Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-06-15T16:27:53Z No. of bitstreams: 1 Claudia Ulisses de Carvalho Silva.pdf: 4146224 bytes, checksum: 6784f9f313a424713c8adbf526388205 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-15T16:27:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Claudia Ulisses de Carvalho Silva.pdf: 4146224 bytes, checksum: 6784f9f313a424713c8adbf526388205 (MD5) Previous issue date: 2005-06-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The aim of this work was to establish protocols for the induction of embryogenic calluses in heliconia species. Two experiments were carried out. The first one had three assays. The first assay consisted of combinations of AIA (indole-3-acetic) (0, 1, 1.5, 2, and 2.5 mg.L-1) with 2,4-D (2,4-dichlorofenoxyacetic acid) (0, 3, 4, and 5 mg.L-1) and the second essay combined BAP (6-benzylamino purine) (0, 1, 1.5, 2, and 2.5 mg.L-1) with 2,4-D (0, 3, 4, and 5 mg.L-1). Sections of ovaries of H. chartacea Lane ex Barreiros cv. Sexy Pink were used in the assays above. The third assay was established from combinations among three levels of AIA (0, 1 and 2 mg.L-1) and five levels of 2,4-D (0, 5, 10, 15, and 20 mg.L-1) within cultivars Sexy Pink and Sexy Scarlet of H.chartacea. The second experiment used explant zygotic embryos of H. bihai cv. (L.) L.Lobster Claw Two in combinations of AIA (0, 1 and 2 mg.L-1) and 2,4-D (0, 5, 10, 15, and 20 mg.L-1). Evaluations in both experiments were carried out on days 30, 60 and 90 after innoculation. Aspects of the callus and the presence of nodules were assessed by visual observations with the help of a stereomicroscope and cytochemical, histologic and scanning electron microscopy analyses were performed. At the end of experiment 1, the index of formation of callus in explants treated with AIA+2,4-D (Assay 1) was greater than that observed with the combinations of BAP+2,4-D (Assay 2). The AIA+2.4-D assay also produced proembryonary cells. In the third assay the Sexy Pink cultivar showed a greater index of formation of callus than the Sexy Scarlet cultivar, but these calluses didn t show somatic embryos at the end of 90 days of cultivation. In the second experiment, formation of somatic proembryos occurred only in zygotic embryos from mature fruit of H. bihai (L.) L. cv. Lobster Claw Two cultivated in the absence of growth regulators. The objective of the second work was to evaluate micropropagation processes for cultivation of zygotic embryos. Initially, an analysis of the internal structure of the embyo was carried out using immature and mature fruits. This was accomplished by embedding the fruits in paraffin and sectioning them with a microtome. Embryos from immature and mature fruits were innoculated in an MS (Murashige and Skoog) environment with different concentrations of salts (full MS and ½ MS), AG3 (0, 2.5 and 5 mg.L-1) and saccharose or glucose (30 g.L-1), and their development was evaluated. Evaluations were carried out 15, 30 and 60 days after innoculation based on visual observations, quantitative parameters, and number of roots. Then, plants were replicated and transferred to an MS environment (full MS or ½ MS), added 0 or 2.5 mg.L-1 BAP, with the objective to evaluate their development after 30 and 45 days after innoculation. The genetic variability of plants from zygotic embryos was estimated using isoenzymatic analyses (PO, EST, ACP, GOT, ADH, and MDH). The internal structure of mature embryos showed tissues in more advanced stages of differentiation than immature embryos, as expected. In the ½ MS environment with saccharose, 85% of the innoculated embryos were converted into plants, just 41% converted into plants in the glucose environment. During the multiplication phase, plants cultivated in an MS environment with a 50% concentration of salts and 2.5 mg.L-1 of BAP showed a greater number of buds. The isoenzymatic analyses showed some changes of isoenzymatic patterns, for example in intensity of coloration and migration of some bands. These results can be associated respectively with the difference of the ages among mother plant and plants obtained in vitro and/or variations in eletrophoretic phenotypes of the plants from in vitro cultivation of zygotic embryos. / Visando estabelecer protocolos para a indução de calos embriogênicos em espécies de helicônia, foram realizados dois experimentos, onde o primeiro constou de três ensaios. O primeiro ensaio consistiu de combinações de AIA (ácido 3-indolilacético) (0; 1; 1,5; 2 e 2,5 mg.L-1) com 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) (0; 3; 4; e 5 mg.L-1) e o segundo ensaio combinou o BAP (6- benzilaminopurina) (0; 1; 1,5; 2; 2,5 mg.L-1) com 2,4-D (0; 3; 4; e 5 mg.L-1), utilizando em ambos secções de ovários de H. chartacea Lane ex Barreiros cv. Sexy Pink. O terceiro ensaio foi estabelecido a partir de combinações entre três níveis de AIA (0; 1 e 2 mg.L-1) e cinco níveis de 2,4-D (0; 5; 10; 15 e 20 mg.L-1), utilizando como explante, secções de ovários das cultivares Sexy Pink e Sexy Scarlet da espécie H. chartacea. No segundo experimento foi utilizado como explante, embriões zigóticos de H. bihai (L.) L. cv. Lobster Claw Two em combinações de AIA (0; 1 e 2 mg.L-1) e 2,4-D (0; 5; 10; 15 e 20 mg.L-1). As avaliações em ambos experimentos foram realizadas aos 30, 60 e 90 dias após a inoculação, considerando o aspecto dos calos e a presença de nódulos, através de observações visuais com o auxílio de estereomicroscópio, além de análises citoquímica, histológica e de microscopia eletrônica de varredura. No experimento 1 o índice de formação de calos nos explantes tratados com AIA+2,4-D (Ensaio I), foi superior àquele observado com as combinações de BAP+2,4-D (Ensaio II), ao final dos 90 dias de cultivo, onde observou-se a presença de células pró-embriogênicas. No terceiro ensaio a cultivar Sexy Pink apresentou um maior índice de formação de calos do que a cultivar Sexy Scarlet , mas, esses calos não apresentaram a formação de embriões somáticos ao final dos 90 dias de cultivo. No segundo experimento, a formação de pró-embriões somáticos ocorreu apenas nos embriões zigóticos provenientes de frutos maduros de H. bihai (L.) L. cv. Lobster Claw Two cultivados na ausência de reguladores de crescimento. Objetivando avaliar o processo de micropropagação a partir do cultivo de embriões zigóticos, foi realizada inicialmente