Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2017-04-04T18:52:20Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Mestrado_PPG-ENTOMOLOGIA_Douglas de Campos.pdf: 4251712 bytes, checksum: 665f3099667589043250d9e99cff911e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T18:52:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Mestrado_PPG-ENTOMOLOGIA_Douglas de Campos.pdf: 4251712 bytes, checksum: 665f3099667589043250d9e99cff911e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-06-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Sensilla are sensory structures found in flagellomeres in greater quantity in antennas and extent in other parts of the head. The sensilla have multiple sensory modalities, are categorized as mechanoreceptors, chemoreceptors, thermoreceptors, or hygroreceptors and are CO2-sensitive. This study aimed to identify the types of sensilla and their distribution along the antenna present in individuals of both sexes and castes of stingless bees Melipona interrupta and M. seminigra. The bees were obtained in colonies from Meliponário do Grupo de Pesquisas em Abelhas (GPA) of the Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA). The antennas were removed and fixed in Zamboni solution and remained in this fixative for 24 hours; washed with saline, 0.9% NaCl, were then dehydrated in acetone solution with increasing concentrations (50%, 70%, 90%, 95% and acetone PA) for 10 minutes each; PA acetone three washes were done in the last material was remained in 0.5 mL of acetone to evaporate all content. The antennas were mounted on stubs for plating with gold and photographed in a scanning electron microscope in the Thematic Laboratory Microscopy Optics and Electronics - LTMOE at INPA. Thirteen different types of sensillum were found in M. interrupta and M. seminigra individuals: sensilla trichodea (ST) (trichodea type I to VI), setae, chaeticum, basiconic, placoidea, coeloconic, ampullacea and campaniform. In both species the sensilla trichodea type I is the most abundant found between the sexes and castes, the sensilla STIII are exclusively found of the first segment, that in males the first antennal segment is smaller than the females, but there is no significant differences in number of STIII between the sexes. STII can be found the first segment to the distal segment is greater number in female of both species. STV is exclusive of the last antennal segment in the distal segment in both species and sexes, sensilla basicônic is exclusive to females, and the number of workers of SB in M. interrupta and M. seminigra increases every segment near the antennal apex. The function chemoreceptor sensillum this must be exercised by another sensilla in males, such as the sensillum placodea, because it is present in larger amount in the male antenna in both species. The other sensilla are distributed homogeneously by the antenna. This work represents a breakthrough in understanding the sensory organs of M. interrupta and M. seminigra and can serve as a basis for further work in this area with this or other insect species, however, more complementary studies to scanning electron microscopy and electrophysiology, electroantennography should be performed to investigate what these sensilla functions play in the studied species. / Sensilas são estruturas sensoriais encontradas em maior quantidade nos flagelômeros e em menor quantidade em outras partes da cabeça dos insetos. As sensilas possuem várias modalidades sensoriais, como olfato, gustação, mecanorrecepção, termorrecepção e higrorrecepção. Este trabalho teve como objetivo identificar os tipos de sensilas e a sua distribuição ao longo da antena presentes em indivíduos de ambos os sexos e castas das abelhas sem ferrão Melipona interrupta e M. seminigra. As abelhas foram obtidas em colônias do Meliponário do Grupo de Pesquisas em Abelhas (GPA) do Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA). As antenas foram retiradas e fixadas em solução Zamboni e mantidas nesse fixador por 24 horas; lavadas com solução fisiológica, NaCl a 0,9 %, em seguida foram desidratadas em solução de acetona em concentrações crescentes (50%, 70%, 90%, 95% e acetona PA) por 10 minutos em cada uma; em acetona PA foram feitas três lavagens, na última o material foi deixado em 0,5 mL de acetona até evaporar todo conteúdo. As antenas foram montadas em suportes para metalização com ouro e fotografadas em microscópio eletrônico de varredura no Laboratório Temático de Microscopia Óptica e Eletrônica – LTMOE no INPA. Foram encontrados treze tipos de sensilas diferentes nos indivíduos de M. interrupta e M. seminigra: Sensilas tricóides (ST) (tricóides do tipo I ao VI), setae, céticas, basicônicas, placóides, celocônicas, ampuláceas e campaniforme. Em ambas as espécies a sensila tricóide tipo I é a mais abundante entre os sexos e castas, a sensila STIII é exclusiva do primeiro segmento, sendo que nos machos o primeiro segmento antenal é menor que os das fêmeas, mas não há diferença significatica no número de STIII entre os sexos. STII pode ser encontrada do primeiro segmento até o ápice antenal, está em maior número nas fêmas de ambas espécies. STV é exclusiva do último segmento antenal na porção distal do segmento em ambas as espécies e sexos, sensila basicônica é exclusiva das fêmeas, e o número de SB das operárias de M. interrupta e M. seminigra aumenta a cada segmento próximo ao ápice antenal. A função quimiorreceptora dessa sensila deve ser exercida por outra sensila nos machos, como por exemplo a sensila placóide, pois a mesma está presente em maior quantidade na antena dos machos em ambas as espécies. As demais sensilas estão distribuídas de forma homogênea em menor número pela antena. Esse trabalho representa um avanço no conhecimento dos órgãos sensoriais de M. interrupta e pode servir como base para mais trabalhos nessa área com essa ou outras espécies de insetos, no entanto, mais estudos complementares a microscopia eletrônica de varredura como eletrofisiologia, eletroantenografia devem ser realizados para investigar quais funções essas sensilas desempenham nas espécies estudadas.

Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2016-08-29T19:27:57Z No. of bitstreams: 2 Dissertação FINAL.pdf: 3365802 bytes, checksum: 750ef4a5dd90f44510a3a73e0ec19519 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-29T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação FINAL.pdf: 3365802 bytes, checksum: 750ef4a5dd90f44510a3a73e0ec19519 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-05-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Both in natural environments and in crops bees are considered the main pollinators. It is estimated that belonging to the tribe Meliponini are responsible for 30 to 90% pollination of the native flora. Due to deforestation, poor management of natural resources and also to the natural variations of climate conditions for the development of colonies of stingless bees, it is necessary to develop artificial feeding techniques and studies to assess their impact on the development of bees submitted to its use. In this work we were offered three types of artificial feeding, namely, syrup, syrup enriched with pollen and syrup enriched with vitamin compound Vitagold®, besides the control group; and all groups were free to collect resources in nature. The effects of the feeds were observed in the progeny of 40 colonies of two species of stingless bees, with 20 uninterrupted Melipona and 20 M. seminigra, to respect the separation of sex and caste, oviposition and morphometry (weight, length and width of the chest , interorbital distance and area corbicula). Five colonies were used in each treatment group for both species. It was found that the groups that received no extra power produced a smaller amount of brood cells, compared with the groups with additional power. For both species, the group creates more cells produced was fed syrup + vitamin complex, followed by that received syrup and lastly, which received syrup + pollen. However the result was not statistically significant between the groups with extra power. But the differences between treatments, even small, can make a difference in environmental stresses times. It was observed that the frequency of production of queens and males increased as the availability of food in nature increased in mid-September and October. The amount of non-viable larvae (rotten) was measured and showed no statistically significant result for any experimental treatment, which shows the need for more studies be conducted to investigate the causes of this production unfeasible. The mass of bees increased over the experimental time and, in general, the smaller masses at the end of the collections were with syrup + Vitagold® and control groups. The interorbital distance varied greatly over time, but at the end of the experiment and control groups syrup + Vitagold® obtained the smaller for both species. In relation to the chest size reduction occurred in M. uninterrupted during the experimental time, but in M ​​seminigra increased. The M. interrupta groups that obtained the smaller control were followed by the syrup + Vitagold® and M. seminigra was the reverse. The areas of the pollen basket decreased for both species; in M. interrupta the lowest averages were those of control groups and syrup + pollen and M. seminigra syrup + Vitagold® and control. It was observed, however, that the experimental species have different patterns of responses to artificial feeding and that it should be given with caution, especially food developed for other agencies, as the studies concerning this issue are still limited. / Tanto em ambientes naturais quanto em culturas agrícolas as abelhas são consideradas os principais polinizadores. Estima-se que as pertencentes à tribo Meliponini sejam responsáveis por 30 a 90% da polinização da flora nativa. Devido ao desmatamento, à má gestão dos recursos naturais e também às variações naturais das condições climáticas propícias ao desenvolvimento das colônias de Meliponini, se faz necessário o desenvolvimento de técnicas de alimentação artificial e de estudos que avaliem as suas consequências no desenvolvimento das abelhas submetidas ao seu uso. Nesse trabalho foram oferecidos três tipos de alimentação artificial, a saber: xarope, xarope enriquecido com pólen e xarope enriquecido com o composto vitamínico Vitagold®, além do grupo controle; e todos os grupos estavam livres para coletarem recursos na natureza. Os efeitos das alimentações foram verificados na progênie de 40 colônias de duas espécies de Meliponini, sendo 20 de Melipona interrupta e 20 de M. seminigra, ao que tange a segregação de sexo e casta, oviposição e morfometria (massa, comprimento e largura do tórax, distância interorbital e área da corbícula). Cinco colônias foram usadas em cada grupo tratamento para ambas as espécies. Constatou-se que os grupos que não receberam alimentação extra produziram uma menor quantidade de células de cria, se comparado com os grupos com alimentação suplementar. Para ambas as espécies, o grupo que mais produziu células de cria foi o alimentado com xarope + complexo vitamínico, seguido pelo que recebeu xarope e por último, o que recebeu xarope + pólen. Entretanto o resultado não foi estatisticamente significativo entre os grupos com alimentação extra. Mas as diferenças encontradas entre os tratamentos, mesmo pequenas, podem fazer a diferença em épocas de estresses ambientais. Foi observado que a frequência de produção de rainhas e machos aumentou à medida que a disponibilidade de alimento na natureza aumentou, em meados de setembro e outubro. A quantidade de larvas inviáveis (podres) foi aferida e não mostrou resultado estatisticamente significativo para nenhum tipo de tratamento experimental, o que mostra a necessidade que mais estudos sejam realizados a fim de investigar as causas dessa produção inviável. A massa das abelhas aumentou com o passar do tempo experimental e, de forma geral, as menores massas no final das coletas ficaram com os grupos xarope + Vitagold® e controle. A distância interorbital variou bastante com o tempo, mas ao término do experimento os grupos controle e xarope + Vitagold® obtiveram as menores dimensões para ambas as espécies. Já em relação às dimensões torácicas ocorreu a redução em M. interrupta durante o tempo experimental, mas em M. seminigra aumentou. Os grupos de M. interrupta que obtiveram as menores dimensões foram o controle seguido pelo do xarope + Vitagold® e, em M. seminigra, foi o inverso. As áreas das corbículas diminuíram para ambas as espécies; em M. interrupta as menores médias foram as dos grupos controle e xarope + pólen e, em M. seminigra, xarope + Vitagold® e controle. Pôde-se observar, portanto, que as espécies experimentais possuem diferentes padrões de respostas à alimentação artificial e que essa deve ser ministrada com cautela, principalmente os alimentos desenvolvidos para outros organismos, visto que os estudos referentes à essa problemática ainda são limitados.

