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Estabelecimento de protocolo para controlar a manifestação de bactérias endofíticas no processo de multiplicação in vitro de eucalipto / Protocol establishment to control the manifestation of endophytic bacteria in the process of Eucalyptus in vitro multiplication

Gabriela Ferraz Leone 27 August 2013 (has links)
A presença de bactérias no cultivo in vitro de plantas é normalmente relacionada à contaminação, acarretando o descarte de microplantas de alto valor comercial. No entanto, essa presença pode ser caracterizada como \"manifestações\", decorrentes de possíveis estresses físicos ou nutricionais, da microbiota endofítica, que coloniza ativamente os tecidos vegetais, e que não necessariamente, afeta o desenvolvimento da planta. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi controlar a manifestação bacteriana, preservando as microcepas de Eucalyptus cloeziana em desenvolvimento in vitro, adicionando-se ao meio de cultura, os antibióticos gentamicina, ciprofloxacina, rifampicina, timentin (isolados ou combinados entre si) e o biocida clorometil-isotiazolinona + metil-isotiazolinona. O monitoramento do trabalho foi realizado por meio de avaliações semanais, visando verificar possíveis influências dos agentes antimicrobianos na morfofisiologia do vegetal e a eficiência no controle das manifestações bacterianas. Para tanto, foram avaliados parâmetros referentes ao incremento de massa seca, número de brotações, teor de acúmulo de nutrientes, análises histológicas e histoquímicas das microcepas. Para verificar possíveis flutuações das comunidades bacterianas endofíticas nas microcepas, utilizou-se a técnica de DGGE. Todas as análises foram realizadas aos 15 e 30 dias após a adição dos agentes antimicrobianos no meio de cultura, exceto a avaliação nutricional que foi feita apenas no final do experimento (30 dias). Os resultados obtidos permitiram inferir que ao longo dos 30 dias de cultivo, o antibiótico gentamicina, ocasionou queda no desenvolvimento das microcepas e não foi eficiente no controle das manifestações bacterianas. Os antibióticos rifampicina e ciprofloxacina apesar de não serem efetivos no controle da manifestação bacteriana, não afetaram o desenvolvimento das microcepas. Conclui-se que, o biocida clorometil-isotiazolinona + metil-isotiazolinona efetivamente controlou as manifestações bacterianas, sem alterar a morfofisiologia das microcepas, bem como o timentin, que além de controlar as manifestações, proporcionou maior vigor das microcepas em função da melhor assimilação dos nutrientes. / The in vitro bacterial presence in plant cultivation, usually is related to contamination, resulting in the elimination of the microplants with high commercial value. However, this presence can be characterized as \"manifestations\" arising from possible physical or nutritional stresses, from microbial endophytic that actively colonize plant tissues, and do not necessarily affect plant development. Therefore, the purpose of this study was to control the bacterial manifestation, preserving in vitro developing of Eucalyptus cloeziana microstumps, by adding to the culture medium, the antibiotics gentamicin, ciprofloxacin, rifampicin, timentin (alone or combined) and biocide + chloromethyl isothiazolinone methyl-isothiazolinone. The monitoring work was conducted through weekly evaluations, to verify the possible influence of antimicrobial agents in the plant morphophysiology and the efficient control of bacterial manifestations. Therefore, were evaluated parameters related to the increase in dry weight, number of buds, content of nutrient accumulation, histological and histochemical the microstumps. DGGE technique was used to check possible fluctuations of endophytic bacterial communities in microstumps. All analyzes were performed at 15 and 30 days after the addition of antimicrobial agents in the culture medium, except for the nutritional assessment that was made only at the end of the experiment (30 days). The results allow to infer that over the 30 days of culture, the antibiotic gentamicin, resulted in the microstumps development decrease and was not effective in controlling bacterial manifestations. The antibiotics rifampicin and ciprofloxacin although were not effective in controlling the bacterial manifestation, affected the development of microstumps. It was concluded that the biocide chloromethyl-methyl-Isothiazolinone + Isothiazolinone effectively controlled the bacterial manifestations without modifying the morphophysiology of the microstumps, well as the timentin, which besides controlling the manifestations, provided greater vigor of microstumps due to better assimilation of nutrients.
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Atuação de ácido \'beta\'-naftoxiacético, ácido indolbutírico e ácido giberélico na morfogênese de microplantas de abacaxizeiro \"Gomo-de-Mel\" / \'beta\'-Naftoxiacetic acid, indolbutyric acid and acid giberelic action in the pineapple microplants gomo de mel morphogenesis.