uma análise da estrutura interna do embrião proveniente de frutos imaturos e maduros. Para isto, foram incluídos em parafina e seccionados em micrótomo. Os embriões provenientes de frutos imaturos e maduros foram inoculados em meio MS (Murashige e Skoog) com diferentes concentrações de sais (MS completo e ½ MS), de GA3 (ácido giberélico) (0; 2,5 e 5,0 mg.L-1), além de sacarose ou glicose (30 g.L-1), para avaliar a conversão do embrião em planta. As avaliações considerando o desenvolvimento da parte aérea e o número de raízes foram realizadas aos 15, 30 e 60 dias após a inoculação, com base em observações visuais e parâmetros quantitativos. Em seguida, as plantas obtidas foram repicadas e transferidas para meio MS (MS completo ou ½ MS), acrescido de 0 ou 2,5 mg.L-1 BAP com o objetivo de avaliar a multiplicação aos 30 e 45 dias após a inoculação. Para avaliar a variabilidade genética das plantas provenientes de embriões zigóticos, utilizou-se sistemas isoenzimáticos (PO, EST, ACP, GOT, ADH e MDH). Avaliando a estrutura interna dos embriões, observou-se que os embriões maduros apresentam tecidos em estádios de diferenciação mais avançados do que os embriões imaturos, como já era esperado. Na fase de conversão dos embriões em plantas, observou-se que 85% dos embriões provenientes de frutos maduros converteram-se em plantas normais em meio MS reduzido à metade da concentração dos sais, utilizando a sacarose como fonte de carboidrato, enquanto que os embriões cultivados em meios com glicose, apenas 41% converteram-se em plantas. Na fase de multiplicação, as plantas cultivadas em meio MS com 50% da concentração dos sais acrescido de 2,5 mg.L-1 de BAP, apresentaram maior número de gemas aos 45 dias de cultivo. Quanto a análise isoenzimática foi observado algumas alterações nos padrões isoenzimáticos no que se refere a intensidade de coloração e a migração de algumas bandas. Esses comportamentos podem estar associados respectivamente, a diferença de idade entre a planta matriz e as plantas obtidas in vitro e/ou alguma variação no fenótipo eletroforético das plantas provenientes do cultivo in vitro de embrião zigótico.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-06T11:28:13Z No. of bitstreams: 1 Maiza de Azevedo Dantas.pdf: 1426194 bytes, checksum: 248ab81985fd9f5b4bd3a17adefea341 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-06T11:28:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maiza de Azevedo Dantas.pdf: 1426194 bytes, checksum: 248ab81985fd9f5b4bd3a17adefea341 (MD5) Previous issue date: 2014-02-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Orchids stand out among the ornamental tropical due to the exotic beauty of flowers, exuberant colors and shapes. Due to the high market demand, depredation of habitat, low rate of seed germination in natural environment and slow growth, tissue culture has been presented as an important tool for the production of seedlings of orchids on a large scale, in a reduced period of time and with greater seedling quality over conventional methods. The polysaccharide chitosan has been tested as an additive in the culture medium of some species as it stand out as a growth promoter and by acting as an antioxidant. This study aimed to evaluate the influence of dietary supplementation of chitosan to the nutrient medium in vitro cultivation of Dendrobium Phalaenopsis and Cattleya labiata in liquid and solid medium. Shoots from in vitro seedlings of both species were inoculated into vials containing 30 ml of MS medium with half the ionic strength. The experiment consisted of the combination of three chitosan concentrations (0, 15 and 20 mg.L-1) with nutrient medium in solid and liquid state. Each treatment had four replicates, each with two plants. The experimental design was completely randomized with a factorial scheme of 3x2 (chitosan concentration x physical state of the medium). For 50 days were evaluated the total fresh weight, number of shoots and roots, and were determined activities of superoxide dismutase enzyme (SOD), ascorbate peroxidase (APX) and catalase (CAT). In cultivation in liquid medium, D. phalaenopsis fresh weight showed higher treatment with 20 mg.L-1 of chitosan as the highest number of shoots was observed in both media, at the same concentration. C. labiata also exhibited higher fresh weight and number of shoots in liquid medium, but at the concentration of 15 mg.L-1 of chitosan. The solid medium favored the emission of roots in both species, but inhibited the formation of shoots of C. labiata regardless of the chitosan concentration. The best development of seedlings of both species in liquid medium coincided with increased activity of SOD directly proportional to the chitosan. This activation of SOD was not accompanied by an increase in the activity of APX or CAT, showing the action of chitosan in the dismutation of superoxide without forming hydrogen peroxide. On solid medium, the action of chitosan on the antioxidative mechanism is also provided by the activation of the APX and CAT. Verified the prevalence of the liquid medium for micropropagation of the species studied and confirmed the combination of chitosan in controlling levels of reactive oxygen species in joint action with the antioxidant enzyme system action. / As orquídeas destacam-se entre as ornamentais tropicais, devido à beleza exótica das flores, exuberância de cores e formas. Em virtude da alta demanda do mercado, depredação do habitat, baixa taxa de germinação das sementes em ambiente natural e o lento crescimento, a cultura de tecidos vem se apresentando como uma importante ferramenta para a produção de mudas de orquídeas em larga escala, em período reduzido de tempo e com maior qualidade das mudas em relação aos métodos convencionais. O polissacarídeo quitosana tem sido testado como aditivo no meio de cultura de algumas espécies por se destacar como promotor de crescimento e por sua ação como antioxidante. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a influência da suplementação de quitosana ao meio nutritivo no cultivo in vitro de Dendrobium phalaenopsis e Cattleya labiata, em meio líquido e sólido. Brotações provenientes de mudas in vitro de ambas as espécies foram inoculadas em frascos com 30 ml de meio MS com metade da força iônica. O experimento constou da combinação de três concentrações de quitosana (0, 15 e 20 mg L-1 de quitosana) em meio nutritivo em estado sólido e líquido. Cada tratamento contou com quatro repetições, cada uma com duas plantas. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial de 3x2 (concentrações de quitosana x estado físico do meio). Aos 50 dias avaliaram-se o peso fresco total, número de brotos e de raízes, e foram determinadas as atividades das enzimas superóxido dismutase (SOD), ascorbato peroxidase (APX) e catalase (CAT). No cultivo em meio líquido, D. phalaenopsis apresentou maior peso fresco no tratamento com 20 mg.L-1 de quitosana, enquanto o maior número de brotos foi observado em ambos os meios, nessa mesma concentração. C. labiata também exibiu maior peso fresco e número de brotos em meio líquido, porém na concentração de 15 mg.L-1 de quitosana. O meio sólido favoreceu a emissão de raízes das duas espécies, mas inibiu a formação de brotos de C. labiata, independente das doses de quitosana. O melhor desenvolvimento das mudas das duas espécies em meio líquido coincidiu com aumento da atividade de SOD diretamente proporcional ao da concentração de quitosana. Essa ativação da SOD não foi acompanhada pelo aumento na atividade da APX nem da CAT, evidenciando a ação da quitosana na dismutação do superóxido sem formação de peróxido de hidrogênio. Em meio sólido, a ação da quitosana no mecanismo antioxidativo se deu pela ativação da APX e CAT. Constatou-se a prevalência do meu líquido para a micropropagação das espécies estudadas e confirmou-se a ação combinada da quitosana no controle dos níveis de espécies reativas de oxigênio, em ação conjunta com o sistema enzimático antioxidativo.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-12-01T13:12:32Z No. of bitstreams: 2 Tese - Aurélio Rubio Neto - 2013.pdf: 1496555 bytes, checksum: 804d41c40ee21eadbcf0427c50c1c358 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-12-04T14:20:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Aurélio Rubio Neto - 2013.pdf: 1496555 bytes, checksum: 804d41c40ee21eadbcf0427c50c1c358 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-04T14:20:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Aurélio Rubio Neto - 2013.pdf: 1496555 bytes, checksum: 804d41c40ee21eadbcf0427c50c1c358 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-06-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this study was to evaluate the physiological quality of embryos of babassu (Orbignya phalerata Mart.) and macaw palm [Acrocomia aculeata (Jacq.) Lood. Ex Mart.] according to the drying speed in order to optimize the already existing drying process as well as to propose a more efficient method for the in vitro establishment of macaw palm and babassu. It was observed that for both species under study, the temperature of 37±2°C promoted loss of water less than 57±2°C. However, it was more efficient because it did not inhibit the embryo during this process, ensuring high germination rates, even in seeds with 9% of water content for babassu and 19% for macaw palm. The adoption of the tetrazolium test, initially proposed for macaw palm, which uses salt at 0.5% and imbibition for 4 hours, allowed to distinguish different classes of vigor also in the babassu. Drying at 37°C favored the extraction of intact seeds and consequently the removal of embryo for in vitro culture of macaw palm. There was no difference in the in vitro germination of embryos extracted from fruit with different colors of the epicarp, which was approached as different maturity classes of macaw palm. The in vitro germination of embryos was enhanced with the addition of 30-40 g L-1sucrose in the culture medium. Thus, it is found that drying the fruit of babassu and macaw palm at 37°C ensures effectiveness in the process, since it allows better extraction of seeds or embryos which enable to achieve high in vitro germination rate within 60 days, making the time for production of seedlings much shorter. / Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade fisiológica de embriões de macaúba [Acrocomia aculeata (Jacq.) Lood. Ex Mart.] e babaçu (Orbignya phalerata Mart.) em função da velocidade de secagem, a fim de otimizar o processo de secagem já existente, bem como, propor uma metodologia mais eficiente para o estabelecimento in vitro de macaúba e babaçu. Verificou-se que para as duas espécies em estudo, a temperatura de 37±2°C promoveu perda de água inferior a de 57±2°C. Entretanto, foi mais eficiente pelo fato de não inviabilizar os embriões durante esse processo, garantindo elevadas taxas de germinação, mesmo em sementes com teor de água de 9% para o babaçu e de 19% para a macaúba. A adoção do teste de tetrazólio proposto inicialmente para macaúba, que utiliza o sal a 0,5% e embebição por 4 horas, permitiu a distinção de diferentes classes de vigor também no babaçu. A secagem a 37°C favoreceu a extração de sementes intactas e, consequentemente, remoção do embrião, para cultura in vitro de macaúba. Não se verificou diferença na germinação in vitro de embriões extraídos de frutos com diferentes cores do epicarpo, que foi abordado como diferentes classes de maturação de macaúba. A germinação in vitro dos embriões foi favorecida com o acréscimo de sacarose no meio de cultivo de 30 a 40 g L-1. Dessa forma, verifica-se que a secagem dos frutos de macaúba e babaçu a 37°C garante efetividade no processo, visto que, permite melhor extração das sementes e embriões, com isso, são alcançadas elevadas taxas de germinação in vitro em até 60 dias, encurtando muito o tempo de produção da muda.