Orientador: Marlus Chorilli / Banca: Maria Vitória Lopes Badra Bentley / Banca: Renata Fonseca Vianna Lopez / Banca: Carlota de Oliveira Rangel Yagui / Banca: Raquel Mantuanelli Scarel Caminaga / Resumo: O câncer bucal é uma doença altamente incidente na população mundial, podendo provocar invalidez, deformidades faciais e morte. O tratamento de escolha é a quimioterapia e radioterapia, que causam vários efeitos adversos como xerostomia, mucosite, perda de cabelo, náusea, dores e vômitos. A administração de moléculas bioativas, como o peptídeo antitumoral CTT1, demonstrou ser um tratamento inovador e eficaz para o câncer bucal. No entanto, peptídeos apresentam baixa biodisponibilidade oral, o que diminui o desempenho clínico do tratamento. Portanto, a sua administração pela via bucal incorporado em sistemas nanoestruturados mucoadesivos precursores de cristais líquidos (SPCL) constituídos por álcool cetílico etoxilado 20 e propoxilado 5, ácido oleico e fase aquosa contendo água (FA), dispersão polimérica de quitosana (FQ), dispersão polimérica de polietilenoimina (FP) ou dispersão de quitosana associada a polietilenoimina (FPQ) surge como uma valiosa estratégia, visto que a mucosa bucal apresenta alta permeabilidade e alta irrigação sanguínea, o que pode aumentar a absorção do CTT1. Ademais, o SPCL possibilita a incorporação concomitante do CTT1 com o fotossensibilizante azul de metileno (AM), permitindo a associação da terapia fotodinâmica (TFD) à terapia peptídica antitumoral, o que pode potencializar o tratamento do câncer bucal. O objetivo do trabalho foi avaliar o potencial de SPCL mucoadesivos para administração bucal do peptídeo CTT1 associados à TFD no tratamento do c... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Oral cancer is a highly incident disease in the world population, and can cause disability, facial deformities and death. The treatment of choice is chemotherapy and radiotherapy, which cause various adverse effects like xerostomia, mucositis, hair loss, nausea, aches and vomiting. The administration of bioactive molecules, such as the antitumor peptide CTT1, has proven to be an innovative and effective treatment for oral cancer. However, peptides have low oral bioavailability, which decreases the clinical performance of the treatment. Therefore, its administration by the oral route incorporated in liquid crystal precursor (SPCL) mucoadhesive nanostructured systems consisting of ethoxylated ethoxylated 20 and propoxylated cetyl alcohol 5, oleic acid and aqueous phase containing water (FA), polymer dispersion of chitosan (CF), dispersion (FP) or polyethyleneimine-associated chitosan dispersion (FPQ) arises as a valuable strategy, since the buccal mucosa has high permeability and high blood supply, which may increase the uptake of CTT1. In addition, SPCL allows the simultaneous incorporation of CTT1 with the methylene blue photosensitizer (MA), allowing the association of photodynamic therapy (PDT) with antitumor peptide therapy, which may potentiate oral cancer treatment. The objective of this study was to evaluate the potential of mucoadhesive SPCL for buccal administration of the CTT1 peptide, as well as to evaluate the use of PDT using AM as a photosensitizer in oral cancer therapy. SPCL were characterized by polarized light microscopy (MLP), low-angle X-ray scattering (SAXS), in vitro mucoadhesion rheology and texture profile tests, which showed that all formulations acted as SPCL because (FPQ-P) and AM (FPQ-AM) were added to the liquid crystals after the addition of artificial saliva, and FPQ formed a more mucoadhesive and structured liquid crystal... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Silvio Issáo Myaki / Banca: Maria Naira Pereira Friggi / Banca: Yasmin Rodarte Carvalho / Resumo: O objetivo deste estudo in vitro foi analisar ao microscópio de luz polarizada o comportamento do esmalte decíduo adjacente a quatro materiais restauradores, após um desafio desmineralizante. Foram realizados preparos cavitários de Classe V nas faces vestibulares de quarenta molares decíduos hígidos, os quais foram aleatoriamente divididos em quatro grupos experimentais (n=10) de acordo com os seguintes materiais: uma resina composta modificada por poliácidos (Dyract AP), uma resina composta híbrida (Z-250), um cimento de ionômero de vidro modificado por resina (Vitremer) e um cimento de ionômero de vidro convencional (Fuji IX GP Fast). Após o polimento das restaurações, os espécimes foram impermeabilizados e submetidos a um desafio desmineralizante representado pela imersão dos espécimes em gelatina acidificada (pH4,5) em temperatura ambiente por 14 dias. Após este período, os espécimes foram incluídos em resina e seccionados longitudinalmente obtendo-se secções de 100µm de espessura, que foram embebidas em água destilada para análise ao microscópio de luz polarizada. Os resultados obtidos revelaram formação de lesões artificiais de cárie em todos os grupos e os valores de profundidade da lesão externa, obtidos por meio de análise histomorfométrica, foram submetidos aos testes estatísticos de Kruskal-Wallis e Dunn (5%) constatando-se que o grupo do cimento de ionômero de vidro exibiu profundidade da lesão externa significantemente menor do que o grupo restaurado com resina composta. Concluiu-se que a desmineralização do esmalte decíduo pode ser influenciada pelo uso de diferentes materiais restauradores / Abstract: The aim of this in vitro study was to evaluate by polarized light microscopy the development of artificial carious lesions in primary teeth adjacent to different restorative materials. Buccal class V restorations were prepared in 40 deciduous human molars with margins in enamel which were ramdonly divided into four groups (n=10): a poliacid modified resin composite (Dyract AP); a hybrid resin composite (Z-250); a resin-modified glass ionomer cement (Vitremer) and a conventional glass ionomer cement (Fuji IX GP Fast). After the restorative procedures, all teeth surfaces were coated with nail polish, except for the restoration area and 1 mm rim of tooth structure. ln order to induce artificial carious lesions, the specimens were immersed into an acidified gel (pH 4,5) for 14 days at room temperature. After this, the specimens were prepared for polarized light microscopy in an imbibition's media of water. The results showed the development of caries lesions in all groups. The data was analysed by Kruskal-Wallis and Dunn's test (5%) and the specimens restored with glass ionomer cement exhibited- the depth of caries significantly lower than the group restored with composite resin. lt was concluded that the restorative material can influence the demineralization of primary enamel / Mestre

Orientador: Marlus Chorilli / Banca: Marcos Antonio Correa / Banca: Maria Valéria Robles Velasco / Resumo: O acetato de dexametasona (DXM) é um potente anti-inflamatório e imunossupressor utilizado principalmente no tratamento de doenças inflamatórias, auto-imunes e alérgicas; inibindo o acúmulo de células inflamatórias na zona de inflamação. A DXM promove uma série de efeitos colaterais sistêmicos, sobretudo a Síndrome de Cushing. Dessa forma, sua aplicação tópica pode ser conveniente de forma a localizá-lo no seu sítio de ação, evitando-se efeitos adversos sistêmicos. O polioxietileno 20 cetil éter forma sistemas de fase hexagonal e cúbica em contato com água. Os sistemas microemulsionados e líquido-cristalinos de fase hexagonal e cúbica têm demonstrado grande vantagem na liberação tópica de várias substâncias dada às características de interação com o estrato córneo e outras camadas da pele. Os objetivos desta pesquisa foram desenvolver e caracterizar sistemas micro e nanoestruturados acrescidos de DXM. Foram desenvolvidos sistemas empregando água, polieoxietileno 20 cetil éter e polieter funcional siloxano. Após delimitação das regiões, foram selecionados alguns sistemas de fase hexagonal e cúbica e um sistema microemulsionado para incorporação do fármaco. A caracterização do sistema foi realizada empregando microscopia de luz polarizada (MLP), espalhamento de raios-X de baixo ângulo (SAXS) e reologia. Realizaram-se ensaios de validação de metodologia analítica para quantificação de DXM por CLAE, comprovando que o método foi linear, exato e preciso. Os ensaios de SAXS corroboram com os de MLP e com as características reológicas dos sistemas, que evidenciaram que as microemulsões apresentaram módulo de perda maior que módulo elástico, resultando em um sistema pouco estruturado quando comparado às formulações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The dexamethasone acetate (DXM) is a potent anti-inflammatory and immunosuppressive drug used mainly in the treatment of inflammatory diseases, autoimmune and allergic reactions, inhibiting the accumulation of inflammatory cells in the inflammation area. The DXM promotes a number of systemic side effects, especially Cushing's syndrome. Thus, topical application may be appropriate in order to find it on it site of action, avoiding systemic adverse effects. The polyoxyethylene 20 cetyl ether forms hexagonal and cubic phase systems in contact with water. The microemulsion and liquid-crystalline phase of hexagonal and cubic system have shown great advantage in topical delivery of various substances given to the characteristics of interaction with the stratum corneum and other skin layers. The objectives of this research were to develop and characterize micro- and nanostructured systems containing DXM. Systems have been developed using water, polyoxyethylene 20 cetyl ether and polyether functional siloxane. After defining the regions, some hexagonal and cubic phase systems and a microemulsion system were selected for incorporation of the drug. The system characterization was carried out using polarized light microscopy (MLP), SAXS and rheology. Validation assays of analytical methodology were performed for quantification of DXM by HPLC, showing that the method was linear, accurate and precise. The SAXS experiments corroborate with the MLP and the rheological characteristics of the systems, which showed that the microemulsions had loss modulus greater than the elastic modulus, resulting in a less structured system when compared... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Regina Maria Puppin-Rontani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-18T20:38:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_AndreaMeloMoutinhoda_D.pdf: 2391111 bytes, checksum: 52fe5970c3df03dc29ac02dce02f7cb2 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Apesar do avanço da Odontologia Preventiva, a doença cárie ainda apresenta-se com alta prevalência na população geral, podendo considerar a superfície oclusal como a mais susceptível à manifestação de lesão subsuperficial, devido aos aspectos morfológicos estruturais. Porém, grande parte dos estudos in vitro de indução de cárie incipiente é dirigida em superfície lisa, escassos são os trabalhos em superfície oclusal. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar quantitativamente por Microdureza Transversal (MD) e qualiquantitativamente por Microscopia de Luz Polarizada (LP) o efeito do tipo de superfície (oclusal e lisa) e tempo de imersão (10h e 16h) em solução desmineralizadora subsaturada por hidroxiapatita, na produção de lesão artificial subsuperficial de cárie em esmalte (LASCE). Terceiros molares humanos recém-extraídos foram limpos e seccionados, obtendo-se por dente: dois fragmentos da superfície lisa (L) e um da oclusal (O). Para padronizar os dentes a serem submetidos ao desafio cariogênico o bloco mais plano da superfície lisa foi submetido à análise de microdureza, os dentes selecionados foram os que apresentaram dureza em torno da média com variação de mais ou menos 10%. Destes 45 blocos da superfície lisa e 45 da superfície oclusal do mesmo dente foram aleatoriamente selecionados, os fragmentos foram cobertos com verniz ácido-resistente deixando uma área de 4x4 mm de esmalte exposto e divididos aleatoriamente em três grupos (n=15) para cada substrato superfície lisa - L [Controle (CoL), 10 horas (10L) e 16 horas (16L)] e superfície oclusal - O [Controle (CoO), 10horas (10O) e 16 horas (16O)]. Posteriormente, os espécimes foram imersos na solução desmineralizadora subsaturada em relação à hidroxiapatita pelo tempo determinado de cada grupo, lavados e seccionados longitudinalmente na área exposta em duas partes. Cada parte de um fragmento foi embutida em resina acrílica, polida e analisada em MD e LP. Para análise da MD foram feitas 10 endentações em diferentes profundidades: 10, 20, 30, 40, 50, 70, 90, 110, 140, 170 ?m em 3 pontos distintos, obtendo-se as médias em cada profundidade. Para LP, a profundidade das lesões foram tomadas medias lineares da profundidade da lesão em 3 distâncias distintas e as médias obtidas. Foi realizada uma análise multivariada de modelo misto a três critérios para MD e o modelo misto a dois critérios para as medidas de LP. As comparações múltiplas foram obtidas pelo teste de Tukey (p<0,05). Os resultados mostraram haver interação significativa entre os fatores grupo e profundidade (p<0,001). Independente da profundidade. A comparação geral pelas médias indicou que a MD na face O foi significativamente maior que na L, independente dos grupos e da profundidade. Quanto à profundidade das lesões, pode-se observar tanto na superfície L quanto O que o tamanho das lesões no tempo 16h (16L: 160,5?m; 16O:123,8?m) foram significativamente maiores que o tempo 10h (10L:97,6?m; 10O:115,4?m). Dessa forma, a imersão na solução desmineralizadora, independente do tempo 10 h ou 16 h, formou lesão de cárie subsuperficial em ambas as superfícies L e O. Estes resultados sugerem que o método adotado de indução química de lesão de cárie pode ser utilizado tanto em superfície lisa como em superfície oclusal nos estudos in vitro, independente do tempo 10 h ou 16 h / Abstract: Although preventive dentistry has constantly improved, dental caries is still highly prevalent in general population, whereas the occlusal surface is found to be the most susceptible to the onset of subsurface lesion, due to both morphologic and structural characteristics that can keep the dental biofilm undisturbed. However, most of the in-vitro studies on incipient caries induction is conducted on free surfaces of the tooth; scarce are the studies carried out on the occlusal surface. Thus, the objective of the present study was to assess quantitatively, by transversal microhardness (MH), as well as qualitative and quality quantitatively, by polarized light microscopy (PL), the effect of the immersion time (10h and 16h) on hydroxyapatite subsaturated demineralizing solution in order to produce subsurface artificial caries lesion in enamel (SACLE) on smooth and occlusal surfaces of third molar teeth. Human freshly extracted third molar teeth were cleaned and sectioned. It was possible to obtain two smooth (S) and one occlusal (O) fragments from each tooth. To standardize the teeth to be submitted to cariogenic challenge the block as flat smooth surface was submitted to microhardness analysis, the teeth selected were those with hardness around the average with a variation of plus or minus 10%. Of these 45 blocks and 45 of the smooth surface of the occlusal surface of the same tooth were randomly selected the fragments were covered with acid-resistant varnish except for an exposed area of 4 x 4 mm of enamel, being then randomly divided into three groups (n=15) for each substrate Smooth - S - [Control (CoS), 10 h (10S) and 16 h (16S)] and occlusal - O [Control (CoO), 10 h (10O) and 16 h (16O)] . Specimens were later immersed into the demineralizing for the specific period of each group, rinsed and sectioned in two parts through the long axis of the exposed area. Each part of a fragment was embedded into acrylic resin, polished and assessed by means of MH and PL. In order to carry out MH assessment, ten indentations were made in different depths: 10, 20, 30, 40, 50, 70, 90, 110, 140, 170 ?m at 3 different points, where the averages in each depth was obtained. For the PL assessment, the depths of the lesions were measured at 3 different distances, obtaining