Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The part of our constant search for new bioactive secondary metabolites of plant origin, the aerial parts of three species of the genus Lupinus (Leguminoseae), and the bark of the roots of the species Waltheria douradinha Sain Hilaire (Sterculiaceae), were submitted to phytochemical investigation. In this research, they were isolated and identified 14 compounds, which was exposid several biological activities. Among the activities performed, the compounds were evaluated against antimicrobial, antioxidant enzyme (POP and DPPIV) and also bacteriolityc activity. Two of the isolated compounds, (+)Lanatina A (L. paranensis) and Antidesmona (W. douradinha) shawed bacteriolityc activity. The test showed that these compounds have bacteriolityc activity, especially against Gram-negative. The Antidesmona presented better lytic potential in the concentration of 12.5 μg/mL against the microorganism Salmonella typhimurium ATCC 14028. For this bacterium, Antidesmona alkaloid produced a cell wall lysis of approximately 30% between 4-6 hours (P <0.0001). The alkaloid extracts W. douradinha, collected in four different regions of Rio Grande do Sul - Brazil, was analyzing its chemical composition by HPLC. Analysis of the chemical composition of the basic extracts was compared with soil analyzes the place collection of plant. These results revealed significant differences in the chemical compositions of alkaloid extracts of Waltheria douradinha Sain Hilaire and were important guides of new collection sites these species. / Como parte da nossa busca permanente por novos metabólitos secundários bioativos, de origem vegetal, as partes aéreas de três espécies do gênero Lupinus, (Leguminoseae), e a casca das raízes da espécie Waltheria douradinha Sain Hilaire (Sterculiaceae), foram submetidas à investigação fitoquímica. Dessa investigação, foram isolados e identificados 14 compostos, os quais foram submetidos a diversas atividades biológicas. Dentre as atividades realizadas, os compostos foram avaliados frente a atividades antimicrobiana, antioxidante, enzimáticas (POP e DPPIV) e também atividade bacteriolítica. Dois dos compostos isolados, (+)Lanatina A (L. paranensis) e Antidesmona (W. douradinha), foram submetidos a atividade bacteriolítica. O teste demonstrou que esses compostos possuem atividade de lise, principalmente frente a Gram-negativos. A Antidesmona apresentou seu melhor potencial lítico na concentração de 12,5 μg/ml frente ao microrganismo Salmonella typhimurium ATCC 14028. Para esta bactéria, o alcaloide Antidesmona produziu uma lise de parede celular de aproximadamente 30% entre 4 e 6 horas (P<0,0001). Os extratos alcaloídicos de W. douradinha, coletada em quatro diferentes regiões do Rio Grande do Sul Brasil, passaram por análise de sua composição química por HPLC. A análise da composição química dos extratos básicos foi comparada com análises do solo do local de coleta da planta. Esses resultados revelaram diferenças significativas nas composições químicas dos extratos alcaloídicos de W. douradinha, e também foram importantes guias de novos locais de coleta dessa espécie.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Mass spectrometry is a technique widely used in all prod uctive sectors. Since the late '80s with the emergence of soft ionization techniques, mass spectrometry has been widely disseminated in the analysis of biopolymers such as fatty acids, nucleic acids, oligosaccharides and especially proteins. Lectins are proteins of nonimmune origin that have at least one specific and reversible binding carbohydrate domain, without the ability to modify them. These proteins are widely distributed in nature. Lectins isolated from seeds of legumes are among the most studied and have high homology degree, being an important molecular marker of evolution in this clade. This study aimed to characterize some legume lectins by m ass spectrometry. Lectin EVA and LAA with 240 and 237 amino acid residues respectively, were analyzed for native mass and sequence of amino acids determined, showing a high degree of homology with other legume lectins. Lectin ConGF, a ConA-like, was analyzed for protein content in the crystal. Was determined that bot h mature chain and proteolytic fragments are present to form crystal, which indicates no difference between the chains structure covalently linked together by weak interactions. The partial sequence shows that ConGF has several structural features within the subtribe Diocleinae. All results demonstrate that mass spectrometry is a versatile and robust tool for characterizing proteins and can be successfully used to obtain structural information of lectins. / A espectrometria de massa à uma tÃcnica amplamente utilizada em todos os setores produtivos. Desde o final dos anos 80 com o surgimento de tÃcnicas de ionizaÃÃo brandas, a espectrometria de massa vem sendo amplamente difundida na anÃlise de biopolÃmeros como Ãcidos graxos, Ãcidos nuclÃicos, oligossacarÃdeos e principalmente proteÃnas. Lectinas sÃo proteÃnas de origem nÃo imune que possuem pelo menos um domÃnio de ligaÃÃo especÃfica e reversÃvel a carboidratos, sem a capacidade de modificÃ-los. Estas proteÃnas sÃo amplamente distribuÃdas na natureza. As lectinas isoladas de sementes de leguminosas estÃo entre as mais estudadas e possuem alta homologia, sendo importantes marcadores moleculares da evoluÃÃo dentro desta famÃlia vegetal. Este trabalho teve como objetivo caracterizar lectinas da famÃlia Leguminosae atravÃs de espectrometria de massa. As lectinas de Erythrina velutina (EVA) e Luetzelburgia auriculata (LAA) com 240 e 237 resÃduos de aminoÃcidos respectivamente foram analisadas quanto a massa molecular nativa e foi determinada a sequencia de aminoÃcidos. As estruturas primÃrias mostraram alto grau de homologia com outras lectinas de leguminosas. A lectina ConGF, uma ConA-Like, foi analisada quanto ao conteÃdo protÃico do cristal. O cristal està composto da cadeia madura alfa e seus os fragmentos proteolÃticos, o que indica nÃo haver diferenÃa entre a estrutura ligada covalentemente e as cadeias unidas por interaÃÃes fracas. A sequÃncia parcial demonstra que ConGF possui caracterÃsticas estruturais da subtribo Diocleinae. Todos os resultados demonstram que a tÃcnica de espectrometria de massa à uma ferramenta versÃtil e robusta para caracterizaÃÃo de proteÃnas e pode ser usada com sucesso para obtenÃÃo de informaÃÃes estruturais de lectinas.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As a part of our ongoing search of new bioactive secondary metabolites of plant origin, the aerial parts of Lupinus lanatus were subjected to phytochemical investigation. Lupinus genus, belonging to the family of Leguminosae (Fabaceae), is widely distributed in south and western North America, in the Mediterranean region and Africa, with approximately 600 species. In Rio Grande do Sul, Brazil, the genus is represented by 13 species, among them, L. lanatus. This is a small shrub native to South America, mainly south Brazil (Rio Grande do Sul), Uruguai, Paraguai and Argentine. In Rio Grande do Sul, L. lanatus is called tremoço, and it is used in folk medicine as an antidiabetic, antifungal, antitumor and antioxidant agent. Quinolizidine alkaloids, such as lupanine, multiflorine, sparteine and argirine, are widely distributed in plants of the genus. Their biological effects, as antiarrhythmic, hypoglycemic, hypotensive, depressing CNS, hallucinogenic and respiratory stimulant activities, among others, has been studied previously. In the present paper, we describe the isolation and structural elucidation of a new quinolizidine alkaloid, lanatine A together with 13-α-cinnamoyloxylupanine, and hydroxylupanine from the leaves, and (-)multiflorine and (-)13-α-cis-tigloyloxymultiflorine from the seeds of L. lanatus. / Como parte da nossa busca permanente por novos metabólitos secundários bioativos de origem vegetal, as partes aéreas de Lupinus lanatus foram submetidas a investigação fitoquímica. O gênero Lupinus, pertencente à família das leguminosas (Fabaceae), é amplamente distribuída no sul e oeste da América do Norte, na região mediterrânica e na África, representado por cerca de 600 espécies. No Rio Grande do Sul, Brasil, o gênero está representado por 13 espécies, entre elas, L. lanatus. Este apresenta-se como um pequeno arbusto e está presente na América do Sul, no Brasil, Uruguai, Paraguai e Argentina. No Rio Grande do Sul, L. lanatus é conhecido popularmente Tremoço, e seu gênero é utilizado na medicina popular como agente antidiabético, antitumoral, antifúngico e antioxidante. Os alcalóides Quinolizidínicos, como lupanina, multiflorina, esparteína e argirina, são amplamente distribuídas em plantas do gênero. Seus efeitos biológicos, como antiarrítmicos, hipoglicemiante, hipotensor, depressor do SNC, alucinógenos e estimulante respiratório, entre outros, tem sido amplamente estudados. No presente trabalho, é descrito o isolamento e elucidação estrutural de um novo alcalóide quinolizidínico, Lanatina A, juntamente com o 13-α-cinnamoiloxilupanina e 13-α-hidroxilupanina oriundos das folhas, e (-)multiflorina e (-)13-α-cis-tigloiloximultiflorina isolados a partir das sementes de L. Lanatus.

