A silicose é a formação de cicatrizes permanentes nos pulmões, provocadas pela inalação do pó de sílica (quartzo) existente na areia. A exposição à poeira respirável contendo sílica é comum entre os trabalhadores de minas, indústrias cerâmicas, os cortadores de arenito e de granito e também os operários de fundições de metais ferrosos e não ferrosos. Atualmente, as fundições reutilizam a areia, adicionando no processo de fundição, percentuais de 3% até 10% de areia nova. Com base em uma Intervenção Ergonômica, este trabalho aborda a avaliação ambiental da concentração de sílica (SiO2) em uma fundição de metais ferrosos da região metropolitana da grande Porto Alegre, com o objetivo de quantificá-la e compará-la com os limites de tolerância (LT) recomendados. Foram obtidas amostras de poeira respirável junto aos trabalhadores, conforme grupo homogêneo de trabalho, utilizando bomba de amostragem de uso individual, ciclone Door-Oliver e filtro de membrana de PVC. Para quantificação da sílica na amostra coletada foi utilizada a técnica da espectrometria de difração de Raios X. Os resultados obtidos indicaram que a exposição à poeira contendo sílica, nas condições de trabalho analisadas, apresenta-se com valores de exposição aceitável segundo as normas nacionais e internacionais.

HOLANDA, Márcia Alcântara. Silicose em cavadores de poços da região da Ibiapaba : papel da intervenção educativa no controle da doença. 1998. 201 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 1998. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-29T11:57:49Z No. of bitstreams: 1 1998_dis_maholanda.pdf: 14146338 bytes, checksum: fe64b9d8959243bf80b139db970759ef (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-29T13:22:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 1998_dis_maholanda.pdf: 14146338 bytes, checksum: fe64b9d8959243bf80b139db970759ef (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-29T13:22:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1998_dis_maholanda.pdf: 14146338 bytes, checksum: fe64b9d8959243bf80b139db970759ef (MD5) Previous issue date: 1998 / Silicosis affects pit diggers in the lbiapaba Mountain Range (IMR). They are men with a mean age of 39. The circumstances that favors the pit digging activities are: 1) lack of natural water sources in the IMR 2) long periods of drought 3) lack of water supply to the population from the local water reservoir 4) lack of alternatives jobs for those men 5) governmental measures with incentives in emergency programs which encourage the manual pit digging activities in an attempt to curb the drought effects. The pit diggers who acquired silicosis had less than 10 years of silica exposure. Most of them became sick after 391,4 days of activity. A primary educational intervention was implemented to a total number of 687 pit diggers in five cities of IMR in intend to prevent silicosis. The Paulo Freire’s educational method was used it was applied to the pit diggers to make them learn about the disease and the sickening process, including how to prevent it. The pit diggers actively participated in the educational program content. This was done by person to person contact among health workers and pit diggers; by group reunions and by large popular communications. In the present study, 283 of the 687 pit diggers answered a questionary in order to evaluate the effects of the educational program on the pit diggers learning about the disease and on the pit digging activities. One hundred fifteen (40,6%) of the pit diggers known they had silicosis, 122 (43,1%) known they did not have silicosis and 46 (16,3%) did not know their diagnosis. The results indicated that the educational program was important to control the disease. The majority of the pit diggers, 277 (98,9%) believed that digging pits was related to getting silicosis This believing was not different among silicotics or non-silicotics (p=0,362). Two hundred seventy one (958%) pit diggers learned that the rock dust causes silicosis and 221 (78,1%) learned that silicosis is acquired by digging pits. The pit diggers said that person to person contact was the best way to learn about silicosis. Most of them, 241 (85,8%) interrupted digging activities. This attitude was influenced by the knowledge of their diagnosis. It was more frequent if they known they had silicosis (p=0,001). The most relevant motive to stop digging was the knowledge about the presence of the silicosis among the diggers 211 (89,1%). There was an association between stopping digging and being diagnosed as silicotic (p=0,034). Nevertheless, 174 (77,7%) wished to change theirjob activity. This was not related to their health status (p=0,831). The pit diggers who did not assimilated the educational program or did not change their attitude regarding pit digging consisted a minority. They did not realize their problem and they need further attention to assimilate an educational intervention / A silicose em cavadores de poços da Região da lbiapaba é uma entidade nosológica ocupacional adquirida por homens com idade média de 39 anos, cujas razões para cavar poços de modo artesanal são: 1) ausência de fontes naturais de água na RI; 2) existência de longos períodos de estiagem; 3) falta de distribuição democrática da água existente no reservatório da RI; 4) falta de alternativa de ocupação para o ganho por parte desses homens; 5) estímulo à escavação manual de poços pelas frentes de serviço dos planos emergenciais de combate aos efeitos da seca. Os cavadores acometidos adoecem em menos de 10 anos de exposição à poeira podendo vir a adoecer em apenas 391,4 dias de atividade. Para prevenir a silicose, foi aplicada à população de 687 cavadores de cinco municípios da RI uma intervenção educativa primária conforme o método Paulo Freire, para o aprendizado sobre o que é a doença, como e por que os cavadores de poços a contraem e como podem evitá-la. O conteúdo educativo do programa foi criado e repassado com a participação ativa dos educandos, tendo sido feito de pessoa a pessoa, pelos profissionais de saúde e cavadores; através de reunião de grupo e da comunicação de massa. No presente estudo, 283 cavadores dos 687 beneficiados com a intervenção responderam a um questionário para se conhecer o papel dessa intervenção no conhecimento dos cavadores sobre a silicose e na atividade de cavar. Cento e quinze (40,6%) eram silicóticos, 122 (43,1%) eram não silicóticos e 46 (16,3%) não sabiam do seu diagnóstico. Os resultados obtidos indicaram que as medidas educativas aplicadas aos cavadores de poços tiveram importante papel no controle da doença. A maioria dos cavadores, 277 (98,9%), acredita que a atividade de cavar poços trás doença. Não houve relação entre a crença e o estado de saúde dos cavadores, (p= 0,362). Duzentos e setenta e um cavadores (95,8%) aprenderam que é o pó da pedra o causador da silicose e 221 (78,1%) disseram que se adquire a doença cavando poços. Com relação à melhor maneira de aprender sobre a silicose, os cavadores disseram que foi através de intervenção feita de pessoa a pessoa. A imensa maioria dos cavadores 241 (85,8%) interrompeu a atividade de cavar e o fato de serem silicóticos influenciou de modo significativo a interrupção da atividade (p=0,001). O principal motivo para interromperem a atividade de cavar foi a silicose 211 (89,1%). A relação entre o motivo para parar de cavar e o fato de serem portadores de silicose foi significativa: p=0,034. Entretanto, o desejo de mudar de atividade foi expresso pela maioria 174 (77,7%) e não sofreu influência do estado de saúde dos cavadores, (p=0,831). A minoria que não assimilou o conteúdo educativo sobre a silicose ou que não mudou de atitude quanto à atividade de cavar poços, não se conscientizou da realidade e precisa receber atenções no sentido de alcançarem essa conscientização.