thus the averages. A multivariate assessment for mixed model was carried out at three criteria for MH and two criteria for the PL measurements. Multiple comparisons were submitted to Tukey test (p<0.05). Results showed that there was a significant interaction between the factors group and depth (p<0.001). General comparison of the averages indicated that MH in the O surface was significantly higher than in the S surface, regardless group and depth. Concerning lesion depth, it was possible to observe that the size of lesions for both S and O surfaces at 16 h (S:160.5 ?m; O:1238 ?m) were significantly greater than at time 10h (S: 97.6 ?m; O: 115.4 ?m). Thus, the immersion into the demineralizing solution, regardless of time 10 or 16h has formed subsurface caries lesion in both S and O surfaces. These results suggested that the approach used for caries lesion chemical induction can be used in both free and occlusal surfaces for in-vitro studies, regardless of time 10 h or 16 h / Doutorado / Odontopediatria / Doutor em Odontologia

Orientador: Maria Virginia Scarpa / Coorientador: Marcelo Gonzaga de Freitas Araújo / Banca : Luis Roberto Basso Junior / Banca : Leila Aparecida Chiavacci / Resumo: A curcumina é o constituinte majoritário encontrado no rizoma da planta Curcuma Longa L., e apresenta diversas atividades farmacológicas. Diversos estudos comprovaram que a curcumina possui excelente atividade antifúngica, sendo um princípio ativo natural promissor para o tratamento de doenças fúngicas. O objetivo específico deste trabalho foi o desenvolvimento de formulações contendo curcumina que possam ter ação contra a candidíase vulvovaginal (CVV). Para a análise estrutural das formulações foram utilizadas as técnicas de microscopia de luz polarizada, espalhamento de raios-X à baixo ângulos, difração de raios-X e comportamento reológico, sendo comprovado que os sistemas desenvolvidos apresentam características adequadas e satisfatórias para a aplicação pretendida e com propriedades mucoadesivas. O método analítico proposto para quantificação da curcumina foi revalidado e utilizado nos ensaios de estabilidade e liberação in vitro. As formulações desenvolvidas foram submetidas ao estudo de estabilidade preliminar, com o objetivo de garantir a segurança e eficácia das mesmas, e foi comprovada a estabilidade das formulações desenvolvidas. Posteriormente foram feitos os testes de liberação in vitro, para verificar a capacidade da curcumina de ser liberada a partir da formulação e exercer sua atividade farmacológica. O sistema emulsionado e o pseudoternário apresentaram taxas de liberação de 0,48% e 0,78% em 12 horas. A atividade farmacológica in vitro deste composto ativo, de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Curcumin is the main active compound found in rhizome of Curcuma Longa L. plant and has several pharmacological activities. Several studies have shown that curcumin has excellent antifungal activity and it is a promising natural active compound for treatment of fungal diseases. The research objective was formulations development containing curcumin that may have action against vulvovaginal candidiasis (VVC). For formulations structural analysis were used techniques as polarized light microscopy, small angle X-ray scattering, X-ray diffraction and rheological behavior, and the developed systems has presented adequate and satisfactory characteristics according with research objective and with mucoadhesive properties. The proposed analytical method for curcumin quantification was revalidated, then used in stability study and in vitro release assays. The formulations were submitted to a preliminary stability study to guarantee its safety and efficacy, this way stability was proven. Subsequently were performed in vitro release tests to verify the curcumin ability of release from formulations and to exert its pharmacological activity. The emulsified and pseudoternary systems presented release rates of 0.48% and 0.78% in 12 hours. With the in vitro pharmacological activity test was determined the minimal inhibitory concentration against yeast Candida albicans and also the effective concentration to be incorporated in the systems. After these tests was performed in vivo anti-VVC acti... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Marlus Chorilli / Coorientador: Taís Maria Bauab / Banca: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Marilisa Guimarães Lara / Resumo: A candidíase vulvovaginal (CVV) é uma infecção fúngica causada principalmente pela espécie Candida albicans, sendo considerada a mais prevalente em mulheres com idade fértil, acometendo cerca de 80-85% dos indivíduos ao menos uma vez na vida. Um crescente interesse tem sido observado na utilização de compostos de origem natural, como a curcumina, de forma a atuar contra este microrganismo. Todavia, algumas de suas propriedades físico-químicas, como baixa solubilidade aquosa, dificultam a sua utilização na terapêutica. Dessa forma, a sua incorporação em sistemas líquido-cristalinos mucoadesivos (SLCM) objetivando administração vaginal pode ser uma estratégia eficiente de tratamento, de forma a potencializar a ação do fármaco, bem como oferecer maior permanência da formulação no local de ação. O objetivo deste trabalho foi desenvolver SLCM constituídos por ácido oleico e ergosterol (5:1) como fase oleosa, ácido cetílico etoxilado e propoxilado (Procetyl® AWS) como tensoativo e dispersão polimérica de quitosana (1%) como fase aquosa, acrescidos de curcumina, e caracterizá-los empregando microscopia de luz polarizada, espalhamento de raios-X de baixo ângulo (SAXS), reologia, análise de textura e mucoadesão in vitro. Posteriormente, avaliou-se a ação antimicrobiana in vitro e in vivo do sistema contra cepas de C. albicans. Pelos ensaios de microscopia de luz polarizada as formulações apresentaram estruturas semelhantes à cruz de malta e campo escuro, características de fase lamela... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Vulvovaginal candidiasis (VVC) is a fungal infection mainly caused by the Candida albicans species. The disease is being considered the most prevalent in women of childbearing age, affecting approximately 80-85% of individuals at least once in life. An increasing interest has been observed in the use of compounds of natural origin, such as curcumin, in order to act against this microorganism. However, some of its physicochemical properties, such as low aqueous solubility, make it difficult to use in therapeutics. Thus, its incorporation into mucoadhesive liquid-crystalline systems (MLCS), with vaginal administration, can be an efficient treatment strategy in order to potentiate the action of the drug, as well as to offer a longer permanence of the formulation at the site of action. The aim of this work was to develop mucoadhesive liquid-crystalline systems consisting of oleic acid and ergosterol (5: 1) as oily phase, ethoxylated and propoxylated cetylic acid (Procetyl® AWS) as a surfactant and polymer dispersion of chitosan (1%) as aqueous phase, plus curcumin and characterize them using polarized light microscopy, low-angle X-ray scattering (SAXS), rheology, texture analysis and in vitro mucoadhesion. Subsequently, the antimicrobial action in vitro and in vivo of the system against C. albicans strains was evaluated. By polarized light microscopy, the formulations presented similar structures to the cross of malt and dark field, characteristics of lamellar phase and microemulsions, respectively, the results were confirmed by low-angle X-ray scattering. In vitro mucoadhesion assays demonstrated an increase in the mucoadhesive strength of the formulations in the presence of increasing concentrations of artificial vaginal mucus (AVM), corroborating rheology results, which showed high viscosity and elasticity of the formulations in the presence of AVM... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A proposta deste estudo in vitro foi otimizar o método microbiológico para a produção de lesão de mancha branca em esmalte que possa ser validada por ensaio não destrutivo (tomografia por coerência óptica - OCT) para possibilitar a utilização posterior dos espécimes em outros experimentos. Foram obtidos 168 fragmentos retangulares de esmalte bovino com janelas centrais de desmineralização de 3,0 x 3,0 mm. Os grupos experimentais foram compostos a partir de 3 fatores de variação: microrganismo (S. mutans UA 159, S. sobrinus 3347 e S. mutans + S. sobrinus), fonte de carboidrato (sacarose 1% e sacarose 1% + amido 1%) e tempo (1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7 dias). Assim, formaram-se seis grupos experimentais: G1 (S. mutans + sacarose), G2 (S. mutans + sacarose + amido), G3 (S. sobrinus + sacarose), G4 (S. sobrinus + sacarose + amido), G5 (S. mutans + S. sobrinus + sacarose), G6 (S. mutans + S. sobrinus + sacarose + amido), testados em 7 tempos de desafio cariogênico. Terminada esta etapa, foram obtidas imagens em escala de cada espécime pelo OCT, e em seguida os espécimes foram processados e submetidos à análise através de microscópio de luz polarizada. Em cada um dos métodos, foram realizadas 5 mensurações de profundidade da região desmineralizada. O teste estatístico de Análise de Variância (ANOVA) (p<0.05) detectou que os desafios cariogênicos testados foram capazes de desmineralizar o esmalte em profundidade, sendo influenciados pelo tipo de microrganismo, fonte de carboidrato e tempo (p=0,000). O Teste de Correlação de Pearson apresentou uma correlação significativa (p=0,000) entre as medidas de profundidade de desmineralização aferidas através dos métodos de luz polarizada e OCT. Logo, a tomografia por coerência óptica é um método não destrutivo válido para aferir a profundidade de desmineralização de lesões de mancha branca, que pode ser muito útil quando se objetiva obter substrato desmineralizado padronizado para estudos laboratoriais. Concluiu-se ainda que o desafio cariogênico realizado com microrganismo S. mutans UA 159, suplementado com sacarose como fonte de carboidrato por 6 dias, é capaz de produzir mancha branca de esmalte padronizada. Desta maneira, seria obtido um substrato modificado relevante para estudos laboratoriais. / The aim of this in vitro study was to optimize the microbiological method for the production of white spot lesions in enamel that can be validated by non-destructive test (optical coherence tomography - OCT) to enable the subsequent use of the specimens in other experiments. A hundred and sixty eight bovine enamel fragments with central windows of demineralization measuring 3,0 x 3,0 mm were obtained. The experimental groups were composed from three variation factors: the microorganism (S. mutans UA 159, S. sobrinus 3347 and S. mutans + S. sobrinus), carbohydrate source (1% sucrose