Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-06-23T12:29:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_fabiana_fonseca_dos_santos.pdf: 3022588 bytes, checksum: 060ec7a7f1d4edb18fdd846563216008 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-06-23T22:08:43Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_fabiana_fonseca_dos_santos.pdf: 3022588 bytes, checksum: 060ec7a7f1d4edb18fdd846563216008 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-23T22:08:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_fabiana_fonseca_dos_santos.pdf: 3022588 bytes, checksum: 060ec7a7f1d4edb18fdd846563216008 (MD5) Previous issue date: 2016-05-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / As etapas da ontogenia de oliveiras (Olea europaea L.), desde a germinação das sementes, o período de crescimento juvenil e de transição da fase reprodutiva até mesmo o desenvolvimento da inflorescência frutífera, são longas e problemáticas. Desta forma, objetivou-se acelerar o processo germinativo (superando a latência) e de formação de mudas da cultivar Arbequina, além de caracterizar morfológica e molecularmente, acessos de oliveiras do banco ativo de germoplasma da Embrapa Clima Temperado (Pelotas/RS) para gerar informações que possam contribuir em futuros programas de melhoramento genético de oliveira do Estado do Rio Grande do Sul. Para os experimentos de germinação utilizou-se sementes da cv. Arbequina com e sem o endocarpo, as quais foram semeadas em casa de vegetação e sem endocarpo e embrião para cultivo in vitro. As plantas obtidas da germinação in vitro (sementes sem endocarpo), foram transferidas para condição ex vitro e submetidas a diferentes tratamentos com nutrientes para acelerar o seu crescimento. Já as análises moleculares foram baseadas na avaliação de 20 loci SSR, em 72 acessos. Destes 20 loci SSR sete foram utilizados, juntamente com seis caracteres fenotípicos, sendo dois qualitativos e quatro quantitativos, relacionados à folha e à flor, com objetivo de caracterizar a variabilidade genética de 12 importantes cultivares, para verificar seu desenvolvimento. Sumarizou-se três matrizes, de dados morfológicos quantitativos, dados morfológicos qualitativos e uma de dados moleculares, e a partir dessa matriz originou-se o dendrograma. Ainda, foram realizadas análises de parâmetros de variabilidade genética dos dados moleculares. A ‗Arbequina‘ sem endocarpo semeada in vivo obteve baixo potencial germinativo,(8,5% de germinação) já as que foram semeadas em condição in vitro de sementes sem endocarpo e embriões isolados com (42,11% e 55,33% de germinação, respectivamente) e reduziram o tempo da germinação em até cinco vezes (de 90 para 15 dias com embriões). As sementes (sem endocarpo) semeadas in vitro (63% de germinação) para aclimatação em casa de vegetação não requerem nutrientes nitrogênio, fósforo e potássio. O dendograma obtido a partir da matriz de similaridade genética UPGMA, calculada pelo índice de Dice, utilizando os dados dos loci SSR, não foi capaz de distinguir os acessos agrupados por países. A abordagem Bayesiana revelou alta relação genética no germoplasma de olivas da Embrapa Clima Temperado, possivelmente devido a maioria pertencer ao mesmo centro de origem, indicando a coancestralidade das cultivares estudadas. Foi possível a identificação de dois pools, com alta relação com os diferentes grupos que compõem a coleção. O conjunto de marcadores SSR escolhidos apresentaram-se polimórficos, permitindo a caracterização de todos os acessos do Banco ativo de Germoplasma da Embrapa Clima Temperado (Pelotas/RS). O resultado da sumarização das matrizes originou um dendrograma que separou os acessos por origem, sendo os acessos Galega e Penafiel originários de Portugal, Frank e VB2, do Brasil, Canino e Coratina, da Itália, e os restantes B21, Gordales, Gran Vitale e Nelson, todos do Brasil confirmando a hipótese de que estes acessos de germoplasma de oliveiras da Embrapa tem uma base genética comum. Contudo, estes resultados indicam um nível médio de variabilidade morfológica e molecular, análises estas complementares, forneceram uma mais completa compreensão da diversidade disponível nestes acessos da coleção de oliveiras. Os resultados desse estudo servem para caracterizar os acessos de oliveiras da coleção da Embrapa Clima temperado (Pelotas/RS) e serão utilizados para os programas de melhoramento genético de oliveira no Brasil, o qual encontra-se em estágio inicial. / The stages of ontogeny olive (Olea europaea L.), from germinating seeds, juvenile period of growth and reproductive phase transition even the development of fruit inflorescence, are long and problematic. Thus, aimed at speeding up the germination process (overcoming latency) and at seedling cultivar Arbequina, besides characterize morphologically and molecularly the access active bank of olive germplasm from Embrapa Temperate Climate (Pelotas / RS) to generate information that may help in future olive breeding programs in Rio Grande do Sul State. For the germination experiments seeds of cv. Arbequina were used with and without the endocarp, which have been sowed in the greenhouse without cored and embryo to in vitro cultivation. The plants obtained through in vitro germination (seed without the endocarp), were transferred to ex vitro conditions and subjected to different treatments with nutrients in order to accelerate their growth. While the molecular analyzes were based on the evaluation of 20 loci SSR in 72 acesses. From those 20 loci SSR seven loci have been used, along with six phenotypic characters, two qualitative and four quantitative, related to leaf and flower, in order to characterize the genetic variability 12 of important cultivars to check their development. Three arrays have been summarized from quantitative and qualitative morphological, also one from molecular data. Due to this matrix dendrogram has been originated. Furthermore, genetic variability analysis were performed of parameters of molecular data. The 'Arbequina' cored seeded in vivo obtained low germination potential (8.5% germination) however those seeds sowed in vitro condition without cored and isolated embryos (42.11% and 55.33% germination, respectively) moreover reduced the time of germination up to five times (from 90 to 15 days with embryos). The seeds (without the endocarp) in vitro (63% germination) for acclimatization in greenhouse do not require nutrients nitrogen, phosphorus and potassium. The dendrogram obtained from the genetic similarity matrix UPGMA Dice index calculated by using the data of SSR loci has not been able to distinguish the access grouped by country. The Bayesian approach has shown high genetic relation to olive germoplasm of Embrapa Temperate Climate, possibly due to the majority belong to the same center of origin, indicating the co-ancestry of cultivars. It has been possible to identify two pools, with high correlation with to the different groups that make up the collection. The set of SSR markers chosen have shown polymorphic, allowing the characterization of all accesses of Active Germplasm Bank of Embrapa Temperate Climate (Pelotas / RS). The result of summarization of the matrices generated a dendrogram that separated the access by origin, being the Galician and Penafiel access originating from Portugal, Frank and VB2 in Brazil, Canine and Coratina in Italy, and the remaining B21, Gordales, Gran Vitale and Nelson, all in Brazil confirming the hypothesis that these germplasm accesses of Embrapa's olive trees have a common genetic basis. Nevertheless, these results indicate an average level of morphological and molecular variability. Complementary analysis provided a more complete understanding of the diversity available in these accesses of the collection of olives. The results of this study serve to characterize the access of olive collection of Embrapa Temperate (Pelotas / RS) and will be used for breeding programs of olive in Brazil, which is at an early stage.

Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-16T15:50:30Z No. of bitstreams: 1 Gemima Manco de Melo.pdf: 1128164 bytes, checksum: 2e667a493ac00163fb5ae1d774736709 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-16T15:50:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gemima Manco de Melo.pdf: 1128164 bytes, checksum: 2e667a493ac00163fb5ae1d774736709 (MD5) Previous issue date: 2011-02-16 / The sugarcane culture has great importance in the socio-economic development of Brazil, being one of the earliest economic activities in the country's history. The proliferation of commercial varieties of sugarcane has been successfully accomplished by applying techniques of tissue culture, as an example the system of temporary immersion bioreactor (TIB). In this system the plant material is immersed in liquid medium for controlled intervals of time, which favors the absorption of nutrients from the culture medium by stimulating the production of seedlings. During the in vitro culture the plant material is submitted to unusual environmental conditions that can cause physiological morphological, biochemical and molecular imbalances. Such imbalances can lead to large losses in the production of biofactories, as well as in research institutions. Therefore, the evaluation both biochemical and molecular in vitro plants has great importance for the production of seedlings genetically faithful to matrix plant. In order to assess the causes of physiological disorder observed in sugarcane RB872552 variety which caused the uncontrolled growth of small buds, forming a cluster of shoots known a "green mass" were performed biochemical and molecular analysis. The "masses" green "and the plants were collected by the TIB and subcultured in flasks containing MS liquid medium supplemented or not with 1.5 mg L-1 6-benzylaminopurine (BAP), following the conventional micropropagation of sugarcane. The activity of catalase and peroxidase was higher in samples of "green mass” cultured on TIB. The ascorbate peroxidase activity was higher in the "green masses cultured in the presence of BAP in the two micropropagation systems. The ascorbate peroxidase activity was higher in the "green masses” grow in the presence of BAP in the two micropropagation systems. The DNA fragments obtained after amplification of the whole plant material analyzed showed monomorphism, suggesting genetic fidelity of cloned material. The profile of enzymatic antioxidative system associated with the molecular analysis showed that the physiological disorder that resulted in the emergence of "green masses" was not caused by genetic variation but a result of stress conditions to which the material was submitted during cultivation in vitro. / A cultura da cana-de-açúcar destaca-se por apresentar grande importância no desenvolvimento sócio-econômico do Brasil, sendo uma das primeiras atividades econômicas da história do país. A multiplicação comercial de variedades de cana-de-açúcar tem sido realizada com sucesso mediante a aplicação de técnicas de cultura de tecidos, como exemplo o sistema de biorreator de imersão temporária (BIT). Nesse sistema o material vegetal fica imerso em meio líquido por intervalos controlados de tempo, o qual favorece a absorção dos nutrientes do meio de cultura estimulando a produção das mudas. Da introdução in vitro até a aclimatização, o material vegetal é submetido a condições ambientais incomuns que podem provocar desajustes fisiológicos, morfológicos, bioquímicos ou moleculares. Tais desajustes podem gerar grandes perdas na produção de biofábricas, como também em instituições de pesquisa. Sendo assim, a avaliação tanto a nível bioquímico quanto molecular de plantas cultivadas in vitro apresenta grande importância para produção de mudas geneticamente fiéis a planta matriz. Com o objetivo de avaliar a causa da desordem fisiológica observada na variedade RB872552 de cana-de-açúcar que provocou o crescimento desordenado de pequenas brotações, formando um aglomerado de brotos conhecido como “massa verde”, foram realizadas análises bioquímica e molecular. As “massas verdes” e as plantas coletadas dos BITs foram subcultivadas em frascos contendo meio MS líquido suplementado ou não com 1,5 mg L-1 de 6-benzilaminopurina (BAP), seguindo o sistema convencional de micropropagação de cana-de-açúcar. A atividade da catalase e da peroxidase foi mais elevada nas amostras de “massa verde” cultivadas em BIT. A atividade da peroxidase do ascorbato foi maior nas “massas verdes” cultivadas na presença de BAP nos dois sistemas de micropropagação. Os fragmentos de DNA obtidos ápos a amplificação de todo o material vegetal analisado apresentou monomorfismo, sugerindo fidelidade genética do material clonado. O perfil enzimático do sistema antioxidativo associado à análise molecular evidenciam que a desordem fisiológica que resultou no surgimento das “massas verdes”, não foi provocada por variação genética e sim resultado das condições de estresse ao qual o material foi submetido durante o cultivo in vitro.

Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-20T18:31:01Z No. of bitstreams: 1 Marina Medeiros de Araujo Silva.pdf: 1111837 bytes, checksum: fa89f364f5e0242c84916270c538f88a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-20T18:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marina Medeiros de Araujo Silva.pdf: 1111837 bytes, checksum: fa89f364f5e0242c84916270c538f88a (MD5) Previous issue date: 2010-02-09 / The somatic embryogenesis is a technique of in vitro culture applied in clonal propagation of plants and regeneration of genetically transformed cells, in addition to supporting basic studies related to morphological, molecular and biochemical events that happen during the embryogenic process. The initial stages of this morphogenic pathway are characterized by the induction of genes related to stress, which leads to the hypothesis that somatic embryogenesis is an extreme response to stress in plant cells cultivated in vitro. In this work, were induced embryogenic pathways direct and indirect in the RB 872552 variety of sugarcane and analyzed the activity of enzymes from antioxidant system in order to assess the correlation between somatic embryogenesis and regulation of oxidative stress. For the direct pathway (ESD), were applied four treatments (TS, TD, TG e TA) based on protocols previously described for sugarcane. These protocols differed as to the composition of the medium and incubation condition (dark or light period of 16 hours) in a completely randomized design with 10 replications per treatment. For the indirect pathway (ESI), were used by eight different treatments combinations of four concentrations of 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid) and two Fe-EDTA, in a factorial 4x2 and 20 replicates per treatment. Were calculated the indices of embryo formation (IFE) and callus (IFC) and evaluated the activity of catalase, peroxidase and polyphenoloxidase. Somatic embryos were visualized only in the treatment of ESD plus 2,4-D and BAP (6-benzylaminopurine), and treatment of ESI with 8 mg.L-1 2,4-D. The conversion of somatic embryos into plants was performed in culture medium without added phytoregulators. The activity of antioxidant enzymes was obtained by reading of a spectrophotometer, from the extract obtained from embryogenic and non-embryogenic tissues treatment of ESD. The polyphenoloxidase and catalase activity increased in non-embryogenic tissue, whereas peroxidase was less active in these tissues when compared to embryogenic. It was found that the induction of somatic embryogenesis in the variety studied is related to oxidative stress and that these antioxidant enzymes may become important as biochemical markers of this process. / A embriogênese somática é uma técnica de cultivo in vitro aplicada na propagação clonal de plantas e na regeneração de células transformadas geneticamente, além de auxiliar estudos básicos relacionados aos eventos morfológicos, moleculares e bioquímicos que ocorrem durante o processo embriogênico. As fases iniciais dessa via morfogênica são caracterizadas pela indução de genes relacionados ao estresse, o que leva à hipótese de que a embriogênese somática é uma resposta extrema ao estresse de células de plantas cultivadas in vitro. Neste trabalho, foram induzidas as vias embriogênicas direta e indireta na variedade RB 872552 de cana-de-açúcar e analisada a atividade de enzimas do sistema antioxidante, a fim de avaliar a correlação entre a embriogênese somática e a regulação do estresse oxidativo. Para a via direta (ESD), foram aplicados quatro tratamentos (TS, TD, TG e TA) baseados em protocolos já descritos para cana-de-açúcar. Esses protocolos diferiam quanto à composição do meio e condição de incubação (escuro ou fotoperíodo de 16 horas), em delineamento inteiramente casualizado, com 10 repetições por tratamento. Para a via indireta (ESI), foram utilizados oito tratamentos diferenciados pelas combinações de quatro concentrações de 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) e duas de Fe-EDTA, em esquema fatorial 4x2 e 20 repetições por tratamento. Foram calculados os índices de formação de embriões (IFE) e de calo (IFC) e avaliada a atividade da catalase, peroxidase e polifenoloxidase. Embriões somáticos foram visualizados apenas nos tratamentos de ESD acrescidos de 2,4-D e BAP (6-benzilaminopurina), e no tratamento de ESI com 8 mg.L-1 de 2,4-D. A conversão de embriões somáticos em plantas foi realizada em meio de cultura sem adição de fitoreguladores. A atividade das enzimas antioxidantes foi obtida através de leitura feita em espectrofotômetro, a partir do extrato obtido de tecidos embriogênicos e não embriogênicos dos tratamentos de ESD. A atividade da polifenoloxidase e da catalase aumentou em tecidos não embriogênicos, enquanto que a peroxidase foi menos ativa nesses tecidos quando comparada aos embriogênicos. Evidenciou-se que a indução da embriogênese somática na variedade estudada está relacionada ao estresse oxidativo e que estas enzimas antioxidantes podem exercer papel relevante como marcadores bioquímicos deste processo.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-01-26T14:15:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_ProducaoAvaliacaoAtividade.pdf: 1531568 bytes, checksum: fa545ee0497fdfbb6c535111d161a8bc (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-01-27T13:40:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_ProducaoAvaliacaoAtividade.pdf: 1531568 bytes, checksum: fa545ee0497fdfbb6c535111d161a8bc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-27T13:40:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_ProducaoAvaliacaoAtividade.pdf: 1531568 bytes, checksum: fa545ee0497fdfbb6c535111d161a8bc (MD5) Previous issue date: 2015-08-06 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Muitas espécies do gênero Piper apresentam ampla distribuição na Amazônia e diversas aplicações biológicas devido a grande diversidade estrutural de seus metabólitos secundários. A espécie Piper divaricatum, é endêmica da Amazônia e produz em seu óleo essencial elevadas concentrações de metileugenol (50 – 90%), um fenilpropanóide com propriedade antioxidante e fungicida. Devido às suas potenciais aplicações, o objetivo deste estudo foi o estabelecimento do cultivo in vitro e a comparação da biossintese dos metabólitos secundários e propriedades antioxidantes com o cultivo in vivo. Para o estabelecimento do cultivo in vitro foram utilizados ápices caulinares cultivados em meio Murashige e Skoog , acrescido do regulador de crescimento BAP 0,5 mg.mL-1. Para o cultivo in vivo, foram propagadas microestacas em casa de vegetação no substrato vermiculita e adição de solução nutritiva de Murashige e Skoog. Os compostos voláteis identificados nas folhas das plântulas cultivadas in vivo foram metileugenol, β-elemeno e E-β-ocimeno, os quais não diferiram do cultivo in vivo, com exceção dos 90 dias. O cultivo in vitro das raízes não se mostrou eficiente para produção de fenilpropanóides e apresentou um perfil bastante diferenciado em relação ao cultivo in vivo de terpenos. De uma maneira geral, para as plantas cultivadas in vitro não houve diferença estatística significativa no teor de compostos fenólicos e na atividade antioxidante das folhas. No entanto, a atividade antioxidante das raízes foi bastante expressiva. Os resultados obtidos reforçam a hipótese de que plantas regeneradas in vitro podem sintetizar metabólitos semelhantes a planta-mãe e manter suas propriedades biológicas. / Many species of the genus Piper are widely distributed in the Amazon and various biological applications because of large structural diversity of its secondary metabolites. The species Piper