A silicose é a formação de cicatrizes permanentes nos pulmões, provocadas pela inalação do pó de sílica (quartzo) existente na areia. A exposição à poeira respirável contendo sílica é comum entre os trabalhadores de minas, indústrias cerâmicas, os cortadores de arenito e de granito e também os operários de fundições de metais ferrosos e não ferrosos. Atualmente, as fundições reutilizam a areia, adicionando no processo de fundição, percentuais de 3% até 10% de areia nova. Com base em uma Intervenção Ergonômica, este trabalho aborda a avaliação ambiental da concentração de sílica (SiO2) em uma fundição de metais ferrosos da região metropolitana da grande Porto Alegre, com o objetivo de quantificá-la e compará-la com os limites de tolerância (LT) recomendados. Foram obtidas amostras de poeira respirável junto aos trabalhadores, conforme grupo homogêneo de trabalho, utilizando bomba de amostragem de uso individual, ciclone Door-Oliver e filtro de membrana de PVC. Para quantificação da sílica na amostra coletada foi utilizada a técnica da espectrometria de difração de Raios X. Os resultados obtidos indicaram que a exposição à poeira contendo sílica, nas condições de trabalho analisadas, apresenta-se com valores de exposição aceitável segundo as normas nacionais e internacionais.

A silicose é a formação de cicatrizes permanentes nos pulmões, provocadas pela inalação do pó de sílica (quartzo) existente na areia. A exposição à poeira respirável contendo sílica é comum entre os trabalhadores de minas, indústrias cerâmicas, os cortadores de arenito e de granito e também os operários de fundições de metais ferrosos e não ferrosos. Atualmente, as fundições reutilizam a areia, adicionando no processo de fundição, percentuais de 3% até 10% de areia nova. Com base em uma Intervenção Ergonômica, este trabalho aborda a avaliação ambiental da concentração de sílica (SiO2) em uma fundição de metais ferrosos da região metropolitana da grande Porto Alegre, com o objetivo de quantificá-la e compará-la com os limites de tolerância (LT) recomendados. Foram obtidas amostras de poeira respirável junto aos trabalhadores, conforme grupo homogêneo de trabalho, utilizando bomba de amostragem de uso individual, ciclone Door-Oliver e filtro de membrana de PVC. Para quantificação da sílica na amostra coletada foi utilizada a técnica da espectrometria de difração de Raios X. Os resultados obtidos indicaram que a exposição à poeira contendo sílica, nas condições de trabalho analisadas, apresenta-se com valores de exposição aceitável segundo as normas nacionais e internacionais.

