Thesis (M.Sc.)--York University, 2009. Graduate Programme in Biology. / Typescript. Includes bibliographical references (leaves 53-57). Also available on the Internet. MODE OF ACCESS via web browser by entering the following URL: http://gateway.proquest.com/openurl?url_ver=Z39.88-2004&res_dat=xri:pqdiss&rft_val_fmt=info:ofi/fmt:kev:mtx:dissertation&rft_dat=xri:pqdiss:MR51603

Bone is one of the few organs capable of regeneration after a substantial injury. As the bone heals itself after trauma, the coupling of angiogenesis to osteogenesis is crucial for the restoration of the skeletal tissue. In prior studies we have shown that Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2), a potent agonist for skeletal formation is expressed by vessels making it a prime candidate that links the morphogenesis of the two tissues. To investigate the role of BMP2 in the coordination of vessel and bone formation, we used a tamoxifen inducible Smooth Muscle Actin (SMA) promoter that conditionally expresses Cre recombinases crossed with a BMP2 floxed mouse in order to conditionally delete the BMP2 gene in smooth muscle actin (SMA) expressing cells. Using the mouse femur as our model for bone regeneration, we performed a surgical technique called distraction osteogenesis (DO) where an osteotomy is created followed by distraction or a gradual separation of the two pieces of bone. This primarily promotes intramembranous ossification at the osteotomy site by mechanical stimulation. Tamoxifen treatment started at day 6 and continued throughout the experiment. At post-operative days 3, 7, 12, 17, 24, and 31, we analyzed the bone and vessel formation by plain X-ray, micro-computed tomography (µCT) and vascular contrast enhanced µCT, and quantitative polymerase chain reaction (qPCR) of selective genes. We assessed both the femur and surrounding tissue to obtain qualitative and quantitative assessments for skeletal and vascular formation. Our results demonstrated that the deletion of BMP2 in vascular tissue resulted in a reduction of angiogenesis in vivo followed by a decrease in skeletal tissue development.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-29Bitstream added on 2014-06-13T21:02:11Z : No. of bitstreams: 1 guskuma_mh_dr_araca.pdf: 465143 bytes, checksum: 0281f4cc114abd1f60018aa084e64214 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A proposta deste estudo foi avaliar a expressão de proteínas que participam da fase de osteoindução (VEGF, BMP-2 e CBFA1) durante o processo de regeneração óssea de defeitos criados em calvária de ratos e preenchidos com enxerto autógeno em bloco. MATERIAIS E MÉTODOS: Para o presente estudo foram utilizados 10 ratos adultos machos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) que receberam dois defeitos ósseos de 5 mm cada, em calvária. Os defeitos ósseos constituiram dois grupos experimentais (n=10): Grupo controle (CONT) (defeitos preenchidos com o próprio coágulo); Grupo enxerto (ENX) (defeitos preenchidos com osso autógeno removido do defeito contralateral). Os animais foram submetidos a eutanásia nos períodos de 7 e 30 dias pós-operatórios. RESULTADOS: A análise quantitativa demonstrou formação óssea significativamente maior no Grupo ENX, no entanto, a presença das proteínas estudadas foi significativamente maior no Grupo CONT em ambos os períodos de observação. CONCLUSÃO: O enxerto ósseo autógeno cortical em bloco não expressou de forma significativa as proteínas osteoindutoras estudadas durante o processo de reparo / AIMS: The proposal of this study was to evaluate the expression of proteins that act in osteoinduction (VEGF, BMP-2, CBFA1) phase during the bone defects regeneration created in rat calvaria and filled with autogenous bone graft in block. METHODS: For the present study, 10 adult male rats (Rattus norvegicus albinus, Wistar) had two 5mm- bone defects in calvaria. Bone defects constituted two experimental groups: CONTROL Group (defects filled with blood clot); GRAFT Group (defects filled with bone graft). Animals were sacrificed at 7 and 30 days post operative. RESULTS: Quantitative analysis showed significantly higher bone formation in Graft Group, however, the presence of studied proteins was significantly higher in Control Group in both observation periods. CONCLUSION: Autogenous cortical bone graft in block did not express the studied osteoinductive proteins during bone repair