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:56:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO TATIANA.pdf: 475643 bytes, checksum: accc20b0283b458769c460005b76fed2 (MD5) Previous issue date: 2008-11-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The jambú is a medicinal plant, cultivated mainly in the North of the Country, more necessarily in Pará. The extract of its leves possess anesthetical properties being used in the treatment of males of the mouth and the throat, as well as for tooth ache. Also it possess antifungal, antibacterial, antiinflammatory, analgesic and larvicidal activity. Such plant still is very used as condiment in the cookery of the Amazon Region, mainly in the preparation of the celebrity tacacá . The present work had as objective to establish different methodologies for the culture in vitro of nodal segments of jambú. Different concentrations of bioregulators had been tested, amongst them AIA (0; 0,5; 1,0; 3,0 mg.L- 1 ) and BAP (0; 0,5; 1,5; 2,5; 5,0 mg.L- 1 ), different concentrations of sucrose (0; 7,5; 15; 30; 45 g.L- 1 ) and inorganic nitrogen (0; 5; 10; 20 and 40 ml .L- 1 ) and finally was made the acclimatization of the micropropagated plants, testing different substrates (plantmax®, vermiculit and sawdust). The experimental delineation was entirely randomized, with 20 repetitions of each treatment. The plants had been evaluated, in the two first experiments, to the 45 days and, in the last one, to the 60 days. One evidenced that the addition of bioregulators influenced the development and multiplication of the shoots, being the best ones resulted gotten between 0,5 mg.L- 1 of AIA combined with 1,5 mg.L- 1 of BAP. Modi fications in such a way in the concentrations of sucrose, as in the ones of inorganic nitrogen had influenced the growth of the cultivated jambú in vitro. The concentrations of sucrose of 7,5 and 30 g.L- 1 , together with the dosages of the inorganic nitrogen of 10 and 20 ml.L- 1 , had provided the best ones resulted for all the evaluated characteristics. The substrate plantmax®, as well as the vermiculit and the sawdust, had not differed between itself, being appropriate for the acclimatization of jambú seedlings. / O jambú é uma planta medicinal, cultivada principalmente no Norte do País, mais precisamente no Pará. O extrato de suas folhas possui propriedades anestésicas sendo utilizada no tratamento de males da boca e da garganta, bem como para dor de dente. Também possui atividade antifúngica, antibacteriana, antiinflamatória, analgésica e larvicida. Tal planta ainda é muito utilizada como condimento na culinária da Região Amazônica, principalmente no preparo do famoso tacacá . O presente trabalho teve como objetivo estabelecer diferentes metodologias para o cultivo in vitro de segmentos nodais de jambú. Foram testadas diferentes concentrações de bioreguladores, dentre eles o AIA (0; 0,5; 1,0; 3,0 mg.L - 1 ) e BAP (0; 0,5; 1,5; 2,5; 5,0 mg.L-1 ), diferentes concentrações de sacarose (0; 7,5; 15; 30; 45 g.L- 1 ) e dosagens de nitrogênio inorgânico (0; 5; 10; 20 e 40 ml.L- 1 ) e por último foi feita a aclimatização das plantas micropropagadas, testando diferentes substratos (plantmax®, vermiculita e serragem). O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com 20 repetições de cada tratamento. As plantas foram avaliadas, nos dois primeiros experimentos, aos 45 dias e, no último, aos 60 dias. Constatou-se que a adição de bioreguladores influenciou o desenvolvimento e multiplicação dos brotos, sendo os melhores resultados obtidos entre 0,5 mg.L- 1 de AIA combinado com 1,5 mg.L- 1 de BAP. Modificações tanto nas concentrações de sacarose, como nas de nitrogênio inorgânico influenciaram o crescimento do jambú cultivado in vitro. As concentrações de sacarose de 7,5 e 30 g.L- 1 , juntamente com as dosagens de nitrogênio inorgânico de 10 a 20 ml.L- 1 , proporcionaram os melhores resultados para todas as características avaliadas. O substrato plantmax®, assim como a vermiculita e a serragem, não diferiram entre si, sendo apropriados para a aclimatização de plântulas de jambú.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O camu-camuzeiro (Myrciaria dubia (H. B. K.) McVaugh) é uma espécie frutífera pertencente à família Myrtaceae, de ocorrência espontânea nas margens de rios e lagos da Amazônia. Apresenta potencial econômico, uma vez que o fruto é considerado a maior fonte natural de vitamina C, chegando a atingir 6112 mg de ácido ascórbico por 100 g de polpa, despertando interesse comercial por parte dos produtores e consumidores. Apesar da importância econômica, pouco se sabe sobre os aspectos da multiplicação in vitro desta espécie, o que poderia elevar significativamente a sua produtividade. Neste sentido, objetivou-se com o presente trabalho testar diferentes concentrações de produtos pra desinfestação e estabelecimento de uma cultura asséptica, utilizando explantes de segmentos caulinares de camu-camu provenientes de plantas mães, mantidas em ambiente ex vitro. O trabalho foi dividido em quatro experimentos: 1) Avaliação do efeito do hipoclorito de sódio na assepsia dos explantes de segmentos caulinares de camu-camu in vitro; 2) Avaliação de diferentes concentrações de cloreto de mercúrio na desinfestação in vitro de segmentos caulinares de camu-camu; 3) Determinação da melhor concentração e tempo de imersão de dióxido de cloro na desinfestação in vitro de segmentos caulinares de camu-camu; 4) Uso de antibióticos para o controle da contaminação bacteriana em culturas in vitro de segmentos caulinares de camu-camu. Após 30 dias, avaliou-se o percentual de contaminação e a porcentagem de explantes estabelecidos. A utilização de hipoclorito de sódio a 1,5 % de cloro ativo, por 12 minutos, proporcionou maiores porcentagens de descontaminação (98%), o que resultou na obtenção de bons índices de estabelecimento (87,9%). O cloreto de mercúrio mostrou-se tóxicos aos explantes, mesmo nas menores concentrações. Com a utilização do dióxido de cloro na concentração de 50%, em exposição no tempo de 30 minutos, obteve-se 60% dos explantes desinfestados e 60% estabelecidos. Quanto aos antibióticos, menores índices de contaminação e maiores de estabelecimento (0% e 50% respectivamente) foram obtidos quando utilizou ampicilina na concentração de 100 mg.L-1. Portanto, para desinfestação in vitro de camu-camuzeiro, via segmentos caulinares, deve-se utilizar hipoclorito de sódio a 1,5 % por 12 minutos, com adição no meio de cultura de 100 mg.L-1 de antibiótico ampicilina. / The camu-camu tree (Myrciaria dubia (H.B.K.) McVaugh) is a fruit-bearing species belonging to the family Myrtaceae of spontaneous occurrence on the banks of rivers and lakes of Amazonia. It presents economic potential, since its fruits are thought the greatest natural source of vitamin C, bordering 6,112g of ascorbic acid per 100 g of pulp, arising commercial interest on the part of the farmers and consumers. In spite of the economic importance, little is known about the aspects of the in vitro multiplication of this species, which could raise significantly its yield. In this sense, it was aimed through this work to test different concentrations of products for disinfestation and establishment of an aseptic culture by utilizing