O canto de anúncio é o principal sinal emitido pelos machos durante a estação reprodutiva e geralmente apresenta duas funções básicas: a atração de fêmeas coespecíficas receptivas sexualmente e o anúncio da posição de um macho para outros machos coespecíficos / heteroespecíficos, ajudando a manter o espaçamento entre os indivíduos vocalizando. A importância do canto de anúncio em anuros como mecanismo primário de isolamento reprodutivo foi extensivamente documentado na literatura e, em decorrência disso, os cantos tem se mostrado altamente valiosos na determinação da identidade das espécies, com aplicação potencial em abordagens macroevolutivas e zoogeográficas. O gênero Leptodactylus atualmente abriga 89 espécies, distribuídas do sul da América do Norte e ao longo de toda a extensão neotropical, do México e Antilhas até a Argentina e Uruguai, cujas espécies são atualmente classificadas em cinco grupos fenéticos. O grupo de L. fuscus é formado por 27 espécies que se distribuem desde o sul do México até o sul do Uruguai e norte da Argentina. Leptodactylus cunicularius foi descrito da Serra do Cipó, área serrana pertencente à porção meridional do complexo da Serra do Espinhaço, e posteriormente, citado de outras três regiões serranas do estado de Minas Gerais. O presente estudo tem como objetivo específico acessar dados bioacústicos e morfológicos/morfométricos de populações previamente atribuídas a Leptodactylus cunicularius, visando a caracterização de populações e o reconhecimento de espécies potencialmente novas. Para isso, analisamos espécimes adultos e cantos de anúncio de oito populações, incluindo a população topotípica, sendo que algumas populações foram previamente atribuídas a L. cunicularius, e outras populações eram desconhecidas até o presente momento. Cinco populações foram reconhecidas como distintas de L. cunicularius através de dados morfológicos/morfométricos e/ou bioacústicos. As outras duas populações ainda estão sob análise. Regiões serranas podem representar áreas de endemismo para anfíbios anuros, ao passo que em algumas delas, é possível detectar congruência biogeográfica para outros grupos de anuros, incluindo espécies próximas e populações confinadas a essas regiões sob complexos de espécies ainda não estudados. / The advertisement call is the main acoustic signal emitted by males during the reproductive season, and usually plays two basic roles: the attraction of conspecific females sexually receptive, and the advertisement of a males position to other conspecific / heteroespecific males, contributing to keep the distance among calling individuals. The importance of the advertisement call in anurans as a primary mechanism of reproductive isolation has been extensively documented in the literature, so that calls have been recognized as very useful to the recognition of species identity, in addition to potential application on macro-evolutionary and zoogeographic approaches. The genus Leptodactylus currently comprises 89 species, distributed from southern North America and throughout the Neotropics, from Mexico and Antilles to Argentina and Uruguay, whose species are today encompassed within five phonetic groups. The L. fuscus group includes 27 species distributed from southern Mexico to southern Uruguay and northern Argentina. Leptodactylus cunicularius was described from the Serra do Cipó, a montane region belonging to the southern secton of the Serra do Espinhaço mountain range, and later, cited from other three montane regions in the State of Minas Gerais. The aim of the present study is to assess bioacoustic and morphological/morphometric data of populations previously assigned to Leptodactylus cunicularius so as to the characterization of populations and the recognition of potentially new species. We analyzed adult specimens and advertisement calls of eight populations, including the topotypic population, considering that some populations were previously assigned to L. cunicularius, and other populations have been unreported so far. Five populations were recognized as different from L. cunicularius based on morphological/morphometric and/or bioacoustic data. The other two populations are still under analysis. Montane regions might represent endemism areas for anuran amphibians, since in some regions, it is already possible to detect biogeographic congruence concerning other anuran groups, including related species and populations restricted to these regions under complex of species unstudied.

Thesis (Ph. D.)--University of Texas at Austin, 1999. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 227-263). Available also in a digital version from Dissertation Abstracts.

