A poliploidia induzida é uma ferramenta valiosa para o melhoramento genético de plantas, resultando em genótipos com características superiores aos diploides correspondentes. Considerando a importância da cultura de eucalipto para o setor florestal e para a economia brasileira, o presente trabalho teve como objetivo estabelecer um protocolo de poliploidização in vitro para eucalipto, utilizando a espécie Eucalyptus urophylla ST Blake. Segmentos nodais contendo gemas laterais de plântulas desenvolvidas in vitro foram utilizados como explantes para os testes de indução. Os tratamentos avaliados consistiram na imersão e agitação dos explantes em soluções de colchicina nas concentrações: 0; 0,125% e 0,250% em tempos de exposição de 12 e 24 horas e posterior inoculação in vitro em meio de cultura para multiplicação. Após 60 dias, as brotações emitidas foram analisadas por citometria de fluxo e constatou-se indivíduos diploides, tetraploides e mixoploides. Estas foram micropropagadas para a obtenção de mudas clonais ao final do processo. As mudas obtidas foram avaliadas por meio de análises morfológicas organográficas e anatômicas para verificar possíveis alterações resultantes da poliploidização in vitro. Os tratamentos promoveram a indução de 16 poliploides, sendo 11 mixoploides, quatro tetraploides e um octaplóide. A eficência máxima de indução obtida foi de 28% de poliploides no tratamento com 0,125% de colchicina por 12 horas sob agitação, com a obtenção tanto de mixoploides como de tetraploides puros. O protocolo geral de micropropagação utilizado, apesar de algumas perdas durante as etapas, garantiu a obtenção de altos percentuais de mudas clonais inteiramente tetraploides, comprovando a eficiência da técnica no isolamento de setores poliploides. A análise morfo-anatômica das mudas mostrou diferenças significativas em relação às características estomáticas, apontando este tipo de análise como indicador de poliploidização na separação preliminar dos indivíduos. A estrutura anatômica das folhas, no entanto, não sofreu modificações significativas, com exceção da espessura e área foliar da epiderme adaxial. A análise de componentes principais realizada para algumas variáveis morfo-anatômicas demonstrou que, apesar da análise estatística não ter apontado diferenças significativas, existe uma tendência em agrupar os genótipos diploides e tetraploides, diferenciando-os principalmente em relação às características estomáticas, espessura foliar, área do mesofilo, parênquimas paliçádico e lacunoso e espaço intercelular. Os resultados obtidos neste trabalho instigam a continuidade do estudo em diversas possibilidades de abordagens, como o estudo do desenvolvimento das mudas em condições de campos, anatomia da madeira e avaliação do comportamento meiótico. / The induced polyploidy is a valuable tool for genetic improvement of plants, resulting in genotypes with superior characteristics to their corresponding diploid. Considering the Eucalyptus culture importance to the forest sector and Brazilian economy, the aim of this study was establish an in vitro polyploidy protocol for eucalyptus, using the species Eucalyptus urophylla ST Blake. Nodal segments containing lateral buds developed from in vitro seedlings were used as explants for induction tests. The treatments tested consisted of soak and shake the explants in colchicine solutions at the concentrations: 0; 0.125% and 0.250% in soaking by periods of 12 or 24 hours and subsequent in vitro inoculation in culture medium for multiplication. After 60 days, the emitted shoots were classified by flow cytometry in levels of ploidy (diploid, tetraploid and mixoploids) and were subsequently micropropagated to obtain clonal seedlings at the end of the process. The clonal seedlings were evaluated using morphological and anatomical analysis to check the possible changes resulting from the in vitro polyploidy. The treatments promoted the induction of sixteen polyploids, being eleven mixoploids, four tetraploid and one octaploid. The maximum induction efficiency was obtained in 28% of polyploidy in the treatment with 0.125% of colchicine by soaking period of 12 hours, having obtained both mixoploids and pure tetraploids. The general protocol of micropropagation used, although presenting some losses during the steps, guaranted the inducing of high percentages of enterelly tetraploid, proving the efficiency of micropropagation in the isolation of polyploid sectors. The morpho-anatomical analysis of the poliploidy seedlings showed significant differences in relation to stomatal characteristics, indicating this type of analysis as polyploidy indicator in the preliminary separation of individuals. The anatomical structure of the leaves, however, did not change significantly, except for the thickness and leaf area of the adaxial epidermis. The principal component analysis (PCA) performed for some morphological and anatomical variables demonstrated that despite the statistical analysis did not have pointed out significant differences, there is a tendency to group the diploid and tetraploid genotypes, differentiating them mainly in relation to stomatal characteristics, leaf thickness, mesophyll area, palisade and spongy parenchyma areas and intercellular space. The results of this work instigate to continue the study in several possibilities of approaches, such as the study of the development of seedlings in fields conditions, wood anatomy and study of meiotic behavior.

