Submitted by Dominick Jesus (dominickdejesus@hotmail.com) on 2016-01-05T18:59:17Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_Semirian Campos Amoêdo.pdf: 2207564 bytes, checksum: 2fe12a017c9e9c44922a96fa76c50647 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-05T18:59:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_Semirian Campos Amoêdo.pdf: 2207564 bytes, checksum: 2fe12a017c9e9c44922a96fa76c50647 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-05-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The species of the Amazon region named andiroba (Carapa guianensis Aubl and Carapa surinamensis Miq) are trees of multiple use, extensively exploited due to their timber and the seed oil, used in phytopharmaceutical products and cosmetics. The seeds are recalcitrant and have slow germination, characteristics which difficult plant propagation and seed trade. The present study aimed to determine the cardinal temperatures of seed germination on several germination criteria observable during initial development, to verify a possible retardation of the germination process by the mechanical resistance of the seed coat and to develop a protocol on tetrazolium staining of the viable seeds, for future physiological studies or seed quality assessment. The dissertation is divided into three chapters: the first and second deal with temperature effects (10 - 40° C) on seed germination and initial plant development of C. surinamensis and C. guianensis, respectively. Here data collected during this master thesis were accomplished with previous results for consolidation. All seeds were collected in forest plantations in the North of Manaus, owned by the Brazilian National Institute for Amazon Research. Seed germination tests of C. surinamensis were done with intact seeds and after removal of the seed coat. Tests of C. guianensis were only done with seeds without seed coat. Germination tests were conducted in chambers with constant temperature (± 1° C) and photoperiod of 12 h. Germination was assessed with three germination criteria (plant development stages): (1) radicle length ≥ 0.5 cm; (2) epicotyl length ≥ 1 cm and (3) epicotyl length ≥ 5 cm. For C. surinamensis all three germination criteria were assessed and for C. guianensis the first and third. The experimental design was completely randomized with four replicates of 20 seeds at each temperature. Data were analyzed for distinct collections by joint variance analysis and simple ANOVA; the comparison of the means at 5% was done by Tukey test. The seeds of C. surinamensis had between 15 and 35° C a high germination percentage. The minimum germination temperature of all three criteria laid between 10 and 15° C. For the radicle the maximum temperature was above 40 ºC, and for both epicotyl lengths between 35 and 40 °C. The germination speed indicated the temperature of 30 ºC as optimum for all criteria. Seed coat removal reduced the time period for radicle protrusion, at the optimum temperature, from 44 to 23 days. The seeds of C. guianensis had a high germination percentage and no significant difference between 15 and 30° C for the radicle protrusion, however the elongation of the epicotyl was restricted to temperatures between 25 and 30° C. Minimum temperatures were similar to those of C. surinamensis and the maximum temperature was between 35 and 40° C for both germination criteria. An optimum temperature of 30 °C was suggested by the germination speed index, for two seed collections from different years. However the results should be confirmed. In the third chapter a protocol for tetrazolium staining was elaborated and validated with germination tests for both species (C.guianensis and C. surinamensis). In a first step the staining intensity was evaluated during a period of up to six hours with different concentrations of tetrazolium (0.05; 0.10; 0.25 and 0.50) at three temperatures (25, 30, 35° C). Comparing good staining results with costs and working time, the concentration of 0.1% at 30° C during three hours was appropriate for both species. Seed preparing was standardized to cut the tiny embryonic axis and expose it to the solution. In a second step the protocol was validated with seeds of different qualities (between 0 – 90% germination capacity), obtained by controlled drying of the recalcitrant seeds over a fan. A germination test was conducted parallel to the viability staining with the same number of seeds. Based on the coloration patterns, the image of the stained seed were classified in four levels of viability. These first classification was compared and validated with the results of two germination criteria (root ≥ 0,5 cm and normal seedling). The proposed protocol of tetrazolium staining was efficient in assessing seed viability of both species. This study determined for the first time the cardinal temperatures for seed germination of andiroba and compared thermal sensitivity of three stages of initial development of C. guianensis and C. surinamensis. The two species had differences in their temperature response. Seed viability of the recalcitrant seeds of andiroba can be assessed in a few hours with the tetrazolium protocol. The method may be usefull in physiological or morphological studies of this or other species of the genus Carapa. / As espécies de andiroba da região da Amazônia (Carapa guianensis Aubl. e Carapa surinamensis Miq.) são árvores de uso múltiplo, amplamente