Maysa Carvalho Barbosa 26 February 2010 (has links)
Visando avaliar a atuação dos biorreguladores beta-NOA, AIB e GA3 na morfogênese de microplantas de abacaxi Ananas comosus L. (Merrill) cultivar IAC Gomo-de-Mel estabeleceu-se um experimento com a presença isolada e/ou combinada dos respectivos biorreguladores ao meio de cultura MS. As microplantas foram mantidas em condições de cultura in vitro, com temperatura, luminosidade e fotoperíodo controlados (25 ± 2 C, irradiância de 42 µmol.m-2s-1 e 16 horas, respectivamente) durante 3 meses. Os resultados obtidos com a análise de variância evidenciaram que houve interação do biorregulador de crescimento e o tempo de cultivo para a altura, número de raiz e número de folhas. O beta-NOA induziu a rizogênese foliar nas microplantas a partir de células da bainha do feixe vascular e não apresentou toxicidade nas concentrações utilizadas, ao passo que o AIB mostrou-se mais eficaz para a indução da rizogênese adventícia caulinar. Em relação ao crescimento das microplantas, a ação tanto isolada, como combinada em ambas as concentrações avaliadas de GA3 foram mais eficientes. As análises histológicas evidenciaram alterações no número de estratos da epiderme, hipoderme e mesofilo das folhas cultivadas nos tratamentos com biorreguladores, porém não se verificou alterações citológicas em nenhum dos tratamentos. Acredita-se que a utilização de pulsing seja uma alternativa eficaz para a rizogênese e crescimento em altura das microplantas de abacaxizeiro Gomo-de-mel. / In order to evaluate the action of bioregulators beta-NOA, IBA and GA3 in the pineapple Ananas comosus L. (Merril) cultivar IAC gomo-de-mel microplants morphogenesis an experiment was stablished in order to the presence of the bioregulator alone and in combinations. The microplants were kept in culture in vitro conditions, during 3 months under controlled temperature, light and photoperiod (25 ± 2 C, irradiance de 42 µmol.m- 2s-1 e 16 hours). The analysis of variance showed the interaction interaction between the use of bioregulator and the period of cultivation on hight, number of roots and leaves. The beta-NOA induced leaf rhizogensis in the microplants from the bundle sheath and there was no sign of toxicity with the used concentrations. The IBA showed to be more effective in the adventicious steam rhizogenesis. The isolated and combinated actions of GA3 were the most effective treatment to microplants growing. The histological analysis showed alterations on the epidermis, hypodermis and mesophyll number of layers of the cultivated leaves with this bioregulator, but neither of the treatments showed citological alterations. It is believed that the use of pulsing would be an effective alternative for the rhizogenesis and growing of the gomo de mel pineapple microplants.
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Otimização da propagação clonal de Eucalyptus globulus Labill / Clonal propagation optimization of Eucalyptus globulus Labill

Germana Marcelino Cordeiro 30 July 2013 (has links)
Poucas espécies de Eucalyptus apresentam aptidão ao cultivo em regiões de baixas temperaturas e geadas frequentes, limitando seu cultivo em algumas regiões do Brasil. Genótipos de Eucalyptus globulus podem representar opções futuras para plantios florestais, tendo em vista o seu ótimo desempenho silvicultural nessas condições. No entanto, informações quanto à obtenção de mudas clonais são escassas, e se focarmos as espécies recomendadas para plantio em condições subtropicais, tal carência é ainda maior, principalmente em termos endógenos e exógenos de enraizamento de propágulos. Esta espécie se destaca também, pelo grande interesse no setor florestal, sobretudo em relação às características de sua madeira para obtenção de celulose, porém, é considerada recalcitrante ao enraizamento de estacas, especialmente quando envolve material adulto, dificultando o aproveitamento dos benefícios da clonagem. Por essa razão, o presente trabalho teve como objetivo principal avaliar a técnica de micropropagação de clones de E. globulus, visando a reversão à juvenilidade, aumentando os índices de enraizamento e, consequentemente a produção de mudas clonais. Para tanto, os clones (USP 01, USP 24 e USP 33) foram estudados e apresentaram estabelecimento satisfatório, onde avaliou-se: (a) a multiplicação in vitro, testando-se três meios de cultura (WPM, JADS e MS) suplementados com concentrações do regulador de crescimento BAP (0; 0,50 e 1,0 mg L-1) combinado com ANA (0; 0,05 e 0,10 mg L-1); (b) o alongamento in vitro, testando-se o meio de cultura WPM suplementado com concentrações de BAP (0; 0,05 e 0,10 mg L-1) combinadas com ANA (0; 0,1; 0,2 e 0,3 mg L-1); (c) e o enraizamento in vitro, em que brotações alongadas in vitro dos clones foram coletadas e transferidas para meio de cultura WPM, suplementado com 0 e 0,05 mg L-1 de BAP combinado com 0; 0,1; 0,5 e 1,0 mg L-1 de AIB. Os resultados revelaram comportamentos diferenciados dos clones quanto à multiplicação e alongamento in vitro. As taxas de multiplicação in vitro dos clones variaram ao longo dos 10 subcultivos, com uma estabilização a partir do 6º subcultivo para todos os clones avaliados, sendo a maior taxa de multiplicação (número médio de 13 gemas) na concentração de 0,7 mg L-1 de BAP e 0,05 mg L-1 de ANA no meio de cultura WPM. O meio de cultura WPM avaliado no alongamento in vitro, contribuiu favoravelmente para o alongamento das brotações, assim como ANA na concentração de 0,3 mg L-1 combinando com 0,1 mg L-1 de BAP. Portanto, o protocolo desenvolvido mostrou-se eficiente para micropropagação via proliferação de gemas axilares dos clones avaliados, porém, em relação ao enraizamento constatou-se apenas uma raiz emitida na concentração de 0,5 mg L-1 de AIB no clone 01. De forma geral, em razão dos resultados observados, conclui-se que apesar de mostrar-se viável, a micropropagação não promoveu rejuvenescimento significativo dos clones de E. globulus, uma vez que não foi observado enraizamento expressivo das microestacas para as características avaliadas. / Few Eucalyptus species present adaptation for cultivation in regions with low temperatures and frequent frosts, limiting their cultivation in some regions of Brazil. E. globulus genotypes may to represent future options for forest plantations, in view of its optimal silvicultural performance in these conditions. However, information about obtaining clonal seedlings are scarce, and considering the species recommended for planting in subtropical conditions, this lack of information is even greater, mainly when considering the endogenous and exogenous factors for the rooting. This species is distinguished by great interest in forestry, particularly in relation to characteristics of its wood to obtain cellulose, however, it is considered recalcitrant to rooting, especially when it involves adult material, making it difficult to utilize the cloning benefits. Therefore, this study aimed to evaluate the micropropagation technique of E. globulus clones, in order to revert to juvenility, increasing the rate of rooting and consequently the clonal production. For this, the clones (USP 01, USP 24 and USP 33) were studied and showed satisfactory in vitro culture establishment, where it was evaluated: (a) the in vitro multiplication, testing three culture media (WPM, JADS and MS) supplemented with concentrations plant growth regulator BAP (0; 0,50 and 1,0 mg L-1) combined with NAA (0; 0,05 and 0,10 mg L-1); (b) the in vitro elongation, testing the WPM medium culture supplemented with BAP concentrations (0; 0,05 and 0,10 mg L-1) combined with NAA (0; 0,1; 0,2 and 0,3 mg L-1); and (c) in vitro rooting, where elongated shoots in vitro of the clones were collected and transferred to WPM, supplemented with 0 and 0,05 mg L-1 BAP combined with 0; 0,1, 0,5 and 1,0 mg L-1 IBA. The results showed different behaviors of clones as in vitro multiplication and elongation. Rates of clones in vitro multiplication varied over the 10 subcultures, with the stabilization from the sixth subculture for all clones, the largest rate multiplication (average number of 13 buds) in the concentration of 0,7 mg L-1 BAP and 0,05 mg L-1 NAA in WPM. The culture media WPM evaluated in vitro elongation, contributed positively to the shoots elongation, with 0,3 mg L-1 NAA and 0,1 mg L-1 BAP. Therefore, with the micropropagation protocol using axillary buds proliferation of these clones showed be well developed , however, in relation to rooting, only one root was emitted at 0,5 mg L-1 IBA in clone 01. In general, it is possible concluded that despite viable, the micropropagation did not promote significant rejuvenation of E. globulus clones, due to the not expressive rooting for the microcutting evaluated.
