Submitted by Cleber Casali (clebercasali@ufv.br) on 2017-06-01T19:10:55Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 641690 bytes, checksum: 192a865a962268cc1e6e97448d12fefd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-01T19:10:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 641690 bytes, checksum: 192a865a962268cc1e6e97448d12fefd (MD5) Previous issue date: 2004-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Melipona rufiventris é uma espécie de meliponíneo que encontra-se ameaçada de extinção no estado de Minas Gerais. Até recentemente, as “formas” encontradas tanto em regiões de mata Atlântica quanto em regiões de cerrado dentro deste estado eram, consideradas uma única espécie. No entanto, devido ao grande número de diferenças morfológicas encontradas entre espécimens provenientes de diferentes regiões, a “forma” encontrada em regiões de mata passou a ser considerada como Melipona mondury e a “forma” presente no cerrado como M. rufiventris. Com o objetivo de estimar a variabilidade genética em populações dessas duas espécies, foram feitas análises com nove “primers” microssatélites em 45 colônias coletadas em diferentes localidades do estado de Minas Gerais. O seqüenciamento de alguns dos locos demonstrou que os fragmentos amplificados realmente continham regiões microssatélites. Considerando todas as amostras analisadas, 7 locos foram polimórficos, sendo que alguns alelos estavam presentes somente em M. rufiventris e outros eram exclusivos de M. mondury. A análise de agrupamento permitiu a formação de dois grupos distintos: o primeiro constituído pelas colônias de M. mondury e o segundo pelas de M. rufiventris. Nesse último observou-se a formação de dois subgrupos, sendo que as colônias de Brasilandia de Minas e Dom Bosco encontraram-se separadas das demais colônias de cerrado. A porcentagem de locos polimórficos foi de 33,3% para as espécies M. mondury e M. rufiventris e 22,2% para as colônias de Brasilandia de Minas/Dom Bosco. A heterozigosidade observada nessas populações foi de 0,1159 para M. mondury, 0,0684 para M. rufiventris e 0,0222 para as colônias de Brasilandia de Minas/ Dom Bosco. M. mondury e M. rufiventris apresentaram valores de F ST próximo de 0,25, mostrando que essas espécies possuem uma elevada estruturação populacional, com grande diferenciação genética entre as subpopulações. / Melipona rufiventris is one species of the stingless bee that is becoming very rare in Minas Gerais state. Therefore it was included on the endangered species’ list of Minas Gerais. Until recently, the different "forms" of M. rufiventris founded in the Atlantic forest areas or in the cerrado areas of this state, were considered as a unique species. However, due to the high number of morphological differences founded among specimens from different geographic regions, the "form" found in forest areas passed to be called Melipona mondury while the "form " found in the cerrado was assumed to be M. rufiventris. Aiming to estimate the genetic variability in populations of these two species, we analysed samples from 45 colonies collected at different places of the Minas Gerais state with nine microsatellites primers. The sequencing of some of these loci revealed that the amplified fragments really corresponded to microsatellite areas. Considering all the samples, 7 loci were polymorphic, with some alleles presented only in M. rufiventris while others were exclusive to M. mondury. The Grouping Analysis allowed the establishment of two different groups: the first constituted by the M. mondury’s colonies and the second by the M. rufiventris’ colonies. In the last one, the establishment of two subgroups was observed, being the colonies from Brasilândia de Minas/Dom Bosco separated from the others colonies from the cerrado. The percentage of polymorphic loci was 33.3% to the species M. mondury and M. rufiventris and 22.2% to the colonies from Brasilândia de Minas/Dom Bosco. The observed heterozygosity in these populations was of 0.1159 for M. mondury, 0.0684 for M. rufiventris and 0.0222 for the colonies from Brasilândia de Minas/ Dom Bosco. M. mondury and M. rufiventris presented F ST close to 0.25, indicating that their subpopulations are well structured, with a great genetic differentiation among them.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-07-04T17:58:11Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1029728 bytes, checksum: 27cf111f65f8a6c9fcf25d49108b08b0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-04T17:58:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1029728 bytes, checksum: 27cf111f65f8a6c9fcf25d49108b08b0 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A polinização é um dos serviços ecológicos essenciais para a manutenção de ambientes naturais e agrários. Dentre os polinizadores, as abelhas representam um grupo diverso que exerce papel fundamental nesse processo. O declínio das populações de abelhas tem sido relatado, sendo a utilização intensiva de agrotóxicos apontada como um dos principais fatores responsáveis por esse impacto. No Brasil, a espécie sem ferrão Melipona capixaba está ameaçada de extinção. Sua região de ocorrência é amplamente impactada pela presença de diversas culturas agrícolas e utilização de agrotóxicos. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade dos agrotóxicos thiamethoxam, glifosato e mancozeb sobre operárias de M. capixaba e Apis mellifera. Foram realizados bioensaios de sobrevivência mediante exposição por contato e ingestão, em doses de campo e diluição desta dose a 1/10. As abelhas sobreviventes desses bioensaios foram submetidas ao teste de voo. Foram realizados também bioensaios de repelência. Nos bioensaios de sobrevivência as duas doses do inseticida thiamethoxam nas duas vias de exposição, e a dose de campo do herbicida glifosato na exposição por ingestão diminuíram a sobrevivência dos indivíduos de M. capixaba e A. mellifera. As duas doses do fungicida mancozeb diminuíram a sobrevivência apenas das abelhas A. mellifera expostas por contato, entretanto nos bioensaios de voo realizados com as sobreviventes dessa via de exposição, esses tratamentos causaram alterações na capacidade de voo das duas espécies. Na exposição por ingestão as doses de campo do herbicida glifosato causaram prejuízos no voo das duas espécies, assim como a dose de campo do fungicida, entretanto apenas para A. mellifera. Por fim foi verificada também uma ausência de repelência dos agrotóxicos testados para as duas espécies, possivelmente levando a uma alta exposição das operárias durante o forrageamento. Esses resultados sugerem que os três agrotóxicos testados causam impactos negativos na população da abelha ameaçada de extinção M. capixaba e para a espécie A. mellifera. / Pollination is one of the essential ecological services for the maintenance of natural and agrarian environments. Among the pollinators, bees