exploradas, devido a sua madeira de valor comercial e óleo das sementes, usado em produtos fitoterápicos e cosméticos. As sementes são recalcitrantes e de germinação lenta, características que dificulta a propagação das plantas e comercialização das sementes. O presente estudo teve como objetivo determinar as temperaturas cardeais de germinação de sementes em diferentes critérios de germinação observáveis durante o desenvolvimento inicial, também verificar um possível retardo do processo de germinação pela resistência mecânica do tegumento e desenvolver um protocolo sobre a coloração de tetrazólio das sementes viáveis, para futuros estudos fisiológicos ou avaliação da qualidade de sementes. A dissertação é dividida em três capítulos: No primeiro e segundo são apresentados resultados sobre o efeito da temperatura entre 10 a 40 °C na germinação das sementes e no desenvolvimento inicial de C. surinamensis e C. guianensis respectivamente. Os dados coletados para a dissertação de mestrado foram complementados com resultados anteriores para a consolidação dos mesmos. Todas as sementes foram coletadas nos plantios florestais do Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, ao norte de Manaus. Os testes de germinação das sementes de C. surinamensis foram feitos com sementes intactas e após a retirada do tegumento. Testes com C. guianensis foram feitos somente com sementes sem tegumento. Os testes de germinação foram conduzidos em câmaras com temperaturas constantes (± 1°C) e fotoperíodo de 12 horas. A germinação foi avaliada a partir de três estádios germinativos: (1) formação da radícula, com comprimento ≥ 0,5 cm; (2) alongamento do epicótilo com comprimento ≥ 1 cm e (3) alongamento do epicótilo, com comprimento ≥ 5 cm. Nos testes com C. surinamensis foram avaliadas os três critérios e com C. guianensis o primeiro e terceiro. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro repetições de 20 sementes a cada temperatura. Os dados de coletas distintas foram analisados por análise de variância conjunta e ANOVA simples, a comparação de médias a 5% foi feita pelo teste de Tukey. As sementes de C. surinamensis apresentaram alta percentagem de germinação entre 15 e 35 ºC. A temperatura mínima de germinação para os três estádios situou-se entre 10 e 15 ºC. Para a radícula, a temperatura máxima foi acima de 40 ºC e entre 35 e 40 °C para o desenvolvimento da parte aérea. A velocidade de germinação indicou a temperatura de 30 ºC como ótima para todos os estádios. A retirada do tegumento reduziu o tempo final da protrusão da radícula, na temperatura ótima, de 44 para 23 dias. As sementes de C. guianensis apresentaram alta porcentagem germinativa sem diferença significativa entre 15 e 30 °C para a protrusão da radícula, entretanto o alongamento do epicótilo foi mais restrito entre as temperaturas de 25 a 30 °C. As temperaturas mínimas foram similares às de C. surinamensis e a máxima foi entre 35 e 40 °C para ambos os critérios. O índice de velocidade de germinação indicou 30 °C como mais adequada na comparação de dois anos de coleta, porém há necessidade de confirmação. No terceiro capitulo uma metodologia para coloração com o tetrazólio foi elaborada e validada com teste de germinação para ambas as espécies (C. guianensis e C. surinamensis). Primeiramente a coloração das sementes foi avaliada durante um período de até seis horas, com diferentes concentrações da solução de tetrazólio (0,05; 0,10; 0,25 e 0,50%,) e três temperaturas (25, 30, 35 °C). Comparando os bons resultados da coloração, com custos e tempo de trabalho, a concentração de 0,1% a 30 ° C durante três horas foi considerada adequada para ambas as espécies. Um método para o corte da semente foi elaborado para visualizar o minúsculo eixo embrionário e expô-lo a solução. Em seguida o protocolo foi validado com sementes de diferentes qualidades (entre 0 - 90% de capacidade germinativa), obtidas pela secagem controlada das sementes recalcitrantes sob ventilador. O teste de germinação foi realizado paralelamente ao de coloração das sementes, com o mesmo número de sementes. Com base nos padrões de coloração, foram definidas quatro classes de viabilidade. A classificação foi comparada e validada com os resultados de dois critérios de germinação (raiz ≥ 0,5 cm e plântulas normais). O protocolo proposto para a coloração do tetrazólio foi eficiente na avaliação da viabilidade de sementes de ambas as espécies. Este estudo determinou pela primeira vez as temperaturas cardeais de germinação das sementes de andiroba, comparando a sensibilidade térmica dos estágios de desenvolvimento inicial de C. guianensis e C. surinamensis. As duas espécies mostraram diferenças na resposta à temperatura. A viabilidade das sementes recalcitrantes de andiroba pode ser avaliada em poucas horas com o protocolo tetrazólio proposto. O método pode ser útil em estudos fisiológicos ou morfológicos desta ou de outras espécies do gênero Carapa.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:09:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 107.pdf: 2520157 bytes, checksum: 93334c0f181c08b7be000b7a1441e401 (MD5) Previous issue date: 2008 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 107.pdf: 2520157 bytes, checksum: 93334c0f181c08b7be000b7a1441e401 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A quantidade de bacilos viáveis presentes na vacina BCG é um importante requisito de qualidade deste produto, pois permite avaliar a consistência de produção. A contagem de colônias em meio sólido é o método oficial recomendado pela Organização Mundial da Saúde e pela Farmacopéia Brasileira para a determinação da viabilidade do BCG. A difícil dispersão do BCG e seu crescimento lento conferem limitações ao método oficial, como a variabilidade dos resultados, a baixa reprodutibilidade e o prolongado tempo de análise. Este trabalho avaliou a aplicabilidade da técnica de redução do sal de tetrazol XTT como método alternativo para a determinação do número de viáveis em vacinas produzidas com o BCG Moreau-RJ. Foi demonstrada a linearidade das técnicas de redução do XTT realizadas com base em Kairo et al. (1999) e em Argüelles et al (2005) em 3, 24 e 48 horas de incubação. Os ajustes lineares foram obtidos pela técnica de redução do XTT a 1 mg/mL baseada em Kairo et al. (1999), com coeficiente de determinação (RP2P=0,99), em conformidade com a Resolução N. 899/2003 da ANVISA referente à validação de métodos bioanalíticos. O melhor ajuste abrangeu as concentrações de vacina de 2,0 a 16,0 x 10P6 PUFC/mL após 24 e 48 horas de incubação a 37C. Nestas condições de ensaio os números de viáveis obtidos preliminarmente para cinco lotes de vacina BCG intradérmica empregados na rotina de imunização do país e para três amostras da vacina de referência BRABCG003 foram fortemente correlacionados (r=0,96) àqueles fornecidos pelo método tradicional de cultivo em meio de Lowenstein-Jensen. Com base nos valores de referência preconizados pela Farmacopéia Brasileira, observou-se 100 por cento de concordância na interpretação final dos resultados fornecidos pelos dois métodos para os cinco lotes de vacina avaliados. / The number of culturable particles in the BCG vaccine is an important requirement of quality control, therefore it allows to evaluate the production consistency. The colony counting on solid medium is the official method recommended by the World Health Organization and by the Brazilian Pharmacopeia to determine the viability of the BCG on final lots. The nature of the organism (difficult dispersion and slow growth) confers inter-laboratory variation of results and time consuming characteristics to the current test. The present work evaluated the applicability of the reduction of the salt of tetrazol XTT as an alternative method to determine the number of viable units in vaccines produced with the BCG Moreau-RJ. The method was linear by the techniques of reduction of the XTT based on Kairo et. (1999) and on Argüelles (2005) after 3, 24 and 48 hours of incubation. The linear adjustment was obtained by assays of reduction of XTT at 1 mg/mL based on Kairo et al. (1999), with coefficient of determination (RP2P=0,99) required by the Resolution N° 899/2003 / ANVISA concernem to the validation of bioanalitical assays. Optimal calibration curves enclosed vaccine concentrations from 2,0 x 10P6 Pto 16,0 x 10P6 PCFU/mL after 24 and 48 hours of incubation at 37 °C. With these conditions the numbers of viable units obtained from five lots of intradermal vaccines used in the brazilian routine of immunization and from three samples of the reference vaccine BRABCG003 had been strongly correlated (r=0,96) to those provided by the current method of culture in Lowenstein-Jensen. Thus, we observed 100% of agreement between the final interpretations of the two methods of analysis considering the range of values referred by the Brazilian Pharmacopeia to BCG vaccine. Therefore, beyond the strong correlation with the official method, the reduction length of assay from 4 weeks to 48 hours, the relative low cost and the easiness of execution represent strong incentives to the validation of the reduction of XTT as an alternative method to replace the counting of colonies in Lowenstein-Jensen.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-18Bitstream added on 2014-06-13T20:47:47Z : No. of bitstreams: 1 silva_lac_me_botfmvz.pdf: 429813 bytes, checksum: 7f077174ba95e6dcf0c8db5ba9626dcd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Embora haja estudos sobre as forrageiras nativas com potencial de cultivo na região do Pantanal, como a grama-do-cerrado (Mesosetum chaseae), há carência de conhecimentos básicos para a definição de estratégias de manejo do germoplasma forrageiro nativo. Desta forma, visou-se avaliar o perfilhamento das plantas e qualidade das sementes de M. chaseae colhidas na sub-região da Nhecolândia, Pantanal, MS. Houve maior produção de perfilhos reprodutivos no campo limpo baixo “inundável”, que produziu sementes com maiores taxas de germinação, variável entre anos, em decorrência da precipitação que influenciou positivamente quando foi de aproximadamente 300 mm mensal, porém foi prejudicial para a viabilidade das sementes. / Although had exist studies about Pantanal potencial native forage, like grama-docerrado (Mesosetum chaseae) grass, the basic knowledge is poor, to identifie estrategies in order to manage the folder native germoplasm. In this way, the objetictive of this research was evaluate the tillers oppearauce, quality and seed productions of the harvested M. chaseae in the Nhecolândia subregion, Pantanal, MS, Brazil. Under this studies conditions, at the “fooded” low clean field, occurred a big production of reprodutive tillers, withdid large germination seed, because the positive influence of rain at almost 300 mm per month, however worse to seeds feasibility.