A floricultura é uma alternativa para produtores que não possuem grandes áreas à disposição, sendo uma opção ao desenvolvimento regional. Nesse cenário a flora brasileira pode contribuir para a expansão e oferta de novos produtos. O Bioma Pampa apresenta uma diversidade de espécies que podem ser utilizadas nesse setor, como por exemplo, a Angelonia integerrima Sprengel, é uma espécie promissora que pode ser usada nesse contexto, porém são necessários estudos básicos para o conhecimento das formas de propagação e cultivo, para que esta possa ser explorada comercialmente de forma sustentável, bem como evitar o extrativismo e a posterior extinção. Diante disso o objetivo deste trabalho é levantar informações referentes à propagação de A. integerrima, por via sexuada e assexuada. Foram desenvolvidos estudos de modo a gerar informações para a produção de mudas in vitro, através da germinação de sementes que foram coletadas no município de Barão do Triunfo - RS e armazenadas em dois locais (ambiente refrigerado e bancada de laboratório), posteriormente foram germinadas em meio Murashige e Skoog (MS) com diferentes concentrações de sais, com a posterior multiplicação em meio com os fitorreguladores benzilaminopurina (BAP) e ácido naftalenoacético (ANA), enraizamento in vitro com ácido indolbutírico (AIB) e aclimatização das mudas em substrato casca de arroz carbonizada (CAC) em ambiente protegido. Outro estudo avaliou tamanhos de ápices caulinares no estabelecimento in vitro, a fim de obter explantes sem contaminações por fungos e bactérias, como estratégia de limpeza clonal para a micropropagação massal de espécimes adultos. Outro trabalho avaliou o efeito da concentração de ácido indol-3-butírico (AIB) em pó e substratos no enraizamento de estacas apicais. Sementes armazenadas sob ambiente refrigerado apresentaram maior porcentagem de germinação, não sendo afetada pela concentração de sais do meio; 1,0 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de ANA proporcionaram maior números de brotos por explante (15,17); 0,83 mg L-1 de AIB foi o ponto de máxima resposta para o enraizamento. Na aclimatização obteve-se 50,8% de mudas aclimatizadas. Durante a fase de estabelecimento dos diferentes tamanhos de ápices caulinares in vitro (primeiros 45 dias de cultivo), somente os explantes com tamanho de 1,0 mm não apresentaram contaminação, já no segundo subcultivo (90 dias) somente brotações oriundas de explantes iniciais com tamanho de 7 mm ou maiores apresentaram contaminação. É possível obter plantas livres de contaminações in vitro por fungos e bactérias, podendo utilizar explantes com tamanho médio inferior ou igual a 5 mm. O BAP proporcionou incremento linear para a multiplicação. Na estaquia obteve-se enraizamento médio de 79%. No enraizamento por estaquia de Angelonia integerrima não é necessário usar AIB e pode-se utilizar o substrato comercial à base de turfa ou a CAC. / Floriculture is an alternative for producers who do not have large areas available, being an option for regional development. In this scenario, Brazilian flora may contribute to expand and offer new products. The Pampa biome presents a diversity of species that can be used in this sector. Angelonia integerrima Sprengel is a promising species and can be used in this context, but basic studies are required for the understanding of its propagation methods and cultivation, so that it can be commercially exploited in a sustainable manner, as well as avoiding the extraction and subsequent extinction. Therefore, the aim of this study is to collect information about the propagation of A. integerrima, sexually and asexually. Studies have been developed in order to generate information for the production of seedlings in vitro from the germination of seeds collected at Barão do Triunfo and stored in two places (refrigerated environment and laboratory bench). They were subsequently germinated on a Murashige and Skoog (MS) medium with different concentrations of salts. Subsequently, a medium multiplication using the growth regulators benzylaminopurine (BAP) and naphthaleneacetic acid (NAA), in vitro rooting with indole-3-butyric acid (IBA) and acclimatization of seedlings on a substrate containing carbonized rice husks (CRH) in a protected environment was performed. Another study evaluated shoot apex sizes in the sample in vitro to obtain explants without contamination by fungi and bacteria, as a cleaning strategy for clonal mass micropropagation of adult specimens. Another study evaluated the effect of the concentration of indole-3-butyric acid (IBA) in powder and substrates on the rooting of apical cuttings. Seeds stored at refrigerated environment showed a higher germination percentage. They were not affected by the concentration of salts in the medium. The values 1.0 mg L-1 of BAP and 0.1 mg L-1 of IBA provided the highest numbers of shoots per explant (15.17). The value 0.83 mg L-1 of IBA obtained the maximal response point for rooting. Under acclimatization, there were 50.8% of acclimatized seedlings. During the different sizes of in vitro caudal apices establishment phase (the first 45 days of culture), only the explants with 1.0 mm in size were not contaminated. However, in the second subculture (90 days), only shoots from initial explants, with 7 mm in size or larger, were contaminated. It is possible to obtain plants free of contaminations in vitro by fungi and bacteria, and can use explants with an average size less than or equal to 5 mm. The IBA provided linear increment for multiplication. In the stem, 79% average rooting was obtained. In the rooting by cutting of Angelonia integerrima it is not necessary to use IBA. For acclimatization a commercial substrate based on peat or CRH can be used.

The banana is one of the most consumed fruits in the world and is widely consumed in Brazil, but diseases such as yellow and black Sigatoka have been reducing its production, most of ali because of lack of proper production technology. The tissue culture, specifically the micropropagation, is an alternative for the production of seedlings of banana with phitosanitarium and vegetative quality, but presents factors that difficult its application. Among which stands out contamination by fungi and bactéria, associated with oxidation of the explants by the exudation of phenolic compounds that cause rapid browning and death of apical shoots, resulting in great loss in the initial phase of the explants establishment. The objective of this work was to adapt and/or optimize the behavior of different banana cultivates, resistant to diseases, via micropropagation, adjusting the in vitro culture establishment phases, through the control of oxidation and contamination, proliferation / multiplication of shoots and rooting, for the rapid multiplication of plants with superior quality, as much in the phitosanitarium aspect as in the vegetative. The cultivates Bucaneiro (AAAA), Caipira (AAA), Fhia 18 (AAAB), BRS Garantida (AAAB), Japira (AAAB), Pacovan Ken (AAAB), PA 4244 (AAAB), Preciosa (AAAB), PV 03-76 (AAAB), Thap Maeo (AAB) and Tropical (AAAB) proceeding from the city of Baião in the state of Pará and Caipira (AAA), BRS Caprichosa (AAAB), Pacovan Ken (AAAB), Preciosa (AAAB), PV 03- 76 (AAAB), Thap Maeo (AAB) proceeding from the city of Belém