represent a diverse group that plays a fundamental role in this process. The decline of bee populations has been reported, with the intensive use of pesticides being pointed as one of the main factors responsible for this impact. In Brazil, the stingless bee Melipona capixaba is threatened with extinction. Its region of occurrence is largely impacted by the presence of various agricultural crops and the use of agrochemicals. In this sense, the objective of this work was to evaluate the toxicity of the pesticides thiamethoxam, glyphosate and mancozeb on workers of M. capixaba and Apis mellifera. Survival bioassays were performed by contact and ingestion exposure at field doses and dilution of this dose to 1/10. The surviving bees of these bioassays were submitted to the flight test. Repellency bioassays were also performed. In the survival bioassays the two doses of the thiamethoxam insecticide in the two exposure routes, and the field dose of the herbicide glyphosate on ingestion exposure decreased the survival of the individuals of M. capixaba and A. mellifera. The two doses of the mancozeb fungicide decreased the survival of A. mellifera bees exposed by contact, however in the flight bioassays performed with the survivors of this route of exposure, these treatments caused changes in the flight capacity of both species. In the exposure by ingestion the field doses of the glyphosate herbicide caused losses in the flight of both species, as well as the field dose of the fungicide, only for A. mellifera. Finally, it was verified an absence of repellency of the pesticides tested for the two species, possibly leading to a high exposure of the workers during the foraging. These results suggest that the three pesticides tested have negative impacts on the population of the threatened stingless bee M. capixaba and on the A. mellifera species.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:30:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4709.pdf: 2150073 bytes, checksum: f0bb3ba0ad56cbde2ee098ee576b5f7d (MD5) Previous issue date: 2012-04-23 / Universidade Federal de Minas Gerais / Research on stimulus equivalence constitutes an experimental approach to assess variables underlying the development of symbolic behavior, which depends on the establishment of conditional relations between stimuli. Matching-to-sample procedure is typically used for teaching conditional discriminations, and it has been also used in early studies with honeybees. Bees are capable of learning conditional relations between stimuli, such as specific identity relations, arbitrary relations between visual stimuli, arbitrary relations between colors and odors and generalized identity matching. Therefore, basic processes involved in symbolic behavior could be studied using honeybees as an experimental model. The main objective of the present study was to establish conditional relations in honeybees. Another goal was to test for select and reject-control relations in simple discrimination baselines, since these controlling relations are involved in responding by exclusion. In Experiment 1, eleven bees Melipona quadrifasciata and Melipona rufiventris were individually trained to perform an identity matching-to-sample task. Identity relations were demonstrated by most of the bees. In Experiment 2, four M. rufiventris were individually trained on arbitrary relations. One of these bees demonstrated an increasing trend in accuracy in an arbitrary MTS task over the last sessions. In Experiment 3, twenty Apis mellifera and four M. rufiventris were trained to perform arbitrary relations. Additionally, Apis mellifera bees were presented with a symmetry test. Apis mellifera bees had acquired arbitrary MTS, but Melipona rufiventris performed at chance level. In the symmetry test, Apis mellifera performed at chance level. In Experiment 4, twenty M. rufiventris were individually trained to perform a simple discrimination task. Subsequently, each honeybee was presented to a select and reject control test. Select as much reject control had developed in simple discrimination training with M. rufiventris. On one hand, these data indicate that in most cases the arbitrary matching performance was not accurate. Moreover, symmetry relations did not emerge from training. On the other hand, most subjects responded highly accurately in simple discrimination and identity matching tasks. Most subjects had also demonstrated select and reject-control relations. These advancements in research on basic learning processes in bees may be a promising starting point for investigating the prerequisite repertoires involved in symbolic behavior. / Pesquisas sobre formação de classes de equivalência constituem uma abordagem experimental sobre o desenvolvimento do comportamento simbólico, o qual depende essencialmente do desenvolvimento de relações condicionais entre estímulos. O procedimento de emparelhamento com o modelo (MTS) é tipicamente usado para ensinar relações condicionais e tem sido usado também em pesquisas com abelhas. Abelhas são capazes de aprender discriminações condicionais, como relações de identidade, relações arbitrárias entre estímulos visuais, relações arbitrárias entre cores e odores e responder generalizado por identidade. Abelhas poderiam, então, ser usadas como um modelo experimental para o estudo de processos básicos envolvidos no desenvolvimento de precursores do comportamento simbólico. O principal objetivo da presente pesquisa foi estabelecer discriminações condicionais em abelhas. Outro objetivo foi testar o controle por seleção e controle por rejeição em linhas de base de discriminação simples, tendo em conta que essas relações de controle estão envolvidas no responder por exclusão. No Experimento 1, onze abelhas M. quadrifasciata e M. rufiventris foram treinadas em uma tarefa de emparelhamento por identidade. A tarefa foi aprendida pela maioria das abelhas. No Experimento 2, quatro M. rufiventris foram individualmente treinadas em uma tarefa de MTS arbitrário. Uma dessas abelhas apresentou indícios de aprendizagem da tarefa. No Experimento 3, vinte Apis mellifera e quatro M. rufiventris foram treinadas em uma tarefa de MTS arbitrário. Além disso, foi conduzido um teste de simetria com as Apis mellifera. A tarefa de MTS arbitrário foi aprendida pelas A. mellifera, mas não pelas M. rufiventris. No teste de simetria, as A. mellifera apresentaram desempenho com nível de precisão ao acaso, isto é, o comportamento não ficou sob controle da nova função de modelo. No Experimento 4, vinte M. rufiventris foram treinadas em uma tarefa de discriminação simples. Em seguida, foi conduzido um teste de controle por seleção e rejeição. Foi demonstrado tanto o controle por seleção quanto por rejeição. Por um lado, esses dados mostram que não foram produzidas discriminações condicionais estáveis. Além disso, não ocorreu emergência de simetria. Por outro lado, foram sistemática e fidedignamente produzidas discriminações simples, MTS por identidade e relações de controle por seleção e por rejeição em abelhas. Esses avanços no estudo de processos básicos de aprendizagem em abelhas podem ser um ponto de partida seguro para o estudo de repertórios relacionais complexos.