explants of stem segments of camu-camu coming from mother plants kept in ex vitro environment. The work was divided into four experiments: 1) evaluation of the effect of sodium hypochlorite upon the asepsis of the explants of stem segments of camu-camu in vitro; 2) to evaluate different concentrations of mercury chlorite in the in vitro disinfestation of camu-camu stem segments; 3) to determine the best concentration and immersion time of chlorine dioxide in the in vitro disinfestations of camum-camu stem segments; 4) Use of antibiotics for the control of bacterial contamination in in vitro cultures of camu-camu stem segments. After 30 days‟ time, the percent of contamination and the percentage of established explants were evaluated. The use of sodium hypochlorite at 1.5%of active chlorine for 12 minutes provided highest percentages of decontamination (98%), which resulted into the obtaining of good establishment indices (87.9%). Mercury chlorite proved toxic to the explants even at the lowest concentrations. Through the use of chlorine dioxide at the concentration of 50% under exposition in the 30 minutes‟ time, 60% of the disinfected explants and 50% of the established ones were obtained. As to the antibiotics, decreased contamination indices and increased establishment indices (0% and 50%, respectively) were reached when ampicillin at the concentration of 100 mg/ L was utilized. Therefore, for in vitro disinfection of camu-camu tree via stem segments, one should utilize 1.5% sodium hypochlorite for 12 minutes, with addition in the culture medium of 100 mg/ L of antibiotic ampicillin.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A micropropagação de orquídeas é uma técnica utilizada com vários objetivos, podendo-se destacar a multiplicação rápida de plantas, propagação de novos híbridos, produção em larga escala e obtenção de matrizes livres de patógenos. A utilização de extratos naturais com ação antimicrobiana na micropropagação mostra-se como uma forma alternativa, ecológica e econômica de obtenção de plantas isentas de micro-organismos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a utilização de extratos de Allium sativum (alho), de Syzygium aromaticum (cravo) e de própolis para evitar a contaminação com micro-organismos durante o processo de subcultivo in vitro de Epidendrum ibaguense Kunth e as possíveis interferências desses extratos no desenvolvimento vegetativo das plântulas. Foram isolados e identificados os micro-organismos Aspergillus sp., Candida sp., bactéria Gram-negativa, bactéria Gram-positiva e Penicillium sp. presentes em frascos com meio de cultura contaminados, oriundos do cultivo in vitro e do ambiente. Avaliou-se a ação antimicrobiana dos extratos sobre os micro-organismos isolados e observou-se que, o extrato de cravo inibiu o crescimento dos mesmos. Foram utilizados sete tratamentos compostos pelo meio Murashige; Skoog (1962) com metade da concentração de macronutrientes, acrescido de carvão vegetal e dos extratos de alho a 1,0 mgL-1 (T1), alho a 0,5 mgL-1 (T2), cravo a 1,0 mgL-1 (T3), cravo a 0,5 mgL-1 (T4), própolis a 1,0 mgL-1 (T5), própolis a 0,5 mgL-1 (T6) e o controle (T7) em um delineamento inteiramente casualizado, com cinco repetições e três plântulas por repetição. Após sessenta dias do subcultivo nos meios com os extratos avaliou-se a altura da parte aérea, o comprimento da maior raiz, o número de raízes, o número folhas, o comprimento da maior folha, o peso da massa fresca, o peso da massa seca e a taxa de multiplicação das plântulas. Houve influência dos extratos de alho, cravo e própolis no desenvolvimento in vitro de plântulas de E. ibaguense. O extrato de cravo apresentou ação antimicrobiana frente aos micro-organismos Aspergillus sp., Candida sp., Escherichia coli, Penicillium sp. e Streptococcus pneumoniae. Já os extratos de alho e própolis não demonstraram atividade antimicrobiana sobre nenhuma das cepas testadas. Através deste trabalho foi possível estabelecer um protocolo para o cultivo in vitro de E. ibaguense visando o controle da contaminação. / The micropropagation of orchids is a technique used for various purposes, may be noted the rapid multiplication of plants, propagation of new hybrid, large-scale production and obtaining free arrays of pathogens. The use of natural extracts with antimicrobial activity in micropropagation shows up as an alternative, environmentally friendly and economical way to obtain plants free of microorganisms. This study aimed to evaluate the use of extracts of Allium sativum (garlic), Syzygium aromaticum (clove) and propolis to prevent contamination with micro-organisms during the process of in vitro subculture of Epidendrum ibaguense Kunth and the possible interference of these extracts on vegetative growth of seedlings. The microorganisms Aspergillus sp. Candida sp. Gram-negative bacteria, Gram-positive and Penicillium sp. present in the contaminated bottles with culture, derived from in vitro culture and the environment, were isolated and identified. We evaluated the antimicrobial activity of the extracts on the isolated microorganisms and it was observed that the extract of clove inhibited their growth. Seven compound treatments were used by Murashige; Skoog (1962) with half the concentration of macronutrients, plus charcoal and garlic extracts to 1.0 mgL-1 (T1), garlic 0.5 mgL-1 (T2), cloves 1.0 mgL- 1 (T3), cloves 0.5 mgL-1 (T4), propolis to 1.0 mgL-1 (T5), propolis 0.5 mgL-1 (T6) and control (T7) on a randomized complete randomized with five replications and three seedlings per replication. Sixty days of subculture in the media with the extracts evaluated the shoot height, the length of roots, number of roots, leaves number, the length of the longest leaf, the weight of the fresh weight, the weight of the mass drought and the multiplication rate of the seedlings. There were significant effects of the extracts of garlic, clove and propolis in the development of in vitro plantlets of E. ibaguense. Clove extract showed antimicrobial activity against microorganisms Aspergillus sp., Candida sp., Escherichia coli, Penicillium sp. and Streptococcus pneumoniae and the extracts of garlic and propolis showed no antimicrobial activity against any of the tested strains. Through this work, it was possible to establish a protocol for the in vitro cultivation of E. ibaguense for the contamination control.

