Presentación de Trabajo Final para el curso Informática para Ciencias de la Salud (ME50) 2010-1

Orientador: Irene G. H. Lorand Metze / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:30:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rego_MonicaFortesNapoleaodo_M.pdf: 1863029 bytes, checksum: b893c5669296e928c8a58dfe825026af (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Variações na distribuição da idade, sexo e tipos FAB têm sido descrita em vários países. Neste trabalho avaliaram-se as características clínicas e resposta ao tratamento da LMA e LLA de Teresina entre 1989 e 2000 e comparamos esses resultados com outros descritos no Brasil e em outros países. Dados clínicos e laboratoriais de 345 pacientes (230 com LLA e 115 com LMA) foram revisados. LMA ocorreu predominantemente em adultos (77%). A mediana de idade foi de 34 anos, semelhante ao que se encontra no Sul do Brasil, e inferior aos encontrados nos Estados Unidos e Europa. A distribuição FAB foi semelhante em crianças e adultos, e FAB-M2 foi o tipo mais comum, semelhante ao Japão. A alta freqüência do tipo FAB-M3, descrita em outras regiões do Brasil e em latinos nos EUA não foi observada. A sobrevida global para adultos foi 39%, semelhante ao encontrado em Campinas ou Belo Horizonte. Entretanto uma alta taxa de mortalidade foi observada durante a indução. Os parâmetros clínicos e hematológicos não influíram na sobrevida quando utilizou-se o modelo de Cox. A LLA apresentou maior incidência entre 2-8 anos. A maioria dos casos era LLA pré-B CD10+. Em 25% foram observadas expressão de marcadores anômalos de antígenos mielóides. Somente 10% dos pacientes tinham idade acima de 30 anos. A sobrevida global foi melhor para crianças. Idade e contagem de leucócitos foram fatores prognósticos independentes que influíram na sobrevida global. Esses dados demonstraram que embora existam peculiaridades regionais nas leucemias agudas no Brasil, a aplicação de tratamento padronizados e cuidados de suporte adequados possibilitam melhorar os resultados / Abstract: Variations in age and sex distribution as well as FAB types have been reported for acute leukemias in several countries. We studied the demographics and response to treatment in AML and ALL between 1989 and 2000 in Terezina- Piauí ¿Brazil and compared those results with other reports from Brazil and other countries. Complete data from 345 (230 ALL and 115 AML) could be reviewed. AML occurred predominantly in adults (77%), median age=34 years, similar to those found us southeast of Brazil but lower than in USA and Europe. FAB distribution was similar in children and adults and FAB-M2 was the most common type as also found in Japan. The high frequency of FAB-M3, described in other regions of Brazil and Latinos in USA was not observed. Overall survival for adults was 39%, similar to those found in Campinas or Belo Horizonte. However, a high mortality in AML group during induction was observed in Terezina. No clinical or hematological parameter influenced survival in the Cox Model. ALL presented the characteristic incidence between 2-8 years. Most of analyzed the cases were CD10+ pre-B ALL. In 255, abnormal expression of myeloid antigens was observed. Only 10% of the patients were > 30 years old. Overall survival was better for children. Age and leukocyte count were independent prognostic factors. These data demonstrate that although there are regional peculiarities in acute leukemias in Brazil, the applications of standardized treatment and a good supportive care make it possible to achieve results observed in other countries using similar chemotherapy protocols / Mestrado / Medicina Interna / Mestre em Ciências Médicas

El objetivo de esta investigación fue caracterizar las alteraciones citogenéticas encontradas en muestras de médula ósea de pacientes adultos diagnosticados como Leucemia Mieloide Aguda subtipo M2 (FAB), por medio de la Citogenética Convencional y Molecular, y evaluar su concordancia con los resultados obtenidos mediante el Inmunofenotipo y Morfología. Se trabajó con 28 muestras, tomadas a un grupo de pacientes que tuvieron, diagnóstico definitivo de LMA subtipo M2, desde enero del 2004 a diciembre del 2005. 20 casos presentaron metafases analizables mediante la citogenética convencional (Bandas G), siendo 9 (45%) positivos para la translocación t(8;21) ó sus variantes. 