La inestabilidad microsatélite (MSI) es una característica de los pacientes HNPCC. En estos tumores la perdida del sistema de reparación MMR tiene como consecuencia una acumulación progresiva de mutaciones. Hasta la actualidad no esta claro, como se acumulan estas alteraciones. Sin embargo, la MSI se puede detectar en los pacientes HNPCC antes del diagnóstico del tumor. Uno de nuestros objetivo fue evaluar la presencia de inestabilidad genética en sangre periférica de 2 familias HNPCC tanto portadores como no portadores de una mutación germinal en los genes MLH1 y MSH2. Hemos realizado un análisis extensivo de la distribución alélica de BAT26 meditante una técnica basada en PCR-clonación de esta secuencia. En los pacientes no portadores de la mutación, la distribución alelica de BAT26 sigue una distribución de campana de Gauss sin ningún alelo por debajo de 21Adeninas, mientras que todos los portadores de la mutación demuestran alelos inestables con una frecuencia de 5,6%. Por lo tanto sugerimos que la baja inestabilidad caracteriza los portadores de mutaciones en MMR. Estas observaciones sugieren que las mutaciones somáticas se acumulan antes del diagnostico del tumor, aunque no esta claro si estas acumulación de mutaciones se debe a la pérdida de MMR en un porcentaje pequeño de células o a la haploinsuficiencia del MMR. La detección de estos alelos inestables posiblemente nos puede ayudar en la identificación de portadores asintomáticos que pertenecen a familias con mutaciones germinales no detectables en MMR.Además del defecto en MMR, las alteraciones de los microsatélites en zonas no codificantes podrían tener otras causas. Por este motivo, hemos utilizado un modelo alternativo (DNA mitocondrial) para evaluar si estas alteraciones dependerán solamente del MMR como se ha postulado anteriormente. Las mutaciones somáticas en la secuencia D310 mitocondrial se ha asociado con la progresión tumoral. La inserción o la deleción de nucleótidos se ha encontrado en varios tipos de tumores. La frecuencia de mutaciones en tumores de colon, estómago u endometrio es de 23, 17 y 11%, respectivamente, que es paralelo al grado relativo de MSI observado en tumores con deficiencia en MMR (colon > estómago > endometrio, ratio relativo 10:8:4). Los tumores de colon con mutaciones de +1 nucleótido se ha observado en tumores de estadios avanzados de progresión. Se han identificado dos tumores con una mutación de T > C que restauró una repetición homoplasmica, con deleciones de secuencias de 4 y 6 nucleótidos. Estos resultados demuestran que el incremento mutacional de la secuencia repetitiva mitocondrial depende de la estructura repetitiva del DNA y no es resultado del proceso selectivo durante la tumorogénesis. Estos resultados sugieren que D310 se podría utilizar como reloj molecular para evaluar la historia replicativa de los tumores.La última parte de este estudio se concentra en el análisis de los microsatélites en zonas codificantes y el efecto que podría tener en el proceso tumorogénico. Estas alteraciones podrían cambiar el comportamiento de varias vías donde están implicados estos genes.El mantenimiento de la estabilidad genómica depende de una respuesta celular apropiada al daño y la integridad del sistema de reparación del DNA. Hemos analizado varios genes diana implicados en estas 2 vías en tumores con MSI. Hemos encontrado una alta frecuencia de mutaciones en los genes ATR (21%), MED1 (43%), hMSH3 (56%) y hMSH6 (43%). También se ha detectado una baja frecuencia en CHK1 (9% de los tumores). Estos resultados confirman que ATR, MED1 y CHK1 son genes diana en el proceso tumoral de estómago, y también sugiere que MED1 junto con hMSH3 y hMSH6 aumentan la inestabilidad genómica considerándolos como mutadores segundarios. Además, estos resultados sugieren la inhibición de la vía de respuesta de daño genómico que depende de ATR y CHK1 y que probablemente está implicada en el proceso tumoral en tumores gástricos con MSI. / Microsatellite instability (MSI) characterizes tumors arising in patients with HNPCC syndrome. In these tumors, the loss of MMR compromises the genome integrity, allowing the progressive accumulation of mutations and the establishment of a mutator phenotype in a recessive manner. It is not clear, however, whether MSI can be detected in HNPCC carriers before tumor diagnosis. The aim of this study was to evaluate the presence of genetic instability in MMR gene carriers in peripheral blood lymphocytes of carriers and non-carriers members of two HNPCC families harboring a germline MLH1 and MSH2 mutation, respectively. An extensive analysis of the allelic distribution of single molecules of the polyA tract bat26 was performed using a highly sensitive PCR-cloning approach. In non-carriers, the allelic distribution of single bat26 molecules followed a gaussian distribution with no bat26 alleles shorter than (A)21. All mutation carriers showed unstable alleles with an overall