As abelhas da tribo Meliponini (abelhas sem ferrão) estão amplamente distribuídas pelas regiões tropicais do planeta, tendo um importante papel na polinização, sendo o gênero Melipona o que contém o maior número de espécies. A espécie Melipona marginata é uma das menores e mais ancestrais do grupo, e a exemplo de outras espécies nidifica em ocos de árvore. M. marginata, assim como outras espécies do gênero Melipona, vêm sofrendo com a destruição do seu ambiente natural, pelo desmatamento, sendo, aparentemente mais exigente que outras espécies quanto ao tamanho do fragmento florestal para se manter, devido a isso é encontrada apenas em fragmentos maiores, mais antigos e menos perturbados. Tendo em vista a perda de hábitat e o pouco conhecimento da biologia dessa espécie, este trabalho pretende analisar populações de M. marginata, através da técnica PCR+RFLP do DNA mitocondrial e marcadores microssatélites, visando contribuir para entendimento da estrutura populacional de M. marginata. Foram analisados 54 ninhos, provenientes dos estados de MG, SP, PR, SC e RS. Oito regiões do DNA mitocondrial foram amplificadas, e posteriormente digeridas com 12 enzimas de restrição. Foram detectados 14 haplótipos, sendo apenas um compartilhado. A população de SP apresentou o maior número de haplótipos. Os testes estatísticos demonstraram que as populações estão estruturadas e isoladas, não havendo fluxo gênico entre as populações. Já nas análises dos microssatélites foram analisados 4 locos, apresentando alta variabilidade genética, onde também foi verificado que as populações se encontram estruturadas. Os resultados obtidos podem ser explicados principalmente pela redução da área de floresta, mas, podem se dever a eventos antigos em conseqüência de mudanças climáticas ocorridas durante as últimas glaciações. / The tribe Meliponini (stingless bees) is present in all tropical regions of the world and has an important role in pollination. The genus Melipona has the highest number of species in the tribe. The specie Melipona marginata is considered the most ancestral within the genus, and like other species builds the nests in hollow of trees. Unfortunately several bee species have suffered with the devastation of their natural environment. M. marginata seems to be very dependent on the size of the forest fragment, being found only in the biggest, oldest and consequently more preserved ones. In view of the habitat loss and few biological knowledge about this specie, this research intended to analyse M. marginata populations molecularly, through mitochondrial DNA PCR-RFLP and microsatellite data., Fifty four colonies were analyzed, from MG, SP, PR, SC and RS states. Eight mitochondrial DNA regions were amplified and screened with 12 restriction enzymes. Fourteen haplotypes were verified and among them just one was shared. SP population showed the highest number of haplotypes. Statistic tests showed that the 5 populations were genetic structured and isolated, therefore not presenting gene flow. The 4 microsatellites loci analyzed showed high genetic variability. The statistics analysis indicated that the 5 populations are structure and isolated. These results can be explained mainly because the decrease of forest leading to population isolation, however we can not discard the hypothesis that this current scenario is a consequence of climatic changes occurred during the last glaciations.

PEREIRA, Júlio Otávio Portela. Diversidade genética da abelha sem ferrão melipona quinquefasciata baseada no sequênciamento das regiões its1 e 18s do dna ribossômico nuclear. 2006. 141 f. Tese (doutorado em zootecnia)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2006. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-04-08T20:31:16Z No. of bitstreams: 1 2006_tese_joppereira.pdf: 2085821 bytes, checksum: da8ccd544517a5841c9efa06abf9dacd (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-25T22:48:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_tese_joppereira.pdf: 2085821 bytes, checksum: da8ccd544517a5841c9efa06abf9dacd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-25T22:48:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_tese_joppereira.pdf: 2085821 bytes, checksum: da8ccd544517a5841c9efa06abf9dacd (MD5) Previous issue date: 2006 / The research was carried out from January 2003 to March 2006, at the Department of Animal Science and Department of Biology in the Federal University of Ceará, in Fortaleza, Ceará. Bee samples were collected in the states of Ceará, Piauí and Goiás, Brazil. The objective of this work was to study the genetic variability of populations of the stingless bee Melipona quinquefasciata, which occurs naturally in the plateau of Araripe (South of Ceará), in the plateau of Ibiapaba (West of Ceará), in Canto do Burití, Piauí and Luziânia-Goiás (Center-Western, Brazil). Our aims were to contribute to the correct taxonomic classification of the Northeastern population and to give initial support to future work on the rational breeding of this species. Meliponiculture in rational hives for honey production will stimulate the change of the present predatory actions into a productive bee rearing activity which is ecologically sustainable. The regions of nuclear ribosomal DNA 18S and partial ITS-1 were extracted and sequenced and the following aspects were determined: nucleotid composition, matrixes of genetic distances, multiple alignments and cladograms. Results showed a high degree of similarity among the samples: 0,008 to region 18S, and 0,015 to partial ITS-1. The sequences’ size found to region 18S varied: from 1823 to 1869, and to ITS-1 from 491 to 572. The cladogram made to 18S presented a single clade. However, when external samples (M. quadrifasciata, M. subnitida, M. scutellaris, M. mandaçaia), were added to ITS-1, three groups were formed reflecting the described subgenus by the morphological taxonomy. Distance among the localities where samples were colleted was not significantly correlated to the dissimilarity of the bees to 17 18S. Nevertheless, there was a correlation with partial ITS-1, which contained the Piauí sample. Our conclusions are: (i) the bee samples from Ceará and Piauí cannot be distinguished, in molecular terms, from the bee samples of Goiás, suggesting they are the same species, although presenting some level of variability among the populations; (ii) the results reflect the taxonomy based in morphological aspects for Melipona quinquefasciata; (iii) the geographical distance suggested some level of alteration in the genoma of bees which inhabit in the three studied regions; (iv) the region partial ITS-1 of the nuclear ribosomal DNA, even in small bee samples, can help to solve taxonomic doubts at the subgenus level, in Melipona. / A pesquisa foi desenvolvida no período de janeiro de 2003 a março de 2006, nos Departamentos de Zootecnia, e Biologia da Universidade Federal do Ceará, localizada no município de Fortaleza, estado do Ceará. As amostras de abelhas foram coletadas nos estados do Ceará, Piauí e Goiás. O objetivo desta tese foi estudar a diversidade genética de populações da abelha sem ferrão Melipona quinquefasciata, ocorrendo naturalmente na Chapada do Araripe (Sul do Ceará), na Chapada da Ibiapaba (Oeste do Ceará), na cidade de Canto do Burití-PI, e na