Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The main role of bees in nature is pollination of angiosperms, because of it bees are responsible for biological diversity maintenance and food production as well. Brazilian stingless bees (Meliponini) pollinate 40-90% of native trees and are found worldwide, wherein Brazil is the main representative of these bees. The Melipona scutellaris species (popularly known as the uruçu do nordeste ) is distributed geographically from Bahia to Rio Grande do Norte State, in the Zona da Mata region. The understanding of caste differentiation in Melipona scutellaris is extremely important for conservation and management of this bee. In 1950, Kerr proposed the model two genes/two-locus to explain the caste differentiation in Melipona; when well fed double heterozygous larvae develop into queens and underfed larvae or homozygous for these genes become workers, as a result of low production of Juvenile Hormone. Antennae is the main organ of bee olfactory system playing an important role in mantaining of colony social organization and in the performance of caste and sexes as well. The antennae houses a great diversity of sensilla, which are very important to bee chemical communication as receptors of compounds in the air such as pheromones, leading to typical behavioral responses of individuals, species, genera or families. The second chapter we show the results from scanning electron microscopy which demonstrates a heterogeneous distribution pattern of sensilla along the antenna. The main types of sensillum found in the antennae of M. scutellaris were: trichodea, basiconica, placodea, coeloconica, ampullacea and campaniformia. The most abundant sensilla found were trichodea and placoid in both castes and sexes. The ampullacea and coeloconica sensilla were found only in the distal flagellomeres of females and campiniformes and basiconica sensilla were not found in the analyzed antennae male. Larvae pre-defecant showed structures that are morphologically similar to sensilla. These structures has pores at its base and were found in many parts of the head area, which may represent an important gateway of volatile compounds from the larval food. xvii These compounds, possibly can activate genes involved in caste differentiation of Melipona scutellaris. The third chapter introduces the detection, cloning and sequencing of transcripts of the MscuCSP2, MscuCSP6, MscuOBP4 and MscuOBP8 genes from Melipona scutellaris larvae. We detected the MscuOBP8 protein in the L2, L3 (1-3), LPD LD larval stages of development using a monoclonal antibody selected by phage display. The 3D structure of the MscuOBP8 protein showed an internal cavity composed of hydrophobic amino acids confirming its binding function to hydrophobic compounds such as volatile substances. According to our data, the morphology of the head and especially adult antenna of the pre-defecating larvae (stage responsive to the action of juvenile hormone) and also the caracterization of genes and proteins of olfactory system in larvae of Melipona scutellaris can be correlated with caste differentiation mechanism in Melipona scutellaris proposed by Kerr. / O principal papel das abelhas na natureza é a polinização de angiospermas, com papel fundamental na manutenção da diversidade biológica, bem como na produção de alimentos de modo geral. As abelhas brasileiras sem ferrão (Meliponini), polinizam de 40 a 90% das árvores nativas e estão presentes em todo o mundo, sendo o Brasil o principal representante dessas abelhas. A espécie Melipona scutellaris (popularmente conhecida como uruçu do Nordeste) está distribuída na região da Zona da Mata, ocorrendo desde a Bahia até o Rio Grande do Norte. O entendimento sobre a diferenciação de castas em Melipona scutellaris é um aspecto extremamente importante para a conservação e manejo dessa abelha, principalmente no Brasil. Em 1950, Kerr propôs um modelo, para explicar a diferenciação de casta em Melipona, de dois genes/dois lócus, de modo que larvas duplo heterozigotas, quando bem alimentadas, desenvolvem-se em rainhas e larvas mal alimentadas ou homozigotas para esses genes, tornam-se operárias, em consequência de baixa produção de Hormônio Juvenil. Para a organização social da colônia e desempenho adequado dos papéis das castas e sexos, as abelhas apresentam um elaborado sistema olfatório, do qual a antena é o principal órgão sensorial, abrigando grande diversidade de sensilas. As sensilas têm papel na comunicação química intra e interespecífica, atuando como receptores de compostos químicos no ar, como os feromônios, levando à respostas comportamentais característico de indivíduos, espécies, famílias ou gêneros. No segundo capítulo apresentamos, de acordo com as imagens de microscopia de eletrônica de varredura, um padrão heterogêneo de distribuição das sensilas ao longo da antena. Os principais tipos de sensilas identificados nas antenas de M. scutellaris foram: tricóide, basicônica, placóide, celocônica, ampulácea e campiniforme, sendo que as sensilas tricóides e placóides foram as mais abundantes em todas as castas e sexo. As sensilas ampulácea e celocônica foram encontradas apenas nos flagelômeros distais das fêmeas e xv campiniformes e basicônicas não foram encontradas nas antenas de macho analisadas. As larvas LPD apresentaram estruturas morfologicamente semelhantes à sensilas, com poros em sua base, em diversas regiões da área analisada, que podem representar uma importante porta de entrada de compostos voláteis presentes no alimento larval