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-05-03T15:15:54Z No. of bitstreams: 1 Sheylla Araujo da Silva.pdf: 1281249 bytes, checksum: 35ab93d3a30418140a86454d6ccdb6cd (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-03T15:15:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sheylla Araujo da Silva.pdf: 1281249 bytes, checksum: 35ab93d3a30418140a86454d6ccdb6cd (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Because biodiversity of the Amazon region and the enzyme potential of yeasts, this study aimed to select a producing yeast L-asparaginase, identify and assess the production parameters. In addition to analyzing the isolated influence of glucose in the biomass and L-asparaginase, biochemically characterize the enzymatic activity, perform pre-purification and to assess the degree of purity of the enzyme and its potential as an agent antiacrilamida. There were used 21 strains of yeasts and yeast with increased L-asparaginase activity was identified by DNA sequencing using NL-1 and NL-4 primers and used for evaluation of production parameters using two statistical planning, Plackett-Burman (PB) and Composite Central (CCD) . Glucose was evaluated by varying the concentration in the medium (0.5%, 1.0% and 5.0%) and through a factorial design 22 having as variables glucose (%) and aeration (%). A pre- purification was performed with ammonium sulfate evaluated on SDS-PAGE 12.5%. The test agent was aintiacrilamida as by inhibiting the formation of a polyacrylamide of 30% acrylamide solution. The selected yeast was identified as Tilletiopsis minor and the significant variables were presented by PB L- asparagine, yeast extract and MgSO4 , presenting 1975.67 U.mL-1 through L- aspraginase CCD 25 g.L-1 of L-asparagine, 40 g.L-1 yeast extract, 0.35 g.L-1 MgSO4 with medium adjusted to pH 5.0 at 28 °C for 72 hours. The results on the influence of glucose alone revealed that high levels of glucose decrease the production of L-asparaginase obtained with maximal activity at 1.0% glucose and aeration of 40%. The pH and optimum temperature of the enzyme was 7.0 and 50 °C respectively, and the Na+ ion with higher inhibitory effect on the L-asparaginase activity. The L-asparaginase produced showed a 7.8 purification factor in the fraction of 20-40% ammonium sulfate and 100% inhibited the formation of polyacrylamide . The electrophoretic profile showed a sharper band 80.5 kDa . The results show the Tilletiopsis minor studied as new producer of L-asparaginase source with potential for applications in the food industry. / Devido a biodiversidade da Região Amazônica e ao potencial enzimático das leveduras, o presente trabalho visou O presente trabalho buscou selecionar uma levedura produtora de L-asparaginase, identificar e avaliar os parâmetros de produção. Além de analisar a influência isolada da glicose na produção de biomassa e de L-asparaginase, caracterizar bioquimicamente a atividade enzimática, realizar pré-purificação e avaliar o grau de pureza da enzima e seu potencial como agente antiacrilamida Foram utilizadas 21 linhagens de leveduras e a levedura com maior atividade de L-asparaginase foi identificada por sequenciamento de DNA utilizando os primers NL-1 e NL-4 e utilizada para a avaliação dos parâmetros de produção através de dois planejamentos estatísticos, Plackett-Burman (PB) e Central Composto (CCD). A glicose foi avaliada variando a concentração no meio (0,5%, 1,0% e 5,0%) e através de planejamento fatorial 22 tendo como variáveis glicose (%) e aeração (%). A pré-purificação foi realizada com sulfato de amônia avaliada em SDS-PAGE 12,5%. O Teste como agente aintiacrilamida foi mediante a inibição da formação de poliacrilamida de uma solução de acrilamida a 30%. A levedura selecionada foi identificada como Tilletiopsis minor e as variáveis significativas apresentadas pelo PB foram L-asparagina, extrato de levedura e MgSO4, apresentando 1975,67 U.mL-1 de L-aspraginase através do CCD com 25 g.L-1 de L-asparagina, 40 g.L-1 de extrato de levedura, 0,35 g.L-1 de MgSO4 com meio ajustado para pH 5,0, a 28°C, durante 72 horas. Os resultados obtidos sobre a influência isolada da glicose revelaram que altos níveis de glicose diminuem a produção de L-asparaginase obtendo atividade máxima com glicose a 1,0% e aeração de 40%. O pH e temperatura ótima da enzima foi 7,0 e 50°C, respectivamente, sendo o Na+ o íon com maior efeito inibitório na atividade de L-asparaginase. A L-asparaginase produzida apresentou um fator de purificação de 7,8 na fração de 20-40% de sulfato de amônio e inibiu 100% a formação de poliacrilamida. O perfil eletroforético demonstrou uma banda mais acentuada de 80,5kDa. Os resultados obtidos evidenciam a Tilletiopsis minor estudada como nova fonte produtora de L-asparaginase.com potencial para aplicações na indústria de alimentos.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-25T08:40:33Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 7983251 bytes, checksum: 5f6d6830b746d01b9e45183b84281ef3 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-25T08:40:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 7983251 bytes, checksum: 5f6d6830b746d01b9e45183b84281ef3 (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A importância das abelhas para a polinização é inquestionável. Apesar disso, populações desses organismos têm sofrido consideráveis reduções no mundo por diversos fatores que incluem o uso de pesticidas. Abelhas eussociais geralmente vivem em ninhos, onde parte do desenvolvimento pós-embrionário ocorre em favos fechados, constituindo empecilho para o estudo do desenvolvimento. Portanto, para se estudar o efeito de pesticidas nesses organismos sem interferência de fatores ambientais é necessário a criação em condições controladas em laboratório, sendo que em condições naturais parte da exposição a pesticidas ocorre via alimentação larval. Nesse sentido, o aprimoramento de métodos de criação pode contribuir para o entendimento de como pesticidas afetam processos morfofisiológicos e moleculares nas abelhas mediante exposição das larvas a esses compostos. A presente tese objetivou desenvolver e/ou melhorar técnicas de criação de abelhas in vitro e realizar testes toxicológicos para avaliar a plasticidade cerebral e comportamental em abelhas sem ferrão. Além disso, desordens ocasionadas por pesticidas em abelhas sem ferrão e abelhas melíferas também foram estudadas. De maneira geral, os resultados obtidos na presente tese permitiram concluir que: 1) a criação de abelha sem ferrão M. quadrifasciata em laboratório