Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PatriciaBBMB.pdf: 749567 bytes, checksum: e355ba98f4fd47889fd16327a3ca1f09 (MD5) Previous issue date: 2005-07-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / American visceral leishmaniasis is a zoonosis caused by Leishmania infantum and transmitted by the bite of the sand flies Lutzomia longipalpis.The main domestic reservoir is the dog, while foxes and opposums are the known wild reservoirs. However, identification of natural infections with L. infantum in rodents appears for need of investigating the participation of these rodents how source of infection of the parasite. In the present work the Leishmania infantum infection was investigated in rodents captured in Rio Grande do Norte, aiming at to offer subsidies to the understanding of the epidemic chains of LVA in the State. Thirteen Galea spixii were distributed in four groups, being G1 the group control with four animals and the others, G2, G3 and G4, with three animals each. Those animals were intraperitoneally inoculated with 107 promastigotas of L. infantum and accompanied for, respectively, 30, 90 and 180 days. Weekly the animals were monitored as for the corporal weight and rectal temperature. At the end of each stipulated period the animals were killed. Blood were used for determination of the parameters biochemical and haematological, PCR, ELISA, microscopic examination and cultivation in NNN medium. Liver, spleen and lymph node were used in Giemsa-stained impression and cultivation in NNN medium. Liver and spleen fragments were still used in PCR and histopathological, respectively. At the same time 79 rodents of the species Rattus rattus, Bolomys lasiurus, Oligoryzomys nigripis, Oryzomys subflavus and Trichomys apereoides were captured in the Municipal districts of Brejinho, Campo Grande, Coronel Ezequiel, Passa e Fica and V?zea for identification of natural infection with L. infantum. Evidence of infection was checked by direct examination of Giemsa-stained impression of liver, spleen and blood and culture of these tissues in NNN medium. Antibodies were researched by ELISA. They were not found differences among the weigh corporal final, rectal temperature and biochemical and haematological parameters of the Galea spixii controls and infected. The rectal temperature of the animals varied from 36OC to 40OC. For the first time values of the haematocrit (33,6% to 42,8%), hemoglobin (10,2 to 14,5g/dl), erythrocyts number (4,67x106 to 6,90x106/mm3), total leukocytes (0,9x103 to 9,2x103/mm3), platelets (49x103 to 509x103/mm3) total proteins (1,56 to 6,06 g/dl), albumin (1,34 to 3,05 g/dl) and globulins (0,20 to 3,01 g/dl) of the Galea spixii were determined. The lymphocytes were the most abundant leucocytes. Infection for L. infantum was diagnosed in two animals euthanasied 180 days after the infection. In one of the animals was also identified antibodies anti-Leishmania. The parasite was not found in none of the five other species of rodents captured. Galea spixii are resistant to the infection for L. infantum and they are not good models for the study for visceral leishmaniose, although they can act as infection sources. More studies are necessary to determine the paper of the rodents in the epidemic chain of transmission of the visceral leishmaniose in the State of Rio Grande do Norte / A leishmaniose visceral americana ? uma zoonose causada pelo parasita Leishmania infantum e transmitida pela picada do fleb?tomo Lutzomya longipalpis. O c?o ? o principal reservat?rio dom?stico, enquanto que raposas e gamb?s s?o os reservat?rios silvestres conhecidos. No entanto, a identifica??o de infec??es naturais com L. infantum em roedores aponta para a necessidade de se investigar a participa??o destes animais como fonte de infec??o do parasita para os insetos vetores. No presente trabalho investigou-se a infec??o com parasita Leishmania infantum em roedores capturados no Rio Grande do Norte, objetivando oferecer subs?dios ? compreens?o das cadeias epidemiol?gicas da LVA no