and 1% sucrose + 1% starch) and time (1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7 days). Thus, six experimental groups were formed: G1 (S. mutans + sucrose), G2 (S. mutans + starch + sucrose), G3 (S. sobrinus + sucrose), G4 (S. sobrinus + starch + sucrose), G5 (S. mutans + S. sobrinus + sucrose), G6 (S. mutans + S. sobrinus + sucrose + starch) tested in 7 periods of cariogenic challenge. After this step, images in scale were obtained from each specimen with OCT, and then the specimens were processed and analysed by polarized light microscopy. In each of the methods were performed 5 measurements of demineralization depth. The statistical test Analysis of Variance (ANOVA) (p<0.05) detected that the cariogenic challenges tested were able to demineralize enamel in depth, regardless of the type of microorganism, carbohydrate source and time (p=0,000). The Pearson\'s Correlation Test showed a significant correlation (p=0,000) between the measurements of depth demineralization measured with polarized light microscopy and OCT. Therefore, the optical coherence tomography is a non-destructive method valid to measure the depth of demineralization of white spot lesions, which can be very useful when the objective is to obtain standard demineralized substrate for laboratory studies. It was also concluded that the cariogenic challenge performed with the microorganism Streptococcus mutans UA159, supplemented with sucrose as carbohydrate source for 6 days, is capable to produce standard white spot lesions in enamel. In this way, a modified substract relevant for laboratory studies could be obtained.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissPMC.pdf: 6652992 bytes, checksum: ded1eb1eecf60367b1a7f8223eddbe63 (MD5) Previous issue date: 2004-02-18 / A lot of therapeutic techniques are used to accelerate and/or stimulate the tendineous repair process, among this techniques we have the low level laser therapy (LLLT). Therefore, this study had the aim of evaluating the effects of LLLT, in different wavelengths and different densities energy, on the tendineous repair process of calcaneal tendon of mice. In this study was used 48 male mice. 40 animals were submitted to the unilateral total tenotomy induced in the middle portion of the right calcaneal tendon. The tendons weren&#8217;t sutured after the surgery, just the skin around the surgery. The animals were randomized divided in 3 experimental groups (1, 2 and 3) and each group were divided in two subgroups. The subgroup A was treated with laser of 685 nm, 3 J/cm2, the subgroup B was treated with laser 685 nm, 10 J/cm2, the subgroup C was treated with 830 nm, 3 J/cm2 and the subgroup D with laser 830 nm, 10J/cm2; the subgroups E and F were classifieds as injured control/placebo treatment and non-injured control. It was used the lasers 685 nm and diode GaAlAs (830 nm), the parameters used in both lasers were 15 mW, continuos, power density of 5,4 W/cm2 and doses of 3 J/cm2 and 10 J/cm2. The applications were made punctually in each 24 hours, during 12 consecutive days, in just one point on the injured lesion. All animals were killed on the 13º day after the surgery and the tendons were extracted cirurgically and prepared for qualitative and quantitative analysis carry out through of polarization microscopy for obtain data of state of concentration, aggregation, orientation and deposition of collagen fibers in the site of tenotomy, was used measures of total birefringence take in polarization microscopy. After, it was obtained a picture of each tendon in the polarization microscopy for the qualitative histologic analysis of the tissue. The data analysis were made using the non-parametric test of multiple comparations in order to compare the data of all subgroups. It was found through of difference of OR (nm) values corresponding for the total birefringence that the molecules of collagen of tendons in process of tissue repair answered to the LLLT during the period of data collection, probabily through the increase in the fibroblastic proliferation and collagen synthesis. The tendinous repair of the subgroup A (685 nm, 3 J/cm2) showed the best result, considering the level of tissue organization, orientation, state of macromolecular aggregation and collagen deposition in the site of lesion. This subgroup was statistically different from the other subgroup, because it showed a higher OR value than the other subgroups treated with laser and the subgroup injured control/placebo treatment. We can conclude that, in the conditions our work was developed, there are different organizational answers in the injuried tendineous tissue and treated with LLLT. Therefore, there is a relationship between the improvement in the tendineous repair and the laser parameters used. In this case there were an acceleration of the tendineous repair when used the laser 685 nm and the dose of 3 J/cm2. / Várias técnicas terapêuticas são utilizadas para acelerar e/ou estimular o processo de reparo tendíneo, dentre elas a terapia laser de baixa potência (LLLT). Assim, este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos do laser de baixa potência, aplicado a diferentes comprimentos de onda e diferentes densidades de energia sobre o processo de reparação tendínea no tendão calcanear de rato. Foram utilizados 48 ratos machos, onde 40 animais foram lesados por uma tenotomia total unilateral feita por