Orientador: Roberta Okamoto / Banca: Wilson Roberto Poi / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Thallita Pereira Queiroz / Banca: Paulo Tambasco de Oliveira / Resumo: A neoformação óssea em defeitos críticos em calvária de ratos depende fortemente das propriedades osteocondutoras dos enxertos e biomateriais. Ainda é controverso se os biomateriais podem substituir os enxertos de osso autógeno e se a suplementação dos biomateriais com Proteínas Ósseas Morfogenéticas (BMPs) é necessária para melhorar a formação óssea. Examinamos defeitos críticos em calvária de ratos (5 mm de diâmetro) tratados com β-tricálcio fosfato (TCP; Cerasorb ® M), gel de ácido polilático e poliglicólico (PLA/PGA; Fisiograft®) e cimento de fosfato de cálcio (CPC; Norian® CRS®), isoladamente ou na presença de 5μg de BMP-2 após 45 dias. Defeitos tratados com enxerto de osso autógeno particulado e defeitos não tratados serviram como controle. A formação óssea foi avaliada com base na análise de μCT, análise histomorfométrica e análise de fluorescência. Nós relatamos que o TCP apoia a formação óssea de forma mais eficiente do que o enxerto de osso autógeno particulado. A formação óssea na presença de TCP sozinho atingiu um nível máximo de neoformação óssea, enquanto que a suplementação de BMP-2 falhou em melhorar a neoformação óssea. Em contrapartida, não houve diferença significativa na formação óssea quando o PLA / PGA e o CPC foram comparados ao enxerto autógeno. Além disso, a presença de BMP-2 não alterou substancialmente as propriedades osteocondutoras de PLA/PGA ou de CPC. Conclui-se que as propriedades osteocondutoras do TCP são superiores aos dos enxertos autógenos e que o TCP não exige suplementação de BMP-2. Nossos resultados também mostram que a diminuição da capacidade osteocondutora do PLA/PGA e do CPC não podem ser superadas pela suplementação de BMP-2 em defeitos de calvária de ratos / Abstract: Bone formation in critical-sized calvaria defects is strongly dependent on the osteoconductive properties of grafts. It remains a matter of controversy whether biomaterials can replace autografts and whether the supplementation of biomaterials with Bone Morphogenetic Proteins (BMPs) is necessary to enhance bone formation. We examined rat calvaria critical-sized defects (5mm diameter) treated with β-tricalcium phosphate (TCP; Cerasorb® M), polylactic and polyglycolic acid gel (PLA/PGA; Fisiograft®) and calcium phosphate cement (CPC; Norian® CRS®), either alone or in the presence of 5μg of BMP-2 after 45 days. Autografts and untreated defects served as controls. Bone formation was evaluated based on μCT analysis, histomorphometric analysis and fluorescence analysis. We report that TCP supported bone formation more efficiently than did autografts. Bone formation in the presence of TCP alone reached a maximal level, as BMP-2 supplementation failed to enhance bone formation. By contrast, no significant difference in bone formation was observed when PLA/PGA and CPC were compared to autografts. Moreover, the presence of BMP-2 did not substantially change the osteoconductive properties of PLA/PGA or CPC. We conclude that the osteoconductive properties of TCP are superior to those of autografts and that TCP does not require BMP-2 supplementation. Our findings also show that the decreased osteoconductive properties of PLA/PGA and CPC cannot be overcome by BMP-2 supplementation in rat calvaria defects / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:18:03Z : No. of bitstreams: 1 silva_vc_me_jabo.pdf: 1083755 bytes, checksum: 2d0de83ba52c01f35f8a0ede2c3b555e (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O uso de pastagens é a alternativa mais econômica para a alimentação de ruminantes. É de suma importância o conhecimento das características morfogênicas e estruturais dos pastos, uma vez que as mesmas determinam o índice de área foliar do relvado, refletindo diretamente no pastejo pelos animais. O experimento foi conduzido no período de janeiro/2010 a junho/2010, com o objetivo de avaliar as características morfogênicas, estruturais e a dinâmica do perfilhamento do capim tanzânia em diferentes índices de área foliar residual (IAFr), sob pastejo rotacionado por cabras Anglonubiano. Os tratamentos consistiram de três IAF residual (0,8; 1,6 e 2,4). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos completos casualizados, em arranjo de parcelas subdividas no tempo, com seis repetições e um total de 18 unidades experimentais. Para determinação do período de descanso foi adotado o critério de 95% de interceptação luminosa (condição de pré-pastejo). Foram avaliadas, no pré e pós pastejo, as alturas do dossel, IL, IAF, massa de forragem e as características morfogênicas e estruturais dos pastos. A altura média, IL e IAF dos dosséis no pré pastejo decresceram com a diminuição do IAFr. No pós pastejo, os IAFr 0,8 e 2,4 apresentaram maior e menor valor de IL, de 35,93 e 62,50%, respectivamente. No pré-pastejo os valores dos componentes de massa dos pastos mantidos sob IAFr 2,4 foram superiores (P<0,10), quando comparados aos pastos sob IAFr 0,8. Houve um aumento nos valores de massa verde seca (8696,85 kg/MS/ha) e massa seca total (12082,00 kg/MS/ha), conforme o ciclo de pastejo, devido principalmente à contribuição da massa seca de colmo (MSC). O período que compreendeu o último ciclo de pastejo teve a TApF 32% menor quando comparada aos primeiro e segundo ciclos de pastejo. O último ciclo de pastejo (Abr/Mai) apresentou TAlF inferior comparadas aos... / The use of pastures is the most economical way to feed ruminants. It is of paramount importance the knowledge of the morphogenetic and structural characteristics of the pasture, since they determine the leaf area index of the sward, is directly reflected by the grazing animals. The experiment was carried from janeiro2010 to June/2010, in order to evaluate the morphogenesis, structure and dynamics of tillering of Guinea grass in different residual LAI under rotational grazing by goats Anglo Nubian. The treatments consisted of three residual rLAI (0.8, 1.6 and 2.4). The experimental design was a complete randomized block, with a split plot arrangement, with six replication and a total of 18 plots. For the determination of rest period has been adopted the criterion of 95% light interception (under pre-grazing). There were evaluated before and after grazing, the sward heights, IL, LAI, herbage mass and the morphogenetic and structural characteristics of the pastures. The average height, canopy LAI and IL pre grazing decreased with decreasing rLAI. In the post grazing, the rLAI 0.8 and 2.4 showed higher and lower LI of 35.93 and 62.50% respectively. In the pre-grazing values of the components of the mass of swards under 2.4 rLAI were higher (P<0,10) when compared to pastures under rLAI 0.8. There was an increase in the values of green dry mass (8696,85 kg / DM / ha) and total dry mass (12082,00 kg / DM / ha) as the grazing cycle, mainly due to the contribution of the dry mass of stem (DMS). The period that included the last period of grazing had LAI 32% lower when compared to the first and second grazing cycles. The last grazing cycle (Apr / May) had markedly lower compared to previous cycles (Mar / Apr). The lifespan of leaves (VPD) was affected by treatments (rLAI) and the grazing season (P<0.10). The rLAI 2.4 resulted in longer life compared to rLAI 0.8 and 1.6. No significant rLAI ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-22Bitstream added on 2014-06-13T20:50:50Z : No. of bitstreams: 1 santos_pl_me_araca.pdf: 11429192 bytes, checksum: d6972580cfad1fbdb5b39c5833a3da0b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O propósito deste trabalho foi avaliar o efeito da osteotomia para implantes, seguindo o protocolo de cirurgia guiada comparando-o com a clássica, sobre o aquecimento tecidual, bem como verificar o desgaste das fresas por microscopia eletrônica de varredura e a viabilidade celular imediata. Para isso foram utilizadas tíbias de 20 coelhos, divididos em 2 grupos – GRUPO CONTROLE (GC) e GRUPO GUIADA (GG) - os quais foram divididos em 5 subgrupos (G): G0, GI, G2, G3, G4, que corresponderam às fresas sem uso e as utilizadas 10, 20, 30 e 40 vezes, respectivamente. Cada animal recebeu 10 seqüências de osteotomias, sendo 5 de cada grupo, aleatoriamente