retarda o desenvolvimento de algumas regiões cerebrais em relação às abelhas mantidas em condições naturais; 2) o inseticida sintético imidaclopride e o bioinseticida spinosade são altamente tóxicos a abelha sem ferrão M. quadrifasciata e também promovem efeitos subletais em operárias dessa espécie; 3) é possível reduzir consideravelmente a mortalidade de Apis mellifera criadas in vitro mediante o uso de procedimentos descritos de forma inédita no presente estudo e 4) todos os pesticidas causaram mortalidade e efeitos subletais (reduções no peso corporal, alterações na atividade de genes associados a destoxificação, distúrbios no desenvolvimento e estruturas das antenas) em abelhas melíferas em virtude da exposição de concentrações realistas de campo durante a fase larval. / The importance of bees for pollination is unquestionable. Nevertheless, populations of these organisms have suffered considerable reductions in the world by several factors including the use of pesticides. Eusocial bees usually live in nests, where part of the post-embryonic development occurs in closed combs, what makes difficult the study of bee development. Therefore, to study the impact of these pesticides without interference from environmental factors, the rearing of these organisms under controlled conditions in laboratory is necessary whereas part of pesticide exposure occurs via larval feeding in natural conditions. In this sense, the improvement of rearing methods can contribute to the understanding of how pesticides affect morphophysiological and molecular processes in bees by exposure of larvae to these compounds. This work aimed to develop and/or improve in vitro bee rearing techniques and perform toxicological tests to assess brain and behavioral plasticity in stingless bees. In addition, disorders caused by pesticides in stingless bees and honeybees were also studied. In general, it can be concluded that: 1) the rearing of stingless M. quadrifasciata laboratory de reased de elop e t of so e ees’ rai regio s compared with bees kept in natural conditions; 2) the synthetic insecticide imidacloprid and bio-insecticide spinosad are highly toxic to stingless M. quadrifasciata and also promote sublethal effects on workers of this species; 3) the mortality of Apis mellifera reared in vitro can be greatly reduced by using procedures described in the present study and 4) all pesticides tested caused mortality and sublethal effects (reductions in body weight, changes in gene activity associated with detoxification, developmental disorders and structures of the antennas) in honey bees after exposure during the larval stage to realistic field pesticide concentrations.

A abelha Melipona subnitida, popularmente conhecida como jandaíra, é uma espécie endêmica do nordeste brasileiro, que possui distribuição em uma ampla gama de ambientes bastante diversificados pertencentes, principalmente ao bioma Caatinga. Estas abelhas apresentam grande importância para as populações locais por serem uma das espécies mais viáveis para criação, uma vez que se adaptam melhor às condições adversas do meio e são bastante promissoras quando multiplicadas, apresentando grande potencialidade para produção de mel e pólen, além de sua importância ecológica como polinizador. No entanto, essas abelhas encontram-se atualmente ameaçadas devido, em grande parte, à destruição de seu habitat e de seus ninhos naturais para coleta do mel. Apesar de sua relevância, estudos populacionais de espécies de meliponíneos ainda são muito escassos, assim como a urgência em se compreender a estrutura e a dinâmica de suas populações para o monitoramento e conservação de espécies. Neste contexto, o trabalho teve como objetivo avaliar a variabilidade de M. subnitida em diferentes localidades do nordeste brasileiro através da morfometria geométrica das asas anteriores e sequenciamento de um fragmento do gene mitocondrial COI. Foram coletadas operárias de 95 colônias de Areia Branca RN, Barreirinhas MA, Parnaíba PI, Fortaleza CE, Jandaíra RN e Mossoró RN. Para análise do padrão de venação da asa foram utilizadas aproximadamente 10 operárias por colônia, sendo marcados 11 marcos anatômicos em cada asa. Os resultados demonstraram estruturação dos grupos com separação estatisticamente significativa (<0,0001) exceto entre Areia Branca e Jandaíra. O teste de validação cruzada identificou corretamente 88,89% dos indivíduos dentro de suas respectivas áreas. As análises moleculares identificaram 11 haplótipos e presença de alto número de haplótipos exclusivos. A diversidade nucleotídica () de 0,00543e uma diversidade haplotípica (Hd) de 0,79. Tanto as distâncias morfológicas, como os resultados moleculares indicam que a variabilidade entre as populações amostradas está relacionada tanto ao ambiente em que as amostras foram coletadas como com a distância geográfica entre tais localidades, indicando a existência de ecótipos localmente adaptados. / The Melipona subnitida bee, popularly known as jandaíra, is an endemic species to northeastern Brazil, with a wide geographical distribution. These bees are extremely important for local people, since they are adapted to the adverse environmental conditions, are very promising when multiplied, and present good potential for honey and pollen production, allied to their ecological importance as pollinators. However, these bees are currently largely threatened due to the destruction of their habitat and their natural nests for honey collection. Despite its relevance, population studies of stingless bee species are still very scarce, as well as the urgency in understanding the structure and dynamics of their populations for monitoring and species conservation. In this context, this study aimed to evaluate the variability of M. subinitida in different localities in northeastern Brazil through geometric morphometrics of the forewing and sequencing of COI mitochondrial gene fragment. We collected workers from 95 colonies from Areia Branca RN, Barreirinhas MA, Parnaíba PI, Fortaleza CE, Jandaíra RN and Mossoró RN. To analyze the pattern of wing venation, we used approximately 10 workers per colony, and 11 landmarks were plotted on each wing. The results showed groups structures with separation statistically significant (<0,0001) except between Areia Branca and Jandaíra. The cross-validation test correctly identified 88,89% of individuals within their respective areas. Molecular analysis identified 11 haplotypes and presence of high number of exclusive haplotypes among the populations. The nucleotide diversity () of 0,00543 and haplotype diversity (Hd) of 0,79. Both morphological distances and molecular results indicated that variability among the sampled populations is related both to the environment in which samples were collected as to the geographical distance between these locations, indicating the existence of locally adapted ecotypes.