frequency of 5.6%. We therefore suggest that low levels of genomic instability characterize MMR mutation carriers. These observations suggest that somatic mutations accumulate well before tumor diagnosis. Even though it is not clear whether this is due to the presence of a small percentage of cells with lost MMR or due to MMR haploinsufficiency, detection of these short unstable alleles might help in the identification of asymptomatic carriers belonging to families with no detectable MMR gene mutations.In addition to the defect in MMR, alterations of microsatellites in no- coding regions may have other causes. For this reason we have used an alternative model (mitocondrial DNA) to evaluate if these alterations depend only on the defects of the MMR, as previously thought. Somatic mutations at a mitochondrial noncoding polycytidine D310 repeat have been associated with tumor progression. We analyzed whether these alterations are due to the inherent mutability of repeated sequences. Insertion and deletion mutations were found in colon, stomach, endometrium, breast, lung, and prostate tumors. The mutation frequency in colon, gastric, and endometrial tumors was 23, 17, and 11% respectively, which paralleled the relative extent of microsatellite instability in long mononucleotide repeats observed in tumors with mismatch repair deficiency (colon > stomach > endometrium, relative ratio 10:8:4). Colon tumors with mutations of more than one nucleotide were more advanced in tumor progression. Further, two tumors showing a T > C mutation that restored the homopolymeric repeat, harbored sequential deletion mutations of 4 and 6 nucleotides. These results illustrate that the increased mutability of repeated mitochondrial sequences is dependent on the repetitive structure of the DNA molecule and suggest that mutations in the D310, whether homoplasmic or not, and by extrapolation, mitochondrial mutations in general, are not the result of selective pressure during tumorigenesis. We also suggest that the D310 may be used as an universal molecular clock to estimate the relative mitotic history of tumors.The last part of this thesis concentrates in studying the alterations of microsatellites in coding regions and the effect that these will have in tumorogenesis process. Alteration in these genes sequences may be change the behaviour comportment of several pathways.. Maintenance of genomic stability depends on the appropriate cellular responses to DNA damage and the integrity of the DNA repair systems. We analyzed stomach tumors with MSI for frameshift mutations in several potential targets of the mutator phenotype involved in DNA damage-response pathways, and DNA repair system. High frequency of mutations was found within ATR (21%), MED1 (43%), hMSH3 (56%) and hMSH6 (43%) genes. Also, a low frequency of mutations within the CHK1 gene was detected in 9% of tumors. These results confirm ATR, MED1 and CHK1 as targets of the mutator pathway in stomach tumorigenesis, and also suggest a potential role of MED1 increasing, together with hMSH3 and hMSH6, the genomic instability in the mutator pathway as a secondary mutator. Furthermore, these results suggest that the inhibition of the ATR-CHK1 DNA damage-response pathway might be involved in the tumorigenesis of gastric cancer with MSI.

Tesis para optar al grado de Magíster en Finanzas / La literatura evidencia que la inestabilidad financiera está relacionada negativamente con el crecimiento económico para economías homogéneas como: África, Unión Europea, países en desarrollo, y países de bajo y medio ingreso (Guillaumont y Kpodar, 2006; Creel et al., 2015; Boukhatem, 2016; y Batuo et al., 2018). Este estudio analiza la relación entre la inestabilidad financiera y el crecimiento económico en 212 países para una muestra final de 903 datos, del periodo de 1989 a 2015, utilizando las bases de datos del Banco Mundial “Estructura Financiera y Desarrollo" e “Indicadores de Desarrollo Mundial” (WDI), a partir de las cuales se construyó un panel dinámico empleando el estimador de Arellano y Bond (1991) Difference GMM, con el propósito de incorporar en la estimación las relaciones de casualidad que se generan en el interior del modelo, como una forma de tratar los problemas de endogeneidad.. La contribución de este trabajo comprende el análisis de la relación entre la inestabilidad financiera y el crecimiento económico, utilizando una nueva medida de inestabilidad financiera propuesta por Batuo et al. (2018), basada en la metodología de análisis de factores, para una muestra de economías de bajo, medio y alto ingreso; además de aportar a la literatura con data actualizada del tema. Los resultados muestran que la inestabilidad financiera tiene un efecto negativo en el crecimiento económico para toda la muestra. Además, los hallazgos sugieren que el impacto de la inestabilidad financiera en la disminución del crecimiento económico oscila entre el -1,13%-1,38%.