cidade de Luziânia-GO (Centro-Oeste do Brasil), visando contribuir para a correta classificação taxonômica da população nordestina e dar subsídios iniciais para trabalhos de criação racional desta espécie, em colméias para produção de mel, motivando então que a atual ação extrativista e predatória, reverta-se numa atividade zootécnica produtiva e ecologicamente sustentável. As regiões do DNA ribossômico nuclear 18S e ITS-1 parcial foram extraídas e seqüenciadas, podendo-se verificar os seguintes aspectos: Composição nucleotídica, matrizes de distância genética, múltiplos alinhamentos e cladogramas. Os resultados mostraram alto grau de similaridade entre as amostras, 0,008 para região 18S e 0,015 para o ITS-1 parcial. O tamanho das seqüências correspondente à região 18S, foram de 1823 a 1869, do ITS-1 491 a 572. O cladograma gerado para o 18S, apresentou um único clado, porém, o ITS-1 quando acrescido de amostras externas (M. quadrifasciata, M subnitida, M scutellaris, M. mandaçaia), derivou-se em três grupos, refletindo os subgêneros descritos pela taxonomia morfológica. A distância entre as áreas não se correlacionou significativamente com a dissimilaridade das abelhas para o 18S, porém houve correlação com o ITS-1 parcial, que agregou a amostra oriunda do estado do Piauí. Conclui-se (i) que as abelhas amostradas nos estados do Ceará e Piauí são indistinguíveis em termos moleculares das abelhas do estado de Goiás, sugerindo tratar-se da mesma espécie, embora apresentando algum nível de variabilidade entre as populações; (ii) os resultados encontrados refletem a taxonomia por dados morfológicos, para a espécie Melipona quinquefasciata; (iii) o distanciamento geográfico sugeriu algum grau de alteração no genoma das abelhas que nidificam nos três estados estudados; (iv) a região ITS-1 parcial do DNA ribossômico nuclear, mesmo em pequenas amostragens de abelhas, pode ajudar a resolver dúvidas taxonômicas ao nível de subgêneros, em Melipona.

BOMFIM, Isac Gabriel Abrahão. Relações filogenéticas de abelhas indígenas sem ferrão do táxon Melipona Illiger, 1806 (Apidae: Meliponina) baseadas em seqüências parciais da região its1 do DNA ribossômico nuclear. 2008. 97 f. Dissertação (Mestrado em zootecnia)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2008. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-05-17T17:48:21Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_igabomfim.pdf: 1036482 bytes, checksum: eed11b61d455adc337c8c2475055b894 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-27T19:59:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_igabomfim.pdf: 1036482 bytes, checksum: eed11b61d455adc337c8c2475055b894 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-27T19:59:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_igabomfim.pdf: 1036482 bytes, checksum: eed11b61d455adc337c8c2475055b894 (MD5) Previous issue date: 2008 / The present work was carried out from April 2006 to March 2008, in the departments of Biology and Animal Science in the Universidade Federal do Ceará. The aim of this research was to investigate, through molecular data, the phylogenetic relationships among some Brazilian stingless bee species belonging to the taxon Melipona Illiger, 1806. It was attempted to obtain information that could facilitate a taxonomic revision of this bee group in the future and to generate information useful to the development of rational rearing adequate to the distinct species of this taxon, contributing to a better commercial exploitation and conservation of these bee species. Bee samples were collected in various states of the North, Northeast and Southeast regions of Brazil. Through the extraction, amplification and partial DNA sequencing of the ITS1 region of nuclear ribosomal DNA of those samples and the partial sequences of the ITS1 region of other bees of the same taxon searched in the GenBank, it was possible to observe the following parameters: multiple alignment, nucleotide composition, matrixes of genetic distances and phylogenetic reconstruction. Results showed that multiple alignment resulted produced a central intersection of only 141 bp long and the average of the genetic distance among all the studied sequences of the taxon Melipona was of 7,6%. The phylogenetic trees built using algorithms based on the methods of the Neighbor-Joining (NJ), Maximum Parsimony (MP) and Maximum Likelihood (ML) for the partial sequences showed essentially the same topology, which was clearly distinct in three great clados: Clado 1 - contained the sequences of M. subnitida, M. quadrifasciata and M. mandacaia (all belonging to the subgenus Melipona); Clado 2 - included the sequences of M. quinquefasciata and M. fasciculata (both belonging to the subgenus Melikerria); and Clado 3 – represented in this work by the sequences of M. mondury, M. flavolineata and M. scutellaris (all belonging to the subgenus Michmelia). The three phylogenetic trees were capable to recover the monophyly of the genus Melipona as well as of the three clados, that appeared as monophyletic groups. / O presente trabalho foi conduzido no período de abril de 2006 a março de 2008, nos departamentos de Zootecnia e de Biologia, da Universidade Federal do Ceará. O objetivo desta pesquisa foi investigar, através de dados moleculares, as relações filogenéticas de algumas abelhas indígenas sem ferrão do táxon Melipona Illiger, 1806, nativas do Brasil. Procurou-se fornecer subsídios para facilitar uma futura revisão taxonômica sobre essas abelhas, e desse modo gerar informações para o desenvolvimento de um criatório racional, adequado às diferentes espécies deste táxon, dessa forma contribuindo para o melhor aproveitamento comercial e conservação dessas abelhas. As amostras de abelhas foram coletadas em vários estados das regiões Norte, Nordeste e Sudeste do Brasil. Por meio da extração, amplificação e seqüenciamento parcial da região ITS1 do DNA ribossômico nuclear dessas amostras, somadas às seqüências parciais da região ITS1 de outras abelhas do mesmo táxon retiradas do GenBank, pôde-se verificar os seguintes aspectos: alinhamento múltiplo, composição nucleotídica, matriz de distância genética e reconstrução filogenética entre as mesmas. Os resultados mostraram que o alinhamento múltiplo produziu uma interseção central com o comprimento de apenas 141 pb e a média da distância genética entre todas as seqüências estudadas do táxon Melipona foi de 7,6%. As árvores construídas usando algoritmos baseados nos métodos de agrupamento do vizinho mais próximo (NJ), máxima parcimônia (MP) e máxima verossimilhança (MV) para as seqüências parciais da região pesquisada mostraram essencialmente a mesma topologia, sendo esta bem definida em três grandes clados: Clado 1- contendo as sequências de M. subnitida, M. quadrifasciata e M. mandacaia (todas pertencendo ao subgênero Melipona); Clado 2 – abrangendo as seqüências de M. quinquefasciata e M. fasciculata (ambas pertencendo ao subgênero Melikerria); Clado 3 – tendo como representantes no presente trabalho, as seqüências de M. mondury, M. flavolineata e M. scutellaris (todas pertencentes ao subgênero Michmelia). Todas as três árvores filogenéticas foram capazes de recuperar a monofilia tanto do gênero Melipona como também a dos três clados, que apareceram como grupos monofiléticos.