in the state of Pará, were subjected to different micropropagation stages. In the study was used the streptomycin sulfate antibiotic and fungicide to reduce contamination in vitro caused by bactéria and fungi, besides the anti-oxidant PVP (polivinilpirrolidona) to control the oxidation. There was contamination reduction with the use of streptomycin sulfate in the concentration of 100 mg.L1 and of oxidation with PVP at 4 gL1. At the stage of proliferation / multiplication of shoots, the different cultivates showed means ranging from 1,67 to 7,0 shoots / explant, with greater proliferation in the initial culture (2,0 to 7,0 shoots / explant).The cultivate Caipira (AAA) stood out from the others with the highest rate of shoot multiplication after three subcultivations, 65 shoots per initial rhizome average, mostly from the rhizomes proceeding from Baião. The culture médium with half concentration of MS salts was effective in shoots rooting as much for PV 03-76 cultivate as for Pacovan to Ken cultivate. / A bananeira é uma das frutas mais consumidas no mundo, sendo amplamente consumida no Brasil, porém doenças como as Sigatokas negra e amarela vem reduzindo a sua produção, principalmente por falta de uma adequada tecnologia de produção. A cultura de tecidos, especificamente a micropropagação, é uma alternativa para a produção de mudas de bananeira com qualidade fitossanitária e vegetativa, mas apresenta fatores que dificultam sua aplicação. Dentre os quais, destaca-se a contaminação, por fungos e bactérias, associada à oxidação dos explantes pela exsudação de compostos fenólicos que provocam o rápido escurecimento e morte de ápices caulinares, resultando em grande perda na fase inicial de estabelecimento dos explantes. O objetivo desse trabalho foi adaptar e/ou otimizar o comportamento de diferentes cultivares de bananeira, resistentes a doenças, via micropropagação, ajustando as fases de estabelecimento da cultura in vitro, por meio do controle de oxidação e contaminação, proliferação/multiplicação de brotos e enraizamento, para a multiplicação rápida de plantas com qualidade superior, tanto no aspecto fitossanitário quanto vegetativo. As cultivares Bucaneiro (AAAA), Caipira (AAA), Fhia 18 (AAAB), BRS Garantida (AAAB), Japira (AAAB), Pacovan Ken (AAAB), PA 4244 (AAAB), Preciosa (AAAB), PV 03-76 (AAAB), Thap Maeo (AAB) e Tropical (AAAB) provenientes do município de Baião do estado do Pará e Caipira (AAA), BRS Caprichosa (AAAB), Pacovan Ken (AAAB), Preciosa (AAAB), PV 03-76 (AAAB), Thap Maeo (AAB), provenientes do município de Belém do Estado do Pará foram submetidas às diferentes fases do processo de micropropagação. No estudo foram utilizados o antibiótico sulfato de estreptomicina e um fungicida visando reduzir a contaminação in vitro provocada por bactérias e fungos, além do anti-oxidante PVP (polivinilpirrolidona) para controlar a oxidação. Houve redução da contaminação com uso do sulfato de estreptomicina à concentração de 100 mg.L'1 e da oxidação com PVP a 4 g.L'1. Na fase de proliferação/multiplicação de brotos, as diferentes cultivares apresentaram médias que variaram de 1,67 a 7,0 brotos/explante, com maior proliferação no cultivo inicial (2,0 a 7,0 brotos/explante). A cultivar caipira (AAA) destacou-se das demais com a maior taxa de multiplicação de brotos após os três subcultivos, média de 65 brotos por rizoma inicial, principalmente a partir dos rizomas provenientes de Baião. O meio de cultura com metade da concentração dos sais de MS foi eficiente no enraizamento de brotos tanto para a cultivar PV 03-76 quanto para a cultivar Pacovan Ken.

A floricultura é uma alternativa para produtores que não possuem grandes áreas à disposição, sendo uma opção ao desenvolvimento regional. Nesse cenário a flora brasileira pode contribuir para a expansão e oferta de novos produtos. O Bioma Pampa apresenta uma diversidade de espécies que podem ser utilizadas nesse setor, como por exemplo, a Angelonia integerrima Sprengel, é uma espécie promissora que pode ser usada nesse contexto, porém são necessários estudos básicos para o conhecimento das formas de propagação e cultivo, para que esta possa ser explorada comercialmente de forma sustentável, bem como evitar o extrativismo e a posterior extinção. Diante disso o objetivo deste trabalho é levantar informações referentes à propagação de A. integerrima, por via sexuada e assexuada. Foram desenvolvidos estudos de modo a gerar informações para a produção de mudas in vitro, através da germinação de sementes que foram coletadas no município de Barão do Triunfo - RS e armazenadas em dois locais (ambiente refrigerado e bancada de laboratório), posteriormente foram germinadas em meio Murashige e Skoog (MS) com diferentes concentrações de sais, com a posterior multiplicação em meio com os fitorreguladores benzilaminopurina (BAP) e ácido naftalenoacético (ANA), enraizamento in vitro com ácido indolbutírico (AIB) e aclimatização das mudas em substrato casca de arroz carbonizada (CAC) em ambiente protegido. Outro estudo avaliou tamanhos de ápices caulinares no estabelecimento in vitro, a fim de obter explantes sem contaminações por fungos e bactérias, como estratégia de limpeza clonal para a micropropagação massal de espécimes adultos. Outro trabalho avaliou o efeito da concentração de ácido indol-3-butírico (AIB) em pó e substratos no enraizamento de estacas apicais. Sementes armazenadas sob ambiente refrigerado apresentaram maior porcentagem de germinação, não sendo afetada pela concentração de sais do meio; 1,0 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de ANA proporcionaram maior números de brotos por explante (15,17); 0,83 mg L-1 de AIB foi o ponto de máxima resposta para o enraizamento. Na aclimatização obteve-se 50,8% de mudas aclimatizadas. Durante a fase de estabelecimento dos diferentes tamanhos de ápices caulinares in vitro (primeiros 45 dias de cultivo), somente os explantes com tamanho de 1,0 mm não apresentaram contaminação, já no segundo subcultivo (90 dias) somente brotações oriundas de explantes iniciais com tamanho de 7 mm ou maiores apresentaram contaminação. É possível obter plantas livres de contaminações in vitro por fungos e bactérias, podendo utilizar explantes com tamanho médio inferior ou igual a 5 mm. O BAP proporcionou incremento linear para a multiplicação. Na estaquia obteve-se enraizamento médio de 79%. No enraizamento por estaquia de Angelonia integerrima não é necessário usar AIB e pode-se utilizar o substrato comercial à base de turfa ou a CAC. / Floriculture is an alternative for producers who do not have large areas available, being an option for regional development. In this scenario, Brazilian flora may contribute to expand and offer new products. The Pampa biome presents a diversity of species that can be used in this sector. Angelonia integerrima Sprengel is a promising species and can be used in this context, but basic studies are required for the understanding of its propagation methods and cultivation, so that it can be commercially exploited in a sustainable manner, as well as avoiding the extraction and subsequent extinction. Therefore, the aim of this study is to collect information about the propagation of A. integerrima, sexually and asexually. Studies have been developed in order to generate information