Estado. Treze pre?s da esp?cie Galea spixii foram distribu?dos em quatro grupos, sendo G1 o grupo controle com quatro animais e os demais, G2, G3 e G4, com tr?s animais cada. Esses animais foram inoculados por via intraperitonial com 107 promastigotas de L. infantum e acompanhados por, respectivamente, 30, 90 e 180 dias. Semanalmente os animais foram monitorados quanto ao peso corporal e temperatura retal. Ao final de cada per?odo estipulado os animais foram eutanasiados. O sangue colhido foi utilizado na determina??o dos par?metros bioqu?micos e hematol?gicos, PCR, ELISA, confec??o de esfrega?o sangu?neo e cultivo em meio NNN. Fragmentos de f?gado, ba?o e linfonodos foram utilizados para confec??o de l?minas por aposi??o e cultivo em meio NNN. Fragmentos de f?gado e ba?o foram ainda utilizados para realiza??o de PCR e histopatol?gico, respectivamente. Concomitantemente 79 roedores das esp?cies Rattus rattus,Bolomys lasiurus, Oligoryzomys nigripis, Oryzomys subflavus e Trichomys apereoides foram capturados nos Munic?pios de Brejinho, Campo Grande, Coronel Ezequiel, Passa e Fica e V?rzea para identifica??o de infec??o natural por L. infantum. O diagn?stico da infec??o nos animais foi realizado pelo exame direto das impress?es coradas com Giemsa e cultura em meio NNN de f?gado, ba?o e sangue. N?o foram encontradas diferen?as no o ganho de peso total, temperatura retal e par?metros bioqu?micos e hematol?gicos dos pre?s controles e infectados. A temperatura retal variou entre 36OC e 40OC. Pela primeira vez foram determinados os valores do hemat?crito (33,6% a 42,8%), hemoglobina (10,2 a 14,5g/dl), n?mero de eritr?citos (4,67x106 a 6,90x106/mm3), leuc?citos totais (0,9x103 a 9,2x103/mm3), plaquetas (49x103 a 509x103/mm3), prote?nas totais (1,56 a 6,06 g/dl), albumina (1,34 a 3,05 g/dl) e globulinas (0,20 a 3,01 g/dl) nesta esp?cie. Os linf?citos foram os leuc?citos mais abundantes. Infec??o por L. infantum foi diagnosticada em dois animais eutanasiados aos 180 dias, sendo que em um desses tamb?m foram identificados anticorpos contra o parasita. N?o foi observada positividade em nenhuma das cinco outras esp?cies de roedores capturadas. A esp?cie Galea spixii ? resistente ? infec??o por L. infantum e, portanto, n?o ? bom modelo para o estudo da leishmaniose visceral, embora possam atuar como fontes de infec??o. Mais estudos s?o necess?rios para que se possa determinar o papel dos roedores na cadeia epidemiol?gica da leishmaniose visceral no Estado do Rio Grande do Norte

The aim of this thesis was to examine the influence of nitrite on fish. Influence of nitrite was evaluated on the basis of acute and sub-chronic toxicity tests results on rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). The effects of nitrite were also observed in wels catfish {--} albino (Silurus glanis). On the basis of the results of acute toxicity tests, values of lethal concentration of nitrite for rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) (96hLC50 = 11.2 mg.l-1 NO2-) and for wels catfish {--} albino (Silurus glanis) (96hLC50 = 15.8 mg.l-1 NO2-) were calculated. Using results of acute toxicity test for rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) and with respect to legislative requirements, concentrations of nitrite for sub-chronic toxicity test were selected. The results of sub-chronic toxicity test showed that nitrite concentration of 3 mg.l-1 NO2- during 28-day exposition caused 65 % fish mortality. This concentration also caused growth rate decrease compared to control. Growth rate among fish exposed to concentrations lower then 3 mg.l-1 NO2- was comparable to control. Among fish exposed to nitrite concentration of 0.6 mg.l-1 NO2- and higher nitrite accumulation in muscle and in blood plasma was observed. Haematological examination showed statistically significant decrease of haematocrit value and concentration of haemoglobin and increase of the number of leukocytes in experimental fish. Other measured haematological parameters (Ery, MCV, MCH and MCHC) were comparable with control.