La anemia de Fanconi (FA) es un desorden genético de naturaleza autosómica recesiva y caracterizado por una serie de malformaciones congénitas, fallo de médula ósea y una elevada predisposición a adquirir tumores sólidos y leucemia mieloide aguda. Las células FA, poseen una elevada inestabilidad cromosómica tanto espontánea como inducida por agents inductors de enlaces cruzados. Otros rasgos celulares son la sensibilidad frente al daño oxidativo, fallos en el ciclo cellular, niveles elevados de apoptosis regulación deficiente de la transcripción y disfunción telomérica. Hasta el momento, se ha descrito que existen 12 genes diferentes que pueden causar esta enfermedad, aunque no todos ellos han sido clonados y caracterizados. De entre ellos, FANCA es el que más frecuentemente se halla mutado entre la población y presenta un amplio espectro de mutaciones, siendo las grandes deleciones una de las principales.Un conocimiento más profundo de la biología de esta enfermedad nos va a permitir adquirir una visión más global de la reparación del daño en el DNA en respuesta a determinados agentes así como un mejor entendimiento de las interacciones moleculares que se establecen entre distintos síndromes genéticos y que tienen un indiscutible valor diagnóstico y terapéutico.En este trabajo de tesis se han planteado cuatro objetivos principales y generales, que son:- Establecer potenciales relaciones entre las características hematológicas de la enfermedad y algunas características celulares tales como el acortamiento telomérico y las anomalías cromosómicas numéricas o estructurales.- Caracterizar genéticamente a la población afectada por la anemia de Fanconi española.- Explorar el papel de la ruta FA en la biología y el mantenimiento telomérico.- Estudiar la biología molecular de la ruta FA en respuesta al daño genómico.Con los estudios llevados a cabo, se ha observado un acortamiento telomérico acelerado en los pacientes Fanconi acompañado de un incremento en el número de fragmentos extrateloméricos y fusiones, aunque este exceso de fusiones terminales ocurre de manera independiente a la presencia de TRF2 en el telómero. Además, este acortamiento no está directamente relacionado con la severidad de la enfermedad a nivel hematológico. Si que se relaciona, sin embargo con la enfermedad hematológica la frecuencia espontánea de roturas cromosómicas.Por otra parte, se ha estudiado y caracterizado exhaustivamente la población Fanconi española, haciendo especial énfasis en los portadores de mutaciones en el gen FANCA y en la población de etnia gitana, poseedores de la mayor frecuencia de portadores de mutaciones en FANCA a nivel mundial.Un dato importante extraído de estos estudios es la participación de la histona H2AX dentro de la ruta Fanconi en respuesta a la irradiación con UV-C. / Fanconi anemia (FA) is an autosomic recessive genetic disorder characterized by a subset of congenital malformations, bone marrow failure and a high predisposition to solid tumours and acute myeloid leukaemia acquisition. FA cells harbour a high spontaneous and induced by interstrand crosslinking agents chromosomic instability. Some other cellular features are the sensibility in front of oxidative damage, cell cycle failure, increased levels of apoptosis, impaired transcription regulation and telomeric dysfunction.Up to date, there have been described 12 genes that cause this disease though not all of them have been cloned and characterized so far. Among them, FANCA is the most prevalent gene in the affected population and it can be affected by a wide spectrum of mutations, being large deletions one of the most common. Acquire a sight about the biology of this illness will allow us having a wider view about/on DNA damage repair in response to some agents. At the same time, we can have a better knowledge about the molecular interactions established among different genetic syndromes with an indisputable diagnostic and therapeutic value. Within the present thesis four main objectives have been raised:- Establishment of potential relationship between the haematological disease and telomere shortening, and numerical or structural chromosomal abnormalities - Genetic characterization of Fanconi anemia Spanish population- Explore the role of the FA pathway on telomeric biology and maintenance- Study the molecular biology of the FA pathway in response to genomic damage As a conclusion of these studies, an accelerated telomeric shortening together with and increased number of extratelomeric fragments and end-to-end fusions has been observed in the FA patients compared to age-matched controls. The excess of terminal fusions is not related with an impaired role of TRF2. This telomeric shortening is not related with the hematologic disease observed in these patients.However, the spontaneous frequency of chromosomal breaks seems to correlate with the haematological severity.Spanish FA population has been extensively studied and characterized, especially those belonging to FA-A complementation group and the gypsy population, which has come out to be the group with the highest frequency of FANCA mutated carriers worldwide.An important point unraveled from our studies is the role of histone H2AX in the FA pathway in response to UV-C irradiation.

