Made available in DSpace on 2015-10-23T12:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ana_silva_ioc_mest_2014.pdf: 1478235 bytes, checksum: 6d52627a1a269a7288d87d75c2559e6c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-04-14 / Fundação Oswaldo Cruz, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, RJ, / O aumento do consumo de drogas ilícitas na atualidade vem acompanhado não apenas do impacto social e econômico, como também na saúde. As pessoas que injetam drogas apresentam maior susceptibilidade a infecções por diversos agentes, devido ao uso da droga e à subsequente imunossupressão, como também pelo risco de maior exposição a agentes transmitidos por artrópodes e reservatórios vertebrados em ambientes insalubres. São muitos os estudos correlacionando o consumo de drogas à infecção pelo HIV, VHB e VHC, porém raros investigam outros agentes. No presente estudo transversal e retrospectivo, selecionamos aleatoriamente 300 amostras de um estudo multicêntrico da década de 1990 e fizemos a pesquisa sorológica para Bartonella spp., Coxiella burnetii e Hantavirus. O perfil demográfico e social encontrado mostrou-se em concordância com a literatura: homens, jovens, de baixa renda e com histórico de prisão. A maior parte apresentava situações de risco por injetar drogas com dispositivos previamente usados e por injetar em local público. Alguns fatores foram discordantes da literatura internacional e podem ter influenciado os resultados, uma vez que são considerados situações de risco, como escassez de pessoas que injetaram drogas enquanto presas, que residem em instituições, ou sem-teto A evidência de infecção por C. burnetii foi de 9,3%, praticamente o dobro da observada na população geral brasileira, embora, em comparação com dados internacionais, a prevalência tenha sido menor. Não houve diferença estatística significativa em relação às variáveis demográficas entre os grupos sororeativos e soronegativos para febre Q. A presença de anticorpos anti-Bartonella foi de 1%, bem discrepante dos estudos nacionais e internacionais. Pode ser justificado pela não inclusão no teste sorológico de antígeno de B. elizabethae e de B. quintana e pela reduzida frequência de sem-tetos. Não houve correlação do alto consumo de álcool com maior soroprevalência por Bartonella spp., provavelmente pelos motivos acima citados. A soroprevalência para hantavirose de 4% foi semelhante à descrita em estudo brasileiro na população geral. Em relação aos usuários de drogas injetáveis, somente um artigo americano evidenciou uma soroprevalência bem menor, de 0,2%. Isso indica que em meios urbanos brasileiros, hantavírus, provavelmente o Seoul, pode estar circulando. Embora considerando que o estudo foi retrospectivo com base em evidência sorológica e que a possibilidade de reação cruzada não pode ser totalmente descartada, o presente estudo aponta para a importância de se incluir a pesquisa de outros agentes infecciosos além do HIV e dos vírus das hepatites B e C na população injetora de drogas / The increased consumption of illicit drugs today is followed not only by a social and economic impact, as well as in health. People who inject drugs are more susceptible to infections by various agents due to drug use and subsequent immunosuppressi on, as well as the risk of increased exposure to agents transmitted by arthropods and vertebrate reservoirs in unhealthy environments. Many studies link drug use to HIV, HBV and HCV, however only a few investigate other agents. In this re trospective cross - sectional study, we selected randomly 300 samples from a multicenter study from the 1990s and made a serological survey for Bartonella spp., Coxiella burnetii and hantavirus. The demographic and social profile was found in agreement with the literature: me n, young age , low income and with a history of imprisonment . The majority was exposed to risk situations by injecting drugs with previously used devices and by injecting in a public place s . Some factors were dis agreeing with the international literature an d may have influenced the results, since they are considered high - risk situations, such as shortage of people who injected drugs while imprisoned, residing in institutions, or homeless. Evidence of C. burnetii infection was 9.3%, almost double the rate in the general Brazilian population, although in comparison with international data, the prevalence was lower. There was no statistically