for the production of seedlings in vitro from the germination of seeds collected at Barão do Triunfo and stored in two places (refrigerated environment and laboratory bench). They were subsequently germinated on a Murashige and Skoog (MS) medium with different concentrations of salts. Subsequently, a medium multiplication using the growth regulators benzylaminopurine (BAP) and naphthaleneacetic acid (NAA), in vitro rooting with indole-3-butyric acid (IBA) and acclimatization of seedlings on a substrate containing carbonized rice husks (CRH) in a protected environment was performed. Another study evaluated shoot apex sizes in the sample in vitro to obtain explants without contamination by fungi and bacteria, as a cleaning strategy for clonal mass micropropagation of adult specimens. Another study evaluated the effect of the concentration of indole-3-butyric acid (IBA) in powder and substrates on the rooting of apical cuttings. Seeds stored at refrigerated environment showed a higher germination percentage. They were not affected by the concentration of salts in the medium. The values 1.0 mg L-1 of BAP and 0.1 mg L-1 of IBA provided the highest numbers of shoots per explant (15.17). The value 0.83 mg L-1 of IBA obtained the maximal response point for rooting. Under acclimatization, there were 50.8% of acclimatized seedlings. During the different sizes of in vitro caudal apices establishment phase (the first 45 days of culture), only the explants with 1.0 mm in size were not contaminated. However, in the second subculture (90 days), only shoots from initial explants, with 7 mm in size or larger, were contaminated. It is possible to obtain plants free of contaminations in vitro by fungi and bacteria, and can use explants with an average size less than or equal to 5 mm. The IBA provided linear increment for multiplication. In the stem, 79% average rooting was obtained. In the rooting by cutting of Angelonia integerrima it is not necessary to use IBA. For acclimatization a commercial substrate based on peat or CRH can be used.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-24T12:12:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1281900 bytes, checksum: 4472f78480864646e3d483fe0dffb30a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-24T12:12:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1281900 bytes, checksum: 4472f78480864646e3d483fe0dffb30a (MD5) Previous issue date: 1999-12-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foram realizados dois trabalhos no laboratório de testes de progênie do Departamento de Fitotecnia da Universidade Federal de Viçosa, em Viçosa-MG. Um com a finalidade de desenvolver um protocolo de transformação de plantas de mandioca (Manihot esculenta Crantz) via Agrobacterium rhizogenes resistente à canamicina, e o outro para avaliar o efeito de fotoperíodo, filtros coloridos, nitrato de amônio, 2,4-D, picloram, ABA, AgNO 3 e STS na micropropagação de plântulas de mandioca. Na transformação da mandioca foram testados: a) meio seletivo com canamicina (0,0; 100; 200; 300; 400; 500; 600; 700; 800; 900; e 1.000 mg/L), b) influência da idade e luz nos discos foliares co-cultivados com a bactéria, c) efeito do ANA (0,0; 0,1; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; e 5,0 mg/L) no co- cultivo, d) efeito de concentrações de BAP (1,0; 10,0; 50; e 100,0 mg/L), e) efeito do GA 3 (0,05) + BAP (2,0 mg/L) e picloram (8,0 mg/L). Foi também realizada a análise isozimática do material. Avaliaram-se: peso da matéria seca, número de folhas e raízes, comprimento da parte aérea, presença de injúrias e coloração de folhas e caule. A partir de 100 mg/L de canamicina, as plântulas apresentaram fitotoxidez; folhas novas e no claro apresentam os melhores resultados; o melhor resultado com ANA foi obtido a 2,0 mg/L; calos transformados apresentaram maior peso de matéria seca com 10 mg/L de BAP e com picloram; na análise isozimática constatou-se diferença no padrão de bandas. Na micropropagação, avaliaram-se as mesmas características dos experimentos de transformação; nos experimentos com STS e AgNO 3 foram avaliados também o teor de clorofila, e nos de nitrato de amônio, fotoperíodo, filtros coloridos e ABA foi feita também uma análise mineral do material vegetal. Avaliou-se o efeito do nitrato de amônio (0; 1/8; 1/4; 1/2; 3/4; 1; e 2 da concentração original) com e sem BAP. Estudou-se o efeito dos fotoperíodos: 0; 8 e 16 h luz. Quanto ao efeito do STS e AgNO 3, as concentrações utilizadas foram: de STS (0, 20, 30 e 50 μM) e de AgNO 3 (0, 10, 30 e 50 μM). Foram avaliados os efeitos de 2,4-D (0; 4,4; e 8,8 mg/L) e picloram (0; 4,8; e 9,6 mg/L) no claro e no escuro. Verificou-se também o efeito de 2,4-D (0; 2,2; 4,4; 6,6; e 8,8 mg/L) e ABA (0,0; 1,0 e 10 mg/L). Para avaliar o efeito da qualidade de luz, as plântulas foram colocadas sob filtros de acrílico vermelho, amarelo e azul. Os resultados obtidos indicaram que, com ou sem o BAP, pode-se usar uma concentração de nitrato de amônio abaixo da normalmente utilizada; o 2,4-D teve efeito melhor na concentração de 4,4 mg/L no escuro; e o picloram não induziu nenhum tipo de mudança morfogênica. O ABA impediu o crescimento da mandioca. O filtro amarelo foi o mais indicado para um estudo na área de enraizamento. O fotoperíodo age diferente conforme, o cultivar. Tanto para o AgNO 3 como para o STS a resposta da mandioca não foi benéfica. / There were two researches done in the progenie test laboratory at the Plant Technology Department at the Federal University of Viçosa, in Viçosa-MG. One of them had as its aim to develop a manioc plant transformation protocol (Manihot esculenta Crantz) by means of Agrobacterium rhizogenes which is resistant to kanamicine, and the other was to evaluate the effect of the photoperiod, colour filters, ammonium nitrate; 2,4-D, picloram, ABA, AgNO 3 and STS in the small plant of cassava. The following were tested during the cassava transformation: a) selective means with kanamicine (0,0; 100; 200; 300; 400; 500; 600; 700; 800; 900; and 1.000 mg/L), b) the influence of age and light over the leaf disks which were cultivated in bacteria, c) the effect of ANA (0,0; 0,1; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; and 5,0 mg/L) in the co-cultivate, d) the effect of the BAP (1,0; 10,0; 50; and 100,0 mg/L) concentrations, e) the effect of the GA3 (0,05) + BAP (2,0 mg/L) and picloram (8,0 mg/L). There was also a isozimatic analysis of the material. The following were evaluated: dry matter weight, the number of leaves and roots, the length of the aerial part, the presence of damage and the coloring of the leaves and stem. With 100 mg/L of kanamicine, the small plants presented phitotoxidity; the new leaves and under light present better results; the best result with ANA was obtained with 2,0 mg/L; the calluses that were formed presented heavier weight, 10 mg/L of BAP, within the dry matter and with picloram; there was a difference with the band pattern in the isozimatic analysis. The same characteristics of the transformation experiments were evaluated; the chlorophyll content was evaluated in the experiments that had STS and AgNO 3, and there was also a mineral analysis of the vegetal material done for the photoperiod, colored filters and ABA. The effect of the ammonium nitrate (0; 1/8; 