Systemic sclerosis (scleroderma, SSc) is a complex autoimmune disease with a highly variable array of clinical features and often fatal outcome. The disease is characterized by microvascular dysfunction, immune abnormalities, chronic inflammation and tissue fibrosis in the skin and internal organs. Chi3L1 is part of the innate stress response of connective tissue cells and elevated serum levels have been observed in SSc. It has long been established that the degree of skin involvement is useful to classify SSc patients, as it often associates with distinct patterns of organ involvement, disease severity and survival. Dermal cells are one of the main effector cells involved in the development of fibrotic lesions in the skin, and their biological activity is regulated by a variety of cytokines and growth factors. In this study the capacity of dermal cells from SSc patients and from healthy individuals to synthesize Chi3L1 and the regulation of this process by growth factors and cytokines were investigated. The cell types that express Chi3L1 in the dermis of SSc patients were also characterized.This study involved 61 dermal cell preparations from skin biopsies taken from the forearm and abdomen of 41 SSc patients and 15 dermal cell preparations from 10 control individuals. The cells were maintained in monolayer cell culture, and stimulated with cytokines and growth factors: IL-1, IL-4, IL-10, IL-13, IL-6, IL-17, OSM, ET-1, TNF-α, TGF-β or PDGF in the absence of serum. Chi3L1 in culture media was analyzed by SDS-PAGE and immunoblotting. Results demonstrated that some SSc dermal cells endogenously express Chi3L1; Chi3L1 expression is variably upregulated in SSc in response to IL-1 and OSM, with OSM having a more prominent effect; Chi3L1 is never found in healthy control skin cell preparations; dermal cells from forearm skin are more likely to produce Chi3L1 than those derived from abdominal skin; and patients with early disease are more likely to produce Chi3L1 consistently in dermal cells derived from both arm and abdomen irrespective of other disease characteristics. Further characterization of Chi3L1-expressing SSc dermal cells showed that only about 5-10% of the total cell population produced Chi3L1 spontaneously. While OSM, a pro-inflammatory cytokine nearly doubled Chi3L1-expressing cells; TGF-β, a pro-fibrotic growth factor downregulated Chi3L1 expression by the cells. Cells that express Chi3L1 also did not stain positively for α-smooth muscle actin, which identifies mature myofibroblasts, suggesting that Chi3L1 is not directly associated with fibrosis. The cells that endogenously produced Chi3L1 also expressed nestin, CD73, STRO-1, TIE2, LSP-1 and NG2 (all of which are progenitor/stem cell markers). These cells were not detected in normal dermal cell preparations. Some SSc dermal cell preparations also contain a population of fibroblast-related cells capable of secreting Chi3L1 when stimulated by OSM. Thus endogenous and OSM induced expression of Chi3L1 identified cell-population(s) in the dermis of SSc patients which may be associated with the transient stage in the transition of progenitor/stem cells to fibroblast-related cells to mature fibroblasts. Therefore, Chi3L1 expression may be a marker of "active" cells in the early establishment of SSc to expand the pool of fibroblasts in the dermis of SSc patients. / La sclérodermie systémique (sclérodermie ou SSc) est une maladie auto-immune complexe qui présente un ensemble très variable de caractéristiques cliniques et est souvent fatale. La maladie est caractérisée par un disfonctionnement micro vasculaire, une inflammation chronique ainsi qu'une fibrose dans le tissu cutané et les organes internes.Chi3L2 fait partie de la réponse inhérente au stress des cellules des tissus conjonctifs et des niveaux sériques ont été observés dans des cas de SSc. Il a été établi, il y a longtemps, que le niveau d'atteinte cutanée aide à la classification des patients atteints de SSc étant donné qu'il est associé aux différents schémas d'atteinte des organes, sévérité de la maladie et le taux de survie. Les cellules dermiques sont impliquées dans le développement des lésions fibriques de la peau et leur activité biologique est régularisée par nombre de cytokines et de facteurs de croissance. La capacité des cellules dermiques de patients atteints de SSc et de sujets normaux à synthétiser du Chi3L1 et le régulation de ce processus par des facteurs de croissance et des cytokines a été au centre de cette étude. Les cellules exprimant le Chi3L1 dans le derme des personnes atteintes de SSc a également été caractérisé.Cette étude comporte 61 préparations de cellules dermiques prises de biopsie de peau de l'avant-bras et d'abdomen provenant de 41 patients atteints de SSc et de 15 préparations cde cellules provenant de 10 sujets témoins. Les cellules ont été maintenues en culture cellulaire monocouche et stimulées par des cytokines et facteurs de croissance suivants : IL-1, IL-4, IL-10, IL-13, IL-6, IL-17, OSM, ET-1, TNF-, TGF- ou PDGF en absence de sérum. La présence de Chi3L1 en milieu de culture a été analysée par SDS-PAGE et immunoblot. Les résultats démontrent que certaines cellules SSc dermiques expriment du Chi3L1 de façon endogène; le Chi3L1 est exprimé positivement de façon variable en réponse au IL1 et l'OSM, ce dernier ayant un effet plus prononcé. Chi3L1 n'est jamais trouvé dans les cellules de sujets témoins; les cellules dermiques d'avant-bras sont plus sujettes à produire du Chi3L1 que celles de l'abdomen et il est probable que les patients atteints plus tôt produisent du Chi3L1 d'une façon plus constante dans les cellules dermiques des avant-bras et de l'abdomen nonobstant les autres caractéristiques de la maladie. Une caractérisation plus poussée des cellules dermiques exprimant le Chi3L1 a démontré qu'à peine de 5 à 10% des cellules totales produisent du Chi3L1 de façon spontanée. Tandis que l'OSM, une cytokine pro-inflammatoire a doublé le nombre de cellules dermiques exprimant le Chi3L1, le TGF-b, un facteur de croissance profibrotique a régulé à la baisse l'expression de Chi3L1. Les cellules exprimant le Chi3L1 ne colorent pas pour l'actine de muscle lisse, qui caractérise les myo-fibroblastes matures, suggérant que le Chi3L1 n'est pas associé à la fibrose. Les cellules produisant le Chi3L1 de façon endogène ont aussi exprimé pour le nestine, CD73, STRO-1, TIE2, LSP-1 et NG-2 (qui sont tous des marqueurs de cellules souches/progénitrices). Ces cellules n'ont pas été détectées dans les préparations de cellules dermiques témoins. Quelques préparations cellulaires dermiques SSc contiennent aussi une population de cellules associées aux fibroblastes qui peuvent sécréter Chi3L1 quand elles sont stimulées par l'OSM. Donc, l'expression de Chi3L1 endogène ainsi que induite par l'OSM a permis d'identifier des populations de cellules dermiques dans les patients atteints de SSc qui pourraient être associés à une étape passagère dans la transition des cellules souches/progénitrices qui se développent en cellules de type fibroblastes en fibroblastes matures. En résumé, l'expression du Chi3L1 pourrait être un marqueur des cellules « actives » pour permettre un pool de fibroblastes dans le derme de patients atteints de SSc.