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Análises anátomo-fisiológicas de folhas de pupunheiras cultivadas in vitro, ex vitro e in vivo visando otimizar o protocolo de aclimatização / Anatomical and physiological analyses of peach palm leaves from in vitro, ex vitro and in vivo cultivated plants designed to optimize the acclimatization protocol

Katherine Derlene Batagin 16 June 2008 (has links)
A pupunha (Bactris gasipaes Kunth-Arecaceae) é uma palmeira de extrema importância ecológica e na agroindústria palmiteira, sendo essencialmente propagada por sementes, uma vez que, devido às sérias dificuldades na aclimatização, a micropropagação dessa espécie é prejudicada. Neste contexto, foram comparadas por meio de análises anatômicas e fisiológicas, folhas de pupunheiras cultivadas in vitro, ex vitro e in vivo, com o intuito de verificar as prováveis alterações, que possam influenciar na adaptação das microplantas às condições ex vitro, uma vez que a lâmina foliar é o órgão que mais se modifica em resposta as alterações ambientais. As plantas cultivadas in vitro e posteriormente transferidas para ambiente ex vitro, passaram por um processo de aclimatização constituído de três etapas de rustificação, onde na 1ª etapa as microplantas foram mantidas por três dias na sala de crescimento com os tubos de ensaio abertos, apresentando 100% de sobrevivência. Na 2ª etapa (50 dias de aclimatização) as microplantas permaneceram por quarenta e sete dias em sala de crescimento com temperatura e luminosidade controladas, apresentando 95% de sobrevivência. Na 3ª etapa (180 dias de aclimatização), onde as microplantas permaneceram por 130 dias no ripado sob condições de sombra (sombrite com malha 50%), com percentual de 70% de sobrevivência. Durante o processo de aclimatização foram coletadas amostras de folhas sob condição in vitro, ex vitro (aos 50, 90 e 180 dias de aclimatização) e in vivo, onde foram realizadas análises anatômicas por meio de microscopia eletrônica de varredura e de luz, e fisiológicas, pela taxa de condutância estomática, transpiração e fotossíntese, obtidas pelo IRGA (analisador de gás infravermelho), e o teor de clorofila, obtida pelo SPAD-502 (Soil and Plant Analysis Development). Os dados analisados foram comparados entre si, e suas médias submetidas à análise de variância e comparadas pelo teste de Tukey. As folhas das pupunheiras apresentaram as mesmas estruturas anatômicas básicas em todas as condições de cultivo, e como resposta a aclimatização observou-se o aumento na espessura do mesofilo e na quantidade fibras vasculares (área ocupada pelas fibras na lâmina foliar). Também foram observadas alterações fisiológicas, como a diminuição da condutância estomática, com conseqüente queda na taxa de transpiração e fotossíntese logo após o transplante das microplantas para as condições ex vitro; sendo que no decorrer do processo de aclimatização observou-se a recuperação destes fatores com a taxa de fotossíntese se igualando as das plantas in vivo. O mesmo verificou-se em relação ao teor de clorofila que apresentou um aumentou gradativo em relação ao tempo de aclimatização. As alterações anatômicas e fisiológicas não afetaram de forma significativa o processo de aclimatização, ao contrário evidenciaram um mecanismo de adaptação da espécie às condições de cultivo, permitindo considerar como fatores determinantes para o estabelecimento do protocolo de aclimatização, o ambiente com elevada umidade relativa do ar (ex vitro), o substrato composto de solo tipo latossolo vermelho-amarelo e o tratamento profilático com fungicidas. / The peach palm (Bactris gasipaes Kunth-Arecaceae) is a palm of extreme importance in ecological and palm tree agribusiness and is being mainly propagated by seed, once; due to serious difficulties in acclimatization, the micropropagation of this species is a hard process. In this context, pejibaye leaves from in vitro, ex vitro and in vivo cultivated plants were compared using anatomical and physiological analysis in order to detect probable alterations that would influence the microplants adaptation to ex vitro conditions, since the leaf blade is the plant organ that more is modifying in response to environmental changes. The in vitro cultivated plants that were subsequently transferred to ex vitro environment went through an acclimatization process that consisted of three rustification phases. In the first stage the microplants were maintained in the growth room for three days in opened test tubes, featuring 100 % of survival. In the second stage (50 days of acclimatization) the microplants remained for forty-seven days in the growth room with controlled lighting and temperature, resulting in 95% of survival. In the third stage (180 days of acclimatization) the microplants remained for 130 days covered with black shadow screen (\"sombrite\" mesh with 50%) on the sides, resulting in 70% of survival. During the acclimatization process leaves samples of in vitro, ex vitro (to 50, 90 and 180 days of acclimatization) and in vivo cultivated plants were collected and used for anatomical analyses using light and scanning electron microscopy and for physiological analyses using stomatal conductance, transpiration and photosynthesis rates, obtained by IRGA (infrared gas analyzer), and the content of chlorophyll, obtained by the SPAD-502 (Soil and Plant Analysis Development). The analyzed data were compared with each other, and their average subjected to analysis of variance and compared by Tukey test. The peach palm had the same basic anatomical structures in all conditions of cultivation, and in response to the acclimatization process there was an increase in the thickness of the mesophyll and in quantity of vascular fibers (area occupied by the fibers in leaf blade). Physiological changes were also observed, as the decrease in stomatal conductance, with a consequent fall in the photosynthesis and transpiration rates soon after the microplants transplant to ex vitro conditions. During the acclimatization process was the recovery of these factors with the photosynthesis rate equaling the rate of in vivo plants. The same occurred in relation to the level of chlorophyll which showed a gradual increase in relation to the period of acclimatization. These anatomical and physiological changes did not affect significantly the acclimatization process, on the contrary, showed a adaptation mechanism of the species to the cultivation conditions, allowing consider as determining factors for the establishment of a acclimatization protocol, the environment with high relative humidity (ex vitro), the substrate consisting of Red Yellow latosol and the fungicide prophylactic treatment.