que possam ativar genes envolvidos na diferenciação de castas de Melipona scutellaris. No terceiro capítulo, nós detectamos transcritos, clonamos e sequenciamentos os genes MscuCSP2, MscuCSP6, MscuOBP4 e MscuOBP8 em larvas de M. scutellaris. Selecionamos um anticorpo monoclonal por phage display que nos permitiu detectar a proteína MscuOBP8 nos estágios L2, L3 (1- 3), LPD e LD do desenvolvimento larval. A estrutura 3D da proteína MscuOBP8 apresentou cavidade interna composta por aminoácidos hidrofóbicos corroborando com sua função carreadora de compostos hidrofóbicos tais como, substâncias voláteis. Neste contexto, este trabalho apresenta a morfologia da antena de adultos e, principalmente, da porção anterior de larva do estágio pré-defecante do desenvolvimento (sensível à ação do hormônio juvenil) e também a caracterização de genes e proteínas do sistema olfatório em larva de Melipona scutellaris a fim de correlacioná-los com o mecanismo de diferenciação de castas em Melipona scutellaris proposto por Kerr. / Doutor em Genética e Bioquímica

Daily rhythms of insects are generated by a circadian system localized in the protocerebrum and in the optic lobes of the central nervous system. The circadian system is composed by coupled oscillators connected to input and output pathways. The oscillator generates rhythms by molecular processes, linked in feedback loops. In the input pathways the components are involved in light mediated-transduction. In the output, several neuropeptides are involved. Foragers of the stingless bee Melipona quadrifasciata exhibit a daily activity rhythm. Foragers have been used here to identify circadian components, through three different approaches: I) analysis of gene expression; II) identification of structures in the central nervous system; III) comparative study of neuropeptides possibly related with the circadian system, using Apis mellifera as the reference species. I) Fragments of putative clock genes were cloned. Only period (per) gene showed rhythmic expression, peaked at 1h after lights off. Non statistically significant rhythms were detected in cryptochrome (cry), clock and cycle genes expression. II) Antibodies against PER, CRY (an input pathway protein) and pigment dispersing hormone (an output pathway neuropeptide) evinced several areas in the brain and in the optic lobes. PER and CRY were localized in the optic lobes and in fibers in the protocerebral region, in a rhythmic pattern. PDH was observed in cell bodies in the lateral protocerebrum, in projections in the brain and in some fibers in the optic lobes. III) Neuropeptides probably related to the circadian system, were found in A. mellifera and M. quadrifasciata. Some of them: tachykinin-related peptide, allatostatin, and FMRF-related peptide were rhythmic and present in specie-specific patterns. The circadian system of M. quadrifasciata showed particularities in the putative clock components when compared with A. mellifera and other insects. The expression, localization, distribution and temporal dynamics of the circadian system point out a novel, specific feature / Ritmos diários em insetos são gerados por um sistema circadiano localizado no protocerebrum e nos lobos ópticos do sistema nervoso central. O sistema circadiano é composto por osciladores acoplados às vias de aferência e eferência. O oscilador gera ritmos através de mecanismos moleculares, integrantes de alças de retroalimentação. Nas vias de aferência estão envolvidos componentes que participam da transdução mediada da luz. Diversos neuropeptídeos fazem parte das vias de eferência. Forrageiras da abelha sem ferrão Melipona quadrifasciata exibem um ritmo diário de atividade. Forrageiras foram utilizadas neste trabalho para identificar componentes circadianos, através de três diferentes abordagens: I) análise da expressão gênica, II) identificação de estruturas no sistema nervoso central, III) estudo comparado de neuropeptídeos possivelmente relacionados com o sistema circadiano, utilizando como espécie referência Apis mellifera. Fragmentos de prováveis genes do relógio foram clonados. Somente o gene period (per) mostrou expressão rítmica, o pico ocorreu 1h após o início do escuro. cryptochrome (cry), clock e cycle não apresentaram diferença estatística na expressão rítmica. I) Anticorpos contra PER, CRY (proteína da via de aferência) e \"pigment dispersing hormone\" (PDH, neuropeptídeo da via de eferência) marcaram diversas áreas no cérebro e nos lobos ópticos. PER e CRY foram localizados nos lobos ópticos, em fibras da região protocerebral, com um padrão rítmico. PDH foi observado em corpos celulares no protocerebrum lateral, em projeções no cérebro e em algumas fibras nos lobos ópticos. II) Neuropeptídeos, provavelmente relacionados com o sistema circadiano, foram detectados em A. mellifera e M. quadrifasciata. Alguns deles: \"tachykinins-related peptides\", alatostatinas, e \"FMRF-related peptides\" são rítmicos, com padrões espécie-específicos. O sistema circadiano de M. quadrifasciata mostrou particularidades nos prováveis componentes do relógio quando comparados com A. mellifera e outros insetos. A expressão, localização, distribuição e dinâmicas temporais apontam para características específicas da organização do sistema circadiano