11 muestras de un grupo de pacientes con diagnóstico de LMA subtipo M2, fueron analizadas mediante el análisis citogenético molecular (FISH locus específico), siendo 5 casos (46%) positivos para la presencia del gen de fusión AML1/ETO producto de la translocación t(8;21). La sensibilidad de detección de la translocación t(8;21) aumenta cuando se usa, además de técnicas convencionales, como el análisis del cariotipo, técnicas de mayor sensibilidad y especificidad como el FISH. La correlación encontrada entre los resultados mediante la citogenética y el inmunofenotipo y morfología mediante el índice Kappa fue insignificante (0.151), considerando sólo la presencia de la translocación t(8;21) como principal anomalía cromosómica encontrada en la LMA M2. Sin embargo se debe tener en cuenta que esta alteración no es exclusiva ni la única que se puede encontrar de este tipo de enfermedad y, que podría encontrarse otras alteraciones cromosómicas e incluso cariotipos normales. / -- The objective of this research was to characterise the cytogenetic alterations found in samples of bone marrow of adult patients with clinical diagnosis of subtype M2 Acute Myeloid Leukemia (FAB), using both conventional and molecular cytogenetic; and to evaluate the agreement with the results obtained by immunophenotype and morphology assays. This research was performed with 28 samples of bone marrow, which were taken from a group of patients with diagnosis of subtype M2 AML from January 2004 to December 2005. 20 cases were showed analyzable metaphases through conventional cytogenetic (Banding G), being 9 positive cases (45%) for t(8;21) translocation or its variants. The molecular cytogenetic analysis (FISH specific locus), was performed in 11 samples of the a group of patients with diagnosis of M2 AML, 5 cases (46%) were positive for AML1/ETO fusion gene product of t(8;21) translocation. The sensitivity of the detection of t(8;21) translocation is increased by using more sensitive and specific tests like FISH added to conventional procedures. The agreement found between the results of the cytogenetic and immuno phenotype and morphology assay was insignificant by kappa index (0.151), considering only the presence of t(8;21) translocation as the main chromosomal anomaly found in AML M2. It must be take in account that this finding is not exclusive, neither unique for this kind of disease; it could be found also another chromosomal alterations or even normal cariotypes.

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Leucemia Mieloide Crónica (LMC), la más frecuente de las enfermedades mieloproliferativas, es una de las leucemias más estudiadas. Debido a la diversidad de formas de presentación y de tratamientos disponibles recibidos por los pacientes y a cómo estos influyen en la evolución de la enfermedad, decidimos realizar este estudio descriptivo analítico a fin de conocer la sobrevida total de los pacientes según hallazgos al diagnóstico y luego del tipo de tratamiento instaurado. Se encontraron 61 pacientes cuyos datos estaban disponibles en las historias clínicas encontradas. Se encontró una clara predisposición de la enfermedad hacia el sexo masculino. Los pacientes con fase acelerada o crisis blástica al diagnóstico tuvieron una menor sobrevida total con respecto a los pacientes con fase crónica al diagnóstico. Una mayor sobrevida también se observó en los pacientes con Score Sokal bajo e intermedio al diagnóstico y en los pacientes que utilizaron como tratamiento al interferón alfa. / Tesis de segunda especialidad

Leucemia Mieloide Crónica (LMC), la más frecuente de las enfermedades mieloproliferativas, es una de las leucemias más estudiadas. Debido a la diversidad de formas de presentación y de tratamientos disponibles recibidos por los pacientes y a cómo estos influyen en la evolución de la enfermedad, decidimos realizar este estudio descriptivo analítico a fin de conocer la sobrevida total de los pacientes según hallazgos al diagnóstico y luego del tipo de tratamiento instaurado. Se encontraron 61 pacientes cuyos datos estaban disponibles en las historias clínicas encontradas. Se encontró una clara predisposición de la enfermedad hacia el sexo masculino. Los pacientes con fase acelerada o crisis blástica al diagnóstico tuvieron una menor sobrevida total con respecto a los pacientes con fase crónica al diagnóstico. Una mayor sobrevida también se observó en los pacientes con Score Sokal bajo e intermedio al diagnóstico y en los pacientes que utilizaron como tratamiento al interferón alfa.

