Submitted by Lucas Pires Garcia Oliveira (pires081@hotmail.com) on 2018-08-21T18:41:21Z No. of bitstreams: 1 dissertação Lucas_P_G_Oliveira.pdf: 2241331 bytes, checksum: 52bfd0bd55f75641925f261173e0ce0d (MD5) / Approved for entry into archive by Sulamita Selma C Colnago null (sulamita@btu.unesp.br) on 2018-08-22T18:26:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 oliveira_lpg_me_bot.pdf: 2241331 bytes, checksum: 52bfd0bd55f75641925f261173e0ce0d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-22T18:26:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 oliveira_lpg_me_bot.pdf: 2241331 bytes, checksum: 52bfd0bd55f75641925f261173e0ce0d (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O câncer é uma doença que atinge pessoas em diversos continentes, acarretando milhões de mortes anualmente. Os tratamentos antineoplásicos são conhecidos por sua ampla lista de efeitos colaterais como toxicidade, indução de resistência em células tumorais, falta de seletividade entre células normais e tumorais, além de acometimento do sistema imunológico com consequente aparecimento de infecções. Com o intuito de atenuar os efeitos colaterais causados pelos agentes antitumorais, a administração de produtos naturais concomitantemente com fármacos tem sido investigada. O presente trabalho foi delineado visando elucidar a possível ação citotóxica e imunomoduladora da geoprópolis (GEO) associada à doxorrubicina (DOX) em menor concentração sobre monócitos de indivíduos saudáveis. A análise da viabilidade celular foi realizada pelo método do MTT, a produção de citocinas (IL-1β, TNF-α, IL-6 e IL-10) por ELISA, a expressão de marcadores de superfície (HLA-DR, CD80, CD40, TLR-2, TLR-4) por citometria de fluxo. Também foi avaliada a atividade microbicida de monócitos frente ao desafio com Candida albicans, Escherichia coli e Streptococcus mutans, a expressão gênica por RT-PCR e a produção de proteínas por western blot. O ensaio de MTT demonstrou que nenhum dos tratamentos apresentou ação citotóxica. Monócitos incubados com GEO e com a associação GEO + DOX apresentaram produção de TNF-α e IL-10 aumentada, e produção de IL-1β e IL-6 diminuídas. Houve aumento na expressão de TLR-4 e CD80 após incubação com a associação, enquanto a GEO isoladamente induziu somente aumento da expressão de TLR-4. A ação bactericida dos monócitos foi aumentada frente ao desafio com E. coli. A atividade fungicida não sofreu alterações significativas pelos diferentes tratamentos, assim como a atividade microbicida contra S. mutans. A expressão gênica de LC3 e NF-κB foi inibida por todos os tratamentos, enquanto a expressão de fosfo-ΙκBα foi diminuída pela GEO, mas a associação manteve os níveis basais. Nossos dados permitem concluir que a associação não é citotóxica para monócitos humanos e possui ação imunomoduladora quanto à expressão de marcadores de superfície celular e produção de citocinas, sugerindo um possível perfil ativador da associação. Como implicações práticas, a utilização da associação permitiria reduzir a concentração de uso da doxorrubicina e os efeitos adversos causados pelo tratamento quimioterápico. / Cancer is a disease that strikes people on many continents, resulting in millions of deaths annually. The antineoplastic treatments are known for their wide range of side effects such as toxicity, induction of resistance in tumor cells, lack of selectivity between normal and tumor cells, as well as immunosuppression with consequent onset of infections. In order to mitigate the side effects caused by antitumor agents, the administration of natural products concomitantly with drugs has been investigated. The present work was designed to elucidate a possible cytotoxic and immunomodulatory action of geopropolis (GEO) combined with doxorubicin (DOX) in a lower concentration on monocytes of healthy individuals. Cell viability was analyzed by the MTT method, the expression of surface markers (HLA-DR, CD80, CD40 , TLR-2, TLR-4) by flow cytometry, the production of cytokines (IL-1β, TNF-α, IL-6 and IL-10) by ELISA, gene expression by RT-PCR, protein production by western blot. The microbicidal activity of monocytes was evaluated against Candida albicans, Escherichia coli and Streptococcus mutans, as well as hydrogen peroxide production. MTT assay showed that none of the treatments exerted a cytotoxic action. Monocytes incubated with GEO and the GEO + DOX had an increased TNF-α and IL-10 production, while IL-1β and IL-6 production decreased when compared to control. An increased TLR-4 and CD80 expression was seen after incubation with the combination, whereas GEO alone increased TLR-4 expression. The combination increased the bactericidal action of monocytes against E. coli. No alterations were found in the fungicidal activity nor in the bactericidal activity against S. mutans. Gene expression of LC3 and NF-κB were decreased by all treatments, whereas phospho-ΙκBα expression was decreased by GEO but the association maintained baseline levels. Our findings indicated that the combination was not cytotoxic for monocytes and exerted an immunomodulatory action on the expression of cell surface markers and cytokine production, suggesting an activator profile of GEO + DOX. The use of this combination could reduce the concentration of DOX and the side effects caused by chemotherapy. / 2016/02249-4