significant difference in relation to demographic variables among seroreactive and seronegative groups for fever Q. The p resence of antibodies to Bartonella was 1%, significantly discrepant from national/ international studies. Possibly justified by the non inclusion of antigen B. elizabethae and B. quintana in the serological test , and the reduced frequency of homelessness. There was no correlation between high alcohol consumption with higher seroprevalence of Bartonella spp., p robably for the reasons mentioned above. The seroprevalence of hantavirus 4% was similar to that described in a Brazilian study in the general populat ion. Regarding inje c t ing drug users , only an American paper showed a much lower prevalence of 0.2%. This indicates that in Brazilian urban areas, hanta virus can circulate , probably Seoul hantavirus . While considering that the study was retrospective based on serological evidence and the possibility of cross - reactivity cannot be completely ruled out, this study points to the importance of including the research of other infectious agents other than H IV and hepatitis viruses B and C in injectin g drug population

Made available in DSpace on 2016-03-28T12:47:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 andrea_cabral_ioc_mest_2013.pdf: 830806 bytes, checksum: f948411de69b8059eee07de1790cd7c0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / As bartoneloses são doenças mundialmente dispersas causadas por bactérias gram negativas do gênero Bartonella. Com mais de 24 espécies reconhecidas, B. bacilliformis, B. henselae e B. quintana são os principais e mais comuns agentes causadores de doença em humanos. Na literatura existem relatos de casos isolados e alguns estudos de prevalência sorológica sobre a doença, a maioria realizados em pacientes adultos, com escassa informação sobre a sua apresentação e a epidemiologia nas crianças. A proposta desse estudo retrospectivo foi analisar uma série casos de bartonelose em pacientes abaixo de 16 anos, no estado do Rio de Janeiro, durante o período de 2006 a 2012, a partir dos dados secundários obtidos no banco de dados do Laboratório de Referência Nacional para Rickettsioses, Laboratório de Hantavirose e Rickettsioses do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro. Dos 36 confirmados por análise sorológica utilizando teste de imunofluorescência comercial, com títulos de corte de 64, e/ ou por reação em cadeia da polimerase, 19 casos (52,7%) foram do sexo feminino, com uma variação por faixa etária de zero a 16 anos, 19 (52,7%) tinham entre 11 e 16 anos de idade A maioria dos casos - 22 casos (61,1%) -, foi procedente do município do Rio de Janeiro, com mais cinco (13,8%) e três (8,3%) em pacientes residentes nos municípios de Duque de Caxias e Nova Iguaçu. A informação sobre contato com gato estava disponível em apenas sete (19,4%). As manifestações clínicas observadas neste estudo foram semelhantes às descritas na literatura, na qual foi possível identificar doença da arranhadura do gato (DAG), febre de origem prolongada e forma hepatoesplênica. Assim, das fichas com dados disponíveis, foi possível verificar que 30 de 32 (94%) e 25 de 29 (90%) dos pacientes apresentaram febre e linfadenopatia, respectivamente. Hepatoesplenomegalia foi identificada em quatro dos 16 pacientes, cujas fichas tinham a informação disponível. Dor abdominal, observada em 33% dos pacientes, associada com náuseas, vômitos, hepatoesplenomegalia e diarreia, em concordância com relatos de casos descritos na literatura, apontam para a dificuldade do diagnóstico diferencial com doenças comuns nas faixas etárias mais baixas, chamando a atenção para as gastroenterites Apesar da restrição de um estudo retrospectivo e da inexistência de uma ficha epidemiológica específica para bartoneloses - as informações foram obtidas da ficha epidemiológica para febre maculosa-, os resultados deste estudo confirmam a necessidade de inclusão das bartoneloses no diagnóstico diferencial de doenças febris associadas com adenomegalia e do estabelecimento desta zoonose como doença de notificação compulsória no Brasil / Bartonelloses are globally dispersed diseases caused by gram-negative bacteria from Bartonella genus. With over 24 recognized species, B. bacilliformis, B. henselae and B. Quintana are the main and most common disease-causing agents in humans. In the literature, there are reports of isolated cases and some seroprevalence