O canto de anúncio é o principal sinal emitido pelos machos durante a estação reprodutiva e geralmente apresenta duas funções básicas: a atração de fêmeas coespecíficas receptivas sexualmente e o anúncio da posição de um macho para outros machos coespecíficos / heteroespecíficos, ajudando a manter o espaçamento entre os indivíduos vocalizando. A importância do canto de anúncio em anuros como mecanismo primário de isolamento reprodutivo foi extensivamente documentado na literatura e, em decorrência disso, os cantos tem se mostrado altamente valiosos na determinação da identidade das espécies, com aplicação potencial em abordagens macroevolutivas e zoogeográficas. O gênero Leptodactylus atualmente abriga 89 espécies, distribuídas do sul da América do Norte e ao longo de toda a extensão neotropical, do México e Antilhas até a Argentina e Uruguai, cujas espécies são atualmente classificadas em cinco grupos fenéticos. O grupo de L. fuscus é formado por 27 espécies que se distribuem desde o sul do México até o sul do Uruguai e norte da Argentina. Leptodactylus cunicularius foi descrito da Serra do Cipó, área serrana pertencente à porção meridional do complexo da Serra do Espinhaço, e posteriormente, citado de outras três regiões serranas do estado de Minas Gerais. O presente estudo tem como objetivo específico acessar dados bioacústicos e morfológicos/morfométricos de populações previamente atribuídas a Leptodactylus cunicularius, visando a caracterização de populações e o reconhecimento de espécies potencialmente novas. Para isso, analisamos espécimes adultos e cantos de anúncio de oito populações, incluindo a população topotípica, sendo que algumas populações foram previamente atribuídas a L. cunicularius, e outras populações eram desconhecidas até o presente momento. Cinco populações foram reconhecidas como distintas de L. cunicularius através de dados morfológicos/morfométricos e/ou bioacústicos. As outras duas populações ainda estão sob análise. Regiões serranas podem representar áreas de endemismo para anfíbios anuros, ao passo que em algumas delas, é possível detectar congruência biogeográfica para outros grupos de anuros, incluindo espécies próximas e populações confinadas a essas regiões sob complexos de espécies ainda não estudados. / The advertisement call is the main acoustic signal emitted by males during the reproductive season, and usually plays two basic roles: the attraction of conspecific females sexually receptive, and the advertisement of a males position to other conspecific / heteroespecific males, contributing to keep the distance among calling individuals. The importance of the advertisement call in anurans as a primary mechanism of reproductive isolation has been extensively documented in the literature, so that calls have been recognized as very useful to the recognition of species identity, in addition to potential application on macro-evolutionary and zoogeographic approaches. The genus Leptodactylus currently comprises 89 species, distributed from southern North America and throughout the Neotropics, from Mexico and Antilles to Argentina and Uruguay, whose species are today encompassed within five phonetic groups. The L. fuscus group includes 27 species distributed from southern Mexico to southern Uruguay and northern Argentina. Leptodactylus cunicularius was described from the Serra do Cipó, a montane region belonging to the southern secton of the Serra do Espinhaço mountain range, and later, cited from other three montane regions in the State of Minas Gerais. The aim of the present study is to assess bioacoustic and morphological/morphometric data of populations previously assigned to Leptodactylus cunicularius so as to the characterization of populations and the recognition of potentially new species. We analyzed adult specimens and advertisement calls of eight populations, including the topotypic population, considering that some populations were previously assigned to L. cunicularius, and other populations have been unreported so far. Five populations were recognized as different from L. cunicularius based on morphological/morphometric and/or bioacoustic data. The other two populations are still under analysis. Montane regions might represent endemism areas for anuran amphibians, since in some regions, it is already possible to detect biogeographic congruence concerning other anuran groups, including related species and populations restricted to these regions under complex of species unstudied.