As abelhas eussociais apresentam uma estrutura organizacional que promove, ao longo da vida das operárias, uma série de transições comportamentais, regidas pela divisão etária de trabalho. Operárias inicialmente confinadas no interior do ninho, onde o ambiente é homogêneo e controlado, passam por uma série de mudanças, culminando na atividade de forrageamento, quando são expostas às variações do ambiente externo. A transição entre as diferentes atividades acompanha uma alteração no nível de contato e percepção das pistas ambientais, conforme as tarefas levam as operárias para as proximidades do tubo de saída e, finalmente, para o exterior. Os componentes temporais rítmicos, associados à complexa arquitetura espacial das colônias e características da divisão de trabalho são essenciais para a organização eussocial, mantendo a seqüência e coordenação das atividades exercidas por operárias e rainha. O objetivo deste trabalho foi medir o consumo de oxigênio de operárias de Melipona quadrifasciata, visando caracterizar aspectos cronobiológicos em diferentes etapas do desenvolvimento pós-embrionário. Três grupos de operárias foram estudados: recém-emergidas (24-48h de idade, grupo i), de idade média (10-15 dias, grupo ii) e forrageadoras (mais de 25 dias, grupo iii). As medidas de consumo de oxigênio foram feitas por respirometria intermitente, em condição de escuro constante, 25 &#61617; 1&#61616;C, alimento e água ad libitum. Os experimentos foram realizados com operárias individualmente isoladas, o que garante um protocolo experimental no qual o ritmo endógeno seja caracterizado sem a interferência de fatores sociais e mantendo a variação interindividual. Cada série temporal foi estabelecida pelo agrupamento de séries, com 24h de duração cada uma, de diferentes indivíduos mantidos em condições experimentais idênticas. Os resultados obtidos comprovam que as operárias dos três grupos apresentam ritmicidade circadiana no consumo de oxigênio, mostrando que os ritmos circadianos estão presentes nas operárias desde a idade de 24-48h. Entre os parâmetros dos ritmos circadianos, o que apresentou maior variação foi a amplitude do consumo de oxigênio: o grupo i exibiu valores de amplitude aproximadamente dez vezes menores que os do grupo iii, sendo os valores do grupo ii intermediários. Freqüências ultradianas significativas foram observadas em todas as operárias estudadas, sendo que a potência espectral em relação à freqüência circadiana foi maior para a idade de 24-48h. Nestas operárias mais jovens, é provável que a ritmicidade ultradiana esteja relacionada à atividade de oviposição da rainha. Os dados obtidos na primavera mostram ciclos de consumo médio de oxigênio mais claros em relação aos dados de inverno. Na primavera a amplitude do consumo de oxigênio foi maior, exceto para as forrageadoras, o que pode ser um indício de estratégias sazonais ligadas à atividade reprodutiva (POP). Os componentes temporais rítmicos, associados aos componentes espaciais, são essenciais na manutenção e coordenação das atividades em uma colônia de abelhas eussociais. A execução de diferentes tarefas inter-relacionadas depende de uma coordenação precisa entre as operárias. Dessa forma, o estudo da organização rítmica, associada ao polietismo etário, traz informações importantes para a compreensão da biologia de uma colônia eussocial. / The eusocial organization promotes a behavioural development of adult worker-bees, based on an age-related division of labour. Workers switch from tasks inside the hive to foraging and undergo a progressive transition from controlled environment of the hive to a diurnal exposure to the environment outside the hive. The coordination of queen and workers’ activities depends on the association of spatial organization of the colony and rhythmicity of bees. This work aimed to detect possible changes in chronobiological parameters during the post-embryonic development of Melipona quadrifasciata workers. Three groups of workers were studied: age 24-48h (group i), 10-15 days old (group ii) and foragers (more than 25 days old, group iii). Oxygen consumption of individually isolated workers was determined by inttermitent respirometry (experiment conditions were constant darkness, 25 &#61617; 1&#61616;C, water and food ad libitum). For the establishment of a time series, a set of 24h measurements were made under the same conditions in different individuals of the same age. This protocol allowed the characterization of endogenous rhythms with no social influence. Chi-square periodogram analysis revealed that oxygen consumption of all workers studied was controlled by an endogenous circadian clock. M. quadrifasciata workers are therefore rhythmic since the age of 24-48h. Cosinor analysis revealed that amplitude of oxygen consumption changed according to age: group i showed low values, while group iii showed large values (about ten times larger than group i). Ultradian frequencies were detected for all worker groups. The ultradian strength was larger in group i, and might be related to the frequency of queen ovipositions. Data collected during spring showed clearer oxygen consumption cycles in comparison to data collected during winter. Amplitude values were larger in spring, except for group iii, suggesting that seasonal strategies may occur in reproductive activities (POP). The association of rhythmic and spatial properties is essential to the precise organization of an eusocial bee colony. Thus, the study of rhythmicity integrated to division of labour is important to elucidate many questions concerning eusocial bees biology.