em cada tíbia, na velocidade de 1600 r.p.m, e por meio de irrigação externa. A oscilação térmica tecidual durante cada fresagem foi quantificada por meio de termopares. As brocas foram analisadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e a quantificação da deformação das fresas foi realizada por meio do software ImageLab 2000. As áreas osteotomizadas foram coletadas, processadas para inclusão em parafina, e submetidas ao processamento imunoistoquímico para a expressão das proteínas osteoprotegerina (OPG), Receptor Ativador do Fator Nuclear k (RANKL), osteocalcina (OC) e caspase 3(cas 3). Os dados obtidos por meio da análise térmica foram submetidos ao teste de Mann-Whitney (p=0,05), já os valores de deformação das brocas foram submetidos ao teste t. O aquecimento ósseo no GG foi estatisticamente maior do que no GC. Na análise por meio do MEV, não houve diferença estatística entre os grupos, mas verificou-se que a deformação foi progressiva de acordo com a maior utilização das fresas. Na análise da viabilidade celular, não houve diferença... / The purpose of this study was to evaluate the effect of osteotomy for implants, following the protocol guided surgery comparing it with the classical, tissue heating, check the wear of the drills by scanning electron microscopy, and cell viability. For such purpose, the tibia of 20 rabbits were divided into 2 groups - Control Group (CG) and GUIDED GROUP (GG) - which were divided into five subgroups (G): G0, GI, G2, G3, G4, which corresponded to the cutters without used and used 10, 20, 30 and 40 times respectively. Each animal received 10 sequences osteotomies, 5 in each group randomly in each tibia at a speed of 1600 rpm, and through external irrigation. The tissue thermal oscillation during each milling was measured using thermocouples. The drills were analyzed by scanning electron microscopy (SEM), and quantification of the deformation of the cutters was performed using the software ImageLab2000. Osteotomized areas were collected, processed for paraffin, and subjected to immunohistochemical processing for the protein expression of osteoprotegerin (OPG), Receptor Activator of Nuclear Factor k (RANKL), osteocalcin (OC) and caspase 3 (cas 3). The data obtained by thermal analysis were tested using the Mann-Whitney test (p = 0.05), the strain values of the drills were tested using parametric t-test. Results in the heating bone in the GG was statistically higher than in CG. In the analysis by means of SEM, it was found that deformation was progressive in accordance with the increased use of milling drills. In the analysis of cell viability, no statistical difference when comparing each protein, OPG, RANKL and CASPASE-3, between groups. In the comparison between the OC and GG GC, there was a statistically significant difference. According to the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-05-29Bitstream added on 2014-06-13T18:19:52Z : No. of bitstreams: 1 zanetti_nm_me_jabo.pdf: 847982 bytes, checksum: c0960b3258ff6b50bfdd4f45e2574a53 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo teve como objetivo avaliar comparativamente os efeitos do emprego do ultrassom pulsado de baixa intensidade e da proteína morfogenética óssea (rhBMP-2) sobre a consolidação do osso in vivo. Foram realizadas ostectomias bilaterais do rádio de 24 coelhos machos, da raça Nova Zelândia Branco, seguido da análise qualitativa (avaliação clínica, histológica e radiográfica) e quantitativa (histomorfometria óssea e bioquímica) da falha óssea preenchida ou não com gel de quitosana. Denominaram-se seis grupos experimentais com quatro animais cada (GI – grupo controle, GII – grupo ultrassom, GIII – grupo quitosana, GIV – grupo quitosana e ultrassom, GV – grupo quitosana e rhBMP-2 e GVI – grupo quitosana, rhBMP-2 e ultrassom). As avaliações radiográficas e a mensuração da fosfatase alcalina sérica foram executadas durante o período experimental. Os fragmentos de tecido provenientes da falha óssea dos coelhos sacrificados no 30o e 45o dia foram submetidos à avaliação histológica e histomorfométrica. Os diferentes métodos de avaliação empregados neste estudo demonstraram que o preenchimento do defeito ósseo foi superior nos casos em que foi empregada