Espécies de anfíbios anuros de áreas abertas tendem a ser mais generalistas e, portanto, são consideradas mais tolerantes à perturbação ambiental. No entanto, pouco se sabe sobre o efeito da degradação ambiental sobre estas espécies. Este trabalho teve como objetivo observar os efeitos das modificações ambientais antrópicas sobre a distribuição espacial e temporal de espécies simpátricas de anfíbios de Leptodactylus do grupo fuscus (Leptodactylus fuscus, L. mystacinus, L. furnarius e L. jolyi) típicas de ambientes abertos e que apresentam parentesco próximo. O estudo foi realizado em área natural de cerrado aberto na Estação Ecológica de Itirapina (EEI) e áreas adjacentes modificadas pelo homem na região sudeste do Brasil entre outubro de 2004 a fevereiro de 2005. Os resultados do presente trabalho sugerem que mesmo em espécies de anfíbios com parentesco próximo e que apresentam características ecológicas semelhantes podem apresentar sensibilidade diferenciada à perturbação no habitat. Dentre as quatro espécies estudadas, Leptodactylus jolyi aparenta ser a espécie mais sensível à degradação ambiental, ocorrendo somente em área natural. Estas diferenças na tolerância à perturbação ambiental provavelmente devem estar relacionadas à amplitude de nicho de cada espécie. Portanto, generalizações sobre a tolerância à perturbação ambiental de espécies de anfíbios de áreas abertas devem ser evitadas. Por outro lado, as espécies mais tolerantes podem ser favorecidas pela atividade antrópica, como em áreas urbanas, pois nestes locais provavelmente há a disponibilidade de recursos mais constantes que em área natural. No presente trabalho foi observado que estas espécies (L. fuscus, L. mystacinus e L. furnarius) apresentaram temporada de atividade de vocalização mais prolongada em áreas urbanas do que em áreas naturais de cerrado. Talvez isso possa refletir em um maior tempo de atividade reprodutiva que resulte em um maior sucesso reprodutivo. No entanto, no presente trabalho a atividade reprodutiva destas espécies não foi estudada. / Anuran species inhabiting open landscapes are usually habitat generalists, so it is considered more tolerant to disturbed habitat. Although, the effect of habitat degradation on these open habitat species have been poorly documented. The goal of this study was to observe the effects of habitat modification caused by human on spatial and temporal distribution of sympatric species of Leptodactylus fuscus group (Leptodactylus fuscus, L. mystacinus, L. furnarius, L. jolyi) which are inhabiting open landscapes and are close related species. This study occurred in natural and modified open habitats of cerrado at southeast of the State of São Paulo, Brazil, between October of 2004 and February of 2005. The results of this study suggest that close related species, which present ecological similarities, can show differences on sensibility to habitat alteration. Among these four species which were object of this study, L. jolyi seems to be the most sensible to habitat degradation, which occurs only in natural habitats in Itirapina and Brotas region. Probably, these tolerance differences to habitat degradation could be related to niche breadth of each species. Therefore, generalizations about amphibians inhabiting open landscapes tolerance to habitat degradations should be avoided. On the other hand, the species that are more tolerant to habitat alteration may be favored by anthropic activities, as in urban areas, because in these places the resources could be more constant than in natural areas. This study observed that three species of Leptodactylus fuscus group which occur in urban areas (L. fuscus, L. mystacinus e L. furnarius) started first the vocalization activity and presented longer time of vocalization activities during the rainy season than in natural areas of cerrado. Perhaps this fact could reflect in bigger period of reproductive activity of these species and may result in a higher reproductive success; however it was not taken into consideration for the present research.

Espécies de anfíbios anuros de áreas abertas tendem a ser mais generalistas e, portanto, são consideradas mais tolerantes à perturbação ambiental. No entanto, pouco se sabe sobre o efeito da degradação ambiental sobre estas espécies. Este trabalho teve como objetivo observar os efeitos das modificações ambientais antrópicas sobre a distribuição espacial e temporal de espécies simpátricas de anfíbios de Leptodactylus do grupo fuscus (Leptodactylus fuscus, L. mystacinus, L. furnarius e L. jolyi) típicas de ambientes abertos e que apresentam parentesco próximo. O estudo foi realizado em área natural de cerrado aberto na Estação Ecológica de Itirapina (EEI) e áreas adjacentes modificadas pelo homem na região sudeste do Brasil entre outubro de 2004 a fevereiro de 2005. Os resultados do presente trabalho sugerem que mesmo em espécies de anfíbios com parentesco próximo e que apresentam características ecológicas semelhantes podem apresentar sensibilidade diferenciada à perturbação no habitat. Dentre as quatro espécies estudadas, Leptodactylus jolyi aparenta ser a espécie mais sensível à degradação ambiental, ocorrendo somente em área natural. Estas diferenças na tolerância à perturbação ambiental provavelmente devem estar relacionadas à amplitude de nicho de cada espécie. Portanto, generalizações sobre a tolerância à perturbação ambiental de espécies de anfíbios de áreas abertas devem ser evitadas. Por outro lado, as espécies mais tolerantes podem ser favorecidas pela atividade antrópica, como em áreas urbanas, pois nestes locais provavelmente há a disponibilidade de recursos mais constantes que em área natural. No presente trabalho foi observado que estas espécies (L. fuscus, L. mystacinus e L. furnarius) apresentaram temporada de