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Avaliação das propriedades antigenotóxicas e antioxidantes do flavonóide quercetina e dos carotenóides bixina e norbixina contra os danos no material genético e distúrbios do estado redox causados pelo cloreto de mercúrio e metilmercúrio, in vitro e in vivo / Evaluation of antigenotoxic and antioxidant properties of the flavonoid quercetin and of the carotenoid bixin and norbixin against DNA-damage and alterations of redox status induced by mercury chloride and methylmercury, in vitro and in vivoBarcelos, Gustavo Rafael Mazzaron 24 January 2011 (has links)
O mercúrio (Hg) é um dos metais mais tóxicos presente no meio ambiente e o principal mecanismo relacionado à sua toxicidade é a indução do estresse oxidativo; sua forma orgânica, metilmercúrio (MeHg) é a que apresenta maior toxicidade. A exposição ao Hg ocorre principalmente através da inalação por trabalhadores ocupacionalmente expostos em diversas indústrias e/ou através do consumo de peixes e outros alimentos aquáticos contendo este metal, como por exemplo, populações amazônicas que estão expostas ao MeHg, via dieta, através do consumo de peixes contaminados. Por outro lado, é pressuposto que alimentos ricos em antioxidantes possam prevenir os efeitos adversos à saúde causados pela exposição ao Hg. O flavonóide quercetina (QC) é o principal polifenol da dieta humana, encontrado principalmente em cebola e frutas cítricas e os carotenóides bixina (BIX) e norbixina (NOR) estão presentes em grandes quantidades no urucum, o qual é amplamente utilizado como condimento no Brasil. Assim sendo, o presente trabalho teve por objetivo avaliar os possíveis efeitos protetores do flavonóide QC e dos carotenóides BIX e NOR contra os diversos efeitos adversos causados pelo cloreto de mercúrio (HgCl2) e MeHg, em modelos experimentais in vitro e in vivo. Para tal, culturas de células de hepatoma humano (HepG2) e ratos machos Wistar foram expostos a diversas concentrações do metal, dos fitoquímicos bem como à suas associações. Determinações das concentrações de glutationa, malondialdeído, proteínas carboniladas, atividades das enzimas antioxidantes catalase e glutationa-peroxidase os quais refletem o estado redox das células e monitoramento do dano no material genético pelo uso do ensaio do cometa e determinações dos níveis de 8-hidroxi-2-deoxiguanosina foram realizados no presente estudo. Os resultados obtidos indicam que o Hg causa claros efeitos genotóxicos e leva a uma serie de alterações de parâmetros bioquímicos relacionados ao estado redox das células, in vitro e in vivo. Além disso, foi evidenciado que fitoquímicos, os quais são comumente encontrados na dieta de seres humanos, denominados QC, BIX e NOR protegem contra a instabilidade genética causada pelo metal e restabelece os distúrbios do estado redox das células causados pela exposição ao Hg. / Mercury (Hg) is one of the most hazardous metals in the environment and the major process responsible for its toxicity is oxidative damage; its organic form methylmercury (MeHg) presents the highest toxicity. The main way of exposition to Hg is through inhalation by workers occupationally exposed in several industries and/or through consumption of fishes and other aquatic food with the metal, as Amazonian populations which are exposed to MeHg, via diet, by consumption of contaminated fishes. On the other hand, it is conceivable that antioxidants may play a protective role in the prevention of adverse effects of Hg. The flavonoid quercetin (QC) is the most abundant polyphenol of the human diet, found mainly in onions and citric fuits and the carotenoids bixin (BIX) and norbixin (NOR) are present in high concentrations in annatto, which is widely used as flavoring in Brazil. Therefore, the present study aims to evaluate the possible protective effects of the flavonoid QC and of the carotenoids BIX and NOR against the adverse effects caused by mercury chloride (HgCl2) and MeHg, in experimental models in vitro and in vivo. For this, human hepatoma cells (HepG2) cultures and male rats Wistar were exposed to several concentrations of the metal, of the phytochemicals as well as their associations. Determination of concentrations of glutathione, malondialdehyde, carbonil proteins, activity of the antioxidant enzymes catalase and glutathione-peroxidase, which reflect the redox status of the cells and monitoring of DNA-damage by use of comet assay and measurements of 8-hydroxi-2-deoxyguanosine levels were carried out in the present study. The results indicate that Hg cause clear genotoxic effects and lead to several alterations of biochemical parameters related to redox status of the cells, in vitro and in vivo. Moreover, it was observed that pythochemicals commonly found in the human diet, namely QC, BIX and NOR counteract the genetic instability induced by the metal and restore the disturbances of redox status of the cells caused by Hg exposition.