The attainment of invasive and metastatic phenotype by tumors ushers in transition from indolent to aggressive disease with poor survival and high recurrence rates. TGF-β is a member of the TGF-β cytokine super family which regulates development and homeostasis. TGF-β exerts tumor suppressive effects that cancer must elude for malignant evolution. Yet, paradoxically, TGF-β modulates processes like cell migration and invasion and epithelium to mesenchymal transition. To dissect the molecular basis of TGF-β pro-carcinogenic effects in breast cancer, we screened human microarray chip to analyze the genomic profile of triple negative breast tumor in response to TGF-β. Interestingly, we found the gene KiSS1 is up-regulated by TGF-β. KiSS1 encodes the secreted proteins kisspeptines. While kisspeptines play anti metastatic role in various types of cancers, its role in breast cancer remain controversial.Our study aims to comprehend the relationship between TGFβ and KiSS1 In breast cancer. We validated our RNA microarray data by real Time Q-PCR, which confirmed the upregulation and demonstrated the pathway involved in this regulation Then, with help of short interference RNA (SiRNA), we examined KiSS1 biological function downstream TGFβ with different In Vitro assays in triple negative breast cancer cell line. To explain the cell response to KiSS1, we explored its effect on a panel of genes that are regulated by TGFβ and known to be associated with aggressive cancer phenotype. The last part of the study, focused on exploring KiSS1 clinical utility as, both, prognostic biomarker and therapeutic target. / L'acquisition de propriétés invasives et métastatiques d'une tumeur annonce la transition d'une affection dormante vers une maladie agressive avec un faible taux de survie et un haut taux de récurrence. Le TGF-ß est un membre de la super famille de cytokines TGF-ß, qui régule le développement et l'homéostasie. Le TGF-ß exerce sur les tumeurs un effet anti-tumoral auquel le cancer doit échapper pour évoluer vers des phénotypes plus agressifs. Paradoxalement, le TGF-ß promeut aussi des procédés tels que la migration cellulaire, l'invasion, et la transition épithélio-mésenchymateuse.Afin de décortiquer les effets pro-carcinogènes du TGF-ß dans le cancer du sein, nous avons analysé le profil génétique de cancers triple-négatifs à l'aide de puces à ADN en réponse au TGF-ß. Nous avons trouvé que le gène KiSS1 est positivement régulé par le TGF-ß. KISS1 code pour les protéines sécrétées kisspeptines. Les kisspeptines sont connues pour jouer un rôle anti-métastatique dans différents types de cancer, cependant leur rôle dans le cancer du sein reste controversé.Notre étude vise à mieux comprendre la relation entre le TGF-ß et KiSS1 dans le cancer du sein. Nous avons validé les données obtenues de la puce par réaction de polymérase en chaîne quantitative en temps réel. Nous avons ensuite utilisé des siRNAs pour examiner les fonctions biologiques du KiSS1 en aval du TGF-ß par plusieurs analyses in vitro dans les lignées triple-négatives du cancer du sein. Pour expliquer la réponse cellulaire suivant une stimulation par KiSS1, nous avons exploré ses effets sur une gamme de gènes qui sont régulés par le TGF-ß et connus pour être impliqués dans la progression vers un phénotype agressif. La dernière partie de l'étude explore l'utilité clinique de KiSS1 comme marqueur pronostique et comme cible thérapeutique.

BACKGROUND: Hip fractures result in significant mortality, morbidity, and costs. Falls are the main mechanism of injury in the geriatric population with hip fractures associated with an annual cost of $9 billion dollars in the United States. Within the next decade, it is estimated that approximately 25% of the Canadian population will be 65 years and older. The cost of trauma center care is high, raising questions about the value of treating isolated hip fractures at Level 1 (tertiary) trauma centers. OBJECTIVES: To conduct a cost-effectiveness analysis of isolated geriatric hip fractures treated in Level 1 trauma centers compared with Level II and III centers. METHODS: A retrospective cohort study was comprised of patients over 65 years of age treated for isolated hip fractures in the Province of Quebec, Canada between January 1, 1998 and December 31, 2002. Data for the study was obtained from the Quebec Trauma Registry (QTR) and 3 patient cohorts were created according to treatment at 3 Level I, 29 Level II, and 21 Level III trauma centers. The primary outcome was total treatment cost defined as hospital costs for patient care from time of arrival at the hospital to discharge. All statistical analyses were carried out with SPSS version 19.0 (SPSS Inc., Chicago, Illinois). RESULTS: We identified 11,009 cases which met our inclusion criteria. The majority of patients were female (77%). Average age was 82 (Range: 65-105; SD: 7.5). The vast majority (96.9%) of admissions were as a result of falls. There were no significant differences with respect to mean age of patients, complication rate, and mortality amongst patient admitted to Level 1, 2 and 3 Trauma Centers. Average length of stay for all patients was 15.4 days (Confidence Interval 95%: 2-55). Our study finds a 20% and 60% savings of approximately $5 and $16 million dollars when patients are admitted to Level 2 and 3 Trauma Centers when compared to Level 1 Centers. CONCLUSIONS: Level 1 trauma centers do not improve the long term functional and rehabilitation outcomes of geriatric isolated hip fracture patient when compared to Level 2 and 3 centers. Our results suggest that treatment of Isolated Hip Fractures at Level 1 Trauma Centers is not cost-effective. A separate geriatric triage criteria for isolated hip fractures could lead to improved resource utilization, cost effectiveness and acute care outcomes.KEY WORDS: Elderly, Isolated hip fractures, Cost of trauma care, Trauma center performance, Level I. / CONTEXTE: Fractures de la hanche suite à une importante mortalité, la morbidité et les coûts. Les chutes sont le principal mécanisme de blessure chez les personnes âgées avec des fractures de la hanche liées à un coût annuel de 9 milliards de dollars aux États-Unis. Dans la prochaine décennie, on estime qu'environ 25% de la population canadienne sera âgée de 65 ans et plus. Le coût des soins de traumatologie est élevé, ce qui soulève des questions sur la valeur du traitement des fractures de la hanche isolées au niveau 1 (tertiaire) des centres de traumatologie. OBJECTIFS: Pour effectuer une analyse coûts-efficacité analyse des fractures de la hanche isolés gériatriques traités dans les centres de traumatologie de niveau 1 par rapport aux niveaux II et III. Centres Méthodes: Une étude de cohorte rétrospective a été composé de patients de plus de 65 ans traités pour des fractures de la hanche isolées dans la province de Québec, au Canada entre Janvier 1, 1998 et Décembre 31, 2002. Les données de l'étude a été obtenue à partir du Registre des traumatismes du Québec (QTR) et 3 cohortes de patients ont été créés selon le traitement au niveau 3 I, 29 II niveau, et 21 centres de traumatologie de niveau III. Le critère principal était coût total du traitement définis comme les coûts hospitaliers pour les soins aux patients de l'heure d'arrivée à l'hôpital de se décharger. Toutes les analyses statistiques ont été réalisées avec SPSS version 19,0 (SPSS Inc, Chicago, Illinois). Résultats: Nous avons identifié 11.009 cas qui répondaient à nos critères d'inclusion. La majorité des patients étaient des femmes (77%). L'âge moyen était de 82 (intervalle: 65-105; SD: 7,5). La grande majorité (96,9%) des admissions étaient à la suite de chutes. Il n'y avait pas de différences significatives en ce qui concerne moyenne d'âge des patients, le taux de complications et de la mortalité parmi les patients admis au niveau 1, 2 et 3 centres de traumatologie. Durée moyenne de séjour pour tous les patients était de 15,4 jours (intervalle de confiance à 95%: 2-55). Notre étude a montré une réduction de 20% et 60% des économies de l'ordre de $ 5 et $ 16 millions de dollars lorsque les patients sont admis au niveau 2 et 3 centres de traumatologie par rapport au niveau 1 centres. CONCLUSIONS: Les centres de traumatologie de niveau 1 ne pas améliorer les résultats fonctionnels à long terme et de réadaptation gériatrique du patient de fracture de la hanche isolé par rapport aux niveaux 2 et 3 centres. Nos résultats suggèrent que le traitement des fractures de la hanche isolés dans les Centres de traumatologie de niveau 1 n'est pas rentable. Un des critères de triage séparées pour les fractures de la hanche gériatriques isolés pourrait conduire à une meilleure utilisation des ressources, la rentabilité et les résultats des soins aigus.MOTS CLÉS: Personnes âgées, isolées fractures de la hanche, coûts des soins de traumatologie, le rendement centre de traumatologie de niveau I.

Background: Subgroups of patients with inflammatory bowel disease (IBD) may have an increased risk of developing lymphoma. We sought to identify factors that were associated with lymphoma in IBD patients. Methods: Cases and controls were identified though a centralized diagnostic index. We identified 80 adult IBD patients who subsequently developed biopsy-proven lymphoma between 1980 and 2009. For each case, two controls were matched for subtype of IBD, geographic location, and length of IBD follow-up at our institution prior to lymphoma diagnosis. Medical records were abstracted for demographic and clinical information. Conditional logistical regression was used to assess associations between risk factors and the development of lymphoma. Results: Sixty cases were males (75%) vs. 77 controls (48%). Median age at index date was 59 years for cases and 42 years for controls. Twenty cases (25%) and 23 controls (14%) were receiving immunosuppressive medications at the index date. Four cases (5%) and six controls (4%) were receiving anti-tumor necrosis factor-alpha (anti-TNF-alpha) agents at the index date. In multivariate analysis, age per decade (odds ratio [OR], 1.83; 95% confidence interval [CI], 1.37-2.43), male gender (OR, 4.05; 95% CI, 1.82-9.02) and immunosuppressive exposure at the index date (OR, 4.20; 95% CI, 1.35-13.11) were significantly associated with increased odds of developing lymphoma. Disease severity and use of anti-TNF-alpha agents were not independently associated with developing lymphoma. Conclusions: In this case-control study, increasing age, male gender and use of immunosuppressive medications were associated with an increased risk of lymphoma in patients with IBD, whereas disease severity and anti-TNF-alpha use were not associated with increased odds. / Cadre de l'étude: Certains sous-groupes de patients atteints de maladies inflammatoires de l'intestin (MII) peuvent courir un risque accru de développer un lymphome. Nous avons chercher à identifier les facteurs associés avec le lymphome chez les patients avec des MII. Méthodologie: Les cas et les témoins ont été identifiés à partir d'un répertoire de diagnostics centralisé. Nous avons identifié 80 patients adultes atteints de MII et qui ont dévelopé un lymphome confirmé par biopsie entre les années 1980-2009. Deux témoins étaient appariés pour chaque cas sur le sous-type de MII, la localisation géographique et la durée du suivi pour les MII dans notre centre jusqu'au diagnostic de lymphome. Les dossiers médicaux ont été consultés afin d'obtenir les données démographiques et cliniques. Un modèle de régression logistique conditionel a été utilisé pour évaluer les associations entre les facteurs de risque et le développement d'un lymphome. Résultats: Parmi les cas retenus, 60 étaient des hommes (75%) vs 77 dans le groupe de témoins (48%). L'âge médian à la date index était de 59 ans pour les cas et de 42 ans pour les témoins. Vingt cas (25%) et 23 témoins (14%) recevaient des médicaments immunosuppresseurs à la date index. Quatre cas (5%) et six témoins (4%) recevaient des anticorps antagonistes du TNF-alpha à la date index. Lors d'une analyse multivariée, l'age par décennie (rapport de cotes [RC]:1,83, intervalle de confiance à 95%[IC]: 1,37-2,43), le sexe masculin (RC:4,05, IC 95%:1,82-9,02) et l'exposition aux médicaments immunosuppresseurs à la date index (RC:4,20, IC 95%: 1,35-13,11) ont été associés, de façon significative, à un risque accru de developper un lymphome. La sévérité de la maladie et l'utilisation d'anticorps antagonistes du TNF-alpha n'ont pas été associés de manière indépendante au developpement d'un lymphome. Conclusion: Dans cette étude de cas-témoin, l'age avancé, le sexe masculin et l'tilisation de médicaments immunosuppresseurs ont été associés à un risque supérieur de lymphome chez les patients atteints de MII. Par contre, la sévérité de la maladie et l'utilisation des anticorps antagonistes du TNF-alpha n'ont pas été associés à un risque plus élevé.