TESI DOCTORAL (DR J.S. ESCALA ARNAU).La Resonància Magnètica (RM) s'ha convertit en el mètode d'exploració no invasiu d'el.lecció, per l'anàlisi de les alteracions al genoll; i s'ha convertit en una eïna molt útil per avaluar la inestabilitat rotuliana objectiva. (IRO).L'objectiu de l'estudi ha estat avaluar i comparar la utilitat diagnòstica de múltiples paràmetres mesurats en la RM de pacients amb IRO. S'han avaluat els factors primaris predisponents, com són: la displàssia de la tròclea femoral, la ròtula alta i la bàscula rotuliana. S'ha emfatitzat amb l'anàlisi de la morfologia rotuliana. S'ha realitzat un estudi retrospectiu en un grup extens i uniforme de 59 genolls amb IRO i en un grup control de 71 genolls. Ambos grups eren comparables segons l'edat i sexe.Tots els genolls amb IRO havien presentat episodis de luxació rotuliana recurrent, documentada per la reducció a urgències, o bé per una història clínica I radiogràfica convincent. En els genolls del grup control es vàren descartar sistemàticament lesions del lligament creuat anterior, alteracions femoropatelars cirurgia prèvia i dolor anterior al genoll. En el grup IRO s'han utilitzat seqüències axials i sagitals potenciades en T-1. En el grup control, s'an utilitzat seqüències axials potenciades en T1 o bé en eco de gradient potenciades en T-2 i seqüències sagitals ràpides en dual eco. Les diverses mesures s'han realitzat a mà utilitzant regles, esquadres, escales i goniòmetres. El contorn del cartílag articular va ésser la referència sistemàtica per a totes les mesures. Tal i com va sugerir Staubli, això és crucial perquè la superfície condral del solc troclear I de les facetes articulars rotulianes no coincideixen habitualment amb el contorn de l'os subcondral. En el tall migsagital de RM, s'han mesurat el sortint de la tròclea, la longitud del tendó rotulià, l'índex de Caton-Deschamps i l'índex d'Insall-Salvati.En el tall migsagital, també es va avaluar la morfologia rotuliana mesurant la longitud del nas rotulià i la proporció del nas. Es va calcular l'índex mortològic descrit per Grelsamer.S'han utilitzat dues seccions diferents per les mesures en els talls axials. El primer tall avaluat, és el més proximal on s'identifica el cartílag articular de la tròclea femoral. El segon, a través de l'arc romànic. En el tall axial, bàsicament es va avaluar la profunditat de la tròclea, la inclinació de la faceta externa de la tròclea i la bàscula rotuliana. Tal i com s'ha comunicat anteriorment, s'ha observat que els genolls amb IRO presenten tròclees menys profundes, ròtules més altes i amb una bàscula més aumentada que els genolls controls.Els paràmetres més sensibles van ésser:-La bàscula rotuliana (93%) amb un valor de tall >11º.-La profunditat de la tròclea a l'arc romànic (86%) amb un valor de tall <5 mm.-L'índex d'Insall-Salvati (78%) amb un valor de tall >1.2.Els paràmetres més específics van ésser:-L'Índex morfològic (87%) amb un valor de tall <1.2.-El nas rotulià (85%) amb un valor de tall <9mm.-La longitud del tendó rotulià (85%) amb un valor de tall >50 mm.En un estudi radiogràfic, Grelsamer va observar que la forma rotuliana en la projecció de perfil por presentar tres morfologies diferents: tipus I, tipus II amb el nas llarg i tipus III amb el nas curt. En el present estudi, el 46% de genolls amb IRO presentaven el nas curt, però sols el 14% dels genolls del grup control. En altres paraules, els pacients amb un nas llarg tenen poques probabilitats de presentar IRO. Els pacients amb en nas curt (especialment amb un índex inferior al 25%) pot considerar-se que presenten una morfologia displàssica. Per altra banda, aquesta morfologia predisposa a la IRO.Per a concluir: En primer lloc, la profunditat de la tròclea en l'arc romànic és un excel.lent paràmetre per avaluar la displàssia de la tròclea en la IRO.Segon, l'ïndex d'Insall-Salvati és millor que el de Caton-Deschamps per avaluar l'alçada rotuliana en la IRO.Tercer, la proporció del nas rotulià és un paràmetre molt específic per a descartar la IRO.La bàscula rotuliana és el paràmetre més sensible.I finalment, l'etiologia de la IRO és probablement multifactorial. Creiem que la RM por ajudar a identificar I mesurar els factors predisponents de la IRO I també ajudar a planificar la cirurgia més adient. / TESI DOCTORAL (DR J.S. ESCALA ARNAU).MRI has become the non invasive method of choice for the evaluation of internal derangements of the knee and has been advocated as a useful test in the evaluation of objective patellar instability (OPI).The purpose of our study was to evaluate and compare the diagnostic utility of multiple quantitative parameters as measured on knee MR examinatios of patients suffering OPI. We chose to evaluate several of the primary predisposing factors, namely trochlear dysplasia, patella alta and increased lateral patellar tilt. Special emphasis was put on the evaluation of the patellar nose.We performed a retrospective evaluation in a large and uniform group of 59 knees with clinically proven OPI and in a control group of 71 knees. Both groups were matched by age and sex.All OPI knees had presented recurrent patellar dislocation, which was documented by reduction in the emergency department or by a convincing history associated with suggestive clinical and radiographical