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Avaliação genotóxia e antigenotóxica da curcumina contra a toxicidade induzida pela cisplatina em culturas de células PC12 / Genotoxicity and antigenotoxicity evaluation of curcumin against induced toxicity of cisplatin in PC12 cells.Mendonça, Leonardo Meneghin 15 August 2008 (has links)
Pode-se dizer que o câncer, ao lado da AIDS, é a doença que atinge, a níveis mundiais, maior clamor da sociedade por desenvolvimento de cura e melhor qualidade de vida ao paciente. Várias terapias são utilizadas para o tratamento do câncer, podendo-se destacar a importância da quimioterapia em inúmeros protocolos de tratamento. Um dos fármacos mais antigos e mais utilizados na quimioterapia é a cisplatina, que ao longo dos seus mais de 30 anos na prática clínica demonstrou sua eficácia e foi incorporada no protocolo de tratamento de uma variedade de tumores. Entretanto, ao lado se sua comprovada eficácia, é inerente o desenvolvimento de vários efeitos colaterais resultante de sua toxicidade à células sadias. Neste trabalho, destaque é dado a neurotoxicidade, que surge em um grande número de pacientes que recebem tratamento com a cisplatina. Inúmeros esforços têm sido realizados na tentativa de prevenir ou controlar os efeitos tóxicos induzidos pela cisplatina, com atenção especial à suplementação do tratamento quimioterápico com compostos antioxidantes. Nesse sentido, este estudo visa avaliar a associação da curcumina, um composto polifenólico com notável atividade antioxidante e neuroprotetora, ao tratamento com cisplatina, em um modelo in vitro com culturas de células PC12. A curcumina é reconhecidamente um composto polifenólico com um amplo espectro de atividades biológicas, com suas propriedades neuroprotetoras demonstradas em vários modelos estudados estando principalmente relacionadas com seu potencial antioxidante. Os múltiplos mecanismos de ação dos compostos fenólicos e suas propriedades neuroprotetoras atribuídas a capacidade de inibição das espécies reativas de oxigênio indicam um potencial de inibição da neurotoxicidade que surgem durante o tratamento quimioterápico com a cisplatina, visto a reconhecida capacidade de geração de espécies reativas de oxigênio da cisplatina. Como a geração de espécies reativas de oxigênio intracelular pode resultar em danos ao DNA pela ação direta das espécies reativas ou indiretamente via produtos de degradação da peroxidação lipídica, nosso estudo avaliou o potencial protetor da curcumina contra a genotoxicidade induzida pela cisplatina em culturas de células PC12, analisando a indução de micronúcleos e a análise de quebras de cadeia simples, cadeia dupla do DNA e sítios álcali-labeis pelo ensaio do cometa. Antes da avaliação antigenotóxica da curcumina, foi realizada uma avaliação citotóxica e genotóxica, em que pode-se observar que em concentrações elevadas a curcumina é citotóxica e genotóxica às células PC12. O efeito protetor da curcumina foi avaliado em pré-tratamento das culturas de células PC12 com concentrações não tóxicas. Nas três concentrações de curcumina estudadas não houve indícios de interferência com a citotoxicidade ou o efeito citostático da cisplatina. Embora o efeito protetor da curcumina contra os danos induzidos ao DNA de células PC12 não tenha sido evidente nos resultados obtidos pelo ensaio do cometa, a curcumina foi eficaz na redução de micronúcleos induzidos pela cisplatina, de maneira semelhante nas três concentrações avaliadas. Os resultados positivos obtidos nesse estudo juntamente com os dados pré-existentes a respeito de efeitos protetores da curcumina incentivam novas pesquisas em relação aos possíveis benefícios da utilização da curcumina em terapia combinada aos quimioterápicos. / Several therapies are used for treating cancer and the importance of chemotherapy can be emphasized in many protocols of treatment. One of the oldest and most used drugs in chemotherapy is the cisplatin which, with its more than thirty years of clinical practice, has demonstrated its effectiveness being incorporated into the protocol of a variety of tumor treatments. On the other hand, it is intrinsic the development of various side effects resulting from its toxicity to healthy cells. This research gives emphasis to the neurotoxicity which appears in a large number of patients receiving the cisplatin treatment. Numerous efforts are being made in attempt to prevent or even control the toxic effects induced by cisplatin with special attention being given to the supplementation of chemotherapy treatment with antioxidant compounds. In that sense, this study aims to assess the association of curcumin, a polifenolic compound with remarkable antioxidant and neuroprotective activity, to the cisplatin treatment in an in vitro neuronal model with PC12 cell cultures. The curcumin is admittedly a polifenolic compound with a broad spectrum of biological activities and their neuroprotective properties, demonstrated in several models, are strongly related to its antioxidant potential. The multiple mechanisms of action of the phenolic compounds and their neuroprotective properties credited to the ability of inhibition of the reactive oxygen species indicate a potential inhibition of neurotoxicity that takes place during the chemotherapy treatment with cisplatin, given its well known ability to generate reactive oxygen species. Since the generation of reactive oxygen species intracellular can result in DNA damage by direct action of reactive species or indirect, through degradation products of the lipid peroxidation, our studies evaluated the potential protector of curcumin against the genotoxicity induced by cisplatin in PC12 cell cultures by examining the induction of micronuclei and analyzing DNA single strand breaks, double strand breaks, and alkali-labeis sites through the comet test. Before the antigenotoxic evaluation of the curcumin, a cytotoxic and genotoxic test was conducted where it was observed that when in high concentrations the curcumin is cytotoxic and genotoxic to the PC12 cells. The protective effect of curcumin was evaluated at the pre-treatment of PC12 cell cultures with non-toxic levels of concentration. In the three studied curcumin concentrations there was no evidence of interference with the cytotoxicity or cytostatic effect of the cisplatin. Although the protective effect of the curcumin put against the damage caused to the DNA of cells PC12 was not evident in the results obtained by the comet test, the curcumin was equally effective in the reduction of micronuclei induced by the cisplatin in all three concentrations evaluated. The positive results obtained in this study combined with the pre-existing data about the protective effects of the curcumin encourage some more new research on possible benefits of using curcumin in combination to chemotherapy.