Transforming growth factor-beta (TGF-ß) is a multifunctional growth factor involved in a variety of cellular processes including wound healing, extracellular matrix deposition, inflammation, and fibrosis. Excessive TGF-ß signaling during wound healing causes sustained inflammation and elevated expression of extracellular matrix proteins, which have both been associated with fibrosis and scarring. Therefore, inhibition of TGF-ß during wound healing is an attractive target to reduce fibrotic skin disorders. Our lab is interested in CD109, a 150 kDa GPI-anchored protein which has been shown to bind TGF-ß in its soluble form and to inhibit TGF-ß signaling in keratinocytes and fibroblasts in vitro. The TGF-ß antagonist properties of CD109 suggest that modulation of its expression in vivo might ameliorate fibrosis and scarring, perhaps via differential activation of keratinocytes and fibroblasts. To investigate the role of CD109 in the skin, we generated transgenic mice overexpressing CD109 in the epidermis.To explore the role of CD109 during wound healing, I conducted incisional and excisional wound healing studies using CD109 transgenic mice and wild-type littermate controls. These studies demonstrate improved scarring parameters including reduced myofibroblast differentiation, reduced granulation tissue, and improved extracellular matrix architecture in the CD109 transgenic mice. Additionally, the data in this thesis show that overexpression of CD109 in the epidermis inhibits immune cell recruitment, and is associated with a reduction in expression of the proinflammatory cytokines IL-1 and MCP-1. I correlated these data with immunohistochemical analysis of Smad2/3 phosphorylation, and show that CD109 overexpression is associated with a reduction in TGF-ß signaling. Collectively, these data suggest that overexpression of CD109 in the epidermis inhibits fibrosis during wound healing in a TGF-ß dependent manner.To better understand the role of CD109 in fibrosis, I employed a murine bleomycin-induced model of fibrosis, which exhibits similarities to scleroderma, in CD109 transgenic mice and wild-type littermates. This study shows that CD109 transgenic mice express reduced levels of the extracellular matrix proteins fibronectin and collagen I, as well as Smad2/3 phosphorylation, and also display improved extracellular matrix architecture and reduced dermal thickness. Collectively, these data suggest that CD109 resists bleomycin-induced fibrosis, and could thus be an attractive target for therapeutic treatment of fibrotic skin disorders.To better understand how CD109 modulates TGF-ß in vivo, I analyzed the TGF-ß signaling molecules in skin, primary keratinocytes, and primary fibroblasts harvested from CD109 transgenic mice and wild-type littermates. Here, I show that CD109 transgenic mice express less collagen I and fibronectin, and display elevated ALK1 expression and signaling through the Smad1/5/8 pathway while wild-type mice express elevated ALK5 and preferentially signal through the Smad2/3 pathway. Investigation of cultured keratinocytes showed a similar expression pattern, with the only difference existing in the expression of ALK1 and ALK5 which were both increased in the CD109 transgenic keratinocytes, and fibroblasts from both genotypes showed similar expression patterns. In both cultured keratinocytes and whole skin extracts, the CD109 transgenic tissue expressed less TGF-ß than their wild-type counterparts. The differential TGF-ß signaling described here could underscore our previous observations indicating that overexpression of CD109 inhibits scarring and fibrosis in vivo.Collectively, the data presented here demonstrate that CD109 potently alters physiological processes in the skin in vivo. The capacity for CD109 to reduce scarring, fibrosis, and inflammation in vivo makes it an attractive target for treating fibrotic skin disorders. / Le facteur de croissance transformant bêta (TGF-ß), est un facteur de croissance multifonctionnel impliqué dans une multitude de processus cellulaires tel que la cicatrisation, la déposition de matrice extracellulaire, l'inflammation et la fibrose. Ainsi, l'inhibition de TGF-ß semble être une cible de choix pour réduire les désordres fibrotiques de la peau. Notre laboratoire a identifié CD109, une proteine de 180 kDa ancrée à un glycosylphosphatidylinositol agissant comme co-récepteur cellulaire de TGF-ß. Ce nouveau récepteur, auquel TGF- ß s'ancre avec très haute affinité, aurait pour propriété d'inhiber la signalisation intra-cellulaire de TGF-ß. Les propriétés antagonistes de CD109 suggèrent que la modulation de son expression in vivo dans la peau pourrait améliorer la cicatrisation et la fibrose cutanée. Pour investiguer le role de CD109 dans la peau, nous avons généré une souris transgénique en clonant CD109 en aval du promoteur de keratin-14, limitant ainsi la surexpression de CD109 à l'épiderme.Afin d'explorer le rôle de CD109 au sein de la guérison des plaies, nous avons conduit des études de ce processus où nous avons pu observer une amélioration des paramètres de cicatrisation tels que la réduction de la différentiation des myofibroblastes, la réduction du tissu de granulation et une amélioration de l'architecture de la matrice extracellulaire chez les souris transgénique CD109 comparées au souris de génotype sauvage pour la même portée. De plus, la surexpression de CD109 dans l'épiderme inhibe le recrutement de cellules immunitaires au site de la plaie et est associé avec une réduction de la signalisation de TGF-ß ainsi que l'expression des cytokines pro-inflammatoire IL-1 et MCP-1. Toutes ces données, suggèrent que la surexpression de CD109 dans l'épiderme inhibe la fibrose cutanée lors de la guérison des plaies.Nous avons ensuite examiné le rôle de CD109 lors de la fibrose en utilisant un model de sclérodermie murine induit par bleomycine. La souris transgénique CD109 exprime des niveaux réduits des protéines fibronectine et collagène 1 dans la matrice extracellulaire, ainsi que des niveaux réduits de phosphorylation de Smad2/3. Elle démontre aussi une meilleure architecture de la matrice extracellulaire et une réduction de l'épaisseur de la couche dermique. Toutes ces données suggèrent que CD109 résiste à la fibrose induite par bleomycine. Cela pourrait donc en faire une cible attrayante pour traitement thérapeutique des désordres fibrotiques de la peau.Pour mieux comprendre comment CD109 modifie l'action de TGF-ß in vivo, nous avons analysé les molécules de signalisation de TGF-ß dans la peau, les keratinocytes primaires et les fibroblastes primaires récoltés des souris transgéniques et de leur sœurs de portée du génotype sauvage. Les souris transgéniques CD109 expriment substantiellement moins de collagène I, de fibronectine et démontre une expression élevée de ALK1 et une activation élevée de la voie Smad1/5/8. Les études utilisant des keratinocytes cultivés démontrent une phosphorylation de Smad et une expression des gènes de la matrice extracellulaire similaire; l'expression de ALK1 et ALK5 étant toutefois plus élevée dans les keratinocytes transgéniques CD109 comparé à ceux du génotype sauvage. Les fibroblastes des deux génotypes démontrent des profils d'expression similaires. La signalisation différentielle de TGF-ß pourrait rehausser nos observations précédente et ainsi renforcer l'idée que la surexpression de CD109 inhibe la cicatrisation et la fibrose cutanée in vivo.Ainsi, les données présentée démontrent que CD109 est un puissant altérateur des processus physiologiques de guérison des plaies, cicatrisation, fibrose et inflammation dans la peau in vivo. La capacité pour CD109 de réduire la cicatrisation, la fibrose et l'inflammation dans la peau in vivo en font une cible attrayante pour traiter les désordres fibrotiques de la peau.