Da topische Glucocorticoide im Vergleich zur parenteralen Anwendung weniger systemische (Neben)Wirkungen haben können, werden sie bevorzugt in der Human- und Veterinärmedizin eingesetzt. Jedoch konnte bei vielen Untersuchungen gezeigt werden, dass topische Glucocorticoide je nach Applikationsdauer, -ort, Wirkstoffpotenz, -dosis und Behandlungsfläche ausgeprägte messbare Reaktionen wie Suppression der HHNA und der Immunzellen hervorrufen können. Beim Pferd wurden jedoch dahingehend bisher keine Untersuchungen durchgeführt. Da Glucocorticoide im Pferdesport auch dopingrelevant sind wurde der Frage nachgegangen, ob nach der dermalen Applikation eines niederpotenten Glucocorticoidpräparates auf die Haut gesunder Pferde systemische Effekte auftreten können und ob ein, nach perkutaner Resorption auftretender, Wirkstoffspiegel im Blut gemessen werden kann. Im Rahmen dieser Dissertation standen 10 erwachsene, klinisch gesunde Versuchspferde zur Verfügung. Die Versuchsdurchführung erfolgte in 3 Phasen. Vor Behandlungsbeginn (Tag 0) wurden von jedem Pferd die Kontrolldaten erfasst. Die Applikation der Dexamethasonformulierung erfolgte über einen Zeitraum von 10 Tagen. 2 mal täglich wurden 50 g einer 0,017 %igen Dexamethasonemulsion auf eine definierte Hautfläche (30 x 50 cm) aufgetragen. Die Blutentnahmen zur Gewinnung der Proben erfolgten am 2., 6., 8., und 10. Tag der Behandlung. Die Nachbehandlungsphase erstreckte sich über einen Zeitraum von 20 Tagen ohne die Dexamethasonanwendung. Hier erfolgte die Probengewinnung an den Tagen 3, 7, 11, 14 und 20 nach Absetzen der Behandlung. Aus den gewonnenen Plasmaproben wurden die Konzentrationen von Cortisol, Insulin, T3 und T4 mittels Radioimmunoassay bestimmt, sowie die ACTH-Konzentrationen mittels Chemilumineszenz-Enzymimmunometrischem Assay. Darüber hinaus wurden die hämatologischen und blutchemischen Parameter gemessen. Die Funktion des negativen Feetback-Mechanismus der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennierenrinden-Achse wurde mittels eines ACTH-Stimulationstests überprüft. Während der Behandlung konnte eine ausgeprägte Suppression der Nebennierenrindenfunktion, gekennzeichnet durch die signifkante Abnahme der basalen Cortisolkonzentration, auf weniger als 10 % der Ausgangswerte vor der Behandlung gemessen werden. Auch der ACTH-Stimulationstest am 8. Behandlungstag zeigte einen signifikant geringeren Anstieg des Kortisolspiegels (< 50 %) als vor der Behandlung. Weiterhin kam es während der dermalen Verabreichung von Dexamethason zu einer progressiven, signifikanten Zunahme des Serumglucosespiegels bis um das 1,5 fache des Kontrollwertes. Parallel dazu stieg der Plasmainsulinspiegel um das 3-fache des Ausgangswertes vor Behandlungsbeginn. Die Plasmakonzentration von T3 zeigte einen leichten behandlungsbedingten Abfall, wohingegen der Plasma-T4-Spiegel einen deutlichen Rückgang auf 50 % des Ausgangswertes zeigte. Die endokrinologischen Veränderungen waren nach Absetzen der Behandlung alle reversibel. Weiterhin kam es zu einer signifikanten Reduktion der eosinophilen Granulozyten und der Lymphozyten, während die Zahl der Neutrophilen zunahm. Plasmakonzentrationen von Dexamethason konnten mit einem Maximalwert am 8. Tag der Behandlung (1542,10 ± 567 pg/ml) gemessen werden. Diese Ergebnisse belegen, dass bei der dermalen Applikation von Dexamethason eine perkutane Wirkstoffresorption in einem Umfang stattfindet, dass die typischen systemischen Glucocorticoidwirkungen auftreten. Es kann somit auch davon ausgegangen werden, dass die topische Verabreichung schwach wirksamer Glucocorticoidformulierungen eine gewisse Dopingrelevanz besitzt.

