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BRASSINOSTEROIDE E AUXINA NO DESENVOLVIMENTO E ENRAIZAMENTO INVITRO DE MIRTILEIRO (Vaccinium Ashei)Oliveira, Marina Angelica de 29 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The expansion of cultivated blueberry fields in Brazil is directly linked to the provision of quality seedlings to the market, which may result in the increase of production. The plant micropropagation technique enables the production and provides high quality plants, physiologically viable and healthy and free from viruses in a short space of time. Woody plants presente difficulty in the in vitro rooting, in this context the
development of a more efficient system of rooting results in plants with higher physiological quality and reduction of losses during the acclimatization phase. In the first experimente the treatments consisted in 8 doses of BIOBRAS 16 (0; 0,1; 0,2;
0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 mg L-1) added to the culture medium at the time of preparation. The following characteristics were evaluated: number of corns, callus diameter, number of roots, the total root length, total length, number of shoots, length of shoots, number of leaves and fresh mass. The lowest concentration of BIOBRAS 16 used (0,1 mg L-1) presented a higher percentage of rooting, root length and number of
leaves, but also stimulated the development of calluses. The dose of 0,4 mg L-1 stimulated the formation of shoots and length thereof. There was no significant difference for other parameters evaluated. In the second experiment the treatments
consisted in diferent doses of BIOBRAS 16 (0,1; 0,3; 0,5 mg L-1) associated to different doses of indole acetic acid (1; 3; 5 L-1 μM) added to the culture medium during preparation. The parameters evaluated were the same as the experiment 1.
The use of BIOBRAS 16 associated with indolacetic acid showed a positive effect for the development of in vitro characteristics of blueberry. For rooting, the concentration of 0,3 mg L-1 BIOBRAS 16 + 5 μM AIA showed a higher percentage.
Concentrations of 0,5 mg L-1 BIOBRAS 16 + 5 μM of AIA induced the formation and callus diameter, undesirable feature when the goal is rooting. For the parameters number of shoots and number of leaves, the best result was the concentration of 0,1
mg L-1 BIOBRAS 16 + 5 μM of AIA. / A expansão da área cultivada de mirtileiro no Brasil está diretamente vinculada a oferta de mudas de qualidade ao mercado, que poderá resultar em aumento da produção. A técnica da micropropagação de plantas viabiliza a produção e fornece plantas de elevada qualidade, fisiologicamente viáveis, sadias e isentas de vírus emcurto espaço de tempo. Plantas lenhosas apresentam dificuldade de enraizamento in vitro, nesse contexto o desenvolvimento de um sistema de enraizamento mais
eficiente resulta em mudas com maior qualidade fisiológica e diminuição de perdas durante a fase de aclimatização. No primeiro experimento os tratamentos consistiram em 8 doses de BIOBRAS 16 (0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 mg L-1)
adicionados no meio de cultura no momento do preparo. As seguintes características foram avaliadas: número de calos, diâmetro do calo, número de raízes, comprimento total de raízes, comprimento total, número de brotações, comprimento de brotações, número de folhas e massa fresca. A menor
concentração de BIOBRAS 16 utilizada (0,1 mg L-1) apresentou maior percentual de enraizamento (%), comprimento de raízes (cm) e número de folhas, porém também estimulou o desenvolvimento de calos. A dose de 0,4 mg L-1 estimulou a formação de brotações e o comprimento das mesmas. Não houve diferença significativa para os demais parâmetros avaliados. No segundo experimento os tratamentos consistiram em diferentes doses de BIOBRAS 16® (0,1; 0,3; 0,5 mg L-1) associadas a diferentes doses de ácido incolacético (1; 3; 5 μM L-1) adicionados ao meio de cultura no momento do preparo. As características avaliadas foram número de calos,diâmetro do calo, número de raízes, comprimento total de raízes, comprimento total, número de brotações, comprimento de brotações, número de folhas e massa fresca. A utilização de BIOBRAS 16 associado a ácido indolacético mostrou efeito positivo para características de desenvolvimento in vitro de mirtileiro. Para enraizamento, as concentrações de 0,3 mg L-1 de BIOBRAS 16 + 5 μM de AIA apresentaram maior percentual. As concentrações de 0,5 mg L-1 de BIOBRAS 16® + 5 μM de AIA
induziram a formação e diâmetro de calos, característica indesejável quando o objetivo é o enraizamento. Para as características número de brotações e número de folhas, o melhor resultado foi da concentração de 0,1 mg L-1 de BIOBRAS 16 + 5 μM de AIA.
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Desinfecção de explantes e cultivo in vitro de Piretro da Dalmácia (Chrysanthemum cinerariaefolium Vis. cv. Vacaria) / Pyrethrum (Chrysanthemum cinerariaefolium cv. Vacaria) explants disinfection and cultivation in vitroBorsoi, Nice Livio 18 June 2009 (has links)
As atividades que envolvem a floricultura vêm se destacando positivamente no cenário econômico do agronegócio brasileiro. Dentre as espécies de plantas utilizadas para este fim ressaltam-se as espécies pertencentes à família botânica Asteraceae, principalmente as do gênero Chrysanthemum. A espécie C. cinerariaefolium Vis. (Piretro da Dalmácia) é mundialmente cultivada visando à produção de aleloquímicos que apresentam atividades de inseticidas naturais (piretrinas). No Brasil chegou a ser produzida para esse fim em larga escala, no município de Taquara-RS na década de 30 a 40. Recentemente o interesse de seu cultivo tem aumentado como uma alternativa natural de manejo de pragas como planta ornamental, principalmente para jardins. Contudo, o fato de não produzir sementes férteis limita sua capacidade de propagação massal. Visando aperfeiçoar sua micropropagação foram realizados dois experimentos. No experimento 1 foi avaliado aos 30 dias de cultivo a influência de cinco concentrações de hipoclorito de sódio (10, 20, 30, 40 e 50% do produto comercial Mazzarolo) e cinco tempos de permanência na solução durante a desinfestação dos explantes (5, 10, 15, 20, 25 min.). Ao todo foram isolados 125 meristemas totalizando 25 tratamentos com cinco repetições. Os explantes isolados foram inoculados no meio de isolamento, o qual foi constituído de MS + 1,0 mg.L-1 de BAP + 0,1 mg.L-1 de GA3 + 0,01 mg.L-1 ANA + 30 g.L-1 de Sacarose em 7,0 g.L-1 de Agar. No experimento 2 foi avaliado a influência das diferentes concentrações de hipoclorito e dois tempos de permanência na solução desinfetante sobre a porcentagem de necrose, estruturas amorfas, plântulas formadas e comprimento de brotos. As plântulas regeneradas do experimento 1 foram inoculadas no meio de multiplicação que constou do MS + 0,4 mg.L-1 de Thiamina HCl + 100 mg.L-1 de Mio-Inositol + 0,05 mg.L-1 de ANA + 1,0 mg.L-1 de BAP + 40 g.L-1 de Sacarose e 7,0 g.L-1 de Agar. O pH dos meios foi ajustado em 5,9 antes da autoclavagem. Os resultados obtidos no experimento 1 indicaram que quanto maior o tempo de permanência na solução, maior a porcentagem de necrose. Porém, quanto menor a permanência maior a taxa de contaminação microbiana. No experimento 2, observou-se que a porcentagem de necrose é maior na concentração de 50%. Não houve influência dos fatores analisados na produção de estruturas amorfas. Para o número de