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO LUZ PIEDAD VIILLAREAL.pdf: 1064710 bytes, checksum: c2a90c98dd31ff419482cc3156edb69b (MD5) Previous issue date: 2009-12-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Stingless bees have gained attention because their importance as pollinators of a wide range of native plant species and because they represent an important income source for meliponicultors. In order to contribute to the knowledge of the chemical composition and antioxidant activity of pollen collected by the stingless bee Melipona seminigra Cockerell, 1919 (uruçú-boca-de-renda), an economical specie in the Amazon region, two samples were collected during two distinguished weather season in the Brazilian Amazon, dry (august 2008, 50 mm) and rainy (april 2008, 300 mm) season. The centesimal composition analysis showed that both samples have a similar nutritional value and all values are in accord to the recommended by the Brazilian Ministery of Agriculture, but carbohydrate contents, which were ca 10 % above. In both samples of pollen, the main botanical source was Miconia dispar (Melastomataceae) (rainy season: 53.19% and dry season: 95.60%) followed by pollen of different Myrtaceae species (rainy: 25.64% and dry 0.96%) and Mimosa pudica pollen (Fabaceae; rainy: 16.81% and dry: 3.44%). Aqueous and ethanolic extracts from samples collected in the two different seasons were prepared and the ethanolic extracts were fractionated by liquid-liquid partition into hexanes, ethyl acetate and hydroalcoholic fractions. The antioxidant activity of the extracts and fractions was determined by two different methods: DPPH· radical scavenging assay and the ferric reducing antioxidant power assay. In both cases, the ethanolic extracts were more active than the aqueous ones. The fractions were also assayed and the ethyl acetate fractions were the most active ones. The total phenolics contents as determined by the Folin-Ciocalteu assay have confirmed that the phenolic compounds were concentrated into these fractions. Fingerprinting analysis by RPHPLC of purified fractions obtained by solid phase extraction (RP-SPE) of ethanolic extracts of each characteristic seasonal period showed similar compositions. The phenylpropanoid, p-coumaric, and the flavonoids myricetin, quercetin and naringenin could be identified with the help of coelution method with authentic commercial standards. The main component of the fraction obtained by RP-SPE was purified by semi-preparative RP-HPLC and was identified by 1H NMR data as quercitrin (quercetin 3-O-rhamnopyranoside). / As abelhas sem ferrão vêm ganhando atenção devido à sua importância como polinizadoras de espécies vegetais nativas e por representarem uma importante fonte de renda para os meliponicultores. Com o propósito de contribuir ao conhecimento da composição química e atividade antioxidante do pólen coletado pela abelha sem ferrão Melipona seminigra Cockerell, 1919 (uruçú-boca-de-renda), espécie muito procurada na região, duas amostras de pólen foram coletadas durante dois períodos característicos da região Amazônica, o chuvoso (abril de 2008, pluviosidade de 300 mm) e o seco (agosto de 2008, pluviosidade de 50 mm). A composição centesimal indicou que as duas amostras apresentam um valor nutricional similar e dentro dos parâmetros recomendados pelo Ministério da Agricultura, com exceção do teor de carboidratos que foi 10 % superior ao valor de referência. Nas duas amostras de pólen, Miconia dispar (Melastomataceae) foi o pólen predominante (periodo chuvoso: 53,19 % e seco: 95,60 %). Outros tipos de pólen identificados foram da família Myrtaceae (período chuvoso 25,64% e seco 0,96%) e da espécie Mimosa pudica (Fabaceae; período chuvoso 16,81% e período seco 3,44%). A partir dessas amostras foram preparados extratos aquosos e etanólicos. Estes últimos foram fracionados por partição líquido-líquido, resultando nas frações hexânica, acetato de etila e hidroalcoólica. A atividade antioxidante dos extratos e das frações foi determinada por dois ensaios: capacidade de seqüestro do radical livre difenilpicrilhidrazilo (DPPH·) e capacidade redutora de Fe(III). Em ambos os ensaios, observou-se que os extratos etanólicos foram os mais ativos, quando comparado aos aquosos. Das frações analisadas, as frações acetato de etila apresentaram a maior atividade antioxidante. O teor de fenólicos totais determinado pelo método de Folin-Ciocalteau confirmou que os compostos fenólicos se concentraram nessas frações. Perfis cromatográficos das frações purificadas por extração em fase sólida a partir dos extratos etanólicos de cada periodo foram obtidos por CLAE em fase reversa e mostraram-se bastante similares. Com o auxílio de padrões comerciais e utilizando o método da coeluição foi possível identificar a presença do fenilpropanoide, ácido p-cumárico e dos flavonóides: miricetina, quercetina e naringenina. O componente principal da fração obtida por extração em fase sólida do extrato etanólico da época de chuva foi ainda purificado por CLAE em fase reversa em escala semi-preparativa. Os dados espectroscópicos (RMN de 1H) dessa substância indicaram tratar-se da quercetina-3-O-ramnosídeo (quercetrina).