As abelhas da tribo Meliponini (abelhas sem ferrão) estão amplamente distribuídas pelas regiões tropicais do planeta, tendo um importante papel na polinização, sendo o gênero Melipona o que contém o maior número de espécies. A espécie Melipona marginata é uma das menores e mais ancestrais do grupo, e a exemplo de outras espécies nidifica em ocos de árvore. M. marginata, assim como outras espécies do gênero Melipona, vêm sofrendo com a destruição do seu ambiente natural, pelo desmatamento, sendo, aparentemente mais exigente que outras espécies quanto ao tamanho do fragmento florestal para se manter, devido a isso é encontrada apenas em fragmentos maiores, mais antigos e menos perturbados. Tendo em vista a perda de hábitat e o pouco conhecimento da biologia dessa espécie, este trabalho pretende analisar populações de M. marginata, através da técnica PCR+RFLP do DNA mitocondrial e marcadores microssatélites, visando contribuir para entendimento da estrutura populacional de M. marginata. Foram analisados 54 ninhos, provenientes dos estados de MG, SP, PR, SC e RS. Oito regiões do DNA mitocondrial foram amplificadas, e posteriormente digeridas com 12 enzimas de restrição. Foram detectados 14 haplótipos, sendo apenas um compartilhado. A população de SP apresentou o maior número de haplótipos. Os testes estatísticos demonstraram que as populações estão estruturadas e isoladas, não havendo fluxo gênico entre as populações. Já nas análises dos microssatélites foram analisados 4 locos, apresentando alta variabilidade genética, onde também foi verificado que as populações se encontram estruturadas. Os resultados obtidos podem ser explicados principalmente pela redução da área de floresta, mas, podem se dever a eventos antigos em conseqüência de mudanças climáticas ocorridas durante as últimas glaciações. / The tribe Meliponini (stingless bees) is present in all tropical regions of the world and has an important role in pollination. The genus Melipona has the highest number of species in the tribe. The specie Melipona marginata is considered the most ancestral within the genus, and like other species builds the nests in hollow of trees. Unfortunately several bee species have suffered with the devastation of their natural environment. M. marginata seems to be very dependent on the size of the forest fragment, being found only in the biggest, oldest and consequently more preserved ones. In view of the habitat loss and few biological knowledge about this specie, this research intended to analyse M. marginata populations molecularly, through mitochondrial DNA PCR-RFLP and microsatellite data., Fifty four colonies were analyzed, from MG, SP, PR, SC and RS states. Eight mitochondrial DNA regions were amplified and screened with 12 restriction enzymes. Fourteen haplotypes were verified and among them just one was shared. SP population showed the highest number of haplotypes. Statistic tests showed that the 5 populations were genetic structured and isolated, therefore not presenting gene flow. The 4 microsatellites loci analyzed showed high genetic variability. The statistics analysis indicated that the 5 populations are structure and isolated. These results can be explained mainly because the decrease of forest leading to population isolation, however we can not discard the hypothesis that this current scenario is a consequence of climatic changes occurred during the last glaciations.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-30T17:39:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 537969 bytes, checksum: 5047dbb6279b6bbcb50b7a57488b68b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-30T17:39:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 537969 bytes, checksum: 5047dbb6279b6bbcb50b7a57488b68b7 (MD5) Previous issue date: 2004-02-12 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Melipona rufiventris e Melipona mondury eram consideradas, até recentemente, a mesma espécie e foram incluídas - citadas como M. rufiventris - entre as espécies ameaçadas de extinção da fauna nativa de Minas Gerais, Brasil. O objetivo deste trabalho foi auxiliar na conservação de M. rufiventris e de M. mondury por meio de estudos sobre alguns aspectos da biologia geral e da biologia reprodutiva destas duas espécies. Utilizaram- se colônias de M. rufiventris e de M. mondury provenientes de diferentes regiões do sudeste brasileiro. Verificaram-se as proporções de sexo e castas nas colônias e os pesos do alimento larval e dos ovos armazenados nas células de cria. Foram realizadas comparações dos pesos do alimento larval e dos ovos entre colônias de M. mondury e de M. rufiventris. Dos indivíduos nascidos nos favos coletados 93,2% eram operárias, 4,77% eram rainhas e 2,03% machos. Constatou-se que as proporções de sexo e casta variam sazonalmente e entre colônias e que o tempo de desenvolvimento do ovo até imago é diferenciado entre sexo e entre castas. Os pesos do alimento larval e dos ovos diferiram significativamente entre ninhos de M. rufiventris e de M. mondury. Machos de diferentes idades de M. mondury foram dissecados e a idade de maturação sexual dos zangões foi determinada. Para M. mondury, são descritos os processos de reabsorção testicular e de aumento do volume da vesícula seminal à medida em que os machos tornam-se mais velhos. Machos dessa espécie tornam-se maduros aproximadamente 15 dias após a emergência. Sugere-se que nas tentativas de acasalamento em laboratório sejam utilizados machos a partir dessa idade. As diferenças entre as “formas” estudadas reforçam o status de espécie para M. mondury. Os resultados obtidos neste estudo serão utilizados para subsidiar planos de manejo para as duas espécies, podendo também auxiliar na produção de colônias por meio de acasalamentos em laboratório. / Melipona rufiventris and Melipona mondury were considered, until recently, the same species and they were included – mentioned as M. rufiventris – in endangered species’ list of Minas Gerais State, Brazil. The goal of this work was to help the conservation of M. rufiventris and M. mondury using studies about their general and reproductive biology. Nests of M. rufiventris and M. mondury from different regions of Southeast Brazil were used. Proportions of castes and sex in the nests were verified and the larval food and the eggs stored in brood cells were weighted. The weights of larval food and of the eggs between nests of M. rufiventris and M. mondury were compared. Among the bees that emerge from the brood combs, 93,2% were workers, 4,77% were gynes and 2,03% were drones. The proportions of castes and of sex shift during the seasons and among nests. The time of development from egg to imago is different according to sex and to caste. The weights of larval food and of eggs were significantly different between nests of M. rufiventris and M. mondury. Drones of different ages of M. mondury were dissected and the age that they become mature was determined. In M. mondury, the process of testicular reabsorption and the increase of seminal vesicles in length and girth, while the males are becoming older, are described. In this species, drones become mature 15 days after emergence. It is suggested that in laboratories mating, should be used drones from this age. The differences between the “forms” studied reinforce the status of species to M. mondury. The results found in this study will be used to subsidize management plans for both species and to nest’s production by means of laboratories mating. / Não foram localizados o cpf e o currículo lattes do autor.