Orientador: José Mauricio Sforcin / Resumo: O câncer é uma doença que atinge pessoas em diversos continentes, acarretando milhões de mortes anualmente. Os tratamentos antineoplásicos são conhecidos por sua ampla lista de efeitos colaterais como toxicidade, indução de resistência em células tumorais, falta de seletividade entre células normais e tumorais, além de acometimento do sistema imunológico com consequente aparecimento de infecções. Com o intuito de atenuar os efeitos colaterais causados pelos agentes antitumorais, a administração de produtos naturais concomitantemente com fármacos tem sido investigada. O presente trabalho foi delineado visando elucidar a possível ação citotóxica e imunomoduladora da geoprópolis (GEO) associada à doxorrubicina (DOX) em menor concentração sobre monócitos de indivíduos saudáveis. A análise da viabilidade celular foi realizada pelo método do MTT, a produção de citocinas (IL-1β, TNF-α, IL-6 e IL-10) por ELISA, a expressão de marcadores de superfície (HLA-DR, CD80, CD40, TLR-2, TLR-4) por citometria de fluxo. Também foi avaliada a atividade microbicida de monócitos frente ao desafio com Candida albicans, Escherichia coli e Streptococcus mutans, a expressão gênica por RT-PCR e a produção de proteínas por western blot. O ensaio de MTT demonstrou que nenhum dos tratamentos apresentou ação citotóxica. Monócitos incubados com GEO e com a associação GEO + DOX apresentaram produção de TNF-α e IL-10 aumentada, e produção de IL-1β e IL-6 diminuídas. Houve aumento na expressão de TLR-4 e CD80 ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Submitted by Leonard Souza (leonardrebello21@gmail.com) on 2018-12-13T17:51:29Z No. of bitstreams: 6 Universidade Federal do Amazonas Versão FINAL Dissertação - Leonard Rebello Santos de Souza - 07.12.2018.pdf: 6617992 bytes, checksum: 11329e8ee711f51c4743aa5b662f3a1c (MD5) Ata de Aprovação.pdf: 202356 bytes, checksum: eb3c1a44c559f01a75f1abc6d61d37f0 (MD5) Carta de encaminamento.pdf: 316076 bytes, checksum: d0e3b634bca40202a56a5d82ce13ab16 (MD5) Declaração de defesa.pdf: 324580 bytes, checksum: 1f224f73c548234d76ffcc2652bff783 (MD5) Ficha catalográfica.pdf: 1931 bytes, checksum: 6dd2816a4e114eef6af8cdb4402fe8ba (MD5) Parecer da comissão examinadora da defesa.pdf: 266273 bytes, checksum: de4593a49e020d79130de4a0263a4caa (MD5) / Approved for entry into archive by PPGQ Química (ppgqsecretaria@gmail.com) on 2018-12-14T15:10:05Z (GMT) No. of bitstreams: 6 Universidade Federal do Amazonas Versão FINAL Dissertação - Leonard Rebello Santos de Souza - 07.12.2018.pdf: 6617992 bytes, checksum: 11329e8ee711f51c4743aa5b662f3a1c (MD5) Ata de Aprovação.pdf: 202356 bytes, checksum: eb3c1a44c559f01a75f1abc6d61d37f0 (MD5) Carta de encaminamento.pdf: 316076 bytes, checksum: d0e3b634bca40202a56a5d82ce13ab16 (MD5) Declaração de defesa.pdf: 324580 bytes, checksum: 1f224f73c548234d76ffcc2652bff783 (MD5) Ficha catalográfica.pdf: 1931 bytes, checksum: 6dd2816a4e114eef6af8cdb4402fe8ba (MD5) Parecer da comissão examinadora da defesa.pdf: 266273 bytes, checksum: de4593a49e020d79130de4a0263a4caa (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-12-14T18:01:15Z (GMT) No. of bitstreams: 6 Universidade Federal do Amazonas Versão FINAL Dissertação - Leonard Rebello Santos de Souza - 07.12.2018.pdf: 6617992 bytes, checksum: 11329e8ee711f51c4743aa5b662f3a1c (MD5) Ata de Aprovação.pdf: 202356 bytes, checksum: eb3c1a44c559f01a75f1abc6d61d37f0 (MD5) Carta de encaminamento.pdf: 316076 bytes, checksum: d0e3b634bca40202a56a5d82ce13ab16 (MD5) Declaração de defesa.pdf: 324580 bytes, checksum: 1f224f73c548234d76ffcc2652bff783 (MD5) Ficha catalográfica.pdf: 1931 bytes, checksum: 6dd2816a4e114eef6af8cdb4402fe8ba (MD5) Parecer da comissão examinadora da defesa.pdf: 266273 bytes, checksum: de4593a49e020d79130de4a0263a4caa (MD5) / Made available in DSpace on 2018-12-14T18:01:15Z (GMT). No. of bitstreams: 6 Universidade Federal do Amazonas Versão FINAL Dissertação - Leonard Rebello Santos de Souza - 07.12.2018.pdf: 6617992 bytes, checksum: 11329e8ee711f51c4743aa5b662f3a1c (MD5) Ata de Aprovação.pdf: 202356 bytes, checksum: eb3c1a44c559f01a75f1abc6d61d37f0 (MD5) Carta de encaminamento.pdf: 316076 bytes, checksum: d0e3b634bca40202a56a5d82ce13ab16 (MD5) Declaração de defesa.pdf: 324580 bytes, checksum: 1f224f73c548234d76ffcc2652bff783 (MD5) Ficha catalográfica.pdf: 1931 bytes, checksum: 6dd2816a4e114eef6af8cdb4402fe8ba (MD5) Parecer da comissão examinadora da defesa.pdf: 266273 bytes, checksum: de4593a49e020d79130de4a0263a4caa (MD5) Previous issue date: 2018-10-19 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Mankind has always sought in nature sources of raw materials, whether of vegetable origin or products derived from animals that could be used with therapeutic and medicinal characteristics for the treatment of their diseases. Among the many, one has been used over the years by the inhabitants of the Amazon region, the geopropolis, which is produced by stingless bees of the genus Melipona. The M. seminigra and M. interrupta species are known to be less aggressive and quite sociable, facilitating their creation and management through Meliponicutura. The geopropolis has a complex composition rich in several chemical classes greatly because of its formation include parts of plants, resins, pollen, in addition to the soil and mineral mixture and which consequently can provide promising biological activities such as antitumor, antitussive, antioxidant, antiparasitic, antimicrobial, antiseptic, antimutagenic, anti-inflammatory and immunomodulatory, making it very appreciable by consumer communities. In the Amazon, besides the climate, the flora used to collect bee subsidies directly influences the chemical composition of the geopropolis, reflecting the biological properties of the product. The reduced amount of studies on the chemical composition of the geopropolis and the possible botanical origin of the substances, emphasized the importance of conducting the research. In this context, the study was developed to chemically characterize the geopropolis of five different locations in the vicinity of Manaus. The methanolic extracts were obtained by the methodology of maceration (48h) of the geopropolis followed by ultrasonic bath (20min), filtered and analyzed by Mass Spectrometry (EM) and Magnetic