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-12-06T20:22:18Z No. of bitstreams: 1 DeboraPessoa.pdf: 2012759 bytes, checksum: 1f1d03e60d45d5c1abe80fb93e59944c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-06T20:22:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeboraPessoa.pdf: 2012759 bytes, checksum: 1f1d03e60d45d5c1abe80fb93e59944c (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / FAPEMA / CAPES / CNPq / Geopropolis is a product obtained from the mixture of plant resins collected by bees plus wax, earth or clay. Geopropolis produced by Melipona fasciculata Smith, known as tiúba is traditionally used in inflammatory processes, gastritis, cancer, hemorrhoids, respiratory system disorders, and also as wound healing. It presents in its chemical composition predominantly phenolic acids, triterpenes and hydrolysable tannins. This study aimed to evaluate the anti-ulcer activity and gastroprotective lyophilized hydroalcoholic extract geopropolis of (EHG), from the Maranhense cerrado. The geopropolis was collected in a meliponary in the city of Fernando Falcão, Maranhão, Brazil. The EHG was obtained by maceration in a water-alcohol solution 70%. In the model ethanol ulcer induction than 75%, treatment of mice with EHG, 50 or 100 mg / kg reduced the ulcerous area of 66.6% and 93.2%, respectively, compared with the control group (127.7 ± 9.5 mm2 ). In indomethacin ulcer induction, treatment of mice with EHG the same doses, reduced the ulcerated area in 82.9% and 92.5%, respectively, compared to the control group (119.3 ± 24.2 mm2 ). Histopathological analysis of the stomachs of animals treated with EHG revealed no acute injury of the epithelium when compared with the control group, which revealed a reduction in epithelial integrity. In evaluating the gastric secretion in rats, the extract (100 and 200 mg/kg) induced an increase in total acidity, reduced the volume of secretion in higher dose, and did not alter the pH, the two doses evaluated. The EHG at doses of 100 and 200 mg / kg did not alter gastric emptying, but decreased intestinal transit of rats in dose-dependent manner. Treatment with EHG induced increase (p <0.05) in the production of gastric mucus (236.7 ± 10.4 µg of Alcian blue/ g glandular tissue, 100 mg / kg). In mice pretreated with Nethylmaleimide (NEM), an inhibitor of sulfhydryl compounds, the gastroprotective activity of EHG was reduced to 34.54%, whereas pre-treatment with saline showed a higher protection 56.4 %. Moreover, oral treatment with EHG increased to 18.0 g/ g tissue levels of sulfhydryl groups of the gastric mucosa from injury induced by ethanol (4.9 ± 1.0 mg / g tissue). Furthermore, pre-treatment with NG-nitro-L-arginine (L-NAME), an inhibitor of NO synthesis, did not affect the gastroprotective activity of the extract. EHG reduced the ulcer lesions induced chronically by acetic acid in 59%. Histological analysis of the tissue gastric mucosa of rats treated with EHG proved arranged with consolidated fibrosis and decreased inflammation. In this group, staining with PAS has become more intense, with diffuse epithelial marking. The immunohistochemical study showed intense reactivity for COX -2 and low reactivity to Ki-67, the gastric mucosa of animals treated EHG. Taken together, the results suggest that EHG M. fasciculata has antiulcerogenic effect observed in models of acute gastric ulcer induction and chronic and that the gastroprotective action of EHG probably involves the participation of sulfhydryl compounds (-SH) no protein. These effects may be related to the phenolic compounds present in geopropolis the city of Fernando Falcao. / A geoprópolis é um produto obtido a partir da mistura de resinas de plantas coletadas por abelhas, acrescida de cera, terra ou barro. A geoprópolis produzida por Melipona fasciculata Smith, conhecida como tiúba, é tradicionalmente utilizada em processos inflamatórios, gastrite, neoplasias, hemorróidas, afecções do sistema respiratório e ainda, como cicatrizante. Apresenta em sua composição química, predominantemente, ácidos fenólicos, triterpenos e taninos hidrolizáveis. Este estudo teve como objetivo, avaliar a atividade antiulcerogênica e gastroprotetora do extrato hidroalcoólico liofilizado da geoprópolis de Melipona fasciculata (EHG), proveniente do cerrado Maranhense. A geoprópolis foi coletada em um meliponário na cidade de Fernando Falcão, Maranhão, Brasil. O EHG foi obtido por maceração em uma solução hidroalcoólica a 70%. No modelo de indução de úlcera por etanol a 75%, o tratamento de camundongos com EHG, 50 ou 100 mg / kg, reduziu a área ulcerada em 66,6% e 93,2%, respectivamente, quando comparado com o grupo controle (127,7 ± 9,5 mm2 ). Na indução de úlcera por indometacina, o tratamento dos camundongos com EHG nas mesmas doses, reduziu a área ulcerada em 82,9% e 92,5%, respectivamente, em relação ao grupo controle (119,3 ± 24,2 mm2 ). A análise histopatológica dos estômagos de animais tratados com EHG não revelou nenhuma lesão aguda do epitélio, quando comparado com o grupo controle, que revelou uma redução na integridade epitelial. Na avaliação da secreção gástrica, em ratos, o extrato (100 e 200 mg/Kg) induziu ao aumento da acidez total, reduziu o volume da secreção na maior dose e, não alterou o pH, nas duas doses avaliadas. O EHG nas doses de 100 e 200 mg/Kg não alterou o esvaziamento gástrico, mas diminuiu o trânsito intestinal de ratos, de forma dependente de dose. O tratamento com o EHG induziu aumento (p<0,05) na produção de muco gástrico (236,7 ± 10,4 µg de Alcian blue/ g de tecido glandular, 100 mg / kg). Em camundongos pré- tratados com N-etilmaleimida (NEM), um inibidor de compostos sulfidrílicos, a atividade gastroprotetora do EHG, foi reduzida para 34,54%, enquanto que o pré- tratamento com salina mostrou uma proteção maior, de 56,4%. Além disso, o tratamento oral com EHG aumentou para 18,0 μg/g de tecido, os níveis de grupos sulfidrílicos da mucosa gástrica, após lesão induzida pelo etanol (4,9 ± 1,0 μg/g de tecido). Por outro lado, o pré-tratamento com NG nitro-L-arginina (L-NAME), um inibidor da síntese de NO, não influenciou a atividade gastroprotetora do extrato. EHG reduziu as lesões de úlcera, induzida de forma crônica pelo ácido acético, em 59%. Na análise histopatológica, o tecido da mucosa gástrica de ratos tratados com EHG mostrou-se organizado, com fibrose consolidada e diminuição da inflamação. Neste grupo, a marcação com PAS tornou-se mais intensa, com difusa marcação epitelial. A investigação imunohistoquímica mostrou intensa reatividade para COX -2 e baixa reatividade para Ki -67, na mucosa gástrica dos animais tratados EHG. Em conjunto, os resultados sugerem que EHG de M. fasciculata apresenta efeito antiulcerogênico observados nos modelos de indução de úlcera gástrica aguda e crônica e, que a ação gastroprotetora do EHG provavelmente envolve a participação de compostos sulfidrílicos (-SH) não protéicos. Estes efeitos podem estar relacionados aos compostos fenólicos presentes na geoprópolis do município de Fernando Falcão.