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-10-01T22:07:36Z No. of bitstreams: 1 Andressa Moraes Guimarães da Silva.pdf: 6335373 bytes, checksum: a2c35eb3696b4a81ce4e63f9767befbf (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-01T22:07:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andressa Moraes Guimarães da Silva.pdf: 6335373 bytes, checksum: a2c35eb3696b4a81ce4e63f9767befbf (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A silicose é uma doença pulmonar, de caráter restritivo, causada pela inalação de partículas de sílica cristalina. Se caracteriza pela indução de uma inflamação crônica associada à intensa proliferação de fibroblastos e acúmulo exacerbado de componentes de matriz extracelular, e para a qual não há um tratamento eficaz. Os fibroblastos são considerados alvos cruciais em doenças de natureza fibrótica e o desenvolvimento de sistemas que permitam avaliar a reatividade destas células é de fundamental importância na busca por terapias anti-fibróticas. No presente estudo foi desenvolvido um sistema de cultura primária em 3D (esferóides), utilizando fibroblastos provenientes do pulmão de camundongos normais e silicóticos objetivando analisar comparativamente os aspectos morfológicos/funcionais de ambas as populações celulares. Os fibroblastos foram obtidos a partir da dissociação mecânica/enzimática dos pulmões de camundongos Swiss-Webster 7 dias após a instilação intranasal de salina (controle) ou sílica (10 mg/animal). Após a terceira passagem, as células foram cultivadas em placas de 96 poços, revestidas com agarose, na ausência ou presença de IL-13 (40 ng/mL), sendo os esferóides avaliados quanto a aspectos morfológicos (tamanho/diâmetro médio/constituição), e funcionais tais como: proliferação, produção de citocinas (TGF-b e quimiocinas (MCP-1)) e de colágeno. Através da análise por microscopia de luz invertida, verificamos que os esferóides contendo fibroblastos de animais normais e silicóticos mostraram progressiva diminuição do tamanho/diâmetro, e maior densidade, ao longo do tempo analisado (1 – 4 dias), com os silicóticos apresentando valores sempre superiores aos dos controles. A estimulação com IL-13 induziu claro aumento de tamanho/diâmetro em ambas as populações de esferóides. A análise por microscopia eletrônica de varredura (MEV) revelou haver diferenças morfológicas importantes entre os grupos normal e silicótico, no que tange ao formato e à constituição celular, com expressivo aumento no conteúdo de matriz extracelular detectado na condição de estimulação com IL-13. De forma interessante, foi observado que os esferóides silicóticos apresentaram níveis basais aumentados de proliferação celular e secreção de TGF-b, assim como de colágeno, em comparação aos dos controles. Tanto esferóides normais quanto silicóticos foram sensíveis à estimulação com IL-13, sendo verificado aumento equivalente na taxa de proliferação e nos níveis de TGF-b e MCP-1 em ambos os grupos. No que tange a produção de colágeno, os esferóides normais mostraram-se responsivos à IL-13 enquanto os silicóticos não. Em conjunto, nossos achados mostraram que os fibroblastos pulmonares de camundongos adultos são: (i) passíveis de serem cultivados em sistema de cultura 3D; (ii) responsivos à estimulação com IL-13 e que; (iii) os esferóides silicóticos apresentam características de ativação em comparação aos normais. Além disso, este modelo mostrou-se reprodutível e promissor quanto a possibilidade de utilização futura na busca por compostos com atividade antifibrótica. / Silicosis is a restrictive pulmonary disease caused by inhalation of crystalline silica particles, which is characterized by chronic inflammation associated with intense fibroblast proliferation and exacerbated accumulation of extracellular matrix components. There is no effective treatment for this disease. Fibroblasts are considered crucial cells in fibrosis, and the development of systems which lead to evaluate their reactivity is important in the search for anti-fibrotic therapy. In this study we aimed to establish a system of primary cell culture in 3D (spheroids) using lung fibroblasts from normal and silicosis mice, in order to perform a comparative analysis of morphological/functional aspects of both cell populations. Fibroblasts were obtained after mechanical/enzymatic dissociation of the lung tissue from Swiss- Webster mice, 7 days after intranasal instillation of saline (control) or silica (10 mg / animal). After the third passage, the cells were cultured in 96-well plates coated with agarose, in the absence or presence of IL-13 (40 ng/ml) and the spheroids were evaluated regarding the morphological (size/diameter/constitution) and functional parameters (proliferation and generation of cytokine (TGF-b), chemokine (MCP-1) and collagen. By means of inverted light microscopy, we noted that spheroids containing fibroblasts from normal and silicotic animals showed a progressive reduction in size/ diameter and increase in density when analyzed for 1 - 4 days of culture. Those from silicotic mice showed themselves bigger as compared to controls. Stimulation with IL-13 induced an increase in size/diameter of both cell populations. The analysis by scanning electron microscopy (SEM) revealed significant morphological differences between normal and silicotic groups, with a significant increase in the content of extracellular matrix being detected under condition of stimulation with IL-13. Interestingly, we observed that spheroids with cells from silicotic mice showed increased basal levels of cell proliferation and secretion of TGF-b and collagen as compared to the controls. Both spheroid populations were sensitive to IL-13 stimulation as attested by increased cell proliferation as well as TGF-b and MCP-1 levels. Increased collagen production was detected only in the case of normal cells. Altogether, our findings show that adult mouse lung fibroblasts grow in a 3D culture system, that they are responsive to IL-13 stimulation and that those from silicotic mice showed an activated phenotype as compared to the controls. Thus, this experimental model seems to be reproducible and promising in the case of searching for anti-fibrotic compounds.