brotos/explante e comprimento de brotos, o melhor desempenho se deu na solução 30%. Porém, a taxa de brotos por explante diminuiu à medida que aumentou o tempo de permanência na solução. Com relação ao comprimento dos brotos, os melhores resultados foram observados até o tempo de 15 minutos de permanência. Assim conclui-se que C. cinerariaefolium Vis. responde positivamente ao cultivo in vitro. A taxa de necrose aumenta à medida que aumenta a concentração de hipoclorito. Por outro lado, a taxa de contaminação aumenta à medida que diminui a concentração da solução desinfetante. A concentração de hipoclorito de sódio e o tempo de permanência na solução desinfetante afetam o número e o comprimento de brotos produzidos nos subcultivos. / The activities that involve floriculture have distinguished positively in the economic scenario of the Brazilian agribusiness. Among the plant species used for that purpose it can be distinguished the species belonging to the botanical family Asteraceae, mainly from the genus Chrysanthemum. The species C. cinerariaefolium Vis. is worldwide cultivated in order to produce the alelochemicals, which have activities of natural insecticides (pyretrine). In Brazil it was produced in large scale, in the Taquara-RS County in the decade of 30 to 40. Recently the interest on its cultivation has increased as natural alternative of pest management as ornamental plant, mainly in yards. However, the fact of no seed is produced by the plant that limits its capacity of massal production. In order to optimize its micropropagation two experiments were developed. In the experiment 1 it was evaluated 30 days after cultivation the influence of five concentrations of sodium hipochlorine (10, 20, 30, 40 and 50% of the commercial product Mazzarolo), and five time lengths of the explants permanence in the disinfecting solution (5, 10, 15, 20 and 25 min.). It was isolated 125 meristems, 25 treatments with five replications. The isolated explants were inoculated in isolation media, that was constituted of MS + 1.0 mg.mL-1 of BAP + 0.1 mg.L-1 of GA3 + 0.01 mg.L-1 ANA + 30 g.L- 1 of sucrose in 7.0 g.L-1 of Agar. In the experiment 2 it was evaluated the influence of different concentrations of hipochlorine and two length of time in disinfection solution measuring the percentage of necrosis, amorphous structures, seedlings formed and length of the sprouts. The regenerated seedlings from experiment 1 were inoculate in a medium of multiplication that was of MS + 0.4 mg.L-1 of Thiamine HCl + 100 mg.L-1 of Mio-Inositol 0.05 mg.L-1 of ANA + 1.0 mg.L-1 of BAP + 40 g.L-1 of sucrose and 7.0 g.L-1 of Agar. The pH of the medium was adjusted to 5.9 before the autoclaving process. The results obtained in the experiment 1 indicated that the higher the time length in the solution, the higher is the percentage of necrosis. However, the higher is the permanence of higher rate of microbial contamination. In the experiment 2; it was observed that the percentage of necrosis is higher at the concentration of 50%. There was no influence of the analyzed factors in the yield of amorphous structures. For the number of sprouts/explants and length of sprouts, the better performance was in the solution of 30%. However, the rate of sprouts per explants diminished as the length of time in the solution increased. The best results for sprout length were obtained up to 15 minutes of permanence. Therefore, it can be concluded that C. cinerariaefolium Vis. responds positively to in vitro culture. The rate of necrosis increases as the hipochlorine concentration is higher. On the other hand, the contamination rate increases as the disinfection solution diminishes. The concentration o hipochlorine sodium as the length of time of permanence in the initial disinfecting solution used during the explants disinfection affects the number and the sprout length produced during the subculture.
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Citronela de Java (Cymbopogon winterianus Jowitt): efeito da sazonalidade e de reguladores vegetais sobre a multiplicação in vitro e rendimento do óleo essencial / Citronela de Java (Cymbopogon winterianus Jowitt): effect of the seasonally and plant regulators about the propagation in vitro and income of essential oilSalvaro, Luciani Marcia Scherer 14 February 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-02-14 / Secretaria de Estado da Educação do Paraná / Citronella of Java (Cymbopogon winterianus Jowitt.) is an aromatic plant of great economical value, it is also well known in all over the world due to repellent characteristics to its essential oil in citronellal. The propagation in vitro is a good method to multiply citronella, due to the fact that the division of the citronella roots ordinarily used facilitates the cutting contamination. However, there are reports that citronella does not present good results in the propagation in vitro when collected in determined seasonal conditions. Therefore, the aim of this paper was to evaluate the effect of the seasonally about the propagation in vitro of citronella of Java, being used different concentration of IBA and BAP, as well as evaluating the income of the essential oil for each season. The explants were collected in each season of the year and inoculated in MS in addition to combination of IBA and BAP. At the end of 30 days the following variants had been evaluated: Height (cm), number of shootings, formation of callus, oxidation and contamination. In the realized conditions, was observed a good multiplication rate during the summer, being just necessary the addition of 1,0 mg/L-1 of BAP in the medium culture, commonly to this it did not have oxidation in this season. The height only presented significant result in the summer. It had formation of callus in the base of the explants either in the autumn or in the winter and in the summer, but in the summer it had a concomitant increase in the number of shootings. The oxidation was higher in the spring. (100% of oxidation). The contamination did not present significant results in any season, therefore, independent from seasonal condition. The extraction of the essential oil was accomplished in each season of the year by in Clevenger appliance. The great income of the essential oil was gotten in the winter with 1,37% of oil, when the plants were totally bloomy. Although the normal conditions of bloom of citronella in the south region is during the spring and in the beginning of the summer. The spring and the summer had 0, 77 and 0,76% income of essential oil, respective. In the autumn presented a lesser income, with 0,57% of essential oil / A citronela de Java (Cymbopogon winterianus Jowitt.) é uma planta aromática de grande valor econômico e também muito conhecida no mundo inteiro devido a sua propriedade repelente atribuída ao seu óleo essencial, rico em citronelal. A propagação in vitro é uma boa forma de multiplicar a citronela, visto que a divisão de touceiras comumente empregada facilita a contaminação das mudas. No entanto, existem relatos de que a citronela não apresenta bons resultados na propagação in vitro quando coletada em determinadas condições sazonais. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da sazonalidade sobre a propagação in vitro da citronela de Java, utilizando diferentes concentrações de IBA e BAP, bem como avaliar o rendimento do óleo essencial para cada estação. Os explantes foram coletados em cada uma das estações do ano e inoculados em meio MS acrescido de combinações de IBA e BAP. Ao final de 30 dias foram avaliadas as variáveis: altura (cm), número de brotações, formação de calo, oxidação e contaminação de explantes. Nas condições realizadas, foi observada uma boa taxa de multiplicação durante o verão, sendo necessária a adição somente de 1,0 mg L-1 de BAP ao meio de cultura, concomitante a isto não houve oxidação nesta estação. A altura dos explantes somente apresentou resultados significativos no inverno. Tanto no outono, como no inverno e no verão houve formação de calo na base dos explantes, sendo que no verão houve também o aumento no número de brotações por explante. A oxidação se deu de forma mais intensa na primavera (100% de oxidação). Para a contaminação de explantes não houve resultados significativos para nenhuma estação, sendo, portanto, independente das condições sazonais. A extração do óleo essencial foi realizada em cada estação do ano utilizando um aparelho de Clevenger. O maior rendimento do óleo essencial foi obtido no inverno, com média 1,37% de óleo, sendo este o momento em que as plantas matrizes se encontravam plenamente floridas. No entanto, as condições normais de florescimento da citronela na região sul são durante a primavera e início do verão. Na primavera e verão o rendimento do óleo essencial foi de 0,77 e 0,76% respectivamente. No outono foi constatado o menor rendimento, com 0,57% de óleo essencial
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Otimização da propagação clonal de Eucalyptus globulus Labill / Clonal propagation optimization of Eucalyptus globulus LabillCordeiro, Germana Marcelino 30 July 2013 (has links)
Poucas espécies de Eucalyptus apresentam aptidão ao cultivo em regiões de baixas temperaturas e geadas frequentes, limitando seu cultivo em algumas regiões do Brasil. Genótipos de Eucalyptus globulus podem representar opções futuras para plantios florestais, tendo em vista o seu ótimo desempenho silvicultural nessas condições. No entanto, informações quanto à obtenção de mudas clonais são escassas, e se focarmos as espécies recomendadas para plantio em condições subtropicais, tal carência é ainda maior, principalmente em termos endógenos e exógenos de enraizamento de propágulos. Esta espécie se destaca também, pelo grande interesse no setor florestal, sobretudo em relação às características de sua madeira para obtenção de celulose, porém, é considerada recalcitrante ao enraizamento de estacas, especialmente quando envolve material adulto, dificultando o aproveitamento dos benefícios da clonagem. Por essa razão, o presente trabalho teve como objetivo principal avaliar a técnica de micropropagação de clones de E. globulus, visando a reversão à juvenilidade, aumentando os índices de enraizamento e, consequentemente a produção de mudas clonais. Para tanto, os clones (USP 01, USP 24 e USP 33) foram estudados e apresentaram estabelecimento satisfatório, onde avaliou-se: (a) a multiplicação in vitro, testando-se três meios de cultura (WPM, JADS e MS) suplementados com concentrações do regulador de crescimento BAP (0; 0,50 e 1,0 mg L-1) combinado com ANA (0; 0,05 e 0,10 mg L-1); (b) o alongamento in vitro, testando-se o meio de cultura WPM suplementado com concentrações de BAP (0; 0,05 e 0,10 mg L-1) combinadas com ANA (0; 0,1; 0,2 e 0,3 mg L-1); (c) e o enraizamento in vitro, em que brotações alongadas in vitro dos clones foram coletadas e transferidas para meio de cultura WPM, suplementado com 0 e 0,05 mg L-1 de BAP combinado com 0; 0,1; 0,5 e 1,0 mg L-1 de AIB. Os resultados revelaram comportamentos diferenciados dos clones quanto à multiplicação e alongamento in vitro. As taxas de multiplicação in vitro dos clones variaram ao longo dos 10 subcultivos, com uma estabilização a partir do 6º subcultivo para todos os clones avaliados, sendo a maior taxa de multiplicação (número médio de 13 gemas) na concentração de 0,7 mg L-1 de BAP e 0,05 mg L-1 de ANA no meio de cultura WPM. O meio de cultura WPM avaliado no alongamento in vitro, contribuiu favoravelmente para o alongamento das brotações, assim como ANA na concentração de 0,3 mg L-1 combinando com 0,1 mg L-1 de BAP. Portanto, o protocolo desenvolvido mostrou-se eficiente para micropropagação via proliferação de gemas axilares dos clones avaliados, porém, em relação ao enraizamento constatou-se apenas uma raiz emitida na concentração de 0,5 mg L-1 de AIB no clone 01. De forma geral, em razão dos resultados observados, conclui-se que apesar de mostrar-se viável, a micropropagação não promoveu rejuvenescimento significativo dos clones de E. globulus, uma vez que não foi observado enraizamento expressivo das microestacas para as características avaliadas. / Few Eucalyptus species present adaptation for cultivation in regions with low temperatures and frequent frosts, limiting their cultivation in some regions of Brazil. E. globulus genotypes may to represent future options for forest plantations, in view of its optimal silvicultural performance in these conditions. However, information about obtaining clonal seedlings are scarce, and considering the species recommended for planting in subtropical conditions, this lack of information is even greater, mainly when considering the endogenous and exogenous factors for the rooting. This species is distinguished by great interest in forestry, particularly in relation to characteristics of its wood to obtain cellulose, however, it is considered recalcitrant to rooting, especially when it involves adult material, making it difficult to utilize the cloning benefits. Therefore, this study aimed to evaluate the micropropagation technique of E. globulus clones, in order to revert to juvenility, increasing the rate of rooting and consequently the clonal production. For this, the clones (USP 01, USP 24 and USP 33) were studied and showed satisfactory in vitro culture establishment, where it was evaluated: (a) the in vitro multiplication, testing three culture media (WPM, JADS and MS) supplemented with concentrations plant growth regulator BAP (0; 0,50 and 1,0 mg L-1) combined with NAA (0; 0,05 and 0,10 mg L-1); (b) the in vitro elongation, testing the WPM medium culture supplemented with BAP concentrations (0; 0,05 and 0,10 mg L-1) combined with NAA (0; 0,1; 0,2 and 0,3 mg L-1); and (c) in vitro rooting, where elongated shoots in vitro of the clones were collected and transferred to WPM, supplemented with 0 and 0,05 mg L-1 BAP combined with 0; 0,1, 0,5 and 1,0 mg L-1 IBA. The results showed different behaviors of clones as in vitro multiplication and elongation. Rates of clones in vitro multiplication varied over the 10 subcultures, with the stabilization from the sixth subculture for all clones, the largest rate multiplication (average number of 13 buds) in the concentration of 0,7 mg L-1 BAP and 0,05 mg L-1 NAA in WPM. The culture media WPM evaluated in vitro elongation, contributed positively to the shoots elongation, with 0,3 mg L-1 NAA and 0,1 mg L-1 BAP. Therefore, with the micropropagation protocol using axillary buds proliferation of these clones showed be well developed , however, in relation to rooting, only one root was emitted at 0,5 mg L-1 IBA in clone 01. In general, it is possible concluded that despite viable, the micropropagation did not promote significant rejuvenation of E. globulus clones, due to the not expressive rooting for the microcutting evaluated.