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Desinfecção de explantes e cultivo in vitro de Piretro da Dalmácia (Chrysanthemum cinerariaefolium Vis. cv. Vacaria) / Pyrethrum (Chrysanthemum cinerariaefolium cv. Vacaria) explants disinfection and cultivation in vitro

Nice Livio Borsoi 18 June 2009 (has links)
As atividades que envolvem a floricultura vêm se destacando positivamente no cenário econômico do agronegócio brasileiro. Dentre as espécies de plantas utilizadas para este fim ressaltam-se as espécies pertencentes à família botânica Asteraceae, principalmente as do gênero Chrysanthemum. A espécie C. cinerariaefolium Vis. (Piretro da Dalmácia) é mundialmente cultivada visando à produção de aleloquímicos que apresentam atividades de inseticidas naturais (piretrinas). No Brasil chegou a ser produzida para esse fim em larga escala, no município de Taquara-RS na década de 30 a 40. Recentemente o interesse de seu cultivo tem aumentado como uma alternativa natural de manejo de pragas como planta ornamental, principalmente para jardins. Contudo, o fato de não produzir sementes férteis limita sua capacidade de propagação massal. Visando aperfeiçoar sua micropropagação foram realizados dois experimentos. No experimento 1 foi avaliado aos 30 dias de cultivo a influência de cinco concentrações de hipoclorito de sódio (10, 20, 30, 40 e 50% do produto comercial Mazzarolo) e cinco tempos de permanência na solução durante a desinfestação dos explantes (5, 10, 15, 20, 25 min.). Ao todo foram isolados 125 meristemas totalizando 25 tratamentos com cinco repetições. Os explantes isolados foram inoculados no meio de isolamento, o qual foi constituído de MS + 1,0 mg.L-1 de BAP + 0,1 mg.L-1 de GA3 + 0,01 mg.L-1 ANA + 30 g.L-1 de Sacarose em 7,0 g.L-1 de Agar. No experimento 2 foi avaliado a influência das diferentes concentrações de hipoclorito e dois tempos de permanência na solução desinfetante sobre a porcentagem de necrose, estruturas amorfas, plântulas formadas e comprimento de brotos. As plântulas regeneradas do experimento 1 foram inoculadas no meio de multiplicação que constou do MS + 0,4 mg.L-1 de Thiamina HCl + 100 mg.L-1 de Mio-Inositol + 0,05 mg.L-1 de ANA + 1,0 mg.L-1 de BAP + 40 g.L-1 de Sacarose e 7,0 g.L-1 de Agar. O pH dos meios foi ajustado em 5,9 antes da autoclavagem. Os resultados obtidos no experimento 1 indicaram que quanto maior o tempo de permanência na solução, maior a porcentagem de necrose. Porém, quanto menor a permanência maior a taxa de contaminação microbiana. No experimento 2, observou-se que a porcentagem de necrose é maior na concentração de 50%. Não houve influência dos fatores analisados na produção de estruturas amorfas. Para o número de brotos/explante e comprimento de brotos, o melhor desempenho se deu na solução 30%. Porém, a taxa de brotos por explante diminuiu à medida que aumentou o tempo de permanência na solução. Com relação ao comprimento dos brotos, os melhores resultados foram observados até o tempo de 15 minutos de permanência. Assim conclui-se que C. cinerariaefolium Vis. responde positivamente ao cultivo in vitro. A taxa de necrose aumenta à medida que aumenta a concentração de hipoclorito. Por outro lado, a taxa de contaminação aumenta à medida que diminui a concentração da solução desinfetante. A concentração de hipoclorito de sódio e o tempo de permanência na solução desinfetante afetam o número e o comprimento de brotos produzidos nos subcultivos. / The activities that involve floriculture have distinguished positively in the economic scenario of the Brazilian agribusiness. Among the plant species used for that purpose it can be distinguished the species belonging to the botanical family Asteraceae, mainly from the genus Chrysanthemum. The species C. cinerariaefolium Vis. is worldwide cultivated in order to produce the alelochemicals, which have activities of natural insecticides (pyretrine). In Brazil it was produced in large scale, in the Taquara-RS County in the decade of 30 to 40. Recently the interest on its cultivation has increased as natural alternative of pest management as ornamental plant, mainly in yards. However, the fact of no seed is produced by the plant that limits its capacity of massal production. In order to optimize its micropropagation two experiments were developed. In the experiment 1 it was evaluated 30 days after cultivation the influence of five concentrations of sodium hipochlorine (10, 20, 30, 40 and 50% of the commercial product Mazzarolo), and five time lengths of the explants permanence in the disinfecting solution (5, 10, 15, 20 and 25 min.). It was isolated 125 meristems, 25 treatments with five replications. The isolated explants were inoculated in isolation media, that was constituted of MS + 1.0 mg.mL-1 of BAP + 0.1 mg.L-1 of GA3 + 0.01 mg.L-1 ANA + 30 g.L- 1 of sucrose in 7.0 g.L-1 of Agar. In the experiment 2 it was evaluated the influence of different concentrations of hipochlorine and two length of time in disinfection solution measuring the percentage of necrosis, amorphous structures, seedlings formed and length of the sprouts. The regenerated seedlings from experiment 1 were inoculate in a medium of multiplication that was of MS + 0.4 mg.L-1 of Thiamine HCl + 100 mg.L-1 of Mio-Inositol 0.05 mg.L-1 of ANA + 1.0 mg.L-1 of BAP + 40 g.L-1 of sucrose and 7.0 g.L-1 of Agar. The pH of the medium was adjusted to 5.9 before the autoclaving process. The results obtained in the experiment 1 indicated that the higher the time length in the solution, the higher is the percentage of