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O microquimerismo vem sendo identificado em uma série de situações biológicas, sendo decorrentes de procedimentos clínicos ou condições fisiológicas. A transfusão sangüínea é um dos procedimentos que pode produzir a mistura de células do doador com as do receptor. Na transfusão sanguínea, o maior constituinte são as hemácias, logo a interferência microquimérica que pode ocorrer deve-se apenas aos leucócitosque são transfundidos do doador. A admistração rotineira de produtos derivados do sangue é a principal causa de doenças, aonde estes hemocomponente vindos de doadores alogênicos contém leucócitos capazes de sobreviver e se expandir. Os leucócitos presentes nas bolsas de concentrado de hemácias usados em transfusões sanguíneas podem causar a doença do enxerto versus hospedeiro, febre, transmissão viral e interferir na identificação genética do receptor. Este trabalho teve como objetivo avaliar, em um primeiro momento, o limite de detecção de microquimerismo, através de microssatélites (STRs), em amostras biológicas misturadas em proporções conhecidas e, posteriormente, verificar a presença e o tempo de duração de microquimerismo em pacientes submetidos à transfusão sangüínea no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. A análise foi realizada a partir de amostras biológicas de três grupos: sete misturas de DNA extraídos antes desse estudo, cinco misturas de sangue e 20 pacientes submetidos à transfusão sangüínea. Todas essas amostras foram também genotipadas individualmente. A genotipagem foi realizada através de PCR seguido por eletroforese capilar, sendo amplificadas as seguintes regiões do genoma: D3S1358, D16S539, THO1, TPOX, CSF1PO, D7S820 e Amelogenina. Os resultados obtidos no grupo de mistura de amostras de DNA foi observada a presença de microquimerismo de 1:30 (ou 3,3%). No grupo de misturas de sangue, microquimerismo foi identificado até a proporção de 1:10 (ou 10%). Entretanto, não foi identificada a presença de microquimerismo em amostras coletadas nas primeiras 24 hs de pacientes submetidos à transfusão sangüínea. Esses resultados sugerem que a metodologia utilizada é sensível para identificar microquimerismo em misturas biológicas até o limite de 3,3%. Portanto, podemos concluir que o microquimerismo em pacientes transfundidos avaliados nesse estudo não atingiu o limite mínimo de detecção da metodologia empregada nesse trabalho. / Microchimerism has been identified in a series of biologic situations, being due to clinical procedures or from physiological conditions. Blood transfusion is a procedure that can produce a mixture of donor and receptor cells. In blood transfusions, where red blood cells are the major component, microchimeric interference is due to donor leukocytes. Even blood cell components previously processed may contain a small portion of leukocytes. In some cases, the routine administration of blood-derived products may be the main cause of diseases9 because these hemocomponents from allogeneic donors contain leukocytes capable of surviving and expanding10. Leukocytes present in bags of red blood cell concentrates used in blood transfusions may cause graft-versus-host disease (GVHD), as well as fever and, viral transmission, and may interfere in the genetic identification of the recipient. This work aimed to evaluate, at first, detection limit of microchimerism, using microssatelites (short tandem repeats - STR), in mixed biological samples of controlled proportions and, later, to verify presence and duration of microchimerism in patients postblood transfusion in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Analysis was performed in biological samples from three groups: DNA mixtures isolated previously to this study, blood mixtures and patients submitted to blood transfusion. All these samples were also analyzed individually. Allelic patterns were performed through PCR, using fluorescent primers, followed by capillary electrophoresis, with amplification of the following genome regions: D3S1358, D16S539, THO1, TPOX, CSF1PO, D7S820 and Amelogenin. These results in the group of DNA mixtures, microchimerism was observed up to 1:30 (or 3.3%). In the group of blood mixtures, microchimerism was identified up to 1:10 (or 10%). However, presence of microchimerism was not identified in samples collected up to 24 h from patients submitted to blood transfusion. These results suggest that the applied methodology is sensitive to identify microchimerism in biological mixtures up to the limit of 3.3%. Therefore, we can conclude that microchimerism in patients submitted to blood transfusion evaluated in this study did not reach the minimal detection limit for the methodology applied in this work.