Resonance Spectroscopy (NMR) and it was possible to differentiate the chemical constituents between the points (PCA and HCA) evidencing the presence of flavonoids, organic acids and benzophenones. Twenty-eight chemical substances were proposed by direct injection into the High Resolution Mass Spectrometry equipment. GC-MS analyzes revealed the presence of fourteen terpene substances. The results of IC 50 and total phenols presented anti-radical potential for the extracts of the geopropolis of the study species. The antimicrobial assay of the extracts of M. interrupta showed satisfactory results of inhibition and death against strains E. feacalis and S. aureus. The research contributed with chemical and biological knowledge about the bees' geoprópolis M. seminigra and M. interrupta, since there are few reports in the literature about the product. / A humanidade sempre buscou na natureza fontes de matérias-primas, seja de origem vegetal ou em produtos oriundos de animais que pudessem ser utilizadas com cunho terapêutico e medicinal para o tratamento de suas enfermidades. Dentre os muitos, um tem sido utilizado ao longo dos anos pelos habitantes da região Amazônica, a geoprópolis, que é produzida pelas abelhas sem ferrão do gênero Melipona. As espécies M. seminigra e M. interrupta são conhecidas por serem pouco agressivas e bastante sociáveis facilitando sua criação e manejo por meio da Meliponicutura. A geoprópolis possui uma composição complexa rica em diversas classes química muito por sua formação incluir partes de vegetais, resinas, pólens, além da mistura de solo e minerais e que como consequência podem proporcionar atividades biológicas promissoras como, antitumoral, antitussígeno, antioxidante, antiparasitário, antimicrobiano, antisséptico, antimutagênico, anti-inflamatório e imunomoduladora, tornando-a bastante apreciável pelas comunidades consumidoras. Na Amazônia além do clima, a flora utilizada para coleta de subsídios por parte das abelhas influencia diretamente na composição química da geoprópolis, refletindo nas propriedades biológicas do produto. A quantidade reduzida de estudos sobre a composição química da geoprópolis e possível origem botânica das substâncias, ressaltaram a importância de se realizar a pesquisa. Nesse contexto, foi desenvolvido o estudo para caracterizar quimicamente a geoprópolis de cinco diferentes localidades dos arredores de Manaus. Os extratos metanólicos foram obtidos pela metodologia de maceração (48h) da geoprópolis seguido de banho ultrassônico (20min), filtrados e analisados por Espectrometria de Massas (EM) e Espectroscopia de Ressonância Magnética (RMN) e foi possível diferenciar os constituintes químicos entre os pontos de coleta por meio da Quimiometria (PCA e HCA) evidenciando a presença de flavonoides, ácidos orgânicos e benzofenonas. Por injeção direta no equipamento de Espectrometria de Massas de Alta Resolução foram propostas vinte e oito substâncias químicas. As análises por CG-MS revelaram a presença de quatorze substâncias terpênicas. Os resultados de CI50 e fenóis totais apresentaram potencial anti-radicalar para os extratos da geoprópolis das espécies de estudo. O ensaio antimicrobiano dos extratos de M. interrupta mostrou resultados satisfatórios de inibição e morte frente as cepas E. feacalis e S. aureus. A pesquisa contribuiu com conhecimento químico e biológico acerca da geoprópolis das abelhas M. seminigra e M. interrupta, posto que existem poucos relatos na literatura sobre o produto.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-01-31T12:00:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_GeopropolisProduzidaDiferentes.pdf: 2161086 bytes, checksum: e4c634c21afbdaf5fca9f14af0e02cf2 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-02-01T12:07:23Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_GeopropolisProduzidaDiferentes.pdf: 2161086 bytes, checksum: e4c634c21afbdaf5fca9f14af0e02cf2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-01T12:07:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_GeopropolisProduzidaDiferentes.pdf: 2161086 bytes, checksum: e4c634c21afbdaf5fca9f14af0e02cf2 (MD5) Previous issue date: 2015-05-15 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Dentre os meliponíneos ou “abelhas sem ferrão” (Stingless bee) destacam-se a Melipona quadrifasciata (Mandaçaia), Melipona marginata (Manduri) e a Tetragonisca angustula (Jataí). Um dos produtos produzidos por estas abelhas e que apresenta grande aceitabilidade no mercado é a geoprópolis, uma substância resinosa e balsâmica de composição química complexa, coletado pelas abelhas de brotos, exsudações e de outras partes do tecido vegetal, que é transformada por processos enzimáticos por adição de secreções, sendo adicionados terra e/ou barro. Dentre os componentes químicos, destacam-se a presença de compostos fenólicos, diterpenos, triterpenos, óleos essenciais e muitos outros. As atividades mais estudadas da própolis são a antibacteriana e antifúngica, além da atividade antiviral, imunomoduladora, antitumoral, antiinflamatoria e antioxidante. Este trabalho objetivou avaliar a atividade antimicrobiana, através da determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM), e atividade antirradicalar pelo método de capacidade antioxidante equivalente ao trolox (TEAC), além da determinação dos teores de compostos fenólicos e flavonóides (Método de Folin-Cioucalteu e complexação com cloreto de alumínio, respectivamente) de amostras de geoprópolis de diferentes espécies de abelhas sem ferrão (Melipona quadrifasciata, Melipona marginata e Tetragonisca angustula). Todas as amostras de geoprópolis apresentaram atividade antimicrobiana frente às bactéria gram-positivas, sendo que a abelha Manduri apresentou menor valor de CIM e CBM; somente a espécie Mandaçaia apresentou atividade moderada contra