atividade de vocalização mais prolongada em áreas urbanas do que em áreas naturais de cerrado. Talvez isso possa refletir em um maior tempo de atividade reprodutiva que resulte em um maior sucesso reprodutivo. No entanto, no presente trabalho a atividade reprodutiva destas espécies não foi estudada. / Anuran species inhabiting open landscapes are usually habitat generalists, so it is considered more tolerant to disturbed habitat. Although, the effect of habitat degradation on these open habitat species have been poorly documented. The goal of this study was to observe the effects of habitat modification caused by human on spatial and temporal distribution of sympatric species of Leptodactylus fuscus group (Leptodactylus fuscus, L. mystacinus, L. furnarius, L. jolyi) which are inhabiting open landscapes and are close related species. This study occurred in natural and modified open habitats of cerrado at southeast of the State of São Paulo, Brazil, between October of 2004 and February of 2005. The results of this study suggest that close related species, which present ecological similarities, can show differences on sensibility to habitat alteration. Among these four species which were object of this study, L. jolyi seems to be the most sensible to habitat degradation, which occurs only in natural habitats in Itirapina and Brotas region. Probably, these tolerance differences to habitat degradation could be related to niche breadth of each species. Therefore, generalizations about amphibians inhabiting open landscapes tolerance to habitat degradations should be avoided. On the other hand, the species that are more tolerant to habitat alteration may be favored by anthropic activities, as in urban areas, because in these places the resources could be more constant than in natural areas. This study observed that three species of Leptodactylus fuscus group which occur in urban areas (L. fuscus, L. mystacinus e L. furnarius) started first the vocalization activity and presented longer time of vocalization activities during the rainy season than in natural areas of cerrado. Perhaps this fact could reflect in bigger period of reproductive activity of these species and may result in a higher reproductive success; however it was not taken into consideration for the present research.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The genus Leptodactylus has wide distribution and it can be found in many physiographic and climatic zones. This fact has raised questions about the taxonomy of this genus because many species that are considered of great geographic distribution has shown to be two or more closely related. The species Leptodactylus fuscus and Leptodactylus latrans, both widely spread, are found in the state of Sergipe in the Caatinga biome and little is known about the ecology, biology and diversity between and within populations that occupy this exclusively Brazilian biome. Therefore, the present study aimed to characterize the species L. fuscus and L. latrans, which occur in different fragments of Caatinga from the state of Sergipe, using cytogenetic and morphometric data. The karyotypes of populations from the municipalities of Carira, Poço Redondo and Tobias Barreto were analyzed by conventional staining techniques, C-band and Ag-RON. The species showed similar cytogenetic patterns, without evidence of species-specific markers; however some variations in morphology and bands were observed when compared to the karyotypes described in the literature. In morphometric analysis, 21 different characters were analyzed in the two species in each location, showing that populations of L. fuscus presented no significant differences between them; however variations were found in samples of L. latrans, mainly on the size of the specimens. The analyzed data showed that there were no cytogenetic and morphometric differences within the L. fuscus populations and that the morphometric variations observed in L. latrans may be due to environmental effects. / O gênero Leptodactylus tem ampla distribuição geográfica e está presente nas mais diversas zonas climáticas e fisiográficas. Esse fato tem levantado questionamentos de caráter taxonômico, pois muitas espécies consideradas de grande distribuição geográfica têm mostrado tratar-se de duas ou mais espécies estreitamente relacionadas. As espécies Leptodactylus fuscus e Leptodactylus latrans, ambas de ampla distribuição, são encontradas no Estado de Sergipe no bioma Caatinga e pouco se conhece sobre a ecologia, biologia e diversidade inter e intrapopulacional em populações que ocupam este bioma exclusivamente brasileiro. Nesse sentido, o presente estudo teve como objetivos caracterizar através de dados citogenéticos e morfométricos as espécies L. fuscus e L. latrans de ocorrência em diferentes fragmentos de Caatinga do Estado de Sergipe. Os cariótipos das populações dos municípios de Carira, Poço Redondo e Tobias Barreto foram analisados, por meio de técnicas de coloração convencional, Banda C e Ag-RON. Os exemplares estudados apresentaram padrões citogenéticos bastante similares, sem evidências de marcadores espécie-específicos; porém, algumas variações de morfologia e bandas foram observadas quando comparadas aos cariótipos já descritos na literatura. Nas análises morfométricas, 21 caracteres foram analisados nas duas espécies, em cada uma das localidades, mostrando que as populações de L. fuscus não apresentaram diferenças significativas entre elas; contudo variações foram encontradas nas amostras de L. latrans, principalmente quanto ao tamanho dos espécimes coletados. Os dados analisados conjuntamente mostram que populações de L. fuscus não diferem citogenética e morfometricamente entre si e as variações morfométricas observadas em L. latrans podem ser devidas aos efeitos ambientais.