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Indução de embriogênese somática em Eucalyptus grandis / Somatic embryogenesis induction in Eucalyptus grandisTiton, Miranda 16 February 2005 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-02-17T10:47:26Z
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Previous issue date: 2005-02-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho teve por objetivos: a) avaliar o efeito dos reguladores de crescimento 2,4-D, dicamba e picloram na indução de embriogênese somática em explantes juvenis de Eucalyptus grandis; b) avaliar o efeito dos meios de cultura MS, WPM e JADS na indução de calos embriogênicos em cotilédones de E. grandis e em folhas e entrenós de um clone híbrido de E. urophylla x E. grandis; e c) avaliar o efeito de fontes de carboidratos na indução de calos embriogênicos em cotilédones de E. grandis. Os parâmetros avaliados foram o percentual de explantes calejados, a intensidade de calejamento, a oxidação, a massa fresca de calos, a rizogênese, a coloração e a textura dos calos, bem como a presença de estruturas embriogênicas. Nos experimentos em que se utilizou 2,4-D, melhores resultados de calogênese foram observados em cotilédones, nas concentrações de 5 e 10 mg L-1, sendo 30 dias no escuro o melhor tempo e condição de indução. Os calos apresentaram coloração amarelo-clara a amarelo-escura e textura semicompacta a semifriável, porém não foram observadas estruturas embriogênicas. Os tratamentos de subcultivo em meio contendo diferentes combinações de reguladores de crescimento, acrescidos de PVP ou carvão ativado, não mostraram resultados satisfatórios. As auxinas dicamba e picloram demonstraram-se promissoras no desenvolvimento de um protocolo de embriogênese somática para E. grandis, sendo observadas estruturas semelhantes a embriões somáticos em diferentes estádios de desenvolvimento quando se utilizou 0,5 mg L-1 de dicamba ou 5,0 e 10,0 mg L-1 de picloram, em explantes cotiledonares. Em relação aos meios de cultura MS, WPM e JADS, maior massa fresca de calos e menores percentuais de oxidação e de regeneração de raízes foram observados em cotilédones de E. grandis, utilizando-se o meio MS. Diferença expressiva foi observada em calos obtidos em folhas do clone híbrido de E. urophylla x E. grandis, onde o meio WPM foi mais efetivo na formação de raízes em relação aos meios MS e JADS. Quanto à fonte de carboidrato, as combinações de glicose e sacarose com maltose ou frutose, em algumas situações, apresentaram maior percentual de calejamento e massa fresca de calos em relação à utilização de sacarose como única fonte de carboidrato. No entanto, quanto ao aspecto dos calos, melhores resultados foram obtidos quando se utilizaram 1,5 e 3% de sacarose, sendo observados calos de textura semifriável e de coloração amarelo-clara, enquanto em concentrações mais altas de sacarose houve tendência de maior compactação e oxidação. O glicerol promoveu aumento na massa fresca de calos nas concentrações de 0,5 e 1%, sendo, a partir dessa concentração, observado decréscimo dos valores desse parâmetro. Os resultados obtidos neste trabalho são concordantes com os da literatura existente, em que se relata a dificuldade de obtenção de um protocolo eficiente e reproduzível de embriogênese somática para espécies de Eucalyptus. Entretanto, em virtude da importância e do potencial de aplicação da embriogênese somática na silvicultura clonal, salienta-se a necessidade de realização de novos estudos relacionados a essa área de conhecimento, os quais envolvam espécies do gênero Eucalyptus. / The present work had the following objectives: a) to evaluate the effect of the growth regulators 2,4-D, dicamba and picloram on the induction of somatic embryogenesis from juvenile explants of Eucalyptus grandis; b) to evaluate the effect of MS, WPM and JADS culture media, on embryogenic callus induction from cotyledons of E. grandis and leaves and stem internodes of a E. urophylla x E. grandis hybrid clone; and c) to evaluate the effect of carbohydrate sources on the embryogenic callus induction from cotyledons of E. grandis. The appraised parameters were the percentage of explant producing calli, the intensity of callus formation, oxidation, callus fresh weight, rhizogenesis, callus coloration and texture, as well as the presence of embryogenic structures. In experiments with 2,4-D the best results for callus production were found with cotyledons, being 5 and 10 mg L-1 and 30 days in the dark the best time and induction conditions. Callus coloration varied from light yellow to dark yellow and semi-compact to semi-friable texture, however no embryogenic structures were observed. Subculture in medium containing different combinations of growth regulators, added of PVP or activated charcoal, did not give good results. Dicamba and picloram showed potential for developing a protocol for somatic embryogenesis of E. grandis, producing structures similar to somatic embryos in different developmental stages with dicamba (0.5 mg L-1) or picloram (5.0 and 10.0 mg L-1), from cotyledon explants. In relation to the culture media MS, WPM and JADS, larger callus fresh weight and smaller percent of oxidation and root regeneration were observed in cotyledons of E. grandis with MS medium. Significant difference was observed in calli obtained from leaves of E. urophylla x E. grandis hybrid, where WPM medium was more effective for root formation compared to MS and JADS. Regarding to the carbohydrate source, the combinations of glucose and sucrose with maltose or fructose, in some situations, presented larger percent of callus production and callus fresh weight compared to the use of sucrose as only carbohydrate source. However, in relation to the callus aspect, better results were obtained with 1,5 and 3% of sucrose, giving semi-friable light-yellow calli, whereas in higher sucrose concentrations there was a tendency for increased hardness and oxidation. Glycerol at 0,5 and 1% increased callus fresh weight, but higher concentrations lowered these values. The results obtained in this work agrees with the existent literature on the difficulty of obtaining an efficient and reproducible protocol for somatic embryogenesis of Eucalyptus species. However, because of the importance and potential for application of somatic embryogenesis in clonal silviculture, it is emphasized the need for new studies on this area, involving species of the Eucalyptus.