bactérias gram-negativas. A geoprópolis da abelha Manduri foi a que apresentou maior teor de compostos fenólicos e flavonóides, seguido da geoprópolis da abelha mandaçaia, e ambas estavam em conformidade com os parâmetros preconizados pela legislação vigente, sendo que a geoprópolis da espécie Manduri também apresentou elevados níveis de antioxidante total em relação as demais abelhas. Observou-se que a atividade antimicrobiana dos extratos de geoprópolis não está diretamente associada aos elevados níveis de compostos fenólicos, incluindo flavonóides. / Among meliponineos or stingless bees the most important are Melipona quadrifasciata (Mandaçaia), Melipona marginata (Manduri) and Tetragonisca angustula (Jataí). One of their product is geopropolis, a balsamic and resinous substance with complex chemical composition, collected from shoots, seepage and other parts of the plant tissue by these bees, which transformed it through enzymatic process by adding secretions and earth or clay, alone or in combination. Among the chemicals components, highlights the presence of phenolic compounds, diterpenes, triterpenes, essential oils and many other. The most studied propolis activity are antibacterial and antifungal, in addition to antiviral, immunomodulatory, anti-tumor, anti-inflammatory and antioxidant. Therefore this work aim to evaluate the antimicrobial activity, through determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Minimum Bactericidal Concentration (MBC) and Trolox equivalent antioxidant capacity assay (TEAC), beyond the determination of the levels of flavonoids and phenolics compounds (Folin-Cioucalteu method and complexation with aluminum chloride, respectively) using geopropolis samples from different bees species (Melipona quadrifasciata, Melipona marginata and Tetragonisca angustula). All the geopropolis samples exhibit antimicrobial activity against gram-positive bacteria, wherein the Manduri Bee showed the lowest MIC and MBC; only Mandaçaia species showed moderate activity against gram-negative bacteria. The Manduri's geopropolis showed higher content of phenolics compounds and flavonoids, followed by Mandaçaia's geopropolis and both were in accordance with the parameters established by current legislation, wherein the Manduri's geopropolis also present high total antioxidant levels compared with other bees. It was noted that the antimicrobial activity of geopropolis extracts were not directly associated with high levels of phenolic compounds, including flavonoids.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-25Bitstream added on 2014-06-13T18:45:04Z : No. of bitstreams: 1 araujo_mjam_dr_botfm.pdf: 543081 bytes, checksum: 9a4eb9b648c8708962a81d32a5de52a3 (MD5) / Própolis é composta por substâncias resinosas, coletadas de várias plantas por abelhas africanizadas, adicionando pólen, cera e secreções glandulares, enquanto para a produção de geoprópolis (Geo) as abelhas sem ferrão utilizam materiais resinosos de plantas, cera, e ainda acrescentam terra ou barro. As atividades biológicas da própolis produzida por Apis mellifera têm sido extensivamente estudadas, mas ainda são escassos os trabalhos sobre as propriedades da geoprópolis. Assim, o presente trabalho se propôs a investigar as atividades citotóxica, imunomoduladora, antibacteriana e antifúngica do extrato hidroalcoólico de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith. Foi realizada a caracterização química da Geo, verificando que o principal grupo de compostos encontrados foram triterpenos. No tocante às células do carcinoma da laringe humana (HEp-2), Geo apresentou ação inibitória em concentrações mais elevadas; entretanto, esta ação foi somente citostática. Geo apresentou ação imunomoduladora sobre monócitos humanos, estimulando a produção das citocinas estudadas (TNF-α e IL-10). Não foi observada ação antibacteriana contra S. aureus e E. coli, havendo inibição destas linhagens somente com altas concentrações do extrato. Contudo, a associação de Geo com antibióticos favoreceu a ação do cloranfenicol sobre S. aureus. A Geo exerceu ação inibitória sobre Pythium insidiosum, tanto para o isolado obtido de caso humano como de eqüinos. Os resultados sugerem que a Geo apresentou inúmeras propriedades biológicas; contudo, sua ação é menor em comparação à própolis produzida por abelhas africanizadas, talvez devido ao baixo rendimento do extrato e sua difícil solubilidade / Propolis is composed of resinous substances collected from various plants by Africanized honeybees, adding polen, wax and bee secretions, while for geopropolis (Geo) production stingless bees use resinous materials from plants, wax, but also adding mud or clay. The biological activities of propolis produced by Apis mellifera have been extensively studied, but there are few studies on Geo properties. Thus, the present study investigated the cytotoxic, immunomodulatory, antibacterial and antifungal activities of hydroalcoholic extract of Geo produced by Melipona fasciculata Smith. The chemical characterization of Geo was performed, revealing that the main group of compounds was triterpenes. Geo exerted an inhibitory action on human larynx carcinoma cells (HEp-2) using high concentrations, however, it was only a cytostatic action. Geo exhibited immunomodulatory effects on human monocytes, stimulating cytokines production (TNF-α and IL-10). No antibacterial activity was seen against S. aureus and E. coli. However, the combination of Geo with chloramphenicol favored its effect against S. aureus. Geo exerted an inhibitory action against Pythium insidiosum, both for human or equine isolates. Data suggested that Geo presented several properties; however, its activity is lower compared to propolis produced by honeybees, perhaps due to the low yield of the extract and its difficult solubility