O microquimerismo vem sendo identificado em uma série de situações biológicas, sendo decorrentes de procedimentos clínicos ou condições fisiológicas. A transfusão sangüínea é um dos procedimentos que pode produzir a mistura de células do doador com as do receptor. Na transfusão sanguínea, o maior constituinte são as hemácias, logo a interferência microquimérica que pode ocorrer deve-se apenas aos leucócitosque são transfundidos do doador. A admistração rotineira de produtos derivados do sangue é a principal causa de doenças, aonde estes hemocomponente vindos de doadores alogênicos contém leucócitos capazes de sobreviver e se expandir. Os leucócitos presentes nas bolsas de concentrado de hemácias usados em transfusões sanguíneas podem causar a doença do enxerto versus hospedeiro, febre, transmissão viral e interferir na identificação genética do receptor. Este trabalho teve como objetivo avaliar, em um primeiro momento, o limite de detecção de microquimerismo, através de microssatélites (STRs), em amostras biológicas misturadas em proporções conhecidas e, posteriormente, verificar a presença e o tempo de duração de microquimerismo em pacientes submetidos à transfusão sangüínea no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. A análise foi realizada a partir de amostras biológicas de três grupos: sete misturas de DNA extraídos antes desse estudo, cinco misturas de sangue e 20 pacientes submetidos à transfusão sangüínea. Todas essas amostras foram também genotipadas individualmente. A genotipagem foi realizada através de PCR seguido por eletroforese capilar, sendo amplificadas as seguintes regiões do genoma: D3S1358, D16S539, THO1, TPOX, CSF1PO, D7S820 e Amelogenina. Os resultados obtidos no grupo de mistura de amostras de DNA foi observada a presença de microquimerismo de 1:30 (ou 3,3%). No grupo de misturas de sangue, microquimerismo foi identificado até a proporção de 1:10 (ou 10%). Entretanto, não foi identificada a presença de microquimerismo em amostras coletadas nas primeiras 24 hs de pacientes submetidos à transfusão sangüínea. Esses resultados sugerem que a metodologia utilizada é sensível para identificar microquimerismo em misturas biológicas até o limite de 3,3%. Portanto, podemos concluir que o microquimerismo em pacientes transfundidos avaliados nesse estudo não atingiu o limite mínimo de detecção da metodologia empregada nesse trabalho. / Microchimerism has been identified in a series of biologic situations, being due to clinical procedures or from physiological conditions. Blood transfusion is a procedure that can produce a mixture of donor and receptor cells. In blood transfusions, where red blood cells are the major component, microchimeric interference is due to donor leukocytes. Even blood cell components previously processed may contain a small portion of leukocytes. In some cases, the routine administration of blood-derived products may be the main cause of diseases9 because these hemocomponents from allogeneic donors contain leukocytes capable of surviving and expanding10. Leukocytes present in bags of red blood cell concentrates used in blood transfusions may cause graft-versus-host disease (GVHD), as well as fever and, viral transmission, and may interfere in the genetic identification of the recipient. This work aimed to evaluate, at first, detection limit of microchimerism, using microssatelites (short tandem repeats - STR), in mixed biological samples of controlled proportions and, later, to verify presence and duration of microchimerism in patients postblood transfusion in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Analysis was performed in biological samples from three groups: DNA mixtures isolated previously to this study, blood mixtures and patients submitted to blood transfusion. All these samples were also analyzed individually. Allelic patterns were performed through PCR, using fluorescent primers, followed by capillary electrophoresis, with amplification of the following genome regions: D3S1358, D16S539, THO1, TPOX, CSF1PO, D7S820 and Amelogenin. These results in the group of DNA mixtures, microchimerism was observed up to 1:30 (or 3.3%). In the group of blood mixtures, microchimerism was identified up to 1:10 (or 10%). However, presence of microchimerism was not identified in samples collected up to 24 h from patients submitted to blood transfusion. These results suggest that the applied methodology is sensitive to identify microchimerism in biological mixtures up to the limit of 3.3%. Therefore, we can conclude that microchimerism in patients submitted to blood transfusion evaluated in this study did not reach the minimal detection limit for the methodology applied in this work.