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Enraizamento de microestacas e miniestacas de mamoeiro híbrido UENF/CALIMAN 02Oliveira, Márcio José Vieira de 28 February 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-29T15:36:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014-02-28 / O desenvolvimento da técnica de micropropagação do mamoeiro por meio da cultura de tecidos se destaca como uma ferramenta de grande aplicação na produção em larga escala de clones com características superiores, de sexos definidos e livres de viroses. Na micropropagação, a possibilidade do enraizamento ex vitro proporciona redução de custos com mão de obra e infraestrutura, pois uma etapa do processo in vitro é eliminada e há economia de energia e espaço na sala de crescimento. Outra forma de se obter maior rendimento na produção de brotos das plantas matrizes é a miniestaquia. Foram realizados três experimentos com objetivos de avaliar o efeito da aplicação de ácido indolbutírico (AIB) para indução do enraizamento em microestacas e miniestacas de plantas hermafroditas de mamoeiro híbrido UENF/CALIMAN 02. No experimento 1, as microestacas produzidas in vitro foram submetidas a duas formas de indução para o enraizamento em condições ex vitro em sistema semi-hidropônico: indução in vitro e ex vitro. O experimento foi instalado em num delineamento inteiramente ao acaso em um esquema fatorial 2 x 4, sendo dois sistema de indução (in vitro e ex vitro) e quatro níveis de AIB ( 00; 2,5; 5,0 e 7,5 mg L-1). No experimento 2, foram selecionadas miniestacas (de 4 a 6 cm) das plantas matrizes e submetidas ao enraizamento em hidroponia com diferentes níveis de AIB (0; 1,; 5; 10; 50 e 100 mg L-1 de AIB). O experimento foi instalado em delineamento inteiramente ao acaso com seis tratamentos, quatro repetições e cinco miniestacas por repetição. O experimento 3 foi instalado em esquema fatorial com cinco níveis de AIB: 0; 2,5; 5,0; 7,5 e 10 mg L-1, dois substratos: vermiculita e fibra de coco, num delineamento inteiramente ao acaso, com três repetições e seis miniestacas por repetição. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey e, para a massa seca da parte aérea e do sistema radicular foram também submetidas à análise de regressão. No enraizamento de microestacas de mamoeiro em sistema semi-hidropônico, o tratamento que gerou melhor resultado (96,66% de enraizamento) foi aquele em que se utilizou 2,5 mg L-1 de AIB com aplicação in vitro. Para o enraizamento de miniestacas em sistema semi-hidropônico, o nível adequado de AIB é de 5,0 mg L-1, que propiciou 61,11% de enraizamento com os substratos vermiculita e com fibra de coco / The development of techniques of micropropagation of papaya through tissue culture stands as a "tool" of wide application in large-scale production of clones with superior characteristics, the sexes defined and free of viruses. In micropropagation, the
possibility of ex vitro rooting provides cost saving in manpower and infrastructure, as a step of the in vitro process is eliminated and there is power and space savings in the growth room. Another way to obtain higher yield of shoots of stock plants is microcutting. Three experiments aimed to evaluate the effect of Indolebutyric Acid
(IBA) to induce rooting on micropiles and mini hermaphrodite papaya plants hybrid UENF/CALIMAN 02 were performed. In experiment 1 microcuttings produced in vitro were subjected to two forms of induction for rooting in ex vitro conditions in semihydroponic system: in vitro and ex vitro induction. The experiment was installed in a
completely randomized design in a 2 x 4 factorial arrangement, two induction system (in vitro and ex vitro) and four levels of IBA (00, 2.5, 5.0 and 7.5 mg L-1 ). In experiment 2 minicuttings were selected (4-6 cm) from the mother plants and subjected to rooting hydroponics with different levels of IBA (0, 1, 5, 10, 50 and 100
mg L-1
IBA). The experiment was installed in a completely randomized design with six treatments, four replications and five minicuttings per replicate. Experiment 3 was installed on factorial design with five levels of IBA: 0, 2.5, 5.0, 7.5 and 10 mg L-1 , two substrates: vermiculite and coconut fiber in a completely randomized design with three replications and six minicuttings per replication. Data were subjected to analysis of variance and means were compared by Tukey test, and for dry weight of
shoot and root were also subjected to regression analysis. On rooting of papaya minicuttings in semi-hydroponic system, the treatment that produced the best result (96.66% rooting) was the one which used 2.5 mg L-1
IBA with in vitro application. For
rooting cuttings in semi-hydroponic system, the appropriate level of IBA is 5.0 mg L-1 which provided 61.11% rooting with vermiculite and coconut fiber.
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MULTIPLICAÇÃO IN VITRO E EX VITRO DE Ilex paraguariensis A. Saint Hilaire (ERVA-MATE) / IN VITRO AND EX VITRO MULTIPLICATION OF Ilex paraguariensis A. Saint Hilaire (HOLLY)Quadros, Kenia Michele de 02 August 2013 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Holly (Ilex paraguariensis A. Saint Hilaire) plays an important economic, social and
ecological throughout southern of Brazil; however, still requires efficient protocols for
vegetative propagation of seedlings aiming planting of selected genotypes. This work aimed
to study vegetative propagation technologies turned at mass production of holly seedlings
through in vitro micropropagation, microcutting and minicutting. The propagation of explants
derived from the apical and nodal holly segments from eight clones established in vitro was
evaluated in four cultivations. It was also evaluated acclimatization and ex vitro rooting of
microcuttings, testing different substrates, separated in two experiments. In experiment one,
the substrates were used pure (carbonized rice husk, coarse sand, vermiculite, coconut fiber
and commercial substrate of pine bark) and in the second experiment, the substrates were used
in combination with equal proportions (carbonized rice husk and coarse sand; carbonized rice
husk, coarse sand and commercial substrate of pine bark; carbonized rice husk and
commercial substrate of pine bark). Holly minicuttings of two collections and four clones
(CE1, CE2, EF6 and EF7) were treated with or without 3-indolibutírico acid (IBA) at a dose
of 1.000 mg L-1 and then placed in a substrate composed by carbonized rice husk, coarse sand
and commercial substrate of pine bark. Clones CE1 and CE2 coming from microcuttings ex
vitro rooted and acclimatizated in the greenhouse, and the clones and EF6 EF7 come from
cuttings rooted of epicormic shoots of two adult plants. From the second collection, it was
followed the rooting evolution of four clones under evaluation at 15, 30, 45, 60 and 75 days.
It is feasible the maintenance of holly germplasm bank, whereas complete plants derived from
nodal segments and apical segments rooted in vitro, can be acclimated in a greenhouse for
holly seedlings production, with the explants competence maintained over four cultivations.