El objetivo de esta investigación fue caracterizar las alteraciones citogenéticas encontradas en muestras de médula ósea de pacientes adultos diagnosticados como Leucemia Mieloide Aguda subtipo M2 (FAB), por medio de la Citogenética Convencional y Molecular, y evaluar su concordancia con los resultados obtenidos mediante el Inmunofenotipo y Morfología. Se trabajó con 28 muestras, tomadas a un grupo de pacientes que tuvieron, diagnóstico definitivo de LMA subtipo M2, desde enero del 2004 a diciembre del 2005. 20 casos presentaron metafases analizables mediante la citogenética convencional (Bandas G), siendo 9 (45%) positivos para la translocación t(8;21) ó sus variantes. 11 muestras de un grupo de pacientes con diagnóstico de LMA subtipo M2, fueron analizadas mediante el análisis citogenético molecular (FISH locus específico), siendo 5 casos (46%) positivos para la presencia del gen de fusión AML1/ETO producto de la translocación t(8;21). La sensibilidad de detección de la translocación t(8;21) aumenta cuando se usa, además de técnicas convencionales, como el análisis del cariotipo, técnicas de mayor sensibilidad y especificidad como el FISH. La correlación encontrada entre los resultados mediante la citogenética y el inmunofenotipo y morfología mediante el índice Kappa fue insignificante (0.151), considerando sólo la presencia de la translocación t(8;21) como principal anomalía cromosómica encontrada en la LMA M2. Sin embargo se debe tener en cuenta que esta alteración no es exclusiva ni la única que se puede encontrar de este tipo de enfermedad y, que podría encontrarse otras alteraciones cromosómicas e incluso cariotipos normales. / The objective of this research was to characterise the cytogenetic alterations found in samples of bone marrow of adult patients with clinical diagnosis of subtype M2 Acute Myeloid Leukemia (FAB), using both conventional and molecular cytogenetic; and to evaluate the agreement with the results obtained by immunophenotype and morphology assays. This research was performed with 28 samples of bone marrow, which were taken from a group of patients with diagnosis of subtype M2 AML from January 2004 to December 2005. 20 cases were showed analyzable metaphases through conventional cytogenetic (Banding G), being 9 positive cases (45%) for t(8;21) translocation or its variants. The molecular cytogenetic analysis (FISH specific locus), was performed in 11 samples of the a group of patients with diagnosis of M2 AML, 5 cases (46%) were positive for AML1/ETO fusion gene product of t(8;21) translocation. The sensitivity of the detection of t(8;21) translocation is increased by using more sensitive and specific tests like FISH added to conventional procedures. The agreement found between the results of the cytogenetic and immuno phenotype and morphology assay was insignificant by kappa index (0.151), considering only the presence of t(8;21) translocation as the main chromosomal anomaly found in AML M2. It must be take in account that this finding is not exclusive, neither unique for this kind of disease; it could be found also another chromosomal alterations or even normal cariotypes.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Dentro de las enfermedades virales que afectan a los gatos, las dos más importantes son la leucemia viral felina y la inmunodeficiencia viral felina. Ambas son capaces de generar alteraciones del sistema inmune y serían la principal causa de morbilidad y mortalidad en los gatos. En esta Memoria de Título, se hace una descripción epidemiológica de los gatos positivos para el virus leucemia felina (ViLeF) y virus inmunodeficiencia felina (VIF) diagnosticados en los Hospitales Clínicos Veterinarios de la Universidad de Chile, durante el período Marzo 2002 a Marzo 2004. Las unidades en estudio fueron 352 fichas clínicas de gatos muestreados antes de ser vacunados o sospechosos clínicos de la infección retroviral; de las cuales, 31 fichas fueron eliminadas por carecer de todos los antecedentes que se querían evaluar. Las variables epidemiológicas consideradas fueron: sexo, estado reproductivo, edad, estado de salud, tipo de residencia, total de gatos en el hogar y estacionalidad. La prueba diagnóstica utilizada fue Speed  DUO (Laboratorio BVT), basada en la técnica de inmunocromatografía en membrana, que detecta el antígeno capsular p27 del virus leucemia felina y el anticuerpo contra la proteína gp40 del virus inmunodeficiencia felina. Del total final de 321 fichas estudiadas un 19,94% fue positivo a ViLeF, 15,58% fue positivo a VIF y 4,98% resultó positivo a ambos virus. En lo referente a las variables epidemiológicas; en los animales positivos a ViLeF la diferencia entre el grupo etario de menores o iguales a 12 meses comparado con el resto fue significativa (p≤0,05), con un 11,83% y un 23,18% respectivamente. También se encontraron diferencias estadísticamente significativas (p≤0,05) según el estado de salud, con un 22,98% en gatos clínicamente enfermos y 7,89% en los clínicamente sanos. En los animales positivos a VIF se encontraron diferencias estadísticamente significativas (p≤0,05) según el sexo, edad y tipo de residencia. Se obtuvo un 25,85% para los machos y un 6,90% para las hembras. De acuerdo a la edad resultaron positivos; 8,6% de los gatos de 12 meses o menores, 12,09% entre 13 y 36 meses de edad, 27,14% entre 37 y 72 meses de edad y 20,34% en los mayores a 72 meses de edad y según el tipo de residencia; de los individuos que vivían en casa un 18,8% fue positivo y de los que vivían en departamento un 6,98%