O microquimerismo vem sendo identificado em uma série de situações biológicas, sendo decorrentes de procedimentos clínicos ou condições fisiológicas. A transfusão sangüínea é um dos procedimentos que pode produzir a mistura de células do doador com as do receptor. Na transfusão sanguínea, o maior constituinte são as hemácias, logo a interferência microquimérica que pode ocorrer deve-se apenas aos leucócitosque são transfundidos do doador. A admistração rotineira de produtos derivados do sangue é a principal causa de doenças, aonde estes hemocomponente vindos de doadores alogênicos contém leucócitos capazes de sobreviver e se expandir. Os leucócitos presentes nas bolsas de concentrado de hemácias usados em transfusões sanguíneas podem causar a doença do enxerto versus hospedeiro, febre, transmissão viral e interferir na identificação genética do receptor. Este trabalho teve como objetivo avaliar, em um primeiro momento, o limite de detecção de microquimerismo, através de microssatélites (STRs), em amostras biológicas misturadas em proporções conhecidas e, posteriormente, verificar a presença e o tempo de duração de microquimerismo em pacientes submetidos à transfusão sangüínea no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. A análise foi realizada a partir de amostras biológicas de três grupos: sete misturas de DNA extraídos antes desse estudo, cinco misturas de sangue e 20 pacientes submetidos à transfusão sangüínea. Todas essas amostras foram também genotipadas individualmente. A genotipagem foi realizada através de PCR seguido por eletroforese capilar, sendo amplificadas as seguintes regiões do genoma: D3S1358, D16S539, THO1, TPOX, CSF1PO, D7S820 e Amelogenina. Os resultados obtidos no grupo de mistura de amostras de DNA foi observada a presença de microquimerismo de 1:30 (ou 3,3%). No grupo de misturas de sangue, microquimerismo foi identificado até a proporção de 1:10 (ou 10%). Entretanto, não foi identificada a presença de microquimerismo em amostras coletadas nas primeiras 24 hs de pacientes submetidos à transfusão sangüínea. Esses resultados sugerem que a metodologia utilizada é sensível para identificar microquimerismo em misturas biológicas até o limite de 3,3%. Portanto, podemos concluir que o microquimerismo em pacientes transfundidos avaliados nesse estudo não atingiu o limite mínimo de detecção da metodologia empregada nesse trabalho. / Microchimerism has been identified in a series of biologic situations, being due to clinical procedures or from physiological conditions. Blood transfusion is a procedure that can produce a mixture of donor and receptor cells. In blood transfusions, where red blood cells are the major component, microchimeric interference is due to donor leukocytes. Even blood cell components previously processed may contain a small portion of leukocytes. In some cases, the routine administration of blood-derived products may be the main cause of diseases9 because these hemocomponents from allogeneic donors contain leukocytes capable of surviving and expanding10. Leukocytes present in bags of red blood cell concentrates used in blood transfusions may cause graft-versus-host disease (GVHD), as well as fever and, viral transmission, and may interfere in the genetic identification of the recipient. This work aimed to evaluate, at first, detection limit of microchimerism, using microssatelites (short tandem repeats - STR), in mixed biological samples of controlled proportions and, later, to verify presence and duration of microchimerism in patients postblood transfusion in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Analysis was performed in biological samples from three groups: DNA mixtures isolated previously to this study, blood mixtures and patients submitted to blood transfusion. All these samples were also analyzed individually. Allelic patterns were performed through PCR, using fluorescent primers, followed by capillary electrophoresis, with amplification of the following genome regions: D3S1358, D16S539, THO1, TPOX, CSF1PO, D7S820 and Amelogenin. These results in the group of DNA mixtures, microchimerism was observed up to 1:30 (or 3.3%). In the group of blood mixtures, microchimerism was identified up to 1:10 (or 10%). However, presence of microchimerism was not identified in samples collected up to 24 h from patients submitted to blood transfusion. These results suggest that the applied methodology is sensitive to identify microchimerism in biological mixtures up to the limit of 3.3%. Therefore, we can conclude that microchimerism in patients submitted to blood transfusion evaluated in this study did not reach the minimal detection limit for the methodology applied in this work.