necrosis. However, the higher is the permanence of higher rate of microbial contamination. In the experiment 2; it was observed that the percentage of necrosis is higher at the concentration of 50%. There was no influence of the analyzed factors in the yield of amorphous structures. For the number of sprouts/explants and length of sprouts, the better performance was in the solution of 30%. However, the rate of sprouts per explants diminished as the length of time in the solution increased. The best results for sprout length were obtained up to 15 minutes of permanence. Therefore, it can be concluded that C. cinerariaefolium Vis. responds positively to in vitro culture. The rate of necrosis increases as the hipochlorine concentration is higher. On the other hand, the contamination rate increases as the disinfection solution diminishes. The concentration o hipochlorine sodium as the length of time of permanence in the initial disinfecting solution used during the explants disinfection affects the number and the sprout length produced during the subculture.
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Cultivo in vitro de maracujazeiro-amarelo / In vitro propagation of yellow passion fruit

Costa, Savana Irribarem 20 March 2015 (has links)
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Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do ácido giberélico e da escarificação na germinação de sementes, avaliar a multiplicação in vitro utilizando distintas concentrações e combinações de 6 – benzilaminopurina e ácido naftalenoacético, e também diferentes fontes e concentrações de carboidratos no cultivo in vitro de maracujazeiro-amarelo. Os experimentos foram realizados no laboratório de Propagação de Plantas Frutíferas, Departamento de Fitotecnia da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, da Universidade Federal de Pelotas (UFPEL), no período de março de 2013 a novembro de 2014. Para o artigo 1 foram avaliados a porcentagem de germinação e o índice de velocidade de germinação, e nos demais foram avaliados as variáveis número médio de folhas, número médio de brotações e comprimento médio das brotações (cm), número médio de raízes e comprimento médio da maior raiz (cm). As maiores médias para as variáveis porcentagem de germinação e índice de velocidade de germinação foram obtidas com a utilização de escarificação das sementes utilizando-se 125 mg.L -¹ e 0 mg.L -¹. A escarificação da extremidade de sementes proporciona maiores médias para as variáveis analisadas em sementes de maracujazeiro-amarelo. A imersão das sementes em solução contendo o regulador de crescimento AG ³ por 24h não obteve efeito sobre as variáveis analisadas. No artigo (2), A ausência dos reguladores promoveu maior comprimento de brotações, da maior raíz e número de raízes. A concentração 0,5 mg.L -¹ de BAP sem a adição de ANA em meio de cultivo MS apresentou maior número de folhas e a mesma dose combinado com ANA, promoveu o maior número de brotações na multiplicação in vitro. E no artigo (3), a glicose na concentração de 88 mM.L -¹ apresentou maiores médias para números de folhas e brotações. A sacarose na concentração 88 mM.L -¹ promoveu maiores médias para comprimento de brotações, de raízes e número de raízes em explantes de maracujazeiro-amarelo cultivados em meio MS. / Passion fruit belongs to Passifloraceae family, which includes over 630 species, which most belongs to genus Passiflora and inhabits the tropical and subtropical regions of South America. Passion fruit commercial yards in Brazil have grown over the years and also the demand for quality seedlings. However, it is necessary to find out in tissue culture new alternatives to obtain high quality cloned seedlings quickly. Therefore, the objective of this work was to evaluate the effect of gibberellic acid and scarification on seed germination, to evaluate the in vitro multiplication using different concentrations and combinations of 6 - benzylaminopurine and naphthaleneacetic acid, and also different sources and carbohydrate concentrations in vitro cultivation yellow passion fruit. The experiments were conducted at Fruit Trees Propagation Laboratory, Department of Crop Science, Faculty of Agronomy Eliseu Maciel, Federal University of Pelotas (UFPEL), from March 2013 to November 2014. On Article 1 were evaluated the percentage of germination and germination speed index, and others articles were evaluated in the average number of leaves, average number of shoots, average shoot length (cm), average number of roots and medium length the largest root (cm). The highest averages for variables analyzed were obtained with seeds scarification using 125 mg.L -¹ and 0 mg.L -¹ GA ³. Seed end scarification provides higher averages for the variables analyzed in P. edulis f. flavicarpa. The immersion of seeds in a solution containing growth regulator GA ³ for 24 hours got not effect on the variables analyzed. Article (2), the absence of regulatory promoted higher length of shoots, the largest root and root number. The concentration of 0.5mg.L -¹ BAP without the addition of NAA in MS medium showed higher number of leaves and the same dose combined with ANA, promoted the highest number of shoots of P. edulis f. flavicarpa on in vitro multiplication. And on Article (3), glucose at a concentration of 88 mM.L -¹ showed the highest averages for number of leaves and shoots. Sucrose added to the concentration of 88 mM.L -¹ showed higher averages for length of shoots, roots and number of roots in explants of yellow passion fruit grown on MS medium.