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Genotoxicidade in vitro das frações orgânica e solúvel em água de material particulado de ar em três locais do Estado de São Paulo / Genotoxicity in vitro of organic and soluble water fractions of airborne particulate matter in three sites of São Paulo StatePalacio Betancur, Isabel Cristina 17 August 2016 (has links)
O aumento na poluição ambiental é na atualidade uma das grandes preocupações em nível mundial. Especificamente, a poluição atmosférica por material particulado tem demostrado ser um fator determinante no desenvolvimento de doenças cardiopulmonares e câncer de pulmão nas populações expostas. O material particulado é constituído por uma mistura complexa de compostos orgânicos e inorgânicos, muitos dos quais possuem potencial mutagênico e genotóxico. As características destes compostos variam em função da suas propriedades físicas, químicas e em razão das condições meteorológicas prevalecentes. A maior parte dos estudos tem se focado em avaliar o potencial genotóxico da fração orgânica do material particulado e poucos estudos têm explorado a fração solúvel em água e a contribuição diferencial das diversas espécies químicas presentes nesta fração para o dano genotóxico. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos mutagênicos e genotóxicos in vitro da fração orgânica e da fração solúvel em água de material particulado (MP10) coletado em três locais diferentes do estado de São Paulo e estabelecer a relação entre a composição química e o efeito biológico observado. Para isto, realizou-se a extração orgânica e solúvel em água de 12 amostras de MP10. A mutagenicidade e genotoxicidade foram avaliadas usando o ensaio de Salmonella/microssoma e o teste de micronúcleos (MN) em células A549 e 16 hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos (HPAs) e 15 metais hidrossolúveis presentes nas amostras foram determinados quimicamente. Adicionalmente, foi determinada a metodologia de extração da fracção solúvel em água e se avaliou a estabilidade química e biológica desta fração. Os resultados indicam que a extração assistida por micro-ondas é um método eficiente para a extração da fração solúvel em agua do MP e que um tempo superior a 60 dias de armazenamento e congelamento deste tipo de extrato tem um efeito significativo sobre os resultados analíticos e a resposta biológica. Foi demonstrado ainda que as duas frações de MP estudadas são responsáveis pela indução do dano ao DNA e que não existe uma relação direta entre a concentração de MP e o efeito genotóxico observado, confirmando a importância do uso de bioensaios na avaliação da genotoxicidade de misturas complexas como o MP. Os HPAs prevalecentes nas amostras de PM10 foram fluorantene e benzo(ghi)perileno. Nos extratos solúveis em água, as maiores concentrações de metais foram determinadas para zinco, ferro e cobre. Confirmou-se que a indução de MN e o ensaio de Salmonella/microssoma representam uma poderosa ferramenta na avaliação da polução atmosférica e que as análises químicas por si só não são suficientes para a proteção e predição dos efeitos biológicos em populações expostas. / The increase of environmental pollution is today one a major concern worldwide. Specifically, air pollution by particulate matter has been shown to be a determining factor in the development of cardiopulmonary disease and lung cancer in exposed populations. The particulate material consists of a complex mixture of organic and inorganic compounds, many of which have mutagenic and genotoxic activity. The characteristics of these compounds vary according to their physical and chemical properties and also to the prevailing weather conditions. Most studies have focused on evaluating the genotoxic potential of the organic fraction of particulate material, but few studies have explored the water-soluble fraction, and the differential contributions of different chemical species present in this fraction to genotoxic damage. The aim of this study was to evaluate the in vitro mutagenic and genotoxic effects of organic and water-soluble fractions of 12 samples of particulate matter (PM10) collected at three different sites in the state of São Paulo and establish the relationship between the chemical composition and the biological effect observed. The mutagenicity and genotoxicity were evaluated using the Salmonella/microssome test and the micronucleus assay (MN) in A549 cells and 16 Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAHs) and 15 water-soluble metals present in the samples were chemically determined. Additionally, the extraction method of water- soluble fraction was determined and the chemical and biological stability of this fraction evaluated. The results indicate that the microwave-assisted extraction is an efficient method for the extraction of the water-soluble compounds of PM and that the freezing and storage of the extract over 60 days has a significant effect on the mutagenic and analytical results of PM samples. It was demonstrated that the two PM fractions studied are responsible for the induction of DNA damage and that there is no direct relationship between the MP concentration and the genotoxic effect observed, confirming the importance of using bioassays in the genotoxicity evaluation of complex mixtures as PM. The PAHs prevailing in our samples were fluoranthene and benzo(ghi)perylene. In the water-soluble extracts, highest concentrations of the elements studied were found for zinc, iron, and copper in the three places of sampling. We confirmed that MN induction and Salmonella/microsome assay represents a powerful tool to evaluate the atmospheric air pollution and that the total concentration of PM and the chemical analyses alone would not be sufficient for the prognosis of biological effects in exposed populations
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Avaliação da toxicidade de nanopartículas de dióxido de titânio (TiO2) e possível efeito protetor do selênio em ratos Wistar / Evaluation of titanium dioxide nanoparticles (TiO2) toxicity and possible protective effect of selenium in Wistar ratsRocha, Cecilia Cristina de Souza 01 March 2018 (has links)