Orientador: José Maurício Sforcin / Banca: Rodrigo Tavanelli Hernandes / Banca: Rosane Nassar Meireles Guerra / Banca: Flávia Raquel Fernandes do Nascimento / Banca: Maria Teresa Teixeira Cruz Rosete / Resumo: Própolis é composta por substâncias resinosas, coletadas de várias plantas por abelhas africanizadas, adicionando pólen, cera e secreções glandulares, enquanto para a produção de geoprópolis (Geo) as abelhas sem ferrão utilizam materiais resinosos de plantas, cera, e ainda acrescentam terra ou barro. As atividades biológicas da própolis produzida por Apis mellifera têm sido extensivamente estudadas, mas ainda são escassos os trabalhos sobre as propriedades da geoprópolis. Assim, o presente trabalho se propôs a investigar as atividades citotóxica, imunomoduladora, antibacteriana e antifúngica do extrato hidroalcoólico de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith. Foi realizada a caracterização química da Geo, verificando que o principal grupo de compostos encontrados foram triterpenos. No tocante às células do carcinoma da laringe humana (HEp-2), Geo apresentou ação inibitória em concentrações mais elevadas; entretanto, esta ação foi somente citostática. Geo apresentou ação imunomoduladora sobre monócitos humanos, estimulando a produção das citocinas estudadas (TNF-α e IL-10). Não foi observada ação antibacteriana contra S. aureus e E. coli, havendo inibição destas linhagens somente com altas concentrações do extrato. Contudo, a associação de Geo com antibióticos favoreceu a ação do cloranfenicol sobre S. aureus. A Geo exerceu ação inibitória sobre Pythium insidiosum, tanto para o isolado obtido de caso humano como de eqüinos. Os resultados sugerem que a Geo apresentou inúmeras propriedades biológicas; contudo, sua ação é menor em comparação à própolis produzida por abelhas africanizadas, talvez devido ao baixo rendimento do extrato e sua difícil solubilidade / Abstract: Propolis is composed of resinous substances collected from various plants by Africanized honeybees, adding polen, wax and bee secretions, while for geopropolis (Geo) production stingless bees use resinous materials from plants, wax, but also adding mud or clay. The biological activities of propolis produced by Apis mellifera have been extensively studied, but there are few studies on Geo properties. Thus, the present study investigated the cytotoxic, immunomodulatory, antibacterial and antifungal activities of hydroalcoholic extract of Geo produced by Melipona fasciculata Smith. The chemical characterization of Geo was performed, revealing that the main group of compounds was triterpenes. Geo exerted an inhibitory action on human larynx carcinoma cells (HEp-2) using high concentrations, however, it was only a cytostatic action. Geo exhibited immunomodulatory effects on human monocytes, stimulating cytokines production (TNF-α and IL-10). No antibacterial activity was seen against S. aureus and E. coli. However, the combination of Geo with chloramphenicol favored its effect against S. aureus. Geo exerted an inhibitory action against Pythium insidiosum, both for human or equine isolates. Data suggested that Geo presented several properties; however, its activity is lower compared to propolis produced by honeybees, perhaps due to the low yield of the extract and its difficult solubility / Doutor

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-05-20T13:36:19Z No. of bitstreams: 1 Silvana Alves de Souza.pdf: 3712694 bytes, checksum: 39a9d8448e0b04308059e284510e2cb8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-20T13:36:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silvana Alves de Souza.pdf: 3712694 bytes, checksum: 39a9d8448e0b04308059e284510e2cb8 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Melipona subnitida, popularly known as jandaira, is a native, social and stingless bee, producer of honey, pollen and geopropolis. Propolis is a mixture of vegetable resins, salivary secretions, wax, pollen grains and ground. In this work eight propolis samples from jandaira collected in the backlands of Paraiba, Brazil were analyzed, revealing the presence of 22 different pollen types, among which, Myrcia, Mimosa, Parapiptadenia, Poincianella and Senna, which are present in almost all samples with pollen grain frequency between 3,3 to 50,0%. The quantitative analysis of phenolic compounds were characterized with values ranging from 92,56 to 201,62 mg GAE/g for EtOH extracts from 157,43 to 320,48 mg GAE/g for fractions AcOEt and 128,63 to 322,40 mg GAE/g for phenolic fractions. The ethanol extracts and phenolic fractions were also tested for antinociceptive activity, showing inhibition in writhing induced by acetic acid in mouse ranging from 96,9% to 100% for the extracts and 71,4% and 93,5% for phenolic fractions. Also, they have the ability to protect the DNA plasmid, with antioxidant potential against the DPPH, ABTS and β-carotene/linoleic acid system and showed antifungal activity against strains of yeasts and dermatophytes. The EtOH extracts exhibited a condensed tannin content ranging from 92,56 to 201,62 mg CE/g sample. Phenolic fractions were analyzed by HPLC-PDA-QTOF-MS and MS/MS in negative mode (ESI-) showing 66 peaks, and 36 peaks were identified mainly as phenyl propanoides, flavonoids and tannins. The major compounds were derivatives of galloyl cinnamoyl/coumaroyl glucopyranoside. The antinociceptive activity, antifungal and protection of plasmid DNA of the geopropolis from Melipona subnitida, as long as we know, was never described before in the literature. / Melipona subnitida, conhecida popularmente como jandaíra, é uma abelha nativa, social e sem ferrão que produz mel, geoprópolis e pólen. A geoprópolis é produzida a partir de uma mistura de resinas vegetais, secreções salivares, cera, grãos de pólen e terra. Foram analisadas oito