O experimento foi conduzido com o objetivo de avaliar a influência da interação entre o nitrato de amônio e nitrato de potássio sobre as respostas morfogênicas de embriões somáticos de pupunheiras in vitro a fim de otimizar o protocolo de micropropagação da espécie. As concentrações utilizadas foram 0, 825, 1650, 2475 e 3300 mg L-1 de nitrato e amônio e 0, 950 , 1900, 2850 e 3800 mg L-1 de nitrato de potássio, combinadas entre si, perfazendo um total de 25 tratamentos. Os tratamentos foram preparados a partir da solução completa de Murashige e Skoog, devidamente modificado para as proporções desses íons no suprimento de nitrogênio. Utilizaram-se duzentos e cinqüenta embriões somáticos com características morfológicas homogêneas, isentos de raízes e folhas, obtidos a partir de microplantas mantidas em sala de crescimento com temperatura e luminosidade controladas. Foram aferidos dados do comprimento da parte aérea e da raiz, o número de raízes, brotações e folhas, a porcentagem de ramificação da raiz, a porcentagem de raízes finas, medianas e grossas, em quatro períodos de cultura, a cada 60 dias, totalizando 240 dias de cultivo. Ao final desse período, avaliou-se também o teor de proteínas totais solúveis, o teor de clorofila pelo índice SPAD e os teores de macro e micronutrientes nas microplantas. Utilizou-se delineamento estatístico inteiramente casualizado e os dados foram submetidos ao teste de Bartlett a 5% e análise de variância (ANOVA) a 1% e 5% de probabilidade de erro ou foi elaborada uma matriz de correlação de Pearson a 1% e 5% de probabilidade de erro, conforme o caso. Os resultados permitiram inferir que aos 240 dias de cultivo as microplantas passam a investir mais em formação de parte aérea e aumentam a porcentagem de raízes finas, e funcionais. Os tratamentos que melhor favoreceram a formação de proteínas foram aqueles com concentração de 2475 mg L-1 de NH4NO3 ou com 2850 mg L-1 de KNO3. Os maiores índices SPAD ocorreram nos tratamentos com até 1650 mg L-1 de NH4NO3 combinado com até 1900 mg L-1 de KNO3. Diferentes combinações dos sais de NH4NO3 e KNO3 podem favorecer a absorção de cada nutriente. Conclui-se que os resultados obtidos no trabalho podem contribuir com a melhoria do protocolo de micropropagação de B. gasipaes, na medida em que permitem estabelecer o melhor tratamento para maximização de uma resposta específica desejada para cada momento do processo de cultivo dos embriões somáticos de pupunheiras, como enraizamento, crescimento da parte aérea, formação de proteínas e formação de brotações, facilitando dessa forma a otimização da produção de microplantas com características desejáveis e, conseqüentemente, sua aclimatização e desenvolvimento ex vitro. / This study aimed to evaluate the influence of the interaction between ammonium nitrate and potassium nitrate on the morphogenetic responses of peach palm somatic embryos in vitro cultivated, to optimize the micropropagation protocol for this species. The concentrations used were 0, 825, 1650, 2475 and 3300 mg L-1 of ammonium nitrate and 0, 950 , 1900, 2850 and 3800 mg L-1 of potassium nitrate, in all possible associations, totalizing 25 treatments. The treatments were prepared with the complete solution of Murashige and Skoog, with modified proportions of these ions in relation to the nitrogen supply. Two hundred and fifty somatic embryos with homogeneous morphological characteristics, without roots and leaves, obtained from microplants from a controlled temperature and luminosity room, were used in the experiment. Every 60 days, during 240 days, the length of shoot and root, the number of roots, propagules and leaves and the root architecture were measured. At the end of 240 days of cultivation, it was also analyzed the total soluble proteins, the foliar chlorophyll by a chlorophyll meter equipment (SPAD-502) and the macronutrients and micronutrients concentrations in the microplants. The experiment was conducted in a randomized design. The data were subjected to Bartlett´s test at 5% and variance analysis (ANOVA) at 1% and 5% of probability of error, or it was made a correlation matrix at 1% and 5% of probability of error, according to each analysis. The results showed that at 240 days of cultivation the microplants spent more energy building the shoot part and raised the percentage of thin, functional root. The best treatments for proteins formation were those with 2475 mg L-1 of NH4NO3 or with 2850 mg L-1 of KNO3. The highest SPAD index occurred in the treatments with at most 1650 mg L-1 of NH4NO3 associated with at most 1900 mg L-1 of KNO3. Different associations of NH4NO3 e KNO3 may favor the absorption of each nutrient. We conclude that the results obtained may contribute to the optimization of the B. gasipaes micropropagation protocol, as it is possible to establish the best treatment for maximization of a specific answer for each moment of the somatic embryos cultivations process, such as rooting, shoot growth, propagules and protein formation, and thus increase the optimization of microplants production with wanted characteristics and hence its acclimatization and ex vitro development.

As espécies Cattleya labiata Lindley e a Cattleya eldorado Linden, nativas da Mata Atlântica e Amazônia, respectivamente, encontram-se sob forte risco de desaparecimento na natureza, sendo, portanto, necessário o desenvolvimento de métodos eficientes de propagação de suas mudas, dentre os quais se destaca a micropropagação. A eficiência do cultivo in vitro de orquídeas está associada aos meios de cultura utilizados e, principalmente, aos reguladores de crescimento. O trabalho teve como objetivo avaliar a influência de paclobutrazol (PBZ) no desenvolvimento das microplântulas cultivadas in vitro. Plântulas provenientes de germinação in vitro, com 1,0 ± 0,2 cm de comprimento, foram utilizadas no estudo. No primeiro experimento, utilizou-se como controle o meio de cultura MS isento de reguladores de crescimento vegetal. Nos tratamentos, o meio MS foi suplementado com quatro concentrações de PBZ 1,0; 2,0; 4,0 e 6,0 mg.L-1; com ácido naftalenoacético (ANA) 1,0 mg.L-1 associado a 6-benzilaminopurina (BAP) 1,0 mg.L-1 e com a combinação de 4,0 mg.L-1 PBZ, com 1,0 mg.L-1 ANA e 1,0 mg.L-1 BAP. As avaliações morfológicas, número de brotos, comprimento da parte aérea (CPA), comprimento da maior raiz (CMR) e comprimento da lâmina foliar (CLF), foram realizadas no início do experimento e nos subcultivos a cada 40 dias, durante 160 dias. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em arranjo trifatorial com parcelas subdivididas no tempo, com seis repetições por tratamento. Um segundo experimento foi realizado utilizando a técnica de pulse. Como controle foi utilizado meio de cultura MS, e para os tratamentos foi utilizado o mesmo meio acrescido de concentrações crescentes de PBZ com diferentes tempos de exposição, sendo: T0= controle (MS); T1= 1,0 mg.L-1 PBZ por 40 dias; T2= 10,0 mg.L-1 PBZ por 4 dias e T3= 100,0 mg.L-1 PBZ por 4 horas. Foram feitas as avaliações de CPA, CLF, CMR, número de raízes, massa fresca e massa seca da parte aérea, massa fresca e massa seca de raiz, massa fresca e massa seca total, contagem e caracterização estomática e avaliação anatômica do tecido radicular. O experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado totalizando quatorze repetições por tratamento. O tratamento com 1,0 mg.L-1 de PBZ por 40 dias promoveu maior desenvolvimento e vigor do sistema radicular, aumentando a espessura das raízes, podendo contribuir para a fase de aclimatização das microplântulas. Os tratamentos com pulse reduziram significativamente a parte aérea das microplântulas, não sendo recomendado na micropropagação da C. labiata. / The Species Cattleya labiata Lindley and Cattleya eldorado Linden, native to the Atlantic Forest and Amazon, respectively, are under high risk of extinction in nature, therefore, necessary to develop efficient methods of spreading their seedlings, among which highlights micropropagation. The efficiency of in vitro cultivation of orchids is associated with culture media, and especially the growth regulators. The study aimed to evaluate the influence of paclobutrazol (PBZ) in the development of in vitro microplantlets. Seedlings from germination in vitro, with 1.0 ± 0.2 cm in length, were used in the study. In the first experiment, we used to control the MS culture medium free of plant growth regulators. In the treatments, MS medium was supplemented with four concentrations of PBZ 1.0, 2.0, 4.0 and 6.0 mg L-1, with naphthaleneacetic acid (NAA) 1.0 mg L-1 associated with 6-benzylaminopurine (BAP) 1.0 mg L-1 and with the combination of 4.0 mg L-1 PBZ with 1.0 mg.L-1 NAA and 1.0 mg L-1 BAP. The morphological evaluations, number of shoots, shoot length (CPA), longest root length (CMR) and leaf blade length (CLF) were performed at the beginning of the experiment and in subcultures every 40 days during 160 days. The experimental design was completely randomized in three-factor split-plot arrangement in time, with six replicates per treatment. A second experiment was performed using the technique of \"pulse\". It was used as control MS medium, and the treatments we used the same medium plus increasing concentrations of PBZ with different exposure times, as follows: T0 = control (MS), T1 = 1.0 mg L-1 PBZ for 40 days, T2 = 10.0 mg L-1 PBZ for 4 days and T3 = 100.0 mg L-1 PBZ for 4 hours. Assessments were made CPA, CLF, CMR, number of roots, fresh and dry mass of shoots, fresh weight and dry weight of root, fresh weight and total dry matter, stomatal counting and characterization and evaluation of the anatomic root tissue. The experiment was conducted in a completely randomized a total of fourteen replicates per treatment. Treatment with 1.0 mg L-1 of PBZ for 40 days promoted further development and vigor of the root system, increasing the thickness of the roots and may contribute to the acclimatization phase of microplantlets. Treatments with \"pulse\" significantly reduced the shoot microplantlets and Its not recommended to the micropropagation of C. labiata.

Dyckia distachya Hassler, bromélia endêmica da região Sul do Brasil, teve sua população acentuadamente reduzida devido às políticas públicas de aproveitamento hidrelétrico na região. Estudos que promovam maiores conhecimentos em relação à espécie são necessários no intuito de elaborar estratégias de conservação e reintrodução da mesma em seu ambiente natural. Nesse contexto, o presente trabalho objetivou ampliar o conhecimento acerca da espécie D. distachya visando fornecer subsídios por meio dos estudos dos aspectos reprodutivos e da micropropagação, gerando informações que possam contribuir para a conservação da espécie. Nesse sentido, foram realizados diferentes experimentos: caracterização das flores por meio de microscopia de luz e eletrônica; viabilidade polínica por germinação in vitro e avaliação histoquímica; receptividade do estigma; caracterização dos mecanismos reprodutivos; concentração e composição do néctar, dentre outras variáveis. Foram realizados ensaios de germinação de sementes em diferentes ambientes e temperaturas, juntamente com o estudo do desenvolvimento pós-seminal. Em adição a esses estudos, foram realizados ensaios de micropropagação, utilizando diferentes meios de cultura em diferentes estados físicos. Os resultados demonstram que as flores são hipóginas, hermafroditas, tubulares, pediceladas, com três sépalas e três pétalas imbricadas. O androceu é formado por seis estames, com as anteras acima do estigma. O gineceu é constituído de três carpelos unidos e ovário parcialmente sincárpico, súpero e trilocular com estigma conduplicado-espiral. Os óvulos são anátropos e apresentam apêndice chalazal. Os nectários são septais, infraloculares com superfície em labirinto na base do ovário. Os grãos de pólen são de tamanho médio, simetria bilateral, âmbito ovalado, monocolpado, exina semitectada, reticulada e heterobrocada. A maior porcentagem de germinação dos grãos de pólen foi observada em meio de cultura BKM. Foram observados todos os mecanismos reprodutivos, com formação de sementes viáveis, sendo superior na polinização cruzada e autopolinização artificial. O estigma mostrou-se receptivo durante todo o período de abertura floral. As sementes germinam em uma ampla faixa de temperatura, sendo que, as sementes alocadas em meio de cultura apresentaram as maiores porcentagens de germinação. A extrusão da raiz primária se deu no segundo dia após introdução das sementes in vitro. No 4° dia foi possível observar o surgimento do 1° eófilo. Aos 12 dias a planta jovem apresenta raiz primária curta e pilosa. Meios de cultura no estado líquido, sob agitação, ou estático, em combinação ou não com reguladores de crescimento vegetais são eficientes na multiplicação in vitro de D. distachya, apresentando elevadas taxas de produção de mudas em curto espaço de tempo. O meio de cultura semissólido apresentou menores taxas de multiplicação e massa fresca e seca em relação ao meios líquidos. A aclimatização foi eficiente em mudas provenientes de todas as condições in vitro utilizadas / Dyckia distachya Hassler, bromeliad endemic to Southern Brazil, had its population markedly reduced due to the regional public policy of hydroelectric power. Studies that promote greater knowledge about the species are needed for to development of strategies for conservation and species reintroduction in their natural environment. In this context, this work aimed to enhance the knowledge on reproductive aspects and micropropagation D. distachya, generating information that can contribute to the conservation of the species. Thus, different experiments were performed: characterization of flowers through light and electron microscopy; pollen viability by in vitro germination and histochemical analysis; stigma receptivity; observation on the reproductive mechanisms; nectar concentration and composition, among other variables. Seed germination was evaluated in different conditions and temperatures and post-seminal development was characterized. In addition, micropropagation experiments were performed