Nanopartículas são estruturas que variam entre 1 e 100 nm e, devido a características como tamanho, área de superfície de contato e reatividade, são utilizadas em várias áreas, como saúde, energia, agricultura e área ambiental. Dentre as várias nanopartículas, destacam-se as de dióxido de titânio, as quais são amplamente utilizadas na indústria, e podem entrar no organismo por diferentes vias de exposição, sendo a absorção gastrintestinal a principal delas. A exposição às nanopartículas de dióxido de titânio vem sendo associadas à geração de espécies reativas de oxigênio (EROs), dentre elas, o peróxido de hidrogênio. Alguns componentes celulares são alvo do dano oxidante mediado pelas EROs, como alterações no material genético e nas atividades enzimáticas. Porém, as células possuem sistemas de defesa enzimáticos que as protegem e mantem seu estado redox. As enzimas catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx) - uma selenoproteína, são exemplos dessa defesa. O selênio é um microelemento essencial na constituição das selenoproteínas, exercendo papel antioxidante. Dessa forma, o presente estudo objetivou avaliar possíveis efeitos protetores do selênio em ratos, quando co-expostos de forma sub-crônica com nanopartículas de dióxido de titânio. Para isso, ratos Wistar, machos, foram expostos à nanopartículas de dióxido de titânio (1,5 mg.kg-1), por gavagem e ao selênio (6 mg.L-1) na forma de selenato de sódio, na água de beber, durante sessenta dias. Os animais foram divididos em quatro grupos (n= 6): Grupo I (controle); Grupo II (nanopartículas de dióxido de titânio); Grupo III (nanopartículas de dióxido de titânio + selênio); Grupo IV (selênio). Após o período de exposição, os animais foram eutanasiados, e o sangue e órgãos foram retirados para análise da genotoxicidade, das atividades das enzimas catalase e GPx e deposição das nanopartículas e do selênio. Os resultados do estudo mostraram que a co-exposição com selênio (Grupo III) não alterou a concentração de titânio nos tecidos quando comparado ao grupo exposto apenas às nanoparticulas de titânio (grupo II), porém, reduziu os danos ao DNA promovidos pelas nanoparticulas de titânio (Tail Intensity), mostrando, assim, o papel do selênio na proteção da genotoxicidade induzida pelas nanopartículas. / Nanoparticles are structures that range from one to 100 nm. Due to their size, superficial contact area and reactivity, they are utilized in several areas of health, energy, agriculture and environmental. Titanium dioxide nanoparticles stand out among others for they are widely employed in industry and can be incorporated in the organism by different exposure pathways, the gastrointestinal as the main one. Exposure to titanium dioxide nanoparticles has been associated with the generation of reactive oxygen species (ROS), such as hydrogen peroxide. Cellular components can be damaged by ROS, being examples some changes in genetic material and enzymatic activities. However, the cells own enzymatic defense systems that protect and maintain their redox state. The enzymes catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx) - a selenoprotein, are examples of this defense. Selenium is an essential microelement in selenoproteins and has an antioxidant role. In this context, the aim of the present study was to evaluate possible protective effects of selenium in rats sub-chronicly co-exposed with titanium dioxide nanoparticles. Male Wistar rats were exposed to titanium dioxide nanoparticles (1.5 mg.kg-1, per gavage) and selenium (6 mg.L-1, in drinking water) in the form of sodium selenium, throughout sixty days. Animals were separated in four groups (n = 6): Group I (control); Group II (titanium dioxide nanoparticles); Group III (titanium dioxide nanoparticles + selenium); Group IV (selenium). After the exposure, the animals were euthanized and blood and organs were removed for analysis of genotoxicity, catalase and GPx activities and deposition of nanoparticles and selenium. The results demonstrated that co-exposure with selenium (Group III) did not alter the concentration of titanium in the tissues when compared to the group exposed only to titanium nanoparticles (group II). On the other hand, selenium reduced DNA damage promoted by titanium nanoparticles (Tail Intensity), showing the role of selenium in the protection of genotoxicity induced by nanoparticles.
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Adaptação de Ensaio Cometa às células meristemáticas provenientes de raízes de propágulos de Rhizophora mangle para avaliar a genotoxicidade no ambiente marinho / Adaptation of comet assay to meristematic cells of mangrove root to study genotoxicity on the marine environmentGarcia, Juliana Maia Rabêlo Nucci 07 October 2016 (has links)
O presente estudo teve como objetivo o estabelecimento de um método citogenotoxico, o ensaio cometa, adaptado às células meristemáticas provenientes de raízes de propágulos de mangue da espécie Rhizophora mangle para utilização em estudos sobre genotoxicidade em ambientes marinhos. Foram testados dois tipos de germinação de raízes, quatro diferentes soluções de extração de núcleos, duas soluções de lise e o não uso da lise, dois períodos de exposição à lise, dois períodos de relaxamento, dois períodos de eletroforese e a interação de duas condições de lise com dois diferentes tempos de relaxamento. A validação de método foi realizada através da exposição de núcleos a quatro diferentes concentrações de peróxido de hidrogênio. Os resultados mostraram que é possível a obtenção de cometas com núcleos extraídos de propágulos de Rhizophora mangle e que a validação de método apresenta uma relação concentração dependente entre o índice de dano de núcleos e a concentração do agente genotoxico testado. Os melhores parâmetros utilizados para obtenção de cometas através do método por nós adaptado são: PBS ou solução salina 12‰ como solução de extração, exposição à lise alcalina iônica por 60 minutos, 5 minutos de relaxamento e eletroforese em tampão pH>13, 0,8V/cm, 230mA por 20 minutos a 4ºC. / This study aimed to establish a citogenotoxic method, the comet assay, adapted to the meristematic cells from propagule roots of red mangrove, Rhizophora mangle, for use in studies of genotoxicity in marine environments. Experiments were carried out to test two ways of root germination, four different nuclei extraction solutions, two lysis solutions and without lysis, two periods of exposure to lysis, two periods of unwinding, two periods of electrophoresis and the interaction of two lysis conditions with two different times of unwinding. Experiments on validation of the method were performed by exposing the nuclei to four different concentrations of hydrogen peroxide. The results showed that it is possible to obtain comets with nuclei extracted from the root of propagules of Rhizophora mangle and the validation data showed a dose-dependent relationship between the damage index and the concentration of the genotoxic agent tested. The best parameters to obtain comets using the method adapted by us are: PBS or saline 12‰ as extraction solution, exposure to alkaline lysis for 60 minutes, 5 minutes of unwinding and electrophoresis in buffer pH> 13, 0,8V/cm, 230mA for 20 min at 4ºC.