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-10-03T12:12:48Z No. of bitstreams: 1 THIAGO JOSÉ FIGUEIRA RAMOS.pdf: 1733228 bytes, checksum: c1606fa7a4e1569d3cc660ae62c32331 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-03T12:12:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 THIAGO JOSÉ FIGUEIRA RAMOS.pdf: 1733228 bytes, checksum: c1606fa7a4e1569d3cc660ae62c32331 (MD5) Previous issue date: 2012-10-10 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A silicose é uma doença ocupacional causada pela inalação de sílica em sua forma livre e cristalina. A inflamação e fibrose pulmonar constituem as principais características da patologia, que envolve uma variedade de mediadores inflamatórios, como o TNF-α, um mediador de ações amplas e que exerce seus efeitos em um grande número de tipos celulares. LASSBio-468 é um análogo da talidomida já descrito como capaz de modular a produção de TNF-α e inibir o choque endotóxico e artrite reumatóide em modelos animais. Neste estudo, nós investigamos o potencial efeito do LASSBio-468 em modelo de silicose experimental em camundongos. Animais Swiss-webster machos (18 – 20g) foram instilados intranasalmente com uma suspensão de sílica (10 mg/50 μL) e veículo (salina). O tratamento consistiu na administração por via oral de LASSBio-468 (12,5 – 100 mg/kg) e talidomida (50 mg/Kg) durante 7 dias consecutivos, do vigésimo primeiro ao vigésimo oitavo dia após a instilação de sílica. Foram analisadas a função pulmonar (resistência e elastância) e hiperreatividade das vias aéreas à aerolização de metacolina (3 – 27 mg/mL), através de pletismógrafo invasivo de corpo inteiro (Finepoint, Buxco System), além de análises morfológicas e morfométricas do tecido pulmonar. A produção de colágeno tecidual foi acessada pelo método de sircol, enquanto que a quantificação de citocinas/quimiocinas foi realizada pelo ensaio de ELISA. A técnica de imunohistoquímica permitiu a identificação da população de miofibroblastos no pulmão. Através de uma digestão mecânica e enzimática do tecido pulmonar, obtivemos uma cultura primária de miofibroblastos que, assim como macrófagos alveolares AMJ2C11 e células epiteliais A549, foram pré-tratados com diferentes concentrações de LASSBio-468 e talidomida, estimulados com IL-13 ou sílica e avaliados quanto a proliferação celular, viabilidade e produção de mediadores inflamatórios in vitro. Demonstramos que animais silicóticos apresentaram níveis basais elevados de resistência pulmonar e elastância, bem como hiperreatividade frente à aerolização de metacolina. Resposta inflamatória tecidual, extensiva deposição de colágeno, formação de granuloma e produção de quimiocinas (KC and MCP-1) e citocinas (TNF- αand TGF-β) também foram detectadas em pulmões de animais silicóticos, assim como o aumento do número de miofibroblastos no tecido. O tratamento com LASSBio-468 reduziu o comprometimento da função pulmonar e hiperreatividade, formação de granulomas, expressão de miofibroblastos e deposição de colágeno no tecido pulmonar de animais doentes. Miofibroblastos oriundos de animais silicóticos apresentaram basal de proliferação superior, sendo responsivos também ao estímulo mitogênico da IL-13, que foi atenuado frente ao pré-tratamento com LASSBio-468. A estimulação de macrófagos alveolares e células epiteliais com sílica promoveu a liberação de TNF-α e IL-8, respectivamente, sendo o LASSBio-468 capaz de inibir de forma significativa esta produção. Em conjunto, nossos resultados mostraram que o tratamento com LASSBio-468 foi capaz de reduzir de forma curativa o comprometimento da função pulmonar e resposta granulomatosa, através de ações sobre células específicas, indicando que o composto em questão parece constituir uma promissora ferramenta para o tratamento de doenças pulmonares fibróticas crônicas como a silicose. / Silicosis, one of the oldest occupational diseases in the world, is a consequence of long-term exposure to inhaled dust containing silica in its free and crystalline form. Lung interstitial inflammation and fibrosis are the main features of the disease, involving a wide range of chemical mediators such as TNF-α. This is a pleiotropic molecule which exerts its effects on many cell types. LASSBio-468 is a thalidomide analogue which modulates TNF-α production and inhibits endotoxic shock and arthritis in animal models. In this study we investigated the effect of LASSBio-468 on experimental silicosis in mice. Anesthetized male Swiss-Webster mice (18-20g) received intranasal (i.n.) instillation of silica (10 mg/50 μL) and vehicle (saline). Treatment consisted of oral administration of the LASSBio-468 (12,5 - 100 mg/kg) and thalidomide (50 mg/Kg) during 7 consecutive days, from day 21 to 28 post-silica. The analyses included lung function (resistance and elastance) and airways hyperreactivity to aerosolized metacholine (3 -27 mg/mL) measured by whole body invasive plestimography (Finepoint, Buxco System). Morphological and morphometrical analyses included classical dyes such as Hematoxylin-Eosin and Picrus-Sirius. Collagen content and cytokine/chemokine generation were quantified by Sircol technique and ELISA, respectively. Immunohistochemistry was employed to identify the lung myofibroblastic population. Primary murine myofibroblasts cells were obtained after a mechanical and enzymatic digestion of the lung from saline and silicotic mice. Myofibroblasts, AMJ2C11 alveolar macrophages and A549 epithelial cells were pre-treated with LASSBio-468 and Thalidomide, stimulated with IL-13 or silica and evaluated thought proliferation, viability and production of inflammatory mediators in vitro. We showed that silicotic mice exhibited increased basal levels of lung resistance and elastance as well as airways hyperreactivity to methacholineaerosolization. Tissue inflammatory response, extensive collagen deposition, granuloma formation and chemokine (KC and MCP-1)/cytokine (TNF-α and TGF-β) generation were also detected in the silicotic lungs, as well as an increasing of myofibroblasts expression in the lung. Administration of LASSBio- 468 into silicotic mice reduced the decline lung function and airways hyperreactivity, myofibroblasts numbers, tissue collagen deposition and granulomatous area. The generation of cytokines and chemokines was also suppressed by the drug. The primary lung myofibroblasts obtained from silicotic mice showed a superior basal proliferation and IL-13, a pro-fibrotic cytokine, stimulated the (3H) incorporation in vitro, which was diminished by the treatment with LASSBio-468. Stimulation of alveolar macrophages and epithelial cells by silica in vitro increased the release of TNF-α and IL-8, respectively, and LASSBio-468 was able to reduce these inflammatory mediators production. The compound modulated key cells functions without decline in cell death. Altogether our findings show that the treatment of silicotic mice with LASSBio-468 reduced curatively the decline in lung function and granulomatous response, throught actions on myofibroblasts, macrophages and epithelial cells, indicating that this compound constitutes a promising tool for the treatment of chronic fibrotic pulmonary diseases such as silicosis.