1/4; 1/2; 3/4; 1; and 2 from the original concentration) with and without BAP was evaluated. The effects of the photoperiods of light were studied : 0; 8 and 16 light hours. For the effect of the STS and the AgNO 3, the concentrations that were used were: STS (0, 20, 30 e 50 μM) and AgNO 3 (0, 10, 30 and 50 μM). The effects of the 2,4-D (0; 4,4; and 8,8 mg/L) and picloram (0; 4,8; and 9,6 mg/L) in the light and in the dark were evaluated. The effect of 2,4-D (0; 2,2; 4,4; 6,6; and 8,8 mg/L) and ABA (0,0; 1,0 and 10 mg/L) was verified. To evaluate the light quality effect, the small plants were put under red, yellow and blue acrylic filter. The results that were obtained indicated that, with or without BAP, a ammonium nitrate concentration can be used below the usual amount that is used; the 2,4-D had a better effect in the concentration of 4,4 mg/L in the dark; and the picloram did not induce any type of morphogenic change. The ABA inhibited the growth of the manioc. The yellow filer was more indicated for a study in the rooting area. The photoperiod works differently according the cultivar. Either for the AgNO 3 or for the STS the return from the cassava was not beneficial.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O gênero Passiflora ocorre principalmente em regiões de clima tropical, sendo o Brasil um importante centro de diversidade. Passiflora foetida L. é uma espécie silvestre que apresenta características de interesse ornamental e medicinal. O objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de sistemas de cultura de tecidos e criopreservação para P. foetida. Explantes caulinares foram excisados de culturas primárias obtidas a partir de plântulas derivadas da germinação in vitro. Para isso foram inoculados em meio MSM, suplementado com diferentes concentrações de ANA, PIC, TDZ e BAP utilizado isoladamente ou em combinação com ANA, e mantidos na presença ou ausência de luz. Foi observada a produção de brotos, calos e raízes adventícias, de acordo com o tipo e a concentração do regulador de crescimento testado e da condição de cultura utilizada. A produção de plantas ocorreu via organogênese direta e indireta em resposta a BAP, enquanto que a formação de calos não morfogênicos foi observada a partir de ambos explantes em resposta a PIC. A produção de raízes adventícias ocorreu em resposta a ANA. Tendo em vista a produção de raízes observada em meio sólido, segmentos internodais foram inoculados em meio líquido suplementado com diferentes auxinas e mantidos em imersão contínua ou sobre pontes de papel de filtro. A maior taxa de multiplicação de raízes foi observada a partir de entrenós mantidos no sistema de ponte de papel de filtro, em resposta a ANA. Segmentos radiculares excisados das culturas primárias também foram utilizados visando à produção de brotos e a multiplicação de raízes. Contudo, apenas foi observada a formação de gemas, sem posterior desenvolvimento de brotos. Além disso, a capacidade proliferativa dos segmentos radiculares inoculados em meio suplementado com ANA foi menor que a obtida a partir dos entrenós cultivados nas mesmas condições. Neste trabalho, foram também testados diferentes protocolos de criopreservação para ápices caulinares de P. foetida por meio de vitrificação e encapsulamento-vitrificação. A recuperação de plantas pós-congelamento foi observada unicamente a partir de ápices encapsulados e expostos à solução de vitrificação PVS2 por 120 minutos. Tendo em vista o potencial medicinal já descrito para P. foetida, através dos diferentes sistemas de cultura desenvolvidos neste trabalho serão obtidos materiais para a avaliação de diferentes atividades biológicas. / The genus Passiflora occurs mainly in tropical regions, and Brazil is na important diversity Center. Passiflora foetida L. is a wild species with ornamental and medicinal potential. The goal of this work was the establishment of tissue culture systems and cryopreservation for P. foetida. Stem explants were excised from primary cultures obtained from plantlets derived from in vitro germination. Nodal and internodal segments were inoculated on MSM medium supplemented with different concentrations of NAA, PIC, TDZ and BAP, used alone or in combination with NAA, and maintained in the presence or absence of light. The production of shoots, calluses and adventitious roots was observed, according to the type and concentration of growth regulator and the culture condition. Plant production occurred via direct and indirect organogenesis in response to BAP, whereas the formation of non-morphogenic calluses was observed from both explants in response to PIC. The production of adventitious roots occurred in response to NAA. In the view of root production on solid medium, internodal segments were inoculated on liquid medium supplemented with different auxins and maintained under continuous immersion or on filter-paper bridges. The highest root multiplication rate was observed from internodes maintained on filter-paper bridge in response to NAA. Root segments excised from primary cultures were also used aiming at shoot production and root multiplication. However, we only observed buds formation, without shoot development. In addition, proliferation capacity of root segments inoculated on medium supplemented with NAA was lower than the observed from internodes cultivated at the same conditions. In this work, we also tested different cryopreservation protocols for shoot tips of P. foetida through vitrification and encapsulation-vitrification. Post-freezing recovery was only observed from encapsulated explants which were exposed to the vitrification solution PVS2 for 120 minutes. In the view of the medicinal potential described for P. foetida, the different culture systems developed in this work will provide sources of material for the evaluation of distinct biological activities.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5434.pdf: 780828 bytes, checksum: 48a9fc16b08390721a72c2c717a9c379 (MD5) Previous issue date: 2013-08-22 / Orchidaceae is one of the largest and diverse families of angiosperms, that is in almost every type of habitat, except tundras and deserts. They are considered of great ornamental importance, the genus Phalaenopsis has received a great prominence having increaed and its production enlarged in the Gross and inner market This way, the Brazilian floriculture market has a great demand in seedling production, requiring more studies and researches involving biotechnologycal techniques from the development of vases and containers on a prepared substrate, propagation techniques and acclimatization. And with in vitro culture, it is possible that the desirable plant coul be multiplied through several sucbultures, which enables an earlier and new cultivation available more quickly for commercial use. The luminosity is another factor that is gaining prominence in the productivity of orchids, the fact that the quality of light affects directly the growth and development of plants grown in vitro and/or ex vitro. The present work had as objective to anlyze the growth of in vitro and acclimatization in the two cultivations (cv. 6323 and cv. 6546) of orchid Phalaenopsis amabilis Blume, under different lighting spectra. Inicially it occurred the sowing the seedling in the cultivation