O objetivo do trabalho foi realizar investigação sobre ocorrência de ranavirose, infecção causada por vírus do gênero Ranavirus, família Iridoviridiae, em anfíbios anuros silvestres nos municípios de Porto Ferreira e Pirassununga, cidades da região centro-leste do estado de São Paulo, Brasil, utilizando diagnóstico molecular. Ao todo, 40 anuros adultos silvestres da espécie Leptodactylus fuscus foram capturados nos municípios citados, sendo coletados três órgãos alvos (fígado, baço e rins) de replicação viral, com registro de eventuais alterações macroscópicas nesses órgãos, e dos quais extraiu-se DNA. Na sequência, realizou a reação em cadeia pela polimerase (PCR), utilizando-se primers específicos para o gene MCP (major capsid protein) de Frog Virus 3 (FV3), ranavírus circulante no Brasil, com isolado de FV3 pertencente ao biobanco do Laboratório de Higiene Zootécnica da FZEA-USP empregado como controle positivo e água livre de nuclease como controle negativo. Como resultados, em relação às alterações macroscópicas, somente um espécime apresentou hepatoesplenomegalia e hipopigmentação do coração. No entanto, ao diagnóstico molecular, nenhum dos 40 animais amostrados foi positivo à ranavirose. Tal resultado pode estar associado tanto a fatores intrínsecos (espécie, idade, resposta imune) como extrínsecos ao hospedeiro (alterações ambientais, patogenicidade viral). Em paralelo, em rãs de criação comercial, surtos por FV3 já foram detectados em vários ranários do país; contudo, essa é a primeira vez que uma prospecção para ranavirose é realizada especificamente com representantes da espécie Leptodactylus fuscus, em municípios da região centro-leste do estado de São Paulo. Assim, são necessárias mais pesquisas com espécies silvestres de rãs, particularmente no entorno de ranários com histórico de animais positivos para FV3, para melhor conhecimento da epidemiologia e dinâmica de transmissão da ranavirose entre rãs silvestres. / The objective of this study was to investigate the occurrence of ranavirus infection caused by virus belonging to genus Ranavirus, Iridoviridiae family, in wild anuran amphibians from Porto Ferreira and Pirassununga municipalities, located in the central-eastern region of the state of São Paulo, Brazil, using molecular diagnostics. In all, 40 wild adult anurans of the species Leptodactylus fuscus were captured in the mentioned municipalities, and three target organs (liver, spleen and kidneys) of the viral replication were collected, being possible macroscopic changes in these organs recorded, and from which DNA was extracted. In the sequence, the polymerase chain reaction (PCR) was carried out using primers specific for the MCP (major capsid protein) gene of Frog Virus 3 (FV3), a circulating ranavirus in Brazil, with a FV3 isolate belonging to the biobank of the Laboratory of Zootechnical Hygiene of FZEA-USP employed as positive control and nuclease-free water as negative control. As a result, in relation to macroscopic alterations, only one specimen showed hepatosplenomegaly and heart hypopigmentation. However, for molecular diagnostics, none of the 40 animals sampled were positive for ranavirus. This result may be associated to both intrinsic (species, age, immune response) and extrinsic (environmental changes, viral pathogenicity) factors to the host. In parallel, FV3 outbreaks have already been detected in several frog farms in the country. However, this is the first time that a prospection for ranavirus infection is performed specifically with specimens of the Leptodactylus fuscus from municipalities in the central-eastern region of the state of São Paulo. Thus, more studies on wild-type frogs are needed, particularly in the settings of frog farms with positive animal history for FV3, to better understand the epidemiology and dynamics of ranavirus transmission among wild frogs.