Made available in DSpace on 2014-07-22T16:59:29Z (GMT). No. of bitstreams: 4 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 69443.pdf: 30039667 bytes, checksum: ea70e0586b05a80c835ac7c80af39f40 (MD5) 69443.pdf.txt: 241427 bytes, checksum: f07e61db23ac87c25bde0ad04a330533 (MD5) 69443.pdf.jpg: 1051 bytes, checksum: 770309c47ccfffe998bf7bbc0d635cc9 (MD5) Previous issue date: 2014-05-07 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, Brasil / A silicose é uma doença de caráter ocupacional, desencadeada pela inalação de partículas de sílica e associada à participação de uma ampla gama de mediadores. O TNF-\F061 é uma citocina pleiotrópica, que apresenta forma transmembranar (mTNF-\F061) e solúvel (sTNF-\F061), envolvidas em diversas doenças de caráter inflamatório. No presente estudo avaliamos o efeito de terapias neutralizantes de TNF-\F061, incluindo a inibição de geração com o composto talidomida, e o bloqueio da ação com o anticorpo infliximabe (Remicade®), no modelo de silicose experimental murina. Foi também testado o composto XPro 1595, um inibidor seletivo do sTNF-\F061. Camundongos Swiss-Webster apresentaram, 28 dias após instilação intranasal de sílica (10 mg), comprometimento da função pulmonar (aumento de resistência e elastância), além de hiper-reatividade à estimulação com metacolina. A análise morfológica e morfométrica revelou intenso infiltrado inflamatório com a presença de fibrose, incluindo aumento na deposição de colágeno e formação de granulomas dispersos no parênquima pulmonar. Vimos, também, aumento na produção de citocinas (TNF-\F061, INF-\F067, IL-1\F062, IL-6, TGF-\F062) e quimiocinas (MCP-1, MIP-1\F061 e MIP-2) no tecido pulmonar de camundongos silicóticos comparados aos animais controles. Aumento de células positivas para F4/80 e \F061- actina de músculo liso (\F061-SMA) foi detectado, indicando a presença de macrófagos e miofibroblastos, respectivamente, no pulmão dos animais silicóticos O tratamento terapêutico com talidomida (25 e 50 mg/kg, v.o.), infliximabe (1,25 mg/kg; i.p.), e com o composto XPro 1595 (10 mg/kg; i.p.), mostrou-se efetivo em reduzir parâmetros importantes do quadro silicótico tais como: i) comprometimento da função pulmonar (aumento de resistência e elastância); ii) componente inflamatório e fibrogênico (deposição de colágeno e formação de granuloma); iii) geração de citocinas inflamatórias/prófibróticas; e iv) presença de células positivas para F4/80 e \F061-SMA. De forma complementar, verificamos que o tratamento com infliximabe e com XPro 1595 foi também capaz de reduzir a ativação/translocação para o núcleo do fator de transcrição NF-\F06BB no pulmão de camundongos silicóticos. Em sistemas biológicos in vitro, vimos que macrófagos alveolares murinos (linhagem AMJ2C11) quando incubados com talidomida, infliximabe e XPro 1595 apresentaram diminuição da geração de TNF-\F061 frente à estimulação com sílica (300 \F06Dg/mL), sem alteração da taxa de viabilidade celular. No sistema de fibroblastos pulmonares, provenientes de camundongos silicóticos, houve redução da resposta proliferativa frente à estimulação com IL-13 (10 - 40 ng/mL) e TNF-\F061 (1 ng/mL) Os três compostos testados não apresentam efeito supressor sobre a produção de IL-8 por células epiteliais pulmonares (linhagem A549) estimuladas com IL-1\F062 (1 ng/mL). Tomados em conjunto, nossos resultados mostram que o tratamento de camundongos silicóticos com compostos neutralizantes da geração ou da ação do TNF-\F061 xii foram eficazes em inibir o comprometimento da função pulmonar e a resposta fibrogênica associadas ao quadro da silicose experimental murina, o que é indicativo de que o TNF-\F061 constitui um alvo terapêutico importante no contexto desta doença. Mais ainda, mostramos de maneira original que a forma solúvel do TNF-\F061 se coloca como de potencial relevância no que tange a terapia de doenças inflamatórias de caráter fibrótico como a silicose / Silicosis is an occupational disease, triggered by silica particle inhalation and is associated with a wide range of mediators. TNF- is a pleiotropic cytokine, which is presented as transmembrane (mTNF-) and soluble (sTNF-) forms, appearing to be involved in several diseases of inflammatory nature. In the present study we evaluated the effect of TNF-neutralizing therapies, including both inhibition of its generation by thalidomide and blockade of its action by the monoclonal antibody infliximab (Remicade®) on the experimental model of silicosis in mice. The selective inhibitor of sTNF- XPro 1595, was also tested. Swiss-Webster mice showed lung function failure (increased resistance and elastance) and hyperreactivity to methacholine aerosolization. Morphological and morphometric analyses revealed an intense inflammatory infiltrate and fibrosis, including increased collagen deposition and granulomas present spread in the lung parenchyma. Elevation in the levels of cytokines (TNF-, IFN-, IL-1, IL-6, TGF-) and chemokines (MCP-1, MIP-1 and MIP-2) in the lung tissue of silicotic mice was also detected as compared to controls. The number of positive cells for F4/80 and -smooth muscle actin (SMA) was shown to elevated in the lungs of silicotic mice, indicating the presence of macrophages and myofibroblasts, respectively. Therapeutic treatment with thalidomide (25 and 50 mg/kg, po), infliximab (1.25 mg/kg, ip) and compound XPro 1595 (10 mg/kg, ip) inhibited important parameters of silicosis such as: i) lung function impairment (increased resistance and elastance), ii) and inflammatory and fibrogenic components (collagen deposition and granuloma formation); iii) cytokine/chemokine generation and iv) presence of F4/80 and -SMA positive cells. In addition, we noted that infliximab and XPro 1595 were also able to reduce nucleus transcription factor NF-B activation/translocation in lung tissue of silicotic mice. We showed in vitro that murine alveolar macrophages (AMJ2C11 cell lineage) when incubated with thalidomide, infliximab and XPro 1595 responded with lower levels of TNF- after silica (300 g/mL) stimulation. No alteration of cell viability was noted. In the case of lung fibroblasts from silicotic mice, stimulated with IL-13 (10 - 40 ng/ml) and TNF- (1ng/ml), we showed that reduced proliferative response occurred after incubation with thalidomide, infliximab and XPro 1595. The three compounds have no effect on IL-8 production by human lung epithelial cells (A549) stimulated with silica (300 g/ml). Taken together, our findings show that treatment of silicotic mice with anti-TNF- therapy, either inhibiting its generation or blocking its activity, was effective to suppress ling function failure and fibrogenesis associated with murine experimental silicosis, which is an indicative that TNF- is an important therapeutic target in this disease. In addition, we showed for the first xiv time that the soluble TNF seems to be a potential therapeutic target in the case of lung fibrotic diseases such as silicosis.