Da topische Glucocorticoide im Vergleich zur parenteralen Anwendung weniger systemische (Neben)Wirkungen haben können, werden sie bevorzugt in der Human- und Veterinärmedizin eingesetzt. Jedoch konnte bei vielen Untersuchungen gezeigt werden, dass topische Glucocorticoide je nach Applikationsdauer, -ort, Wirkstoffpotenz, -dosis und Behandlungsfläche ausgeprägte messbare Reaktionen wie Suppression der HHNA und der Immunzellen hervorrufen können. Beim Pferd wurden jedoch dahingehend bisher keine Untersuchungen durchgeführt. Da Glucocorticoide im Pferdesport auch dopingrelevant sind wurde der Frage nachgegangen, ob nach der dermalen Applikation eines niederpotenten Glucocorticoidpräparates auf die Haut gesunder Pferde systemische Effekte auftreten können und ob ein, nach perkutaner Resorption auftretender, Wirkstoffspiegel im Blut gemessen werden kann. Im Rahmen dieser Dissertation standen 10 erwachsene, klinisch gesunde Versuchspferde zur Verfügung. Die Versuchsdurchführung erfolgte in 3 Phasen. Vor Behandlungsbeginn (Tag 0) wurden von jedem Pferd die Kontrolldaten erfasst. Die Applikation der Dexamethasonformulierung erfolgte über einen Zeitraum von 10 Tagen. 2 mal täglich wurden 50 g einer 0,017 %igen Dexamethasonemulsion auf eine definierte Hautfläche (30 x 50 cm) aufgetragen. Die Blutentnahmen zur Gewinnung der Proben erfolgten am 2., 6., 8., und 10. Tag der Behandlung. Die Nachbehandlungsphase erstreckte sich über einen Zeitraum von 20 Tagen ohne die Dexamethasonanwendung. Hier erfolgte die Probengewinnung an den Tagen 3, 7, 11, 14 und 20 nach Absetzen der Behandlung. Aus den gewonnenen Plasmaproben wurden die Konzentrationen von Cortisol, Insulin, T3 und T4 mittels Radioimmunoassay bestimmt, sowie die ACTH-Konzentrationen mittels Chemilumineszenz-Enzymimmunometrischem Assay. Darüber hinaus wurden die hämatologischen und blutchemischen Parameter gemessen. Die Funktion des negativen Feetback-Mechanismus der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennierenrinden-Achse wurde mittels eines ACTH-Stimulationstests überprüft. Während der Behandlung konnte eine ausgeprägte Suppression der Nebennierenrindenfunktion, gekennzeichnet durch die signifkante Abnahme der basalen Cortisolkonzentration, auf weniger als 10 % der Ausgangswerte vor der Behandlung gemessen werden. Auch der ACTH-Stimulationstest am 8. Behandlungstag zeigte einen signifikant geringeren Anstieg des Kortisolspiegels (< 50 %) als vor der Behandlung. Weiterhin kam es während der dermalen Verabreichung von Dexamethason zu einer progressiven, signifikanten Zunahme des Serumglucosespiegels bis um das 1,5 fache des Kontrollwertes. Parallel dazu stieg der Plasmainsulinspiegel um das 3-fache des Ausgangswertes vor Behandlungsbeginn. Die Plasmakonzentration von T3 zeigte einen leichten behandlungsbedingten Abfall, wohingegen der Plasma-T4-Spiegel einen deutlichen Rückgang auf 50 % des Ausgangswertes zeigte. Die endokrinologischen Veränderungen waren nach Absetzen der Behandlung alle reversibel. Weiterhin kam es zu einer signifikanten Reduktion der eosinophilen Granulozyten und der Lymphozyten, während die Zahl der Neutrophilen zunahm. Plasmakonzentrationen von Dexamethason konnten mit einem Maximalwert am 8. Tag der Behandlung (1542,10 ± 567 pg/ml) gemessen werden. Diese Ergebnisse belegen, dass bei der dermalen Applikation von Dexamethason eine perkutane Wirkstoffresorption in einem Umfang stattfindet, dass die typischen systemischen Glucocorticoidwirkungen auftreten. Es kann somit auch davon ausgegangen werden, dass die topische Verabreichung schwach wirksamer Glucocorticoidformulierungen eine gewisse Dopingrelevanz besitzt.