Uma colônia de abelhas sem ferrão é composta pela rainha, operárias de diferentes idades, que desempenham diferentes tarefas e por machos, presentes apenas na época anterior à fecundação da rainha. Dentre as operárias, somente as mais velhas forrageiras - mantém contato direto com o ciclo claro/escuro ambiental. Ritmos biológicos estão presentes e são gerados pelo sistema circadiano localizado no sistema nervoso central e no complexo retrocerebral. Este sistema é composto por uma rede de múltiplos osciladores integrados com vias aferentes, provenientes do sistema sensorial, e eferentes. As vias eferentes se expressam através de componentes nervosos, neurohormonais e hormonais. Neste trabalho, o sistema nervoso central e o complexo retrocerebral de forrageiras de Melipona quadrifasciata anthidioides foi mapeado, usando procedimentos histológicos clássicos, complementados por ensaios de imunocitoquímica. Anticorpos gerados contra Fasciclina II, PDF e Corazonina foram utilizados e a marcação obtida foi específica. Neurópilas estão presentes, tanto nos lobos ópticos como no cérebro e são áreas de referência para identificação das diferentes estruturas. As neurópilas do lobo óptico: lâmina, medula e lóbula, são regiões bem delimitadas e evidentes. O protocérebro é o gânglio cerebral mais dorsal e com o maior volume. Nele encontram-se dois conjuntos neuropilares: os corpora pedunculata, de forma cogumelar, que ocupam grande parte do protocérebro; e o complexo central, na linha média. Duas regiões protocerebrais concentram células neurossecretoras: pars intercerebralis e pars lateralis. O complexo retrocerebral é composto por duas glândulas pares: corpora cardiaca e corpora allata. A localização espacial destas estruturas foi reconstruída em imagens tridimensionais. Reconhece-se no sistema nervoso central e no complexo retrocerebral de M. quadrifasciata estruturas com características morfológicas e localização espacial específicas da espécie. Os resultados encontrados neste trabalho são as informações anatômicas básicas imprescindíveis para estudos posteriores que visam identificar os componentes e a organização do sistema circadiano em abelhas sem ferrão. / The stingless bees colony comprises a queen, workers of diferent ages that perform different tasks and males only present before the queen´s fecundation. Among the workers, only the oldest ones foragers keep a direct contact with the light/dark environmental cycle. Biological rhythms are present and are generated by the circadian system located in the central nervous system and in the retrocerebral complex. This system is composed by a web of multiple oscillators coupled to input pathways from the sensorial system and output pathways. The output pathways consist in nervous, neurohormones and hormones components. In this study, the central nervous system and the retrocerebral complex of Melipona quadrifasciata foragers were analyzed by classical histological procedures complemented by immunocitochemical essays. Specific reactive antibodies against Fasciclin II, PDF and Corazonin have been used. The optic lobes neuropils: lamina, medulla and lobula are distinct and evident. The protocerebrum is the dorsal most and largest ganglia. In this structure two neuropilar groups are present: corpora pedunculata, the bilateral mushroom bodies that occupy a large portion of the protocerebrum; and the central complex in the median line. Neurosecretory cells cluster together in two protocerebral regions: pars intercerebralis and pars lateralis. The retrocerebral complex is composed by two pairs of glands: corpora cardiaca and corpora allata. In this work, tridimensional images show their specific localization in the nervous system. In both, central nervous system and retrocerebral complex of M. quadrifasciata, species specific traces can be recognized in morphological characteristics and spatial localization of certain structures. The results on the anatomy of stingless bees nervous system shown here are indispensable to proceed with studies that aim to identify the components and the organization of the circadian system of stingless bees.

Daily rhythms of insects are generated by a circadian system localized in the protocerebrum and in the optic lobes of the central nervous system. The circadian system is composed by coupled oscillators connected to input and output pathways. The oscillator generates rhythms by molecular processes, linked in feedback loops. In the input pathways the components are involved in light mediated-transduction. In the output, several neuropeptides are involved. Foragers of the stingless bee Melipona quadrifasciata exhibit a daily activity rhythm. Foragers have been used here to identify circadian components, through three different approaches: I) analysis of gene expression; II) identification of structures in the central nervous system; III) comparative study of neuropeptides possibly related with the circadian system, using Apis mellifera as the reference species. I) Fragments of putative clock genes were cloned. Only period (per) gene showed rhythmic expression, peaked at 1h after lights off. Non statistically significant rhythms were detected in cryptochrome (cry), clock and cycle genes expression. II) Antibodies against PER, CRY (an input pathway protein) and pigment dispersing hormone (an output pathway neuropeptide) evinced several areas in the brain and in the optic lobes. PER and CRY were localized in the optic lobes and in fibers in the protocerebral region, in a rhythmic pattern. PDH was observed in cell bodies in the lateral protocerebrum, in projections in the brain and in some fibers in the optic lobes. III) Neuropeptides probably related to the circadian system, were found in A. mellifera and M. quadrifasciata. Some of them: tachykinin-related peptide, allatostatin, and