Made available in DSpace on 2016-02-26T13:34:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 kene_gallois_ioc_mest_2009.pdf: 8919174 bytes, checksum: 5cb63a99e70a1503eb86db1086b275b0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A silicose é a pneumoconiose de maior prevalência no Brasil e resulta da exposição às partículas de sílica cristalina, sendo caracterizada por infiltrado inflamatório, deposição de colágeno e formação de granulomas, em um contexto dependente de uma gama de mediadores. O fator inibidor da migração de macrófagos (MIF) é uma citocina pró-inflamatória atuante em diferentes tipos de patologias, sendo importante em respostas imunes e nos mecanismos decorrentes do dano tecidual. Neste trabalho, investigamos a participação do MIF no moelo experimental de silicose murina. Camundongos \201Cwild-type\201D (BALB/c) e MIF \201Cknockout\201D (MIF-/-) foram submetidos à instilação intranasal com 10 mg de sílica, sendo as análises realizadas 7 (fase aguda) e 28 dias (fase crônica) pós-sílica. Verificamos a existência de um aumento significativo no número de leucócitos totais no lavado broncoalveolar de camundongos silicóticos em 7 dias. O mesmo perfil foi observado no caso de células mononucleares e neutrófilos, enquanto que o número destes últimos permaneceu elevado por pelo menos 28 dias. A análise tecidual revelou a presença de um intenso infiltrado de células inflamatórias 7 dias pós-sílica, seguido de progressão da resposta fibrótica com formação de granulomas peribronquiolares em 28 dias. Vimos, também, que os camundongos silicóticos exibiram um aumento na deposição de colágeno nos pulmões, quando comparados aos controles, juntamente com elevação significativa nos níveis das quimiocinas M IP-1\03B1 MIP-2 e das citocinas fibrogênicas TNF-\03B1 e TGF-\03B2, em ambos os tempos analisados. Esse fenômeno apresentou correlação direta com o quadro de comprometimento da função pulmonar (aumento de resistência e elastância) e de hiperreatividade das vias aéreas ao agente broncoconstrictor metacolina Os camundongos MIF-/- sílica apresentaram, ainda, na fase aguda, redução nos níveis de MIP-1\03B1 e MIP-2, em paralelo a um menor infiltrado leucocitário, expressão diminuída do marcador F4/80 e de menor proporção dos granulomas, acompanhado por redução da resposta de hiperreatividade das vias aéreas. Em contraste, foi verificado processo exacerbado de granulomas no pulmão dos camundongos sílica MIF-/- 28 dias pós-sílica, através da detecção de marcado aumento na área tecidual ocupada por granulomas, menor deposição de colágeno e níveis elevados de TNF-\03B1 e TGF-\03B2, quando comparados aos camundongos \201Cwild-type\201D. Além disso, foi detectada, na fase crônica da doença, uma expressão elevada de \03B1-SMA no pulmão de camundongos sílica MIF-/-, refletindo a presença de miofibroblastos. Observamos, ainda, que camundongos silicóticos tratados com anticorpo neutralizante anti-MIF apresentaram comprometimento da função pulmonar e alterações morfológicas no tecido pulmonar reduzidos, indicando a participação do MIF como mediador pró-inflamatório de fase aguda da silicose. Em conclusão, nossos resultados indicam que o MIF coloca-se como um mediador atuante na modulação do quadro silicótico, constituindo um potencial alvo para intervenção terapêutica no caso da doença humana / Silicosis is the pneumoconiosis of highest prevalence in Brazil and is of crystalline silica particles, being characterized by granuloma formation, in a way dependent on a wide range of mediato migration inhibitory factor (MIF) several inflammatory diseases to investigate the potential role of MIF in a model of (BALB/c) and MIF knockout the analyses made on day 7 (acute phase) and 28 (chronic phase). increase in the number of total l mice, on day 7 after silicosis induction mononuclear cells and neutrophil least 28 days. Tissue analyses day 7, followed by fibrotic response day 28. We also noted that silicotic mice exhibited an increase in a marked increase in the levels of MIP increase in the levels of fibrogenic cytokines TNF These phenomena directly correlated resistance and elastance) and MIF-/- silicotic mice showed hyperreactivity to methacholine of MIP-1 and MIP-2 and F4/80 expression and granuloma area phase, a marked increased in granuloma tissue area compared to WT mice, together with lower collagen deposition and and TGF- . An increase in the expression of also noted. When silicotic mice were treated with anti the reduced pulmonary function and tissue damage were noted, indicating a role for MIF as a proinflammatory mediator in silicosis. In conclusion, our results to play a relevant modulatory role in as a potential therapeutic target in human disease.