SILVA, J. M. S. Fenotipagem eritrocitária em doadores de sangue no HEMOPI - PI (Teresina - Picos) e no hemocentro regional do Crato - CE. 2016. 71 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-09-02T11:12:27Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_jmsilva.pdf: 3030543 bytes, checksum: 837545373c655dd3a0028ee47b1a3414 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-09-02T11:12:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_jmsilva.pdf: 3030543 bytes, checksum: 837545373c655dd3a0028ee47b1a3414 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-02T11:12:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_jmsilva.pdf: 3030543 bytes, checksum: 837545373c655dd3a0028ee47b1a3414 (MD5) Previous issue date: 2016-01-21 / Due to better life expectancy and the aging of population, consequently the improvement of technical advances and diagnostics in medicine, combined with new therapeutic modalities for different diseases, it is growing worldwide the transfusion of packed red blood cells, platelets and fresh frozen plasma. So, the erythrocyte phenotyping as in receptors as in blood donors aims to reduce the number of transfusion reactions, preventing the appearance of antibodies in a later way, mainly in those receptors candidates to poly-transfusion. Besides this the erythrocyte phenotyping is essential for confirmation of formed alloantibodies as well as facilitating the identification of antibodies that can be formed in the future. This study aimed to analyze the frequencies of the main antibodies of blood groups belonging to the systems ABO, Rh, Duffy, Kidd, MNS, and K antigen of Kell system and to study the association between these groups and the distribution concerning the origin and the racial group self-referred. Being these, the main systems involved in hemolytic disease worldwide. 532 samples of blood donors of hemocenter of Ceará State, regional of Crato and hemocenter of Piaui State (Teresina and Picos). The methods used were the techniques of blood typing in hemolysis tube for phenotyping ABO/Rh (Fresenius Kabi). To identify other systems, it was used gel centrifugation with their respective antisera. (Biorad). It was determined the absolute and relative frequencies of categorical variables analyzed. The association between the phenotypes of blood group and region of origin and the self-referred race of donors was evaluated chi-square test. It was adopted as significant P< 0.05. In the current study it was observed that of 532 phenotyped donors , the distribution for males was ( 68.80% ) and females ( 31.20%). As for the frequency of blood systems, the most common groups were: O (53.38%), Jk ( a + b +) (52.26%), Fy (a + b ) ( 35.71%), M + Na s-s + + (21.05%), DCcee (35.54%) and the antigen K negative with ( 96.62% ). As for the phenotypes less frequent it was found the groups : AB (2,26% ) , Jk (0,19% ), Fy ( 8,65% ), M - N + S –s- ( 0,19% ) , M + N - S-s- ( 0,19% ), M+ N +S - s - ( 0,56% ), dCee ( 0,19% ), DCCEe ( 0,38% ) and DccEE ( 3,01% ). As for the region of origin shows there was no association between all phenotypes analyzed and the region of origin between donors. Also, it was not found association between the categories of self-reported race and all phenotypes analyzed. The study provided to know the erythrocyte profile of our donors with respect to the blood groups studied which constitute the main erythrocyte antigens of major clinical importance, contributing to improve the safety, quality and improvement in the practice of transfusion medicine in the states of Ceará and Piauí. From our data on, the meeting of negative units for the main erythrocytes antigens will allow the gathering of blood with rare phenotype in our population. The use of phenotyped red blood cells, along with the proof of compatibility becomes a fundamental tool to foster strategy for stock of blood, reflecting in a fast meeting of an ideal blood for each receptor. / Em razão da melhor expectativa de vida e do envelhecimento da população, consequentemente, a melhora dos avanços técnicos e diagnósticos na Medicina, aliados a novas modalidades terapêuticas para doenças, cresce no mundo inteiro a transfusão de concentrados de hemácias, plaquetas e plasma fresco congelado. Assim, a fenotipagem eritrocitária, tanto em receptores quanto em doadores de sangue, tem como finalidade reduzir o número de reações transfusionais, prevenindo o aparecimento de anticorpos de forma mais tardia, principalmente naqueles receptores candidatos a politransfusão. Além disso, a fenotipagem eritrocitária é essencial na confirmação dos aloanticorpos formados, além de facilitar a identificação de anticorpos que poderão ser constituídos no futuro. O estudo teve como objetivo analisar as frequências dos principais antígenos de grupos sanguíneos pertencentes aos sistemas ABO, Rh, Duffy, Kidd, MNS, e o antígeno K do sistema Kell, bem como estudar a associação entre esses grupos e a distribuição quanto à procedência e o grupo racial autorreferido, por serem esses os principais sistemas envolvidos em reação transfusional hemolítica e causarem a doença hemolítica perinatal em todo o mundo. Foram analisadas 532 amostras de doadores de sangue do Hemocentro do Estado do Ceará, regional do Crato, e Hemocentro do Estado do Piauí (Teresina e Picos). As metodologias empregadas foram as técnicas de tipagem sanguínea em tubo de hemólise, para fenotipagem ABO/Rh. Para a identificação dos outros sistemas, utilizou-se a de gel-centrifugação, com seus respectivos antissoros. Foram determinadas as frequências absolutas e relativas das variáveis categóricas analisadas. A associação entre os fenótipos dos grupos sanguíneos e a região de procedência ou a raça autorreferida dos doadores foram avaliadas pelo Teste de Qui-Quadrado. Foi adotado o P< 0,05. Neste trabalho, observou-se que, dos 532 doadores fenotipados, obteve-se a distribuição de (68,80%) do sexo masculino e (31,20%) do sexo feminino. Quanto à frequência dos sistemas sanguíneos, os grupos mais frequentes foram: O (53,38%), Jk(a+b+) (52,26%), Fy(a-b+) (35,71%), M+N+S-s+ (21,05%), DCcee (35,54%) e o antígeno K negativo com (96,62%). Quanto aos fenótipos menos frequentes, foram encontrados os grupos: AB (2,26%), Jk(a-b-) (0,19%), Fy(a-b-) (8,65%), M-N+S-s- (0,19%), M+N-S-s- (0,19%), M+N+S-s- (0,56%), dCee (0,19%), DCCEe (0,38%) e DccEE (3,01%). Quanto à região de procedência, notou-se que não houve associação entre todos os fenótipos analisados e a região de procedência entre os doadores. Também não foi constatada associação entre as categorias de raça autorreferida e todos os fenótipos analisados. O estudo permitiu conhecer o perfil eritrocitário dos doadores da pesquisa com relação aos grupos sanguíneos estudados que constituem nos principais antígenos eritrocitários de maior importância clínica, contribuindo com a melhoria da segurança, qualidade e aprimoramento no exercício da Medicina transfusional dos estados do Ceará e Piauí. O uso de hemácias fenotipadas, junto com a prova de compatibilidade, passa a ser meio fundamental para fomentar estratégia de estoque de sangue, refletindo na agilização do encontro de sangue ideal para cada receptor. Com suporte aos nossos dados, o encontro de unidades negativas para os principais antígenos eritrocitários irá permitir o encontro de sangue com fenótipo raro na nossa população.