cisalhamento induzida na porção média do tendão calcanear direito, os tendões não foram suturados após a incisão cirúrgica, somente a pele ao redor da incisão sofreu sutura. Os animais foram divididos aleatoriamente em 3 grupos experimentais homogêneos (1, 2 e 3), sendo que cada grupo foi subdividido em 2 subgrupos; o grupo 1 foi dividido em subgrupo A que recebeu tratamento com laser de 685 nm, 3 J/cm2 e subgrupo B que recebeu tratamento laser 685 nm, 10 J/cm2; o grupo 2 foi dividido em subgrupo C que recebeu tratamento com laser de 830 nm, 3 J/cm2 e subgrupo D cujo tratamento foi com laser de 830 nm, 10J/cm2 e o grupo 3 que também foi dividido em subgrupo E (CL/PL) e F (CP) que foram classificados como controle lesado/tratamento placebo e controle padrão respectivamente. Foram utilizados os lasers de 685 nm e o diodo Ga-Al-As (830 nm), os parâmetros dosimétricos utilizados para ambos os lasers foram (15 mW, contínuo, densidade de potência de 5,4 W/cm2 e doses de 3 J/cm2 e 10 J/cm2), as aplicações foram feitas pontualmente a cada 24 horas, durante 12 dias consecutivos, irradiando-se transcutaneamente um único ponto sobre a região da lesão. Todos os animais foram sacrificados no 13º de P.O. e seus tendões foram retirados cirurgicamente e processados para a análise qualitativa e quantitativa realizadas por meio da microscopia de luz polarizada para se obter dados sobre o estado de concentração, agregação, orientação e deposição das fibras colágenas no local da tenotomia, foi utilizado medidas de birrefringência total tomadas no microscópio de luz polarizada. Posteriormente os tendões foram fotografados no microscópio de polarização para a análise histológica qualitativa do tecido. A análise estatística utilizada foi o teste não-paramétrico de comparações múltiplas para a comparação de todos os subgrupos dois a dois afim de detectar possíveis diferenças estatísticas. Os achados demonstraram por meio de diferenças de valores de OR (nm), correspondentes à birrefringência total, que as moléculas de colágeno presentes nos tendões em processo de reparação tecidual responderam a LLLT durante o período da coleta do material, provavelmente através do aumento da proliferação fibroblástica e síntese de colágeno. A reparação tendínea do subgrupo A tratado com laser de 685 nm e 3 J/cm2 apresentou melhores resultados considerando o nível de organização, orientação, estado de agregação macromolecular e deposição das fibras colágenas no local da lesão, diferindo-se estatisticamente dos demais subgrupos, uma vez que este subgrupo apresentou valor de OR considerado estatisticamente maior que o OR dos demais subgrupos tratados com laser e o subgrupo controle lesado/tratamento placebo. Com base nos nossos resultados podemos concluir, nas condições que o nosso trabalho foi desenvolvido, que há diferenças na resposta organizacional do tecido tendíneo lesado e estimulado pela LLLT, há portanto uma relação de melhora do reparo tendíneo com a combinação dos parâmetros laser utilizados; neste caso houve aceleração do processo de reparação tendínea quando utilizou-se o laser de 685 nm e 3 J/cm2.

A proposta deste estudo in vitro foi otimizar o método microbiológico para a produção de lesão de mancha branca em esmalte que possa ser validada por ensaio não destrutivo (tomografia por coerência óptica - OCT) para possibilitar a utilização posterior dos espécimes em outros experimentos. Foram obtidos 168 fragmentos retangulares de esmalte bovino com janelas centrais de desmineralização de 3,0 x 3,0 mm. Os grupos experimentais foram compostos a partir de 3 fatores de variação: microrganismo (S. mutans UA 159, S. sobrinus 3347 e S. mutans + S. sobrinus), fonte de carboidrato (sacarose 1% e sacarose 1% + amido 1%) e tempo (1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7 dias). Assim, formaram-se seis grupos experimentais: G1 (S. mutans + sacarose), G2 (S. mutans + sacarose + amido), G3 (S. sobrinus + sacarose), G4 (S. sobrinus + sacarose + amido), G5 (S. mutans + S. sobrinus + sacarose), G6 (S. mutans + S. sobrinus + sacarose + amido), testados em 7 tempos de desafio cariogênico. Terminada esta etapa, foram obtidas imagens em escala de cada espécime pelo OCT, e em seguida os espécimes foram processados e submetidos à análise através de microscópio de luz polarizada. Em cada um dos métodos, foram realizadas 5 mensurações de profundidade da região desmineralizada. O teste estatístico de Análise de Variância (ANOVA) (p<0.05) detectou que os desafios cariogênicos testados foram capazes de desmineralizar o esmalte em profundidade, sendo influenciados pelo tipo de microrganismo, fonte de carboidrato e tempo (p=0,000). O Teste de Correlação de Pearson apresentou uma correlação significativa (p=0,000) entre as medidas de profundidade de desmineralização aferidas através dos métodos de luz polarizada e OCT. Logo, a tomografia por coerência óptica é um método não destrutivo válido para aferir a profundidade de desmineralização de lesões de mancha branca, que pode ser muito útil quando se objetiva obter substrato desmineralizado padronizado para estudos laboratoriais. Concluiu-se ainda que o desafio cariogênico realizado com microrganismo S. mutans UA 159, suplementado com sacarose como fonte de carboidrato por 6 dias, é capaz de produzir mancha branca de esmalte padronizada. Desta maneira, seria obtido um substrato modificado relevante para estudos laboratoriais. / The