Submitted by Michele Mologni (mologni@unoeste.br) on 2017-10-25T20:23:10Z No. of bitstreams: 1 Silvério Takao Hosomi.pdf: 4057608 bytes, checksum: ecca767a35ae165f15b936d314803fcb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-25T20:23:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silvério Takao Hosomi.pdf: 4057608 bytes, checksum: ecca767a35ae165f15b936d314803fcb (MD5) Previous issue date: 2017-12-19 / In 2008, the Plant Tissue Culture Laboratory from the Agricultural Sciences College has partnered with Orchid Seed Stores for Sustainable Use (OSSSU) Project - Darwin Initiave - to create an orchid seed bank at Unoeste in Presidente Prudente, São Paulo. The aim of this project was to collaborate with the ex situ conservation of the largest plant family, that due to intense environmental degradation and unbridled exploitation, is also one of the most endangered. Seed storage in germplasm banks requires low conditions of humidity and temperature and has great advantages, as the numerous small seeds can last for years at very low costs. However, this strategy demands procedures such as viability tests for selecting lots to be stored, quality monitoring of stored seeds and eventually, germination tests to determine the potential for the production of individuals to be reintroduced into natural systems. Thus, the present work approaches the seed bank establishment at Unoeste and its importance for orchid biodiversity conservation. It also describes the results of preconditioning procedures, tested in order to improve the quality of tetrazolium test, one of the most used for the verification of seed vigor and viability. Finally were analyze the results of experiments to determine the germination cardinal temperatures - minimum, optimum and maximum - for some species of orchids. / No ano de 2008, o Laboratório de Cultura de Tecidos Vegetais da Faculdade de Ciências Agrárias da Universidade do Oeste Paulista estabeleceu uma parceria com o Orchid Seed Stores for Sustainable Use (OSSSU) Project - Darwin Initiave - para a criação de um banco de sementes de orquídeas na Unoeste, em Presidente Prudente, SP. O objetivo desse empreendimento foi colaborar com a conservação ex situ da maior família de plantas que, devido à intensa degradação ambiental e exploração desenfreada, é também uma das mais ameaçadas de extinção. O armazenamento de sementes em bancos de germoplasma se dá em baixas condições de umidade e temperatura e possui grandes vantagens, pois as numerosas e pequenas sementes podem ser conservadas por anos a custos muito reduzidos. No entanto, tal estratégia pressupõe procedimentos como testes de viabilidade para a seleção de lotes a serem conservados, monitoramento da qualidade das sementes armazenadas e eventuais testes de germinação para a produção de indivíduos a serem reintroduzidos em sistemas naturais. Desta forma, o presente trabalho trata do estabelecimento do banco de sementes na Unoeste e de sua importância para a conservação da biodiversidade das orquídeas. Também estão descritos os resultados dos procedimentos de pré-condicionamento, testados com o intuito de melhorar a qualidade do teste de tetrazólio, um dos mais utilizados para a verificação da viabilidade das sementes. Por fim analisa-se o resultado de experimentos para a determinação das temperaturas cardeais de germinação – mínima, ótima e máxima – para algumas espécies de orquídeas do gênero Cattleya.

Submitted by Michele Mologni (mologni@unoeste.br) on 2017-12-05T17:48:44Z No. of bitstreams: 1 Silvério Takao Hosomi.pdf: 4057608 bytes, checksum: ecca767a35ae165f15b936d314803fcb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-05T17:48:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silvério Takao Hosomi.pdf: 4057608 bytes, checksum: ecca767a35ae165f15b936d314803fcb (MD5) Previous issue date: 2016-12-19 / In 2008, the Plant Tissue Culture Laboratory from the Agricultural Sciences College has partnered with Orchid Seed Stores for Sustainable Use (OSSSU) Project - Darwin Initiave - to create an orchid seed bank at Unoeste in Presidente Prudente, São Paulo. The aim of this project was to collaborate with the ex situ conservation of the largest plant family, that due to intense environmental degradation and unbridled exploitation, is also one of the most endangered. Seed storage in germplasm banks requires low conditions of humidity and temperature and has great advantages, as the numerous small seeds can last for years at very low costs. However, this strategy demands procedures such as viability tests for selecting lots to be stored, quality monitoring of stored seeds and eventually, germination tests to determine the potential for the production of individuals to be reintroduced into natural systems. Thus, the present work approaches the seed bank establishment at Unoeste and its importance for orchid biodiversity conservation. It also describes the results of preconditioning procedures, tested in order to improve the quality of tetrazolium test, one of the most used for the verification of seed vigor and viability. Finally were analyze the results of experiments to determine the germination cardinal temperatures - minimum, optimum and maximum - for some species of orchids. / No ano de 2008, o Laboratório de Cultura de Tecidos Vegetais da Faculdade de Ciências Agrárias da Universidade do Oeste Paulista estabeleceu uma parceria com o Orchid Seed Stores for Sustainable Use (OSSSU) Project - Darwin Initiave - para a criação de um banco de sementes de orquídeas na Unoeste, em Presidente Prudente, SP. O objetivo desse empreendimento foi colaborar com a conservação ex situ da maior família de plantas que, devido à intensa degradação ambiental e exploração desenfreada, é também uma das mais ameaçadas de extinção. O armazenamento de sementes em bancos de germoplasma se dá em baixas condições de umidade e temperatura e possui grandes vantagens, pois as numerosas e pequenas sementes podem ser conservadas por anos a custos muito reduzidos. No entanto, tal estratégia pressupõe procedimentos como testes de viabilidade para a seleção de lotes a serem conservados, monitoramento da qualidade das sementes armazenadas e eventuais testes de germinação para a produção de indivíduos a serem reintroduzidos em sistemas naturais. Desta forma, o presente trabalho trata do estabelecimento do banco de sementes na Unoeste e de sua importância para a conservação da biodiversidade das orquídeas. Também estão descritos os resultados dos procedimentos de pré-condicionamento, testados com o intuito de melhorar a qualidade do teste de tetrazólio, um dos mais utilizados para a verificação da viabilidade das sementes. Por fim analisa-se o resultado de experimentos para a determinação das temperaturas cardeais de germinação – mínima, ótima e máxima – para algumas espécies de orquídeas do gênero Cattleya.