studies about the disease, most performed in adult patients, with limited information about its presentation and epidemiology in children. The purpose of this retrospective study was to analyze a case series of bartonellosis in patients aged less than 16 years, in the State of Rio de Janeiro, during the period 2006-2012. We assessed secondary data from the National Reference Laboratory for Rickettsiosis, Laboratory of Hantaviroses and Rickettsioses of Oswaldo Cruz Institute, Rio de Janeiro. Nineteen cases (52,7%), from 36 confirmed by serological analysis using commercial immunofluorescence test, with antibody cut off titers of 64 , and / or polymerase chain reaction, were female, with an age variation from zero to 16 years old, 19 (52.7%) were between 11 and 16 years old. Most of cases - 22 (61.1%) – were found in the city of Rio de Janeiro, with another five (13.8%) and three (8.3%) in patients residing in the cities of Duque de Caxias and Nova Iguaçu. Information about contact with cats was available in just seven (19,4%). Clinical manifestations observed in this study were similar to those described in the literature, in which it was possible to identify cat scratch disease (CSD), fever of unknown origin, and hepatosplenic form. Thus, from the records with available data, it was possible to find that 30 of 32 (94%) and 25 of 29 (90%) of the patients had fever and lymphadenopathy, respectively. Hepatosplenomegaly was identified in four of the 16 patients whose records had information available. Abdominal pain, occurring in 33% of patients, associated with nausea, vomiting, diarrhea and hepatosplenomegaly, in accordance with reported cases in the literature point to the difficulty of the differential diagnosis of common diseases in the lower age groups, drawing attention to gastroenteritis. Despite the restrictions of a retrospective study and the absence of a specific epidemiological record for bartonella - Information has been obtained from epidemiological record for spotted fever -, the results of this study confirm the need for inclusion of bartonellosis in the differential diagnosis of febrile illnesses associated with lymph node enlargement and the establishment of this zoonosis as a reportable disease in Brazil

Orientador: Paulo Eduardo Neves Ferreira Velho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T03:36:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pitassi_LuizaHelenaUrso_D.pdf: 10118032 bytes, checksum: 2717c0557147ebb4a9a080297c902cd6 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O gênero Bartonella constitui um grupo de patógenos zoonóticos re-emergentes e negligenciados que têm sido associados a um amplo espectro de doenças humanas graves. As Bartonella spp. são bacilos gram-negativos que infectam hemácias e células endoteliais, que podem causar infecção crônica ou mesmo fatal. As bartoneloses humanas mais conhecidas são a doença de Carrión, febre das trincheiras, doença da arranhadura do gato e angiomatose bacilar. Como existem espécies de Bartonella intraeritrocitárias e que podem causar infecção persistente e assintomática em humanos, objetivou-se avaliar o risco potencial de transmissão de Bartonella spp. por transfusão sanguínea. No primeiro estudo, os eritrócitos humanos foram infectados com B. henselae em 30 min e 1, 5, 10, e 72 h para a avaliação ultraestrutural por microscopia eletrônica de transmissão (ME). A B. henselae foi vista aderida a eritrócitos humanos 10 h após a inoculação e no interior de eritrócitos após 72 h. A localização intraeritrocitária de B. henselae havia sido mostrada em eritrócitos de gatos, mas nunca antes identificada em eritrócitos humanos. Foi realizado um segundo estudo para determinar as características ultraestruturais da Bartonella spp. nas células do sangue, pois estas informações eram muito limitadas. Este trabalho definiu os parâmetros para se caracterizar a bactéria no interior de células sanguíneas à ME. Um terceiro estudo, utilizando a ME e cultura de bactérias, demonstrou a capacidade da B. henselae sobreviver em uma unidade de concentrado de hemácias armazenada a 4° C durante 35 dias. A viabilidade de B. henselae em unidades de células vermelhas do sangue define o potencial de infecção associada à transfusão de doadores de sangue assintomáticos. Os receptores de transfusão de sangue muitas vezes são ou podem tornar-se imunodeficientes, apresentando o risco de desenvolver formas graves de