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Avaliação da atividade antimutagênica do beta-caroteno microencapsulado em células de ratos tratados com o antitumoral doxorrubicina empregando os ensaios de micronúcleo e cometa / Evaluation of beta-carotene microencapsulated antimutagenic activity in cells of rats treated with antitumor doxorubicin using micronucleus test and comet assayAissa, Alexandre Ferro 12 March 2010 (has links)
Os corantes são muito usados na indústria alimentícia. Podendo ser de origem natural ou sintética, estes são utilizados na produção de alimentos no intuito de compensar a perda da cor durante a fabricação e estocagem, garantir a uniformidade da cor e também de atribuir coloração àqueles originalmente incolores. Dentre os pigmentos naturais, o beta-caroteno (BC) tem sido um dos mais adicionados em alimentos. Por outro lado, a utilização do BC é limitada devido à sua instabilidade. Por essa razão, técnicas de microencapsulamento são muito utilizadas, pois podem proteger o material microencapsulado de ações oxidantes, prolongando a propriedade do composto. Porém, nestes processos tecnológicos, as propriedades do composto encapsulado devem ser cuidadosamente estudadas. O objetivo deste trabalho foi comparar a possível ação antimutagênica do BC puro e na forma microencapsulada (BCM) por meio do teste do micronúcleo em células da medula óssea e sangue periférico, e por meio do ensaio do cometa em rins e fígado de ratos tratados com o antitumoral doxorrubicina (DXR). Para isso, o tratamento foi feito com duas doses do carotenóide (2,5 ou 5 mg/kg) puro ou microencapsulado, por gavagem durante 14 dias, seguida de injeção intraperitoneal de salina ou do antitumoral DXR (16 mg/kg), logo após a última gavagem. Ratos Wistar machos foram divididos em 14 grupos de tratamentos (n=6/grupo), e foram sacrificados 24h após a injeção intraperitoneal. Os resultados com o teste do micronúcleo nos dois tecidos mostram que o BC não foi mutagênico, exceto na dose de 5mg/kg. No BCM as doses não foram mutagênicas e na associação BCM+DXR apenas a maior dose foi antimutagênica. Os resultados com o teste do cometa nos rins e fígado mostram que o BC não foi genotóxico e quando associado à DXR obteve valores de proteção semelhantes aos resultados obtidos com o controle solvente (óleo de milho). O BCM também não foi genotóxico em qualquer dos tecidos. Quando associado à DXR as duas doses tiveram efeito protetor contra a fragmentação do DNA no fígado. No rim, a dose BCM 2,5mg+DXR foi genotóxica e a dose BCM 5mg+DXR foi antigenotóxica. A antimutagenicidade observada pode ser explicada pela ação antioxidante do beta-caroteno. No entanto, quando uma dose alta é utilizada, os produtos de clivagem do carotenóide podem aumentar a formação de espécies reativas de oxigênio induzindo ainda mais a formação de micronúcleos. A diferença entre os resultados obtidos com as duas doses do BC e do BCM indicam que, talvez, a biodisponibilidade do carotenóide foi alterada pelo processo de microencapsulamento. No entanto, o efeito protetor observado em uma das doses do BCM pode ser explicado pela capacidade antioxidante do beta-caroteno, mesmo na forma microencapsulada. Em conclusão, o BC puro não deve ser utilizado em altas doses, pois aumenta o dano ao DNA e quando microencapsulado não perde suas propriedades, porém uma dose maior deve ser utilizada para que o carotenóide tenha efeito antimutagênico. / Colorants are commonly used in the food industry. From natural or synthetic origin, these colorants are used in food production in order to recompense the loss of color during manufacturing and stowage processes, guarantee color uniformity and also attribute color to those colorless ones. Among natural pigments, beta-carotene (BC) has been one of the most added to food. On the other hand, the utilization of BC is limited due to its instability. On that account, microencapsulation techniques are more used, once they can protect the microencapsulated material from oxidizing actions, extending the composition property. Nevertheless, in these technological processes, the properties of the encapsulated compound must be studied carefully. The aim of this work was to compare the possible antimutagenic action of pure and microencapsulated BC (BCM) through micronucleus test in cells of bone marrow and peripheral blood, and through comet assay in kidneys and livers of rats treated with the antitumoral doxorubicin (DXR). For this, the treatment was made of two doses of pure and microencapsulated carotenoid (2.5 or 5 mg/kg), by gavage during 14 days, followed by saline intraperitoneal injection or antitumor DXR (16 mg/kg), right after the last gavage. Male Wistar rats were divided in 14 treatment groups (n=6/group), and were sacrificed 24 hours after the intraperitoneal injection. The micronucleus test results in both tissues show that BC was not mutagenic, except for the 5mg/kg dose. In BCM the doses were not mutagenic and in the association of BCM+DXR, only the higher dose was antimutagenic. The results of the comet assay in kidney and liver show that BC was not genotoxic and when associated to DXR it obtained protection values similar to the results obtained with the solvent control (corn oil). BCM was also not genotoxic in none of the tissues. Once associated to DXR, the two doses had protector effect against the DNA fragmentation in the liver. In the kidney, the BCM 2.5mg+DXR dose was genotoxic and the BCM 5mg+DXR dose was antigenotoxic. The observed antimutagenicity can be explained by the beta-carotene antioxidant action. However, when a higher dose is used, the carotenoid cleavage products can increase the formation of reactive oxygen species inducing the formation of micronucleus. The difference between the results obtained with the two doses, BC and BCM, indicates that, perhaps, the carotenoid biodisponibility was modified by the process of microencapsulation. Nevertheless, the protector effect observed in one of the BCM doses can be explained by the beta-carotene antioxidant capacity, even in the microencapsulated form. In conclusion, the pure BC should not be used in high dose, because it increases damage to DNA and while microencapsulated it does not lose its properties, but one higher dose must be used for the carotenoid to have antimutagenic effect.
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AVALIAÇÃO DA MUTAGENICIDADE E GENOTOXICIDADE EM TRABALHADORES RURAIS DE MUNICÍPIOS GOIANOS COM INTENSA ATIVIDADE AGRÍCOLAKhayat, Carolinne Borges 13 April 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1
CAROLINNE BORGES KHAYAT.pdf: 2297476 bytes, checksum: 992aa1b9dc7b17cdf96375464ab8d719 (MD5)
Previous issue date: 2012-04-13 / The term pesticide is used to refer to a wide variety of chemicals used to kill
weeds, insects and fungi. In Brazil, the use of pesticides in agriculture has been
expanding continuously, and therefore the analysis of the effects of this type of
environmental exposure begins to document an epidemiological profile of the
distribution of cancer in both populations occupationally exposed to these
chemicals as in the general population indirectly affected by contaminated food
and water resources. The possible toxic effects of such exposures are unknown
and the information related only to the toxicity of active ingredients are not
sufficient to assess the risk of adverse effects of pesticides on human health
and the environment. Workers exposed to pesticides when compared with the
control group showed increased 8 times more micronucleus and 20 times more
binucleated cells and increased DNA damage measured by comet assay.