A multiplicação de espécies como as da planta de urucum tem limitações em função do conhecimento limitado das características morfológicas e fisiológicas das sementes e das plântulas e da restrição de métodos para determinar a qualidade dessas sementes. Assim, o objetivo dessa pesquisa foi estudar métodos para determinar a viabilidade e o vigor das sementes de urucum (Bixa Orellana L.). Para tanto foram utilizadas sementes de quatro acessos genéticos mantidos pelo Instituto Agronômico, em Campinas, SP, analisadas em duas etapas; na primeira, foram avaliados os métodos para os testes de germinação e de tetrazólio e, na segunda, métodos para estimar o vigor que incluíram os testes de condutividade elétrica, de envelhecimento acelerado e de frio e a determinação do comprimento da plântula. A avaliação da qualidade das sementes foi complementada pela determinação do teor de água, pelos testes de germinação, primeira contagem e classificação de vigor da plântula, pelo desenvolvimento da plântula e determinações do teor de bixina e da composição química das sementes. A adequação dos métodos propostos para caracterizar a qualidade das sementes de urucum foi verificada também pelo progresso da deterioração das sementes durante o armazenamento, pelo período de um ano. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância e comparação de médias por meio do teste de Tukey a 5% de probabilidade. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que independentemente do acesso genético, o intervalo adequado de temperatura, favorável para germinação de sementes de urucum, é o entre 29,5°C e 31°C, e o substrato papel (entre papel). Para o teste de tetrazólio os métodos entre papel ou imersão em água são adequados para hidratar as sementes e o teor de água indicado é 40%; os períodos de duas horas, quatro horas ou seis horas são eficientes para avaliar a viabilidade das sementes. Os testes de condutividade elétrica utilizando 25 ou 50 sementes, hidratadas em 50 ou 75mL de água destilada a 20°C ou 25°C por oito horas, 16 horas ou 24 horas, o de envelhecimento acelerado com água ou solução salina por 72 horas ou 96 horas e o de frio nas temperaturas de 15°C ou 20°C por cinco ou sete dias são eficientes para classificar as sementes de urucum quanto à qualidade. / The multiplication of annatto plant has limitations due to the limited knowledge of the morphological and physiological characteristics of seeds and seedlings and restricted methods to determine the quality of the seed. The objective of this research was to study methods to determine the viability and vigor of annatto seeds (Bixa Orellana L.). Four seeds genetic access kept by the Agronomic Institute of Campinas, SP were used for research, analyzed in two stages: firstly, methods for testing the germination and tetrazolium and in the second, methods were evaluated to estimate the vigor, electrical conductivity, accelerated aging and cold and seedling length. The evaluation of seed quality was complemented by the determination of water content, germination test, the first count and seedling vigor classification, seedling development and the determination of bixin and seeds chemical composition. The appropriateness of the proposed methods to characterize the quality of annatto seeds was also verified by the progress of seed deterioration during storage for one year. The experimental design was completely randomized with four replications. The results were subjected to variance analysis and means were compared by the Tukey test at 5% probability. According to the results, regardless of the genetic access, the appropriate temperature range for annatto seeds germination is between 29,5°C and 31°C, and the paper substrate (between paper). To tetrazolium test the methods between paper or water immersion are appropriate to hydrate the seeds and the water content appropriate is 40%. The periods two hours, four hours or six hours are efficient to evaluate the seeds viability. The electrical conductivity test using 25 or 50 seeds, hydrated in 50 or 75 mL of distilled water, the temperature of 20°C and 25°C for eight hours, 16 hours or 24 hours, the accelerated aging with water and salt solution for 72 hours or 96 hours and the cold tests at temperatures of 15°C or 20°C for five or seven days are effective for classify the annatto seeds quality.

A multiplicação de espécies como as da planta de urucum tem limitações em função do conhecimento limitado das características morfológicas e fisiológicas das sementes e das plântulas e da restrição de métodos para determinar a qualidade dessas sementes. Assim, o objetivo dessa pesquisa foi estudar métodos para determinar a viabilidade e o vigor das sementes de urucum (Bixa Orellana L.). Para tanto foram utilizadas sementes de quatro acessos genéticos mantidos pelo Instituto Agronômico, em Campinas, SP, analisadas em duas etapas; na primeira, foram avaliados os métodos para os testes de germinação e de tetrazólio e, na segunda, métodos para estimar o vigor que incluíram os testes de condutividade elétrica, de envelhecimento acelerado e de frio e a determinação do comprimento da plântula. A avaliação da qualidade das sementes foi complementada pela determinação do teor de água, pelos testes de germinação, primeira contagem e classificação de vigor da plântula, pelo desenvolvimento da plântula e determinações do teor de bixina e da composição química das sementes. A adequação dos métodos propostos para caracterizar a qualidade das sementes de urucum foi verificada também pelo progresso da deterioração das sementes durante o armazenamento, pelo período de um ano. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância e comparação de médias por meio do teste de Tukey a 5% de probabilidade. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que independentemente do acesso genético, o intervalo adequado de temperatura, favorável para germinação de sementes de urucum, é o entre 29,5°C e 31°C, e o substrato papel (entre papel). Para o teste de tetrazólio os métodos entre papel ou imersão em água são adequados para hidratar as sementes e o teor de água indicado é 40%; os períodos de duas horas, quatro horas ou seis horas são eficientes para avaliar a viabilidade das sementes. Os testes de condutividade elétrica utilizando 25 ou 50 sementes, hidratadas em 50 ou 75mL de água destilada a 20°C ou 25°C por oito horas, 16 horas ou 24 horas, o de envelhecimento acelerado com água ou solução salina por 72 horas ou 96 horas e o de frio nas temperaturas de 15°C ou 20°C por cinco ou sete dias são eficientes para classificar as sementes de urucum quanto à qualidade. / The multiplication of annatto plant has limitations due to the limited knowledge of the morphological and physiological characteristics of seeds and seedlings and restricted methods to determine the quality of the seed. The objective of this research was to study methods to determine the viability and vigor of annatto seeds (Bixa Orellana L.). Four seeds genetic access kept by the Agronomic Institute of Campinas, SP were used for research, analyzed in two stages: firstly, methods for testing the germination and tetrazolium and in the second, methods were evaluated to estimate the vigor, electrical conductivity, accelerated aging and cold and seedling length. The evaluation of seed quality was complemented by the determination of water content, germination test, the first count and seedling vigor classification, seedling development and the determination of bixin and seeds chemical composition. The appropriateness of the proposed methods to characterize the quality of annatto seeds was also verified by the progress of seed deterioration during storage for one year. The experimental design was completely randomized with four replications. The results were subjected to variance analysis and means were compared by the Tukey test at 5% probability. According to the results, regardless of the genetic access, the appropriate temperature range for annatto seeds germination is between 29,5°C and 31°C, and the paper substrate (between paper). To tetrazolium test the methods between paper or water immersion are appropriate to hydrate the seeds and the water content appropriate is 40%. The periods two hours, four hours or six hours are efficient to evaluate the seeds viability. The electrical conductivity test using 25 or 50 seeds, hydrated in 50 or 75 mL of distilled water, the temperature of 20°C and 25°C for eight hours, 16 hours or 24 hours, the accelerated aging with water and salt solution for 72 hours or 96 hours and the cold tests at temperatures of 15°C or 20°C for five or seven days are effective for classify the annatto seeds quality.

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AntoniaATS_DISSERT.pdf: 913546 bytes, checksum: d8262ad4e9d559fb8809834484072eae (MD5) Previous issue date: 2016-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this work was to study the tetrazolium test efficiency to verify the viability of okra seeds. The first experiment tested whether pre-conditioning and preparation methods. To overcome cutaneous hardness, we evaluated three methods to the best way of preconditioning: sulfuric acid (96%) for 1, 3 and 6 minutes; warm water (60 ° C) for 3, 6 and 10 minutes and ethyl alcohol ( 98%) for 30, 60 and 90 minutes. Four replications of 25 seeds were used, then the seeds were immersed in water at 25 ° C for 18 hours and then exposed to tetrazolium solution (with or without cut) at concentrations of 0.025 to 0.1% for 30, 60, 90 and 120 minutes in a germination chamber. The seeds were classified in four classes: discolored seed, poor coloring, satisfactory and excessive. The second experiment was carried out based on the results of the previous experiment. For this, four lots of okra seeds were subjected to preconditioning soaking in alcohol for 60 