signs.In all control knees, anterior cruciate ligament tear, patellofemoral disabilities, fractures, prior surgery or anterior knee pain were sistematically ruled out.In the OPI group, we used axial and sagittal T-1 weighted sequences. In the control group, we used axial T1-weighted or gradient-recalled-echo T2-weighted sequences and sagittal fast dual-echo MR sequences.The knee MR examinations belonging to both groups of patients were randomly mixed for imaging review. Various categories of quantitative parameters were evaluated using rulers, scales, squads and a hand-held goniometer. Where necessary, the contour of the articular cartilage was systematically used as the reference plane. As suggested by Staubli, this may be crucial because the chondral surface of the trochlear groove and patellar facets does not coincide with the contour of the subchondral bone. In the midsagittal MR section, among other things, we measured the ventral trochlear prominence, the patellar tendon length, the Caton-Deschamps index and the Insall-Salvati index.In the midsagittal MR section, we also evaluated the patellar morphology by measuring the patellar nose and the patellar nose ratio. We also calculated the morphology ratio as described by Grelsamer.Two different MR sections were used for the measurements in the axial projection. The first was through the most cranial aspect of the trochlear groove where we identified the cartilage. The second, was through the roman arch. In the axial view, we basicaly evaluated the trochlear groove depth, the lateral trochlear inclination and the lateral patellar tilt.As previusly reported, we found that OPI knees tend to have shallower trochlear groove, higher patella and larger patellar tilt than control knees.The most sensitive measurements:-With a cut-off value over 11º, the lateral patellar tilt had a sensitivity of 93%-With a cut-off value under 5 mm, the trochlear groove depth at the roman arch had a sensitivity of 86%.-With a cut-off value over 1.2, the Insall-Salvati index had a sensitivity of 78%. The most specific parameters, were:-With a cut-off value under 1.2, the morfology ratio had a specificity of 87%-Whith a cut-off value under 9 mm, the patellar nose had a specificity of 85%-With a cut-off value over 50 mm the patellar tendon length had a specificity of 85%.In a radiological study, Grelsamer found that the sagittal patella can have three distinct morphologies: type I, type II with a long patellar nose and type III with a short patellar nose. In our study, a short patellar nose was present in 46% of OPI knees but only in 14% of control knees. In other words, those patients with a large patellar nose are unlikely to suffer OPI. On the other hand, those patients with short patellar nose -and especially those whose patellar nose ratio is under 25%-- may be considered to have a dysplastic patellar morphology. Therefore, this morphology predisposes for OPI.In conclusion: In the fist place, the trochlear depth at the roman arch is an excellent parameter for evaluating trochlear dysplasia in OPI knees.Secondly, the Insall-Salvati index is better than Caton-Deschamps index for evaluating patellar height in OPI knees.Thirdly, the patellar nose ratio is a very specific parameter for ruling out OPI.Then, the lateral patellar tilt is the most sensitive parameter.And finally, as you already know, the etiology of OPI is probably multifactorial. We believe that quantitative MRI may help to identify specific predisposing factors in each individual, which in time may help us to plan appropiate surgery.

En el ciclo neoliberal ecuatoriano ocurrido entre 1990 y el 2005 opera un cambio en la estrategia de izquierda. El concepto de Clausewitz (1832) sobre el centro de gravedad, demuestra que la irrupción del movimiento indígena apuntó a la acumulación de fuerzas de la acción anti estatal a la acción pro estado plurinacional. Como señala el general prusiano, dicho centro de gravedad refiere al centro de poder y movimiento del cual dependerá todo, el golpe concentrado de las fuerzas deberá dirigirse contra el centro de gravedad del enemigo, en otrora el estado weberiano, por uno nuevo, el estado neoliberal. Por un lado, la implantación de una serie de medidas de ajuste económico provocó una crisis económica sin precedentes, y por otro, la política deslocalizada de los partidos de izquierda promovió una nueva forma de acción colectiva que obligó a los gobiernos de los noventa a incorporar progresivamente las demandas étnicas y sociales al aparataje estatal. Dicha incorporación fue resultado de una intensa conflictividad social liderada por diferentes organizaciones sociales, provocando inestabilidad política y la salida anticipada de tres mandatarios. La investigación sistematizó noticias de protesta social publicadas en los periódicos El Universo (2077) y El Hoy (1542) entre Enero 1990 y Diciembre 2005, las cuales permiten caracterizar la lucha social en el Ecuador. Al mirar a la distancia la incorporación institucionalizada de las demandas étnicas, y el cambio en el centro de gravedad de la lucha política, evidenciamos cómo los partidos de izquierda perdieron el proyecto programático (socialismo) y en consecuencia se adhirieron a los movimientos sociales y a su nueva demanda social (plurinacionalidad).