FMRF-related peptide were rhythmic and present in specie-specific patterns. The circadian system of M. quadrifasciata showed particularities in the putative clock components when compared with A. mellifera and other insects. The expression, localization, distribution and temporal dynamics of the circadian system point out a novel, specific feature / Ritmos diários em insetos são gerados por um sistema circadiano localizado no protocerebrum e nos lobos ópticos do sistema nervoso central. O sistema circadiano é composto por osciladores acoplados às vias de aferência e eferência. O oscilador gera ritmos através de mecanismos moleculares, integrantes de alças de retroalimentação. Nas vias de aferência estão envolvidos componentes que participam da transdução mediada da luz. Diversos neuropeptídeos fazem parte das vias de eferência. Forrageiras da abelha sem ferrão Melipona quadrifasciata exibem um ritmo diário de atividade. Forrageiras foram utilizadas neste trabalho para identificar componentes circadianos, através de três diferentes abordagens: I) análise da expressão gênica, II) identificação de estruturas no sistema nervoso central, III) estudo comparado de neuropeptídeos possivelmente relacionados com o sistema circadiano, utilizando como espécie referência Apis mellifera. Fragmentos de prováveis genes do relógio foram clonados. Somente o gene period (per) mostrou expressão rítmica, o pico ocorreu 1h após o início do escuro. cryptochrome (cry), clock e cycle não apresentaram diferença estatística na expressão rítmica. I) Anticorpos contra PER, CRY (proteína da via de aferência) e \"pigment dispersing hormone\" (PDH, neuropeptídeo da via de eferência) marcaram diversas áreas no cérebro e nos lobos ópticos. PER e CRY foram localizados nos lobos ópticos, em fibras da região protocerebral, com um padrão rítmico. PDH foi observado em corpos celulares no protocerebrum lateral, em projeções no cérebro e em algumas fibras nos lobos ópticos. II) Neuropeptídeos, provavelmente relacionados com o sistema circadiano, foram detectados em A. mellifera e M. quadrifasciata. Alguns deles: \"tachykinins-related peptides\", alatostatinas, e \"FMRF-related peptides\" são rítmicos, com padrões espécie-específicos. O sistema circadiano de M. quadrifasciata mostrou particularidades nos prováveis componentes do relógio quando comparados com A. mellifera e outros insetos. A expressão, localização, distribuição e dinâmicas temporais apontam para características específicas da organização do sistema circadiano

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O presente trabalho foi conduzido no perÃodo de abril de 2006 a marÃo de 2008, nos departamentos de Zootecnia e de Biologia, da Universidade Federal do CearÃ. O objetivo desta pesquisa foi investigar, atravÃs de dados moleculares, as relaÃÃes filogenÃticas de algumas abelhas indÃgenas sem ferrÃo do tÃxon Melipona Illiger, 1806, nativas do Brasil. Procurou-se fornecer subsÃdios para facilitar uma futura revisÃo taxonÃmica sobre essas abelhas, e desse modo gerar informaÃÃes para o desenvolvimento de um criatÃrio racional, adequado Ãs diferentes espÃcies deste tÃxon, dessa forma contribuindo para o melhor aproveitamento comercial e conservaÃÃo dessas abelhas. As amostras de abelhas foram coletadas em vÃrios estados das regiÃes Norte, Nordeste e Sudeste do Brasil. Por meio da extraÃÃo, amplificaÃÃo e seqÃenciamento parcial da regiÃo ITS1 do DNA ribossÃmico nuclear dessas amostras, somadas Ãs seqÃÃncias parciais da regiÃo ITS1 de outras abelhas do mesmo tÃxon retiradas do GenBank, pÃde-se verificar os seguintes aspectos: alinhamento mÃltiplo, composiÃÃo nucleotÃdica, matriz de distÃncia genÃtica e reconstruÃÃo filogenÃtica entre as mesmas. Os resultados mostraram que o alinhamento mÃltiplo produziu uma interseÃÃo central com o comprimento de apenas 141 pb e a mÃdia da distÃncia genÃtica entre todas as seqÃÃncias estudadas do tÃxon Melipona foi de 7,6%. As Ãrvores construÃdas usando algoritmos baseados nos mÃtodos de agrupamento do vizinho mais prÃximo (NJ), mÃxima parcimÃnia (MP) e mÃxima verossimilhanÃa (MV) para as seqÃÃncias parciais da regiÃo pesquisada mostraram essencialmente a mesma topologia, sendo esta bem definida em trÃs grandes clados: Clado 1- contendo as sequÃncias de M. subnitida, M. quadrifasciata e M. mandacaia (todas pertencendo ao subgÃnero Melipona); Clado 2 â abrangendo as seqÃÃncias de M. quinquefasciata e M. fasciculata (ambas pertencendo ao subgÃnero Melikerria); Clado 3 â tendo como representantes no presente trabalho, as seqÃÃncias de M. mondury, M. flavolineata e M. scutellaris (todas pertencentes ao subgÃnero Michmelia). Todas as trÃs Ãrvores filogenÃticas foram capazes de recuperar a monofilia tanto do gÃnero Melipona como tambÃm a dos trÃs clados, que apareceram como grupos monofilÃticos / The present work was carried out from April 2006 to March 2008, in the departments of Biology and Animal Science in the Universidade Federal do CearÃ. The aim of this research was to investigate, through molecular data, the phylogenetic relationships among some Brazilian stingless bee species belonging to the taxon Melipona Illiger, 1806. It was attempted to obtain information that could facilitate a taxonomic revision of this bee group in the future and to generate information useful to the development of rational rearing adequate to the distinct species of this taxon, contributing to a better commercial exploitation and conservation of these bee species. Bee samples were collected in various states of the North, Northeast