White adipose tissue (WAT) dysfunction plays an essential role in the etiology of diseases such as insulin resistance, type 2 diabetes and cardiovascular disease. It is characterized by its reduced ability to hydrolyze and store triglycerides. Several factors such as adipokines and WAT enzymes are known to affect this process. However, the work of this thesis indicates that apolipoprotein C-I (apoC-I) is a novel player in this process.ApoC-I is an apolipoprotein found on triglyceride rich lipoproteins (TRL) and high-density lipoproteins (HDL). It has several roles in lipid metabolism such as the activation of lecithin-cholesterol acyltransferase, the inhibition of cholesteryl ester transfer protein, lipoprotein lipase and hepatic lipase. Although ubiquitously expressed in several tissues, we were the first to demonstrate its synthesis and secretion from a human adipocyte cell model. The pertinence of apoC-I secretion from human WAT has not been examined, and has been the focus of this PhD thesis. We particularly focused on normolipidemic healthy postmenopausal obese women, thus eliminating the possible confounding effect of chronic disease on the regulation of apoC-I. Firstly, we demonstrated that total fasting plasma apoC-I concentrations do not correlate with adiposity, lipid parameters, markers of insulin resistance or inflammation in this population. Similarly, loss of fat mass without concomitant changes in plasma lipids did not induce any significant changes in plasma apoC-I. However, we later demonstrated that when plasma lipoproteins were separated by fast-protein liquid chromatography, the non-HDL fraction of total plasma apoC-I, although minor at < 20%, associated positively with fasting pro-atherogenic lipoproteinemia and delayed postprandial TRL and TRL-remnants clearance. Moreover, in contrast to what has been reported in the literature, postprandial increases in TRL apoC-I were not associated with decreases in HDL apoC-I. On the other hand, both fasting and postprandial increases in non–HDL apoC-I were associated with apoC-I secretion from women's WAT, a relation that did not exist for HDL apoC-I. Additionally, WAT apoC-I secretion was associated with delayed postprandial dietary fat clearance. Finally, mature adipocytes isolated from women's WAT secreted apoC-I, indicating that WAT apoC-I secretion in humans was, at least in part, attributed to the adipocyte cell population of this tissue. Incubation of 3T3-L1 adipocytes with synthetic TRL in the presence of exogenous apoC-I induced a time-dependent inhibition of LPL activity in these adipocytes. Therefore, the work presented in this thesis has demonstrated that apoC-I secretion from adipocytes / WAT is an upstream element regulating the function of this tissue. We propose that the pertinence of WAT apoC-I secretion lies in a negative crosstalk between WAT apoC-I secretion and WAT function in the postprandial state. We believe that the transfer of apoC-I from WAT to TRL inhibits WAT LPL activity and delays the clearance of plasma TRL. The accumulation of TG-rich TRL-remnants, leads to increased uptake and production of VLDL by the liver, which further aggravates the postprandial dyslipoproteinemia. Thus, WAT apoC-I may be at the root of WAT dysfunction and its associated dyslipoproteinemia; a phenotype that is closely related to the development of insulin resistance, type 2 diabetes and cardiovascular disease in humans. / Le tissu adipeux blanc (WAT) dysfonctionnel joue un rôle essentiel dans l'étiologie des maladies telles que la résistance à l'insuline, le diabète de type 2 et les maladies cardiovasculaires. Il est caractérisé par sa capacité réduite d'hydrolyser et stocker les triglycérides. Plusieurs facteurs connus, tels que les adipokines et les enzymes du tissu adipeux blanc, peuvent affecter ce processus. Cependant, le travail de cette thèse indique que l'apolipoprotéine C-I (apoC-I) est un nouvel acteur dans ce processus.L'apoC-I est une apolipoprotéine trouvée sur les lipoprotéines riches en triglycérides (TRL) et les lipoprotéines de haute densité (HDL). Elle a plusieurs rôles dans le métabolisme des lipides tels que l'activation de la lécithine-cholestérol acyltransférase, l'inhibition de la protéine de transfert des esters de cholestérol, l'inhibition de la lipoprotéine lipase et de la lipase hépatique. Elle est exprimée dans plusieurs tissus et nous avons été les premiers à démontrer sa synthèse et sa sécrétion dans un modèle de d'adipocyte humain. La pertinence de cette la sécrétion n'a jamais été examinée et fait l'objet de cette thèse. Nous avons mis l'accent sur les femmes saines, ménopausées, obèses et normolipidémiques pour éliminer l'effet des maladies chroniques sur l'homéostasie de l'apoC-I.Nous avons montré que la concentration de l'apoC-I total du plasma à jeun ne corrèle pas avec l'adiposité, les paramètres lipidiques, les marqueurs de résistance à l'insuline et l'inflammation dans cette population. De même, la perte de masse grasse sans changements simultanés des lipides plasmatiques n'a pas entraîné de changements significatifs de la concentration de l'apoC-I totale. Cependant, nous avons ensuite démontré que lorsque les lipoprotéines plasmatiques sont séparées par chromatographie liquide rapide des protéines, la fraction non-HDL plasmatique de l'apoC-I totale, bien que mineure (<20%), s'associe positivement avec une lipoprotéinémie pro-athérogène à jeun et une réduction de la clairance des TRL postprandiales et leurs TRL-remnants. De plus, contrairement à ce qui a été rapporté dans la littérature, l'augmentation postprandiale de l'apoC-I des TRL n'est pas associée à une diminution de l'apoC-I des HDL. Aussi, des augmentations à jeun et postprandiale de l'apoC-I non-HDL ont été associées à la sécrétion de l'apoC-I du WAT chez ces femmes, une relation qui n'existe pas pour l'apoC-I des HDL. Cependant, la sécrétion de l'apoC-I par le WAT a été associée à une réduction de la clairance post-prandiale du gras alimentaires. Enfin, des adipocytes matures isolés du gras de ces femmes obèses sécrètent de l'apoC-I, ce qui indique que l'apoC-I secrétée par le WAT de nos patientes provient, en partie, des adipocytes retrouvés dans ce tissu. De plus, l'incubation d'adipocytes 3T3-L1 avec des TRL synthétiques en présence d'apoC-I exogène induit une inhibition chrono-sensible de l'activité LPL dans ces adipocytes.En conclusion, la sécrétion de l'apoC-I des adipocytes / WAT pourrait être un élément en amont de la régulation de la fonction de ce tissu. Nous proposons que la pertinence de l'apoC-I du WAT soit celle d'une interaction négative entre la sécrétion de l'apoC-I par le WAT et la fonction réduite de l'hydrolyse et la captation de TG par le WAT dans l'état postprandial. Nous suggérons qu'il y a un transfert d'apoC-I à partir du WAT aux TRL, qui cause une réduction de l'activité de la LPL à la surface du WAT. Ceci retarde la clairance des TRL plasmatiques et entraine une accumulation de remnants de TRL riche en triglycérides. Cependant, il y a une absorption accrue de TRL et une surproduction de VLDL par le foie, ce qui aggrave encore plus la dyslipoprotéinémie postprandiale. L'apoC-I du WAT peut être à l'origine de la dysfonction du WAT et de la dyslipoprotéinémie associée; un phénotype qui est lié au développement de la résistance à l'insuline, du diabète de type 2 et des maladies cardiovasculaires chez l'humain.