Variables such as smoking, alcohol consumption, age, sex, duration of
exposure and type of pesticide did not affect the appearance of genetic
damage. However, there was an increase of micronucleus in workers who did
not use personal protective equipment. Pesticide exposure can cause
genotoxicity and mutagenicity to individuals who deal with such agents. / O termo pesticida é usado para denominar uma ampla variedade de produtos
químicos utilizados para destruir ervas daninhas, insetos e fungos. No Brasil, o
uso de pesticidas na agricultura vem se ampliando de forma contínua e,
consequentemente, a análise sobre os efeitos deste tipo de exposição
ambiental começa a documentar um perfil epidemiológico da distribuição de
câncer tanto em populações ocupacionalmente expostas a estes agentes
químicos, como na população geral indiretamente afetada por contaminação
alimentar e dos recursos hídricos. Os possíveis efeitos tóxicos de tais
exposições ainda são desconhecidos e as informações da toxicidade
relacionada apenas aos ingredientes ativos não são suficientes para avaliar o
risco dos efeitos adversos dos pesticidas à saúde humana e ambiental. Os
trabalhadores expostos a pesticidas, quando comparados ao grupo controle,
tiveram aumento de 8 vezes mais micronúcleos e 20 vezes mais células
binucleadas e maior dano ao DNA avaliado pelo ensaio cometa, em relação ao
grupo controle (p<0,0001), como demonstrado pelo teste t e análises de
regressão linear simples. Nesse estudo, variáveis como tabagismo, consumo
de álcool, idade, sexo, tempo de exposição e tipo de pesticida não
influenciaram o aparecimento de danos genéticos. Entretanto, houve aumento
de micronúcleos em trabalhadores que não utilizavam equipamentos de
proteção pessoal (p=0,006). Assim, a exposição a pesticidas, independente do
tempo e tipo de agente utilizado, pode causar genotoxicidade e mutagenicidade
aos indivíduos que os manipulam.
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AVALIAÇÃO DE DANOS GENÔMICOS DE AGENTES DE SAÚDE DE CONTROLE DE ENDEMIAS (DENGUE) DO MUNICÍPIO DE APARECIDA DE GOIÂNIA (GO).Oliveira, Macxuell Rosa dos Reis 12 May 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Macxuell Rosa dos Reis Oliveira.pdf: 1230845 bytes, checksum: 9ca756dde6dc4a9a9cde4f85bc8e0a66 (MD5)
Previous issue date: 2014-05-12 / Agents to combat epidemics (ACEs) represent the most exposed group to the effects of the
insecticides once exposure occurs from the preparation until the application inside and outside
the houses. Factors such as lack of personal protective equipment (PPE) or ignorance of the
correct way of handling each product increase the risk of intoxication. In this context, due to the
scarcity of information on genotoxicity caused by pesticides, to combat the mosquito Aedes
aegypti , the present study assessed the genomic damage of the ACEs, from Aparecida de
Goiânia (GO). Therefore, the occupation exposure was associated with the use of PPE and the
lifestyle of the worker, considering social factors such as gender, age, exposure duration to
pesticides, smoking and alcohol. A group of 52 ACEs, working in the city of Aparecida de
Goiânia, and 60 controls, who presented similar lifestyles, was selected. Genomic DNA was
extracted from both groups being analyzed by the comet assay, a test of simple application, able
to demonstrate DNA damage. To the evaluation of genomic damage, 04 parameters were
analyzed and classified as follows: Tail length (CC) Percentage of DNA in tail (PDCA), tail
moment (MC) and Olive tail moment (MCO). A questionnaire to evaluate the lifestyle and
history of exposure was associated with genomic damage. The exposed group consisted of 52
ACEs, 26 (50 %) men and 26 (50 %) women and the control group consisted of 60 subjects, 33
(55 %) men and 27 (45 %) women, 17% of ACEs smoked and 38% drunk. The data indicated
that 45 % of ACEs handled pesticides on average for 10 years. 31 (60 %) of ACEs used EPI s
and 21 (40 %) did not use, although 95 % of ACEs consider the importance of PPEs usage. As
for genomic damage, when comparing the 04 comet parameters between the exposed and
control groups, statistically significant differences (p < 0.001) were detected. As for ACE´s
lifestyle, smoking and drinking, , no statistically significant differences were detected ( p >
0.05) between the 04 comet assay parameters of evaluation of genomic damage , i.e. ,
individuals who smoked and or drank did not show larger DNA lesions, when compared to
individuals who did not use such compounds. We also did not find statistically significance
between CC and reports of poisoning in the ACEs (F = 1.7, p = 0.19). In addition, no
statistically significant differences between PDCA, MC and MCO were observed, with reports
of poisoning of ACEs, respectively (F = 2.5, p = 0.12, F = 1.9, p = 0.17 and F = 2.0, p = 0.16).