and Southeast regions of Brazil. Through the extraction, amplification and partial DNA sequencing of the ITS1 region of nuclear ribosomal DNA of those samples and the partial sequences of the ITS1 region of other bees of the same taxon searched in the GenBank, it was possible to observe the following parameters: multiple alignment, nucleotide composition, matrixes of genetic distances and phylogenetic reconstruction. Results showed that multiple alignment resulted produced a central intersection of only 141 bp long and the average of the genetic distance among all the studied sequences of the taxon Melipona was of 7,6%. The phylogenetic trees built using algorithms based on the methods of the Neighbor-Joining (NJ), Maximum Parsimony (MP) and Maximum Likelihood (ML) for the partial sequences showed essentially the same topology, which was clearly distinct in three great clados: Clado 1 - contained the sequences of M. subnitida, M. quadrifasciata and M. mandacaia (all belonging to the subgenus Melipona); Clado 2 - included the sequences of M. quinquefasciata and M. fasciculata (both belonging to the subgenus Melikerria); and Clado 3 â represented in this work by the sequences of M. mondury, M. flavolineata and M. scutellaris (all belonging to the subgenus Michmelia). The three phylogenetic trees were capable to recover the monophyly of the genus Melipona as well as of the three clados, that appeared as monophyletic groups

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A pesquisa foi desenvolvida no perÃodo de janeiro de 2003 a marÃo de 2006, nos Departamentos de Zootecnia, e Biologia da Universidade Federal do CearÃ, localizada no municÃpio de Fortaleza, estado do CearÃ. As amostras de abelhas foram coletadas nos estados do CearÃ, Piauà e GoiÃs. O objetivo desta tese foi estudar a diversidade genÃtica de populaÃÃes da abelha sem ferrÃo Melipona quinquefasciata, ocorrendo naturalmente na Chapada do Araripe (Sul do CearÃ), na Chapada da Ibiapaba (Oeste do CearÃ), na cidade de Canto do BuritÃ-PI, e na cidade de LuziÃnia-GO (Centro-Oeste do Brasil), visando contribuir para a correta classificaÃÃo taxonÃmica da populaÃÃo nordestina e dar subsÃdios iniciais para trabalhos de criaÃÃo racional desta espÃcie, em colmÃias para produÃÃo de mel, motivando entÃo que a atual aÃÃo extrativista e predatÃria, reverta-se numa atividade zootÃcnica produtiva e ecologicamente sustentÃvel. As regiÃes do DNA ribossÃmico nuclear 18S e ITS-1 parcial foram extraÃdas e seqÃenciadas, podendo-se verificar os seguintes aspectos: ComposiÃÃo nucleotÃdica, matrizes de distÃncia genÃtica, mÃltiplos alinhamentos e cladogramas. Os resultados mostraram alto grau de similaridade entre as amostras, 0,008 para regiÃo 18S e 0,015 para o ITS-1 parcial. O tamanho das seqÃÃncias correspondente à regiÃo 18S, foram de 1823 a 1869, do ITS-1 491 a 572. O cladograma gerado para o 18S, apresentou um Ãnico clado, porÃm, o ITS-1 quando acrescido de amostras externas (M. quadrifasciata, M subnitida, M scutellaris, M. mandaÃaia), derivou-se em trÃs grupos, refletindo os subgÃneros descritos pela taxonomia morfolÃgica. A distÃncia entre as Ãreas nÃo se correlacionou significativamente com a dissimilaridade das abelhas para o 18S, porÃm houve correlaÃÃo com o ITS-1 parcial, que agregou a amostra oriunda do estado do PiauÃ. Conclui-se (i) que as abelhas amostradas nos estados do Cearà e Piauà sÃo indistinguÃveis em termos moleculares das abelhas do estado de GoiÃs, sugerindo tratar-se da mesma espÃcie, embora apresentando algum nÃvel de variabilidade entre as populaÃÃes; (ii) os resultados encontrados refletem a taxonomia por dados morfolÃgicos, para a espÃcie Melipona quinquefasciata; (iii) o distanciamento geogrÃfico sugeriu algum grau de alteraÃÃo no genoma das abelhas que nidificam nos trÃs estados estudados; (iv) a regiÃo ITS-1 parcial do DNA ribossÃmico nuclear, mesmo em pequenas amostragens de abelhas, pode ajudar a resolver dÃvidas taxonÃmicas ao nÃvel de subgÃneros, em Melipona / The research was carried out from January 2003 to March 2006, at the Department of Animal Science and Department of Biology in the Federal University of CearÃ, in Fortaleza, CearÃ. Bee samples were collected in the states of CearÃ, Piauà and GoiÃs, Brazil. The objective of this work was to study the genetic variability of populations of the stingless bee Melipona quinquefasciata, which occurs naturally in the plateau of Araripe (South of CearÃ), in the plateau of Ibiapaba (West of CearÃ), in Canto do BuritÃ, Piauà and LuziÃnia-GoiÃs (Center-Western, Brazil). Our aims were to contribute to the correct taxonomic classification of the Northeastern population and to give initial support to future work on the rational breeding of this species. Meliponiculture in rational hives for honey production will stimulate the change of the present predatory actions into a productive bee rearing activity which is ecologically sustainable. The regions of nuclear ribosomal DNA 18S and partial ITS-1 were extracted and sequenced and the following aspects were determined: nucleotid composition, matrixes of genetic distances, multiple alignments and cladograms. Results showed a high degree of similarity among the samples: 0,008 to region 18S, and 0,015 to partial ITS-1. The sequencesâ size found to region 18S varied: from 1823 to 1869, and to ITS-1 from 491 to 572. The cladogram made to 18S presented a single clade. However, when external samples (M. quadrifasciata, M. subnitida, M. scutellaris, M. mandaÃaia), were added to ITS-1, three groups were