Proposição: O presente trabalho propõe o estudo histológico descritivo da aplicação de um campo magnético sepultado, estático e permanente em área de enxerto ósseo alógeno liofilizado e dento-alveolar associada a defeito cirúrgico em mandíbulas de ratos. Metodologia: estudo experimental in vivo, randomizado. Amostra foi composta por 21 ratos, da espécie Rattus novergicus albinus, linhagem Wistar, machos, divididos em três grupos, correspondendo aos tempos experimentais de sete, 21 e 45 dias. Foram realizadas ostectomias associadas a odontossecções, na face lateral externa do corpo mandibular e no ramo ascendente, atingindo transversalmente a raiz do incisivo inferior e os ápices dos molares. Este defeito cirúrgico permitiu a adaptação de dispositivos metálicos magnetizados (grupo teste) e não magnetizados (grupo controle) associados às regiões apicais dos molares e ao coto distal do incisivo inferior, local este onde realizou-se enxertia óssea alógena liofilizada. A intensidade média do campo magnético sepultado e permanente foi de 250 gauss.Resultados: observou-se no grupo teste e controle, nos diferentes tempos experimentais a gradativa integração do enxerto ósseo alógeno liofilizado, a manutenção da vitalidade pulpar dos molares e coto proximal do incisivo inferior, além da contínua erupção do incisivo inferior do rato. Nos grupos teste, principalmente aos 45 dias, constatou-se uma diferenciada e exuberante neoformação óssea centrípeta em direção aos dispositivos metálicos imantados. Conclusão: o campo magnético sepultado in vivo foi capaz de favorecer o processo de cicatrização óssea no defeito cirúrgico criado. / Purpose: The present study provides a descriptive histological analysis of the use of a buried, static and permanent magnetic field in lyophilized bone allografts in a dentoalveolar area associated with surgical defects in rat mandibles. Method: a randomized in vivo experimental study was carried out with 21 male Wistar rats (Rattus norvegicus albinus), which were split into three groups, corresponding to 7, 21 and 45 experimental days. Ostectomies associated with odontotomies were performed on the outer lateral face of the mandibular body and in the ascending branch, cross-sectionally to the root of the lower incisor and to the molar apices. This surgical defect allowed for the use of magnetized (test group) and non-magnetized (control group) metal devices associated with molar apices and with the distal stump of the lower incisor, where the lyophilized bone allograft was performed. The intensity of the buried and permanent magnetic field amounted to 250 gauss. Results: In the test and control groups, there was gradual integration of the lyophilized bone allograft, maintenance of pulp vitality of the molars and of the proximal stump of the lower incisor, in addition to continuous eruption of the lower incisor. In the test groups, especially at 45 days, there was distinct and pronounced centripetal new bone formation in a direction toward the magnetized metal devices. Conclusion: the in vivo buried magnetic field favored bone healing at the site of the surgical defect.

Os felinos domésticos há muito tempo são utilizados como animais de companhia, tornando freqüentes os atendimentos veterinários a esta espécie. As afecções ortopédicas em gatos ocupam papel de destaque na rotina do traumatologista veterinário, que pode deparar-se com fraturas cominutivas de ossos longos, neoplasias ósseas, não-uniões ou uniões-viciosas de fraturas. Uma das opções para o tratamento dessas afecções é a utilização de enxerto ou implante ósseo. O objetivo deste trabalho foi avaliar implantes ósseos corticais alógenos conservados em mel, congelados a -70°C ou liofilizados na substituição de segmento diafisário do fêmur de felinos domésticos. Foi confeccionada uma falha óssea de três centímetros na região diáfisária do fêmur de 24 felinos adultos. Em seis felinos (grupo controle), a falha foi preenchida com o próprio osso removido após a retirada do periósteo, endósteo e medula óssea, e em outros 18 animais, foi preenchida com implantes ósseos corticais alógenos conservados em mel (seis animais), congelado (seis animais) e liofilizado (seis animais). Os animais foram avaliados clínica, radiográfica e histologicamente até completarem 180 dias de pós-operatório. A porcentagem de incorporação foi de 91,6% no grupo controle, com tempo médio necessário para consolidação de 83,1 dias; no grupo mel foi de 75%, com tempo médio de 105 dias; no grupo congelado foi de 83,3% com tempo médio de 78 dias e no grupo liofilizado foi de 25%, com tempo médio de 120 dias. Foi encontrada diferença estatisticamente significativa entre as porcentagens de consolidação do grupo liofilizado em relação aos grupos congelado e controle. Não houve diferença estatística entre os grupos com relação ao tempo de consolidação. Foi identificada a bactéria Brevibacterium spp. em um dos implantes conservados no mel. Foi possível concluir que os implantes ósseos autógenos e os conservados no mel e a -70°C foram eficazes no