amostras de geoprópolis da jandaíra coletadas no sertão da Paraíba-Brasil. As análises palinológicas das oito amostras revelou a presença de 22 tipos polínicos diferentes, dentre os quais, os tipos Myrcia, Mimosa, Parapiptadenia, Poincianella e Senna, estão presentes em quase todas as amostras com freqüência de grão de pólen entre 3,3 a 50,0%. As análises quantitativas dos compostos fenólicos foram caracterizadas com valores variando entre 92,56 - 201,62 mg EAG/g para os extratos EtOH, 157,43 - 320,48 mg EAG/g para as frações AcOEt e 128,63 - 322,40 mg EAG/g para as frações fenólicas. Os extratos etanólicos e frações fenólicas no ensaio de atividade antinociceptiva, produziram inibição nas contorções abdominais induzidas por ácido acético em camudongos, variando de 96,9% a 100% para os extratos e 71,4% a 93,5% para as frações fenólicas. Além disso, apresentaram capacidade de proteção ao DNA Plasmídeo, potencial antioxidante frente ao DPPH, ABTS e sistema β-caroteno/ácido linoléico e atividade antifúngica contra cepas de leveduras e dermatófitos. Os extratos EtOH exibiram um teor de taninos condensados variando entre 92,56 a 201,62 mg de EC/g de amostra. As frações fenólicas foram analisadas por UHPLC-PDA-qTOF-MS e MS/MS no modo negativo (ESI-). Foram detectados 66 picos, dos quais 36 foram identificados principalmente como fenil propanóides, flavonoides e taninos. Os principais compostos foram os derivados de galoil cinamoil/coumaroil glicopiranosídeo. A atividade antinociceptiva, antifúngica e a proteção ao DNA plasmídeo da geoprópolis de Melipona subnitida, estão sendo descritas pela primeira vez na literatura.

Made available in DSpace on 2015-04-22T19:34:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ellen cristina.pdf: 3695330 bytes, checksum: 714dde52e6b8cdfa52ad6ca971f01e4c (MD5) Previous issue date: 2012-12-20 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The bee species of Melipona genre are stingless bees found in the tropical and subtropical regions of the world. The bees produce a resinous material, known as geopropolis. Altogether, the geopropolis has medical use as antiseptic, anti inflammatory agent, it also shows antimicrobian, antioxidant, immunomodulatory property, among others. To the geopropolis of the Melipona interrupta Latreille, 1811, and Melipona seminigra Friese, 1903 (Apidae, Meliponini) species, natives from Amazonia region, there is no studies about the chemical composition and neither of biological activity. The name Melipona interrupta is the synonymous of Melipona compressipes. In this assignment was executed the study of M. interrupta geoprópolis chemical composition of two sampled specimens in different places of Manaus. From the methanolic extract of M. interrupta specie collected in Manaus (GPA-INPA) were isolated the following flavonoids: glycosylated naringenin, aromadendrin and naringenin. From methanolic extract of the same collected specie on Ramal do Brasileirinho (road) in Manaus, were isolated the glycosylated myricetin and again glycosylated naringenin substances. The analyses by CG-MS of four hexane fractions of two bee species presented eight triterpenic substances. The antimicrobian activity analysis of fractions and extracts of several M. Interrupta and M. seminigra species had satisfactory results against the following bacteria: Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. The lipoxygenase and cyclooxygenase enzymatic essay showed the great inhibitory potential that the extracts of the two bee species presented. The larvicida activity of the fractions and extracts of theses specimens against Aedes aegypti and Culex quinquefasciatus also had satisfactory results. This chemical and biological assignment contributed to the study of these two stingless bee species, whereas, there are no studies in literature about species collected in Amazonia region. / As espécies de abelhas do gênero Melipona são abelhas sem ferrão encontradas nas regiões tropicais e subtropicais do mundo. As abelhas produzem um material resinoso, conhecido como geoprópolis. De modo geral, a geoprópolis tem uso medicinal como agente antiséptico, antiinflamatório, também apresenta propriedade antimicrobiana, antioxidante, imunomoduladora, entre outras. Para a geoprópolis das espécies Melipona interrupta Latreille, 1811, e Melipona seminigra Friese, 1903 (Apidae, Meliponini), nativas da região amazônica, não existe estudo da composição química e nem de atividade biológica. O nome Melipona interrupta é o nome sinonímio da Melipona compressipes. Neste trabalho realizou-se o estudo da composição química da geoprópolis de M. interrupta de dois espécimes amostrados em diferentes localidades da cidade de Manaus. Do extrato metanólico da espécie M. interrupta coletada em Manaus (GPA-INPA) isolaram-se os flavonóides: naringenina glicosilada, aromadendrina e naringenina. Do extrato metanólico da mesma espécie coletada em Manaus - Ramal do Brasileirinho, foram isoladas as substâncias miricetina glicosilada e novamente a naringenina glicosilada. As análises por CG-MS de quatro frações hexânicas do geopropólis de duas espécies de abelhas apresentaram oito substâncias triterpênicas. As análises de atividade antimicrobiana de extratos e frações de vários espécimes de M. interrupta e M. seminigra tiveram resultados satisfatórios. Os ensaios enzimáticos lipoxigenase e ciclooxigenase mostraram o grande potencial de inibição que os extratos do geopropólis de duas espécies de abelha apresentam. A atividade larvicida de extratos e frações desses espécimes contra Aedes aegypti e Culex quinquefasciatus também tiveram resultados satisfatórios. Esse trabalho químico e biológico contribuiu para o estudo dessas duas espécies de abelhas sem ferrão, visto que, não existem trabalhos na literatura para espécies coletadas na Região Amazônica.