minutes followed by 18 hours of direct immersion in water at 25 ° C. Then, the seeds were cut longitudinally, immersed in 0.025 solutions; 0.050 and 0.075% for 60, 90 and 120 minutes and maintained in a growth chamber at 35 and 40° C. After this period, the seeds were classified with basis on the color (bright red pink or strong red carmine). At the same time, the germination test was installed, and the results were used as reference to the tetrazolium test. The experiment was conducted in a completely randomized design, in a factorial 3 x 3 + 1, three concentrations of the tetrazolium salt, three periods of immersion and the witness. The average of viable seeds tetrazolium test were compared by Tukey test at 5% significance level. The comparison between the means of the tetrazolium test and the germination test was taken by Dunnett test at 5% significance level. For preconditioning phase, it is recommended soaking seeds in alcohol for 60 minutes followed by 18 hours of immersion in distilled water at 25 ° C. The completion of the facilitated penetration of the cutting tetrazolium solution. For staining, we must use the concentration of 0.025% in 90 minutes time. The tetrazolium test is effective to estimate the viability of okra seeds in tetrazolium solution of 0.075% for 90 minutes / O objetivo desse trabalho foi estudar a eficiência do teste de tetrazólio para verificar a viabilidade de sementes de quiabo. No primeiro experimento, testaram-se métodos de pré-condicionamento e preparo. Para superar a dureza tegumentar, foram avaliados três métodos visando à melhor forma de pré-condicionamento: ácido sulfúrico (96%) por 1, 3 e 6 minutos; água quente (60 °C) por 3, 6 e 10 minutos e álcool etílico (98%) durante 30, 60 e 90 minutos, utilizando quatro repetições de 25 sementes. Posteriormente, as sementes foram imersas em água a 25 °C por 18 horas e, em seguida, expostas à solução de tetrazólio (com e sem corte) nas concentrações de 0,025 e 1% durante 30, 60, 90 e 120 minutos em câmara de germinação. As sementes foram classificadas em quatro classes: sementes descoloridas, coloração fraca, satisfatória e excessiva. O segundo experimento foi realizado com base nos resultados do experimento anterior. Para isso, quatro lotes de sementes de quiabo foram submetidos ao pré-condicionamento de imersão em álcool por 60 minutos seguido de 18 horas de embebição direta em água a 25 ºC. Em seguida, as sementes foram seccionadas longitudinalmente, imersas em soluções de 0,025; 0,050 e 0,075% por 60, 90 e 120 minutos e mantidas em câmara de germinação, a 35 e 40 °C. Após esse período, as sementes foram classificadas com base na coloração (vermelho brilhante rosa ou vermelho carmim forte). Paralelamente, foi instalado o teste de germinação, cujos resultados foram empregados como referência para o teste de tetrazólio. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualisado, em esquema fatorial 3 x 3 + 1, sendo três concentrações do sal de tetrazólio, três períodos de imersão e a testemunha. As médias de sementes viáveis do teste de tetrazólio foram comparadas pelo teste Tukey a 5% de significância. Já a comparação entre as médias do teste de tetrazólio e o teste de germinação foi feita pelo teste de Dunnett a 5% de significância. Para a fase de pré-condicionamento, recomenda-se a imersão das sementes em álcool por 60 minutos, seguida de 18 horas de embebição em água destilada a 25 ºC. A realização do corte facilitou a penetração da solução de tetrazólio. O teste de tetrazólio é eficiente para estimar a viabilidade em sementes de quiabo, na concentração de 0,075% sob temperatura de 35°C por 90 minutos

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AntoniaATS_DISSERT.pdf: 913546 bytes, checksum: d8262ad4e9d559fb8809834484072eae (MD5) Previous issue date: 2016-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this work was to study the tetrazolium test efficiency to verify the viability of okra seeds. The first experiment tested whether pre-conditioning and preparation methods. To overcome cutaneous hardness, we evaluated three methods to the best way of preconditioning: sulfuric acid (96%) for 1, 3 and 6 minutes; warm water (60 ° C) for 3, 6 and 10 minutes and ethyl alcohol ( 98%) for 30, 60 and 90 minutes. Four replications of 25 seeds were used, then the seeds were immersed in water at 25 ° C for 18 hours and then exposed to tetrazolium solution (with or without cut) at concentrations of 0.025 to 0.1% for 30, 60, 90 and 120 minutes in a germination chamber. The seeds were classified in four classes: discolored seed, poor coloring, satisfactory and excessive. The second experiment was carried out based on the results of the previous experiment. For this, four lots of okra seeds were subjected to preconditioning soaking in alcohol for 60 minutes followed by 18 hours of direct immersion in water at 25 ° C. Then, the seeds were cut longitudinally, immersed in 0.025 solutions; 0.050 and 0.075% for 60, 90 and 120 minutes and maintained in a growth chamber at 35 and 40° C. After this period, the seeds were classified with basis on the color (bright red pink or strong red carmine). At the same time, the germination test was installed, and the results were used as reference to the tetrazolium test. The experiment was conducted in a completely randomized design, in a factorial 3 x 3 + 1, three concentrations of the tetrazolium salt, three periods of immersion and the witness. The average of viable seeds tetrazolium test were compared by Tukey test