preenchimento de defeito cortical em fêmur de felinos adultos, enquanto que os implantes liofilizados necessitam de maior avaliação da resistência e imunogenicidade para tornarem-se uma opção viável em felinos. / Cats with orthopedic conditions are a prominent part of the clinical work of veterinary traumatologists. Conditions such as comminuted fractures of the long bones, bone cancers and non-unions or unions that repeatedly fracture are often difficult to repair surgically and may require the use of bone grafts or implants for successful treatment. This study evaluated cortical bone allografts preserved in honey, frozen at -70°C or lyophilized for correcting 3 cm long bone defects created in the diaphysis of the right femur of adult domestic cats (n=24). In the control group (n=6), the defect was repaired using the autologous bone following removal of the periosteum, endosteum and bone marrow. In the remaining animals (n=6/group), the defect was repaired with cortical bone allografts preserved in honey, frozen or lyophilized. Success of implant incorporation and length of time for consolidation were assessed through clinical, radiographic and histological evaluations performed up to 180 days after surgery. In the control, frozen, honey and lyophylized groups, respectively, success of implant incorporation was 91.6%, 83.3%, 75%, and 25%, with corresponding mean length of time for consolidation of 83.1, 78, 105 and 120 days. Consolidation percentage in the lyophilized group was significantly lower than in the frozen and control groups. Length of time for consolidation was not different between the groups. Brevibacterium spp. was isolated from one of the implants preserved in honey. In conclusion, bone grafts preserved in honey or frozen at -70°C were effective for repairing cortical defects in the femurs of adult cats as compared to autologous bone. Lyophilized implants require more evaluation of resistance and immunogenicity before they can be considered a viable option for bone repair in cats.

No description available.

Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2273273 bytes, checksum: afe75a32141cc8b050636b76ca53f785 (MD5) Previous issue date: 2012-05-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Frog meat show highlights because has the high value proteins biological and also low-fat because therefore has been considered as a dietary supplement and for treatment of various diseases and food allergy. It is necessary to obtain news products from frog meat to offer in the marked. Lyophilization of frog meat could be like an alternative for this problem because can add value in the innless parts noble, and we can have available and the excellent raw material for make some news products. The objectives of the present study were to: determine the composition of frog meat albino and pigmented normal; Post-mortem behavior from pH; and freeze-dry to study the meat from bullfrog aiming to offer it with high value protein and also the mineral value to obtain the specific food products. We used 150 bullfrogs (Lithobates catesbeianus). 75 were pigmented and 75 were albinos from the same spawn, males and females reared under Anfigraja separated into pens according to their own pigmentation. The animals were followed until it to obtain the weight of 230 ± 20 g, it happened in the February from to September 2011 (7 months). The method of killing was stunning electronarcosis with and without bleeding. Separation was performed and boning cuts according to the treatments. The sample were dry by until constant weight. The analyses were performed on fresh beef meat and lyophilized. We did in a 2x3 factorial (two cultivars x three cuts) with three replications in a completely randomized design. Manual boning was used to flank and thighbones and mechanics to the back. Frog albino had the higher initial pH for all sections except in the mechanically separated dorsal (DMS), the behavior was similar to the curves varieties, but not to the cuts, they were composed of muscles and different fiber composition that affect the pH value. Proximate food composition was similar for the two different frog albino and pigmented. The iron content was higher frog albino and show statistic difference from the normal pigmentation. Meat from bullfrog albino or pigmented in all courts had adopted the high protein content and mineral. For lyophilized samples range factor was only significant influence in determining the goal of color lyophilized meat. The cuts differ in composition, and the thigh and flank cuts more similar, with higher amounts of protein, and the back always different from the others with the highest percentage of lipids. The water solubility was determined not influenced by the factors studied, so the parameter to choice of which one treatment to use in developing a product with this raw material will depend on their physicochemical properties. The freeze-dried frog meat can be considered like an excellent ingredient to enrichment and the production the protein foods for specific purposes. / A carne de rã destaca-se nutricionalmente por suas proteínas de alto valor biológico e por seu baixo teor em gorduras, por esse motivo pode ser indicada como complemento alimentar no tratamento de diversas doenças e alergias alimentares. Neste sentido existe a necessidade de se criar produtos a partir da carne de rã, que sejam viáveis, e venham atender essa demanda. A liofilização pode ser uma alternativa para esse problema, pois além de agregar valor aos cortes menos nobres, pode disponibilizar uma matéria-prima de excelente qualidade para a elaboração de diversos produtos. Objetivou-se neste trabalho determinar a composição centesimal da carne de rã albina e de pigmentação normal, estudar o comportamento do pH pós morte, liofilizar e estudar a carne de rã-touro com a premissa de disponibilizar matéria-prima de alta qualidade proteica e mineral para a elaboração de produtos para fins específicos. Foram utilizadas 150 rãs-touro (Lithobates catesbeianus), sendo 75 pigmentadas e 75 albinas, provenientes de uma mesma desova, machos e fêmeas, criados em sistema Anfigranja separados em baias de acordo com sua pigmentação. Os animais foram acompanhados até atingirem o peso de 230 ± 20 g, isso ocorreu no período de fevereiro a setembro de 2011 (7 meses). O método de abate foi com insensibilização por eletronarcose e sem a sangria convencional. Foi realizada a separação dos cortes e a desossa. As amostras de carne foram liofilizadas até atingirem peso constante. As análises foram feitas na carne in natura e na carne liofilizada. O experimento foi instalado em esquema fatorial 2x3 (duas variedades x três cortes) com três repetições, em um delineamento inteiramente casualizado. Foi utilizada a desossa manual para a coxa e a fraldinha e a desossa mecânica para o dorso. A rã albina apresentou pH inicial maior para todos os cortes exceto o dorso mecanicamente separado (DMS), o comportamento das curvas foi semelhante para as variedades, mas não para os cortes, pois eram compostos por diferentes músculos, o que influenciou no valor do pH. A composição centesimal foi semelhante para albinos e pigmentados, apenas o teor de ferro foi maior na rã albina diferindo estatisticamente da rã de pigmentação normal. A carne de rã-touro albina ou pigmentada em todos os cortes adotados apresentou alto conteúdo protéico e mineral. Para as amostras liofilizadas o fator variedade teve influencia significativa somente na determinação da cor. Os cortes diferiram entre si na composição centesimal, sendo a coxa e a fraldinha os cortes mais semelhantes, apresentando maior quantidade de proteínas, e o dorso sempre diferente dos demais com maior percentual de lipídeos. A solubilidade em água não foi influenciada pelos fatores estudados, logo para definir qual corte utilizar na elaboração de algum produto, a escolha será em função das propriedades físico-químicas de cada um. A carne de rã liofilizada apresenta-se como um ingrediente de primeira linha para o enriquecimento e produção de alimentos proteicos para fins específicos.

Introdução: A engenharia tecidual óssea com utilização de células-tronco mesenquimais é um campo de pesquisas com potencial para aplicação clínica em cirurgia plástica reparadora. Suas vantagens seriam ampliar as opções de reconstrução e diminuir a morbidade cirúrgica nas zonas doadoras. Não está definida na literatura médica a possibilidade de utilizar o osso liofilizado bovino nãodesmineralizado como estrutura tridimensional e carreadora celular para engenharia tecidual óssea. Objetivo: Avaliar o uso de células da medula óssea, com potencial osteogênico, agregadas a estrutura tridimensional de osso liofilizado bovino nãodesmineralizado para engenharia tecidual óssea, em modelo experimental heterotópico. Materiais e Métodos: Os animais doadores de células da medula óssea, assim como os animais receptores dos construtos ósseos, foram camundongos de linhagem isogênica C57Bl/6. Os construtos ósseos consistiram em osso liofilizado bovino não-desmineralizado (OL) associado a diferentes grupos celulares com potencial osteogênico, e foram implantados no plano subcutâneo no dorso dos animais, em procedimento cirúrgico compatível com a primeira etapa da confecção de retalho osteocutâneo pré-fabricado. Grupos de comparação (n=10 em cada grupo): 1) OL isoladamente (controle); 2) OL + células mononucleares da medula; 3) OL + células-tronco mesenquimais; 4) OL + células-tronco mesenquimais diferenciadas em meio osteoindutor. A aferição foi realizada após 5 semanas, com avaliação histológica e determinação da atividade de fosfatase alcalina. Resultados: A avaliação histológica não mostrou diferença entre os grupos de comparação. Em todas as amostras observou-se processo inflamatório crônico, com nítida reabsorção óssea, e com tecido conjuntivo fibroso circunjacente ao implante estendendo-se por entre as trabéculas ósseas. Não foram visualizados osteoblastos ou osteócitos viáveis, nem neoformação óssea, em nenhum dos cortes histológicos examinados. Os resultados da atividade de fosfatase alcalina também