SIMÕES, Rafael da Conceição. Caracterização de lectinas de leguminosas por espectrometria de massa. 2011. 91 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2011. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-06-29T13:14:44Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_rcsimoes.pdf: 16302885 bytes, checksum: aaccf965c78f4557403cda206b305a40 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:14:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_rcsimoes.pdf: 16302885 bytes, checksum: aaccf965c78f4557403cda206b305a40 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:14:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_rcsimoes.pdf: 16302885 bytes, checksum: aaccf965c78f4557403cda206b305a40 (MD5) Previous issue date: 2011 / Mass spectrometry is a technique widely used in all prod uctive sectors. Since the late '80s with the emergence of soft ionization techniques, mass spectrometry has been widely disseminated in the analysis of biopolymers such as fatty acids, nucleic acids, oligosaccharides and especially proteins. Lectins are proteins of nonimmune origin that have at least one specific and reversible binding carbohydrate domain, without the ability to modify them. These proteins are widely distributed in nature. Lectins isolated from seeds of legumes are among the most studied and have high homology degree, being an important molecular marker of evolution in this clade. This study aimed to characterize some legume lectins by m ass spectrometry. Lectin EVA and LAA with 240 and 237 amino acid residues respectively, were analyzed for native mass and sequence of amino acids determined, showing a high degree of homology with other legume lectins. Lectin ConGF, a ConA-like, was analyzed for protein content in the crystal. Was determined that bot h mature chain and proteolytic fragments are present to form crystal, which indicates no difference between the chains structure covalently linked together by weak interactions. The partial sequence shows that ConGF has several structural features within the subtribe Diocleinae. All results demonstrate that mass spectrometry is a versatile and robust tool for characterizing proteins and can be successfully used to obtain structural information of lectins. / A espectrometria de massa é uma técnica amplamente utilizada em todos os setores produtivos. Desde o final dos anos 80 com o surgimento de técnicas de ionização brandas, a espectrometria de massa vem sendo amplamente difundida na análise de biopolímeros como ácidos graxos, ácidos nucléicos, oligossacarídeos e principalmente proteínas. Lectinas são proteínas de origem não imune que possuem pelo menos um domínio de ligação específica e reversível a carboidratos, sem a capacidade de modificá-los. Estas proteínas são amplamente distribuídas na natureza. As lectinas isoladas de sementes de leguminosas estão entre as mais estudadas e possuem alta homologia, sendo importantes marcadores moleculares da evolução dentro desta família vegetal. Este trabalho teve como objetivo caracterizar lectinas da família Leguminosae através de espectrometria de massa. As lectinas de Erythrina velutina (EVA) e Luetzelburgia auriculata (LAA) com 240 e 237 resíduos de aminoácidos respectivamente foram analisadas quanto a massa molecular nativa e foi determinada a sequencia de aminoácidos. As estruturas primárias mostraram alto grau de homologia com outras lectinas de leguminosas. A lectina ConGF, uma ConA-Like, foi analisada quanto ao conteúdo protéico do cristal. O cristal está composto da cadeia madura alfa e seus os fragmentos proteolíticos, o que indica não haver diferença entre a estrutura ligada covalentemente e as cadeias unidas por interações fracas. A sequência parcial demonstra que ConGF possui características estruturais da subtribo Diocleinae. Todos os resultados demonstram que a técnica de espectrometria de massa é uma ferramenta versátil e robusta para caracterização de proteínas e pode ser usada com sucesso para obtenção de informações estruturais de lectinas.