at 5% significance level. The comparison between the means of the tetrazolium test and the germination test was taken by Dunnett test at 5% significance level. For preconditioning phase, it is recommended soaking seeds in alcohol for 60 minutes followed by 18 hours of immersion in distilled water at 25 ° C. The completion of the facilitated penetration of the cutting tetrazolium solution. For staining, we must use the concentration of 0.025% in 90 minutes time. The tetrazolium test is effective to estimate the viability of okra seeds in tetrazolium solution of 0.075% for 90 minutes / O objetivo desse trabalho foi estudar a eficiência do teste de tetrazólio para verificar a viabilidade de sementes de quiabo. No primeiro experimento, testaram-se métodos de pré-condicionamento e preparo. Para superar a dureza tegumentar, foram avaliados três métodos visando à melhor forma de pré-condicionamento: ácido sulfúrico (96%) por 1, 3 e 6 minutos; água quente (60 °C) por 3, 6 e 10 minutos e álcool etílico (98%) durante 30, 60 e 90 minutos, utilizando quatro repetições de 25 sementes. Posteriormente, as sementes foram imersas em água a 25 °C por 18 horas e, em seguida, expostas à solução de tetrazólio (com e sem corte) nas concentrações de 0,025 e 1% durante 30, 60, 90 e 120 minutos em câmara de germinação. As sementes foram classificadas em quatro classes: sementes descoloridas, coloração fraca, satisfatória e excessiva. O segundo experimento foi realizado com base nos resultados do experimento anterior. Para isso, quatro lotes de sementes de quiabo foram submetidos ao pré-condicionamento de imersão em álcool por 60 minutos seguido de 18 horas de embebição direta em água a 25 ºC. Em seguida, as sementes foram seccionadas longitudinalmente, imersas em soluções de 0,025; 0,050 e 0,075% por 60, 90 e 120 minutos e mantidas em câmara de germinação, a 35 e 40 °C. Após esse período, as sementes foram classificadas com base na coloração (vermelho brilhante rosa ou vermelho carmim forte). Paralelamente, foi instalado o teste de germinação, cujos resultados foram empregados como referência para o teste de tetrazólio. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualisado, em esquema fatorial 3 x 3 + 1, sendo três concentrações do sal de tetrazólio, três períodos de imersão e a testemunha. As médias de sementes viáveis do teste de tetrazólio foram comparadas pelo teste Tukey a 5% de significância. Já a comparação entre as médias do teste de tetrazólio e o teste de germinação foi feita pelo teste de Dunnett a 5% de significância. Para a fase de pré-condicionamento, recomenda-se a imersão das sementes em álcool por 60 minutos, seguida de 18 horas de embebição em água destilada a 25 ºC. A realização do corte facilitou a penetração da solução de tetrazólio. O teste de tetrazólio é eficiente para estimar a viabilidade em sementes de quiabo, na concentração de 0,075% sob temperatura de 35°C por 90 minutos

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-24Bitstream added on 2014-06-13T18:34:44Z : No. of bitstreams: 1 silva_cb_me_jabo.pdf: 2648759 bytes, checksum: 11269f5f7ec29529935ef54ee49855c3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O desenvolvimento de procedimentos sensíveis para rápida obtenção de informações precisas sobre o potencial fisiológico de lotes de sementes é essencial para o desenvolvimento de programas de controle de qualidade pelas empresas produtoras das mesmas. Nesta pesquisa, foi avaliada a eficiência de diferentes testes de vigor na determinação do potencial fisiológico de sementes de crotalária e, o desempenho das mesmas sob condições de estresse hídrico. O estudo foi conduzido em duas etapas, sendo a primeira relativa à seleção de procedimentos adequados para a condução dos testes de condutividade elétrica, envelhecimento acelerado, tetrazólio e de um sistema automatizado de análise de imagem de plântulas (Seed Vigor Imaging System – SVIS). Na segunda etapa, as sementes foram submetidas a diferentes situações de disponibilidade hídrica, utilizando-se soluções aquosas de polietileno glicol (PEG 6000). Para tal, foram utilizados cinco lotes de sementes. Os testes de condutividade elétrica, envelhecimento acelerado com solução salina saturada e o uso do software SVIS em plântulas com três dias de idade podem detectar eficientemente diferenças de vigor entre lotes de sementes de crotalária. O desempenho fisiológico de sementes dessa espécie é fortemente afetado pelo estresse hídrico / The development of sensitive procedures for quickly obtaining accurate information on the physiological potential of seed lots is essential for developing quality control programs by seed companies. In this research, were evaluated the efficiency of different vigor tests to determine the physiological potential of sunn-hemp seeds, and the performance of seeds under water stress. The study was conducted in two stages: the first consisted of the selection of appropriate procedures for the electrical conductivity, accelerated aging and tetrazolium tests, and of an automated system of seedling imaging analysis (Seed Vigor Imaging System – SVIS). In the second stage, the seeds were submitted to different water stress using aqueous solutions of polyethylene glycol (PEG 6000). The electrical conductivity, and accelerated aging with a saturated salt solution tests, and the SVIS on 3-day old seedlings can efficiently detect differences in vigor between sunn-hemp seed lots. The seeds physiological performance is strongly affected by water stress