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Participação do fator inibidor da migração de macrófagos (MIF) no processo inflamatório pulmonar induzido por sílica em camundongosGallois, Kene Dique January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-01-16 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A silicose é a pneumoconiose de maior prevalência no Brasil
partículas de sílica cristalina, sendo caracteriza
colágeno e formação de granulomas,
mediadores. O fator inibidor
inflamatória atuante em diferentes tipos de patologias, sendo importante em respostas imunes
e nos mecanismos decorrentes do dano tecidual.
do MIF no modelo experimental de silicose murina.
MIF “knockout” (MIF-/-) foram submetidos à instilação
as análises realizadas 7 (fase aguda) e 28 dias (fase crônica) pós
existência de um aumento significativo no número de leucócitos totais
broncoalveolar de camundongos silicóticos
de células mononucleares
elevado por pelo menos 28 dias.
infiltrado de células inflamatórias 7 dias pós
fibrótica com formação de granuloma
camundongos silicóticos exibiram um aumento na deposição de colágeno nos pulmões
quando comparados aos controle
quimiocinas MIP-1 MIPtempos
analisados. Esse fenômeno apresentou correlação direta com o quadro de
comprometimento da função pulmonar (aumento de resistência e elastância) e de
hiperreatividade das vias aéreas ao agente broncoconstrictor metacolina.
MIF-/- sílica apresentaram, ainda,
paralelo a um menor infiltrado leucocitário, expressão diminuída
menor proporção dos granulomas, acompanhado por redução da resposta de hiperreatividade
das vias aéreas. Em contraste, foi verificado processo exacerbado de granulomas no pulmão
dos camundongos sílica MIF
área tecidual ocupada por granulomas
TNF- e TGF- , quando comparados ao
detectada, na fase crônica da doença, uma expres
camundongos sílica MIF-/-, refletindo a presença de miofibroblastos
camundongos silicóticos tratados com anticorpo neutralizante anti
comprometimento da função pulmonar e alteraçõe
reduzidos, indicando a participação do MIF como mediador pró
silicose. Em conclusão, nossos resultados indicam que o MIF coloca
atuante na modulação do quadro silicótico, c
terapêutica no caso da doença humana. / Silicosis is the pneumoconiosis of highest prevalence in Brazil and is
of crystalline silica particles, being characterized by
granuloma formation, in a way dependent on a wide range of mediato
migration inhibitory factor (MIF)
several inflammatory diseases
to investigate the potential role of MIF in a model of
(BALB/c) and MIF knockout
the analyses made on day 7 (acute phase) and 28 (chronic phase).
increase in the number of total l
mice, on day 7 after silicosis induction
mononuclear cells and neutrophil
least 28 days. Tissue analyses
day 7, followed by fibrotic response
day 28. We also noted that silicotic mice exhibited an increase in
a marked increase in the levels of MIP
increase in the levels of fibrogenic cytokines TNF
These phenomena directly correlated
resistance and elastance) and
MIF-/- silicotic mice showed
hyperreactivity to methacholine
of MIP-1 and MIP-2 and F4/80 expression and granuloma area
phase, a marked increased in granuloma tissue area
compared to WT mice, together with lower collagen deposition and
and TGF- . An increase in the expression of
also noted. When silicotic mice were treated with anti
the reduced pulmonary function and tissue damage were noted, indicating a role for MIF as a
proinflammatory mediator in silicosis. In conclusion, our results
to play a relevant modulatory role in
as a potential therapeutic target in human disease.
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Indução diferencial das vias MyD88 e TRIF-dependentes em leucócitos totais de equinos estimulados com LPS de E. coli / Diferencial induction of MyD88 and TRIF-dependent pathway in equine leukocytes stimulated with LPS from E. coliDalmagro, Priscila [UNESP] 01 February 2016 (has links)
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TESE DE DOUTORADO PRISCILA DALMAGRO - FMVA.pdf: 1395003 bytes, checksum: 7cf46631afb2b9992d84269869e9aa10 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-02-05T12:33:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016-02-01 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A resposta imune inata é a principal responsável pela defesa do hospedeiro contra endotoxinas de bactérias Gram-negativas. Tal resposta se dá através dos receptores Toll-like-4 e -2, seja pela via MyD88–dependente, TRIF-dependente ou ambas. Entretanto, uma resposta exagerada pode resultar em muitos danos para o organismo e levar até mesmo ao choque séptico. Uma das formas de controle desta resposta se dá através da tolerância à endotoxina (TE). Por isso o presentes estudo tem por objetivo investigar a indução diferencial dos receptores TLR-4 e 2, suas vias de sinalização MyD88 e TRIF-dependentes e avaliar outros possíveis genes relacionados a estas vias após indução da TE. Foi coletado sangue total de cavalos saudáveis (n=6), o qual foram estimulados com diferentes doses (0, 1 ou 10ng de LSP/mL) LPS de E.coli no momento 0 e 4 horas após o primeiro estímulo e 4 horas após o segundo estímulo. O “pool” (n=6) de RNA das amostras, coletado 0, 2, 4 e 8 horas, foi utilizado para a transcrição do cDNA. A