Submitted by Inácio de Oliveira Lima Neto (inacio.neto@inpa.gov.br) on 2018-01-30T12:57:01Z No. of bitstreams: 2 Diana Vieira Brito.pdf: 3554087 bytes, checksum: 965a5a8e72d0c0e6a8b6ef8339bd4aad (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-30T12:57:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Diana Vieira Brito.pdf: 3554087 bytes, checksum: 965a5a8e72d0c0e6a8b6ef8339bd4aad (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-07-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Sex differentiation is a fundamental step that profoundly affects the physiological, morphological and behavioral traits for species reproduction to be succeeded. In highly eusocial bees, another developmental process also takes place to increase species reproductive success: morphological specialization of some females for reproduction (queens), and others for colony maintenance functions (workers). The aim of this thesis was to investigate the molecular basis of sex and caste determination in the Amazonian stingless bee Melipona interrupta, and a possible interaction between them. Two genes from sex determination pathway were characterized in this study: feminizer (fem) and double sex (dsx). Candidate gene approach was used to identify genes related to caste determination. Relation between these genes and caste determination was identified by analyzing their response to manipulation of Juvenile Hormone (JH) titers, which have a major role in queen differentiation of highly eusocial insects, during caste divergence period (last larval instar). Moreover, expression of two genes involved in JH metabolism – mfe (biosynthesis) and jhe (degradation) – was analyzed in social organization context. About sex determination, it was found that Mi-fem pre-mRNA is sex-specifically spliced in a way which only the female splice variant encodes the full-length protein. Higher expression levels of Mi-fem were observed in embryos, which is the stage when sex is determined in insects. Furthermore, it was observed that JH induces an increase in Mi-fem expression during caste divergence period. A method for functional analysis of Mi-fem was also tested in M. interrupta. Parental RNA interference (pRNAi) was used for silencing fem in embryos, but it was not possible to confirm the knockdown. Sex-specific transcripts of Mi-dsx transcripts were also characterized and full-cDNA sequence was obtained. These transcripts encode protein isoforms with differences in their C-terminal domain. These results provide support for the conserved regulatory function of fem and dsx in Melipona bees and demonstrate a significant correlation between key elements of sex and caste determination pathways. About caste determination, five genes belonging to growth-related signaling or regulatory pathways with large phenotypic effects in development were found to be related to caste determination of M. interrupta in this study. Two genes from Insulin/Insulin-Like Signaling (IIS) pathway were responsive to JH (InR1 and InR2), but in opposite directions. DNA methyltransferase 3 (Dnmt3) gene, which is a key feature of epigenetic regulation, and yolk protein vitellogenin gene (Vg) were also found to be related to caste differentiation in M. interrupta. Furthermore, dsx expression was increased by high JH levels, which corroborates previous findings with fem. Besides being the first study to identify regulatory genes related to caste determination in Melipona, these findings give a hint about social strategy used by these bees to achieve high eusociality without relying on a nutrition-based phenotypic plasticity. Finally, analysis of JH metabolism genes revealed that only the expression of JH catabolism related gene jhe is correspondent to overall expected fluctuation of JH titers during larval development. In adult workers, comparison between mfe and jhe expression with recent findings about JH titers in another Melipona species indicated that JH might be playing alternative roles in social organization of workers of stingless bees. Taken together, these results provide a basis for further analysis functional about these sex- and caste-related genes to unveil mechanisms underlying these developmental processes. Also, findings here of a close link between sex and caste determination pathway, which points to sex determination pathway as a potential basis for the evolution of morphological specialization of castes. / A diferenciação sexual é uma etapa crucial do desenvolvimento que afeta profundamente os aspectos morfológicos, fisiológicos e comportamentais para que a reprodução das espécies seja bem-sucedida. Nas abelhas altamente eussociais, outro processo do desenvolvimento também está relacionado ao aumento do sucesso reprodutivo: a especialização morfológica de algumas fêmeas para a reprodução (rainhas), e de outras para a manutenção das colônias (operárias). O objetivo desta tese foi investigar a base molecular da determinação do sexo e da casta na abelha Melipona interrupta e uma possível interação entre ambas as vias. Dois genes da via de determinação do sexo foram caracterizados: feminizer (fem) e double sex (dsx). A abordagem de genes candidatos foi utilizada para a identificação de genes relacionados a determinação das castas, cuja relação foi deduzida por meio da análise de suas respostas à manipulação dos níveis de Hormônio Juvenil (HJ), o qual tem um papel central na diferenciação das rainhas. Além disso, a expressão de dois genes envolvidos no metabolismo do HJ – mfe (biossíntese) e jhe (degradação) – foi analisada no contexto de organização social. Observou-se que o pré-mRNA do gene Mi-fem sofre um splicing alternativo sexo-específico, de modo que apenas a variante específica das fêmeas codifica a proteína completa. Os níveis mais altos de expressão do fem foram observados na fase embrionária, na qual o sexo é determinado. Além disso, foi observado que o JH induz um aumento na