Resumo: A leishmaniose visceral canina (LVC) é causada pelo protozoário Leishmania (L.) chagasi e a presença deste parasita na pele dos cães reforça a importância destes animais no ciclo de vida da L. (L..) chagasi e na infecção humana. O objetivo deste trabalho foi avaliar o teste imunoistoquímico (IMIQ) e a PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) em tecidos cutâneos caninos para o diagnóstico da LVC e compará-los com os exames histoquímico (HE) e sorológicos (ELISA e RIFI). Dos 34 cães naturalmente infectados, classificados em assintomáticos, oligossintomáticos e polissintomáticos, foram colhidas amostras de pele sadia ou com lesão para a realização da IMIQ, HE e PCR. Não somente peles lesionadas (56,5%), mas também peles sadias (31,8%) encontravam-se positivas pela IMIQ, confirmadas posteriormente pela PCR em 97,8% das amostras. No grupo assintomático, 87,5% estavam negativos pelos testes sorológicos, mas positivos em 50% dos casos pela IMIQ e 100% pela PCR. Entre os oligossintomáticos, 100%, 85,7% e 28,6% encontravam-se positivos, respectivamente pela PCR, sorologia e IMIQ. 91,7% dos polissintomáticos eram soro positivos e tinham parasitas intactos na pele. A PCR apresentou maior positividade, detectando amastigotas na pele de 100% dos cães independente do quadro clínico, do resultado dos exames sorológicos e do teste HE. A eficiência de cada teste variou de acordo com a evolução da doença, demonstrando a necessidade da associação de técnicas, usando IMIQ para confirmação da sorologia e a PCR apenas nos casos ainda suspeitos após a IMIQ, podendo assim aumentar os níveis de positividade e contribuir para o controle desta zoonose. / Abstract: Canine visceral leishmaniasis (CVL) is caused by a protozoa of the specie Leishmania (L.) chagasi and the presence of parasite in the skin reinforces the importance of dogs in the L. (L.). chagasi life cycle and for human infection. The purpose of the present study was to evaluate the immunohistichemistry (IMHC) and PCR (Polymerase Chain Reaction) tests for CVL diagnosis and compared the results with serological tests such as the indirect fluorescence antibody test (IFAT), ELISA and a parasitalogical test (microscopic direct examination of the parasite stained with haematoxylin and eosin - HE). For this study, samples of healthy or lesion skin tissues were obtained from 34 CVL naturally infected dogs classified in three groups: asymptomatic, oligosymptomatic and polisymptomatic. Not only lesion (56.5%) but also healthy skins (31.8%) were positives by IMHC and confirmed by PCR in 97.8% of skin samples. In asymptomatic group, 87.5% dogs were negatives by serological tests, but positives by IMHC in 50% and by PCR in 100%. In oligosymptomatic group, 100%, 85.7% and 28.6% of dogs were positives, respectively by PCR, serological and IMHC tests. In addition, 91.7% of polisymptomatic dogs were serum positives and had intact parasites in the skin. PCR showed higher positivity, detecting amastigotes in skins of 100% dogs regardless their clinical status or the serological or IMHC or HE test results. The efficiency of each test varied in agreement with the evolution of the disease. IMHC may be used to confirm the results of the serology and PCR only in suspicious cases after IMHC. The association of techniques proposed in this study may increase the positivity and contributed to the control of this zoonoses. / Orientador: Wilma Aparecida Starke Buzetti / Coorientador: Caris Maroni Nunes / Banca: Caris Maroni Nunes / Banca: Mary Marcondes / Mestre

Orientadora: Julieta Rodini Engrácia de Moraes / Banca: Marileda Bonafim Carvalho / Banca: Ana Maria Ferreira Roselino / Resumo: O cão é um importante reservatório do agente etiológico da leishmaniose visceral (LV). Este estudo compreendeu a avaliação de aspectos clínico-laboratoriais, histopatologia renal (cap. 2) e uso da PCR na identificação do agente infectante em baço, fígado, linfonodo e rins em cães com LV (cap. 3). No primeiro estudo, foram utilizados 34 cães soropositivos sintomáticos (caso), e 17 assintomáticos (controle), machos ou fêmeas, com raças e idades variadas, provenientes de Teresina-PI. Os cães foram submetidos a eutanásia. Após, foram coletados fragmentos de baço, fígado, linfonodo e rins. Fragmentos renais foram preparados por técnicas histológicas e corados com HE e PAS. Ao exame físico, foi freqüente hipertrofia de linfonodos (85,29%) e úlceras cutâneas (35,29%) no grupo caso. Verificou-se anemia em 55,88% dos cães no grupo caso e 11,76% no controle. A avaliação histopatológica renal no grupo caso, revelou que 61,76% dos cães apresentaram glomerulonefrite (GN) membranoproliferativa e, no controle, 17,65%. GN proliferativa mesangial ocorreu em 32,35% dos cães do grupo caso e em 64,70% do controle. Foram encontradas formas amastigotas de Leishmania em meio ao infiltrado inflamatório em um dos cães do grupo caso. No segundo estudo, utilizaram-se 25 cães soropositivos para LV sintomáticos (caso) e 15 assintomáticos (controle). As PCRs foram realizadas em termociclador automático, utilizando-se "primers" específicos para o gênero Leishmania. Os 25 cães do grupo caso, foram positivos nas PCRs de baço, ou fígado ou linfonodo, contra dois cães do grupo controle. Por meio das PCRs em rins, detectou-se DNA de Leishmania em oito animais (32%) do grupo caso. O estudo permitiu concluir que na LV canina, independentemente de haver sinais detectados ao exame físico, os rins freqüentemente estão acometidos e que a PCR é um exame mais preciso que a histopatologia convencional, na detecção da presença do parasita. / Abstract: The dog is an important reservoir of visceral leishmaniasis (VL) etiological agent. This study included clinical and laboratorial evaluation, renal histopathology (chapter 2) and the use of PCR in the identification of the infective agent on the spleen, liver, lynphonodes and kidney in dogs with VL (chapter 3). In the first study, it were used 34 symptomatic soropositives dogs (case), and 17 asymptomatic (control), male or female, with different breeds and ages, coming from Teresina-PI. The dogs were submitted to euthanasia. Right after, samples from spleen, liver, lymphonodes and kidneys were collected. Renal fragments were prepared using histological techniques and stained with HE and PAS. At physical exam, it was frequent lymphonodes hypertrophy (85.29%) and cutaneous ulcers (35,29%) in the case group. Anaemia was presented in 55.88% of the dogs from case group and 11.76% from control. The renal histopathology evaluation of the case group showed that 61.76% of the dogs presented membranoproliferative glomerulonephritis (GN) and, at the control group, 17.65%. Mesangial proliferative glomerulonephritis occurred in 32.35% of the dogs from case group and in 64.70% from control. In one of the dogs from case group, it was found amastigotes forms of Leishmania in the middle of the inflamatory infiltrated. In the second study, it were used 25 symptomatics soropositives dogs for VL (case) and 15 asymptomatic (control). PCRs were accomplished at an automatic termocycler using specific primers for Leishmania. All 25 dogs from case group were positives in PCRs of spleen, or liver or lymphonode, and only two from the control group. Through the PCRs of the kidneys, it was detected DNA of Leishmania in eight animals (32%) from case group... (complete abstract, access undermentioned eletronic address) / Mestre

Orientador: Cáris Maroni Nunes / Banca: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Banca: Silvia Helena Venturoli Perri / Resumo: A leishmaniose visceral (LV) vem se tornando um problema de saúde pública e atividades de educação em saúde podem resultar em maior participação da comunidade para o controle desta zoonose, pois tem forte potencial epidemiológico. Este estudo teve como objetivo avaliar o conhecimento sobre LV de escolares de 6º e 7º anos do Ensino Fundamental de três escolas públicas do município de Birigui-SP e a variação deste conhecimento após realização de um programa educativo. Um questionário foi aplicado antes (Etapa I) e após (Etapa II) a realização do projeto educativo que se constituiu de aula expositiva, palestra realizada por profissional de saúde, confecção de história em quadrinhos e de cruzadinha sobre o tema. Um total de 711 escolares foi entrevistado na Etapa I e 693 na Etapa II. Adotou-se critério de conhecimento de LV como "Bom", "Regular" e "Ruim" quando, de 10 questões analisadas pela Teoria de Resposta ao Item, os escolares tiveram 10- 8, 7-4, e 3-0 acertos, respectivamente. Verificou-se que houve aumento estatisticamente significante do nível de conhecimento, com o número de escolares com conceito Bom variando de 35,7% (Etapa I) para 59,7% (Etapa II), com conceito Regular de 54,3% (Etapa I) para 35,3% (Etapa II) e com conceito Ruim de 10,0% (Etapa I) para 4,9% (Etapa II). As atividades educativas realizadas geraram ganhos de conhecimento entre os escolares, o que permite concluir que programas educativos de forma continuada podem trazer resultados para a saúde pública. / Abstract: Visceral leishmaniasis (VL) is a public health problem and education activities in health can result in greater community participation for the control of zoonoses. We aimed at evaluating the 6th and 7th grade students' knowledge on visceral leishmaniasis from three public schools of Birigui,SP, Brazil. We also evaluated the knowledge gaining before and after an educative project were carried out by using a questionnaire before (Phase I) and after (Phase II) these activities that comprehended one speech, making one comic and one crossword about VL. We interviewed 711 students in Phase I and 693 in Phase II. A criterion of knowledge of VL was adopted as "Good", "Medium" and "Bad" when, out of 10 questions analyzed by Item Response Theory, 10-8, 7-4, and 3-0 were right, respectively. We observed a statistically significant increase in the students' level of knowledge after the educational project, since the number of students with "Good" concept changed from 35.7% (Phase I) to 59.7% (Phase II); the "Medium" concept changed from 54.3% to 35.3% and the "Bad" concept, from 10,0% to 4.9%. The educational activities carried out led to gains in knowledge among students suggesting that continuing education can bring important results to public health. / Mestre