divaricatum, is endemic in the Amazon and produces in its essential oil high concentrations of methyleugenol (50-90%), an phenylpropanoid with antioxidant and fungicidal properties. Because of its potential applications, the objective of this study was to establish the in vitro cultivation and comparing the biosynthesis of secondary metabolites and antioxidant properties with the in vivo cultivation. For establish the in vitro culture were used shoot apexes on Murashige e Skoog medium with addition of regulator BAP 0.5 mg.mL-1. For in vivo cultivation, micropiles were propagated in the greenhouse in vermiculite and adding nutritious Murashige e Skoog solution. The volatile compounds identified in the leaves of seedlings grown in vivo were methyleugenol, β-elemene and E-β-ocimene, which did not differ from in vivo cultivation, with the exception of 90 days. The in vitro culture of roots was not efficient to produce phenylpropanoids and presented a very different profile compared to the in vivo cultivation of terpenes. In general, for plants in vitro cultivated there was no statistically significant difference in the phenolics compounds content and antioxidant activity in the leaves. However, the antioxidant activity of roots was significant. The results support the hypothesis that in vitro regenerated plants can synthesize metabolites similar the matrix plant and maintain their biological properties.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Native medicinal plants are widely used, but are insufficient scientific information on the spread of some species and cytotoxicity. This study investigated the sexual propagation and vegetative species Solidago chilensis Meyen (Asteraceae) through seed germination, micropropagation, cuttings, evaluate the genotoxic and quantify the accumulation of secondary metabolites of plants obtained. Studies of germination in vitro and ex vitro seeds were developed by testing storage conditions, concentrations of gibberellic acid (GA3), light regimes, soaking times in water to 5ºC ± 1ºC, temperatures and populations. For micropropagation were used apical and nodal segments and combinations of benzylaminopurine BAP (0,0 e 2,0 mg L-1) and naphthalene acetic acid NAA (0,0 e 0,2 mg L-1). In the study of stem cuttings were used cuttings of branches overhead and underground rhizomes. Apical, middle and basal branches were kept in distilled water and nutrient solutions Murashige and Shoog (20%), with or without indole butyric acid (IBA) (5,0 mg L-1). For the cutting of rhizomes, segments thereof were immersed in 0, 600 and 1200 mg L-1 IBA for six hours and after cultured in Plantmax, sand or vermiculite. Apical leaves from four different origins: natural plants growing in wasteland; plants from wasteland and cultivated in the greenhouse, plants from cuttings and rhizomes micropropagated plants were collected for the assessment of genotoxicity and quantification of total polyphenols and flavonoids by spectrophotometry, and chlorogenic acid, quercetin and rutin by High Performance Liquid Chromatography Efficiency. The genotoxicity was assessed using the Allium cepa test, testing concentrations of 5 and 20 g L-1 aqueous extracts of dried leaves. Populations influenced the germination of seeds, and the wasteland of the ones who had averaged 57,2% germination. The seeds germinated under 16h photoperiod (2,4% and 22,3%) and continuous darkness (3,5% and 17,6%). The soaking time of 36 hours favored germination (56% and 24,7%) and germination rate in the experiment 2 and 3, respectively. A temperature of 20°C, in experiment 3, provided the highest percentage of seed germination, 26,6%. In micropropagation, the combination of 2,0 mg L-1 of BAP and 0,2 mg L-1 og NAA, provided 49% of complete plants and 37% survival at acclimatization. In cuttings of new shoots, rooting in the substrate occurred over water with the presence of IBA (29%). The Plantmax® provided 62% rooting in cuttings of rhizomes did not differ from sand (43%). In the evaluation of genotoxicity was detected genotoxic potential of extracts derived from micropropagated plants (5 and 20 g L-1) and grown in a greenhouse (5 g L-1). Polyphenols and flavonoids were found in all the extracts and identified flavonoids quercetin and chlorogenic acid in higher concentrations in plants of wasteland, 441,4 and 95,7 mg g-1, respectively, and rutin in similar concentration in all samples (mean 46,9 mg g-1). / Plantas nativas medicinais são amplamente utilizadas, porém as informações científicas são insuficientes sobre a propagação e a citotoxicidade de algumas espécies. Este trabalho objetivou estudar a propagação sexuada e vegetativa da espécie Solidago chilensis Meyen (Asteraceae), através da germinação de sementes, micropropagação e estaquia, além de avaliar o potencial genotóxico e quantificar o acúmulo de metabólitos secundários das plantas obtidas. Estudos da germinação in vitro e ex vitro das sementes foram desenvolvidos testando-se condições de armazenamento, doses de ácido giberélico (GA3), regimes de luz, tempos de embebição em água a 5ºC ± 1ºC, temperaturas e populações. Para a micropropagação, foram utilizados segmentos apicais e nodais e combinações de benzilaminopurina BAP (0,0 e 2,0 mg L-1) e ácido naftaleno acético ANA (0,0 e 0,2 mg L-1). No estudo da estaquia foram utilizadas estacas de ramos aéreos e de rizomas subterrâneos. Porções apicais, medianas e basais de ramos foram mantidas em água destilada e soluções nutritivas de Murashige e Shoog (20%), contendo ou não ácido indol butírico (AIB) (5,0 mg L-1). Para a estaquia de rizomas, segmentos dos mesmos foram imersos em 0, 600 e 1200 mg L-1 de AIB por seis horas e após cultivados em Plantmax®, areia ou vermiculita. Folhas apicais de quatro procedências: plantas crescendo naturalmente em terreno baldio; plantas oriundas de terreno baldio e cultivadas em casa de vegetação; plantas obtidas das estacas de rizomas e plantas micropropagadas foram coletadas para a avaliação da genotoxicidade e quantificação de polifenóis totais e flavonoides por espectrofotometria, além de ácido clorogênico, quercetina e rutina por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A genotoxicidade foi avaliada através do teste Allium cepa, testando-se concentrações de 5 e 20 g L-1 de extratos aquosos das folhas secas. As populações influenciaram na germinação de sementes, sendo as de terreno baldio as que apresentaram em média 57,2% de germinação. As sementes germinaram sob fotoperíodo de 16 horas (em média 2,4% e 22,3%) e escuro contínuo (em média 3,5% e 17,6%) no experimento 1 e 3, respectivamente. A embebição por 36 horas favoreceu a germinação (56% e 24,7%) e velocidade de germinação no experimento 2 e 3, respectivamente. A temperatura de 20ºC, no experimento 3, proporcionou a maior porcentagem de germinação das sementes, 26,6%. Na micropropagação, a combinação de 2,0 mg L-1 de BAP + 0,2 mg L-1 de ANA, proporcionou 49% de plantas completas e 37% de sobrevivência na aclimatização. Na estaquia de ramos aéreos, ocorreu superior enraizamento no substrato água com a presença de AIB (29%). O substrato Plantmax® proporcionou 62% de enraizamento nas estacas de rizomas, não diferindo da areia (43%). Na avaliação da genotoxicidade, foi detectado potencial genotóxico dos extratos oriundos das plantas micropropagadas (5 e 20 g L-1) e das cultivadas em casa de vegetação (5 g L-1). Polifenóis e flavonoides foram encontrados em todos os extratos, sendo identificados, os flavonoides, ácido clorogênico e quercetina em maior concentração nas plantas de terreno baldio, 441,4 e 95,7 mg g-1, respectivamente, e rutina em concentração semelhante em todas as amostras (em média 46,9 mg g-1).