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Enraizamento, dinâmica e protocolo de propagação de Prunus / Rooting, dynamics and Prunus propagate protocol

Timm, Cari Rejane Fiss 31 August 2016 (has links)
Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2016-10-13T14:17:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese CARI REJANE FISS TIMM.pdf: 1890245 bytes, checksum: 3dd97e2c8ea44f66e16d8dc12f151fc0 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-01-04T14:54:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese CARI REJANE FISS TIMM.pdf: 1890245 bytes, checksum: 3dd97e2c8ea44f66e16d8dc12f151fc0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-04T14:54:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese CARI REJANE FISS TIMM.pdf: 1890245 bytes, checksum: 3dd97e2c8ea44f66e16d8dc12f151fc0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-08-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Existem muitas informações referentes à cultura do pessegueiro. Entretanto, como o dinamismo da pesquisa, da fruticultura e do mercado consumidor causa mudanças, estas irão exigir um sistema moderno e tecnificado de produção de mudas de qualidade genética e sanitária para obtenção de frutos de qualidade e uma alta produtividade. Com o objetivo de adequar uma metodologia de propagação para a produção de mudas de qualidade, foram desenvolvidos vários experimentos com cultivares copa e porta-enxertos de Prunus spp. para avaliar os efeitos de diferentes concentrações de ácido indolbutírico e do tipo de miniestaca no enraizamento, determinar o tempo ótimo de enraizamento de miniestacas e identificar nas fases de estabelecimento e multiplicação o meio de cultura e a concentração de BAP adequados, na propagação in vitro para obtenção de mudas. Os experimentos foram realizados em casa de vegetação e no Laboratório de Micropropagação de Plantas Frutíferas do Departamento de Fitotecnia da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel da Universidade Federal de Pelotas, no período de março de 2014 a fevereiro de 2016. Para os experimentos de enraizamento foram utilizados os porta-enxertos das cultivares Nemaguard, Flordaguard, Okinawa, umezeiro, Mr.S 2/5 e as cultivares copa Capdeboscq, Bonão e Maciel, testando-se os tipos de miniestacas, as diferentes concentrações de AIB e determinando o tempo ótimo de enraizamento das miniestacas. No estabelecimento e na multiplicação foram utilizados os portaenxertos umezeiro e Marianna para determinar o meio de cultura e a concentração de BAP. No enraizamento, as miniestacas apicais, medianas e basais resultaram com a maior porcentagem utilizando-se 1.000 mg L-1 de AIB e determinando o tempo ótimo de enraizamento Flordaguard obteve 70% aos 50 dias de cultivo. Na fase de estabelecimento observou-se que o meio de cultivo WPM acrescido de 1.0 mg L-1 de BAP demonstrou ser o mais adequado. Na multiplicação, verificou-se que a cultivar Marianna com 1.5 mg L-1 de BAP foram superiores para altura da brotação, número de gemas, número e comprimento das brotações massa fresca e taxa de multiplicação. / There are many information regarding the peach crop. However, as the dynamism of research, horticulture and consumer market causes changes, these will require a modern and technified production of genetic and health quality system to obtain seedlings of fruit quality and high productivity. In order to adapt a method of propagation for the production of quality seedlings, they were developed several experiments with cultivars crown and rootstock Prunus spp. to evaluate the effects of different indolebutyric acid concentration and type of minicuttings rooting, determining the optimum time of cuttings rooting and identify the establishment and multiplication stage culture medium and concentration of appropriate BAP in vitro propagation in obtaining seedlings. The experiments were conducted in a greenhouse and Fruit trees Plant Micropropagation Laboratory of the Department of Plant Science, Faculty of Agronomy Eliseu Maciel, Federal University of Pelotas, from March 2014 to February 2016. For rooting experiments were used rootstocks of Nemaguard cultivars Flordaguard, Okinawa, mume, Mr.S 2/5 and cultivars Capdeboscq, Bonao and Maciel, testing themselves the types of cuttings, different concentrations of IBA and determining the optimum time for rooting of cuttings. In the establishment and multiplication were used the rootstocks mume and Marianna to determine the culture medium and the concentration of BAP. In the rooting cuttings apical, middle and basal resulted with the highest percentage using 1,000 mg L-1 IBA and determining the rooting great time Flordaguard obtained 70% after 50 days of cultivation. In the establishment phase it was observed that the WPM culture medium supplemented with 1.0 mg L-1 BAP proved to be the most suitable. In multiplying it was found that cultivating Marianna 1.5 mg L-1 BAP were superior to the height of the time of budding e, number and length of shoot fresh weight and multiplication rate.
