Submitted by Natalie Mendes (nataliermendes@gmail.com) on 2015-07-25T15:23:13Z No. of bitstreams: 1 Disserta??o Melina PPGRGV.pdf: 1355642 bytes, checksum: 38055ea3e94c1f1eaec922c55c2d09bf (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-25T15:23:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Disserta??o Melina PPGRGV.pdf: 1355642 bytes, checksum: 38055ea3e94c1f1eaec922c55c2d09bf (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The species Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes, popularly known as ipeca or poaia, has attracted interest from the pharmaceutical industry for many decades due to the presence of cephalin and emetine alkaloids in their roots that have expectorant properties , emetic and amebicides. The extinction risk and difficulty of conventional crop production, front of the large market demand, encourage studies of cultivation methods that enable the economic exploitation and, consequently , the creation of new productive chains in rainforest areas . This study was performed at the Environmental Preservation Area Pratigi - APA Pratigi - located on the territory of Southern Bahia and aimed to quantify the growth and production of emetine in ipeca plants under agroforestry crop type cabruca , evaluating the effect of different lighting conditions , age and nutrient sources. Quantification of emetine was made by high performance liquid chromatography (HPLC) and the experimental results were subjected to analysis of variance , comparing treatment means by the Tukey test and Skot Knot . The experimental results showed that the lighting conditions affect plant growth of ipeca , being higher in environments with shading above 90 % . Ipecc had an average yield of 207 kg ha - 1 of fresh root and 80 kg ha - 1 dry at 16 months of growing root ; and 240 kg ha - 1 of fresh root and 93 kg ha - 1 at 28 months. It was possible to obtain levels of emetine , the conditions of agroforestry cultivation cabruca kind in Southern Bahia territory , equivalent to the levels obtained from plants collected extractive in other regions of the country . Age affects the content of emetine in agroforestry cultivation conditions, with higher concentrations in younger plants, after 16 months of cultivation. Considering the sources of fertilizer, with and without liming, gave higher plant height and higher No leaves / plant in treatments without liming , however, yielded better results for No / plant roots in limed areas . For the accumulation of root dry weight, the commercial part of the plant , treatments with nitrogen, with and without liming , promoted the highest averages. The levels of emetine were higher in treatments without lime and subjected to potassium fertilization. / A esp?cie Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes, conhecida popularmente como ipeca ou poaia, tem despertado interesse da ind?stria farmac?utica a muitas d?cadas, devido ? presen?a dos alcaloides emetina e cefalina em suas ra?zes, que possuem propriedades expectorantes, em?ticas e amebicidas. O risco de extin??o e a dificuldade do cultivo convencional da esp?cie, frente ? grande demanda de mercado, fomentam estudos de m?todos de cultivo que possibilitem a explora??o econ?mica e, consequentemente, a cria??o de novas cadeias produtivas em ?reas de floresta tropical. O presente trabalho foi realizado na ?rea de Preserva??o Ambiental do Pratigi - APA do Pratigi ? localizada no territ?rio do Baixo Sul da Bahia e teve como objetivos quantificar o crescimento e a produ??o de emetina em plantas de ipeca sob cultivo agroflorestal tipo cabruca, avaliando o efeito de diferentes condi??es de luminosidade, idade e fontes de aduba??o. A quantifica??o da emetina foi feita por meio de cromatografia l?quida de alta efici?ncia (CLAE) e os resultados experimentais foram submetidos ? an?lise de vari?ncia, comparando-se as m?dias dos tratamentos por meio dos testes Tukey e Skot Knot. Os resultados experimentais demonstraram que as condi??es de luminosidade afetaram o crescimento das plantas de ipeca, sendo maior em ambientes com sombreamento acima de 90%. A ipeca apresentou rendimento m?dio de 207 kg Ha-1 de raiz fresca e 80 kg Ha-1 de raiz seca aos 16 meses de cultivo; e de 240 kg Ha-1 de raiz fresca e 93 kg Ha-1 aos 28 meses. Foi poss?vel obter teores de emetina, nas condi??es de cultivo agroflorestal tipo cabruca no territ?rio Baixo Sul da Bahia, equivalente aos teores obtidos de plantas coletadas extrativistamente nas demais regi?es do pa?s. A idade afeta o teor de emetina nas condi??es de cultivo agroflorestal, com maiores teores em plantas mais jovens, aos 16 meses de cultivo. Considerando as fontes de aduba??o, com e sem calagem, obteve-se maior altura de plantas e maior n? folhas/planta nos tratamentos que n?o receberam calagem, entretanto, obteve-se melhores resultados para n? ra?zes/planta nas ?reas com calagem. Para o ac?mulo de massa seca de raiz, parte comercial da planta, os tratamentos com nitrog?nio, com e sem calagem, promoveram as maiores m?dias. Os teores de emetina foram maiores nos tratamentos sem calagem e submetidas ? aduba??o com pot?ssio.