During development, netrin guidance cues control cell motility and cell adhesion. Cell-adhesion between endothelial cells at the blood-brain barrier makes the endothelium impermeable to blood-derivatives and immune cells. To establish and maintain this barrier during development, and adulthood, and as well as during disease, brain endothelial cells must develop and sustain these strong adhesive contacts, through expression of tight junction molecules. However, we do not know whether netrins support inter-endothelial cell adhesion at the blood-brain barrier. Given this, we hypothesize that netrin tightens the blood-brain barrier during development, adulthood, and protects it during disease. Methods: To test this, we used both human adult primary brain-derived endothelial cells and newborn netrin-1 knockout mice and evaluated netrin's effect on inter-endothelial cell adhesion and barrier permeability. We also assessed netrins' therapeutic potential to maintain the barrier and limit immune cell infiltration into the central nervous system (CNS) during experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE). Results: Our results demonstrate that brain endothelial cells express netrins where they function in three ways. They help to form a tighter blood-brain barrier during development. They also maintain and protect the adult barrier by increasing the expression of endothelial junction molecules, thus promoting inter-endothelial adhesion and reducing protein leakage across the barrier. Netrins also reduce blood-brain barrier breakdown and diminish initial myeloid cell infiltration into the brain and spinal cord during EAE, which delays disease onset and ameliorates disease severity. However, during the chronic phase of EAE, netrin-1 treated mice have higher numbers and more activated T cells in their CNS and exhibit an ataxic gait and limb spasticity. Discussion: We conclude that netrins enhance BBB stability, but have dual functions on immune responses during neuroinflammatory disease. These findings favour the hypothesis that if netrin function was to be manipulated as a therapeutic, early short-term approaches would likely be the most effective. / Au cours du développement, les molécules de la famille des nétrines contribuent à la morphologénèse des organes en contrôlant la motilité et l'adhérence cellulaire. L'adhérence cellulaire entre les cellules endothéliales est une caractéristique importante de la barrière hémato-encéphalique (BHE), ce qui rend l'endothélium imperméable aux molécules sanguines et aux cellules immunitaires. Pour établir et maintenir cette barrière au cours du développement, à l'âge adulte et au cours de la maladie, les cellules endothéliales du cerveau doivent développer et maintenir ces contacts adhésifs en exprimant des molécules de jonction serrées. Cependant, nous ne savons pas si les molécules de la famille des nétrines influencent l'adhérence cellulaire inter-endothéliale de la BHE. Nous avons donc émis l'hypothèse que les nétrines resserrent la BHE au cours du développement, à l'âge adulte, et la protège au cours de la maladie.Méthodes: Pour valider notre hypothèse, nous avons utilisé des cellules endothéliales primaires dérivées des cerveaux humains adultes ou des cerveaux de souris nouveau-nés déficientes en nétrine-1 et évalué l'effet de la nétrine sur l'adhésion cellulaire endothéliale et inter-perméabilité de la barrière. Nous avons également évalué le potentiel thérapeutique des nétrines a restaurer la barrière et l'infiltration de cellules immunitaires limite dans le système nerveux central (SNC) pendant encéphalomyélite allergique expérimentale, un modèle animal de sclérose en plaques. Résultats: Nos résultats démontrent que les nétrines sont exprimées par les cellules endothéliales du cerveau, exprimes nétrines. Au cours du développement les nétrines aident à assurer l'étanchéité de la BHE. Chez les adultes, ils maintiennent et protègent la barrière adulte en augmentant l'expression des molécules de jonctions serrées, favorisant ainsi l'adhérence inter-endothéliale et diminuant les fuites de protéines à travers la BHE. Dans la pathologie de l'EAE, le rôle des nétrins diffère en fonction de la phase de la maladie. Au cours de la phase aigue, les nétrines atténuent la perte de l'intégrité de la BHE et diminuent l'infiltration des cellules myéloïdes dans le SNC. Ceci retarde l'apparition de la maladie et réduit sa sévérité. Au cours de la phase chronique de l'EAE, les souris traitées avec netrin-1 ont un plus grand nombre des cellules T activées dans leurs SNC et présentent une démarche ataxique ainsi qu'une spasticité des membres. Discussion: Nous concluons que les nétrins améliorent la stabilité de la BHE. Ces résultats suggèrent que les nétrines peuvent être envisagée comme agent thérapeutique dans les maladies neuroinflammatoire. Dans ce cas une approche précoce et à court terme serait probablement plus efficace.