hibridização do cDNA marcado com Cy-3 foi realizada em uma lâmina 4x44 contendo sequências específicas da espécie equina. Foi identificado durante a TE, nas diferentes doses de LPS, um aumento de transcritos dos receptores TLR-4 e -2, TNFAIP3 e IL-10 e uma diminuição de outros transcritos de genes importantes, tais como: MyD88, IL1-B, TNF-a, TRAM2, o que caracteriza e esclarece, de certa forma, as alterações na sinalização do TLR nas condições de tolerância à endotoxina. / The innate immune response is the main responsible for the host's defense against endotoxins from Gram-negative bacteria. Such response occurs via Toll-like-4 and -2 receptors, MyD88–dependent pathway, TRIF-dependent pathway or both. However, an exaggerated reponse can induce many damages to the organism, including septic shock. One way to control this exacerbated response is through endotoxin tolerance (ET). The goals of the present study were to investigate TLR-4 and 2 receptors, their signaling through MyD88 e TRIF-dependent pathways and evaluate other possible genes related to this ways after ET induction. Blood samples were collected from healthy horses (n=6) which were stimulated with different doses (0, 1 or 10ng of LSP/mL) of LPS from E.coli, for 0 and 4 hours after the first stimulus and 4 hours after second stimulus. The pool (n=6) of RNA, extracted from the samples collected at 0, 2, 4 e 8 hours, was used for the transcription of the cDNA. The hybridization of the cDNA marked with Cy-3 was done in one slide 4x44 containing specific sequences from the equine species. We identified during the ET, on the different doses of LPS, an increase of transcripts for the receptors TLR-4 and -2, TNFAIP3 and Il-10 and a reduction of transcripts of other important genes, such as: MyD88, IL1-B, TNF-a, TRAM2, what characterizes and enlightens the changes in TLR signaling during endotoxin tolerance. / FAPESP: 2010/34567-8
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Indução diferencial das vias MyD88 e TRIF-dependentes em leucócitos totais de equinos estimulados com LPS de E. coli /Dalmagro, Priscila. January 2016 (has links)
Orientador: Juliana Regina Peiró / Coorientador: Sérgio Ribeiro Aoki / Banca:Lina Maria Wehrle Gomide / Banca: Flávia Lombardi Lopes / Banca:José Paes de Oliveira Filho / Banca:Glenda Nicioli da Silva / Resumo: A resposta imune inata é a principal responsável pela defesa do hospedeiro contra endotoxinas de bactérias Gram-negativas. Tal resposta se dá através dos receptores Toll-like-4 e -2, seja pela via MyD88-dependente, TRIF-dependente ou ambas. Entretanto, uma resposta exagerada pode resultar em muitos danos para o organismo e levar até mesmo ao choque séptico. Uma das formas de controle desta resposta se dá através da tolerância à endotoxina (TE). Por isso o presentes estudo tem por objetivo investigar a indução diferencial dos receptores TLR-4 e 2, suas vias de sinalização MyD88 e TRIF-dependentes e avaliar outros possíveis genes relacionados a estas vias após indução da TE. Foi coletado sangue total de cavalos saudáveis (n=6), o qual foram estimulados com diferentes doses (0, 1 ou 10ng de LSP/mL) LPS de E.coli no momento 0 e 4 horas após o primeiro estímulo e 4 horas após o segundo estímulo. O "pool" (n=6) de RNA das amostras, coletado 0, 2, 4 e 8 horas, foi utilizado para a transcrição do cDNA. A hibridização do cDNA marcado com Cy-3 foi realizada em uma lâmina 4x44 contendo sequências específicas da espécie equina. Foi identificado durante a TE, nas diferentes doses de LPS, um aumento de transcritos dos receptores TLR-4 e -2, TNFAIP3 e IL-10 e uma diminuição de outros transcritos de genes importantes, tais como: MyD88, IL1-B, TNF-a, TRAM2, o que caracteriza e esclarece, de certa forma, as alterações na sinalização do TLR nas condições de tolerância à endotoxina. / Abstract: The innate immune response is the main responsible for the host's defense against endotoxins from Gram-negative bacteria. Such response occurs via Toll-like-4 and -2 receptors, MyD88-dependent pathway, TRIF-dependent pathway or both. However, an exaggerated reponse can induce many damages to the organism, including septic shock. One way to control this exacerbated response is through endotoxin tolerance (ET). The goals of the present study were to investigate TLR-4 and 2 receptors, their signaling through MyD88 e TRIF-dependent pathways and evaluate other possible genes related to this ways after ET induction. Blood samples were collected from healthy horses (n=6) which were stimulated with different doses (0, 1 or 10ng of LSP/mL) of LPS from E.coli, for 0 and 4 hours after the first stimulus and 4 hours after second stimulus. The pool (n=6) of RNA, extracted from the samples collected at 0, 2, 4 e 8 hours, was used for the transcription of the cDNA. The hybridization of the cDNA marked with Cy-3 was done in one slide 4x44 containing specific sequences from the equine species. We identified during the ET, on the different doses of LPS, an increase of transcripts for the receptors TLR-4 and -2, TNFAIP3 and Il-10 and a reduction of transcripts of other important genes, such as: MyD88, IL1-B, TNF-a, TRAM2, what characterizes and enlightens the changes in TLR signaling during endotoxin tolerance. / Doutor
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