bartonelose. Utilizando-se parâmetros ultraestruturais da infecção por Bartonella sp., relatou-se um caso de bartonelose como causa de morte 72h após uma transfusão. Um jovem com anemia aplástica, após receber várias transfusões sanguíneas, apresentou estado de choque e morreu após transfusão de um concentrado de hemácias. Os achados da ME permitiram o diagnóstico de infecção por Bartonella sp.. Foi investigada nesta tese a prevalência da Bartonella spp. em uma amostra de 500 doadores de sangue voluntários de Campinas, estado de São Paulo, Brasil, utilizando sorologia, cultura líquida e sólida, PCR e sequenciamento como métodos de identificação destes patógenos. Os anticorpos contra B. henselae e B. quintana foram detectados em 16,2% e 32%, respectivamente. O DNA das Bartonella spp. foi sequenciado e demonstrado em 3,2% do sangue doado (B. henselae em 15 amostras e B. clarridgeiae em uma) e em 1,2% foi documentada, por meio do isolamento do agente, bacteremia por B. henselae. Este estudo revelou a presença de patógenos no sangue de doadores assintomáticos que não estão sendo rastreados no sangue doado e que podem ser responsáveis por doenças não diagnosticadas em pacientes imunodeficientes. Os resultados apresentados estabelecem a necessidade de uma reavaliação por autoridades de saúde pública dos riscos e do impacto da transmissão da Bartonella spp. através de transfusões sanguíneas, especialmente para os pacientes imunodeficientes. Esforços devem ser feitos para a melhoria dos métodos de diagnóstico com sensibilidade suficiente para excluir a Bartonella spp. em doadores de sangue e para proteger os receptores de transfusão de sangue / Abstract: The genus Bartonella is a group of re-emerging zoonotic and neglected pathogens that have been associated with a wide range of serious human diseases. Bartonella spp. are gram-negative bacilli that infect red blood cells and endothelial cells, which can cause chronic infection or even fatal. In humans, Bartonella spp. are known causative agents of Carrion's disease, trench fever, cat scratch disease and bacillary angiomatosis. As they are intra-erythrocytic bacteria and can cause persistent infection and asymptomatic in humans, our objective for this proposal was evaluate the potential risk of transmission of Bartonella spp. by blood transfusion. In the first study, human erythrocytes were infected with B. henselae in 30 min and 1, 5, 10, and 72h for ultrastructural evaluation by transmission electron microscopy (TEM). B. henselae was seen adhering to human erythrocytes 10h after inoculation and inside the erythrocyte after 72 h. Intraerythrocytic localization of B. henselae has been demonstrated in cat erythrocytes, but never before identified in human erythrocytes. A second study was conducted to determine the ultrastructural features of the Bartonella spp. on blood cells because this information was very limited. This paper set the parameters to characterize the bacteria within the blood cell using TEM. A third study using TEM and bacterial culture demonstrated the ability of B. henselae to survive in a unit of red blood cells stored at 4°C for 35 days. The viability of B. henselae in units of red blood cells defines the potential for infection associated with transfusion in asymptomatic blood donors. Recipients of blood transfusions often are or may become immunodeficient, with the risk of developing severe forms of bartonellosis. Using the ultrastructural findings for the diagnosis of Bartonella sp. infection, we reported a case of bartonellosis as cause of death 72 h after transfusion. A young man with aplastic anemia who had received multiple blood transfusions went into shock and died after transfusion of a red blood cell. The findings of TEM allowed the diagnosis of infection with Bartonella sp.. Was investigated in this thesis the prevalence of Bartonella spp. in 500 volunteer blood donors from Campinas, São Paulo State, Brazil, using serology, solid and liquid culture, PCR and sequencing as methods for identifying these pathogens. Antibodies against B. henselae and B. quintana were detected in 16.2% and 32%, respectively. Bartonella sp. DNA was demonstrated in 3,2% of donated blood (15 infected with B. henselae and one with B. clarridgeiae) and 1.2% had B. henselae documented bacteremia by isolation of the agent. This study reveals the presence of pathogens in asymptomatic blood donors who are not being screened in donated blood and may be responsible for undiagnosed diseases in immunodeficient patients. The results presented establish the need for re-evaluation by public health officials of the risks and impact of Bartonella spp. transmission through blood transfusions, especially to immunocompromised patients. Efforts should be made towards improve diagnostic tests with sufficient sensitivity to rule out Bartonella ssp. infection in blood donors to protect transfusion recipients / Doutorado / Clinica Medica / Doutora em Clínica Médica