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Radiação gama e conservação in vitro de Amoreira-preta / Culture in vitro of blackberry: gamma radiation and germplasm conservation

SILVA, Natália Dias Gomes da 04 March 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_natalia_dias_gomes_da_silva.pdf: 607017 bytes, checksum: 8181995ebd6e935c42ebf574ca9486d6 (MD5) Previous issue date: 2013-03-04 / Blackberry is belonging to the genus Rubus, and cultive this has great potential for growth, however, still seek improvement programs cultivars with higher productivity, taste sweeter, larger fruits, plants with upright stems and mostly thornless. Because of these needs, gamma radiation and micropropagation technique, become a possibility in the induction, monitoring and storage germplasm. With this it aimed to radiate with different doses of gamma rays, explants of blackberry established in vitro, to induce changes compared to non-irradiated explants, and seek alternatives that enable the storage of germplasm blackberry black, stored for 120 days at a temperature of 6 ° C and subsequently verify the return rate of multiplication of explants. For this, containing an axillary bud explants were irradiated with different doses of gamma radiation (0, 5, 10, 20 and 40 Gy) and cultured in vitro. For the experiment of slow growth were also used micro-cuttings with one bud, which were cultured for 30, 60, 90 and 120 days at 6 ° C and grown in culture medium with different concentrations of sucrose (15, 30 and 45 g L-1) and presence or absence of mannitol and subsequently transferred to a growth chamber with a temperature of 24 ° C for 30 days. For a percentage multiplication, length of shoot and root growth was observed with increasing radiation for both cultivars, however the length of roots increased up to 20 Gy, for both cultivars. The number of roots was increased to 5 Gy, followed by reduction according to the increase of the radiation dose for the experiment slow growth was observed a gradual increase in multiplication rate until 120 days, the presence of mannitol and sucrose in the medium culture reduced the rate of multiplication, for both cultivars, indicating the importance of these osmoregulators in slow growth. After returning to growth room, it was found that the explants returned their metabolic activities, returning the rates indicated multiplication per explant. Thus, it can be concluded that the radiation causes changes in explants of blackberry and adding osmorregulators in the culture medium provides a reduction in the rate of proliferation during the storage period the cold, but does not affect the rate multiplied after returning to room growth. / A amoreira-preta é pertencente ao gênero Rubus e o seu cultivo apresenta grande potencial de crescimento. No entanto, programas de melhoramento ainda buscam cultivares com maior produtividade, sabor mais doce, maior tamanho das frutas, plantas com hastes eretas e principalmente sem espinhos. Devido a essas necessidades, a radiação gama e a técnica de micropropagação, tornam-se uma possibilidade na indução, acompanhamento e armazenamento de germoplasma. Com isso o presente trabalho teve como objetivo irradiar, com diferentes doses de raios Gama, explantes de amoreira-preta estabelecidos in vitro, a fim de induzir alterações, além de buscar alternativas que possibilitem o armazenamento do germoplasma de amoreira-preta, por até 120 dias a 6°C. Para isso, explantes contendo uma gema axilar foram irradiados com diferentes doses de radiação gama (0, 5, 10, 20 e 40 Gy) e cultivados in vitro. Para o experimento de crescimento lento também foram usados segmentos nodais contendo uma gema, os quais foram cultivados por 30, 60, 90 e 120 dias a 6°C em meio de cultura com diferentes concentrações de sacarose (15, 30 e 45 g L-1), presença ou ausência de manitol e posteriormente transferidos para sala de crescimento, com temperatura de 24°C, por 30 dias. Para a percentagem de multiplicação, comprimento de parte aérea e de raízes foi observado crescimento com aumento da radiação para ambas cultivares, contudo o comprimento de raízes aumentou até 20 Gy, para ambas cultivares. O número de raízes, foi crescente até 5 Gy, seguido de redução conforme aumento da dose de radiação. No crescimento lento, foi observado um aumento gradual na taxa de multiplicação até os 120 dias, a presença do manitol e da sacarose no meio de cultura reduziu a taxa de multiplicação, para ambas cultivares, evidenciando a importância destes osmorreguladores na redução do crescimento. Após o retorno à sala de crescimento, foi verificado se os explantes retornaram as taxas de normais multiplicação. Com isso, pode-se concluir que a radiação promove alterações em explantes de amoreira-preta e que a adição de osmorreguladores no meio de cultura proporciona redução na taxa de multiplicação, durante o período de armazenamento ao frio, porém não afeta a taxa de multiplicação após o retorno as condições padrões em sala de crescimento.
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Diferentes formas de propagação e intensidades de poda no desempenho a campo de mirtileiros do grupo rabbiteye / Different methods of propagation and intensity of pruning on field performance of rabbiteye blueberries

Souza, André Luiz Külkamp de 02 March 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_andre_de_souza.pdf: 1505540 bytes, checksum: d992967fc84ee46bcd594a64a2a642a6 (MD5) Previous issue date: 2011-03-02 / Blueberry cultivars of rabbiteye group Bluegem, Briteblue, and Woodard are characterized by having low chilling requirement, high vigor and productivity, being able to be produced in region of Southern Brazil. Studies on cultural practices and field performance in blueberry are recent in Brazil. In order to provide more accurated informations to the growers of this fruit crop, experiments were carried out during 2009 and 2010 in a high potential region. The first experiment was carried out in a didactic orchard at the Federal University of Pelotas (Rio Grande do Sul State), and the objective was to study the field behavior of the blueberries propagated by two different techniques. Evaluations on vegetation, production, and fruit quality aspects were done in order to determine the effect of rejuvenation obtained through micropropagation technique. One year-old plants of blueberry, cultivars Bluegem, Briteblue, and Woodard, obtained from micropropagation and semi-hardwood cuttings were used. It was found that micropropagated plants showed a high initial vegetative growth, and both productivity and fruit quality similar to plants propagated by cuttings. In the second experiment, conducted in a commercial orchard located in the same city of the first experiment, it was tested different intensities of pruning on production and fruit quality aspects. Seven years-old plants, cultivars Briteblue and Woodard were used. They were pruned during the winter rest period in different intensities (low, moderate, drastic and control), and the control (no pruning). Blueberry plants which were not pruned showed high productivity, but produced smaller fruits. The moderate pruning system showed the best results. / As cultivares de mirtileiro Bluegem, Briteblue e Woodard pertencem ao grupo rabbiteye e caracterizam-se pela baixa exigência em frio, elevado vigor e alta produtividade, sendo aptas a serem produzidas nas condições do Sul do Brasil. No país ainda são recentes os estudos relativos ao manejo do pomar de mirtileiro e suas características a campo. Na tentativa de oferecer informações mais precisas aos produtores desta cultura, foram conduzidos dois experimentos durante os anos de 2009 e 2010 em região com potencial produtivo. O primeiro experimento foi conduzido em pomar didático pertencente à Universidade Federal de Pelotas, e o objetivo foi estudar o comportamento a campo de mirtileiros propagados por duas diferentes técnicas, avaliando-se aspectos vegetativos, produtivos e de qualidade dos frutos, a fim de constatar o efeito do rejuvenescimento obtido através da técnica de micropropagação. Para isso, realizou-se o plantio de mudas de mirtileiro com um ano de idade das cultivares Bluegem, Briteblue e Woodard, propagadas in vitro e por estaquia semilenhosa. Foi constatado que plantas micropropagadas apresentam, a campo, crescimento vegetativo inicial superior, além de produtividade e qualidade de frutos semelhantes às plantas propagadas por estaquia. No segundo experimento, conduzido em um pomar comercial localizado no mesmo município do primeiro, foram testadas diferentes intensidades de poda de frutificação e avaliados aspectos produtivos e de qualidade de frutos. Foram utilizadas plantas com sete anos de idade, das cultivares Briteblue e Woodard, que foram podadas no período de repouso hibernal em intensidades distintas (leve, moderada, drástica e testemunha). Plantas de mirtileiro não podadas apresentaram produtividade superior, porém produziram frutos de menor tamanho. O sistema de poda moderado foi o que apresentou melhores resultados.