formed reflecting the described subgenus by the morphological taxonomy. Distance among the localities where samples were colleted was not significantly correlated to the dissimilarity of the bees to 17 18S. Nevertheless, there was a correlation with partial ITS-1, which contained the Piauà sample. Our conclusions are: (i) the bee samples from Cearà and Piauà cannot be distinguished, in molecular terms, from the bee samples of GoiÃs, suggesting they are the same species, although presenting some level of variability among the populations; (ii) the results reflect the taxonomy based in morphological aspects for Melipona quinquefasciata; (iii) the geographical distance suggested some level of alteration in the genoma of bees which inhabit in the three studied regions; (iv) the region partial ITS-1 of the nuclear ribosomal DNA, even in small bee samples, can help to solve taxonomic doubts at the subgenus level, in Melipona

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A pesquisa foi realizada na fazenda SÃo SebastiÃo, localizada no municÃpio de Mulungu â CE. Os dados foram coletados e trabalhados no perÃodo de Novembro de 2009 a Junho de 2010, com o objetivo de estudar os visitantes florais e a polinizaÃÃo do cafà (Coffea arabica L.) ecolÃgico e sombreado das cultivares Mundo Novo e Maragogipe. Foram estudados a biologia floral e os requerimentos de polinizaÃÃo das cultivares; o comportamento de pastejo e avaliaÃÃo dos frutos apÃs 100 dias dos tratamentos de polinizaÃÃo. Os resultados mostraram que Apis mellifera foi a espÃcie mais freqÃente nas flores (9  0,42, n = 455) seguida de Trigona fulviventris (4  0,52, n = 206), Melipona rufiventris (4  0,42, n = 151), Nannotrigona sp. (3  0,48, n = 148), Trigona spinipes (3  0,43, n = 157) e Xylocopa grisescens (2  0,78, n= 38). ApÃs 100 dias dos tratamentos de polinizaÃÃo (polinizaÃÃo livre, restrita com saco de papel, restrita com saco de organza, polinizaÃÃo cruzada manual e geitonogamia) verificamos diferenÃas significativas / The survey was conducted on the farm SÃo SebastiÃo, located in the city of Mulungu - CE. Data were collected and studied during the period November 2009 to June 2010 with the aim of studying the floral visitors and pollination of coffee (Coffea arabica L.) and green shade of Mundo Novo and Maragogipe. We studied the floral biology and pollination requirements of the cultivars, the grazing behavior and evaluation of fruit after 100 days of pollination. The results showed that Apis mellifera was the most frequent in the flowers (9  0.42, n = 455) followed by Trigona fulviventris (4  0.52, n = 206), Melipona rufiventris (4  0.42, n = 151), Nannotrigona sp. (3  0.48, n = 148), Trigona spinipes (3  0.43, n = 157) and Xylocopa grisescens (2  0.78, n = 38). After 100 days of pollination (open pollination, with narrow paper bag, with narrow organza bag, manual cross-pollination and geitonogamy) showed significant differences (Mundo Novo X2 = 44.9495, DF=4,p<0.005; Maragogipe: X2 = 59.8649, df = 4, p <0.005) between treatments with respect to viable fruits. The open pollinated differed significantly (P <0.05) of all treatments for Mundo Novo. In the cultivar Maragogipe, the free pollination, manual cross-pollination and geitonogamy presented the highest number of viable fruits and did not differ. However, these treatments differed significantly (P <0.05) than treatment with restricted pollination bag and this in turn also differed from the restricted pollination treatment with organza bag. The total weight of 100 days after the pollination treatments showed no significant differences between cultivars at a significance level of 5%. It is concluded that the Arabic coffee can produce fruits under any circumstances tested. Despite being selfcompatible, also supports the cross-pollination that leads to an increase in productivity. The wind and gravity did not favor an increase in fruit set fruit. Species Apis mellifera, Melipona rufiventris and Xylocopa grisescens recorded behavior of potential pollinators.

Uma colônia de abelhas sem ferrão é composta pela rainha, operárias de diferentes idades, que desempenham diferentes tarefas e por machos, presentes apenas na época anterior à fecundação da rainha. Dentre as operárias, somente as mais velhas forrageiras - mantém contato direto com o ciclo claro/escuro ambiental. Ritmos biológicos estão presentes e são gerados pelo sistema circadiano localizado no sistema nervoso central e no complexo retrocerebral. Este sistema é composto por uma rede de múltiplos osciladores integrados com vias aferentes, provenientes do sistema sensorial, e eferentes. As vias eferentes se expressam através de componentes nervosos, neurohormonais e hormonais. Neste trabalho, o sistema nervoso central e o complexo retrocerebral de forrageiras de Melipona quadrifasciata anthidioides foi mapeado, usando procedimentos histológicos clássicos, complementados por ensaios de imunocitoquímica. Anticorpos gerados contra Fasciclina II, PDF e Corazonina foram utilizados e a marcação obtida foi específica. Neurópilas estão presentes, tanto nos lobos ópticos como no cérebro e são áreas de referência para identificação das diferentes estruturas. As neurópilas do lobo óptico: lâmina, medula e lóbula, são regiões bem delimitadas e evidentes. O protocérebro é o gânglio cerebral mais dorsal e com o maior volume. Nele encontram-se dois conjuntos neuropilares: os corpora pedunculata, de forma cogumelar, que ocupam grande parte do protocérebro; e o complexo central, na linha média. Duas regiões protocerebrais