The Forest Sector has an accomplishment to attend the demand for noble wood products, usually get from native Brazilian species as louro-pardo. Therefore, propagation studies of native species are necessary to produce high quality plants for commercial exploitation and to reduce deforestation pressure over remained populations of native species. The objective of this study was to develop protocols of establishment in vitro and propagation of louro-pardo. Time of seed imbibition and disinfection protocols were studied for in vitro seedling establishment. Seeds were imbibed in distilled and autoclaved water for 0, 24, 48, 72, 96 and 120 h. Seeds were immersed in a sodium hypochlorite solution of 5% for 30 min, submitted to tegument excision and immersed in a alcohol solution of 70% for 30 s. Disinfection was done in sodium hypochlorite solutions of 2 and 5% for 0, 5, 10 15 and 20 min. Seeds without tegument were then inoculated in medium culture for germination. Percentages of disinfection and germination and mean germination time were evaluated. Seedling growth was quantified in 1/2MS and WPM culture mediums. Number of emerged leaves and primary roots and length of shoots and primary roots were evaluated at 7, 14, 21 and 28 days after inoculation. The addition to the WPM culture medium of 0; 0.05; 0.10; 0.15 or 0.20 mg L-1 of 6-benzilaminopurin (BAP), naphthalene acetic acid (NAA) or gibberellic acid (GA3) and the combination of 0 or 0.05 mg L-1 of NAA with 0; 0.10 or 0.20 mg L-1 of GA3 were tested for propagation. At 30 days after inoculation, number of internodes and leaves and plantlet height were evaluated. Plantlets of seminal origin were also excised below or above the first true leaf and the microstumps maintained in vitro with liquid WPM added to the original medium to increase multiplication rate. Number of sprouts and internodes per microstump were evaluated at 21 days after first and second excision. Minicuttings from 2.5 to 4, 4.01 to 5.5 and 5.51 to 7 cm were treated with 0 or 1000 mg L-1 of indol butyric acid (IBA) by basal immersion for 10 s. Survival and rutting percentage and callus formation were evaluated at 60 days after treatment. Imbibition of louro-pardo seeds until 24 hours made easy tegument excision without affecting disinfection and germination. Immersion of seeds with tegument in a sodium hypochlorite solution of 5% for 30 min, tegument excision and immersion in a alcohol solution of 70% for 30 s are enough for an acceptable production of in vitro aseptic seedlings. Louro-pardo seedlings grow satisfactorily in a WPM culture medium without growth regulators. The addition of growth regulators either isolated or combined to the WPM medium did not increase in vitro propagation. Maintaining microstump increased the in vitro multiplication rate in 1.75 fold. Minicuttings of louro-pardo from 2.5 to 5.5 cm showed high survival percentages, but they did not root. Protocols of plantlet acclimatization and clonal propagation by minicuttings should be developed to produce high genetic and physiological quality of louro-pardo plants / O setor florestal hoje enfrenta um grande desafio, atender à demanda por produtos madeireiros nobres, abastecido especialmente por espécies nativas brasileiras, dentre elas o louro-pardo. Nesse sentido, estudos de propagação que contemplem espécies nativas são necessários para garantir a produção de mudas de qualidade para plantios comerciais, reduzindo a pressão sobre as matas remanescentes. O objetivo deste estudo foi desenvolver protocolos de estabelecimento in vitro e de propagação de louro-pardo. Para o estabelecimento in vitro, estudou-se o efeito do tempo de embebição e de diferentes protocolos de desinfestação das sementes. A embebiçao se fez em água destilada e autoclavada por 0, 24, 48, 72, 96 e 120 h. Para a desinfestação, testou-se a imersão em solução de hipoclorito de sódio a 2 e 5%, por 0, 5, 10, 15 e 20 min. após 30 min de imersão em hipoclorito de sódio a 5%, retirada do tegumento e imersão em álcool etílico 70% por 30 s. Sementes sem tegumento foram inoculadas em meio de cultura para germinação. Foram avaliadas as porcentagens de desinfestação e germinação e o tempo médio de germinação. O crescimento de explantes de louro-pardo foi quantificado nos meios de cultura 1/2MS e WPM, pelo número de folhas e raízes primárias emitidas e comprimento da parte aérea e das raízes primárias, aos 7, 14, 21 e 28 dias após a inoculação. Para a multiplicação, foram testadas a adição ao meio de cultura WPM de 6-benzilaminopurina (BAP), ácido naftaleno acético (ANA) ou ácido giberélico (GA3) nas concentrações de 0; 0,05; 0,10; 0,15 ou 0,20 mg L-1 e a combinação de 0 ou 0,05 mg L-1 de ANA com 0; 0,10 ou 0,20 mg L-1 de GA3. Foram avaliados o número de folhas e de entrenós e a altura das plântulas aos 30 dias de cultivo. Plântulas fornecedoras de segmentos nodais e ápices caulinares foram reidratadas com meio WPM líquido e mantidas in vitro como microcepas, para aumentar a taxa de multiplicação. Aos 21 dias após o primeiro e o segundo corte foi avaliado o número de brotações adventícias e de entrenós por microcepa. Miniestacas de 2,5 a 4; 4,01 a 5,5 e 5,51 a 7 cm foram submetidas à aplicação de 0 ou 1000 mg L-1 de ácido indol butírico (AIB) por 10 s na base. Foram avaliadas as porcentagens de sobrevivência, enraizamento e formação de calos aos 60 dias. A embebição das sementes de louro-pardo por até 24 h favorece a retirada do tegumento sem afetar a desinfestação e germinação. A imersão das sementes com tegumento em NaOCl 5% por 30 min, retirada do tegumento e a imersão das sementes sem tegumento em solução de álcool etílico 70% por 30 s foram suficientes para a produção in vitro de plântulas assépticas. Plântulas de louro-pardo apresentaram melhor crescimento em meio de cultura WPM, sem a adição de reguladores de crescimento. A adição isolada ou combinada de reguladores de crescimento não aumentou a taxa de multiplicação in vitro. A manutenção de microcepas aumentou a taxa de multiplicação in vitro em até 1,75 vezes. Miniestacas de louro-pardo de 2,5 a 5,5 cm de comprimento apresentaram altos índices de sobrevivência, porém não enraizaram

The Parapiptadenia rigida (Bentham) Brenan is a native forest specie that can be used in the restoration of gallery forests and degraded areas. This work has the objective to develop the regeneration in vitro of P. rigida using explants of aseptic seedlings. In experiment 1, seeds of P. rigida were disinfected in 0.0, 2.5 and 5.0% of sodium hypochlorite during 5, 10, 15 and 30 minutes. A design completely randomized was used with 12 treatments and four repetitions by treatment, each repetitions had five seeds. It was evaluated the percentage of seeds sprouted at 10, 20 and 30 days, and the percentage of seeds aseptic in 30 days. In experiment 2, shoots of cotyledonal nodal segment and nodal segment were induced using 0.0, 0.25, 0.50 and 1.0 mg.L-1 of BAP or KIN. The design was completely randomized and 16 treatments were used, each treatment was constituted by five repetitions with six bottles each. The percentage of explants with shoots, the size of shoots, the number of leaves per shoots, the morphologic appearance of shoots, the percentage of callus on the base of explants and the size of callus were availed at 60 days. In