Submitted by Gilvan Almeida (gilvan.almeida@icict.fiocruz.br) on 2017-02-21T18:04:00Z No. of bitstreams: 1 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) / Approved for entry into archive by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2017-03-16T19:17:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 livia_mariano_ioc_mest_2016.pdf: 3017677 bytes, checksum: e1138f1f4e5cbaa36865b559d960ffaa (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-16T19:17:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 livia_mariano_ioc_mest_2016.pdf: 3017677 bytes, checksum: e1138f1f4e5cbaa36865b559d960ffaa (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A silicose é uma doença inflamatória pulmonar, de caráter ocupacional, causada pela inalação de partículas de sílica, sendo caracterizada por marcada inflamação e fibrose, e para qual não há tratamento até o momento. A lidocaína é um anestésico local que possui atividade anti-inflamatória conforme já demonstrado em processos de natureza alérgica. Neste estudo buscamos avaliar o efeito do tratamento com lidocaína sobre a silicose experimental murina. Para tanto, camundongos Swiss-Webster foram instilados, por via intranasal, com partículas de sílica (0,5 \2013 10 \03BCm) e as análises realizadas em diferentes tempos após o desafio. A lidocaína foi administrada sob forma de aerossol, em doses diárias de 1 e 2%, por sete dias consecutivos, iniciando-se 6 horas (fase inicial) ou 21 dias (tardia) após a instilação de sílica. Verificamos que os camundongos silicóticos apresentaram comprometimento da função pulmonar (aumento de resistência das vias aéreas e elastância pulmonar) e hiper-reatividade frente à metacolina. Observamos uma correlação temporal com a ocorrência de alterações morfológicas como infiltrado inflamatório, com presença de células F4/80 positivas (macrófagos), produção de citocinas e quimiocinas (CXCL2/MIP-2, CXCL-1/KC, TNF-\03B1 e IFN-\03B3), progressiva fibrose e marcada formação de granulomas durante o curso da doença O tratamento com lidocaína, na fase inicial, foi capaz de inibir as alterações de função pulmonar, infiltrado de macrófagos, produção de citocinas e a resposta fibrótica, tanto em 7 como em 28 dias após instilação da sílica. De forma contrária, a administração da lidocaína na fase tardia (21 dias) falhou em causar alteração ou reversão dos parâmetros analisados. Adicionalmente, demonstramos que a lidocaína foi capaz de inibir a produção de TNF-\03B1 por macrófagos alveolares (linhagem AMJ2C11) estimulados com sílica in vitro. Ademais, utilizando macrófagos derivados de medula óssea, diferenciados in vitro para os fenótipos M1 (próinflamatório) e M2 (anti-inflamatório), verificamos que apenas o subtipo M1 mostrou-se sensível ao tratamento com lidocaína, conforme atestado pela redução dos níveis de citocinas liberadas (TNF-\03B1 e IL-1\03B2). Em conclusão, nossos resultados mostram que o tratamento com a lidocaína se mostrou eficiente em interferir somente com a fase de instalação da silicose, falhando quando administrada na condição do quadro fisiopatológico estabelecido. Isto pode ser atribuído, pelo menos em parte às propriedades anti-inflamatórias da lidocaína, conforme demonstrado pela inibição da atividade secretora de macrófagos possuidores de perfil próinflamatório (M1) / Silicosis is an occupational lung inflammatory disease caused by silica particle inhalation, being characterized a inflammation and fibrosis - there is no treatment available until now. Lidocaine is a local anesthetic showing anti-inflammatory activity already demonstrated in allergic processesess. In this study we investigated the effect of lidocaine treatment on a model of murine experimental silicosis. Swiss-Webster mice were instilled intranasally with silica particles (0.5 - 10 \03BCM) and the analyses were performed at different time points after challenge. Lidocaine was administered by aerosol 1 - 2% during seven consecutive days, starting 6 hours (initial phase) or 21 days (late phase) after silica instillation. We showed that silicotic mice exhibited decreased lung function (increased airways resistance and lung elastance) and hyper-reactivity after methacholine stimulation. A temporal correlation was noted concerning morphological alterations including inflammatory infiltrate F4/80 positive cells (macrophages), production of cytokines and chemokines (CXCL2/MIP-2, CXCL1/KC, TNF-\03B1 e IFN-\03B3) and a progressive fibrosis and granuloma formation during the course of the disease. Treatment with lidocaine, at the initial phase, inhibited lung function alterations, macrophage infiltration, cytokine production and fibrosis, both at 7 and 28 days after silica instillation In contrast, lidocaine administration at the late phase (21 days) failed to modify or reverse all the parameters analyzed. Additionally, we demonstrated that lidocaine inhibited TNF-\03B1 production by alveolar macrophages (AMJ2C11 lineage) stimulated with silica in vitro. Moreover, using bone-marrow derived macrophages differentiated in vitro to M1 phenotype (pro-inflammatory) and M2 phenotype (anti-inflammatory), we noted that only the M1 macrophages were sensitive to lidocaine as attested by reduced levels of cytokine release (TNF-\03B1 and IL-1\03B2). In conclusion, our results show that treatment with lidocaine was shown to be effective to interfere only with silicosis installation and failed when the physiopathology was already established. This could be attributed, at least partially, to the anti-inflammatory properties of lidocaine as shown by its ability to inhibit the secretory function of pro-inflammatory macrophages (M1)