Memoria para optar al título de Bioquímico / En la actualidad, la postergación de la maternidad, se ha vuelto una tendencia cada vez más preponderante en las mujeres. Esto debido al mayor acceso a la educación, oportunidades laborales y métodos para el control de la natalidad. Por consiguiente, cuando la mujer decide ser madre más allá de los 30 años de edad, ya se aproxima al periodo de subfertilidad, etapa en donde la reserva folicular ovárica disminuye considerablemente, al igual que las probabilidades de éxito de un embarazo. Por lo anterior, es que ha tomado gran importancia el estudio del funcionamiento ovárico durante el envejecimiento reproductivo y de los factores involucrados en dicho proceso. En la regulación del desarrollo folicular, participan una pluralidad de factores destinados a controlar cada etapa. En la última década, ha tomado especial protagonismo una citoquina denominada Factor Inhibidor de Leucemia (LIF), conocida ampliamente en el ámbito reproductivo por ser de vital importancia en el proceso de implantación uterina y, además, por participar en el desarrollo folicular ovárico, promoviendo la transición de folículos primordiales a primarios en rata y favoreciendo el proceso ovulatorio en primates. Sin embargo, se cree que sus acciones se encontrarían bajo la regulación de Kisspeptina (KP), un neuropéptido clave en el control del eje Hipotálamo-Pituitaria-Gónadas (HPG). De ser así, esto cobraría aún mayor importancia durante el periodo de subfertilidad, etapa en la que se ha demostrado que ocurre un aumento significativo en los niveles de expresión de KP en el ovario. Tomando en cuenta estos antecedentes, se postuló que “KP induce la expresión de LIF en ovario de rata durante el período de subfertilidad”. El objetivo general del presente trabajo consistió en determinar la expresión de LIF en ovarios de ratas Sprague Dawley en los periodos fértil y subfértil y estudiar los efectos de la adición de KP sobre la expresión de LIF durante ambos periodos. Los resultados muestran que: 1) los niveles de mRNA de LIF en el ovario no varían durante el envejecimiento reproductivo; 2) los niveles de proteína de LIF se encuentran aumentados durante el período fértil; y 3) la adición de KP produce un aumento en el contenido proteico intraovárico de LIF durante el periodo fértil, sugiriendo una posible regulación de KP sobre LIF en este estadio. Por consiguiente, los resultados obtenidos no avalan la hipótesis planteada puesto que el tratamiento de los ovarios con KP no tuvo efecto sobre la expresión de LIF durante el periodo subfértil. Sin embargo, los resultados sugieren que KP participa en la regulación de LIF en el periodo fértil / At present, the postponement of maternity has become an increasingly preponderant trend in women. This is due to the increased access to education, job opportunities and methods for birth control. Therefore, when women decide to become mothers beyond the age of 30, they are approaching the period of subfertility, a stage in which the ovarian follicular reserve decreases considerably, as well as the probabilities of a successful pregnancy. Due to the above, the study of ovarian function during reproductive aging and the factors involved in this process has taken great importance. In the regulation of follicular development, a plurality of factors are involved in controlling each stage. In the last decade, the Leukaemia Inhibitory Factor (LIF) has played a prominent role, a cytokine widely known in the reproductive field by its role in the uterine implantation process and, in addition, by its participation in ovarian follicular development, promoting the transition from primordial to primary follicles in rat and favoring the ovulatory process in primates. Nevertheless, it is thought that their actions would be under the regulation of Kisspeptin (KP), a key neuropeptide in the control of the Hypothalamus-Pituitary-Gonads (HPG) axis. If so, this would be even more important during the subfertility period, a stage in which it has been shown to occur a significant increase in KP expression levels in the ovary. Considering this background, it was postulated that, "KP induces LIF expression in the rat