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Detecção e genotipagem de papilomavírus humano de alto risco em amostras cervicais de mulheres do município de Coari, AmazonasReis, Renato dos Santos, 97-98122-6660 01 December 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-12-01 / HPV infection is the most common sexually transmitted infection worldwide and the persistence of high-risk HPV (hrHPV) is the major etiologic factor for the development of Uterine Cervical Cancer (UCC). CCU is the fourth most common type of cancer in women in the world. In Brazil, it is the third most prevalent type and, in the North, it is the first neoplasm among women. Cytological examination has been the method of choice for the screening of precursor lesions and invasive cancer. Liquid cytology (CML) and molecular detection of HPV have been considered as promising strategies to increase the effectiveness of screening. This study aimed to detect hrHPV in women with altered cytology and in a group with normal cytology in the city of Coari-Amazonas. After consent, cervical samples were collected from 455 women under routine gynecological examination at the Basic Health Units of the city of Coari from September to December 2014. The samples were collected using the cytology collection kit in liquid medium - CML (BD SurePathTM). The cytopathological slides were prepared in the semi-automated BD PrepmateTM and PrepStainTM equipment. A 0.5 mL aliquot was separated to screen hrHPV by the HPV BD Onclarity® assay using the Viper LT system, which identifies six types individually (16/18/31/45/51/52) and eight types per group of genotypes ( P1: HPV33/58; P2: HPV56/59/66 and P3: HPV35/39/68). Our results showed that the blades made by CML were 99.3% classified as satisfactory and 7,3% (33/452) presented altered results. The hrHPV were detected in 70,9% of the cytologies altered, being positive in 77,3% of the cytologies classified as LSIL, 60% of the HSIL cytologies, 50% of the ASCUS cytologies and the most found genotypes were HPV 52 and group of HPV P3 genotypes. Among the 42 normal cytologies selected, 11,9% presented hrHPV infection, being also the most common genotypes HPV 52 and group of HPVP3 genotypes. These data, in addition to tracking women with a real risk for CCU development and confirming the presence and genotypic diversity of hrHPV in this Amazon female sample, reinforce studies in the literature that present CML and molecular tests as fundamental alternative tools in screening and, consequently, CCU reduction, especially in regions where there is a high index of this pathology. / A infecção por HPV é a infeção sexualmente transmissível mais comum em todo o mundo e a persistência do HPV de alto risco (hrHPV) é o principal fator etiológico para o desenvolvimento do Câncer do Colo do Útero (CCU). O CCU é o quarto tipo de câncer mais comum em mulheres no mundo. No Brasil, é o terceiro tipo mais prevalente e, na Região Norte, é a primeira neoplasia entre as mulheres. O exame citopatológico tem sido o método de escolha para o rastreamento das lesões precursoras e do câncer invasivo. A citologia em meio líquido (CML) e a detecção molecular do HPV têm sido consideradas estratégias promissoras para aumentar a eficácia do rastreamento. Este trabalho teve como objetivo detectar hrHPV em mulheres com citologia alterada e num grupo com citologia normal na cidade de Coari-Amazonas. Após consentimento, foram coletadas amostras cervicais de 455 mulheres em exame ginecológico de rotina nas Unidades Básicas de Saúde da cidade de Coari no período de setembro a dezembro de 2014. As amostras foram coletadas utilizando-se o kit de coleta de citologia em meio líquido - CML (BD SurePathTM). As lâminas citológicas foram confeccionadas nos equipamentos semi-automatizados BD PrepmateTM e PrepStainTM. Uma alíquota 0,5 mL foi separada para rastrear hrHPV pelo ensaio HPV BD Onclarity®, através do sistema Viper LT, que identifica seis tipos individualmente (16/18/31/45/51/52) e oito tipos por grupos de genótipos (P1: HPV33/58; P2: HPV56/59/66 e P3: HPV35/39/68). Nossos resultados mostraram que as lâminas confeccionadas por CML foram 99,3% classificadas como satisfatória e 7,3% (33/452) apresentaram resultados alterados. Os hrHPV foram detectados em 70,9% das citologias alteradas, sendo positivo em 77,3% das citologias classificadas como LSIL, 60% das citologias com HSIL, 50% das citologias com ASCUS e os genótipos mais encontrados foram o HPV 52 e o grupo de genótipos HPV P3. Dentre as 42 citologias normais selecionadas, 11,9% apresentaram infecção por hrHPV, sendo, também, os genótipos mais comuns o HPV 52 e o grupo de genótipos HPVP3. Estes dados, além de rastrear mulheres com real risco para o desenvolvimento do CCU e confirmar a presença e a diversidade genotípica de hrHPV nesta amostra feminina amazônica, reforça os estudos na literatura que apresentam a CML e os testes moleculares como ferramentas alternativas fundamentais no rastreio e, consequentemente, redução do CCU, principalmente em regiões onde existe um alto índice desta patologia.