La tesis aborda como problema de investigación la relación entre el estilo atribucional y el estrés por la inestabilidad laboral en trabajadores de una empresa comercial del rubro automotriz con sede en la ciudad de Lima. Para responder a esta interrogante se ha efectuado una investigación de tipo aplicada, el método utilizado el descriptivo correlacional con diseño transversal. Para la evaluación de Inestabilidad Laboral se utilizó el Cuestionario IMPIL (Inventario del Malestar Percibido ante la Inestabilidad Laboral), elaborado por Leibovich y Schuffer (2005), y el cuestionario denominado Cuestionario de Estilos Atribucionales (ASQ) de Seligman, Peterson (2003), para la evaluación el cuestionario de Estilos Atribucionales ASQ-CIDE de Peterson y Villanova, con Revisión y adaptación en Lima por Luis A. Vicuña Peri (2001) La población de estudio estuvo conformada por 349 trabajadores de una empresa comercial ubicada en la ciudad de Lima y la muestra por 49 trabajadores administrativos, único grupo afectado en la organización de estudio por un proceso de despido masivo. El estudio encontró que existe una relación entre el Estilo Atribucional y el Malestar Percibido, hallando que cuando el aumenta el Malestar Percibido (por Preocupaciones Económicas) se acentúa el Estilo Atribucional pesimista. Además, se detectó un Estilo Atribucional mayormente Pesimista y un Malestar Percibido de nivel bajo, causado principalmente por Preocupaciones Medio Ambientales, pudiendo relacionarse con que los trabajadores no tengan posibilidades de reinsertarse laboralmente, no saber cuánto tiempo seguirán siendo estables y el que no haya oferta de trabajo.

Las levaduras silvestres presentan una acusada inestabilidad cariotípica durante el crecimiento vegetativo. Hemos analizado alrededor de 500 cariotipos de derivados mitóticos y meióticos de la cepa vínica silvestre DC5, la cual presenta una frecuencia de inestabilidad cariotípica de 8.2x10-2 cambios/clon/generación. Un 70 % de los derivados meióticos de DC5 presentó una baja frecuencia de inestabilidad cariotípica, con una media de 5.8x10-4 cambios/clon/generación, sugiriendo que la inestabilidad cariotípica es un fenotipo de carácter dominante. Los derivados diploides con una baja tasa de inestabilidad cariotípica mitótica, también presentaron una baja tasa de inestabilidad cariotípica en meoisis, sugiriendo que los dos fenotipos están ligados. La cepa DC5 y alguno de sus derivados meióticos (tanto los de baja como los de alta frecuencia de variabilidad cariotípica) presentaron una manifiesta hipervariabilidad en el cromosoma XII, aunque esta no es un indicativo de inestabilidad genética. Los derivados cariotípicamente inestables, pueden dar lugar a derivados estables con una alta frecuencia.La inestabilidad genética de una cepa dificulta la posibilidad de aplicar programas de mejora genética en ésta para su aplicación industrial. La inestabilidad cariotípica es un fenómeno de carácter dominante, y que depende de pocos elementos genéticos. La disrupción del gen RAD52 en una cepa hipervariable, estabiliza parcialmente su cariotipo. Concretamente la disrupción de RAD52 elimina la recombinación subtelomérica y telomérica, no influye en la hipervariabilidad del cromosoma XII y reduce en un 30% la frecuencia de inestabilidad cariotípica. Por consiguiente, existen al menos tres mecanismos relacionados con la inestabilidad cariotípica en cepas salvajes, de los que dos son independientes de recombinación homóloga- RAD52. El mutante rad52 presentó un fitness industrial equiparable a la cepa salvaje, en la segunda fermentación del cava, en concreto en lo que a capacidad de fermentación vigorosa se refiere. El aislamiento físico y el análisis de algunas variantes de tamaño del cromosoma I en estas cepas, mostró como estas diferían en las regiones subteloméricas, permaneciendo el cuerpo central cromosómico de 150 Kb inalterado. El mapeo fino de dichas regiones subteloméricas, mostró grandes alteraciones en dos loci muy similares, FLO1 y FLO9. Estos loci se localizan en los brazos derecho e izquierdo del cromosoma I. Estos genes poseen secuencias repetidas internas. Algunas variantes del cromosoma I que carecen del gen FLO1 mostraron un evidencias de procesos recombinatorios en regiones del brazo derecho que contienen LTRs y Tys. Por lo tanto proponemos que las secuencias repetidas en algunas regiones subteloméricas de S.cerevisiae pueden jugar un papel la hipervariabilidad cariotípica. Algunas de dichas secuencias codifican proteínas de membrana y de interacción con el medio, por lo que la plasticidad subtelomérica puede implicar un mecanismo de adaptación a substratos específicos. Este patrón semi conservativo de reorganizaciones cromosómicas puede tener importantes implicaciones, tanto desde un punto de vista evolutivo como para diferentes procesos biotecnológicos. / Yeast strains isolated from the wild may show high rates of changes in their karyotypes during vegetative growth. We