Holly microcuttings can be acclimated and ex vitro rooted, using as substrate the composition
of the same proportions of carbonized rice husk and commercial substrate of pine bark or with
carbonized rice husk, coarse sand and commercial substrate of pine bark. In holly minicutting,
clones differ in rooting competence and induction period for root initiation, whereas the application of 3-indolibutiric acid does not affect the rooting of holly minicuttings. The closed
system of cultivation in sand is feasible for conduct and management of holly ministumps
aiming to collect the minicuttings.
application of 3-indolibutiric acid does not affect the rooting of holly minicuttings. The closed
system of cultivation in sand is feasible for conduct and management of holly ministumps
aiming to collect the minicuttings. / A erva-mate (Ilex paraguariensis A. Saint Hilaire) exerce uma grande importância
econômica, social e ecológica em toda a região sul do Brasil, no entanto, ainda necessita de
protocolos eficientes para a propagação vegetativa de mudas visando o plantio de
povoamentos com clones selecionados. Esse trabalho teve como objetivo estudar tecnologias
de propagação vegetativa voltado à produção massal de mudas de erva-mate por meio da
micropropagação in vitro, microestaquia e miniestaquia. Foi avaliada a propagação de
explantes oriundos de segmentos apicais e segmentos nodais de erva-mate de oito clones
estabelecidos in vitro e em quatro cultivos. Também foi avaliada a aclimatização e o
enraizamento ex vitro de microestacas, testando diferentes substratos, separados em dois
experimentos. No experimento um, os substratos foram utilizados puros (casca de arroz
carbonizada, areia grossa, vermiculita média, fibra de coco e substrato comercial à base de
casca de pinus) e no segundo experimento, os substratos foram utilizados em combinações e
em iguais proporções (casca de arroz carbonizada e areia grossa; casca de arroz carbonizada,
areia grossa e substrato comercial à base de casca de pinus; casca de arroz carbonizada e
substrato comercial a base de casca de pinus). Miniestacas de erva-mate de duas coletas e de
quatro clones (CE1, CE2, EF6 e EF7) foram tratadas com e sem ácido 3-indolibutírico (AIB)
na dose de 1.000 mg L-1 e então colocadas em substrato composto por casca de arroz
carbonizada, areia de granulometria grossa e substrato comercial a base de casca de pinus. Os
clones CE1 e CE2 foram provenientes de microestacas enraizadas ex vitro e aclimatizadas em
casa de vegetação, e os clones EF6 e EF7 foram oriundos de estacas enraizadas de brotações
epicórmicas de duas matrizes adultas. A partir da segunda coleta, foi acompanhada a evolução
do enraizamento dos quatro clones em avaliação aos 15, 30, 45, 60 e 75 dias. É possível a
manutenção de banco de germoplasma de erva-mate, sendo que plantas completas oriundas de
segmentos nodais e segmentos apicais enraizados in vitro, podem ser aclimatizados em casa
de vegetação para a produção de mudas de erva-mate, com a competência dos explantes mantida ao longo de quatro cultivos. Microestacas de erva-mate podem ser aclimatizadas e
enraizadas ex vitro, utilizando como substrato a composição de mesmas proporções de casca
de arroz carbonizada e substrato comercial à base de casca de pinus ou com o substrato de
casca de arroz carbonizada, areia grossa e substrato comercial a base de casca de pinus. Na
miniestaquia de erva-mate, os clones diferem na competência ao enraizamento e no período
de indução à iniciação radicial, sendo que a aplicação de ácido 3-indolibutírico na dose de
1.000 mg L-1 não afeta o enraizamento de miniestacas de erva-mate. O sistema fechado de
cultivo em areia é viável para a condução e o manejo de minicepas de erva-mate visando a
coleta de miniestacas.
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Estudo agronômico, químico e biológico de Cochlospermum regium (mart. ex. Scharank): uma planta medicinal do CerradoInácio, Marielle Cascaes [UNESP] 05 February 2010 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2010-02-05Bitstream added on 2014-06-13T19:13:49Z : No. of bitstreams: 1
inacio_mc_me_botfca.pdf: 869092 bytes, checksum: 1eb4b536eee97edfc5d08547cbb87a5f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Cochlospermum regium é uma espécie medicinal do Cerrado utilizada na medicina popular para infecções. Por ser a raiz o órgão utilizado nas preparações fitoterápicas, quando a droga vegetal é preparada, de modo geral, não há uma ação conservacionista que garanta a continuidade do indivíduo, comprometendo assim a sobrevivência desta espécie. Desta forma, este trabalho teve como objetivo fazer um estudo sobre aspectos agronômicos, químicos e biológicos da espécie visando ampliar os conhecimentos gerais sobre C. regium para que no futuro seja possível o desenvolvimento de um medicamento fitoterápico a partir desta espécie. Foram desenvolvidos experimentos de germinação in vitro, protocolos de micropropagação, conservação de germoplasma in vitro, avaliação da atividade antimicrobiana e anti-tumoral e avaliação do perfil fitoquímico da planta. Para determinação das melhores condições de germinação in vitro foram avaliados diferentes métodos de assepsia e tempos de imersão em ácido sulfúrico para superação da dormência das sementes. No desenvolvimento do protocolo de micropropagação foram avaliados o controle da produção de calos e vitrificação nos explantes de C. regium; o efeito das citocininas BAP, cinetina e zeatina na multiplicação dos explantes e da auxina IBA no enraizamento in vitro; a posição da gema em relação a brotação e; o efeito de agentes de estresse osmótico no crescimento mínimo de explantes de C. regium. A atividade antibacteriana foi determinada através do método de microdiluição em caldo. A citotoxicidade foi avaliada em células de fibroblasto e melanoma. O perfil químico da espécie foi determinado por testes histoquímicos anatômicos e pela identificação dos componentes do óleo essencial, ambos avaliados em folhas. Durante o estabelecimento... / Cochlospermum regium is a medicinal species from Cerrado popularly used against infections. Being the C. regium root the plant organ commonly used for preparing phytotherapic formulations and considering that there is not a conservationist action that guarantee the preservation of individuals allowing the survival of this species a study on the chemical, biological and agronomic aspects of that species was carried out to expand the general knowledge about C. regium so that in the future the development of a phytotherapic from this specie may be viable. Experiments of in vitro germination, micropropagation protocols, germplasm in vitro conservation, evaluation of antimicrobial and antitumor activities and evaluation of the phytochemical profile of the plant were performed. To determine the best conditions