BASÍLIO, Francisco Plácido de Sousa. Evolução das políticas de hemoterapia no Brasil : o sistema público de hemoterapia do Ceará. 2002. 98 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2002. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-12-17T13:11:48Z No. of bitstreams: 1 2002_dis_fpsbasilio.pdf: 688170 bytes, checksum: 96542050a0d8d9e4179ac1c599873d0f (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2013-12-17T13:12:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2002_dis_fpsbasilio.pdf: 688170 bytes, checksum: 96542050a0d8d9e4179ac1c599873d0f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-17T13:12:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2002_dis_fpsbasilio.pdf: 688170 bytes, checksum: 96542050a0d8d9e4179ac1c599873d0f (MD5) Previous issue date: 2002 / The hemotransfusion is a need which has accompanied the humanity since its origins. Starting from the 15th century, several specialists tried to use the blood trough transfusion, however, only in the 20th century, with the discovery of blood groups and description of the crossed proof, transfusion was recognized as a scientific method. Blood Tranfusion Institutes were created in 1920, but in Brazil, only in the decade of 1940 apperead the first hemotherapics organizations. In this period, the Brazilian Society of Hematology and Hemotherapy was founded (in 1949) and the first law motivating the voluntary donation of blood in Brazil was written (which dates from 1950). In 1964, with the appereance of the military movement and the verification that in an eventual catastrophe there would not be enough blood to assist the national demand, was recommended a definition in the National Politics of Blood. In 1965 was edited by the Federal Government the law number 4.071 which has established rules to hemotherapic activity in the country and this was the first step to regulate this kind of service. But only in 1980 the National Program of Blood and Stems – Pro-Sangue was created tends with main goal the implantation of Hemocenters in Brazil. Comparing the year 1999, when 2.096.190 blood collections were accomplished by National Hematology Network, with the year 2000, when 2.329.937 people donated blood, we noticed a significant increase in the number of donors throughout Brazil. The National Management of Blood and Stems, responsible for the blood section in Brazil, steems the percentage of spontaneous donations around 41,74% and in this estimate 54,99% represent replacement donors. In 1971, the first private blood banks showed up in Ceará, and in 1983, HEMOCE, started to operate. Ten years later, Regional Hemocenters was implanted in the country side of the state. Nowadays, the hemotherapic coverage in Ceará approaches 100%, assisting all of the public and private hospitals. / A hemotransfusão é uma necessidade que acompanha a humanidade desde seus primórdios. A partir do século XV vários estudiosos tentaram utilizar o sangue através da transfusão. Somente no século XX com a descoberta dos grupos sangüíneos e a descrição da prova cruzada, tornaram a transfusão como um método científico. Os institutos de transfusão de sangue foram criados na Europa a partir do ano de 1920. No Brasil somente na década de 1940 surgiram as primeiras organizações hemoterápicas. Em 1949 surgiu a Sociedade Brasileira de Hematologia e Hemoterapia. A primeira Lei incentivando a doação voluntária de sangue no Brasil data de 1950. Com o surgimento do movimento militar em 1964 e a constatação de que numa eventual catástrofe não haveria sangue suficiente para atender a demanda nacional, é recomendada uma definição na Política Nacional de Sangue. Em 1965 é editado pelo Governo Federal a Lei nº 4.071 disciplinando a atividade hemoterápica no país. E este foi o primeiro passo para regulamentar estes serviços. Somente em 1980 é criado o Programa Nacional de Sangue e Hemoderivados – Pro-Sangue tendo com meta a implantação dos Hemocentros no Brasil. Comparando-se o ano de 1999 quando 2.096.190 coletas de sangue foram realizadas pela Hemorrede Nacional em relação ao ano de 2000 quando 2.329.937 pessoas doaram sangue, notamos um aumento significativo no número de doadores em todo o Brasil. A Gerência Nacional de Sangue e Hemoderivados responsável pelo setor de sangue no Brasil estima o percentual das doações espontâneas em torno de 41,74% sendo que 54,99% representam os doadores de reposição. Em 1971 surgem os primeiros bancos de sangue privados no Ceará. Em 1983 HEMOCE inicia suas atividades. Após dez anos os Hemocentros Regionais são implantados no interior do Estado. Hoje a cobertura hemoterápica no Ceará se aproxima dos 100% atendendo a todos os hospitais públicos e privados.