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Aspectos fisiológicos e bioquímicos da morfogênese in vitro de Dendrobium phalaenopsis e Cattleya labiataDANTAS, Maiza de Azevedo 06 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Orchids stand out among the ornamental tropical due to the exotic beauty of flowers, exuberant colors and shapes. Due to the high market demand, depredation of habitat, low rate of seed germination in natural environment and slow growth, tissue culture has been presented as an important tool for the production of seedlings of orchids on a large scale, in a reduced period of time and with greater seedling quality over conventional methods. The polysaccharide chitosan has been tested as an additive in the culture medium of some species as it stand out as a growth promoter and by acting as an antioxidant. This study aimed to evaluate the influence of dietary supplementation of chitosan to the nutrient medium in vitro cultivation of Dendrobium Phalaenopsis and Cattleya labiata in liquid and solid medium. Shoots from in vitro seedlings of both species were inoculated into vials containing 30 ml of MS medium with half the ionic strength. The experiment consisted of the combination of three chitosan concentrations (0, 15 and 20 mg.L-1) with nutrient medium in solid and liquid state. Each treatment had four replicates, each with two plants. The experimental design was completely randomized with a factorial scheme of 3x2 (chitosan concentration x physical state of the medium). For 50 days were evaluated the total fresh weight, number of shoots and roots, and were determined activities of superoxide dismutase enzyme (SOD), ascorbate peroxidase (APX) and catalase (CAT). In cultivation in liquid medium, D. phalaenopsis fresh weight showed higher treatment with 20 mg.L-1 of chitosan as the highest number of shoots was observed in both media, at the same concentration. C. labiata also exhibited higher fresh weight and number of shoots in liquid medium, but at the concentration of 15 mg.L-1 of chitosan. The solid medium favored the emission of roots in both species, but inhibited the formation of shoots of C. labiata regardless of the chitosan concentration. The best development of seedlings of both species in liquid medium coincided with increased activity of SOD directly proportional to the chitosan. This activation of SOD was not accompanied by an increase in the activity of APX or CAT, showing the action of chitosan in the dismutation of superoxide without forming hydrogen peroxide. On solid medium, the action of chitosan on the antioxidative mechanism is also provided by the activation of the APX and CAT. Verified the prevalence of the liquid medium for micropropagation of the species studied and confirmed the combination of chitosan in controlling levels of reactive oxygen species in joint action with the antioxidant enzyme system action. / As orquídeas destacam-se entre as ornamentais tropicais, devido à beleza exótica das flores, exuberância de cores e formas. Em virtude da alta demanda do mercado, depredação do habitat, baixa taxa de germinação das sementes em ambiente natural e o lento crescimento, a cultura de tecidos vem se apresentando como uma importante ferramenta para a produção de mudas de orquídeas em larga escala, em período reduzido de tempo e com maior qualidade das mudas em relação aos métodos convencionais. O polissacarídeo quitosana tem sido testado como aditivo no meio de cultura de algumas espécies por se destacar como promotor de crescimento e por sua ação como antioxidante. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a influência da suplementação de quitosana ao meio nutritivo no cultivo in vitro de Dendrobium phalaenopsis e Cattleya labiata, em meio líquido e sólido. Brotações provenientes de mudas in vitro de ambas as espécies foram inoculadas em frascos com 30 ml de meio MS com metade da força iônica. O experimento constou da combinação de três concentrações de quitosana (0, 15 e 20 mg L-1 de quitosana) em meio nutritivo em estado sólido e líquido. Cada tratamento contou com quatro repetições, cada uma com duas plantas. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial de 3x2 (concentrações de quitosana x estado físico do meio). Aos 50 dias avaliaram-se o peso fresco total, número de brotos e de raízes, e foram determinadas as atividades das enzimas superóxido dismutase (SOD), ascorbato peroxidase (APX) e catalase (CAT). No cultivo em meio líquido, D. phalaenopsis apresentou maior peso fresco no tratamento com 20 mg.L-1 de quitosana, enquanto o maior número de brotos foi observado em ambos os meios, nessa mesma concentração. C. labiata também exibiu maior peso fresco e número de brotos em meio líquido, porém na concentração de 15 mg.L-1 de quitosana. O meio sólido favoreceu a emissão de raízes das duas espécies, mas inibiu a formação de brotos de C. labiata, independente das doses de quitosana. O melhor desenvolvimento das mudas das duas espécies em meio líquido coincidiu com aumento da atividade de SOD diretamente proporcional ao da concentração de quitosana. Essa ativação da SOD não foi acompanhada pelo aumento na atividade da APX nem da CAT, evidenciando a ação da quitosana na dismutação do superóxido sem formação de peróxido de hidrogênio. Em meio sólido, a ação da quitosana no mecanismo antioxidativo se deu pela ativação da APX e CAT. Constatou-se a prevalência do meu líquido para a micropropagação das espécies estudadas e confirmou-se a ação combinada da quitosana no controle dos níveis de espécies reativas de oxigênio, em ação conjunta com o sistema enzimático antioxidativo.
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Contribuição da Citopatologia Esfoliativa no diagnóstico de lesões de cavidade oralAbrahim, Naíza Menezes Medeiros, 92-99962-0222 19 September 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-09-19 / . / JUSTIFICATION: Oral cancer is considered worldwide as a major public health
problem, more common in developing countries. The evolution can be insidious, and
often diagnosed only in advanced stages with mutilating surgeries, associated or not
with adjuvant treatment. As in other cancers, early diagnosis is a priority activity to
perform less aggressive treatments and improving survival. An activity that can
contribute to the early diagnosis of lesions with or without evident clinical
repercussion is exfoliative cytology; technique is not yet implemented for the
diagnosis of oral lesions in the Amazonas´s state. OBJECTIVES: The aim of this
study is to evaluate the efficacy of the use of exfoliative cytology for the diagnosis of
oral cavity and oropharyngeal lesions, prior to its surgical removal. MATERIAL AND
METHODS: Patients with an incisional or excisional biopsy of oral cavity lesions
attended at the Dental North Specialty Center and the Oncology Control Center
Foundation of the State of Amazonas, both in Manaus-AM, were selected. Before
completing the biopsy, and after patient's consent, a form was filled out to obtain
clinical data, followed by photodocumentation of the lesion and collection of
cytological material for the preparation of conventional smears and in a liquid
medium. These were fixed and then stained by the Papanicolaou technique. The
results of the cytology techniques were compared with each other and with those
obtained in the histopathological evaluation. RESULTS: The study sample was
composed of 50 patients, 30 females and 20 males. In 70% of the cases, the lesions
were histological interpreted as benign and 30% as malignant. Squamous cell
carcinoma was the most prevalent lesions, with 15 cases, the benign lesions
preferential site was lip and the malignant lesions were tongue, the profile´s patients
diagnosed with malignancy was of male patients, smoker and alcohol use. When
comparing the two methods of cytology we obtained 100% sensitivity, specificity
97%, accuracy 97%, Kappa 0.91. Regarding the accuracy of the cytological and
histopathological diagnosis, sensitivity was 86.6%, specificity 100%, PPV 100%, NPV
94.5%, Kappa 0.958 and accuracy 96%. CONCLUSIONS Traditional and liquid
based cytology methods were able to identify and classify cell changes with
characteristics of malignancy and have high sensitivity and specificity, without
significant differences between the two techniques tested. Cytology techniques have
proven reproducible and, if well indicated, can be routinely used for the early
detection of malignant lesions. / JUSTIFICATIVA: O câncer de boca é considerado em todo o mundo como um grave
problema de saúde pública, sendo mais incidente em países em desenvolvimento.