concentram células neurossecretoras: pars intercerebralis e pars lateralis. O complexo retrocerebral é composto por duas glândulas pares: corpora cardiaca e corpora allata. A localização espacial destas estruturas foi reconstruída em imagens tridimensionais. Reconhece-se no sistema nervoso central e no complexo retrocerebral de M. quadrifasciata estruturas com características morfológicas e localização espacial específicas da espécie. Os resultados encontrados neste trabalho são as informações anatômicas básicas imprescindíveis para estudos posteriores que visam identificar os componentes e a organização do sistema circadiano em abelhas sem ferrão. / The stingless bees colony comprises a queen, workers of diferent ages that perform different tasks and males only present before the queen´s fecundation. Among the workers, only the oldest ones foragers keep a direct contact with the light/dark environmental cycle. Biological rhythms are present and are generated by the circadian system located in the central nervous system and in the retrocerebral complex. This system is composed by a web of multiple oscillators coupled to input pathways from the sensorial system and output pathways. The output pathways consist in nervous, neurohormones and hormones components. In this study, the central nervous system and the retrocerebral complex of Melipona quadrifasciata foragers were analyzed by classical histological procedures complemented by immunocitochemical essays. Specific reactive antibodies against Fasciclin II, PDF and Corazonin have been used. The optic lobes neuropils: lamina, medulla and lobula are distinct and evident. The protocerebrum is the dorsal most and largest ganglia. In this structure two neuropilar groups are present: corpora pedunculata, the bilateral mushroom bodies that occupy a large portion of the protocerebrum; and the central complex in the median line. Neurosecretory cells cluster together in two protocerebral regions: pars intercerebralis and pars lateralis. The retrocerebral complex is composed by two pairs of glands: corpora cardiaca and corpora allata. In this work, tridimensional images show their specific localization in the nervous system. In both, central nervous system and retrocerebral complex of M. quadrifasciata, species specific traces can be recognized in morphological characteristics and spatial localization of certain structures. The results on the anatomy of stingless bees nervous system shown here are indispensable to proceed with studies that aim to identify the components and the organization of the circadian system of stingless bees.

105 f. / Submitted by Cynthia Nascimento (cyngabe@ufba.br) on 2013-03-05T12:42:58Z No. of bitstreams: 1 Rodrigo da Cruz Ferreira.pdf: 1855377 bytes, checksum: ed2258da7fe50ebec3bcae6b7a4be4d4 (MD5) / Approved for entry into archive by Alda Lima da Silva(sivalda@ufba.br) on 2013-03-05T21:08:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Rodrigo da Cruz Ferreira.pdf: 1855377 bytes, checksum: ed2258da7fe50ebec3bcae6b7a4be4d4 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-05T21:08:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigo da Cruz Ferreira.pdf: 1855377 bytes, checksum: ed2258da7fe50ebec3bcae6b7a4be4d4 (MD5) / CAPES / A caracterização físico-química e microbiológica do pólen faz-se importante na busca do controle de qualidade e até mesmo em uma padronização do pólen de abelhas nativas. Com o objetivo de se verificar a composição físico-química mineral e microbiológica de amostras do pólen recolhido pelas abelhas Melipona scutellaris L., foram realizadas coletas do samburá de 10 colônias em dois momentos, (05/2010 e 05/2011) por equipe técnica da EBDA seguindo as metodologias disposta pelo Codex Alimentarius. O material foi fornecido pelo Meliponário Velho Simião, localizado em Cajazeiras de Abrantes, Camaçari-BA, (latitude 12°48’39.35’’S / longitude 38°15’37.19’’W) no bioma Mata Atlântica. O clima é tropical úmido e temperatura anual entre 23 a 35°C. Os experimentos foram executados no Laboratório LAPAAC-UFBA e nos laboratórios de Abelhas (LABE) e Nutrição Animal da Central de Laboratórios da Agropecuária - EBDA Foram obtidas as seguintes médias para o pólen in natura: 19,7% de proteínas; 2,4% de cinzas; 51,7% de umidade; 2,76% de fibras; 2,5% de lipídios; 1738,64mEq kg-1 de pólen de acidez titulável, pH igual a 3,8, e a Aw apresentou valor de 0,82. Após utilização das técnicas de desidratação (liofilizador, por corrente de ar frio e refrigerador frost-free) os teores encontrados foram respectivamente 34%, 32% e 33% de proteínas; 3,92%, 4,31% e 3,61% de cinzas; 17%,19% e 18% de umidade; 4,03%, 3,27% e 3,20% de fibras; 5,9%, 4,5%,4,0% de lipídios;1531,84mEq kg-1, 1217,01 mEq kg-1, 1556,74 mEq kg-1 de acidez titulável, pH igual a 4,14, 4,28 e 4,00. Os valores de Aw para os respectivos tratamentos de desidratação foram 0,15, 0,56, 0,22. O Mn foi analisado em espectrofotômetro de Absorção Atômica, forno de grafite. Os minerais (Ca, Mg, Zn, Cu e Fe ) foram analisados em equipamento de absorção por chama. Os resultados encontrados em mg/kg para (Mn), (Zn), (Cu), (Mg), (Ca) e (Fe) foram respectivamente:45,3; 53,7; 23,4; 2499,8 e 108,1. As análises microbiológicas foram realizadas para coliformes a 45ºC, Eschericia coli, bolores e leveduras, Bacillus cereus, clostrídios sulfito redutores a 46ºC, Salmonella sp., de acordo com a APHA – American Public Health Association – 4ª edição, 2001. Não houve variação nos resultados nas amostras testadas (in natura e liofilizada) para coliformes