expressão do Mi-fem no período de divergência entre as castas. Um método para a análise funcional do fem também foi testado em M. interrupta. O RNA de interferência parental (pRNAi) foi usado para silenciar o fem nos embriões, mas não foi possível confirmar o knockdown. Os transcritos sexo-específicos do Mi-dsx também foram caracterizados e a sequência completa do cDNA foi obtida. Esses transcritos codificam isoformas proteicas que apresentam diferenças nos seus domínios C-terminal. Esses resultados fornecem suporte às funções regulatórias conservadas do fem e dsx e demonstram um link entre os elementos-chave das vias de determinação do sexo e da casta. Cinco genes candidatos pertencentes a vias de sinalização de crescimento celular ou vias regulatórias com amplos efeitos fenotípicos no desenvolvimento apresentaram uma relação com a determinação das castas em M. interrupta. A expressão de dois genes da via Insulin/Insulin-Like (IIS) foi alterada em resposta ao HJ (InR1 e InR2), mas em sentidos opostos. Também foi observado que os genes codificadores da enzima DNA metiltransferase 3 (Dnmt3), a qual é um elemento chave na regulação epigenética, e da proteína do vitelo vitelogenina (Vg) apresentam uma relação com a diferenciação das castas. Ademais, a expressão do dsx foi aumentada pelos altos níveis de HJ, o que corrobora os resultados anteriores sobre o fem. Além desse ser o primeiro estudo a identificar genes regulatórios relacionados a determinação das castas em Melipona, esses resultados dão uma ideia sobre a estratégia social usada por essas abelhas para alcançarem a alta eussocialidade sem depender de uma plasticidade baseada em nutrição. Finalmente, a análise de genes relacionados ao metabolismo de HJ revelou que as flutuações nos títulos de HJ durante o desenvolvimento larval parecem ser reguladas pela via catabólica. Nas operárias adultas, a comparação do perfil de expressão do mfe e jhe com achados recentes sobre a titulação de HJ em outra espécie de Melipona forneceu indícios de que o HJ pode estar desempenhando papéis alternativos na organização social das operárias. Tomados em conjunto, esses resultados proveem uma base para análises mais aprofundadas sobre os processos de determinação do sexo e da casta. Além disso, as evidências encontradas aqui de uma conexão entre as vias de determinação do sexo e da casta apontam para a via de determinação do sexo como uma potencial base para a evolução da especialização morfológica entre as castas.

Submitted by Cleber Casali (clebercasali@ufv.br) on 2017-06-01T18:20:47Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 814506 bytes, checksum: 72a5b8760b3236d37f898dddf3ac222a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-01T18:20:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 814506 bytes, checksum: 72a5b8760b3236d37f898dddf3ac222a (MD5) Previous issue date: 2004-07-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As espécies do gênero Melipona são conhecidas como abelhas indígenas sem ferrão. Apresentam grandes relevâncias econômica e ecológica devido à sua importância na polinização e na produção de mel. Até o momento foram estudadas citogeneticamente 16 das 42 espécies descritas do gênero. Na citogenética, a utilização das endonucleases de restrição in situ (REs) tem se mostrado muito útil, por produzir informações sobre a constituição da cromatina. O presente trabalho teve como objetivos utilizar duas REs seguidas da coloração com fluorocromos, para obter informações a respeito da composição e organização da cromatina das três espécies do gênero Melipona (M. bicolor, M. quadrifasciata e M. subnitida); incrementar o entendimento dos mecanismos de atuação das enzimas de restrição in situ; e, com base no padrão de bandeamento, inferir sobre as relações de parentesco entre as espécies estudadas. Os cromossomos metafásicos foram tratados com a combinação das REs HaeIII e DraI, com os fluorocromos QM e CMA 3 , obtendo, assim, quatro tratamentos para cada espécie. As presenças ou ausências de bandas foram analisadas e os cladogramas, montados com o auxílio do programa PAUP ® . Foi reconhecida uma nova modalidade de atuação das REs nos cromossomos das espécies estudadas, que resultou no aumento da fluorescência de algumas regiões dos cromossomos. Os tratamentos com as REs parecem ter amplificado as marcações dos fluorocromos, provavelmente devido à descondensação do DNA, que aumentou a acessibilidade dos fluorocromos. A utilização dos caracteres obtidos com a aplicação das REs produziu um cladograma informativo, no qual se percebe uma grande divergência entre as espécies M. bicolor e M. subnitida. / The bees of genus Melipona are known as stingless indigenous bees. They have great economical and ecological relevance due to their importance on pollination and honey production. Until present, 16 out of 42 species of Melipona have been cytogenetically studied. In cytogenetics, the use of in situ restriction endonucleases (REs) has been very useful for generating information towards a better comprehension of the nature of chromatin. The objective of this work was to apply two REs, followed by fluorochrome dying, to characterize chromatin composition and organization in three species (M. bicolor, M. quadrifasciata and M. subnitida); and infer about the degree of similarity among these species. Metaphase chromosomes were treated with the combination of the REs HaeIII and DraI with fluorochromes QM and CMA 3 , representing four treatments for each species. The presence or absence of bands were recorded as characters and a Neighbor Joining analysis was carried out with PAUP*. Combination of REs action and fluorochromes resulted in the increase of fluorescence at some regions of the chromosomes, probably because of the DNA decondensation, which increased the accessibility of the fluorochromes. REs patterns suggest greater divergence between the species M. bicolor and M. subnitida.