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2717003 bytes, checksum: 430ed9ce97311b4450b054a78245fcf2 (MD5) Previous issue date: 2013-02-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Cobalamin-independent methionine synthase (MetE) is a key enzyme for de novo synthesis of methionine in plants and it is also responsible for the regeneration of S-adenosylmethionine, which is a metabolite associated with the process of interaction with pathogens, plant growth and stresses response. In this study, 95 complete sequences of the gene for methionine synthase were obtained from 26 specimens of Carapichea ipecacuanha (species of Rubiaceae family, which is popularly known as ipecac) with aims to understand and model evolutionary events that occurred on MetE locus and on the specimens from three disjuncts ranges of occurrence of this species (Atlantic, Amazon and Central America ranges). Sequences of ITS and 5.8S from nrDNA and trnT-trnL spacers from cpDNA were also used for a multiloci population analysis. The sequenced region of MetE covered 3,890pb, where 2,298pb correspond to the coding region (composed of 11 exons) and 1,592pb to the noncoding region (comprising 10 introns and a portion of 3'UTR). In the entire sample were obtained 75 haplotypes and a nucleotide diversity of 0.00899. FST and AMOVA analyzes of MetE indicated no structure in three regions, opposite to detected for other loci analyzed here and in previous studies in which high divergence among the specimens from three ranges was observed. However, in the network haplotype was possible to observe the sympatric distribution of the haplotypes. Possibly, excess of tip haplotypes and the small number of mutational steps among neighboring haplotypes from the three ranges do not allow that the differentiation among these was significant. The Bayesian phylogenetic tree rooted by Carapichea lucida (outgroup) using the coding region sequences showed the formation of clades by geographic regions and provided evidence that sequences from "Atlantic" range is closer to the ancestral state of the gene MetE than sequences from others ranges. The heterogeneity of results for neutrality tests and for values of haplotype and nucleotide diversity at different loci suggests that these are evolving independently and also suggests that demographic events do not explain the pattern found. Thereby, tests for the presence of selection site-by-site were performed for the coding region of the gene MetE and protein alignment against others MetE from diferents plant species available in the Genbank was develop too. Four sites under positive selection were found, but the results show that negative selection (purifying selection) is the main force acting on the locus, favoring the conservation of protein structure and function in all gene copies from C. ipecacuanha. / Metionina sintase independente de cobalamina (MetE) é uma enzima chave na via de síntese de novo de metionina em plantas e também é responsável pela regeneração de S-adenosilmetionina, metabólito associado à vias de interação com patógenos, crescimento vegetal e resposta à estresses. Neste estudo, 95 sequências do gene para metionina sintase foram obtidas a partir de 26 indivíduos de Carapichea ipecacuanha (espécie da família Rubiaceae, popularmente conhecida com ipeca) com objetivo de entender e modelar os eventos evolutivos que ocorreram sobre o locus MetE e sobre os indivíduos de três regiões disjuntas de ocorrência desta espécie (Mata Atlântica, Amazônia e América Central). Sequências de ITS do nrDNA e dos espaçadores trnT-trnL do cpDNA também foram utilizadas para uma análise populacional multiloci. A região sequenciada de MetE abrangeu 3.890pb, sendo 2.298pb correspondentes à região codificante (composta por 11 exons) e 1.592pb à região não codificante (composta por 10 introns e uma parte da região 3 UTR). No total, foram obtidos 75 haplótipos e uma diversidade nucleotídica de 0,00899. As análises FST e AMOVA de MetE indicaram ausência de estruturação em relação às três regiões, diferentemente do observado para os demais loci aqui analisados e em estudos prévios em que elevada divergência entre as três regiões foi observada. Por meio rede de haplótipos foi possível observar a distribuição simpátrica destes; no entanto, o excesso de haplótipos de ponta e o pequeno número de passos mutacionais entre haplótipos vizinhos das três regiões não permitem que a diferenciação destes seja significativa. A árvore filogenética Bayesiana enraizada por Carapichea lucida (grupo externo) utilizando a região codificante também mostrou a formação de clados por regiões geográficas e forneceu evidências de que sequências da Mata Atlântica sejam mais próximas do estado ancestral do gene MetE que as sequências das demais regiões. A heterogeneidade dos resultados encontrados para os testes de neutralidade e para os valores de diversidade nucleotídica e haplotípica nos diferentes loci sugerem que estes estão evoluindo independentemente e que eventos demográficos não explicam o padrão obtido. Assim, análises para a presença de seleção foram conduzidas para a região codificante do gene MetE e também foi realizado alinhamento de proteínas preditas para esta espécie contra proteínas MetE de outras espécies vegetais disponíveis no GenBank. Em quatro sítios houve evidência de seleção positiva, mas os resultados sugerem que a seleção negativa (purificadora) é a principal força atuando sobre o locus, favorecendo a conservação da estrutura e função proteica em todas as cópias gênicas de C. ipecacuanha.