Neuropathic pain is a debilitating problem affecting millions of people worldwide. This condition affects the quality of life and bears a substantial economic burden on society. Current drug treatments are often inadequate to treat this type of chronic pain, as they provide limited relief and are often accompanied with many undesired and difficult to manage side effects. It is imperative thus, to find new treatments that target alternative mechanisms from the currently approved drugs.The pathogenesis of neuropathic pain is very complex and involves structural, physiological and pharmacological changes throughout the neural axis (from the site of peripheral nerve injury to the spinal cord/brain). While a neuron-centric view has dominated the literature for decades and the way we approach neuropathic pain treatment, recent work has uncovered extensive neuroimmune interactions as substrates of this condition. Interactions between the immune and nervous systems occur at multiple levels, where different types of immune/glial cells and immune-derived substances are implicated in various stages of the pathogenesis. The four experimental chapters contained in this dissertation are in line with this recent recognition of the importance of neuroimmune mechanisms in neuropathic pain. In the work presented here, we sought to unravel novel neuroinflammatory mechanisms driving the aberrant pain condition in both the spinal cord and the peripheral nerve as well as to investigate the role of a potent anti-inflammatory cytokine, TGF-β1, as a potential modulator of these mechanisms. Several important mechanisms have been observed: A) Modulation of the central and peripheral inflammatory reaction with TGF-β1 significantly delays and attenuates mechanical allodynia and thermal hyperalgesia via immunosuppressive actions on glial cells (Chapter 2) and macrophages (Chapter 3). In the spinal cord TGF-β1 inhibits microglial proliferation, astrocytic activation and release of pro-inflammatory cytokines and exerts neuroprotective effects resulting in a decrease in the production of MCP-1. At the site of the injury, exposure to TGF-β1 reduces the number of macrophages, which release pro-inflammatory mediators, and modulates different populations of T-cells. B) In chapter 4 we demonstrate that sciatic nerve injury-induced neuropathic pain is associated with an increased permeability of the blood spinal cord barrier (BSCB). We observed that the spinal inflammatory reaction triggered by nerve injury is a key player in modulating this BSCB impairment. We identified MCP-1 as an endogenous trigger of BSCB leakage, which could be reversed using anti-inflammatory molecules TGF-β1 and IL-10. C) Selective depletion of microglia with MAC-1-saporin results in impairment of mechanical and thermal hypersensitivities at both acute and chronic stages following nerve injury suggesting an important and persistent contribution of microglia in the pathogenesis of neuropathic pain. These results expand our understanding of the neuro-inflammatory mechanisms of neuropathic pain as well as propose that immunosuppression or blockade of the reciprocal signalling pathways between neuronal and non-neuronal cells offer new opportunities for disease modification and more successful management of pain. / La douleur neuropathique est un problème débilitant affectant des millions de personnes dans le monde. Cette maladie affecte la qualité de vie et apporte un fardeau économique considérable à la société. Les traitements actuels sont souvent inadéquats pour traiter ce type de douleur chronique, car ils ne procurent qu'un soulagement limité et s'accompagnent de nombreux effets secondaires indésirables et difficiles à gérer. Aussi, il est impératif que de nouveaux traitements pour la douleur neuropathique soient trouvés.Le problème de la douleur neuropathique est que la pathogenèse de cet état hypersensible est très complexe et implique des changements structuraux, psychologiques et pharmacologiques à travers l'axe neuronal (en partant du site du nerf périphérique lésé jusqu'à la moelle épinière/cerveau). Alors qu'un point de vue neurocentrique a dominé la littérature tout comme l'approche du traitement de la douleur neuropathique pendant des décennies, des travaux récents ont mis en évidence des interactions neuro-immunitaires étendues afin de caractériser la maladie. Les interactions entre les systèmes immunitaires et nerveux se produisent à différents niveaux, avec divers types de cellules immunitaires/gliales et des molécules dérivées du système immunitaire sont impliqués dans plusieurs étapes de la pathogenèse.Les quatre chapitres expérimentaux contenus dans cette thèse sont en lien avec cet état de fait récent de l'importance des mécanismes neuro-immunitaires dans la douleur neuropathique. Dans le travail présenté ici, nous avons cherché à éclaircir ces nouveaux mécanismes neuro-inflammatoires entrainant cette condition de douleur aberrante à la fois dans la moelle épinière et le nerf périphérique afin d'étudier le rôle d'une cytokine anti-inflammatoire active, TGF-β1, comme modulateur potentiel de ces mécanismes. Plusieurs mécanismes importants ont été observés: A) La modulation de la réaction inflammatoire centrale et périphérique avec TGF-β1 retarde et diminue de manière significative l'allodynie mécanique et l'hyperalgésie thermique via des actions immunosuppressives sur les cellules gliales (chapitre 2) et les macrophages (chapitre 3). Dans la moelle épinière, TGF-β1 inhibe la prolifération microgliale, l'activation des astrocytes et la libération de cytokines pro-inflammatoires et exerce des effets neuro-protecteurs entrainant une diminution de la production de MCP-1. À l'endroit de la lésion, l'exposition à TGF-β1 réduit le nombre de macrophages libérant des médiateurs inflammatoires et module différentes populations de cellule T. B) Dans le chapitre 4, nous démontrons que la douleur neuropathique induite par la lésion du nerf sciatique est associée à une augmentation de la perméabilité de la barrière hématoencéphalique (BHE). Nous avons observé que la réaction inflammatoire de la moelle déclenchée par la lésion du nerf a un rôle clé dans la modulation de la perméabilité de la BHE. Nous avons identifié MCP-1 comme étant un déclencheur endogène de la perméabilité de la BHE, cette dernière pouvant être inversée en utilisant des molécules telles que TGF-β1 et IL-10. C) La diminution sélective des microglies grâce à la MAC-1-saporine résulte en l'affaiblissement de l'hypersensibilité mécanique et thermique à la fois dans les étapes aigues et chronique suivant la lésion du nerf suggérant une contribution importante et persistante des microglies dans la pathogenèse de la douleur neuropathique. Ces résultats étendent notre compréhension des mécanismes neuro-inflammatoire de la douleur neuropathique en plus de suggérer que l'immunosuppression ou le blocage des voies de signalisation réciproques entre les cellules neurales et non-neurales offre de nouvelles opportunités à la modification de la maladie et une meilleure gestion de la douleur.