a terapia ultrassônica associada à implantação do gel ativado com a proteína osteoindutora. Os coelhos que receberam o implante livre da proteína (GIII e GIV) tiveram o processo de reparo ósseo comprometido. Foi possível concluir que o ultrassom acelerou o preenchimento da falha óssea e que o gel de quitosana, embora tenha induzido processo inflamatório, foi capaz de carrear a rhBMP-2, permitindo a ação sinérgica entre o ultrassom e a proteína. / This comparative study evaluated in vivo responses of bone healing under low intensity pulsed ultrasound and bone morphogenetic protein (rhBMP-2) treatment in experimental bone defects filled or not with chitosan gel. Twenty four New Zealand White rabbits were assigned in six experimental groups, four animals each (GI – control group, GII – ultrasound group, GIII – chitosan group, GIV – chitosan plus ultrasound group, GV – chitosan with rhBMP-2 and GVI – chitosan with rhBMP-2 plus ultrasound). It was performed a qualitative (radiographic, histological and clinical evaluation) and quantitative research (histomorphometrical and biochemical analysis) of bone healing. The radiographic and serum alkaline phosphatase evaluation was performed during the experimental period. Histological and bone histomorphometry was applied for bone sample evaluation from sacrificed rabbits (30th and 45th days). The different evaluation methods used in this study showed that defect filling was improved when the treatment was based on the association between ultrasound and activated chitosan gel. The bone defects filled with non-activated gel (GIII and GIV) showed a delay in bone healing. This study had demonstrate that low intensity ultrasound improves bone healing process, that chitosan gel is a good carrier for rhBMP-2 even when it induced an inflammatory reaction, allowing a synergetic effect between ultrasound and protein.

Orientador: João Guilherme Padilha Filho / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Patricia Popak Giordano / Resumo: Este estudo teve como objetivo avaliar comparativamente os efeitos do emprego do ultrassom pulsado de baixa intensidade e da proteína morfogenética óssea (rhBMP-2) sobre a consolidação do osso in vivo. Foram realizadas ostectomias bilaterais do rádio de 24 coelhos machos, da raça Nova Zelândia Branco, seguido da análise qualitativa (avaliação clínica, histológica e radiográfica) e quantitativa (histomorfometria óssea e bioquímica) da falha óssea preenchida ou não com gel de quitosana. Denominaram-se seis grupos experimentais com quatro animais cada (GI - grupo controle, GII - grupo ultrassom, GIII - grupo quitosana, GIV - grupo quitosana e ultrassom, GV - grupo quitosana e rhBMP-2 e GVI - grupo quitosana, rhBMP-2 e ultrassom). As avaliações radiográficas e a mensuração da fosfatase alcalina sérica foram executadas durante o período experimental. Os fragmentos de tecido provenientes da falha óssea dos coelhos sacrificados no 30o e 45o dia foram submetidos à avaliação histológica e histomorfométrica. Os diferentes métodos de avaliação empregados neste estudo demonstraram que o preenchimento do defeito ósseo foi superior nos casos em que foi empregada a terapia ultrassônica associada à implantação do gel ativado com a proteína osteoindutora. Os coelhos que receberam o implante livre da proteína (GIII e GIV) tiveram o processo de reparo ósseo comprometido. Foi possível concluir que o ultrassom acelerou o preenchimento da falha óssea e que o gel de quitosana, embora tenha induzido processo inflamatório, foi capaz de carrear a rhBMP-2, permitindo a ação sinérgica entre o ultrassom e a proteína. / Abstract: This comparative study evaluated in vivo responses of bone healing under low intensity pulsed ultrasound and bone morphogenetic protein (rhBMP-2) treatment in experimental bone defects filled or not with chitosan gel. Twenty four New Zealand White rabbits were assigned in six experimental groups, four animals each (GI - control group, GII - ultrasound group, GIII - chitosan group, GIV - chitosan plus ultrasound group, GV - chitosan with rhBMP-2 and GVI - chitosan with rhBMP-2 plus ultrasound). It was performed a qualitative (radiographic, histological and clinical evaluation) and quantitative research (histomorphometrical