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Orientador: Noeme Sousa Rocha / Resumo: A glomerulonefrite membranosa (GNM) é uma das principais causas de síndrome nefrótica no mundo e figura entre as glomerulopatias primárias mais prevalentes. Desde a década de 50, estudos são realizados na tentativa de elucidar os mecanismos etiopatogênicos envolvidos no desenvolvimento da doença. Apenas em 2009 o antígeno, denominado receptor tipo M da Fosfolipase A2 (PLA2R), foi descrito em casos de glomerulonefrite primária. Esta descoberta representou evolução notável no entendimento da gênese da doença. Numerosos estudos foram realizados desde então, com o objetivo de estabelecer a relação entre a presença de anticorpos anti-PLA2R e a forma primária da doença. Assim, o objetivo deste estudo foi verificar a prevalência deste anticorpo nas biópsias renais pelo método imunoistoquímico e no soro pelo método de ELISA, em pacientes portadores de GNM primária e da forma membranosa secundária ao lúpus eritematoso sistêmico (classe V da OMS). Trata-se de análise retrospectiva das biópsias renais e dos prontuários eletrônicos, de onde foram obtidos os dados clínicos de 75 pacientes com GNM e 33 pacientes com nefrite lúpica. Um segundo grupo de pacientes ainda em acompanhamento ambulatorial foi incluído para pesquisa de anticorpos circulantes no soro. Encontrou-se como resultados correlação estatisticamente significativa entre os valores de anticorpos na biópsia e a forma primária da doença (OR: 25,8 – IC 95% 8,00;83,43). O teste avaliado mostrou sensibilidade de 91,2% e especificid... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Membranous glomerulonephritis (MGN) is one of the leading causes of nephrotic syndrome in the world and is among the most prevalent primary glomerulopathies. Since the 1950s studies have been carried out in an attempt to elucidate the etiopathogenic mechanisms involved in the development of the disease. Only in 2009 the antigen, named M type phospholipase A2 receptor (PLA2R), involved in primary glomerulonephritis was described. This discovery represented a remarkable step in the understanding of the genesis of the disease. Numerous studies have been carried out with the aim of establishing the relationship between the presence of anti-PLA2R antibodies and the primary form of the disease. We performed this study to check the prevalence of the antibody in renal biopsies and in serum, in patients with primary membranous glomerulonephritis and membranous lupus nephritis (class V of WHO). The study was done on retrospective analysis of renal biopsies and electronic medical record, where we obtained clinical data of 75 patients with MGN and 33 patients with lupus nephritis (class V by WHO and ISN/RPS classifications). A secondary group of patients, still in follow up, was included for circulating antibodies research. The antibody screening in renal biopsies was realized by immunohistochemical method. In serum, we used the Elisa test for evaluation of circulating antibodies. We found a statistically significant correlation between antibody values in the biopsy and the primary form ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Introdução: A injúria ao podócito glomerular tem um papel crítico para o surgimento de proteinúria em diferentes glomerulopatias. Neste estudo avaliamos a expressão gênica das proteínas associadas ao podócito em biópsias renais e na urina simultaneamente em pacientes com glomerulopatias proliferativas (GPP) e não proliferativas (GPNP) proteinúricas, assim como a efeito do tratamento imunossupressor sobre a expressão destas moléculas. Material e Métodos: Setenta e cinco pacientes adultos foram incluídos, 35 com diagnóstico de GPNP e 41 casos de GPP. Vinte e um indivíduos sem doença renal foram incluídos como controles. O RNAm foi quantificado no tecido renal (basal) e em células do sedimento urinário (na biópsia, aos 6 e 12 meses) dos genes nefrina, podocina, podocalixina, sinaptopodina e alfa actinina-4 por PCR em tempo real. A expressão gênica foi correlacionada com a proteinúria e a função renal, e a variação do RNAm ao longo do tempo foi comparada entre os grupos pela Equação de Estimativas Generalizadas. Resultados: O RNAm dos genes (exceto da sinaptopodina) no tecido estava significativamente reduzido no grupo GPNP. No grupo GPP, a expressão também foi menor, mas apenas o gene da podocina teve diferença estatística comparado aos controles. Em paralelo, o RNAm dos mesmos genes na urina basal foi mais elevado nos pacientes, e mais marcadamente no grupo GPP. Após seis meses de tratamento imunossupressor associado ou não a inibidores da angiotensina, no grupo GPP houve uma redução significativa da expressão de podocina, podocalixina e alfa actinina-4 aos 6 e 12 meses quando comparando ao nível basal (p<0,001). No grupo GPNP, apenas a alfa actinina-4 diminuiu (p=0,008) com uma tendência de redução da podocalixina (p=0,08). Verificou-se uma forte correlação entre os genes na biópsia (exceto com sinaptopodina), mas na urina esta correlação foi fraca. Houve correlação moderada mas significativa dos genes na urina com a proteinúria basal e dos 6 meses, mas nenhum gene correlacionou-se com a taxa de filtração glomerular. Conclusão: Nestes pacientes com glomerulopatias proteinúricas em fase aguda de doença, a expressão gênica de proteínas associadas ao podócito estava reduzida na biópsia renal concomitante com aumento da excreção urinária, sugerindo a presença de podocitopenia intra-renal e podocitúria, respectivamente. O RNAm destes genes reduziu em paralelo com a proteinúria com o uso de imunossupressores, sugerindo reorganização estrutural dos podócitos. Os resultados deste estudo não são conclusivos sobre diferenças qualitativas da podocitopatia com base em tipos histológicos específicos. / Introduction: Injury to the glomerular podocyte has a critical role in the development of proteinuria in different glomerulopathies. In this study, gene expression of podocyte-associated proteins was evaluated in kidney biopsies and urine simultaneously in patients with proliferative (PGP) and non proliferative (NPGP) glomerulopathies. The effect of immunosuppressive treatment on the expression of these molecules was also studied. Material and Methods: Seventy-five adult patients were included, 35 with NPGP and 41 cases of PGP. Twenty-one individuals without renal disease were included as controls. The mRNA was quantified by real time PCR in renal tissue (baseline) and in urinary sediment cells (at biopsy, at 6 and 12 months) for the following genes: nephrin, podocin, podocalyxin, synaptopodin and alpha actinin-4. Gene expression was correlated with proteinuria and renal function, and variation in mRNA levels over time was compared between groups by Generalized Estimating Equation. Results: The mRNA of all genes (except synaptopodin) in renal tissue was significantly decreased in NPGP group. In the PGP, this expression was also lower, but only podocin had statistical difference as compared to controls in parallel, mRNA of the same genes was increased in baseline urine of the patients, but more markedly in PGP group. After six months of immunosuppressive treatment, with or without angiotensin inhibitors, there was a significative reduction in urinary expression of podocin, podocalyxin and alpha actinin-4 at 6 and 12 months as compared to baseline levels. In the NPGP group, only alpha actinin-4 decreased in the urine (p=0,008) and there was also a trend to reduction of podocalyxin (p=0,08). There was a strong correlation between all genes (except for synaptopodin) in biopsy, but in the urine this correlation was weak. There was also a moderate but significative correlation between urinary genes and baseline and six-month proteinuria, but no gene correlated with glomerular filtration rate. Conclusion: In these patients with proteinuric glomerulopathies in the acute phase of disease, gene expression of podocyte-associated proteins was decreased in kidney biopsy concurrent with increased levels in the urine, suggesting the presence of intra-renal podocytopenia and podocyturia respectively. The mRNA of these genes decreased in parallel with proteinuria along with immunosuppressive treatment, suggesting structural reorganization of podocytes. The findings of this study cannot be conclusive about qualitative differences of the podocytopathy based on specific histologic types.