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-12-06T20:22:18Z No. of bitstreams: 1 DeboraPessoa.pdf: 2012759 bytes, checksum: 1f1d03e60d45d5c1abe80fb93e59944c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-06T20:22:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeboraPessoa.pdf: 2012759 bytes, checksum: 1f1d03e60d45d5c1abe80fb93e59944c (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / FAPEMA / CAPES / CNPq / Geopropolis is a product obtained from the mixture of plant resins collected by bees plus wax, earth or clay. Geopropolis produced by Melipona fasciculata Smith, known as tiúba is traditionally used in inflammatory processes, gastritis, cancer, hemorrhoids, respiratory system disorders, and also as wound healing. It presents in its chemical composition predominantly phenolic acids, triterpenes and hydrolysable tannins. This study aimed to evaluate the anti-ulcer activity and gastroprotective lyophilized hydroalcoholic extract geopropolis of (EHG), from the Maranhense cerrado. The geopropolis was collected in a meliponary in the city of Fernando Falcão, Maranhão, Brazil. The EHG was obtained by maceration in a water-alcohol solution 70%. In the model ethanol ulcer induction than 75%, treatment of mice with EHG, 50 or 100 mg / kg reduced the ulcerous area of 66.6% and 93.2%, respectively, compared with the control group (127.7 ± 9.5 mm2 ). In indomethacin ulcer induction, treatment of mice with EHG the same doses, reduced the ulcerated area in 82.9% and 92.5%, respectively, compared to the control group (119.3 ± 24.2 mm2 ). Histopathological analysis of the stomachs of animals treated with EHG revealed no acute injury of the epithelium when compared with the control group, which revealed a reduction in epithelial integrity. In evaluating the gastric secretion in rats, the extract (100 and 200 mg/kg) induced an increase in total acidity, reduced the volume of secretion in higher dose, and did not alter the pH, the two doses evaluated. The EHG at doses of 100 and 200 mg / kg did not alter gastric emptying, but decreased intestinal transit of rats in dose-dependent manner. Treatment with EHG induced increase (p <0.05) in the production of gastric mucus (236.7 ± 10.4 µg of Alcian blue/ g glandular tissue, 100 mg / kg). In mice pretreated with Nethylmaleimide (NEM), an inhibitor of sulfhydryl compounds, the gastroprotective activity of EHG was reduced to 34.54%, whereas pre-treatment with saline showed a higher protection 56.4 %. Moreover, oral treatment with EHG increased to 18.0 g/ g tissue levels of sulfhydryl groups of the gastric mucosa from injury induced by ethanol (4.9 ± 1.0 mg / g tissue). Furthermore, pre-treatment with NG-nitro-L-arginine (L-NAME), an inhibitor of NO synthesis, did not affect the gastroprotective activity of the extract. EHG reduced the ulcer lesions induced chronically by acetic acid in 59%. Histological analysis of the tissue gastric mucosa of rats treated with EHG proved arranged with consolidated fibrosis and decreased inflammation. In this group, staining with PAS has become more intense, with diffuse epithelial marking. The immunohistochemical study showed intense reactivity for COX -2 and low reactivity to Ki-67, the gastric mucosa of animals treated EHG. Taken together, the results suggest that EHG M. fasciculata has antiulcerogenic effect observed in models of acute gastric ulcer induction and chronic and that the gastroprotective action of EHG probably involves the participation of sulfhydryl compounds (-SH) no protein. These effects may be related to the phenolic compounds present in geopropolis the city of Fernando Falcao. / A geoprópolis é um produto obtido a partir da mistura de resinas de plantas coletadas por abelhas, acrescida de cera, terra ou barro. A geoprópolis produzida por Melipona fasciculata Smith, conhecida como tiúba, é tradicionalmente utilizada em processos inflamatórios, gastrite, neoplasias, hemorróidas, afecções do sistema respiratório e ainda, como cicatrizante. Apresenta em sua composição química, predominantemente, ácidos fenólicos, triterpenos e taninos hidrolizáveis. Este estudo teve como objetivo, avaliar a atividade antiulcerogênica e gastroprotetora do extrato hidroalcoólico liofilizado da geoprópolis de Melipona fasciculata (EHG), proveniente do cerrado Maranhense. A geoprópolis foi coletada em um meliponário na cidade de Fernando Falcão, Maranhão, Brasil. O EHG foi obtido por maceração em uma solução hidroalcoólica a 70%. No modelo de indução de úlcera por etanol a 75%, o tratamento de camundongos com EHG, 50 ou 100 mg / kg, reduziu a área ulcerada em 66,6% e 93,2%, respectivamente, quando comparado com o grupo controle (127,7 ± 9,5 mm2 ). Na indução de úlcera por indometacina, o tratamento dos camundongos com EHG nas mesmas doses, reduziu a área ulcerada em 82,9% e 92,5%, respectivamente, em relação ao grupo controle (119,3 ± 24,2 mm2 ). A análise histopatológica dos estômagos de animais tratados com EHG não revelou nenhuma lesão aguda do epitélio, quando comparado com o grupo controle, que revelou uma redução na integridade epitelial. Na avaliação da secreção gástrica, em ratos, o extrato (100 e 200 mg/Kg) induziu ao aumento da acidez total, reduziu o volume da secreção na maior dose e, não alterou o pH, nas duas doses avaliadas. O EHG nas doses de 100 e 200 mg/Kg não alterou o esvaziamento gástrico, mas diminuiu o trânsito intestinal de ratos, de forma dependente de dose. O tratamento com o EHG induziu aumento (p<0,05) na produção de muco gástrico (236,7 ± 10,4 µg de Alcian blue/ g de tecido glandular, 100 mg / kg). Em camundongos pré- tratados com