Regarding the use of PPE, there was also no statistically significant differences (p > 0.05)
between staff who used or not such equipment. By associating the use of PPE with reports of
intoxication also no statistically significant differences were found (F = 0.17, p = 0.7). Finally,
as to exposure time and association with the parameters of genetic damage, there was also no
statistically significant difference (p > 0.05). Thus, the results found in this study provided
information that ACEs have genetic risks associated with exposure to pesticides, highlighting the need for educational programs in order to reduce the occupational risk associated with the
use of insecticides. / Os agentes de combate a endemias (ACEs) representam a categoria mais exposta aos
efeitos dos inseticidas, pois a exposição se dá desde o preparo da calda até a aplicação
nas áreas intra ou peridomiciliares. Fatores como a falta de equipamentos de proteção
individual (EPI) ou desconhecimento da forma correta de manipulação de cada produto,
aumentam os riscos de intoxicação. Neste contexto, mediante a escassez de informações
sobre a genotoxicidade provocada pelo uso de pesticidas, de combate ao mosquito
Aedes aegypti, o presente estudo avaliou danos à saúde de ACEs, do município de
Aparecida de Goiânia (GO). Para tanto, a atividade profissional foi associada ao uso de
Equipamentos de Proteção Individual (EPI) e ao estilo de vida do trabalhador,
considerando fatores sociais, tais como: sexo, idade, tempo de exposição aos pesticidas,
tabagismo e etilismo. Foi selecionado um grupo de 52 ACEs, atuantes no município de
Aparecida de Goiânia, e 60 indivíduos do grupo controle, que apresentavam estilos de
vida semelhantes. O DNA genômico foi extraído de ambos os grupos, sendo analisado
pelo ensaio cometa, um teste de simples aplicação, capaz de demonstrar danos causados
ao DNA. Para a avaliação dos danos genômicos, foram analisados 04 parâmetros, classificados
como: Comprimento da cauda (CC), Porcentagem de DNA na Cauda (PDCA), Momento da
Cauda (MC) e Momento da Cauda de Olive (MCO). Também foi aplicado um questionário,
visando avaliar os hábitos de vida e histórico de exposição e associar com os danos
genômicos encontrados. O grupo exposto compreendeu 52 agentes, sendo 26 (50%)
homens e 26 (50%) mulheres e o grupo controle foi composto por 60 indivíduos, sendo
33 (55%) homens e 27 (45%) mulheres. Pode-se observar que 17% dos ACEs fumavam
e 38% bebiam. Os dados indicaram que 45% dos ACEs manusearam algum tipo de
pesticida, em média por 10 anos. Quando questionados sobre o uso dos EPIs, 31 (60%)
dos ACEs utilizavam EPI´s e 21 (40%) não utilizavam, embora 95% dos ACEs
considerassem importante o uso destes equipamentos. Quanto aos danos genômicos, ao
se comparar os 04 parâmetros de dano, entre os grupos exposto e controle, foram detectadas
diferenças estatisticamente significativas (p< 0,001). Quanto aos hábitos de vida (tabagismo e
etilistmo) dos ACEs, não foram detectadas diferenças estatisticamente significativas (p>0,05)
entre os 04 parâmetros de avaliação de dano genômico, ou seja, indivíduos que fumavam e ou
bebiam não apresentaram maiores lesões ao DNA, em relação aos indivíduos que não faziam
uso de tais compostos. Ao se associar o comprimento da cauda (CC) com os relatos de
intoxicação dos ACEs não foram detectadas diferenças estatisticamente significativas (F =1,7,
p=0,19). Também não foram evidenciadas diferenças estatisticamente significativas entre PDCA, MC e MCO, com relatos de intoxicação dos ACEs, respectivamente (F= 2.5, p= 0,12;
F= 1,9, p=0,17 e F= 2.0 e p= 0,16). Quanto ao uso de EPIs, também não houve diferenças
estatisticamente significativas (p>0,05) entre os agentes que utilizavam ou não tais
equipamentos. Ao se associar a utilização de EPI´s com relatos de intoxicação também não
foram encontradas diferenças estatisticamente significativas (F=0,17; p= 0,7). Finalmente,
quanto ao tempo de exposição e associação com os parâmetros de dano genético, também não
houve uma associação estatisticamente significativa (p> 0,05). Assim, os resultados
encontrados nessa pesquisa forneceram informações de que os ACEs apresentam riscos
genéticos associados à exposição aos pesticidas, salientando a necessidade de
programas educacionais, a fim de reduzir o risco ocupacional associado ao uso de
inseticidas e demais produtos químicos.
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69 |
ANÁLISE DE MUTAGENICIDADE EM SANGUE PERIFÉRICO DE AGENTES DE COMBATE A ENDEMIAS DO MUNICÍPIO DE APARECIDA DE GOIÂNIA (GO).Rodrigues, Douglas Dantas 30 March 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-03-30 / The agent to combat epidemic (ACEs) are the more exposed classes to effect of
pesticides, since their expositions is given to preparation to application of pesticides.
The uses of PPE are essential to protection of these workers, yet they often dispense
their uses. Factors such as lack of knowledge about the correct use of pesticides or no
respect for the PPE uses may be related to the risk of intoxication. It is well known that
pesticides may cause DNA damage in people who are occupationally exposed.
Although there are many studies on the damage to farmers, few studies have been
performed with ACEs. In this context, this study aimed to evaluate the genomic damage
in ACEs of the city of Aparecida de Goiânia (GO) and to correlate the damage with
intoxication reports and use of PPE and styles of life of the agents. We selected for
research 39 ACEs and 39 people from the local community who were not
occupationally exposed to pesticides. Based on a structured questionnaire was collected
lifestyle information of the participants, such as age, gender, alcohol consumption,
tobacco use, and data on the use of PPE and signs and symptoms of intoxication of
ACEs. The evaluation of genomic damage was made by micronucleus technique, and
the cholinesterase test was performed in ACEs to observe the presence of chronic
intoxication. The exposed group consisted of 21 men (53.8%) and 18 women (46.2%).
Of agents 39, 10 (25.6%) smoked and 29 (74.4%) did not smoke; 23 (58.9%) drank and
16 (41.1%) did not drink. The evaluation of cholinesterase was normal in all agents, but
when comparing the frequency of micronuclei in the case group with control, a
statistical difference (p> 0.05) was observed. By correlating the use of PPE with
genomic damage, was not found a significant difference. Based on the findings of this
research, it can be states that the use of pesticides by ACEs is a risk to it in genomic
damage, which can lead to serious healths problems for the same. Worth pointing out
that there are a need for education about the risk of using pesticides, particularly for
occupationally exposed group. / Os agentes de combate a endemias (ACEs) são as categorias mais exposta aos efeitos de
pesticidas, pois sua exposição se dá deste o preparo da calda dos pesticidas até a
aplicação do mesmo. O uso de EPIs é essencial para a proteção desses trabalhadores,
todavia eles muitas vezes os dispensam. Fatores como a falta de conhecimento acerca
do uso correto dos pesticidas ou não respeito aos usos das EPIs podem estar
relacionados com o risco de intoxicação. Sabe-se que os pesticidas podem causar danos
no DNA em pessoas que são ocupacionalmente expostas. Apesar de existir muitos
estudos sobre o dano em agricultores, poucos estudos foram realizados com ACEs.
Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o dano genômico em
ACEs da cidade de Aparecida de Goiânia (GO) e correlacionar o dano com os quadros
de intoxicação e com uso de EPIs e aos estilos de vidas dos agentes. Foram
selecionados para pesquisa 39 ACEs e 39 pessoas da comunidade local que não foram
ocupacionalmente expostos a pesticidas. Através de um questionário estruturado foram
coletados dados sobre estilo de vida dos participantes, tais como idade, sexo, etilismo,
tabagismo, além de dados acerca do uso de EPIs e sinais e sintomas de intoxicação dos
ACEs. A avaliação do dano genômico foi realizada pela da técnica de micronúcleo, e o
teste de colinesterase foi realizado nos ACEs para observar a presença de intoxicação
crônica. O grupo exposto foi composto por 21 homens (53,8%) e 18 mulheres (46,2%).
Dos 39 agentes, 10 (25,6%) fumavam e 29 (74,4%) não fumavam e 23 (58,9%) bebiam
e 16 (41,1%) não bebiam. A avaliação da colinesterase foi normal em todos os agentes,
porém, ao comparar a frequência dos micronúcleos do grupo caso com controle, foi
observada uma diferença estatística (p<0,05). Ao correlacionar o uso de EPIs com dano
genômico, não foi encontrada uma diferença significativa. Com base nos achados dessa
pesquisa, pode-se afirmar que o uso de pesticidas por ACEs representa um risco de dano
genômico, o que pode trazer sérios problemas de saúde para os mesmos. Vale salientar
que há uma necessidade de educação sobre o risco do uso de pesticidas, principalmente
para os grupos ocupacionalmente exposto.
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INFLUÊNCIA DO BARBATIMÃO(Stryphnodendron adstringens)NA ANGIOGÊNESE E GENOTOXICIDADE.Chaves, Dwight Assis 05 February 2015 (has links)
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Dwight Assis Chaves.pdf: 1963972 bytes, checksum: a15ea173ac93c1534367c22dfc6105bd (MD5)
Previous issue date: 2015-02-05 / The barbatimão (Stryphnodendron adstringens) is a medicinal plant, rich in tannins,
found in the cerrado, which has anti-inflammatory, analgesic activity and a protective
activity of gastric mucosa. In this work we evaluated the angiogenic activity and result
from antiangiogenic, genotoxic and non-genotoxic of the barbatimão bark aqueous
solution. Data from recent studies of the angiogênise using the CAM of hens egg to
the barbatimão were not found in the literature. The barbatimão shells for the
preparation of ASB (aqueous solution of barbatimão) were acquired in the city of
Goiânia. Were used 30 grams of crushed shells to one litre of water. Angiogenic
activities and result from antiangiogenic were evaluated by the experimental method
of the corioalantoide membrane (CAM) and as positive control was used the
Regederm product, which features angiogenic activity known. Genotoxic activity was
evaluated from the barbatimão from aqueous solution using experimental model the
micronucleus test in bone marrow of mice, and non-genotoxic activity was evaluated
by the simultaneous treatment of the ASB and the compound known to be genotoxic
Mitomycin C (MMC). The presented ASB tests, was considered genotoxic,
angiogenic and features not non-genotoxic on concentration tested compared with
the controls. The ASB presented a high vascularization in MCA (50.4) compared with
the positive control (52.9). The dose of the barbatimãos peel solution (30 mg.ml -1)
analyzed presented difference (p<0,05) at the EPCMN frequency relative to the
negative control group.Comparing the frequency of dose EPCMN SABMMC
concurrent treatment with the positive control, there was no significant difference
(p>0,05).
The results were promising, cooperating with future research for developing new
medicines. It is noticed that the genus presents promising active principles for the
development of new herbal medicines, that becomes necessary more studies and
research for consumer safety. / O barbatimão (Stryphnodendron adstringens) é uma planta medicinal, rica em
taninos, encontrada no cerrado,a qual possui atividade anti-inflamatória, analgésica
e uma atividade protetora da mucosa gástrica. Neste trabalho foram avaliadas as
atividades angiogênica e antiangiogênica, genotóxica e antigenotóxica da solução
aquosa da casca do Barbatimão.Dados dos estudos recentes da angiogênise
utilizando a MCA de ovo de galinha para o barbatimão não foram encontrados na
literatura.As cascas de barbatimão para o preparo da SAB(Solução aquosa de
barbatimão) foram adquiridas na cidade de Goiânia. Foram utilizadas 30 gramas de
cascas trituradas para um litro de água. As atividades angiogênica e antiangiogênica
foram avaliadas pelo método experimental da membrana corioalantoide (MCA) e
como controle positivo foi utilizado o produto Regederm, que apresenta atividade
angiogênica conhecida. A atividade genotóxica foi avaliada a partir da solução
aquosa do barbatimão utilizando como modelo experimental o teste do micronúcleo
em medula óssea de camundongos, sendo que a atividade antigenotóxica foi
avaliada pelo tratamento simultâneo da SAB e do composto sabidamente genotóxico
Mitomicina C (MMC). A SAB pelos testes apresentados foi considerada angiogênica,
genotóxica e não possui características antigenotóxicas na concentração testada
comparada com os controles. A SAB apresentou uma elevada vascularização na
MCA (50.4%) quando comparada com o controle positivo(52,9%). A dose da
solução da casca de barbatimão (30 mg.ml-1) analisada apresentou diferença
(p<0,05) na frequência de EPCMN em relação ao grupo controle
negativo.Comparando a frequência de EPCMN da dose do tratamento de
SAB+MMC simultâneo com o controle positivo, não houve diferença significativa
(p>0,05).
Os resultados foram promissores, cooperando com pesquisas futuras para
desenvolvimento de novos medicamentos.Percebe-se que o barbatimão apresenta
princípios ativos promissores para o desenvolvimento de novos medicamentos
fitoterápicos, para isso tornam-se necessários mais estudos e pesquisas para
segurança do consumidor final.
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