analysed over 500 karyotypes from mitotic and meiotic derivatives of strain DC5, which has a chromosome rearrangement rate of 8.2x10-2 changes/generation. About 70% of the meiotic derivatives of DC5 had low rearrangement rates, with an average of 5.8x10-4 changes/generation, suggesting that karyotype instability behaved as a dominant phenotype. Diploid derivatives with low karyotype variability in mitosis also had low rates of chromosomal rearrangement during meiosis, suggesting that the two phenotypes may be linked. DC5 and some of its meiotic derivatives (both with high and low karyotype variability) had chromosome XII hypervariable bands. Their distribution among the meiotic products indicates that they are not indicators for genetic instability. Karyotypically unstable yeast strains may give stable progeny at high rates. The genetic instability compromises their utility in genetic improvement projects for industrial purposes. Karyotype instability is a dominant trait, segregating among meiotic derivatives as if it depended upon only a few genetic elements. We show that disrupting the RAD52 gene in a hypervariable strain partially stabilizes its karyotype. Specifically, RAD52 disruption eliminated recombination at telomeric and subtelomeric sequences, had no influence on ribosomal DNA rearrangement rates, and reduced to 30% the rate of changes in chromosomal size. Thus, there are at least three mechanisms related to karyotype instability in wild yeast strains, two of them not requiring RAD52-mediated homologous recombination. When utilized for a standard sparkling-wine second fermentation, rad52 strains retained the enological properties of the parental strain, specifically its vigorous fermentation capability. Physical isolation and analysis of several chromosome I size variants of one of these strains revealed that they differed only in their subtelomeric regions, leaving the central 150 Kb unaltered. Fine mapping of these subtelomeric variable regions revealed gross alterations of two very similar loci, FLO1 and FLO9. These loci are located on the right and left arms, respectively, of chromosome I and encompass internal repetitive DNA sequences. Furthermore, some chromosome I variants lacking the FLO1 locus showed evidence of recombination at a DNA region on their right arm that is enriched in repeated sequences, including Ty LTRs. We propose that repetitive sequences in many subtelomeric regions in S. cerevisiae play a key role in karyotype hypervariability. As these regions encode several membrane-associated proteins, subtelomeric plasticity may allow rapid adaptive changes of the yeast strain to specific substrates. This pattern of semi-conservative chromosomal rearrangement may have profound implications, both in terms of evolution of wild strains and for biotechnological processes.

La inestabilidad genómica presente en el tumor determina su evolución. Esta evolución puede ocurrir por diferentes vías de progresión tumoral que comportan unas características moleculares, cromosómicas y clínico-patológicas concretas. El estudio del daño genómico, consecuencia de la inestabilidad genómica, puede ayudar a caracterizar las vías de progresión tumoral y puede permitir la identificación de los grupos de tumores con peor pronóstico.Con el objetivo de caracterizar las distintas formas de daño genómico presentes en el cáncer colorectal y de determinar su relación con el comportamiento biológico del tumor se procedió a analizar el daño genómico de 131 tumores colorectales esporádicos mediante dos técnicas distintas: la citometría de flujo para medir aneuploidía, y la AP-PCR para cuantificar ganancias y pérdidas alélicas. A continuación se realizó la comparación de los dos tipos de daño genómico entre ellos y con las variables clínico-patológicas y moleculares de los tumores y se determinó el valor pronóstico de las medidas de daño genómico. También se analizó el papel de la aneuploidía en la diseminación metastásica.Con la intención de mejorar la cuantificación de la aneuploidía de los tumores decidimos crear un nuevo índice (Aneuploidy Index, AI) que tuviera en cuenta el grado y la extensión de la aneuploidía en el tumor. El AI tiene valor pronóstico independiente del estadío de Dukes y permite identificar un subgrupo de pacientes con tumores en estadíos tempranos, pero con alto riesgo de muerte. Por otra parte, el daño genómico medido por AP-PCR (GDF) cuantifica desequilibrios alélicos y también presenta valor pronóstico independiente. El alto GDF se asocia a mutaciones en p53, lo que indica que la inactivación de este gen podría ser una de las causas de producción de desequilibrios alélicos. Además, el GDF y el AI son independientes y por este motivo la combinación de las dos variables es el mejor predictor de supervivencia en los pacientes con resección quirúrgica radical. En cuanto al análisis de la ploidía en las metástasis, hemos observado que la mayoría presenta una población de células