experiment 3, named by rooting of explants, two tests were performed. Test 1 used cotyledonal nodal segment and nodal segments, both from shoots induction phase, and test 2 used shoots from cotyledonal nodal segment. At experiment 3, it was used IBA with concentration of 0, 0.25, 1.0 and 1.75 mg.L-1 and a design completely randomized, with 8 treatments. Test 1 was constituted by four repetitions with three bottles per repetition and test 2 was constituted by four treatments, each treatments constituted by four repetitions with five bottles per repetition. The percentage of rooting, the number of roots per explants, the length of the longest root, the percentage of explants with callus on the base and the average size of callus were availed at 60 days. In experiment 4, the plants were transferred to the substrate composed by Plantmax® and vermiculite, and the percentage of survival was availed at 60 days. The analysis of variance, the Tukey test and the regression analyzes were applied on data obtained from all experiments. In experiment 1, the highest percentages of germinations (76%) were found in the treatment with water and Tween 20 during 20 minutes. The second higher was the treatment with 2.5% of sodium hypochlorite during 30 minutes (70%). The highest percentage of disinfected seeds (81%) occurred in treatment with 2.5% of sodium hypochlorite during 30 minutes. In experiment 2, the dose of 0.50 mg.L-1 formed the largest size sprouts (0.50 cm) and the biggest number of leaves for sprout (3.60 leaves), independent of kind of phytoregulators. Experiment 3 presented the biggest number of roots was observed in segments cotyledonal nodal cotyledonary inoculated in medium containing 1.0 mg.L-1 of IBA (2.35 roots). In experiment 4, the highest percentage of survival was in plants derived from cotyledonal nodal segment in medium of rooting containing 1.0 mg.L-1 AIB. The segment cotyledonal nodal is better kind of explant for regeneration in vitro of the P. rigida than nodal segment. / A Parapiptadenia rigida (Benthan) Brenam é uma espécie florestal nativa que pode ser utilizada na restauração de matas ciliares e recuperação de áreas degradadas. Este trabalho visa ao desenvolvimento da regeneração in vitro da P. rigida utilizando explantes de plântulas assépticas. No experimento 1, sementes de P. rígida foram desinfestadas em 0; 2,5 e 5,0% de hipoclorito de sódio, durante 5, 10, 15 e 30 min. O delineamento foi inteiramente casualizado, com 12 tratamentos, sendo quatro repetições por tratamento, cada repetição com cinco sementes. Avaliou-se a porcentagem de sementes germinadas aos 10, 20 e 30 dias, e a porcentagem de sementes desinfestadas aos 30 dias. No experimento 2, realizou-se a indução de brotos em segmentos nodal cotiledonar e nodal utilizando 0; 0,25; 0,50 e 1,0 mg.L-1 de BAP ou KIN. O delineamento foi inteiramente casualisado, com 16 tratamentos, com cada tratamento constituído de cinco repetições, cada repetição com seis frascos. Aos 60 dias avaliou-se a porcentagem de explantes com broto, o comprimento dos brotos, o número de folhas por broto, o aspecto morfológico dos brotos, a porcentagem de explantes com calo na base e o tamanho dos calos. O experimento 3, enraizamento de explantes, foi dividido em dois testes. No teste 1 utilizaram-se segmentos nodal cotiledonar e nodal advindos da fase de indução de brotos e, no teste 2, brotos provenientes de segmento nodal cotiledonar. Para indução rizogênica foram utilizadas as doses de 0; 0,25; 1,0; 1,75 mg.L-1 de AIB. O delineamento foi inteiramente casualizado, com oito tratamentos, sendo, no teste 1, cada tratamento composto por quatro repetições, com três tubos por repetição e, no teste 2, por quatro tratamentos, cada tratamento constituído de quatro repetições, com cinco tubos por repetição. Aos 60 dias foi avaliada a porcentagem de enraizamento, o número de raízes por explante, o comprimento da raiz mais longa, a porcentagem de explantes com calo na base e o tamanho médio dos calos. No experimento 4, as plantas regeneradas a partir dos diferentes tipos de explantes foram transferidas para substrato composto por Plantmax® e vermiculita e, aos 60 dias, avaliadas quanto a porcentagem de sobrevivência. Os dados obtidos, nos diferentes experimentos, foram submetidos à análise de variância, análise de regressão e ao teste de Tukey. No experimento 1, a maior porcentagem de germinação ocorreu em sementes embebidas em água com tween 20, durante 30 min., seguido do tratamento utilizando 2,5% de hipoclorito de sódio, por 30 min., com 76 e 70% de sementes germinadas respectivamente. A maior porcentagem de sementes desinfestadas (81%) ocorreu no tratamento com 2,5% de hipoclorito de sódio, durante 30 min. No experimento 2, foi verificado que a dose de 0,50 mg.L-1, independente do tipo de fitorregulador, promoveu maior tamanho dos brotos (0,50 cm) e maior número de folhas por broto (3,60 folhas). No experimento 3, o maior número de raízes foi observado em segmentos nodal cotiledonar inoculados em meio contendo 1,0 mg.L-1 de AIB (2,35 raízes). No experimento 4, a maior sobrevivência durante o processo de aclimatização (68%) ocorreu em plantas regeneradas a partir de segmento nodal cotiledonar em meio contendo 1,0 mg.L-1 AIB. O segmento nodal cotiledonar é o melhor tipo de explante para a regeneração in vitro de P.rigida se comparado ao segmento nodal.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Seedling production of canjerana has been limited by difficulty in germination, caused by recalcitrant behavior of their seeds. The objective of this study was to develop micropropagation to auxiliate preserving and multiplication of superior genotypes, to study the plantlet production by micro-cutting and mini-cutting, and to evaluate the genetic diversity of canjerana. In micropropagation, seeds of canjerana were disinfected with 0, 2.5, 5.0, 7.5 and 10% of NaOCl solution to produce aseptic seedlings, which were cultivated on MS and WPM media. Nodal segments were treated with 0 and 2.5 μM of BAP, KIN and TDZ and with 0, 1, 3, 6, 9 and 12 μM of BAP, which were cultivated on WPM media. Micro-cuttings, were cultivated on MS and WPM media with either 0 or 5.0 μM of IBA and NAA. The rooted micro-cuttings were acclimatizated in a humid chamber in a greenhouse. The highest percentage of decontaminated seeds was produced using a solution of 7.5% of NaOCl and immersion times of 10, 20 and 30 minutes. The same concentrations of BAP, KIN and TDZ and increasing concentrations of BAP in the WPM media did not increase shoot number and length. Neither the base medium nor the auxin had a significant effect on the survival of micro-cuttings after 60 days of cultivation, but the addition of 5.0 μM of NAA did increase the percentage of rooting and survival during the acclimatization. Both nodal segments and microstumps of canjerana have a low rate of multiplication. Shoots produced from microstumps may be rooted in WPM or MS medium added with 5.0 μM of NAA. These complete plantlets can be mantained in vitro or acclimatized as a source of stock plants for the microclonal hedge. For production of canjerana plantlets by mini-cutting, different concentrations of indolbutyric acid (IBA) and substrate combinations were evaluated. Mini-cuttings were treated with 2000 mg L-1 of IBA and