and biochemical analysis) of bone healing. The radiographic and serum alkaline phosphatase evaluation was performed during the experimental period. Histological and bone histomorphometry was applied for bone sample evaluation from sacrificed rabbits (30th and 45th days). The different evaluation methods used in this study showed that defect filling was improved when the treatment was based on the association between ultrasound and activated chitosan gel. The bone defects filled with non-activated gel (GIII and GIV) showed a delay in bone healing. This study had demonstrate that low intensity ultrasound improves bone healing process, that chitosan gel is a good carrier for rhBMP-2 even when it induced an inflammatory reaction, allowing a synergetic effect between ultrasound and protein. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-22Bitstream added on 2014-06-13T21:00:42Z : No. of bitstreams: 1 casagrande_dr_me_jabo.pdf: 395284 bytes, checksum: 72f661526d93863790c9ca71cddffce5 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo foi realizado com o objetivo avaliar as características morfogênicas e o acúmulo de forragem do dossel de Brachiaria brizantha cv. Marandu em função de diferentes ofertas de forragem, em regime de desfolha intermitente, ao longo da estação chuvosa. O experimento foi realizado no setor de forragicultura da FCAV, no período chuvoso de 2005/2006. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, utilizando o esquema de parcelas subdivididas, com três repetições. Nas parcelas foi avaliado o efeito das ofertas de forragem (4, 7, 10 e 13 % de OF) e na subparcela o efeito dos ciclos de pastejo (CP). Foram avaliadas as seguintes variáveis: altura do dossel comprimido, massa de forragem, dinâmica de acúmulo de forragem e características morfogênicas e estruturais. Observou-se aumento da altura do dossel comprimido com acréscimo da OF. Da mesma forma foi verificado acréscimo na massa de forragem. Constatou-se aumento da massa de forragem, pós pastejo, com a sucessão dos CP, exceto para OF de 4 %, que se manteve constante (3181 kg/ha) ao longo dos CP. Apenas a taxa de alongamento de colmo, das características morfogênicas sofreu alteração em função da OF, sendo que, esta variável aumentou linearmente com a OF. A densidade de perfilhos vegetativos aumentou linearmente com a intensidade de pastejo, no entanto, a densidade de perfilhos reprodutivos e totais ajustou-se ao modelo quadrático. Observou-se tendência de maior acúmulo de forragem nas OF intermediárias (7 e 10 %). Sendo assim, concluise que OF ao redor de 8 % parece ser a mais indicada para o manejo de pastagem de capim - Marandu em pastejo rotacionado. / The present study aimed to evaluate the morphogenetic characteristics and the herbage accumulation of Brachiaria brizantha cv. Marandu swards in function different herbage allowance, managed on intermittent stocking during the summer season. The experiment was carried out at Departamento de Zootecnia, FCAV/UNESP, in the summer period of 2005/2006 year. The experimental design was the complete randomized block, with split plot scheme, and three replications. In the plot the effect of the herbage allowance was evaluated (4, 7, 10 and 13% of HA) and in the split plot the effect of the grazing cycles (GC). There were evaluated the following variables: height of the compressed sward, forage mass, forage accumulation dynamics and morphogenetic and structural characteristics. An Increase of the compressed sward height was observed with increment of HA. Thus, the increase in the herbage mass was verified. An increase herbage mass after grazing was verified with the GC succession, except for 4% of HA, which kept constant (3181 kg/ha) along GC. The stem elongation rate, was the only morphogenetic characteristics altered in function of HA and, this variable increased lineally with HA. The vegetative tiller density increased lineally with the grazing intensity. However, reproductive and total density of tillers was adjusted to the quadratic model. There was a tendency of larger forage accumulation in intermediate HA (7 and 10%). As conclusion the HA around 8% showed the most suitable for grassland management with Marandu-grassin rotational stocking.