for in vitro germination different methods of asepsis and time of immersion in sulfuric acid to the break dormancy of seeds were evaluated. For the development of C. regium micropropagation protocol callus proliferation, explants vitrification as well the effect of the cytokinins BAP, kinetin and zeatin in plant multiplication and of the auxin IBA on in vitro rooting were investigated. Also, the position of the bud and the effects of osmotic stress agents on minimal growing of C. regium plantlets were evaluated. The antibacterial activity of C. regium extract was determined by the broth microdilution method and the cytotoxicity was evaluated in fibroblast and melanoma cells. The chemical profile of the species was determined by anatomical and histochemical tests and by the identification of the essential oil components. During the development of the micropropagation protocol was observed vitrification and callus proliferation on the explants, what was controled with the increase of sucrose concentration and the addition of activated charcoal in the culture medium... (Complete abstract click electronic access below)
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Técnicas de micropropagação e criopreservação para abacaxizeiroMoraes, Ailton Melo de 18 June 2007 (has links)
Submitted by Katiane Souza (katyane.souza@gmail.com) on 2016-04-21T00:51:23Z
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arquivototal.pdf: 2203586 bytes, checksum: 632c234a3beaf879d47073782b8ec380 (MD5)
Previous issue date: 2007-06-18 / Brazil is one of the three main pineapple producers in the world, being the state of
Paraíba, especially, considered as the first of them. The area cultivated has slightly
increased due to the small offer of good quality seedlings. This work aimed to
develop a cv. EMEPA 1 micropropagation protocol especially selected to be
cultivated in the state of Paraíba. The cv. EMEPA 1 axillary gems used were
disinfested and inoculated in half MS solid with 5,8 pH. There was incubation in a
growth room with temperature of 25 ± 5oC and photoperiod of 16 hours/light at a
luminous intensity of 30 pmol.m-2.s-1, except for the etiolation phase, held at B.O.D,
with no light and temperature of 28 ± 1oC. The cv. EMEPA 1 micropropagation
protocol was developed according to the existing literature, comprising the following
phases: treatment and isolation of explants (TI); establishing of explants (EE);
etiolation (ES); regeneration (RE); multiplication (MU); extent; rooting ®;
acclimatization (AC). A completely randomized design (CRD) was used in all the
phases as follows: TI – CRD with 4 x 4 factorial array (4 concentrations of sodium
hypochlorite x 4 exposition times to sodium hypochlorite), with 10 repetitions
containing 1 explant per bottle; EE – DIC with 6 treatments comprised of 10
repetitions containing 1 explant per bottle; ES – CRD with 4 treatments, comprised of
10 repetitions containing 1 defoliated plantule per test tube; RE – DIC with 4
treatments, comprised of 10 repetitions containing 1 etiolated sprout per Petri’s
plaque; MU – CRD with 8 treatments, comprised of 10 repetitions containing 1
explant per bottle; AL – CRD with 4 treatments comprised of 10 repetitions containing
1 plantule per bottle; and AC – CRD with 11 treatments, comprised of 4 repetitions
containing 5 plants each. It was concluded that the concentration of 2% of sodium
hypochlorite for 10 minutes causes gems disinfestation and the establishment can be
carried out by means of tillage without any growth regulators. The etiolation can be
achieved in MS with 1,86 mg.L-1 of ANA and regeneration in MS with 1,8mg.L-1 of
ANA + 2,0 mg.L-1 of BAP. For the multiplication, the type of tillage indicated is MS
supplemented with 2,0 mg.L-1 of BAP + 0,5 mg.L-1 of ANA.; in extent, the type of crop
MS without any dilution causes the highest growth of plantules, whereas the addition
of ANA prompts increase in number and decrease of plantules root size and the
organic compound favors increase and development of pineapple plantules produced
in vitro during the acclimatizing phase. / Mundialmente o Brasil se encontra entre os três maiores produtores de abacaxi e o
Estado da Paraíba é reconhecido com primeiro produtor. A área cultivada tem
aumentado pouco devido à pequena oferta de mudas de boa qualidade. Este
trabalho teve por objetivo desenvolver um protocolo de micropropagação para a cv.
EMEPA 1 selecionada especialmente para o Estado da Paraíba. Utilizaram-se
gemas axilares da cv. EMEPA 1, que foram desinfestadas e inoculadas em meio MS
sólido, com pH de 5,8. A incubação foi em sala de crescimento com temperatura de
25 ± 5 ºC e fotoperíodo de 16 horas luz, a uma intensidade luminosa de 30 `mol.m-
2.s-1, exceto na fase de estiolamento, que foi em B.O.D. na ausência de luz com
temperatura de 28 ± 1 ºC. O protocolo de micropropagação para a cv. EMEPA 1 foi
desenvolvido de acordo com a literatura existente e contempla as fases: tratamento
e isolamento dos explantes (TI); estabelecimento de explantes (EE); estiolamento
(ES); regeneração (RE); multiplicação (MU); alongamento (AL); enraizamento (EN) e
aclimatação (AC). Em todas as fases se empregou o delineamento inteiramente
casualizado (DIC), conforme a seguir: TI – DIC com arranjo fatorial 4 x 4 (4
concentrações de hipoclorito de sódio x 4 tempos de exposição ao hipoclorito de
sódio), com 10 repetições contendo 1 explante por frasco; EE – DIC com 6
tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1 explante por frasco; ES – DIC
com 4 tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1 plântula desfolhada por
tubo de ensaio; RE – DIC com 4 tratamentos, composto de 10 repetições contendo 1
broto estiolado por placa de Petri; MU – DIC com 8 tratamentos, composto de 10
repetições contendo 1 explante por frasco; AL – DIC com 4 tratamentos, composto
de 10 repetições contendo 1 plântula por frasco; EN – DIC com 4 tratamentos,
composto de 10 repetições contendo 1 plântula por frasco e AC – DIC com 11
tratamentos, composto de 4 repetições contendo 5 plantas cada. Concluiu-se que a
concentração de 2% de hipoclorito de sódio por 10 minutos, promove a
desinfestação das gemas e o estabelecimento pode ser em meio de cultivo sem
reguladores de crescimento, o estiolamento pode ser realizado em meio MS com
1,86 mg.L-1 de ANA e a regeneração em meio MS com 1,8 mg.L-1 de ANA + 2,0
mg.L-1 de BAP. Para a multiplicação o meio de cultivo indicado é o MS
suplementado com 2,0 mg.L-1 de BAP + 0,5 mg.L-1 de ANA; no alongamento o meio
de cultura MS sem diluição proporciona o maior crescimento das plântulas, enquanto
a adição do ANA promove o aumento no número e a diminuição do tamanho das
raízes das plântulas e o composto orgânico favorece o crescimento e o
desenvolvimento de plântulas de abacaxizeiro, produzidas in vitro, na fase de
aclimatação.