planted in commercial substrate; coarse sand; carbonized rice husks; and a combination of the three. Apical and nodal minicuttings were treated with 0, 1000, 2000 and 3000 mg L-1 of IBA and planted in a combination of commercial substrate, coarse sand and carbonized rice husks. The productivity of microstumps and mini-cutting rooting were evaluated in three clones of canjerana. The combination of commercial substrate, coarse sand and carbonized rice husks maximized mini-cuttings rooting. Nodal mini-cuttings had higher rooting capability than apical ones. The application of 3000 mg L-1 of IBA improved rooting differentiation and growth of canjerana mini-cuttings. Canjerana clones differ in rooting capability and survival rates. The genetic diversity of canjerana, within and among progenies of three stock plants, was assessed with previously defined species-specific SSR markers. The allele frequency was calculated for each band and the heterozygosity and the polymorphic information content were calculated for each SSR pair of primers, progeny and for the combination of the 32 canjerana genotypes. The results showed high level of genetic diversity, both within and among progenies, making possible that genotypes from different stock plants grouped together. Based upon these results, high level of genetic diversity can be maintained in clones from progenies of selected stock plants. / A produção seminal de mudas de canjerana tem sido limitada pela dificuldade de germinação, ocasionada pelo comportamento recalcitrante das sementes. O objetivo deste trabalho foi desenvolver a micropropagação para auxiliar a conservação e multiplicação de genótipos superiores, estudar a microestaquia e miniestaquia para a produção massal de mudas, e avaliar a diversidade genética da canjerana. Na micropropagação, sementes de canjerana foram desinfetadas com 0; 2,5; 5,0; 7,5 e 10,0% de hipoclorito de sódio para a produção de plantas assépticas e cultivadas em meios MS e WPM. Segmentos nodais das plântulas foram inoculados em meio WPM acrescido de 0 ou 2,5 μM de BAP, KIN ou TDZ, bem como acrescido de 0; 1; 3; 6; 9 e 12 μM de BAP. Microestacas foram cultivados nos meios MS e WPM acrescido de 0 ou 5,0 μM de AIB e ANA. As microestacas enraizadas foram aclimatizadas em câmara úmida e em casa de vegetação. O maior percentual de sementes descontaminadas foi produzido usando uma solução de 7,5% de NaOCl por 10, 20 e 30 minutos. Tanto BAP, KIN e TDZ em iguais concentrações quanto o aumento das concentrações de BAP no meio WPM não aumentaram o número e nem comprimento das brotações. O meio de cultura e a auxina não afetaram a sobrevivência de microestacas, mas a adição de 5,0 μM de ANA aumentou a porcentagem de enraizamento e sobrevivência durante a aclimatização. Segmentos nodais e microcepas tiveram baixa taxa de multiplicação. Microestacas enraizaram em meio WPM ou MS acrescido de 5,0 μM de ANA. As mudas produzidas podem ser mantidas in vitro ou aclimatizadas para serem utilizadas como plantas matrizes do microjardim clonal. Para a produção de mudas de canjerana por miniestaquia foram avaliadas as concentrações de AIB e diferentes substratos. Miniestacas foram tratadas com 2000 mg L-1 de AIB e plantadas em substrato comercial; areia grossa; casca de arroz carbonizada; e a combinação em iguais proporções de substrado comercial, areia grossa e casca de arroz carbonizada. Miniestacas apicais e nodais foram tratados com 0; 1000; 2000 e 3000 mg L-1 de AIB e plantadas em uma combinação de substrato comercial, areia grossa e casca de arroz carbonizada. Além disso, a produtividade de minicepas e o enraizamento de miniestacas foram avaliados em três clones de canjerana. A combinação de substrato comercial, areia grossa e casca de arroz carbonizada maximizaram o enraizamento das miniestacas. Miniestacas nodais tiveram maior capacidade de enraizamento do que as apicais. A aplicação de 3000 mg L-1 de AIB aumentou o enraizamento e o crescimento de miniestacas de canjerana. Clones de canjerana diferem na porcentagem de enraizamento e na sobrevivência das miniestacas. A diversidade genética entre e dentro de progênies de três matrizes de canjerana foi avaliada por microsatélites. A frequência alélica foi calculada para cada banda e a heterozigose e o conteúdo de informação polimórfica foram obtidos para cada par de primers, cada progênie e para a combinação dos 32 genótipos de canjerana. Os resultados indicam a existência de alta variabilidade genética, tanto entre quanto dentro das progênies avaliadas, possibilitando a formação de grupos com genótipos oriundos de diferentes progênies. Assim, alta variabilidade genética pode ser mantida a partir de clones de progênies de matrizes selecionadas.

Submitted by Claudia Rocha (claudia.rocha@udesc.br) on 2018-02-27T16:48:15Z No. of bitstreams: 1 PGPV16MA210.pdf: 1614873 bytes, checksum: 236bab6cf01b676397429dd551089261 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-27T16:48:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV16MA210.pdf: 1614873 bytes, checksum: 236bab6cf01b676397429dd551089261 (MD5) Previous issue date: 2016-07-26 / Capes / Cattleya coccinea and Coppensia ranifera are epiphytic orchids, which have ornamental potential. Understanding how is the behavior of those species on their performance environments, along with in vitro culture of research is fundamental to building solid plans for the use and conservation of natural resources. We evaluated the occurrence of C. coccinea in three installments in the conservation unit complex Serra da Farofa in Urupema, SC; and C. ranifera in a forest fragment of a particular property in Brunópolis, SC. the frequencies of orchids were analyzed in vertical strata, the points chains (north, south, east and west) and correlation with height and diameter. In micropropagation C. ranifera protocorms we were used germinated in vitro longitudinally sectioned (2 mm) in medium Knudson C stationary and gelled liquid, supplemented with thidiazuron (TDZ) (0, 1, 2, 4 and 8 uM) to induce protocorm-like structures (ESP). For regeneration of plantlets was used in medium lacking growth regulators culture. For C. coccinea were recorded in 1398 orchids distributed in 258 phorophytes. Drimys angustifolia corresponded to 65.1% of phorophytes and held 72.2% of orchids. The Middle Fuste of phorophytes concentrated 68.7%, and the North face took 40.0% of orchids. The positive correlation to the height of phorophyte (r = 0.93) and diameter classes (r = 0.95) depending on the frequency of orchids, where 7.6 m center class obtained 32% of orchids and phorophytes; and 13,4cm class center obtained 30% of orchids and phorophytes. C. To ranifera frequencies of orchids were analyzed in vertical layers, positions in the chains, and correlation with height and diameter. They sampled 473 individuals of C. ranifera distributed in 72 phorophytes. Lamanonia ternata recorded 34.7% of phorophytes and took 42.5% of orchids. The Middle Fuste of phorophytes concentrated 54.8% and 40.6% north face orchids. Positive correlation was found to the height of phorophyte (r = 0.25) and negative for diametric classes (r = -0.88) depending on the frequency of orchids, where 14.4m center class obtained 17% of orchids and of phorophytes; the 17.5cm class center obtained 20% of orchids and phorophytes. The