enviroment MS that were enveloped with different cellophanes: yellow, blue, Green, red, and white. After 60 cultivation days it was performed an statistical evaluation on the seedling. Afterward, they were put in collective vases to the phase of acclimatization, and those ones stand for more three months. Through analyze the biometric data it can be observed that the growing in vitro and ex vitro of Phalaenopsis amabilis was influenced by many different spectra lights, considering that the various results of this influence from the genotype. It can be observed that the blue spectrum performed a great performance on cv. 6323 and on the Green spectrum cv. 6546. / Orchidaceae é uma das maiores e diversificadas famílias de angiospermas, que ocupam quase todo tipo de habitat, exceto tundras e regiões desérticas. São consideradas de grande importância ornamental, principalmente as do gênero Phalaenopsis que tem recebido grande destaque, e sua produção aumentada no mercado interno e externo. Dessa forma, o mercado florícola brasileiro teve uma grande demanda na produção de mudas, exigindo mais estudos e pesquisas biotecnológicas que envolvessem técnicas desde o desenvolvimento de vasos e recipientes, a substratos, formas de propagação e aclimatação. Nesse ínterim, com a cultura in vitro, é possível obter a partir de uma planta de interesses desejáveis, a multiplicação desta em vários subcultivos, que possibilita que uma nova cultivar esteja disponível mais rapidamente para uso comercial. A luminosidade é outro fator que vem ganhando destaque na produtividade de orquídeas frente à sua influência direta no crescimento e desenvolvimento de plantas cultivadas in vitro e/ou ex vitro. O presente trabalho teve como objetivo analisar o crescimento in vitro e a aclimatação de dois cultivares (cv. 6323 e cv. 6546) da orquídea Phalaenopsis amabilis, sob diferentes espectros luminosos. Inicialmente, ocorreu a semeadura da plântula em meio de cultura MS que foram envelopados com diferentes cores de celofane: amarelo, azul, verde, vermelho e o controle. Passados 60 dias de cultivo, foi feita a avaliação estatística das plântulas. Posteriormente, foram envasadas em vasos coletivos para a fase de aclimatação, as quais permaneceram por mais três meses. A partir dos dados biométricos analisados pode-se observar que o crescimento in vitro e ex vitro de Phalaenopsis amabilis foi influenciado pelos diferentes espectros luminosos, sendo os variados resultados desta influência decorrentes do genótipo. Pode se observar que o espectro azul exerceu maior influência sobre o cv. 6323 e o espectro verde sobre o cv. 65496.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O gênero Passiflora ocorre principalmente em regiões de clima tropical, sendo o Brasil um importante centro de diversidade. Passiflora foetida L. é uma espécie silvestre que apresenta características de interesse ornamental e medicinal. O objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de sistemas de cultura de tecidos e criopreservação para P. foetida. Explantes caulinares foram excisados de culturas primárias obtidas a partir de plântulas derivadas da germinação in vitro. Para isso foram inoculados em meio MSM, suplementado com diferentes concentrações de ANA, PIC, TDZ e BAP utilizado isoladamente ou em combinação com ANA, e mantidos na presença ou ausência de luz. Foi observada a produção de brotos, calos e raízes adventícias, de acordo com o tipo e a concentração do regulador de crescimento testado e da condição de cultura utilizada. A produção de plantas ocorreu via organogênese direta e indireta em resposta a BAP, enquanto que a formação de calos não morfogênicos foi observada a partir de ambos explantes em resposta a PIC. A produção de raízes adventícias ocorreu em resposta a ANA. Tendo em vista a produção de raízes observada em meio sólido, segmentos internodais foram inoculados em meio líquido suplementado com diferentes auxinas e mantidos em imersão contínua ou sobre pontes de papel de filtro. A maior taxa de multiplicação de raízes foi observada a partir de entrenós mantidos no sistema de ponte de papel de filtro, em resposta a ANA. Segmentos radiculares excisados das culturas primárias também foram utilizados visando à produção de brotos e a multiplicação de raízes. Contudo, apenas foi observada a formação de gemas, sem posterior desenvolvimento de brotos. Além disso, a capacidade proliferativa dos segmentos radiculares inoculados em meio suplementado com ANA foi menor que a obtida a partir dos entrenós cultivados nas mesmas condições. Neste trabalho, foram também testados diferentes protocolos de criopreservação para ápices caulinares de P. foetida por meio de vitrificação e encapsulamento-vitrificação. A recuperação de plantas pós-congelamento foi observada unicamente a partir de ápices encapsulados e expostos à solução de vitrificação PVS2 por 120 minutos. Tendo em vista o potencial medicinal já descrito para P. foetida, através dos diferentes sistemas de cultura desenvolvidos neste trabalho serão obtidos materiais para a avaliação de diferentes atividades biológicas. / The genus Passiflora occurs mainly in tropical regions, and Brazil is na important diversity Center. Passiflora foetida L. is a wild species with ornamental and medicinal potential. The goal of this work was the establishment of tissue culture systems and cryopreservation for P. foetida. Stem explants were excised from primary cultures obtained from plantlets derived from in vitro germination. Nodal and internodal segments were inoculated on MSM medium supplemented with different concentrations of NAA, PIC, TDZ and BAP, used alone or in combination with NAA, and maintained in the presence or absence of light. The production of shoots, calluses and adventitious roots was observed, according to the type and concentration of growth regulator and the culture condition. Plant production occurred via direct and indirect organogenesis in response to BAP, whereas the formation of non-morphogenic calluses was observed from both explants in response to PIC. The production of adventitious roots occurred in response to NAA. In the view of root production on solid medium, internodal segments were inoculated on liquid medium supplemented with different auxins and maintained under continuous immersion or on filter-paper bridges. The highest root multiplication rate was observed from internodes maintained on filter-paper bridge in response to NAA. Root segments excised from primary cultures were also used aiming at shoot production and root multiplication. However, we only observed buds formation, without shoot development. In addition, proliferation capacity of root segments inoculated on medium supplemented with NAA was lower than the observed from internodes cultivated at the same conditions. In this work, we also tested different cryopreservation protocols for shoot tips of P. foetida through vitrification and encapsulation-vitrification. Post-freezing recovery was only observed from encapsulated explants which were exposed to the vitrification solution PVS2 for 120 minutes. In the view of the medicinal potential described for P. foetida, the different culture systems developed in this work will provide sources of material for the evaluation of distinct biological activities.