MENESES, Hiara Marques. Desenvolvimento de colônias de jandaíra (Melipona Subnitida) sob confinamento e avaliação de métodos de multiplicação. 2016. 56 f. Dissertação (mestrado em zootecnia)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2016. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-04-07T17:16:42Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_hmmeneses.pdf: 2143261 bytes, checksum: ff87b61a8bd81c507236eb1fcd570261 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-24T23:10:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_hmmeneses.pdf: 2143261 bytes, checksum: ff87b61a8bd81c507236eb1fcd570261 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-24T23:10:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_hmmeneses.pdf: 2143261 bytes, checksum: ff87b61a8bd81c507236eb1fcd570261 (MD5) Previous issue date: 2016 / In periods of food shortage in the field, the production of honey and colonies decreases leading to weakening and even loss of colonies. Therefore, the maintenance of stingless bee colonies this time of year is still an obstacle in the production chain of beekeeping and management strategies that enable the maintenance and strengthening of colonies in times of food shortage must be established as well as efficient techniques of colonies multiplication. This study aimed to test the development of colonies of Melipona subnitida under confinement in order to develop them quickly, protected from external environment and without exposure to predators. For this, thirteen colonies were used, eight of them submitted to confinement system (CC) without access to the field, with energy and protein supply (syrup of water with sugar and Apis mellifera pollen), while five remained with free access to field (CLA) and without dietary supplementation in order to be used as control. In addition, three different methods of multiplication of colonies were tested: with supply of protein food, but without inserting princesses (Method I); with insertion of princesses, but without supply of protein food (Method II); with supply of protein food and insertion of princesses (Method III). In the first experiment, cell production ranged from 1.7 to 6.2 cells / day, with an average of 4.24 ± 1.59 cells / day in CC. In CLA, production ranged from 0.2 to 3 cells / day, averaging 1.76 ± 1.18 cells / day, significantly differ between groups. At the end of the experiment, only the group of CC was able to get up to 4 brood combs, that is the strong colony level. In this group, 75% of the colonies reached the target of 4 brood combs, taking an average of 52.13 ± 2.44 days. In relation to the median level colony (3 brood combs), the group of CC obtained 75% successful, while the group of CLA succeeded 60%. The average number of days needed to reach the goal of 3 brood combs was 37.88 ± 3.56 and 31.25 ± 0.51 for CC and CLA, respectively. However, the number of cells was one covariate that influenced the number of days until the conclusion of the third brood comb, averaging 174.5 ± 28.01 cells in CC and 133 ± 54.99 cells in CLA. Regarding multiplication methods colonies tested, the I method presented 83.3% successful, while the method II and III showed 9.8 and 14.3% successful, respectively. Therefore, it is concluded that the confinement technique proved to be very efficient in strengthening weak colonies, it may also be used for maintenance of colonies in the lean period. Thus, since the quantity and quality of food are adequate, the colonies are suitable for the multiplication phase. This multiplication without inserting princesses and with protein food supply is very effective, however, the princesses insertion technique is promising, need further study of the physiology and behavior of these insects to improve it. / Nos períodos de escassez de alimento no campo, a produção de mel e de novas colônias nos meliponários diminui levando ao enfraquecimento e até mesmo perda de colônias. Logo, a manutenção de colônias de abelhas sem ferrão nessa época do ano ainda é um entrave na cadeia produtiva da meliponicultura. Desta forma, estratégias de manejo que possibilitem a manutenção e fortalecimento de colônias em períodos de escassez precisam ser estabelecidas, bem como técnicas eficientes de multiplicação de colônias. O presente estudo teve por objetivo testar o desenvolvimento de colônias de jandaíra (Melipona subnitida) sob confinamento, a fim de desenvolvê-las rapidamente, protegidas de ambiente externo, sem esforço de forrageio e sem a exposição a predadores. Para isto, treze colônias foram utilizadas, sendo oito delas submetidas ao sistema de confinamento (CC), sem acesso ao campo e com fornecimento de alimentação energética e proteica (xarope de água com açúcar e pólen apícola desidratado e moído), enquanto que cinco permaneceram com livre acesso ao campo (CLA) e sem suplementação alimentar, a fim de serem usadas como controle. Além disto, três diferentes métodos de multiplicação de colônias foram testados: com fornecimento de alimento proteico, porém sem introdução de princesas (Método I); com introdução de princesas, porém sem fornecimento de alimentação proteica (Método II); e com fornecimento de alimentação proteica e introdução de princesas (Método III). No primeiro experimento, a produção de células variou de 1,7 a 6,2 células/dia, sendo em média, 4,24 ± 1,59 células/dia nas CC. Já nas CLA, a produção variou de 0,2 a 3 células/dia, com média de 1,76 ± 1,18 células/dia, diferindo significativamente entre os grupos. Ao final do experimento, somente o grupo das CC foi capaz de chegar até 4 discos, ou seja, ao patamar de colônia forte. Nesse grupo, 75% das colônias atingiram a meta de 4 discos, levando em média 52,13 ± 2,44 dias. Em relação ao patamar de colônia mediana (3 discos de cria), o grupo de CC obteve sucesso de 75%, enquanto o grupo das CLA obteve sucesso de 60%. A média de dias necessários para atingir a meta de 3 discos foi de 37,88 ± 3,56 e 31,25 ± 0,51 dias para CC e CLA, respectivamente. Porém, o número de células foi uma covariável que influenciou no número de dias até a conclusão do terceiro disco, sendo em média 174,5 ± 28,01 células nas CC e 133 ± 54,99 células nas CLA. Em relação aos métodos de multiplicação de colônias testados, o método I apresentou 83,3% de sucesso, enquanto que o método II e III apresentaram 9,8 e 14,3 % de sucesso, respectivamente. Portanto, conclui-se que a técnica de confinamento mostrou-se muito eficiente no fortalecimento de colônias fracas, podendo também ser utilizada para a manutenção das colônias no período de escassez. Desta forma, desde que a quantidade e qualidade do alimento sejam adequadas, as colônias estarão aptas para a fase de multiplicação. Essa multiplicação sem inserção de princesas e com fornecimento de alimento proteico é muito eficaz, porém, a técnica de inserção de princesas é promissora, necessitando mais estudos sobre a fisiologia e comportamento desses insetos para aprimorá-la.