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RIZOGÊNESE IN VITRO E EX VITRO EM Peltophorum dubium (SPRENGEL) TAUBERT / RHIZOGENESIS IN VITRO AND EX VITRO IN Peltophorum dubium (SPRENGEL) TAUBERT

Curti, Aline Ritter 28 February 2014 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Peltophorum dubium is native forest species of Brazil endowed with ecological importance for the recovery of degraded areas and economical for timber purposes. The seeds of this species have low and irregular germination if they are not subjected to treatments to overcome dormancy. However, there are few studies that allow for the vegetative propagation of the species. As a result, the present study aimed to evaluate the formation of roots in shoots of P. dubium applying the techniques of micropropagation and minicutting and acclimatization of plants produced by these techniques. For rooting in vitro micropropagated shoots were subjected to treatments where different culture media were tested, with addition of 30 g L-1 vermiculite, combined with the nutrient media MS, MS/2, WPM, WPM/2 and changes in concentrations of auxin IBA (0, 5, 10 or 20 μM) and sucrose (0, 15 or 30 g L -1) in the presence or absence of agar (0 or 7g L-1) arranged in different tests. The results indicated that the best combination for root formation in vitro shoots of Peltophorum dubium is the use of nutritional WPM/2 without addition of sucrose and auxin, with 7 g L- 1 agar. This condition was still allowing the best performance of the plants during acclimatization in vitro. For rooting of shoots via minicutting, cuttings 3-7 cm apical portion of rooted shoots of seminal origin were used. Root formation after the cuttings are subjected to immersion in solution with 0, 1.000, 2.000 or 4.000 mg L- 1 IBA, from different collections and during 30, 60 or 90 days in a greenhouse with controlled conditions was evaluated for root induction. Rooting in cuttings occurred even without the use of IBA, after successive collections. However, it was increased with the use of up to 2.000 mg L-1 auxin the period of 60 days being sufficient for the formation of roots takes place. The seedlings showed good performance during acclimatization, indicating that the technique is feasible for minicutting plants production Peltophorum dubium. / Peltophorum dubium é uma espécie florestal nativa do Brasil dotada de importância ecológica para fins de recuperação de áreas degradadas e econômica, para fins madeiráveis. As sementes desta espécie apresentam germinação baixa e irregular se não forem submetidas a tratamentos para superação de dormência. Em virtude da carência de estudos que viabilizem a propagação vegetativa da espécie e considerando a natural recalcitrância em relação à rizogênese nesse processo, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a rizogênese in vitro e ex vitro em brotações de P. dubium aplicando-se as técnicas de micropropagação e de miniestaquia, bem como a aclimatização das mudas produzidas por meio destas técnicas. Para a rizogênese in vitro, brotações micropropagadas foram submetidas a tratamentos em que foram testados diferentes meios de cultivo, com acréscimo de 30 g L-1 de vermiculita, combinados aos meios nutritivos MS, MS/2, WPM, WPM/2 e alterações nas concentrações da auxina ácido indolbutírico - AIB (0, 5, 10 ou 20 μM) e sacarose (0, 15 ou 30 g L-1), na presença ou ausência de ágar (0 ou 7 g L-1), arranjados em diferentes ensaios. Os resultados indicaram que a melhor combinação para a rizogênese in vitro em brotações de Peltophorum dubium é a utilização do meio nutritivo WPM/2, na ausência de sacarose e da auxina, porém com 7 g L-1 de ágar. Essa condição foi, ainda, a que permitiu o melhor desempenho das mudas durante a aclimatização in vitro. Para a rizogênese em brotações via miniestaquia, foram utilizadas miniestacas, de 3 a 7 cm, isoladas da porção apical de brotações de minicepas de origem seminal. Foi avaliada a formação de raízes após as miniestacas serem submetidas à imersão em solução contendo 0, 1.000, 2.000 ou 4.000 mg L-1 de AIB, oriundas de diferentes coletas e permanecendo por 30, 60 ou 90 dias em casa de vegetação com condições controladas adequadas à indução de raízes. A rizogênese nessas miniestacas ocorreu mesmo sem a utilização de AIB, ao longo das sucessivas coletas. No entanto, foi incrementada com a utilização de até 2.000 mg L-1 da auxina, sendo suficiente o período de 60 dias para que ocorra a formação de raízes. As mudas apresentaram bom desempenho durante a aclimatização, indicando que a técnica de miniestaquia é viável para a produção de mudas de Peltophorum dubium.

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