Orientador: Sara Teresinha Olalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T06:16:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_MarceloAddasde_D.pdf: 1285336 bytes, checksum: 9f0a8c27299796261470ed0167c4e315 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Citocinas inflamatórias como IL-1a e ß, IL-1RA, IL-6, IL-10 e TNF estão envolvidas na resposta imune inclusive na ocorrência de reação febril não hemolítica. Podem acumular nos concentrados de plaquetas (CPs) durante o armazenamento ou serem liberadas por células do receptor de transfusão. Alguns polimorfismos dos genes destas citocinas interferem na produção frente a estímulos. O presente trabalho tem como objetivo avaliar a importância dos polimorfismos IL1B-511C/T, IL1+3953C/T, IL1RN intron2 VNTR, IL6-174G/C, IL10-1082G/A, IL10-819C/T, TNF308G/A e TNF+252G/A em pacientes multitransfundidos e em doadores de sangue, utilizado para produção de CPs, através da avaliação da ocorrência precoce de RFNH associada a transfusão de concentrado de hemácias ou do acúmulo de IL-1a e ß, IL-1RA e TNF nos CPs. Utilizamos o método PCR e digestão com enzimas de restrição (PCR-RFLP) ou sequenciamento automatizado para identificações destes polimorfismos. Em nossa amostra de população da região de Campinas, São Paulo, encontramos freqüências genotípicas comparáveis às populações européia e norte americana e diferenças significativas das populações asiática e de origem africana. O raro alelo IL1RN*0 foi identificado em nosso grupo, não foi demonstrado interferência deste alelo, em heterozigose, na expressão do gene IL1RN em modelo in vitro. Nos CPs obtidos de plasma rico em plaquetas (CP-PRP) foi observado maior acúmulo de IL-1ß nos doadores IL1B-511CC, evidenciado no D5 e D7 de armazenamento. Foi observada correlação inversa entre o conteúdo de plaquetas nos CP-PRP e o acúmulo de IL-1ß e TNF, não havendo correlação com a contaminação leucocitária. Não houve acúmulo de IL-1a e IL- 1RA durante o armazenamento. No grupo de pacientes multitransfundidos, o alelo IL1RN*2 e o genótipo IL1RN*2.2 correlacionaram-se com a ocorrência de RFNH precoce. Concluímos que, o estudo de características genéticas dos doadores de sangue e pacientes pode ajudar a esclarecer as variações de ocorrência e gravidade dos efeitos adversos associados à transfusão de sangue, identificando grupos de maior risco e delineia uma nova linha de investigação / Abstract: Inflammatory cytokines such as IL-1a e ß, IL-1RA, IL-6, IL-10 and TNF have been related with immune responses including febrile non-hemolytic reactions. These biological mediators may accumulate in platelet concentrates (PCs) during storage or be secreted by receptor immune cells. Many cytokine gene polymorphisms interfere in the production of cytokines after stimulus. The present study aims to value the significance of polymorphisms IL1B-511C/T, IL1B+3953C/T, IL1RN intron2 VNTR, IL6-174G/C, IL10-1082G/A, IL10-819C/T, TNF308G/A and TNF+252G/A in multitransfused patients and in PCs donors using the evaluation of precocious FNHTR occurrence associated with red blood cells (RBCs) transfusion or accumulations of IL-1a e ß, IL-1RA and TNF in PCs during storage. The methods used were based on PCR and restriction enzymes (PCR-RFLP) or automated DNA sequencing for polymorphism characterizations. In our population sample from Campinas, southeast Brazilian region, we detected similar genotype frequencies to European and North American populations and significant differences to the Asiatic and African ones. A rare allele IL1RN*0 was detected in our control group, we did not demonstrate the interference of this allele in heterozygousity, in the IL1RN gene expression in the in vitro model. In PCs from plasma rich in platelet (PRP-PC), we observed increased IL-1ß accumulation in PCs from IL1B-511CC blood donors on storage days 5 and 7 (D5 and D7). IL-1ß and TNF levels were inversely correlated with platelet content in PRP-PCs and no correlation with leukocyte content. There was no increase in IL-1a e IL-1RA levels during storage. In the multitransfused patients group, the IL1RN*2 allele and IL1RN*2.2 genotype were correlated with the occurrence of precocious FNHTR. We concluded that studies of genotypic characteristics of blood donors and patients might contribute to explain the variations in frequencies and gravity of side effects related with blood transfusion characterizing high risk groups and may outline a new and promising investigation field / Doutorado / Hematologia e Hemoterapia / Doutor em Clínica Médica