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-05-22T14:36:59Z No. of bitstreams: 1 FranciscoVAN_DISSERT.pdf: 1013354 bytes, checksum: 1be0d7fcc15937d75236ebd887a49afc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-22T14:36:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FranciscoVAN_DISSERT.pdf: 1013354 bytes, checksum: 1be0d7fcc15937d75236ebd887a49afc (MD5) Previous issue date: 2010-08-25 / In recent years, bacterial resistance to multiple drugs has increased due to the indiscriminate use of antibiotics, widely used to treat infections. This situation has challenged scientists to search for new alternatives such as natural substances, in order to develop new guidelines with antibacterial recognized. Natural products have been used for thousands of years by the popular medicine for several purposes. Among them is the honey, a product resulting from collection and exudates of various plants by bees. Besides its nutritional value, honey is receiving greater attention by the scientific evidence of its medicinal effects through its therapeutic properties, especially the antimicrobial activity. Thus, this study aims to evaluate the in vitro antimicrobial activity exerted by the honey bee Apis mellifera L. and Melipona subnitida L. on the microorganisms Metilcilina Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Pseudomonas aeruginosa isolated from hospital samples. The honey samples used were obtained from hives maintained in the region of Serra do Mel, RN, Brazil, and the Technological Center of Beekeeping (CETEC) of UFERSA, Mossoró, RN, Brazil. Data on the physical and chemical properties were used for characterization of honey from Apis mellifera L., in addition to color, consisting of honey-colored (mC), light amber (mAC) and dark amber. The method of Kirby and Bauer, diffusion in Mueller Hinton agar was used to evaluate the antimicrobial activity of honey, using wells 06 mm in diameter, in the presence of 06 bacterial isolates. To control the experiment, were conducted in parallel with different antibiograms commercial antibiotics, using the strains ATCC 25953 and ATCC 27853. The test results showed a susceptibility to MRSA, reaching inhibition zones of up to 31 mm in diameter. However, for Pseudomonas aeruginosa, the zones of inhibition reached 19 mm, considered minor when compared to produce about MRSA, probably due to factors intrinsic resistance to Pseudomonas aeruginosa. Therefore, this study identified to date for a therapeutic potential of this natural product, in particular the antimicrobial activity of honey from Apis mellifera L., proving to be the more efficient than honey from Melipona subnitida / Nos últimos anos, a resistência bacteriana a múltiplas drogas tem aumentado devido ao uso indiscriminado de antibióticos, amplamente utilizados no tratamento de infecções. Essa situação tem forçado à busca de novas alternativas como substâncias naturais, com a finalidade desenvolver novos princípios com atividades antibacterianas reconhecidas. Os produtos naturais têm sido utilizados há milhares de anos pela medicina popular para diversos propósitos. Dentre eles está o mel, produto resultante da coleta e exsudatos de várias plantas pelas abelhas. Além de seu valor nutricional, o mel vem recebendo uma maior atenção pela comprovação de seus efeitos medicinais através de suas propriedades terapêuticas, especialmente a atividade antimicrobiana. Desta forma, o presente trabalho tem por objetivo avaliar a atividade antimicrobiana in vitro exercida pelo mel das abelhas Apis mellifera L. e Meliponea subnitida L. sobre os microorganismos Staphylococcus aureus Resistente a Metilcilina (MRSA) e Pseudomonas aeruginosa multirresistentes isolados de amostras hospitalares. As amostras de mel utilizadas foram obtidas de colméias mantidas na região de Serra do Mel, RN, Brasil, e do Centro Tecnológico de Apicultura (CETEC) da UFERSA, Mossoró, RN, Brasil. Dados das análises físico-químicas foram utilizadas para caracterização dos méis de Apis mellifera L., além da cor, consistindo em mel de cor clara (mC), âmbar claro (mAC) e âmbar escuro. O método de Kirby e Bauer, difusão em Agar de Mueller Hinton, foi utilizado para avaliação da atividade antimicrobiana do mel, utilizando poços de 06 mm de diâmetro, em presença de 06 isolados bacterianos. Para controle do experimento, em paralelo foram realizados antibiogramas com diferentes antibióticos comerciais, utilizando as linhagens ATCC 25953 e ATCC 27853. Os resultados dos testes demonstraram uma suscetibilidade para o MRSA, atingindo halos de inibição de até 31 mm de diâmetro. Porém, para a Pseudomonas aeruginosa, as zonas de inibição chegaram até 19 mm, consideradas menores quando comparadas as produzidas sobre o MRSA, devido, provavelmente, a fatores de resistência intrínsecos à Pseudomonas aeruginosa. Portanto, este estudo apontou até o momento para um potencial terapêutico deste produto natural, em especial a atividade antimicrobiana do mel de Apis mellifera L., demonstrando ser mais eficiente do que o mel de Melipona subnitida / 2017-05-22