Bartoneloses são infecções causadas por Bartonella spp e constituem zoonoses de importância crescente devido à gravidade da infecção em pacientes imunodeficientes. Existem muitas síndromes clínicas associadas às bartoneloses, desde quadros típicos de doença da arranhadura do gato até lesões cutâneas linfoproliferativas (angiomatose bacilar), ou granulomatosas em órgãos (peliose bacilar), passando por quadros neurológicos, oculares, endocardites e febre prolongada. O diagnóstico laboratorial deveria ser baseado em isolamento da bactéria em cultura, resultados de sorologias e exames imunohistoquímicos, porém estas técnicas não se encontram disponíveis em nosso meio. A Reação da Cadeia da Polimerase (PCR) tem sido utilizada para aprimorar o diagnóstico das bartoneloses, e o presente estudo teve como objetivo padronizar três sistemas de dupla amplificação para detecção de DNA de Bartonella henselae em amostras biológicas de pacientes com suspeita de bartonelose e determinar dentre os sistemas de dupla amplificação (nested-PCR), aquele com melhor desempenho. Os nested-PCR empregaram oligonucleotídeosiniciadores das sequências ITS, HSP e FtsZ da Bartonella spp. Foram incluídos 19 pacientes, sendo 14 crianças/adolescentes e cinco adultos, tendo oito deles referido contato com gatos. Dos pacientes, 10 não tinham doenças de base, e nove apresentavam doença de base (três evoluíram a óbito). Foram coletadas 25 amostras: 14 de sangue periférico, sete biópsias de gânglios, duas punções de gânglios e duas biópsias de pele. Do total de 19 pacientes, 14 tiveram resultados positivos por PCR, e considerando as 25 amostras, 18 foram positivas por PCR (nove amostras de sangue, cinco biópsias de gânglios, duas punções de gânglios e duas biópsias de pele). Dez das 18 amostras positivas por PCR só foram detectadas pelo nested-FtsZ (seis amostras de sangue periférico, duas punções de gânglios, uma biópsia de gânglio e uma biópsia de pele). A primeira amplificação do sistema HSP-PCR detectou uma amostra positiva em 25 (1/25 ou 4%), e após o nested-HSP este percentual foi de 24% (6/25). Na primeira amplificação do sistema ITS-PCR a positividade foi de 20% (5/25), e no nested-ITS 32% (8/25). Após a primeira amplificação do sistema FtsZ-PCR a positividade foi de 16% (4/25), e no nested-FtsZ foi de 72% (18/25). O teste de McNemar testou a concordância ou discordância dos resultados obtidos pelos três sistemas de nested-PCR e revelou que os mesmos foram discordantes, com superioridade do sistema nested-FtsZ em relação aos outros dois nested-PCR, sendo a diferença estatisticamente significante (p<0,05). Os resultados do presente estudo permitiram concluir que o nested-FtsZ apresentou vantagens para o diagnóstico das bartoneloses em relação aos outros sistemas testados, em materiais biológicos previamentedescritos na literatura (biópsias e punções de gânglios), e até mesmo em sangue periférico de pacientes sem doença de base. Além disso, foi possível determinar, no presente estudo, que as infecções foram causadas por B. henselae, uma vez que não houve nenhuma PCR positiva pelos outros dois sistemas que não tenha sido detectada pelo nested-FstZ, e este amplifica apenas DNA de Bartonella henselae após a segunda amplificação. / Bartonellosis are infections caused by Bartonella spp and this zoonosis is of growing importance due to the severity of infection in immunodeficient patients. Many clinical syndromes are associated with bartonellosis, varying from typical manifestations of cat scratch disease, to lymphoproliferative skin lesions (bacillary angiomatosis) or granulomatous ones in organs (bacillary peliosis), and also neurologic and ocular manifestations, endocarditis and prolonged fever. The laboratory diagnosis should be based on bacteria isolation in culture, serological tests and immunohistochemical examination, but these techniques are not available in our country. The Polymerase Chain