ARRUDA, Daisy Maria Meireles. Aloimuniodade contra os antígenos HLA de classe I em pacientes portadores das síndromes mielodisplásticas e de anemia aplástica. 2005. 127 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2005. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-20T16:14:54Z No. of bitstreams: 1 2005_dis_dmmarruda.pdf: 661544 bytes, checksum: aa4ebb9c359f3176009d72da73f55c22 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T16:06:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_dis_dmmarruda.pdf: 661544 bytes, checksum: aa4ebb9c359f3176009d72da73f55c22 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T16:06:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_dis_dmmarruda.pdf: 661544 bytes, checksum: aa4ebb9c359f3176009d72da73f55c22 (MD5) Previous issue date: 2005 / Myelodysplastic syndrome (MDS) and aplastic anemia (AA) are two of the hematological disorders which present peripheral cytopenias, with extensive clinical manifestations that vary from slight anemia to severe pancytopenia; the latter requiring continuous transfusional reposition of red cell (RC) and platelet concentrates (PC), which can induce aloimunization in patients. Such patients can develop a post-transfusional refractory state, rendering further transfusions unviable. The objective of the present study was to investigate the incidence of anti-HLA antibodies in politransfused patients, and correlate the aloimmunity levels to the clinical profiles of MDS and AA patients. A total of 110 politransfused patients (70 with MDS, and 40 with AA) have been included in the study, with the MDS patients being subclassified into four clinical diagnostic categories: refractory anemia (RA), ringed-sideroblastic refractory anemia (RSRA), refractory anemia with excess blasts (RAEB) and refractory anemia with excess blasts in transformation (RAEB-t). Blood serum samples from these patients were treated with dithiothreitol for the detection of anti-HLA class I antibodies, using the complement-dependent cytotoxicity test (CDC), in a panel of lymphocytes constituted on the basis of the frequency of HLA antigens in our population (PRA). The results showed that a larger number of AA patients were aloimmunized than MDS patients (45% v 28.6%), with the aloreactivity being higher in AA patients who received higher mean transfusions of PC, than in MDS patients who received higher average number of EC transfusions. The degree of aloimmunization was different in the two disorders, and was generally related to: the number of transfusions received, the application of un-deleukocytised PC and EC, and the type of immunosuppressant drugs used in treatment [Cyclosporin (CsA) and/or antiglobulin (ALG) therapy significantly reduced aloimmunization, but corticoids alone were not sufficient]. The highest degree of aloimmunity (Grade 4) was observed only in MDS females, particularly in those who had multiple births. Persistent IgG was also associated with Grade 4 aloimmunity. These results reveal that significant numbers of MDS and AA patients, if politransfused with un-deleukocytised PC and EC and un-treated with immunosuppressants CsA and/or ALG, can develop anti-HLA antibodies and become refractory to further transfusions. Such aloimmunized patients can also become potentially unsuited to receive bone marrow transplants from HLA-matched donors. / As Síndromes Mielodisplásticas e Anemia Aplástica são desordens hematológicas que apresentam citopenias periféricas, com desenvolvimento de características clínicas extensas, com manifestações clínicas variáveis que vão desde uma leve anemia até uma pancitopenia severa, necessitando, nos últimos casos, de reposição transfusional contínua de concentrados de hemácias (CH) e de plaquetas (CP), tornando-os alvos à aloimunização pós-transfusional e desenvolvimento do estado de refratariedade às transfusões. Este estudo objetivou determinar a incidência de anticorpos anti-HLA de classe I em pacientes politransfundidos e correlacionar a aloimunidade ao perfil clínico dos pacientes de SMD e AA. 110 pacientes foram incluídos nesta pesquisa (70 portadores das SMD e 40 de AA), com os portadores das SMD classificados em quatro sub-grupos clínicos: anemia refratária (AR), anemia refratária sideroblástica em anel (ARSA), anemia refratária com excesso de blastos (AREB) e anemia refratária com excesso de blastos em transformação (AREB-t). Soros dos pacientes foram tratados com Dithiothreitol (DTT) para a pesquisa de Acs contra os Ag HLA de