Surgical site infections (SSI) are one of the most common complications following surgery. SSIs can incur many consequences for the patient including extended hospital stay, increased hospital costs, increased risk of entering the ICU as well as increased risk of morbidity and mortality. There are three types of SSIs: superficial incisional SSIs, the most common yet the least severe, deep incisional SSIs and organ/space SSIs, the most life-threatening. Due to the high emergence of resistant bacteria, treatment with common antibiotics is ineffective in the majority of patients with an SSI. Therefore, more attention must be paid preoperatively and intraoperatively to prevent SSIs rather than to treat these infections. The data of the literature have identified risk factors that predispose surgical patients to SSIs, however validated risk-index tools have not been developed to quantify the risk of SSI. The data for this study was obtained from the NSQIP (National Surgical Quality Improvement Program) database established at the JGH and included patients undergoing surgery at this institution between November 2009 and December 2011. The database was selected because it is prospective, non-biased and comprehensive. Bivariate analyses and stepwise multivariate logistic regression were used to identify the following five risk factors that were independently and significantly associated with the risk of an SSI: male gender, inpatient status, hypertension, corticosteroid use and partial or total dependence for everyday activities prior to surgery. Logistic regression models with an ROC curve analysis were used to develop a risk scoring tool for SSI and limits for incremental risk categories. Patients with a score below 43.17 were at low-risk, those with a score between 43.17 and 63.40 were at moderate-risk and those with a score above 63.40 were at high-risk for SSI development. Compared to low-risk patients, moderate-risk patients had a relative risk of 3.963 (p<0.001, 95% CI=2.58-6.08) of developing an SSI and high-risk patients had a relative risk of 6.48 (p<0.001, 95% CI=4.16-10.10) of acquiring an SSI. Overall, approximately 3% of low-risk patients, 10% of moderate-risk patients and 16% of high-risk patients of the NSQIP database developed any type of SSI. In this study, a simple risk tool for quantifying SSI risk created at the JGH was developed. The tool has external validity for the JGH population. Validation in other populations will be required in future studies. / Les infections du site opératoire (ISO) constituent une des plus fréquentes complications à la suite d'une chirurgie. Les ISOs ont plusieurs conséquences chez le patient incluant un séjour prolongé à l'hôpital, des coûts d'hôpitaux plus élevés, un risque plus accru de requérir des soins intensifs ainsi qu'un risque de morbidité et de mortalité plus élevé. Il existe trois types d'ISOs : ISO incisionelle superficielle, le plus commun néanmoins le moins sérieux, ISO incisionelle profonde et ISO d'organe et/ou d'espace, le plus dangereux des trois. À cause de l'émergence accrue des bactéries résistantes aux antibiotiques, les traitements de certaines ISOs sont inefficaces chez la majorité des patients avec une ISO. En conséquence, plus d'attention doit être fournie avant et pendant la chirurgie afin de prévenir à tout prix les ISOs au lieu de se concentrer sur les traitements de cettes infections. Les données pris de la littérature scientifique ont identifié des facteurs de risque qui prédisposent les patients chirurgicaux pour le développement des ISOs. Cependant, aucun modèle de risque valide n'a été produit afin de quantifier le risque de développer un ISO. Les données pour cette étude ont été obtenues grâce à la base de données NSQIP (National Surgical Quality Improvement Program) établie à l'Hôpital Général Juif et incluent les patients qui ont subi une chirurgie à cet hôpital entre novembre 2009 et décembre 2011. Nous avons choisi d'utiliser la base de données NSQIP puisqu'elle est prospective, impartiale et compréhensive. Des analyses bivariées et des régressions logistiques multivariées ont été employées afin d'identifier les cinq facteurs de risque suivants qui sont indépendamment et significativement associés avec le risque d'un ISO : le sexe male, l'hospitalisation du patient, l'hypertension, l'usage de corticostéroïdes et la dépendance (partielle ou totale) pour des activités quotidiennes avant la chirurgie. Des modèles de régression logistique avec une analyse de courbe ROC ont été utilisés pour développer un outil de pointage de risque pour ISO et délimite les catégories en incréments de risque. Les patients avec un score inférieur de 43.17 sont considérés des patients à risque minime de développer un ISO, ceux avec un score entre 43.17 et 63.40 ont un risque modéré d'acquérir un ISO et ceux avec un score de 63.40 ou plus haut ont un risque élevé pour le développement d'un ISO. Comparé à des patients qui ont un risque minime, les patients avec risque modéré ont un risque relatif de 3.96 fois (p<0.001, 95% CI=2.58-6.08) de développer un ISO et les patients à risqué élevé ont un risque relatif de 6.48 (p<0.001, 95% CI=4.16-10.10) d'acquérir un ISO. Dans cette étude, un outil de risque simple afin de quantifier le risque d'ISO à l'hôpital Général Juif a été développé. L'outil possède la validité externe pour la population de cet hôpital. La validation pour les autres populations sera requise dans des études futures.

Background: Drug related cues are potent triggers for relapse in people with cocaine dependence. Dopamine release within a limbic network of striatum, amygdala and hippocampus has been implicated in animal studies, but in humans it has been possible to measure effects in the striatum only. The objective here was to measure dopamine release in the amygdala and hippocampus using high-resolution PET with [18F]fallypride. Methods: Twelve cocaine dependent volunteers (mean age: 39.6±8.0; years of cocaine use: 15.9±7.4) underwent two [18F]fallypride HRRT PET scans, one with exposure to neutral cues and one with cocaine cues. [18F]Fallypride non-displaceable binding potential (BPND) values were derived for five regions of interest (ROI) (amygdala, hippocampus, ventral limbic striatum, associative striatum, and sensorimotor striatum,). Subjective responses to the cues were measured with visual analog scales and grouped using principal component analysis. Results: Drug cue exposure significantly decreased BPND values in all five ROI in subjects who had a high but not low craving response (limbic striatum: p=0.019, associative striatum: p=0.008, sensorimotor striatum: p=0.004, amygdala: p=0.040, and right hippocampus: p=0.025). Individual differences in the cue-induced craving response predicted the magnitude of [18F]fallypride responses within the striatum (ventral limbic: r=0.581, p=0.048; associative: r=0.589, p=0.044; sensorimotor: r=0.675, p=0.016). Conclusions: To our knowledge this study provides the first evidence of drug cue-induced dopamine release in the amygdala and hippocampus in humans. The preferential induction of dopamine release among high craving responders suggests that these aspects of the limbic reward network might contribute to drug seeking behavior. / ABRÉGÉHistorique: L'indice lié à la drogue est un puissant élément déclencheur pour une rechute chez les gens avec une dépendance à la cocaïne. La libération de la Dopamine dans le réseau limbique du striatum, les amygdales et les hippocampes a été démontrée dans les études animales, mais avec l'humain, il a été possible de mesurer les effets spécifiques au striatum. Notre objectif est de quantifier le relâchement de dopamine dans les amygdales et hippocampes en utilisant la TEP à haute résolution avec injection de [18F]fallypride. Méthode : Douze bénévoles dépendants de la cocaïne (moyenne d'âge : 39.6±8.0; nombre d'années d'utilisation de la cocaïne : 15.9±7.4) ont subi deux scans HRRT TEP avec [18F]fallypride: Une avec exposition de l'indice neutre et l'autre avec l'indice de la cocaïne. Les valeurs du potentiel de fixation (BPND) du [18F]fallypride sont tirées de cinq régions d'intérêt (RDI) (striatum limbique ventral, cortex associatif, striatum sensorimoteur, amygdales et hippocampes). Les réponses subjectives de l'indice déclencheur sont mesurées avec des échelles analogues visuelles et groupées à l'aide d'analyses en composantes principales.Résultats : L'exposition de l'élément déclencheur de la drogue diminue significativement les valeurs BPND d aux cinq RDI des sujets qui ont eu un désir élevé de consommer (striatum limbique p=0.019, cortex associatif : p=0.008, striatum sensorimoteur : p=0.004, amygdales : p=0.040 et l'hippocampe droit : p=0.025). A l'intérieur du striatum, les différences individuelles dans la réponse à la provocation de l'élément déclencheur prédisait l'ampleur des réponses [18F]fallypride (limbique ventral: r=0.581, p=0.048; cortex associatif: r=0.589, p=0.044; sensorimoteur: r=0.675, p=0.016). Conclusion: À notre connaissance, cette étude apporte la première preuve que l'élément déclencheur provoque le relâchement de la dopamine dans les amygdales et hippocampes chez les humains. L'induction préférentielle du relâchement de la dopamine parmi les répondants aux indices de la drogue suggère que ces aspects du réseau limbique pourraient contribuer aux comportements de recherche de la drogue.