não mostraram diferença entre os grupos de comparação, com análise de variância entre grupos mostrando p=0,867. Discussão: No modelo estudado, a adição de células da medula óssea com potencial osteogênico sobre estrutura de osso liofilizado bovino não-desmineralizado não agregou propriedades osteogênicas ao material. Com isso, não se confirmou a perspectiva inicial de utilizá-lo como estrutura tridimensional e carreadora celular na engenharia tecidual óssea em sítio heterotópico. Para melhor definir o papel deste material, sugerem-se estudos subseqüentes que o avaliem em outros modelos experimentais, comparando com outros materiais de uso já estabelecido, e explorando separadamente cada etapa metodológica que possa influir no sucesso da engenharia tecidual óssea. / Introduction: Bone tissue engineering using mesenchymal stem cells is a research area with potential applicability in reconstructive plastic surgery, aiming to broaden surgical choices and decrease morbidity in donor sites. It has not been established in the medical literature whether bovine non-demineralized lyophilized bone can be used as a scaffold and cell carrier for bone tissue engineering. Objective: To assess the use of bone marrow cells with osteogenic potential seeded on a bovine non-demineralized lyophilized bone scaffold for bone tissue engineering in a heterotopic experimental model. Materials and Methods: The donors of bone marrow cells, as well as the receptors of the osseous constructs were isogenic line C57BI/6 mice. The constructs consisted on bovine non-demineralized lyophilized bone (LB) with addition of different cell groups with osteogenic potential, and they were implanted into subcutaneous sites on the backs of the animals in a surgical procedure compatible with an osteocutaneous flap pre-fabrication. Comparison groups (n=10 each group): 1) LB alone (control group); 2) LB + marrow mononuclear cells 3) LB + mesenchymal stem cells; 4) LB + mesenchymal stem cells differentiated in an osteoinductive medium. The constructs were harvested at 5 weeks after implantation for histological analysis and alkaline phosphatase activity test. Results: The histological analysis did not show differences among the comparison groups. In all samples, chronic inflammatory process was observed, with evident osseous resorption, and with adjacent fibrous connective tissue rich in neovessels extending through bone trabeculae. Viable osteoblasts or osteocytes , as well as new bone formation, were not observed. Likewise, results of the alkaline phosphatase activity test have not shown any difference among comparison groups, with analys of variance between groups showing p value=0.867. Discussion: In this experimental model, the addition of bone marrow cells with osteogenic potential to a bovine non-demineralized lyophilized bone scaffold did not add osteogenic properties to the material. Therefore, the initial perspective of using it as a scaffold for bone tissue engineering in heterotopic sites could not be confirmed. In order to better define the role of this material, further studies should be conducted, assessing it in other experimental models, comparing it with other materials currently in use and separately exploring each methodological step that might influence the success of bone tissue engineering.

A artroplastia é, em última análise, a opção final para o tratamento da osteoartrose. Com o aumento do número de indicações deste procedimento, a troca (artroplastia total de quadril de revisão – ATQR) dos componentes também passou a ser mais frequente. Os defeitos ósseos ou falhas ósseas são problemas que podem ser encontrados quando se realiza uma ATQR e, eles devem ser reparados, ou seja, o quadril do paciente a receber outra prótese necessita ser reconstruído. Para isto a grande maioria das técnicas empregadas requer o uso de enxerto ósseo e, devido a este motivo este tecido tem se tornado um dos tecidos mais transplantados na atualidade. Porém a demanda para utilização dos enxertos, na maioria provenientes de bancos de tecidos ósseos, tem aumentado, mas o suprimento é insuficiente. Portanto faz-se necessário a busca por novas tecnologias e alternativas aos bancos de tecidos. O enxerto bovino liofilizado (EBL) é uma destas opções, sua produção em livre demanda suas características físicas e químicas semelhantes ao osso humano e sua boa repercussão clínico-radiológica o torna uma alternativa viável. Este estudo tem o objetivo de verificar e quantificar a neoformação óssea com o uso do EBL pelo uso da avaliação histológica. Realizou-se um estudo de casos de Julho de 2000 a Abril de 2013 no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), onde se incluíram sujeitos que foram submetidos a uma cirurgia prévia cirurgia de ATQR onde foi utilizado o EBL os quais internaram posteriormente para uma segunda cirurgia de ATQR não relacionada a falha do enxerto e sim a falha da prótese. Nesta segunda cirurgia realizou-se a biópsia óssea. Quatorze sujeitos foram analisados, sendo 64,3% do sexo feminino. A média de idade dos