Este estudo analisou a influência de diferentes superfícies de titânio na adesão, proliferação e diferenciação de células semelhantes a osteoblastos de rato (osteo-1) em culturas, na presença ou não da proteína morfogenética óssea recombinante-2 (rhBMP-2). As células osteo-1 foram cultivadas sobre as seguintes superfícies de titânio: 1. superfície lisa, 2. superfície desgastada com partículas de areia e condicionamento ácido (SLA) e 3. superfície desgastada com partículas de areia e condicionamento ácido sob proteção de nitrogênio e armazenadas em solução isotônica de cloreto de sódio (SLActive), na presença ou não de 20 ng/ml de rhBMP-2. Foram analisadas a adesão celular em 24 horas, o conteúdo total de proteínas, o conteúdo de colágeno e a atividade de fosfatase alcalina em 7, 14 e 21 dias e a formação de nódulos calcificados em 21 dias. Os resultados mostraram que a adesão não foi influenciada nem pelo tipo de superfície nem pelo tratamento com rhBMP-2 (p=0,0936). Quando relacionamos o conteúdo total de proteínas ao número total de células, percebemos que a proliferação não foi influenciada pelo tipo de superfície de titânio, porém a adição de rhBMP-2 levou a uma redução estatisticamente significante na superfície SLA aos 21 dias (p=0,0000). Em relação à diferenciação, pudemos observar que o tipo de superfície não influenciou o conteúdo total de proteínas, o conteúdo de colágeno e a formação de nódulos calcificados em quaisquer dos períodos analisados. A atividade de fosfatase alcalina somente foi influenciada pelo tipo de superfície aos 14 dias, onde o grupo C/SLAactive apresentou valores inferiores ao grupo C/Liso (p=0,0000). A adição de rhBMP-2 promoveu uma maior influência sobre o processo de diferenciação, levando a uma redução estatisticamente significante no conteúdo total de proteínas na superfície SLA aos 21 dias (p=0,0000), a um aumento estatisticamente significante no conteúdo de colágeno na superfície SLActive no período de 7 dias (p=0,0005) e a uma diminuição estatisticamente significante na atividade de fosfatase alcalina na superfície lisa nos períodos de 14 e 21 dias, na superfície SLA aos 14 dias e na superfície SLActive aos 21 dias (p=0,0000). Somente a formação de nódulos calcificados não sofreu influência da adição de rhBMP-2. / This study has analyzed the influence of different titanium surfaces in the adhesion, proliferation and differentiation of rat osteoblast-like cells (osteo-1 culture), in the presence or not, of the recombinant bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2). The osteo-1 cells were grown on the following titanium surfaces: 1. smooth surface; 2. coarse grit-blasted and acid-etched surface (SLA); and 3. coarse grit-blasted and acid-etched surface under nitrogen protection, and stored in sodium chloride isotonic solution (SLActive), in the presence or not, of 20 ng/ml of rhBMP-2. It was analyzed the cell adhesion in 24 hours, the total protein content, the collagen content, and the alkaline phosphatase in 7, 14 and 21-day periods, and also the formation of calcified nodules in 21 days. The results showed that the adhesion was neither influenced by the surface type, nor by the treatment with rhBMP-2 (p=0.0936). When we related the total protein content to the total number of cells, we noticed that the proliferation was not influenced by the titanium surface type; however, the addition of rhBMP-2 led to a statistically significant reduction on the SLA surface at 21 days (p=0.0000). Concerning the differentiation, we could observe that the surface type did not influence the total content of proteins, the collagen content and the formation of calcified nodules in any of the analyzed periods. The alkaline phosphatase activity was only influenced by the surface type at 14 days, where the group C/SLActive presented lower values than the group C/Smooth (p=0.0000). The addition of rhBMP- 2 promoted a bigger influence over the differentiation process, thus leading to a statistically significant reduction in the total protein content on the SLA surface at 21 days (p=0.0000), a statistically significant increase in the collagen content on the surface SLActive in the 7-day period (p=0.0005), a statistically significant reduction in the alkaline phosphatase activity on the smooth surface in the 14 and 21-day periods, on the SLA surface at 14 days, and on the SLActive surface at 21 days (p=0.0000). Only the formation of calcified nodules did not undergo influence of the rhBMP-2 addition.