A floricultura é uma alternativa para produtores que não possuem grandes áreas à disposição, sendo uma opção ao desenvolvimento regional. Nesse cenário a flora brasileira pode contribuir para a expansão e oferta de novos produtos. O Bioma Pampa apresenta uma diversidade de espécies que podem ser utilizadas nesse setor, como por exemplo, a Angelonia integerrima Sprengel, é uma espécie promissora que pode ser usada nesse contexto, porém são necessários estudos básicos para o conhecimento das formas de propagação e cultivo, para que esta possa ser explorada comercialmente de forma sustentável, bem como evitar o extrativismo e a posterior extinção. Diante disso o objetivo deste trabalho é levantar informações referentes à propagação de A. integerrima, por via sexuada e assexuada. Foram desenvolvidos estudos de modo a gerar informações para a produção de mudas in vitro, através da germinação de sementes que foram coletadas no município de Barão do Triunfo - RS e armazenadas em dois locais (ambiente refrigerado e bancada de laboratório), posteriormente foram germinadas em meio Murashige e Skoog (MS) com diferentes concentrações de sais, com a posterior multiplicação em meio com os fitorreguladores benzilaminopurina (BAP) e ácido naftalenoacético (ANA), enraizamento in vitro com ácido indolbutírico (AIB) e aclimatização das mudas em substrato casca de arroz carbonizada (CAC) em ambiente protegido. Outro estudo avaliou tamanhos de ápices caulinares no estabelecimento in vitro, a fim de obter explantes sem contaminações por fungos e bactérias, como estratégia de limpeza clonal para a micropropagação massal de espécimes adultos. Outro trabalho avaliou o efeito da concentração de ácido indol-3-butírico (AIB) em pó e substratos no enraizamento de estacas apicais. Sementes armazenadas sob ambiente refrigerado apresentaram maior porcentagem de germinação, não sendo afetada pela concentração de sais do meio; 1,0 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de ANA proporcionaram maior números de brotos por explante (15,17); 0,83 mg L-1 de AIB foi o ponto de máxima resposta para o enraizamento. Na aclimatização obteve-se 50,8% de mudas aclimatizadas. Durante a fase de estabelecimento dos diferentes tamanhos de ápices caulinares in vitro (primeiros 45 dias de cultivo), somente os explantes com tamanho de 1,0 mm não apresentaram contaminação, já no segundo subcultivo (90 dias) somente brotações oriundas de explantes iniciais com tamanho de 7 mm ou maiores apresentaram contaminação. É possível obter plantas livres de contaminações in vitro por fungos e bactérias, podendo utilizar explantes com tamanho médio inferior ou igual a 5 mm. O BAP proporcionou incremento linear para a multiplicação. Na estaquia obteve-se enraizamento médio de 79%. No enraizamento por estaquia de Angelonia integerrima não é necessário usar AIB e pode-se utilizar o substrato comercial à base de turfa ou a CAC. / Floriculture is an alternative for producers who do not have large areas available, being an option for regional development. In this scenario, Brazilian flora may contribute to expand and offer new products. The Pampa biome presents a diversity of species that can be used in this sector. Angelonia integerrima Sprengel is a promising species and can be used in this context, but basic studies are required for the understanding of its propagation methods and cultivation, so that it can be commercially exploited in a sustainable manner, as well as avoiding the extraction and subsequent extinction. Therefore, the aim of this study is to collect information about the propagation of A. integerrima, sexually and asexually. Studies have been developed in order to generate information for the production of seedlings in vitro from the germination of seeds collected at Barão do Triunfo and stored in two places (refrigerated environment and laboratory bench). They were subsequently germinated on a Murashige and Skoog (MS) medium with different concentrations of salts. Subsequently, a medium multiplication using the growth regulators benzylaminopurine (BAP) and naphthaleneacetic acid (NAA), in vitro rooting with indole-3-butyric acid (IBA) and acclimatization of seedlings on a substrate containing carbonized rice husks (CRH) in a protected environment was performed. Another study evaluated shoot apex sizes in the sample in vitro to obtain explants without contamination by fungi and bacteria, as a cleaning strategy for clonal mass micropropagation of adult specimens. Another study evaluated the effect of the concentration of indole-3-butyric acid (IBA) in powder and substrates on the rooting of apical cuttings. Seeds stored at refrigerated environment showed a higher germination percentage. They were not affected by the concentration of salts in the medium. The values 1.0 mg L-1 of BAP and 0.1 mg L-1 of IBA provided the highest numbers of shoots per explant (15.17). The value 0.83 mg L-1 of IBA obtained the maximal response point for rooting. Under acclimatization, there were 50.8% of acclimatized seedlings. During the different sizes of in vitro caudal apices establishment phase (the first 45 days of culture), only the explants with 1.0 mm in size were not contaminated. However, in the second subculture (90 days), only shoots from initial explants, with 7 mm in size or larger, were contaminated. It is possible to obtain plants free of contaminations in vitro by fungi and bacteria, and can use explants with an average size less than or equal to 5 mm. The IBA provided linear increment for multiplication. In the stem, 79% average rooting was obtained. In the rooting by cutting of Angelonia integerrima it is not necessary to use IBA. For acclimatization a commercial substrate based on peat or CRH can be used.