pacientes foi 52,36±18,55. Neoformação óssea estava presente em 85,7% dos sujeitos, e constituiu 61,79% da área total de matriz óssea. O diagnóstico de absorção do EBL estava presente em 12 sujeitos. Uma forte correlação de proporção inversa foi constatada pelo teste de Pearson entre a porcentagem de osso neoformado e a porcentagem de EBL na área total de matriz óssea (p=0,001). Nenhuma resposta inflamatória foi encontrada. Concluiu-se que houve neoformação óssea adequada na grande maioria dos casos sendo o EBL uma boa estrutura osteocondutora, podendo ser considerado uma alternativa aos outros enxertos ósseos no tratamento das falhas ósseas. / Arthroplasty is, ultimately, the final option for the treatment of osteoarthritis. With the increasing number of indications of this procedure, the exchange (total hip arthroplasty revision surgery- THARS) also became more frequent. The bone defects are problems that can be encountered when conducting a THARS and this defect must be repaired, in other words, the patient's hip needs to be rebuilt before receive a new prosthesis. Most of techniques used to rebuild requires the use of bone graft, and because of this reason, this tissue has become one of the most transplanted tissues today. However the demand for the use of grafts, mostly from bone tissue banks, has increased, but the supply is insufficient. Therefore it is necessary to search for new technologies and alternatives to tissue banks. The bovine lyophilized xenograft (BLX) is one of these options; the production on free demand, its physical and chemical characteristics similar to human bone and its good clinical and radiological outcomes makes it a viable alternative. The aim of this study was to verify and quantify new bone formation by the histological analysis in subjects who received the BLX. This was a case series from July 2000 to April 2013 realized in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre. This study included patients who underwent to a THARS where was used the BLX, which later was admitted to a second THARS surgery, not related to the xenograft failure but a mechanical failure of the implant. In this second surgery was performed the bone biopsy. Fourteen subjects were analyzed, 64.3% were female. The average age of patients was 52.36 ± 18.55 years. New bone formation was present in 85.7% of subjects, and constituted 61.79% of the total bone matrix. The diagnosis of BLX absorption was present in 12 subjects. A strong inverse correlation founded by the Pearson's test was observed between the proportion of new bone and the proportion of BLX (p=0.001). No inflammatory response was found. Was concluded that there was suitable bone formation in the vast majority of the cases, as well as the BLX is a good osteoconductive scaffold and can be considered an alternative to other bone graft in the treatment of bone defects.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-16Bitstream added on 2014-06-13T19:20:13Z : No. of bitstreams: 1 filadelpho_al_dr_jabo.pdf: 1067546 bytes, checksum: 1640469b38a922f10c7c7709e1696f70 (MD5) / Este trabalho teve por objetivo avaliar a incorporação das matrizes liofilizadas de colágeno no dorso de ratos, testando principalmente a sua integridade e capacidade de servir como suporte para a migração de fibroblastos. Implantou-se no dorso torácico de 60 ratos albinos da variedade Wistar, machos e adultos, uma matriz de colágeno liofilizada. Os animais foram divididos em dois grupos de 30 animais, e cada grupo com três subgrupos de 10 animais. O primeiro grupo de animais, grupo AV, recebeu aplicação tópica de gel de Aloe vera e, no segundo grupo de animais, grupo SF, foi aplicado de modo similar, solução fisiológica a 0,9%. Os animais (10 ratos/subgrupo) foram submetidos à eutanásia aos 15, 30 e 45 dias de pós-operatório. A avaliação microscópica demonstrou aos 15 dias de pós-cirúrgico, nos dois grupos estudados, a ocorrência de uma reação inflamatória aguda, seguida de edema linfático e formação de tecido de granulação. Esse tecido era formado, principalmente, por leucócitos, que migraram para o local da inflamação. Linfócitos e macrófagos foram encontrados em maior número, no material tratado com Aloe vera. Aos 30 dias de pós-implante verificou-se um processo inflamatório moderado, nos dois grupos experimentais. Observou-se ainda, a presença de infiltrado inflamatório mononuclear discreto, associado à proliferação de fibroblastos. E aos 45 dias, no grupo AV, as matrizes encontravam-se menos espessas do que no grupo SF, havendo total bioincorporação dos moldes implantados. Frente aos resultados obtidos, é possível concluir que a matriz liofilizada de colágeno, é substituída por tecido local próximo ao normal e que a aplicação tópica de gel de Aloe vera acelerou o processo de cicatrização das lesões cirúrgicas e de incorporação das matrizes de colágeno liofilizadas / For this study aimed to evaluate the incorporation of lyophilized collagen matrix in the back of rats, mainly by testing their integrity and ability to serve as support for the migration of fibroblasts. Implanted in the thoracic dorsum of 60 albino rats of the Wistar variety, males and adults, a lyophilized collagen matrix. The animals were divided into 2 groups of 30 animals, and each group with 3 subgroups of 10 animals. The first group of animals, the AV group received topical application of Aloe vera gel and in the second group of animals the SF group was applied similarly saline 0.9%. Animals (10 rats / subgroup) were euthanized at 15, 30 and 45 days postoperatively. Microscopic evaluation demonstrated 15 days after surgery in both groups, the occurrence of an acute inflammatory reaction, followed by lymphoedema and formation of granulation tissue. This tissue was formed mainly by leukocytes, which migrated to the site of inflammation. Lymphocytes and macrophages were found in greater numbers, the material treated with Aloe vera. At 30 days post-implantation there was a moderate inflammatory process in both experimental groups. It was also observed, the presence of discrete mononuclear inflammatory infiltrate, associated with the proliferation of fibroblasts. And after 45 days in the AV group, matrixes were thinner than in the SF group, with total bioincorporation the molds in place. Given our results, we conclude that the freeze-dried collagen matrix is replaced by local tissue close to normal and that topical application of Aloe vera gel has accelerated the healing of surgical wounds and incorporation of freeze-dried collagen matrix

Introdução: A engenharia tecidual óssea com utilização de células-tronco mesenquimais é um campo de pesquisas com potencial para aplicação clínica em cirurgia plástica reparadora. Suas vantagens seriam ampliar as opções de reconstrução e diminuir a morbidade cirúrgica nas zonas doadoras. Não está definida na literatura médica a possibilidade de utilizar o osso liofilizado bovino nãodesmineralizado como estrutura tridimensional e carreadora celular para engenharia tecidual óssea. Objetivo: Avaliar o uso de células da medula óssea, com potencial osteogênico, agregadas a estrutura tridimensional de osso liofilizado bovino nãodesmineralizado para engenharia tecidual óssea, em modelo experimental heterotópico. Materiais e Métodos: Os animais doadores de células da medula óssea, assim como os animais receptores dos construtos ósseos, foram camundongos de linhagem isogênica C57Bl/6. Os construtos ósseos consistiram em osso liofilizado bovino não-desmineralizado (OL) associado a diferentes grupos celulares com potencial osteogênico, e foram implantados no plano subcutâneo no dorso dos animais, em procedimento cirúrgico compatível com a primeira etapa da confecção de retalho osteocutâneo pré-fabricado. Grupos de comparação (n=10 em cada grupo): 1) OL isoladamente (controle); 2) OL + células mononucleares da medula; 3) OL + células-tronco mesenquimais; 4) OL + células-tronco mesenquimais diferenciadas em meio osteoindutor. A aferição foi realizada após 5 semanas, com avaliação histológica e determinação da atividade de fosfatase alcalina. Resultados: A avaliação histológica não mostrou diferença entre os grupos de comparação. Em todas as amostras observou-se processo inflamatório crônico, com nítida reabsorção óssea, e com tecido conjuntivo fibroso circunjacente ao implante estendendo-se por entre as trabéculas ósseas. Não foram visualizados osteoblastos ou osteócitos viáveis, nem neoformação óssea, em nenhum dos cortes histológicos examinados. Os resultados da atividade de fosfatase alcalina também não mostraram diferença entre os grupos de comparação, com análise de variância entre grupos mostrando p=0,867. Discussão: No modelo estudado, a adição de células da medula óssea com potencial osteogênico sobre estrutura de osso liofilizado bovino não-desmineralizado não agregou propriedades osteogênicas ao material. Com isso, não se confirmou a perspectiva inicial de utilizá-lo como estrutura tridimensional e carreadora celular na engenharia tecidual óssea em sítio heterotópico. Para melhor definir o papel deste material, sugerem-se estudos subseqüentes que o avaliem em outros modelos experimentais, comparando com outros materiais de uso já estabelecido, e explorando separadamente cada etapa metodológica que possa influir no sucesso da engenharia tecidual óssea. / Introduction: Bone tissue engineering using mesenchymal stem cells is a research area with potential applicability in reconstructive plastic surgery, aiming to broaden surgical choices and decrease morbidity in donor sites. It has not been established in the medical literature whether bovine non-demineralized lyophilized bone can be used as a scaffold and cell carrier for bone tissue engineering. Objective: To assess the use of bone marrow cells with osteogenic potential seeded on a bovine non-demineralized lyophilized bone scaffold for bone tissue engineering in a heterotopic experimental model. Materials and Methods: The donors of bone marrow cells, as well as the receptors of the osseous constructs were isogenic line C57BI/6 mice. The constructs consisted on bovine non-demineralized lyophilized bone (LB) with addition of different cell groups with osteogenic potential, and they were implanted into subcutaneous sites on the backs of the animals in a surgical procedure compatible with an osteocutaneous flap pre-fabrication. Comparison groups (n=10 each group): 1) LB alone (control group); 2) LB + marrow mononuclear cells 3) LB + mesenchymal stem cells; 4) LB + mesenchymal stem cells differentiated in an osteoinductive medium. The constructs were harvested at 5 weeks after implantation for histological analysis and alkaline phosphatase activity test. Results: The histological analysis did not show differences among the comparison groups. In all samples, chronic inflammatory process was observed, with evident osseous resorption, and with adjacent fibrous connective tissue rich in neovessels extending through bone trabeculae. Viable osteoblasts or osteocytes , as well as new bone formation, were not observed. Likewise, results of the alkaline phosphatase activity test have not shown any difference among comparison groups, with analys of variance between groups showing p value=0.867. Discussion: In this experimental model, the addition of bone marrow cells with osteogenic potential to a bovine non-demineralized lyophilized bone scaffold did not add osteogenic properties to the material. Therefore, the initial perspective of using it as a scaffold for bone tissue engineering in heterotopic sites could not be confirmed. In order to better define the role of this material, further studies should be conducted, assessing it in other experimental models, comparing it with other materials currently in use and separately exploring each methodological step that might influence the success of bone tissue engineering.

Resumo: Este trabalho teve por objetivo avaliar a incorporação das matrizes liofilizadas de colágeno no dorso de ratos, testando principalmente a sua integridade e capacidade de servir como suporte para a migração de fibroblastos. Implantou-se no dorso torácico de 60 ratos albinos da variedade Wistar, machos e adultos, uma matriz de colágeno liofilizada. Os animais foram divididos em dois grupos de 30 animais, e cada grupo com três subgrupos de 10 animais. O primeiro grupo de animais, grupo AV, recebeu aplicação tópica de gel de Aloe vera e, no segundo grupo de animais, grupo SF, foi aplicado de modo similar, solução fisiológica a 0,9%. Os animais (10 ratos/subgrupo) foram submetidos à eutanásia aos 15, 30 e 45 dias de pós-operatório. A avaliação microscópica demonstrou aos 15 dias de pós-cirúrgico, nos dois grupos estudados, a ocorrência de uma reação inflamatória aguda, seguida de edema linfático e formação de tecido de granulação. Esse tecido era formado, principalmente, por leucócitos, que migraram para o local da inflamação. Linfócitos e macrófagos foram encontrados em maior número, no material tratado com Aloe vera. Aos 30 dias de pós-implante verificou-se um processo inflamatório moderado, nos dois grupos experimentais. Observou-se ainda, a presença de infiltrado inflamatório mononuclear discreto, associado à proliferação de fibroblastos. E aos 45 dias, no grupo AV, as matrizes encontravam-se menos espessas do que no grupo SF, havendo total bioincorporação dos moldes implantados. Frente aos resultados obtidos, é possível concluir que a matriz liofilizada de colágeno, é substituída por tecido local próximo ao normal e que a aplicação tópica de gel de Aloe vera acelerou o processo de cicatrização das lesões cirúrgicas e de incorporação das matrizes de colágeno liofilizadas / Abstract: For this study aimed to evaluate the incorporation of lyophilized collagen matrix in the back of rats, mainly by testing their integrity and ability to serve as support for the migration of fibroblasts. Implanted in the thoracic dorsum of 60 albino rats of the Wistar variety, males and adults, a lyophilized collagen matrix. The animals were divided into 2 groups of 30 animals, and each group with 3 subgroups of 10 animals. The first group of animals, the AV group received topical application of Aloe vera gel and in the second group of animals the SF group was applied similarly saline 0.9%. Animals (10 rats / subgroup) were euthanized at 15, 30 and 45 days postoperatively. Microscopic evaluation demonstrated 15 days after surgery in both groups, the occurrence of an acute inflammatory reaction, followed by lymphoedema and formation of granulation tissue. This tissue was formed mainly by leukocytes, which migrated to the site of inflammation. Lymphocytes and macrophages were found in greater numbers, the material treated with Aloe vera. At 30 days post-implantation there was a moderate inflammatory process in both experimental groups. It was also observed, the presence of discrete mononuclear inflammatory infiltrate, associated with the proliferation of fibroblasts. And after 45 days in the AV group, matrixes were thinner than in the SF group, with total bioincorporation the molds in place. Given our results, we conclude that the freeze-dried collagen matrix is replaced by local tissue close to normal and that topical application of Aloe vera gel has accelerated the healing of surgical wounds and incorporation of freeze-dried collagen matrix / Orientador: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Coorientador: José Wanderley Cattelan / Banca: Valéria Helena Alves Cagnon Quitete / Banca: Joaquim Coutinho Netto / Banca: José Jurandir Fagliari / Banca: Luiz Francisco Prata / Doutor