ESP formation occurs by direct route, without callus. The use of the liquid culture medium is more efficient than the medium gelled with respect to the number of ESP formed per explant. In liquid culture medium the highest percentage of formation and more ESP per explant occurs with the addition of 4 uM TDZ. It was established an efficient method for in vitro propagation C. ranifera, using thin layer technique cell (TCL), the efficiency (conversion percentage) in plantlet regeneration gelled media is higher than in the liquid medium. The data indicate colonization capacity and the importance of conservation actions of orchid species / Cattleya coccinea e Coppensia ranifera são orquídeas epífitas, que possuem potencial ornamental. Entender como se dá o comportamento dessas espécies em ambientes de sua ocorrência, juntamente com pesquisa de cultivo in vitro é fundamental para construção de planos sólidos para o uso e conservação dos recursos naturais. Avaliou-se a ocorrência de C. coccinea em três parcelas na unidade de conservação Complexo Serra da Farofa, em Urupema, SC; e de C. ranifera em um fragmento de floresta de uma propriedade particular, em Brunópolis, SC. Foram analisadas as frequências de orquídeas em estratos verticais, aos pontos cadeias (norte, sul, leste e oeste) e correlação com a altura e diâmetro. Na micropropagação de C. ranifera foram utilizados protocormos germinados in vitro seccionados longitudinalmente (2 mm) em meio Knudson C líquido estacionário e gelificado, suplementado com thidiazuron (TDZ) (0, 1, 2, 4 e 8 M) para a indução de estruturas semelhantes a protocormos (ESP). Para a regeneração de plântulas foi utilizado meio de cultura isento de fitorreguladores. Para C. coccinea foram registradas 1398 orquídeas, distribuídas em 258 forófitos. Drimys angustifolia correspondeu a 65,1% dos forófitos e sustentou 72,2% das orquídeas. O Fuste Médio dos forófitos concentrou 68,7%, e a face Norte abrigou 40,0% das orquídeas. A correlação positiva para a altura do forófito (r=0,93) e classes Diamétricas (r=0,95) em função da frequência de orquídeas, onde centro de classe 7,6m obteve 32% das orquídeas e forófitos; e o centro de classe 13,4cm obteve 30% das orquídeas e forófitos. Para C. ranifera foram analisadas as frequências de orquídeas em estratos verticais, nas posições cadeias, e correlação com a altura e diâmetro. Foram amostrados 473 indivíduos de C. ranifera, distribuídas em 72 forófitos. Lamanonia ternata registrou 34,7% dos forófitos e abrigou 42,5% das orquídeas. O Fuste Médio dos forófitos concentraram 54,8% e a face Norte 40,6% orquídeas. Foi verificado a correlação positiva para a altura do forófito (r=0,25) e negativa para classes Diamétricas (r= - 0,88) em função da frequência de orquídeas, onde centro de classe 14,4m obteve 17% das orquídeas e dos forófitos; o centro de classe 17,5cm obteve 20% das orquídeas e forófitos. A formação de ESP ocorre por via direta, sem calo. A utilização de meio de cultura líquido é mais eficiente do que o meio gelificado com relação ao número de ESP formado por explante. Em meio líquido de cultura o maior percentual de formação e o maior número de ESP por explante ocorre com a adição de 4 M de TDZ. Estabeleceu-se um método eficiente de propagação in vitro para C. ranifera, utilizando a técnica de camada fina celular (TCL), a eficiência (percentual de conversão) na regeneração de plântula em meio gelificado é maior do que em meio líquido. Os dados indicam a capacidade de colonização e a importância de ações de conservação das espécies de orquídeas

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:51:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 01 - capa_abstract.pdf: 58664 bytes, checksum: 66cb47131cc46bcd2d5d263065f54c20 (MD5) Previous issue date: 2008-07-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of this work was to evaluate the effects of the arbuscular mycorrhizal fungus (AMF), Glomus clarum, multiplied monoxenically in transformed carrot roots, on the growth, survival, mycorrhizal colonization and root development of micropropagated plantlets in different stages of rooting. Inoculation was performed in vitro and ex vitro conditions. Micropropagated plantlets with 0, 14 or 21 days maintained in rooting medium, supplemented or not with 1 mg L-1 of Indolbutiric acid (IBA), were transferred to a substrate composed by sand:soil:vermiculite (1:1/2:1). The in vitro system allowed the establishing mycorrhizal association, but no stimulatory effect on the development of shoot or root by mycorrhizal inoculation was observed. The period of time and addition of IBA did not affect plant growth. In ex vitro system, the stimulatory effects of arbuscular mycorrhizal association were evident in all evaluated characteristics, except to plant height. Plants that were not submitted to rooting showed growth similar or superior to those that were maintained in the rooting media, independent of IBA addition. Inoculated plants were shown to be more efficient at nutrient absorption, especially to phosphate. The arbuscular mycorrhizal association promotes beneficial effects when inoculation is performed ex vitro and the best period for inoculation of physic nut seedlings is in the beginning of acclimatization, without in vitro rooting phase. Inoculation of physic nut with arbuscular mycorrhizal fungi showed to be an important tool for micropropagated seedlings production. / O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da inoculação do fungo micorrízico arbuscular (FMA), Glomus clarum, multiplicado monoxenicamente em raízes de cenoura transformadas, sobre o crescimento, a sobrevivência, a colonização micorrízica e o desenvolvimento radicular de plantas micropropagadas de pinhão-manso em diferentes estádios de enraizamento. A inoculação foi efetuada em condições in vitro e ex vitro. Plantas micropropagadas de pinhão-manso com 0, 14 ou 21 dias de permanência em meio de enraizamento, suplementado ou não com 1 mg L-1 de ácido indol-butírico (AIB), foram transferidas para substrato areia lavada:solo:vermiculita (1:1/2:1). O sistema in vitro utilizado permitiu o estabelecimento da associação micorrízica, mas não foi possível observar efeitos estimuladores da inoculação sobre o crescimento e desenvolvimento radicular das plantas. O tempo de permanência em meio de enraizamento e a adição de AIB também não afetaram o crescimento das plantas. No sistema ex vitro os efeitos estimuladores das micorrizas arbusculares foram evidenciados em todas as características relacionadas ao crescimento, com exceção da altura das plantas. As plantas que não foram submetidas à etapa de enraizamento mostraram crescimento semelhante ou superiores àquelas submetidas à etapa de enraizamento, independente da adição do AIB. As plantas inoculadas com G. clarum mostraram-se também eficientes na absorção de nutrientes, principalmente de fósforo. Pode-se concluir que os efeitos estimuladores das micorrizas arbusculares foram evidenciados quando foi realizada a inoculação ex vitro dessas plantas e que a melhor época de inoculação de J. curcas corresponde à fase de início da aclimatização, sem necessidade de passar pela fase de enraizamento in vitro. A inoculação com FMAs pode representar importante ferramenta para a produção de mudas micropropagadas de qualidade.