Reaction (PCR) has been used to improve the diagnosis of bartonellosis, and this study has aimed at standardizing three nested-amplifications for detection of Bartonella henselae DNA in biological samples of patients with suspected bartonellosis, and establishing among the three nested-PCR, the one presenting with the best performance. Nested-PCR amplifications were performed using the ITS, the HSP and the FtsZ gene sequences of Bartonella spp. We included 19 patients, being 14 children / adolescents andfive adults, and eight reported contact with cats. From these patients, 10 had no underlying disease, and nine patients had underlying conditions (3 evolved to death). We collected 25 samples: 14 peripheral blood samples, seven lymph nodes biopsies, two lymph nodes punctures and two skin biopsies. From the total of 19 patients, 14 had positive results by PCR, and considering the 25 samples, 18 were positive by PCR (nine peripheral blood samples, five lymph nodes biopsies, two lymph nodes punctures and two skin biopsies). Ten of the 18 PCR-positive samples were only detected by the nested-FtsZ (six peripheral blood samples, two lymph nodes punctures, one lymph node biopsy and one skin biopsy). The first HSP-PCR amplification detected one positive sample in 25 (1 / 25 or 4%), and after the nested-HSP this percentage was 24% (6 / 25). In the first ITS-PCR amplification the positivity was 20% (5 / 25), and after the nested-ITS 32% (8 / 25). The first FtsZ-PCR amplification positivity was 16% (4 / 25), and after the nested-FtsZ it was 72% (18/25). The McNemar test was used to verify the concordance or discordance of the results obtained by the three nested-PCR systems and showed that they were discordant, with superiority of the nested-FtsZ in relation to the other two nested-PCR, being the difference statistically significant (p<0.05). The results of this study indicated that the nested-FtsZ showed advantages for the diagnosis of bartonellosis with respect to the other two systems when biological materials previously described in literature were tested (punctures and lymph nodes biopsies), and also in peripheral blood of patients without underlying conditions. Furthermore, it was possible to determine that the infections were caused byB. henselae, since there was no positive PCR results obtained by the other two systems that were not detected by the nested-FstZ, that only amplifies DNA from Bartonella henselae after the second round of amplification.

Bartoneloses são infecções causadas por Bartonella spp e constituem zoonoses de importância crescente devido à gravidade da infecção em pacientes imunodeficientes. Existem muitas síndromes clínicas associadas às bartoneloses, desde quadros típicos de doença da arranhadura do gato até lesões cutâneas linfoproliferativas (angiomatose bacilar), ou granulomatosas em órgãos (peliose bacilar), passando por quadros neurológicos, oculares, endocardites e febre prolongada. O diagnóstico laboratorial deveria ser baseado em isolamento da bactéria em cultura, resultados de sorologias e exames imunohistoquímicos, porém estas técnicas não se encontram disponíveis em nosso meio. A Reação da Cadeia da Polimerase (PCR) tem sido utilizada para aprimorar o diagnóstico das bartoneloses, e o presente estudo teve como objetivo padronizar três sistemas de dupla amplificação para detecção de DNA de Bartonella henselae em amostras biológicas de pacientes com suspeita de bartonelose e determinar dentre os sistemas de dupla amplificação (nested-PCR), aquele com melhor desempenho. Os nested-PCR empregaram oligonucleotídeosiniciadores das sequências ITS, HSP e FtsZ da Bartonella spp. Foram incluídos 19 pacientes, sendo 14 crianças/adolescentes e cinco adultos, tendo oito deles referido contato com gatos. Dos pacientes, 10 não tinham doenças de base, e nove apresentavam doença de base (três evoluíram a óbito). Foram coletadas 25 amostras: 14 de sangue periférico, sete biópsias de gânglios, duas punções de gânglios e duas biópsias de pele. Do total de 19 pacientes, 14 tiveram resultados positivos por PCR, e considerando as 25 amostras, 18 foram positivas por PCR (nove amostras de sangue, cinco biópsias de gânglios, duas punções de gânglios e duas biópsias de pele). Dez das 18 amostras positivas por PCR só foram detectadas pelo nested-FtsZ (seis amostras de sangue periférico, duas punções de gânglios, uma biópsia de gânglio e uma biópsia de pele). A primeira