A artroplastia é, em última análise, a opção final para o tratamento da osteoartrose. Com o aumento do número de indicações deste procedimento, a troca (artroplastia total de quadril de revisão – ATQR) dos componentes também passou a ser mais frequente. Os defeitos ósseos ou falhas ósseas são problemas que podem ser encontrados quando se realiza uma ATQR e, eles devem ser reparados, ou seja, o quadril do paciente a receber outra prótese necessita ser reconstruído. Para isto a grande maioria das técnicas empregadas requer o uso de enxerto ósseo e, devido a este motivo este tecido tem se tornado um dos tecidos mais transplantados na atualidade. Porém a demanda para utilização dos enxertos, na maioria provenientes de bancos de tecidos ósseos, tem aumentado, mas o suprimento é insuficiente. Portanto faz-se necessário a busca por novas tecnologias e alternativas aos bancos de tecidos. O enxerto bovino liofilizado (EBL) é uma destas opções, sua produção em livre demanda suas características físicas e químicas semelhantes ao osso humano e sua boa repercussão clínico-radiológica o torna uma alternativa viável. Este estudo tem o objetivo de verificar e quantificar a neoformação óssea com o uso do EBL pelo uso da avaliação histológica. Realizou-se um estudo de casos de Julho de 2000 a Abril de 2013 no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), onde se incluíram sujeitos que foram submetidos a uma cirurgia prévia cirurgia de ATQR onde foi utilizado o EBL os quais internaram posteriormente para uma segunda cirurgia de ATQR não relacionada a falha do enxerto e sim a falha da prótese. Nesta segunda cirurgia realizou-se a biópsia óssea. Quatorze sujeitos foram analisados, sendo 64,3% do sexo feminino. A média de idade dos pacientes foi 52,36±18,55. Neoformação óssea estava presente em 85,7% dos sujeitos, e constituiu 61,79% da área total de matriz óssea. O diagnóstico de absorção do EBL estava presente em 12 sujeitos. Uma forte correlação de proporção inversa foi constatada pelo teste de Pearson entre a porcentagem de osso neoformado e a porcentagem de EBL na área total de matriz óssea (p=0,001). Nenhuma resposta inflamatória foi encontrada. Concluiu-se que houve neoformação óssea adequada na grande maioria dos casos sendo o EBL uma boa estrutura osteocondutora, podendo ser considerado uma alternativa aos outros enxertos ósseos no tratamento das falhas ósseas. / Arthroplasty is, ultimately, the final option for the treatment of osteoarthritis. With the increasing number of indications of this procedure, the exchange (total hip arthroplasty revision surgery- THARS) also became more frequent. The bone defects are problems that can be encountered when conducting a THARS and this defect must be repaired, in other words, the patient's hip needs to be rebuilt before receive a new prosthesis. Most of techniques used to rebuild requires the use of bone graft, and because of this reason, this tissue has become one of the most transplanted tissues today. However the demand for the use of grafts, mostly from bone tissue banks, has increased, but the supply is insufficient. Therefore it is necessary to search for new technologies and alternatives to tissue banks. The bovine lyophilized xenograft (BLX) is one of these options; the production on free demand, its physical and chemical characteristics similar to human bone and its good clinical and radiological outcomes makes it a viable alternative. The aim of this study was to verify and quantify new bone formation by the histological analysis in subjects who received the BLX. This was a case series from July 2000 to April 2013 realized in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre. This study included patients who underwent to a THARS where was used the BLX, which later was admitted to a second THARS surgery, not related to the xenograft failure but a mechanical failure of the implant. In this second surgery was performed the bone biopsy. Fourteen subjects were analyzed, 64.3% were female. The average age of patients was 52.36 ± 18.55 years. New bone formation was present in 85.7% of subjects, and constituted 61.79% of the total bone matrix. The diagnosis of BLX absorption was present in 12 subjects. A strong inverse correlation founded by the Pearson's test was observed between the proportion of new bone and the proportion of BLX (p=0.001). No inflammatory response was found. Was concluded that there was suitable bone formation in the vast majority of the cases, as well as the BLX is a good osteoconductive scaffold and can be considered an alternative to other bone graft in the treatment of bone defects.