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-20T14:29:33Z No. of bitstreams: 3 Dissertação - Elisa Barreto Pereira - 2014.pdf: 8780558 bytes, checksum: 5fadc3e589faf51ab9607a5a6db9a3d4 (MD5) Dissertação - Elisa Barreto Pereira - 2014 - Anexos.pdf: 5906578 bytes, checksum: 1ba8fbf89d407670555f01497afd353c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-20T14:32:03Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Dissertação - Elisa Barreto Pereira - 2014.pdf: 8780558 bytes, checksum: 5fadc3e589faf51ab9607a5a6db9a3d4 (MD5) Dissertação - Elisa Barreto Pereira - 2014 - Anexos.pdf: 5906578 bytes, checksum: 1ba8fbf89d407670555f01497afd353c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-20T14:32:03Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Dissertação - Elisa Barreto Pereira - 2014.pdf: 8780558 bytes, checksum: 5fadc3e589faf51ab9607a5a6db9a3d4 (MD5) Dissertação - Elisa Barreto Pereira - 2014 - Anexos.pdf: 5906578 bytes, checksum: 1ba8fbf89d407670555f01497afd353c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-03-14 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Leptodactylinae frogs are a remarkable example of anurans outstanding diversity of reproductive features. The major distinctions among the four reproductive modes presented by this group are the relationship with water and the predicted gradual tendency towards terrestriality. To study the evolution of Leptodactylinae reproductive traits and recognize their patterns we used ancestral reconstruction methods. We also tested correlations among reproductive modes and other life-history traits by using stochastic inferences. First we reconstructed a phylogenetic hypothesis of Leptodactylinae lineages including Leptodactylus, Adenomera, and Lithodytes genera based on four DNA fragments. This hypothesis comprises the most complete phylogeny of Adenomera to date and confirm its monophyletism with Lithodytes as sister taxon. Our ancestral reconstruction analysis indicated that even though shifts from aquatic to terrestrial breeding occurred in the history of Leptodactylus and Adenomera, shifts from terrestrial to aquatic happened in almost the same frequency, indicating that Leptodactylinae frogs do not always evolve towards terrestriality and that reproductive modes with semi-terrestrial tadpoles is not necessarily an intermediate form between aquatic and terrestrial breed. Correlations among reproductive modes and other life-history traits suggest that tadpole environment, clutch size, nuptial spines, and egg pigmentation are coevolving driven by water dependence. / (Sem resumo)

O objetivo do trabalho foi realizar investigação sobre ocorrência de ranavirose, infecção causada por vírus do gênero Ranavirus, família Iridoviridiae, em anfíbios anuros silvestres nos municípios de Porto Ferreira e Pirassununga, cidades da região centro-leste do estado de São Paulo, Brasil, utilizando diagnóstico molecular. Ao todo, 40 anuros adultos silvestres da espécie Leptodactylus fuscus foram capturados nos municípios citados, sendo coletados três órgãos alvos (fígado, baço e rins) de replicação viral, com registro de eventuais alterações macroscópicas nesses órgãos, e dos quais extraiu-se DNA. Na sequência, realizou a reação em cadeia pela polimerase (PCR), utilizando-se primers específicos para o gene MCP (major capsid protein) de Frog Virus 3 (FV3), ranavírus circulante no Brasil, com isolado de FV3 pertencente ao biobanco do Laboratório de Higiene Zootécnica da FZEA-USP empregado como controle positivo e água livre de nuclease como controle negativo. Como resultados, em relação às alterações macroscópicas, somente um espécime apresentou hepatoesplenomegalia e hipopigmentação do coração. No entanto, ao diagnóstico molecular, nenhum dos 40 animais amostrados foi positivo à ranavirose. Tal resultado pode estar associado tanto a fatores intrínsecos (espécie, idade, resposta imune) como extrínsecos ao hospedeiro (alterações ambientais, patogenicidade viral). Em paralelo, em rãs de criação comercial, surtos por FV3 já foram detectados em vários ranários do país; contudo, essa é a primeira vez que uma prospecção para ranavirose é realizada especificamente com representantes da espécie Leptodactylus fuscus, em municípios da região centro-leste do estado de São Paulo. Assim, são necessárias mais pesquisas com espécies silvestres de rãs, particularmente no entorno de ranários com histórico de animais positivos para FV3, para melhor conhecimento da epidemiologia e dinâmica de transmissão da ranavirose entre rãs silvestres. / The objective of this study was to investigate the occurrence of ranavirus infection caused by virus belonging to genus Ranavirus, Iridoviridiae family, in wild anuran amphibians from Porto Ferreira and Pirassununga municipalities, located in the central-eastern region of the state of São Paulo, Brazil, using molecular diagnostics. In all, 40 wild adult anurans of the species Leptodactylus fuscus were captured in the mentioned municipalities, and three target organs (liver, spleen and kidneys) of the viral replication were collected, being possible macroscopic changes in these organs recorded, and