N-etilmaleimida (NEM), um inibidor de compostos sulfidrílicos, a atividade gastroprotetora do EHG, foi reduzida para 34,54%, enquanto que o pré- tratamento com salina mostrou uma proteção maior, de 56,4%. Além disso, o tratamento oral com EHG aumentou para 18,0 μg/g de tecido, os níveis de grupos sulfidrílicos da mucosa gástrica, após lesão induzida pelo etanol (4,9 ± 1,0 μg/g de tecido). Por outro lado, o pré-tratamento com NG nitro-L-arginina (L-NAME), um inibidor da síntese de NO, não influenciou a atividade gastroprotetora do extrato. EHG reduziu as lesões de úlcera, induzida de forma crônica pelo ácido acético, em 59%. Na análise histopatológica, o tecido da mucosa gástrica de ratos tratados com EHG mostrou-se organizado, com fibrose consolidada e diminuição da inflamação. Neste grupo, a marcação com PAS tornou-se mais intensa, com difusa marcação epitelial. A investigação imunohistoquímica mostrou intensa reatividade para COX -2 e baixa reatividade para Ki -67, na mucosa gástrica dos animais tratados EHG. Em conjunto, os resultados sugerem que EHG de M. fasciculata apresenta efeito antiulcerogênico observados nos modelos de indução de úlcera gástrica aguda e crônica e, que a ação gastroprotetora do EHG provavelmente envolve a participação de compostos sulfidrílicos (-SH) não protéicos. Estes efeitos podem estar relacionados aos compostos fenólicos presentes na geoprópolis do município de Fernando Falcão.

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JardelBS_DISSERT.pdf: 1487162 bytes, checksum: 3c112dba9883bc8ce9ed34012482ca23 (MD5) Previous issue date: 2016-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The study aimed to evaluate the geopropolis bees Plebeia aff. flavocincta produced in Rio Grande Norte- Brazil, through the study of pharmacological activities, sensory characteristics and physical and chemical requirements. Investigated the antioxidant activity by the DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl), antibacterial, through the method of diffusion in agar and healing activity, by inducing experimental surgical wounds Rattus norvegicus in Berkenhout, 1769 Wistar. Quantified if the contents of total phenols and flavonoids through the Waterman and Mole methods, Woisky and Salatino, respectively. Samples of geopropolis showed consistency between the soft sticky resinous hard and hydroalcoholic extracts of geopropolis we identified 06 different types of scent, amber color, dark brown, green and colorless. The taste ranged from bitter to sweet and strong characteristic. All samples of the extracts showed up with liquid aspect, clear and smooth. The total phenolic content varied between 0,00 ± 0,00 and 9,4 ± 0,28% (m/m), the total flavonoid content of 0,0005 ± 0,0220 and 0,00003 ± 0,00037% (m/m). The antioxidant capacity of over 90% was observed in 05 samples. The extracts were found to be effective with respect to antimicrobial activity because of the 08 samples tested, 05 promoted inhibition zones &#8805;9mm front of all the strains tested. In wound healing assay of the experimental group, the base cream 20% geopropolis P. aff. flavocincta decreased the signs of inflammation and stimulate collagen production, accelerating the process of re-epithelialization, with no statistically significant difference in the areas of the wounds from the 9th day and complete healing on the 16th day. It follows that the geopropolis P. aff. flavocincta produced in semiarid RN, can be used as an alternative and natural principle in antibacterial activities, antioxidant and healing, characterized by a source of phenolic compounds / O estudo objetivou avaliar a geoprópolis de abelhas Plebeia aff. flavocincta produzida no Rio Grande do Norte-Brasil , através do estudo das atividades farmacológicas, características sensoriais e requisitos físico-químicos. Investigou-se a atividade antioxidante através do método DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazilo), antibacteriana, através do método de difusão em ágar e atividades cicatrizantes, através da indução de feridas cirúrgicas experimentais em Rattus norvegicus Berkenhout, 1769, linhagem Wistar. Quantificou-se os teores de fenóis e flavonoides totais através dos métodos Waterman e Mole, Woisky e Salatino, respectivamente. As amostras de geoprópolis apresentaram consistência entre maleável pegajoso a rígido resinoso e nos extratos hidroalcoólicos de geoprópolis identificou-se 06 distintos tipos de aroma, coloração âmbar, marrom escuro, esverdeado e incolor. O sabor variou do amargo ao característico forte e adocicado. Todas as amostras dos extratos apresentaram-se com aspecto líquido, límpido e homogêneo. O teor de fenóis totais variou entre 0,00± 0,00 e 9,4± 0,28% (m/m), o teor de flavonoides totais 0,0005 ± 0,00003 e 0,0220 ± 0,00037% (m/m). A capacidade antioxidante acima de 90% foi observada em 05 amostras. Os extratos foram considerados eficazes no que tange a atividade antimicrobiana, pois das 08 amostras testadas, 05 promoveram halos de inibição &#8805;9mm frente todas às cepas testadas. No ensaio de cicatrização do grupo experimental, o creme base 20% de geoprópolis de P. aff. flavocincta diminuiu os sinais de inflamação e estimulou a produção de colágeno, acelerando o processo de re-epitelização, apresentando diferença estatística significativa nas áreas das feridas a partir do 9° dia e total cicatrização no 16° dia. Conclui-se que a geoprópolis da P. aff. flavocincta produzidas no semiárido do RN, pode ser usada como princípio alternativo e natural nas atividades antibacteriana, cicatrizante e antioxidante, caracterizando por ser fonte de compostos fenólicos