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-26Bitstream added on 2015-04-09T12:47:49Z : No. of bitstreams: 1 000814099.pdf: 1099789 bytes, checksum: 35da07dc8f564c92e438ab64715aa4f3 (MD5) / O presente estudo buscou avaliar as alterações glomerulares e tubulares associadas com o carcinoma mamário em cadelas. Para tanto foram utilizadas 11 fêmeas caninas como controle e 32 com diagnóstico de carcinoma mamário, atendidas pelo Serviço de Oncologia e Obstetrícia do Hospital Veterinário “Governador Laudo Natel” da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - UNESP, câmpus de Jaboticabal, SP. O protocolo experimental incluiu a obtenção de histórico clínico e exames inerentes ao hemograma, bioquímica sérica, excreção fracionada de sódio, eletroforese de proteínas séricas e urinárias e pressão arterial sistêmica em conjunto da avaliação do tecido renal obtido por tru-cut logo após a realização da ováriohisterectomia (OH), os quais foram avaliados por microscopia de luz, imunofluorescência e microscopia eletrônica de transmissão. Vale ainda ressaltar que exames sorológicos, PCR e testes hormonais foram utilizados para exclusão/inclusão de animais nos seus respectivos grupos. O grupo carcinoma apresentou maior concentração de globulinas, haptoglobina e transferrina séricas, indicando provável estímulo e produção de substâncias provenientes do carcinoma mamário. A proteinúria associada a maior frequência no aparecimento de proteínas urinárias de baixo, médio e alto pesos moleculares e sua relação com as alterações da microscopia de luz evidência que existem tanto alterações glomerulares quanto tubulares. Ademais a associação desses achados ao depósito de diferentes classes de imunoglobulinas e complemento C3 (C3) na imunofluorescência renal, e a presença de depósitos eletrodensos subendoteliais no glomérulo confirmam a existência de importantes alterações renais relacionados ao carcinoma mamário em cadelas / The present study evaluated the glomerular and tubular alterations associated with mammary carcinoma in bitches. Eleven animals was used for control and 32 bitches with diagnosis of mammary carcinoma was assisted by Oncology and Obstetrics Service of the Veterinary Teaching Hospital Governador Laudo Natel of Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - UNESP, câmpus de Jaboticabal. The experimental protocol included obtaining clinical history and examination inherent to the blood count, serum biochemistry, urinary fractional excretion of sodium, electrophoresis of serum and urinary protein and blood pressure in combination with the evaluation of renal tissue obtained by tru-cut after the achievement of ovariohysterectomy (OH), which were evaluated by light, immunofluorescence and transmission electron microscopy (TEM). Serological tests, PCR and hormonal tests were used for animal’s exclusion or inclusion in their respective groups. Carcinoma group had higher concentration of globulins, haptoglobin and serum transferrin, indicating probable stimulation and production of substances from mammary carcinoma. Proteinuria associated with higher frequency of low, medium and high molecular weights of urinary proteins and their relationship with glomerular and tubular alterations evidenced by light microscopy and the association of these findings to the deposit of different classes of immunoglobulins and complement C3 (C3) in renal immunofluorescence, and the presence of subendothelial electron-deposits in the glomerulus might support the hypothesis of existence of renal alterations associated with mammary carcinoma

Orientadora: Julieta Rodini Engrácia de Moraes / Banca: Marileda Bonafim Carvalho / Banca: Silvia Regina Catharino Sartori Barraviera / Resumo: Os estudos do tecido renal de cães com insuficiência renal são raros e em sua maioria estão relacionados aos quadros de doença renal familial ou de doenças específicas. Nestes casos, a estrutura morfológica dos rins pode ser alterada por vários fatores no curso de doenças sistêmicas, podendo ser diagnosticadas por meio da histopatologia. A doença glomerular é classificada de acordo com o padrão histológico das alterações visualizadas no tecido renal, e portanto o conhecimento deste aspecto da histopatologia é necessário para a sua compreensão. Análise morfológica de 11 casos de cães com insuficiência renal foi descrita. As alterações foram caracterizadas e classificadas morfologicamente, de acordo com os padrões estabelecidos pela Organização Mundial de Saúde para seres humanos. Glomerulonefrite esclerosante difusa foi diagnosticada em 82% dos animais e Nefrite intersticial crônica nos 18% restantes. Os tipos de lesões identificadas neste estudo, e suas freqüências, foram similares aos encontrados na literatura, onde alterações glomerulares são mais freqüentes na insuficiência renal crônica. / Abstract: The studies of the renal tissue of dogs with renal failure are rare and in most of cases are related to the familial renal disease or of specific diseases. In these cases, the morphologic structure of the kidneys may be changed by several factors in the course of systemic diseases, could be diagnosed by means of histopatology. The glomerular disease is classified as for the histological pattern of the alterations visualized in the renal tissue, and therefore the knowledge of this histopatologic aspect is necessary for his comprehension. Morphologic analysis of 11 cases of dogs with renal failure was described. The alterations were characterized and classified morphologically, as for the patterns established by the World Health Organization for human beings. Glomerulonephritis diffuse sclerosing was diagnosed in 82% of the animals and chronic interstitial nephritis in the remaining 18%. The types of lesions identified in this study, and their frequencies, were similar to the noticed in the literature, in which glomerular alterations are more frequent in the chronic renal failure. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-08-30Bitstream added on 2014-06-13T20:17:36Z : No. of bitstreams: 1 camargo_mhb_me_jabo.pdf: 948018 bytes, checksum: c97b9fdef07dcd51c130069083d377af (MD5) / Os estudos do tecido renal de cães com insuficiência renal são raros e em sua maioria estão relacionados aos quadros de doença renal familial ou de doenças específicas. Nestes casos, a estrutura morfológica dos rins pode ser alterada por vários fatores no curso de doenças sistêmicas, podendo ser diagnosticadas por meio da histopatologia. A doença glomerular é classificada de acordo com o padrão histológico das alterações visualizadas no tecido renal, e portanto o conhecimento deste aspecto da histopatologia é necessário para a sua compreensão. Análise morfológica de 11 casos de cães com insuficiência renal foi descrita. As alterações foram caracterizadas e classificadas morfologicamente, de acordo com os padrões estabelecidos pela Organização Mundial de Saúde para seres humanos. Glomerulonefrite esclerosante difusa foi diagnosticada em 82% dos animais e Nefrite intersticial crônica nos 18% restantes. Os tipos de lesões identificadas neste estudo, e suas freqüências, foram similares aos encontrados na literatura, onde alterações glomerulares são mais freqüentes na insuficiência renal crônica. / The studies of the renal tissue of dogs with renal failure are rare and in most of cases are related to the familial renal disease or of specific diseases. In these cases, the morphologic structure of the kidneys may be changed by several factors in the course of systemic diseases, could be diagnosed by means of histopatology. The glomerular disease is classified as for the histological pattern of the alterations visualized in the renal tissue, and therefore the knowledge of this histopatologic aspect is necessary for his comprehension. Morphologic analysis of 11 cases of dogs with renal failure was described. The alterations were characterized and classified morphologically, as for the patterns established by the World Health Organization for human beings. Glomerulonephritis diffuse sclerosing was diagnosed in 82% of the animals and chronic interstitial nephritis in the remaining 18%. The types of lesions identified in this study, and their frequencies, were similar to the noticed in the literature, in which glomerular alterations are more frequent in the chronic renal failure.

Made available in DSpace on 2016-07-01T13:10:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-13. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:14:18Z : No. of bitstreams: 1 000866867.pdf: 2330149 bytes, checksum: 96dff1e0184e3c0fb472e739765d613e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A ehrlichiose monocítica canina (EMC), é doença infecciosa de alta incidência na clínica veterinária, causada por Ehrlichia canis, bactéria gram-negativa intracelular obrigatória e transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus. O trabalho teve como objetivo avaliar as lesões histopatológicas em rins e baço causadas pela EMC, assim como os parâmetros da bioquímica sérica, ureia, creatinina, albumina e globulina. Para tanto, 16 cães apresentaram valores médios de ureia (90,18mg/dl) e creatinina (1,62mg/dl) acima dos valores de referência normal para cães; a albumina apresentou valores abaixo do normal com média de 2,01g/dl, enquanto a globulina permaneceu dentro da média com 3,58g/dl. A análise histopatológica constituiu na avaliação da região cortical e medular dos rins e do parênquima esplênico. As alterações morfológicas mais prevalentes foram o espessamento da membrana basal, formação de sinéquias, degeneração e necrose tubular. Quanto às glomerulonefrites a que apresentou maior ocorrência foi a do tipo mesangial em 62,5% (10/16) dos cães. Quanto às alterações esplênicas 43,7% (7/16) dos cães desenvolveram hipoplasia dos folículos linfóides, e 87,5% destes (14/16) apresentaram acúmulo de plasmócitos no parênquima. A análise estatística de correlação entre as variáveis, evidenciou correlação positiva entre a concentração de ureia e hiperplasia de células epiteliais glomerulares, e correlação positiva entre a creatinina e hiperplasia de células mesangiais e dilatação tubular; e entre a concentracão de globulina e o infiltrado de plasmócitos. Correlação negativa foi observada para albumina e infiltrado plasmocitário. Em baço, hipertrofia de folículos linfoides e ureia tiveram correlação positiva, enquanto albumina e infiltrado plasmocitário apresentaram correlação negativa. Houve predomínio de glomerulonefrite mesangial, e o infiltrado plasmocitário parece ter papel... / Canine monocytic ehrlichiosis (CME), is an infectious disease of high incidence in clinical routine, caused by Ehrlichia canis, an obligate intracellular gram-negative bacterium and transmitted by the tick Rhipicephalus sanguineus. This work aimed to evaluate the