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-11-03T12:29:58Z No. of bitstreams: 1 Lindomar Maria de Souza.pdf: 1006883 bytes, checksum: f749ba8de0eaf85d829e1e5e32898e96 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-03T12:29:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lindomar Maria de Souza.pdf: 1006883 bytes, checksum: f749ba8de0eaf85d829e1e5e32898e96 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / This paper has analyzed the morphophysiological and biochemical responses in sugarcane plants (Saccharum spp) and cactus pear (Opuntia stricta Haw) in function of exposition to various kinds and concentrations of cytokinins during these species’ micropropagations. The cytokinins are growth regulators which are largely used in the multiplication phase to induce breaking of the apical dominance, stimulating cell division and budding of lateral buds. The 6-benzylaminopurine (BAP) is the most used cytokinin in the micropropagation industry due to its effectiveness and accessibility; however it may incur abnormal growth in some plants. A kind of aromatic, non-conventional cytokinin, the meta-topolin (mT), has been an alternative to BAP for the purpose of reducing occurrence of morphophysiological disorders. Morphophysiological anomalies like fasciation in sugarcane and hyperhydricity in cactus pear, are problems caused by excessive exposure to BAP. The work was done in the Laboratório de Cultura de Tecidos Vegetais/UFRPE with collaboration of the Biofábrica Governador Miguel Arraes/CETENE. Sugarcane plants of the RB98710 variety were grown in static liquid system in various cytokinin concentrations (6,66 μmol L-1 of BAP; 5 μmol L-1 of BAP or mT). Buddings of cactus pear from variety Orelha de Elefante Mexicana, growth in vitro were used in the experiment. The treatments consisted in two kinds of cytokinins, BAP and mT in concentrations of 2,22 μmol L-1 of BAP, 1,11 μmol L-1 of BAP or 1,11 μmol L-1 of mT in static system in liquid or solid medium. Analysis were realized for multiplication ratio, fresh matter, height, analysis for enzymatic activity of superoxide dismutase (SOD), ascorbate peroxidase (APX) and catalase (CAT), as well as quantification in hydrogen peroxidase (H2O2) and malondialdehyde (MDA). In sugarcane it was observed that the mT promoted the higher rate on multiplication and higher height of plants and tillers. The role of hydrogen peroxyde in plant growth and development was observed. The plants submitted to higher BAP concentration displayed a higher MDA content. In the cactus pear growth it was observed that high concentrations of BAP favored the reduction of fresh matter, as well as buddings’ height. Formation of buds in liquid medium happened, in low amounts compared to solid medium. The hyperhydricity characteristics were more intense in buds grown with BAP. The hyperhydric buddings displayed a purple coloring, primarily in the podaries. From this paper it was verified that the sugarcane variety RB98710 responded positively to mT addition. The use of mT in cactus pear micropropagation in MS solid medium leads to promising results for bud production. / A presente pesquisa visou avaliar respostas morfofisiológicas e bioquímicas em plantas de cana-de-açúcar (Saccharum spp) e em plantas de palma forrageira (Opuntia stricta Haw) em função da exposição a diferentes tipos e concentrações de citocininas durante a micropropagação dessas espécies. As citocininas são reguladores de crescimento que são amplamente empregadas na fase de multiplicação por induzir a quebra da dominância apical, estimulando a divisão celular e a brotação de gemas laterais. A 6-benzilaminopurina (BAP) é a citocinina mais utilizada na indústria de micropropagação devido à sua efetividade e acessibilidade, porém pode acarretar crescimento anormal em algumas plantas. Um tipo de citocinina aromática não convencional, a meta-topolina (mT), tem sido alternativa ao uso do BAP a fim de reduzir o aparecimento de desordens morfofisiológicas. Anomalias morfofisiológicas como fasciação em cana-de-açúcar e hiperidricidade, em palma forrageira, são problemas atribuídos ao efeito do excesso ou tempo de exposição prolongado ao BAP. O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Cultura de Tecidos Vegetais/UFRPE com colaboração da Biofábrica Governador Miguel Arraes/CETENE. Plantas de cana-de-açúcar variedade RB98710 foram cultivadas em sistema estático líquido em diferentes concentrações de citocininas (6,66 μmol L-1 de BAP; 5 μmol L-1 de BAP ou mT). Brotações de palma forrageira, cultivar Orelha de Elefante Mexicana cultivadas in vitro foram utilizadas na obtenção de unidades propagativas. Os tratamentos consistiram em dois tipos de citocininas, BAP e mT nas concentrações de 2,22 μmol L-1 de BAP, 1,11 μmol L-1 de BAP ou 1,11 μmol L-1 de mT em sistema estático em meio líquido ou sólido. Foram realizadas avaliações da taxa de multiplicação, matéria fresca, altura, avaliação da atividade enzimática da superóxido dismutase (SOD), ascorbato peroxidase (APX) e catalase (CAT), como também a quantificação dos níveis de peróxido de hidrogênio (H2O2) e malondialdeído (MDA). Em cana-de-açúcar foi observado que mT promoveu maior taxa de multiplicação e maior altura de plantas e perfilhos. Foi observado o papel do peróxido de hidrogênio no crescimento e desenvolvimento vegetal. As plantas submetidas a maior concentração de BAP apresentaram maior teor de MDA. No cultivo da palma forrageira foi constatado que altas concentrações de BAP favoreceu para a redução da matéria fresca, bem como da altura das brotações. Houve formação de brotos em meio líquido, mesmo que em número reduzido quando comparado com o meio sólido. As características de hiperidricidade foram mais intensas em brotos provenientes do cultivo com BAP. As brotações hiperídricas apresentaram uma coloração púrpura, principalmente nas podarias. A apartir desse estudo foi constatado que a variedade de cana-de-açúcar RB98710 respondeu de forma favorável à adição de mT. O uso de mT na micropropagação da palma forrageira em meio MS sólido apontam resultados promissores para a produção de mudas em larga.escala.