from which DNA was extracted. In the sequence, the polymerase chain reaction (PCR) was carried out using primers specific for the MCP (major capsid protein) gene of Frog Virus 3 (FV3), a circulating ranavirus in Brazil, with a FV3 isolate belonging to the biobank of the Laboratory of Zootechnical Hygiene of FZEA-USP employed as positive control and nuclease-free water as negative control. As a result, in relation to macroscopic alterations, only one specimen showed hepatosplenomegaly and heart hypopigmentation. However, for molecular diagnostics, none of the 40 animals sampled were positive for ranavirus. This result may be associated to both intrinsic (species, age, immune response) and extrinsic (environmental changes, viral pathogenicity) factors to the host. In parallel, FV3 outbreaks have already been detected in several frog farms in the country. However, this is the first time that a prospection for ranavirus infection is performed specifically with specimens of the Leptodactylus fuscus from municipalities in the central-eastern region of the state of São Paulo. Thus, more studies on wild-type frogs are needed, particularly in the settings of frog farms with positive animal history for FV3, to better understand the epidemiology and dynamics of ranavirus transmission among wild frogs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-23Bitstream added on 2014-06-13T19:19:39Z : No. of bitstreams: 1 leal_ddm_dr_botib.pdf: 1224687 bytes, checksum: a107e39c90387dc0cf8a5b2fc947fde8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Hepatozoon spp. são parasitas que comumente infectam anfíbios anuros e artrópodes hematófagos. Possuem como uma das características a grande variabilidade morfológica e morfométrica e, devido a estas variações, a denominação correta da espécie é prejudicada. Assim, a visualização do ciclo esporogônico no vetor é a principal forma de resolver este problema. Recentemente, a utilização da genética molecular tem ajudado na denominação de espécies. Neste trabalho coletamos 145 anuros (68 Leptodactylus chaquensis e 77 Leptodactylus podicipinus) em dois diferentes locais de coleta, onde foram encontrados 18 (26,5%) L. chaquensis e 24 (31,3%) L. podicipinus positivos para o parasita. Além de gamontes, também foram observadas formas esquizogônicas nos órgãos dos animais. A diferença de prevalência entre os locais de coleta nas diferentes espécies de anuros não se mostrou estatíscamente significativa. Comparando os gamontes encontrados em cada espécie de anuro, observamos diferenças na morfologia. Infelizmente, não foi possível a comparação a nível molecular para L. podicipinus devido à pequena quantidade de sangue obtido, apenas L. chaquensis teve o DNA de seus parasitas sequenciados. Diante disso, vimos que embora a morfologia e morfometria do parasita em cada local coletado mostrassem diferenças, quando realizamos o sequenciamento, as amostras obtidas foram idênticas, ao passo que quando comparadas à espécies depositadas no GenBank, nossas amostras foram bem diferentes / Hepatozoon spp. are parasites that commonly infect frogs and arthropod vectors. This species has variability in morphological and morphometric characteristics. Due to these variations the name of the species is thus impaired and only by visualizing the sporogonic cycle in vector can be solved this problem. Recently the use of molecular genetics has helped the denomination of species. In this work we collected 145 frogs (68 Leptodactylus chaquensis and 77 Leptodactylus podicipinus) in different sampling sites, where they were found 18 (26.5%) L. chaquensis and 24 (31.3%) L. podicipinus positive for parasites. Besides of gamonts, schizogonic forms also were seen in organs of animals. The positivity difference between the sites for different frog species were not significant. Comparing gamonts found in each species of anuran, we observed differences in morphology. Unfortunately it was not possible in the molecular level comparation for L. podicipinus due to small amount of blood obtained, just L. chaquensis have had their DNA sequenced parasites.Therefore, we have seen that, although the morphology and morphometry of the parasite collected at each site showed differences, the sequencing of these samples revealed identical species of Hepatozoon, and different compared to those from GenBank. We also emphasize that the collection points did not influence the presence of this parasite, even located at a distance of approximately 76 km apart one of other