Sua evolução pode ser insidiosa, sendo na maioria das vezes diagnosticado apenas
em estágios avançados, em que cirurgias mutiladoras são realizadas, associadas ou
não a tratamento adjuvante. Como em outras neoplasias, a precocidade do
diagnóstico é atividade prioritária para a realização de tratamentos menos
agressivos e na melhoria da sobrevida. Uma atividade que pode contribuir para o
diagnóstico precoce de lesões orais e de orofaringe, com ou sem repercussão
clínica mais evidente, é a citologia esfoliativa, técnica ainda não implementada para
avaliação das referidas lesões no Estado do Amazonas. OBJETIVOS: Avaliar a
eficácia do uso da citopatologia esfoliativa para diagnóstico de lesões de cavidade
oral antes de sua remoção cirúrgica. MÉTODOS: Foram selecionados pacientes
com indicação de biópsia incisional ou excisional de lesões de cavidade oral e
orofaringe, atendidos no Centro de Especialidade Odontológica Norte e na
Fundação Centro de Controle de Oncologia do Estado do Amazonas, ambos em
Manaus-AM. Antes da realização da biópsia, e após anuência do paciente, foi
realizado preenchimento de formulário para obtenção de dados clínicos, seguido de
fotodocumentação da lesão e de coleta de material citológico para confecção de
esfregaços convencional e em meio líquido. Estes foram fixados e então corados
pela técnica de Papanicolau. Os resultados das técnicas de citologia foram
comparados entre si e com aqueles obtidos na avaliação
histopatológica. RESULTADOS: A amostra foi constituída de 50 pacientes, na qual
30 eram do sexo feminino e 20 do sexo masculino. E em 70% dos casos a lesão foi
interpretada à histopatologia como de natureza benigna e em 30%, como maligna. A
localização preferencial das lesões benignas foi em lábio e das lesões malignas, em
língua, sendo que destas, a mais prevalente foi o carcinoma escamocelular, com 15
casos. O perfil dos pacientes com diagnóstico de malignidade foi de pacientes do
sexo masculino, tabagistas e etilistas. Quando os dois métodos de citologia foram
comparados entre si foram obtidos os seguintes resultados: sensibilidade 100%,
especificidade 97%, acurácia 97%, Kappa 0,91. Com relação à acuidade do
diagnóstico citológico com o histopatológico, a sensibilidade foi de 86,6%, a
especificidade de 100%, o VPP 100%, o VPN 94,5%, Kappa 0,958 e acurácia 96%.
CONCLUSÕES: Os métodos de citologia tradicional e em meio líquido foi capaz de
identificar e classificar as alterações celulares características de malignidade e
possuem alta sensibilidade e especificidade, sem que houvesse diferenças
significativas entre as duas técnicas testadas. As técnicas de citologia se mostraram
reprodutíveis e se bem indicadas podem ser utilizadas rotineiramente para detecção
precoce de lesões malignas.
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