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:53:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FABIOLA CURADO.pdf: 968004 bytes, checksum: 6b4b82075a1b0e1f620232a1879668f9 (MD5) Previous issue date: 2010-11-05 / Silicosis, respiratory disease associated with occupational exposure to crystalline silica represents a serious public health problem, since, in spite of being potentially avoidable, presents high rates of incidense and prevalence, especially in less developed countries. Objectives: measure values of Forced Vital Capacity (FVC), Forced Expiratory Volume in 1 second (FEV1) and Peak Expiratory Flow (PEF), verify the occurrence of respiratory symptoms characteristic of silicosis; test whether there is relevant differences between spirometric values and occurrence of respiratory symptoms length of employment, workers' age and smoking factor; test whether there is correlation between spirometric rates and length of employment, age and smoking habit. Methodology: The study was applied by descriptive analytical transversal methods. The studied sample was composed of workers from six companies in the field of stone processing industry (quarries / marble), one in Goiânia-GO district and the other five in the city of Pirenopolis-GO, totaling 56 workers. The method of data collection consisted in two questionnaires and a portable spirometry equipment. Results: Regarding the use of Collective Protection Equipment (CPE), 100% of the employees answered that there was collective protection, 73% related to ventilation with open shelter shed and 27% with semi-open shelter. Regarding to the exhaust ventilation, 100% of the employees related that there was not this kind of ventilation. Regarding the use of Personal Protective Equipment (PPE), specifically in the case of respiratory protection, the mask filter was used by 20 employees and mask without filter (made of fabric) by 36 employees. It can be stated that 100% of the workers wore masks for personal protection, covering any kind of mask, including inappropriate types. The result of the averages of the three spirometric rates presented a highly significant difference when compared to t normal average of reference (P < 0.0001). In the universe of 56 men surveyed, 40 men were symptomatic (71%). There was no statistically significant differences between spirometric values and exposure time (at about 5 years); symptomatic and asymptomatic; and between smokers and nonsmokers. There was statistically significant differences between spirometric values and age (at about 45 years old). At the correlation test showed that there was no statistically differences between spirometric rates and exposure time, number of cigarettes smoked and length of smoking habit. There was negative correlation between spirometric values and age. Conclusion: it was verified that the employees present a high percentage of symptomatic factor; for spirometric values changed significantly for the three indices studied compared with the reference literature. / Silicose, doença respiratória associada à exposição ocupacional ao cristalino, sílica, representa um sério problema de saúde pública, uma vez que, apesar de ser potencialmente evitável, apresenta altos índices de incidência e prevalência, especialmente nos países menos desenvolvidos. Objetivos: mensurar valores de Capacidade Vital Forçada (CVF), Volume Expiratório Forçado no 1º segundo (VEF) e Pico Fluxo Expiratório (PEF); verificar a presença de sintomas respiratórios, característicos de Silicose; testar se há diferença significativa entre os valores espirométricos e presença de sintomas respiratórios, tempo de serviço, idade dos trabalhadores e fator tabagismo; testar se há correlação entre os índices espirométricos e tempo de serviço, idade e hábito tabagista. Metodologia: o estudo foi do tipo descritivo - analítico, transversal. A população estudada foi composta por trabalhadores de seis empresas do ramo de beneficiamento de pedras (pedreiras/marmorarias), uma no município de Goiânia-GO e as outras cinco no município de Pirenópolis-GO, totalizando 56 trabalhadores. Os instrumentos de coleta de dados foram dois questionários e um equipamento de espitometria portátil. Resultados: em relação ao uso de Equipamento de Proteção Coletiva (EPC), 100% dos funcionários respondeu que existia proteção coletiva; 73% referente à ventilação do galpão aberto e 27% com galpão semi-aberto. Em relação à ventilação exaustora, 100% dos funcionários afirmou que não existia esse tipo de ventilação. Referente ao uso de Equipamento de Proteção individual (EPI), tratando-se especificamente de proteção respiratória, a máscara com filtro era utilizado por 20 funcionários e a máscara sem filtro (tecido) por 36 funcionários. Pode-se afirmar que 100% dos trabalhadores usavam máscaras de proteção individual, abrangendo qualquer tipo de máscara, inclusive não apropriadas. O resultado das médias dos três índices espirométricos apresentou uma diferença altamente significativa quando comparado às médias normais de referência (p < 0,0001). Dos 56 homens pesquisados, 40 homens apresentam-se sintomáticos (71%). Não houve diferença estatística significativa entre valores espirométricos e tempo de exposição (mais ou menos de 5 anos), sintomáticos e assintomáticos e tabagistas e não tabagistas. Houve diferença estatística significativa entre valores espirométricos e idade (mais ou menos de 45 anos). No teste de correlação verificou-se que não houve diferença estatística significativa entre os índices espirométricos e tempo de exposição, número de cigarros fumados e tempo de hábito tabágico. Houve correlação negativa entre os valores espirometricos e idade. Conclusão: verificou-se que os funcionários apresentam um alto percentual de fator sintomático; para os valores espirométricos houve alteração significativa para os três índices pesquisados comparados com a literatura de referência.