a 45ºC, Eschericia coli, bolores e leveduras respectivamente (< 3,0NMP/g, < 3,0NMP/g e < 1,0 x 102UFC/g). Bacillus cereus e clostrídios sulfito redutores a 46ºC na amostra liofilizada apresentaram respectivamente os valores (2,2 x 103UFC/g e 1,2 x 103 UFC/g) enquanto que na amostra in natura (2,0 x 102UFC/g e 1,2 x 102UFC/g). As análises realizadas nas amostras desidratadas por corrente de ar frio e frost-free apresentaram os seguintes resultados respectivamente 4,0 e < 3,0NMP/g para Coliformes a 45° C , < 3,0 e < 3,0NMP/g para Escherichia coli. 1,4 x 10³ UFC/g e < 1,0 x 10² UFC/g para Bolores e leveduras, 3,7 x 10³ e 8,0 x 10² UFC/g para Bacillus cereus e 2,4 x 10² e 1,1 x 10³ UFC/g para Clostrídios sulfito redutor 46° C. As amostras apresentaram ausência de Salmonella. (UFC/g – Unidade Formadora de Colônia por grama, NMP/g – Número mais provável por grama). Para análise estatística foi utilizado o Programa R sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey em nível de 5%. Foram verificadas diferenças significativas nas médias para os diferentes parâmetros estudados, com exceção da porcentagem de fibras Quando comparamos frost-free com a técnica que utiliza corrente de ar frio não apresenta variação significativa. Os resultados demonstraram que a técnica de liofilização foi mais eficiente na redução da Aw, e umidade do pólen assim como também conservou maiores teores de proteínas, lipídios e fibras no produto. Quando se pretendeu selecionar a técnica mais acessível e efetiva na desidratação e conservação do pólen Melipona scutellaris L. o refrigerador frost-free apresentou-se bastante eficaz, pelo baixo custo de aquisição do equipamento frente aos outros.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-18T11:28:39Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 621043 bytes, checksum: 5d6e419c0131dcfeb408c083cb39b79a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-18T11:28:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 621043 bytes, checksum: 5d6e419c0131dcfeb408c083cb39b79a (MD5) Previous issue date: 2005-02-22 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foi avaliado o potencial da abelha-sem-ferrão Melipona quadrifasciata Lepeletier (Hymenoptera: Apidae) como polinizador de tomateiros (híbrido longa-vida; variedade Rodas) sob cultivo hidropônico e conceitos orgânicos em casa-de- vegetação em Minas Gerais, Brasil. O efeito do tratamento polinização pelas abelhas mais polinização manual não diferiu do efeito do tratamento polinização das abelhas ou manual. O (1) diâmetro máximo, a (2) altura e a circunferência do fruto (quociente entre 1 e 2), não diferiram entre os tratamentos. Entretanto, os frutos resultantes das flores visitadas somente por M. quadrifasciata, apresentaram 10,8% menos sementes (massa seca) do que os produzidos por polinização manual. Na variedade testada, as flores protegidas com sacos de poliéster (não polinizadas) não produziram frutos. A aparente baixa eficiência da polinização feita por M. quadrifasciata poderia ser atribuída à sobreposição de apenas 30 minutos entre o pico máximo de forrageamento das abelhas e o horário de maior receptividade do estigma das flores. Concluiu-se que é possível usar M. quadrifasciata como polinizador de tomateiros cultivados em ambiente protegido devido ao (i) aumento na qualidade dos frutos, considerando-se a diminuição das injúrias mecânicas quando comparadas à polinização manual tradicional, (ii) a não- diminuição do tamanho do fruto e (iii) ao alto preço do produto no mercado. Todavia, para o uso sustentável de M. quadrifasciata como polinizador em técnicas de criação e manejo em ambientes protegidos, cativeiro precisam ser desenvolvidas e difundidas, o que poderia prevenir sérios declínios das populações naturais desta abelha. Isto poderia ocorrer caso o único modo de aquisição de novas colônias para uso em programas de polinização fosse a retirada delas de seu ambiente natural. / The neotropical stingless bee Melipona quadrifasciata Lepeletier was evaluated for pollinating tomatoes (long-life hybrid variety Rodas) grew in a plastic house with hydroponic system and organic concepts in Minas Gerais State, Brazil. Flowers not pollinated did not set any fruit. Pollination by bees plus manual pollination did not differ from either bee or manual pollination. (1) Maximum diameter, (2) fruit height and roundness (quotient between 1 and 2) was not significantly different between treatments, but flowers visited by M. quadrifasciata, set fruits with 10.8% less seeds (dry mass) than ones set from manual pollination. This apparently low efficiency of M. quadrifasciata as pollinator might be attributed to the overlap of only 30 minutes between highest bee foraging activity and highest flower stigma receptivity. Yet it was concluded M. quadrifasciata may be a feasible pollinator of greenhouse tomatoes because of (i) the observed increase in fruit quality due lower mechanical injury compared to traditional manual pollination, (ii) no significant decrease in fruit size, and (iii) high price of such product in the market. Some considerations for sustainable use of M. quadrifasciata as greenhouse pollinator are presented. Since while techniques for keeping captive colonies for M. quadrifasciata are currently available, the current method for acquiring new ones is removing them from the forest and, if colony demand was created for commercial use, techniques for captive colonies growing and distribution for pollination use must be developed to prevent serious declines in wild populations.