classe I, usando a técnica de “citotoxicidade dependente do complemento” (CDC), no painel de linfócitos baseado na frequência dos Ags HLA da nossa população (PRA). Os resultados demonstraram que os pacientes portadores das SMD desenvolveram um menor grau de aloimunização (28,6%), que os pacientes de AA (45%). A alorreatividade foi mais freqüente nos portadores de AA que tinham recebido maiores médias transfusionais de CP, em relação aos pacientes de SMD que receberam maior número de transfusões com CH. O grau de alorreatividade se manifestou diferente nestas duas doenças e, de forma geral, se relacionou com: o maior número médio de transfusões, a aplicação de preparações não desleucotizadas de CH e CP e o uso de imunossupressores (ciclosporina e/ou soros anti-leucocitários). Somente o uso de corticóide não foi suficiente para reduzir a aloimunização. O mais alto grau de alorreatividade (Padrão 4) nas SMD foi evidenciado somente em mulheres, principalmente nas multíparas. IgG persistente esteve mais presente no Padrão 4. Estes dados revelam que alguns pacientes das SMD e AA podem desenvolver anticorpos anti-HLA, se forem politransfundidos com hemoconcentrados não desleucotizados e sem o tratamento com os imunossupressores CsA e/ou GAL. Tal alorreatividade poderá tornar o paciente refratário às futuras transfusões e dificultar, em princípio, recebimento do transplante de medula óssea de doadores HLA compatíveis.

Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2016-12-20T13:42:45Z No. of bitstreams: 1 Vanessa Oliveira.pdf: 1271186 bytes, checksum: f62aea4aa8f97d8efc90c7570541717d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-20T13:42:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanessa Oliveira.pdf: 1271186 bytes, checksum: f62aea4aa8f97d8efc90c7570541717d (MD5) Previous issue date: 2015-12-15 / Blood transfusion is a complex procedure that requires specific expertise. The knowledge and skills of the entire health care team are extremely important for safe transfusion. During the procedure, there may be risks and complications, some of which can be fatal. This study aimed to evaluate the knowledge of transfusion therapy among the nursing staff of a large, regional hospital in Southern Rio Grande do Sul. It is a quantitative and cross-sectional, hospital-based study. Interviews were conducted among 352 nursing staff that had treated patients with transfusion therapy indication, from May to June in 2015. Data collection was carried out using a self-administered questionnaire at the workplace and soon after it was analyzed using univariate statistics. The data showed a predominance of young and female professionals, with five years of training at most. The results evaluation confirmed that the nursing staff has had unsatisfactory knowledge (less than 70% accuracy) on transfusion therapy. It was also shown that the participants are interested in receiving training focusing on the subject. Based on the results it was prepared an assistential manual containing basic guidelines on blood transfusion, which will help these professionals to train their skills and it will serve as a guide in the hospitals where the research was conducted. / A transfusão de sangue é um procedimento complexo que exige conhecimentos específicos. Para uma transfusão segura é de suma importância o conhecimento e habilidade de toda a equipe de saúde. O objetivo deste estudo foi avaliar o conhecimento acerca da terapia transfusional entre a equipe de enfermagem de um hospital de grande porte de uma região do sul do Rio Grande do Sul. Constituiu-se de uma pesquisa quantitativa, transversal, de base hospitalar. Foram entrevistados 352 funcionários de enfermagem que atendiam pacientes com indicação de terapia transfusional, entre maio e junho de 2015. A coleta de dados foi realizada através de um questionário autoaplicado, no local de trabalho, e logo após analisado por estatística univariada. Os dados evidenciaram predominância de profissionais jovens, do sexo feminino, com no máximo cinco anos de formação. A avaliação dos resultados confirmou conhecimento insatisfatório (percentual menor que 70% de acertos) da equipe de enfermagem sobre a terapia transfusional. Evidenciou-se o interesse dos participantes em receber capacitação sobre o assunto. Com base nos resultados, foi elaborado um manual assistencial com orientações básicas para transfusão de sangue que auxiliará na capacitação desses profissionais e servirá de consulta nos locais de serviço onde foi realizada a pesquisa.