aim of this in vitro study was to optimize the microbiological method for the production of white spot lesions in enamel that can be validated by non-destructive test (optical coherence tomography - OCT) to enable the subsequent use of the specimens in other experiments. A hundred and sixty eight bovine enamel fragments with central windows of demineralization measuring 3,0 x 3,0 mm were obtained. The experimental groups were composed from three variation factors: the microorganism (S. mutans UA 159, S. sobrinus 3347 and S. mutans + S. sobrinus), carbohydrate source (1% sucrose and 1% sucrose + 1% starch) and time (1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7 days). Thus, six experimental groups were formed: G1 (S. mutans + sucrose), G2 (S. mutans + starch + sucrose), G3 (S. sobrinus + sucrose), G4 (S. sobrinus + starch + sucrose), G5 (S. mutans + S. sobrinus + sucrose), G6 (S. mutans + S. sobrinus + sucrose + starch) tested in 7 periods of cariogenic challenge. After this step, images in scale were obtained from each specimen with OCT, and then the specimens were processed and analysed by polarized light microscopy. In each of the methods were performed 5 measurements of demineralization depth. The statistical test Analysis of Variance (ANOVA) (p<0.05) detected that the cariogenic challenges tested were able to demineralize enamel in depth, regardless of the type of microorganism, carbohydrate source and time (p=0,000). The Pearson\'s Correlation Test showed a significant correlation (p=0,000) between the measurements of depth demineralization measured with polarized light microscopy and OCT. Therefore, the optical coherence tomography is a non-destructive method valid to measure the depth of demineralization of white spot lesions, which can be very useful when the objective is to obtain standard demineralized substrate for laboratory studies. It was also concluded that the cariogenic challenge performed with the microorganism Streptococcus mutans UA159, supplemented with sucrose as carbohydrate source for 6 days, is capable to produce standard white spot lesions in enamel. In this way, a modified substract relevant for laboratory studies could be obtained.

Orientadores: Raquel Fernanda Gerlach, Frederico Barbosa de Sousa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-17T01:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Porto_IsabelMaria_D.pdf: 20861055 bytes, checksum: 0299cefd6df5fb84fe2f7a034ca14273 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O esmalte é o tecido mais mineralizado do corpo. Esta característica o torna um tecido altamente conservado no período post mortem. Por isso ele é citado como o melhor tecido para se estudar matéria orgânica em fósseis no campo da antropologia, paleontologia e arqueologia. É possível também a determinação do sexo na ciência forense. Porém a dificuldade está em se extrair o conteúdo orgânico destes dentes, já que o esmalte maduro contém menos de 1% de proteínas. Dois estudos da presente tese descrevem um método muito eficiente em extrair proteínas do esmalte. Esta mineralização do esmalte dentário pode ser prejudicada por doenças, como a fluorose dentária por exemplo. Em nosso terceiro estudo, analisamos o perfil dos aminoácidos para saber se o flúor interfere na clivagem das amelogeninas. Neste estudo, a clivagem da amelogenina não é afetada pelo flúor em dentes humanos fluoróticos erupcionados e inclusos. O quarto estudo traz como hipótese que a distribuição espacial dos conteúdos bioquímicos nas lesões fluoróticas do esmalte se assemelha aquela observada na última onda de mineralização durante o estágio de maturação. Observou-se neste estudo que há um aumento do conteúdo orgânico e uma hipomineralização na superfície no esmalte fluorótico, tanto nos terceiros molares erupcionados quanto inclusos. Estes dados sugerem que a lesões fluoróticas em esmalte humano refletem a composição do esmalte no período tardio de maturação da amelogênese / Abstract: The dental enamel is the most highly mineralized tissue in the body. Due to its characteristics, the enamel is highly inert to changes brought about by time and the environment, being a very important source of information for palaeo-, palaeanthropo-, and anthropologists. The enamel proteins are also used for sex identification in forensic science. But protein recovery from the enamel it is a challenging task. Here, we present two studies that describe procedures very effective in providing enamel samples that are adequate for protein analysis. This mineralization could be impaired by diseases like dental fluorosis, for example. In the third study, we analyzed the amino acid profile in the erupted and nonerupted fluorotic human teeth compared to control ones. In this study the cleavage of amelogenin was not affected by fluoride in the fluorotic teeth. In the fourth study we hypothesized that the composition of fluorotic lesions may resemble the enamel found during last wave of enamel mineralization. We found an increase in the organic content and a superficial hypomineralization of the fluorotic enamel, in both erupted and non-erupted human third molars. These data suggest that in both non-erupted and erupted human teeth the fluorotic lesions resembles the late maturation stage enamel, which is not mineralized until maturation is completed / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental