one giving high rates of cellulases production; it also presented favorable characteristics for genetic and breeding studies.
|
70 |
Isolamento e seleção de fungos lignocelulolíticos / Isolation and selection of lignocellulolytic fungiVânia Aparecida Vicente 14 November 1989 (has links)
No presente trabalho foram avaliados os aspectos biológicos básicos e as atividades lignocelulósicas de fungos isolados a partir de indústrias de celulose. Para o isolamento foi descrito um método seletivo, obtendo um total de 115 isolados, dos quais 12 foram selecionados quanto a produção de celulase. Todos os isolados selecionados apresentavam atividades β-glicosidase (Salicinase), Exoglucanase (Avicelase) e Endoglucanase (CMCase) semelhantes à linhagem QM9414 de T. reesei. Quanto a atividade ligninolítica foi estabelecido um método preliminar identificando as linhagens de Aspergillus fumigatus e Fusarium solani, como capazes de degradar lignina. Os isolados selecionados foram classificados e caracterizados biologicamente envolvendo observações citológicas e avaliação do desenvolvimento, estabelecendo o período e as condições adequadas para o cultivo. Entre as linhagens analisadas somente Trichoderma pseudokoningii e Fusarium solani apresentaram conídios uninucleados. A avaliação do crescimento e esporulação das linhagens selecionadas em diferentes meios de cultivo demonstrou que o pH é um fator limitante em meio contendo celulose como fonte de carbono e que todas as linhagens selecionadas podem ser utilizadas para se obter mutações auxotróficas, uma vez que se desenvolvem bem em meio mínimo. Os padrões eletroforéticos para α e β esterase das linhagens selecionadas apresentaram diferentes perfis de bandas, permitindo correlacioná-los com as características morfológicas dos esporos das linhagens e serem utilizados como um dos parâmetros auxiliares na classificação dos fungos isolados. Entre as linhagens selecionadas, a Fusarium solani foi considerada a melhor quanto a produção de enzimas lignocelulolíticas e se mostrou promissora para estudos genéticos e de melhoramento, uma vez que esta linhagem apresenta conídios brancos e uninucleados, facilidade na obtenção de mutantes morfológicos com luz ultra-violeta e crescimento em meio mínimo. / This work was carried out aiming to eva1uate the basic bio1ogica1 aspects and the 1ignocellulolytic activities in fungi isolated from cellulose industries. It was described a selective isolation method and from a total of 115 isolates, 12 of them were selected according to their cellu1ase production. All the selected isolates showed β-glicosidade (salicinase), exog1ucanase (avicelase) and endoglucanase (CMCase) activities similar to Trichoderma reesei QM94l4 strain. A preliminary method was stablished for testing ligninolytic activity and according to it, strains of Aspergillus fumigatus and Fusarium solani are invo1ved in the degradation of lignin. The selected isolates were classified and bio1ogically characterized according to cytologica1 observations and their deve1opment eva1uation leading to stablish the best cultivation conditions. Among the ana1ysed strains only Trichoderma pseudokoningii and Fusarium solani showed 100% uninucleated conidia. The evaluation of growing and sporulation of the selected strains ln different culture media showed that pH is the limiting factor in a medium containing cellulose as the sole carbon source. All the selected strains grow well in minimal medium and can be used to get auxotrophic mutants. The α and βesterase electrophoretic patterns of the selected strains were shown to have different band profiles and it allows to correlate them with the spore morphological characteristics, and to be used as one of the useful parameters in classifying the isolated fungi. Among the selected strains, Fusarium solani was considered to be the best lignocellulolytic enzymes producer and it might be very useful for further genetics and breeding studies since it has uninucleated white conidia, it is easy to induce UV morphological mutants and it grows very well in minimal medium.
|
Page generated in 0.0541 seconds