ovary during the subfertility period". The main objective of the present work was to determine the expression of LIF in ovaries of fertile and subfertile Sprague Dawley rats and to study the effects of the addition of KP on the expression of LIF during both periods. Our results revealed that: 1) LIF mRNA levels in the ovary did not change during reproductive aging; 2) LIF protein levels were increased during the fertile period; and 3) the addition of KP in an in vitro system, produces an increase in the intraovarian protein content of LIF during the fertile period. These data suggest a possible regulation of LIF by KP during this stage of development. Therefore, we concluded that the results obtained do not support the hypothesis of a stimulatory role of KP on LIF expression, since the treatment of the ovaries with KP did not affect the expression of LIF during the subfertile period. Nevertheless, our results suggest that KP may participate in the regulation of LIF expression during the fertile period

O câncer é a segunda causa de morte no mundo sendo a quimioterapia parte fundamental no tratamento, constituindo-se muitas vezes na única opção de cura para os pacientes. Entretanto, progressão de doença e morte ainda são problemas resultantes de resistência intrínseca e adquirida às drogas. Com o intuito de melhorar a resposta aos tratamentos e a sobrevida dos indivíduos, sistemas de avaliação de resposta a drogas vêm sendo testados para determinar a potencial atividade das drogas antes da sua administração aos pacientes. O ChemoBiogram é o primeiro kit para avaliação de quimiorresistencia in vitro, buscando solucionar problemas de manipulação de quimioterápicos e degradação e extravio de amostras. Desta forma, o objetivo geral deste trabalho é avaliar a quimiorresistência em leucemias agudas, utilizando como ferramenta o kit. Para isso foi avaliada a integridade e ação biológica das drogas sobre células leucêmicas utilizando linhagens celulares de LLA e LMA, assim como em cultivos primários a partir de amostras de medula óssea. Os padrões dos fármacos de interesse foram padronizados por HPLC e tiveram seu IC50 determinado utilizando as linhagens HL60 e Jurkat. As drogas foram liofilizadas em diferentes doses na placa de 96 poços. A estabilidade do kit foi analisada ao longo dos meses, atingindo até seis meses de integridade para todas as drogas. Para a avaliação da ação biológica as linhagens HL60 e Jurkat foram cultivadas em meio RPMI 1640 e mantidas em condições padrões. A viabilidade celular foi avaliada pelo método de azul de Tripan, citometria de fluxo e agentes colorimétricos, sendo o cortante CellTiter 96 o mais eficiente para aplicação no modelo proposto. Os resultados demonstram confiabilidade quanto à estabilidade e reprodutibilidade dos efeitos citotóxicos das drogas testadas. A aplicação do teste in vitro em culturas primárias apresentaram importante correlação clínica quanto à resposta aos tratamentos administrados. / Cancer is the second death cause in the world. Despite chemotherapy is an essencial part of the treatment as well as in many times the only option of cure for the patients, disease progression and death are still resultants problems from the intrinsinc and acquired drug resistance. In order to improve the response to treatments and individuals survival, several studies have evaluated different response systems to the drugs to determine the potential drug activity before their administration to the patients. In an attempt to solve manipulation problems of chemotherapeutics and degradation of samples, we developed ChemoBiogram that is the first in vitro chemoresistance assay for evaluation in a kit format. Thus, the general aim of this work is to validate the test for chemoresistance evaluation in acute leukemias, by confirming the integrity and biological action of the drugs on cell lines of ALL and AML, as well as in primary cultures from bone marrow samples. The drugs standards of interest were standardized by HPLC and the IC50 was determined using HL60 and Jurkat cell lines. After standardization and determination of the doses the drugs were lyophilized in two different concentrations in the 96-well plate. The stability of the kit was analyzed over the months, reaching even nine month of integrity for all drugs. To assess biological action, the HL60 and Jurkat cell lines were cultured in RPMI 1640 and keep under standard conditions. The cell viability was evaluated by the trypan blue exclusion method, flow cytometry and colorimetric agent with the CellTiter 96 as an efficient standard for kit application. The results demonstrated reliability regarding stability and reproducibility of the cytotoxic effects of tested drugs. The application of the ChemoBiogram kit in primary cultures presented an important clinical correlation regarding the response of administered treatments.