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Caracterização anatômica e bioquímica da hiperidricidade em morangueiro (Fragaria x ananassa Duch.) e videira (Vitis vinifera L. x Vitis rotundifolia) propagados in vitro / Anatomical and biochemical characterization of the hyperhydricity in strawberry (Fragaria x ananassa Duch.) and grapevine (Vitis vinifera L. x Vitis rotundifolia) plants propagated in vitroBarbosa, Letícia Mascarenhas Pereira 24 February 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1
texto completo.pdf: 3012323 bytes, checksum: 96e79a49116ebbc5c759193ecd754c2b (MD5)
Previous issue date: 2006-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The plants propagated in vitro are usually affected by stress conditions, which can lead to the hyperhydricity development. In this sense, this study was carried out to investigate the influence of the gelling agents, cytokinin-6-benzylaminopurine (BAP) and type of the flask sealing upon the induction of hyperhydricity in grapevine and strawberry plants. So, strawberry plants Dover and Burkley and the rootstock of the grapevine 'VR043 - 43',
kept in vitro in growth room at 25 ± 2 ºC, under a 16-hour photoperiod and irradiance 36 µmol m-2 s-1. Strawberry explants were cultivated in medium containing salts and vitamins of MS, 30 g L-1 sucrose, 100 mg L-1 myo-inositol
added with Agar (6.5 g L-1) or Phytagel® (2.5 g L-1) and BAP at different concentrations (0.5; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1). Some grapevine internodes were transferred to MS/2 or to Q & L medium, with the same amounts of sucrose and myo-inositol added with Agar (6.5 g L-1) or Phytagel® (2,5 g L-1) and BAP (1.0 or 2.0 mg L-1). The ethylene levels were measured inside the flasks at 5, 10, 20, and 30 days under culture for strawberry plant, as well as at 3, 7, 14, 20, 30 and 40 days for grapevine. After 35 days, the following analyses were accomplished: biochemistry (SOD, CAT, POD, isozymes, lipid peroxidation, chlorophyll content), structural (light microscopy and scanning electron microscopy), besides the morphologic characteristics of the hyperhydricity. To study the influence of the sealing upon the development of
hyperhydricity, the grapevine and strawberry plants were transferred to flasks containing both inductor and noninductor medium of hyperhydricity. The flasks were sealed with either rigid polypropylene lid with and without membrane permeable to gaseous exchanges or two layers of plastic PVC film. The ethylene levels were measured at 7, 20 and 40 days under culture. After 35 days, the following were analyzed: fresh and dry matter of the buds, lipid peroxidation, enzymatic systems MDH, ADH and POD, electrolyte leakage, and ultra-structural characteristics (scanning). The BAP addition to the culture medium induced the oxidative stress, which caused changes in the physiologic state of both strawberry and grapevine plants, that were characterized by increase in either the activity of antioxidant enzymes and the peroxidation of lipids, alterations at cellular level, malformations in stomata and epidermal cells, besides increased production ethylene inside the culture flasks. The sealing type affected the internal ambient of the flasks, therefore the hyperhydricity development. In the flasks sealed with permeable membrane, even in hyperhydricity inducing medium, no morphologic characteristics of such a phenomenon were observed, although
an increase in both peroxidase activity and electrolyte leakage were observed in the grapevine plants submitted to this treatment. The sealing of the flasks with rigid polypropylene lid or with PVC film, in presence of BAP,
promoted higher hyperhydricity index, therefore confirming that the sealing type of the flasks associated to the components of the medium and culture conditions are related to the appearance of this physiological disorder in plants grown in vitro. / Plantas propagadas in vitro são freqüentemente afetadas por condições de estresse que podem levar ao desenvolvimento de hiperidricidade. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivos investigar a influência de agentes gelificantes, da citocinina 6-benzilaminopurina (BAP) e do tipo de vedação dos frascos sobre a indução de hiperidricidade em videira e morangueiro. Para tal, foram utilizadas plantas de morangueiros Dover e Burkley e do porta-enxerto de videira VR043 43 , mantidas in vitro em sala de crescimento a 25 ± 2 ºC, sob fotoperíodo de 16 h e irradiância 36 mmol m-2 s-1. Explantes de morangueiro foram cultivados em meio contendo sais e vitaminas de MS, 30 g L-1 de sacarose, 100 mg L-1 de inositol, acrescido de Ágar (6,5 g L-1) ou Phytagel® (2,5 g L-1) e BAP em diferentes concentrações (0,5; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1). Segmentos de entrenós de videira foram transferidos para meio MS meia força ou para meio Q & L, com as mesmas quantidades de sacarose e mioinositol, acrescidos de Ágar (6,5 g L-1) ou Phytagel® (2,5 g L-1) e BAP (1,0 ou 2,0 mg L-1). Foram mensurados os níveis de etileno no interior dos frascos aos 5, 10, 20, e 30 dias de cultivo, para morangueiro, e aos 3, 7, 14, 20, 30 e 40 dias, para videira. Após 35 dias, foram realizadas analisadas bioquímicas (SOD, CAT, POD, isoenzimas, peroxidação de lipídios, teor de clorofila), estruturais (microscopia fotônica e eletrônica de varredura), além da análise das caracteristicas morfológicas da hiperidricidade. Para estudar a influência do tipo de vedação no desenvolvimento de hiperidricidade, plantas de videira e morangueiro foram transferidas para frascos contendo meio indutor e não indutor de hiperidricidade. Os frascos foram vedados com tampa rígida de polipropileno, com e sem membrana permeável a trocas gasosas ou duas camadas de filme pástico de PVC. Foram mensurados os níveis de etileno aos 7, 20 e 40 dias de cultivo e, após 35 dias, foram analisados massas fresca e seca dos brotos, peroxidação de lipídios, sistemas enzimáticos (MDH, ADH e POD), extravasamento de solutos e características ultraestruturais. A adição de BAP no meio de cultivo induziu ao estresse oxidativo que, por sua vez, causou mudanças no estado fisiológico de plantas de morangueiro e videira, caracterizadas por aumento da atividade de enzimas antioxidantes e da peroxidação de lipídios, alterações em nível celular, malformações de estômatos e de células epidérmicas, além de aumento na produção de etileno no interior dos frascos de cultivo. O tipo de vedação utilizado influenciou o ambiente interno dos frascos e, conseqüentemente, o desenvolvimento de hiperidricidade. Nos frascos vedados com membrana permeável, mesmo em meio indutor de hiperidricidade, não foram observadas características morfológicas desse fenômeno, embora tenha sido observado aumento da atividade de peroxidases e de extravasamento de eletrólitos em plantas de videira, submetidas a este tratamento. A vedação de frascos com tampa rígida de polipropileno ou com filme de PVC, em presença de BAP, promoveram maior índice de hiperidricidade, confirmando que o tipo de vedação dos frascos, em combinação com componentes do meio e com condições de cultivo, estão relacionados ao surgimento dessa desordem fisiológica em plantas cultivadas in vitro.
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