using liquid and semi-solid supplemented with different growth regulator compositions. The results showed that the flowers are hypogynous, hermaphrodite, tubular, pedicellate, with three imbricate sepals and three petals. The androecium consists of six stamens with anthers that develop above the stigma. The pistil consists of three carpels, the ovary is superior, partially syncarpous and trilocular, with a conduplicate-spiral stigma. The ovules are anatropous and have a chalazal appendage. Septal infralocular nectaries are observed, with a labyrinth surface, at the base of the ovary. The pollen grains are of medium size, with a bilateral symmetry, ovate, monocolpate, semitectate, reticulate and with a heterobrocate exine. The highest percentage of pollen grain germination was observed in BKM culture medium. All reproductive mechanisms were observed and the higher numbers of viable seeds were observed after cross-pollination and manual self-pollination. The stigma was receptive during the entire period the flower was opened, with the highest receptivity at anthesis Seeds germinated in different temperatures and in vitro germination, showed the highest germination percentages. Post-seminal development initiated with the extrusion of the primary root at the second day after the introduction of the seeds in vitro. The emergency of the first eophyll was observed on the fourth day, and on the 12nd day the young plant shows a short primary root, with rood hairs. Liquid medium under agitation, or static and semi-solid medium supplemented with different combinations of plant growth regulators were efficient for the micropropagation of D. distachya, with high rates of production of seedlings in a short period of time. The use of the semi-solid medium showed lower multiplication rates when compared to liquid media. Acclimatization was very efficient in all treatments, independently from the in vitro culture conditions

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2016-09-27T14:25:05Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Roseane Maidana Moreira.pdf: 1526932 bytes, checksum: 24ec9be5cb36029c41e9e55dad9e3488 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-09-28T17:10:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Roseane Maidana Moreira.pdf: 1526932 bytes, checksum: 24ec9be5cb36029c41e9e55dad9e3488 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-28T17:10:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Roseane Maidana Moreira.pdf: 1526932 bytes, checksum: 24ec9be5cb36029c41e9e55dad9e3488 (MD5) Previous issue date: 2014-03-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A oliveira (Olea europaea L.) pertence a família Oleaceae, a qual tem suas espécies distribuídas em regiões tropicais e temperadas do mundo. O cultivo é crescente e demanda tecnologias para a instalação de pomares. Dentre as técnicas de propagação utilizadas para a oliveira, a micropropagação se destaca, pois permite conservar o germoplasma e produzir mudas de alta qualidade e sanidade. No entanto verifica-se a carência de protocolos eficientes para o estabelecimento in vitro de várias cultivares de oliveira. Assim sendo, este trabalho teve como objetivo desenvolver protocolos eficientes para a redução da oxidação e estabelecimento in vitro de oliveira. O experimento foi realizado no laboratório de Propagação de Plantas Frutíferas, Departamento de Fitotecnia da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, da Universidade Federal de Pelotas, (UFPel/RS), no período de março de 2012 a outubro de 2013. O artigo 1 consistiu no estabelecimento in vitro de seis cultivares de oliveira (Ascolano, Leccino, Maria da Fé, Coratina, Arbequina e Frantoio) em diferentes meios de cultura (MO e WPM) e épocas de coleta dos explantes (outono, inverno, primavera e verão). No artigo 2, o objetivo foi avaliar o efeito da presença e ausência de luz fornecida à planta matriz, bem como concentrações de zeatina (0, 2, 4 e 8 mg.L-1) no estabelecimento in vitro. Em ambos os artigos foram avaliadas as variáveis referentes à porcentagem de oxidação; contaminação fúngica e bacteriana; sobrevivência e estabelecimento dos explantes in vitro. Os resultados obtidos demonstraram que no artigo (1) houve maior oxidação fenólica em explantes de oliveira coletados no inverno, a primavera é indicada para a coleta de explantes da cultivar Maria da Fé, enquanto as cultivares Ascolano e Arbequina apresentam maior taxa de estabelecimento in vitro no outono. O meio de cultura WPM promoveu maior porcentagem de estabelecimento de explantes de oliveira. No artigo (2), plantas matrizes em condições de ausência de luz são as mais indicadas no estabelecimento in vitro das cultivares de oliveira estudadas. A concentração de 2 mg.L-1 de Zeatina favorece a sobrevivência de explantes de oliveira 'Arbequina'. As concentrações (0, 4 e 8 mg.L-1 ) de Zeatina não apresentam diferença entre as cultivares Leccino e Arbequina para a variável contaminação fúngica. / The olive tree (Olea europaea L.) belongs to Oleaceae family, which has its species distributed in tropical and temperate regions of the world. The cultivation is increasing and demand technologies for facilities orchards. Among the techniques used for olive propagation, micropropagation stands out, because it preserves germplasm and produce high qualitu seedling and sanity. However there is a lack of efficient protocols for in vitro in several varieties of olive property.This study aimed to develop efficient protocols to reduce oxidation and in vitro establishment of olive. The experiment was conducted in the Fruit Tree Propagation Laboratory, Crop Science Department, Faculty of Agronomy Eliseu Maciel, Universidade Federal de Pelotas (UFPel/RS) from March 2012 to October 2013. The Article 1 consisted of establishing in vitro six olive cultivars (Ascolano, Leccino, Maria da Fé, Coratina, Arbequina e Frantoio) in different culture media (MO e WPM) and explants sampling times (fall, winter, spring and summer). In Article 2, the objective was to evaluate the presence and absence of light provided to the mother plant and Zeatin concentrations (0, 2, 4 and 8 mg.L-1) in vitro establishment. In both articles the variables were evaluated variables concerning the percentage of rust, fungal and bacterial contamination, survival and establishment of explants in vitro were evaluated. The results showed that in the Article 1 there was a higher phenolic oxidation in olive explants collected in winter, spring is indicated for collecting explants of cultivar Maria da Fé, while Ascolano and Arbequina cultivars have a higher rate of in vitro establishment in autumn. The WPM promoted a higher rate of establishment of olive explants. In Article (2), mother plants in conditions of absence of light are the most suitable in vitro establishment of olive cultivars studied. The concentration of 2 mg.L-1 Zeatin promotes survival explants of olive 'Arbequina'. Concentrations (0, 4 and 8 mg.L-1) showed no Zeatin difference between Leccino and Arbequina cultivars for variable fungal contamination.