amplificação do sistema HSP-PCR detectou uma amostra positiva em 25 (1/25 ou 4%), e após o nested-HSP este percentual foi de 24% (6/25). Na primeira amplificação do sistema ITS-PCR a positividade foi de 20% (5/25), e no nested-ITS 32% (8/25). Após a primeira amplificação do sistema FtsZ-PCR a positividade foi de 16% (4/25), e no nested-FtsZ foi de 72% (18/25). O teste de McNemar testou a concordância ou discordância dos resultados obtidos pelos três sistemas de nested-PCR e revelou que os mesmos foram discordantes, com superioridade do sistema nested-FtsZ em relação aos outros dois nested-PCR, sendo a diferença estatisticamente significante (p<0,05). Os resultados do presente estudo permitiram concluir que o nested-FtsZ apresentou vantagens para o diagnóstico das bartoneloses em relação aos outros sistemas testados, em materiais biológicos previamentedescritos na literatura (biópsias e punções de gânglios), e até mesmo em sangue periférico de pacientes sem doença de base. Além disso, foi possível determinar, no presente estudo, que as infecções foram causadas por B. henselae, uma vez que não houve nenhuma PCR positiva pelos outros dois sistemas que não tenha sido detectada pelo nested-FstZ, e este amplifica apenas DNA de Bartonella henselae após a segunda amplificação. / Bartonellosis are infections caused by Bartonella spp and this zoonosis is of growing importance due to the severity of infection in immunodeficient patients. Many clinical syndromes are associated with bartonellosis, varying from typical manifestations of cat scratch disease, to lymphoproliferative skin lesions (bacillary angiomatosis) or granulomatous ones in organs (bacillary peliosis), and also neurologic and ocular manifestations, endocarditis and prolonged fever. The laboratory diagnosis should be based on bacteria isolation in culture, serological tests and immunohistochemical examination, but these techniques are not available in our country. The Polymerase Chain Reaction (PCR) has been used to improve the diagnosis of bartonellosis, and this study has aimed at standardizing three nested-amplifications for detection of Bartonella henselae DNA in biological samples of patients with suspected bartonellosis, and establishing among the three nested-PCR, the one presenting with the best performance. Nested-PCR amplifications were performed using the ITS, the HSP and the FtsZ gene sequences of Bartonella spp. We included 19 patients, being 14 children / adolescents andfive adults, and eight reported contact with cats. From these patients, 10 had no underlying disease, and nine patients had underlying conditions (3 evolved to death). We collected 25 samples: 14 peripheral blood samples, seven lymph nodes biopsies, two lymph nodes punctures and two skin biopsies. From the total of 19 patients, 14 had positive results by PCR, and considering the 25 samples, 18 were positive by PCR (nine peripheral blood samples, five lymph nodes biopsies, two lymph nodes punctures and two skin biopsies). Ten of the 18 PCR-positive samples were only detected by the nested-FtsZ (six peripheral blood samples, two lymph nodes punctures, one lymph node biopsy and one skin biopsy). The first HSP-PCR amplification detected one positive sample in 25 (1 / 25 or 4%), and after the nested-HSP this percentage was 24% (6 / 25). In the first ITS-PCR amplification the positivity was 20% (5 / 25), and after the nested-ITS 32% (8 / 25). The first FtsZ-PCR amplification positivity was 16% (4 / 25), and after the nested-FtsZ it was 72% (18/25). The McNemar test was used to verify the concordance or discordance of the results obtained by the three nested-PCR systems and showed that they were discordant, with superiority of the nested-FtsZ in relation to the other two nested-PCR, being the difference statistically significant (p<0.05). The results of this study indicated that the nested-FtsZ showed advantages for the diagnosis of bartonellosis with respect to the other two systems when biological materials previously described in literature were tested (punctures and lymph nodes biopsies), and also in peripheral blood of patients without underlying conditions. Furthermore, it was possible to determine that the infections were caused byB. henselae, since there was no positive PCR results obtained by the other two systems that were not detected by the nested-FstZ, that only amplifies DNA from Bartonella henselae after the second round of amplification.