histopathological lesions in kidneys and spleen caused by CME, as well as the parameters of serum biochemistry urea, creatinine, albumin and globulin. To this end, 16 dogs showed mean values of urea (90,18mg / dl) and creatinine (1,62mg / dl) were above the normal reference values for dogs; albumin showed values below normal averaging 2.01g / dl, while globulin remained within the average with 3,58g / dl. The histopathological analysis consisted of the evaluation of cortical and medullary region of the kidney and splenic parenchyma. The most prevalent morphological changes were the thickening of the basement membrane, synechia formation, tubular degeneration and necrosis. As for glomerulonephritis the one that presented the highest occurrence was the mesangial type in 62.5% (10/16) of dogs. As for the splenic changes 43.7% (7/16) of the dogs developed hypoplasia of lymphoid follicles, and 87.5% of them (14/16) had plasma accumulation in the parenchyma. The statistical analysis of correlation between the variables, showed positive correlation between the urea concentration and hyperplasia of the glomerular epithelial cells, and also a positive correlation between creatinine and hyperplasia of mesangial cells and tubular dilation; and between the concentration of globulin and infiltrate of plasma cells. Negative correlation was observed for albumin and plasma cell infiltration. In spleen, enlarged lymphoid follicles and urea had positive correlation, whereas albumin and plasma cell infiltrates showed a negative correlation. There was a predominance of mesangial glomerulonephritis, and the plasma cell infiltrate probably plays an essential role in the immunopathology of injuries

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Coorientador: Gyl Eanes Barros Silva / Coorientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Priscylla Tatiana Chalfun Guimarães Okamoto / Banca: Andrigo Barboza de Nardi / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Banca: Sabryna Gouveia Calazans / Resumo: O presente estudo buscou avaliar as alterações glomerulares e tubulares associadas com o carcinoma mamário em cadelas. Para tanto foram utilizadas 11 fêmeas caninas como controle e 32 com diagnóstico de carcinoma mamário, atendidas pelo Serviço de Oncologia e Obstetrícia do Hospital Veterinário "Governador Laudo Natel" da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - UNESP, câmpus de Jaboticabal, SP. O protocolo experimental incluiu a obtenção de histórico clínico e exames inerentes ao hemograma, bioquímica sérica, excreção fracionada de sódio, eletroforese de proteínas séricas e urinárias e pressão arterial sistêmica em conjunto da avaliação do tecido renal obtido por tru-cut logo após a realização da ováriohisterectomia (OH), os quais foram avaliados por microscopia de luz, imunofluorescência e microscopia eletrônica de transmissão. Vale ainda ressaltar que exames sorológicos, PCR e testes hormonais foram utilizados para exclusão/inclusão de animais nos seus respectivos grupos. O grupo carcinoma apresentou maior concentração de globulinas, haptoglobina e transferrina séricas, indicando provável estímulo e produção de substâncias provenientes do carcinoma mamário. A proteinúria associada a maior frequência no aparecimento de proteínas urinárias de baixo, médio e alto pesos moleculares e sua relação com as alterações da microscopia de luz evidência que existem tanto alterações glomerulares quanto tubulares. Ademais a associação desses achados ao depósito de diferentes classes de imunoglobulinas e complemento C3 (C3) na imunofluorescência renal, e a presença de depósitos eletrodensos subendoteliais no glomérulo confirmam a existência de importantes alterações renais relacionados ao carcinoma mamário em cadelas / Abstract: The present study evaluated the glomerular and tubular alterations associated with mammary carcinoma in bitches. Eleven animals was used for control and 32 bitches with diagnosis of mammary carcinoma was assisted by Oncology and Obstetrics Service of the Veterinary Teaching Hospital "Governador Laudo Natel" of Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - UNESP, câmpus de Jaboticabal. The experimental protocol included obtaining clinical history and examination inherent to the blood count, serum biochemistry, urinary fractional excretion of sodium, electrophoresis of serum and urinary protein and blood pressure in combination with the evaluation of renal tissue obtained by tru-cut after the achievement of ovariohysterectomy (OH), which were evaluated by light, immunofluorescence and transmission electron microscopy (TEM). Serological tests, PCR and hormonal tests were used for animal's exclusion or inclusion in their respective groups. Carcinoma group had higher concentration of globulins, haptoglobin and serum transferrin, indicating probable stimulation and production of substances from mammary carcinoma. Proteinuria associated with higher frequency of low, medium and high molecular weights of urinary proteins and their relationship with glomerular and tubular alterations evidenced by light microscopy and the association of these findings to the deposit of different classes of immunoglobulins and complement C3 (C3) in renal immunofluorescence, and the presence of subendothelial electron-deposits in the glomerulus might support the hypothesis of existence of renal alterations associated with mammary carcinoma / Doutor