tumorales diploides, lo que indicaría que la diseminación ha sido llevada a cabo por este tipo de células. Además las metástasis reproducen el patrón de ploidía existente en el tumor primario.En base a los distintos tipos de daño genómico observado proponemos que éstos son la manifestación de 4 vías de progresión tumoral con factores pronósticos diferentes: vía de la inestabilidad de microsatélites, vía diploide sin inestabilidad de microsatélites (factor pronóstico: estadío de Dukes), vía aneuploide 'numérica' (factor pronóstico: AI) y vía aneuploide 'numérico-estructural' (factor pronóstico: GDF). / Genomic instability determines tumor evolution. This evolution takes place following different pathways of tumor progression that associate with specific molecular, chromosomic and clinicopathologic characteristics. The study of genomic damage, consequence of genomic instability, could help to characterize the pathways of tumor progression and to identify the subgroups of patients with worse prognosis.To characterize the different forms of genomic damage present in colorectal cancer and to determine their relationship with the biological behaviour of the tumor, we analized the genomic damage of 131 sporadic colorectal tumors using two different techniques: flow cytometry to mesure aneuploidy and AP-PCR to mesure allelic gains and losses. We made the comparison of the two types of genomic damage between them and with tumor molecular and clinicopathologic variables and we determined the prognostic value of genomic damage assessment. Furthermore we analyzed the role of aneuploidy in metastasic dissemination.To quantify tumor aneuploidy in a comprehensive way, we created a new index (Aneuploidy Index, AI) that considers both, the degree and the extension of aneuploidy in the tumor. AI showed prognostic value independent of Dukes stage and identified a subset of patients with early stage tumors but with high risk of death. On the other hand, genomic damage mesured by AP-PCR (GDF) quantified allelic imbalances and also showed independent prognostic value. High GDF associated with p53 mutations, indicating that the inactivation of this gene could be a possible cause of production of allelic imbalances. Furthermore, GDF and AI were independent and, therefore, the combination of both variables was the best predictor of survival in patients with absence of remnant disease. Ploidy analysis in metastasis revealed that most of them show a population of diploid tumoral cells, suggesting that dissemination is accomplished by diploid cells. Furthermore, most metastasis reproduced the ploidy pattern of the primary tumor.In base of the distinct types of genomic damage observed we propose that they are the manifestation of 4 pathways of tumor progression with different prognostic factors: microsatellite instability pathway, diploid without microsatellite instability pathway (prognostic factor: Dukes stage), 'numerical' aneuploid pathway (prognostic factor: AI) and 'numerical-structural' aneuploid pathway (prognostic factor: GDF).

El objetivo central de esta tesis es intentar contribuir a la comprensión de los procesos que dan lugar a la formación de sistemas planetarios como un todo. Para esto, trabajamos en la construcción de modelos de crecimiento planetario en el contexto de un disco protoplanetario realista, que evoluciona por viscosidad del disco gaseoso como así también por migración de planetesimales. Específicamente calcularemos la interacción que surge entre dos (o más) planetas gaseosos gigantes que crecen simultáneamente en un mismo disco protoplanetario. Aunque al presente se dispone de una descripción plausible de la formación planetaria, dicha descripción se basa en modelos construidos bajo la hipótesis del crecimiento de un planeta aislado. Esta configuración es poco realista e insuficiente para comprender globalmente tanto la formación del Sistema Solar como la de los sistemas planetarios extrasolares recientemente descubiertos. De los más de 300 exoplanetas descubiertos hasta el momento (The Extrasolar Planets Encyclopaedia, http://exoplanet.eu/catalog.php) muchos de ellos se encuentran en sistemas múltiples (alrededor de 30 sistemas planetarios descubiertos a la fecha); aún más, recientemente Marois et al. 2008 presentaron las primeras imágenes directas (en infrarrojo) de exoplanetas. Estas imágenes muestran tres planetas gigantes orbitando la estrella de tipo espectral A HR 8799, perteneciente a la constelación de Pegasus. Estos datos son determinantes para incluir a la formación simultánea de planetas gigantes en los modelos de formación de sistemas planetarios.

En este trabajo se analizó la factibilidad de alcanzar los límites de descarga de efluentes impuestos por el DSN°90/200, a través, de la evaluación de alternativas de remoción biológica de nutrientes que permitan cumplir con los requerimientos de calidad y/o conlleven optimizar el funcionamiento de los sistemas de tratamiento de aguas servidas.