Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 1996. / Vita. Includes bibliographical references (leaves [72]-87).

Dissertation (Ph.D.) -- University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, 2008. / Vita. Bibliography: p. 96-110.

Thesis (Ph.D.) -- University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, 2005. / Embargoed. Vita. Bibliography: 170-172.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:32:57Z : No. of bitstreams: 1 lima_arr_me_botfm.pdf: 825853 bytes, checksum: 593e370c7aa688abb20c1b7dda04672a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Estudos clínicos e experimentais têm sugerido que anormalidades da musculatura esquelética podem colaborar para a ocorrência precoce de dispnéia e fadiga em pacientes com insuficiência cardíaca crônica. Em músculos periféricos e respiratórios, frequentemente observa-se modificação na composição das cadeias pesadas da miosina (MyHC) na insuficiência cardíaca. Os mecanismos e vias intracelulares de sinalização responsáveis pela alteração das MyHCs ainda não estão completamente definidos. Na insuficiência cardíaca direita induzida por monocrotalina, foi verificado que a expressão dos fatores de regulação miogênica está associada a alterações no fenótipo das MyHC. Recentemente, foi verificado que o fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α) pode modular a expressão de proteínas miofibrilares. Não identificamos estudos que avaliaram o papel dos fatores de regulação miogênica e a influência do TNF-α na composição das MyHCs no músculo diafragma durante a insuficiência cardíaca. O objetivo deste estudo é determinar se modificações nas isoformas das MyHCs são selacionadas a alterações na expressão gênica dos fatores de regulação miogênica no músculo diafragma de ratos com infarto do miocárdio, com e sem insuficiência cardíaca. Adicionalmente, verificamos se as concentrações séricas de TNF-α e de IL-6 estão relacionadas a alterações das MyHCs e da expressão gênica dos fatores de regulação miogênica. Insuficiência cardíaca foi induzida pro infarto do miocárdio. Seis meses após a cirurgia, foram constituídos três grupos de animais: Sham (n=10), IM/IC- (animais infartados com disfunção ventricular e sem insuficiência cardíaca, n=10) e IM/IC+ (animais infartados com insuficiência cardíaca, n=10). As estruturas cardíacas e a função ventricular foram avaliadas por ecocardiograma... / Several clinial and experimental studies have suggested that skeletal muscle abnormalities can contribute to early fatigue and dyspnea in heart failure patients. Changes of myosin heavy chain (MyHC) isoforms have been frequently observed in peripheral and respiratory muscles during heart failure. Pathophysiological mechanisms and intracellular signaling pathways involved on MyHCs alterations are not completely defined. In monocrotaline-induced right heart failure, it was observed that the expression of myogenic regulatory factors is associated with MyHCs phenotype changes. Tumoral necrosis factor-alpha (TNF-α) has been recently described to modulate skeletal myofibril proteins. We did not find studies evaluating the influence of myogenic regulatory factors and TNF-α serum concentration on diaphragm MyHC isoforms during heart failure. In this study we tested the hypothesis that diaphragm MyHC isoforms changes are related to myogenic regulatory factors gene expression in chronic heart failure. Additionally, we measured TNF-α and interleukin-6 serum levels to examine their correlation with both MyHC isoforms and myogenic regulatory factors gene expression. A coronary ligation nodel was employed to induce heart failure. Six months after the surgical procedure, three groups of rats were studied: Sham (n=10), infarcted rats without heart failure (MI/HF-, n=10), and infarcted rats with heart failure (MI/HF+, n=10). Cardiac structures and ventricular function were assessed by transthoracic echocardiogram. MyHC isoforms were analyzed by protein electrophoresis. Muscle fiber cross-sectional area was measured in hematoxilin-eosin stained sections and in sections submitted to NADH-TR reaction. Myogenic regulatory factors miogenin, MyoD, and MRF4 gene expression was evaluated by real time RT-PCR; TNF-α and interleukin-6 serum levels werre quantified by... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: Estudos clínicos e experimentais têm sugerido que anormalidades da musculatura esquelética podem colaborar para a ocorrência precoce de dispnéia e fadiga em pacientes com insuficiência cardíaca crônica. Em músculos periféricos e respiratórios, frequentemente observa-se modificação na composição das cadeias pesadas da miosina (MyHC) na insuficiência cardíaca. Os mecanismos e vias intracelulares de sinalização responsáveis pela alteração das MyHCs ainda não estão completamente definidos. Na insuficiência cardíaca direita induzida por monocrotalina, foi verificado que a expressão dos fatores de regulação miogênica está associada a alterações no fenótipo das MyHC. Recentemente, foi verificado que o fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α) pode modular a expressão de proteínas miofibrilares. Não identificamos estudos que avaliaram o papel dos fatores de regulação miogênica e a influência do TNF-α na composição das MyHCs no músculo diafragma durante a insuficiência cardíaca. O objetivo deste estudo é determinar se modificações nas isoformas das MyHCs são selacionadas a alterações na expressão gênica dos fatores de regulação miogênica no músculo diafragma de ratos com infarto do miocárdio, com e sem insuficiência cardíaca. Adicionalmente, verificamos se as concentrações séricas de TNF-α e de IL-6 estão relacionadas a alterações das MyHCs e da expressão gênica dos fatores de regulação miogênica. Insuficiência cardíaca foi induzida pro infarto do miocárdio. Seis meses após a cirurgia, foram constituídos três grupos de animais: Sham (n=10), IM/IC- (animais infartados com disfunção ventricular e sem insuficiência cardíaca, n=10) e IM/IC+ (animais infartados com insuficiência cardíaca, n=10). As estruturas cardíacas e a função ventricular foram avaliadas por ecocardiograma... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Several clinial and experimental studies have suggested that skeletal muscle abnormalities can contribute to early fatigue and dyspnea in heart failure patients. Changes of myosin heavy chain (MyHC) isoforms have been frequently observed in peripheral and respiratory muscles during heart failure. Pathophysiological mechanisms and intracellular signaling pathways involved on MyHCs alterations are not completely defined. In monocrotaline-induced right heart failure, it was observed that the expression of myogenic regulatory factors is associated with MyHCs phenotype changes. Tumoral necrosis factor-alpha (TNF-α) has been recently described to modulate skeletal myofibril proteins. We did not find studies evaluating the influence of myogenic regulatory factors and TNF-α serum concentration on diaphragm MyHC isoforms during heart failure. In this study we tested the hypothesis that diaphragm MyHC isoforms changes are related to myogenic regulatory factors gene expression in chronic heart failure. Additionally, we measured TNF-α and interleukin-6 serum levels to examine their correlation with both MyHC isoforms and myogenic regulatory factors gene expression. A coronary ligation nodel was employed to induce heart failure. Six months after the surgical procedure, three groups of rats were studied: Sham (n=10), infarcted rats without heart failure (MI/HF-, n=10), and infarcted rats with heart failure (MI/HF+, n=10). Cardiac structures and ventricular function were assessed by transthoracic echocardiogram. MyHC isoforms were analyzed by protein electrophoresis. Muscle fiber cross-sectional area was measured in hematoxilin-eosin stained sections and in sections submitted to NADH-TR reaction. Myogenic regulatory factors miogenin, MyoD, and MRF4 gene expression was evaluated by real time RT-PCR; TNF-α and interleukin-6 serum levels werre quantified by... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Marina Politi Okoshi / Coorientador: Katashi Okoshi / Banca: Márcia Koike / Banca: Paula Schmidt Azevedo Gaiolla / Mestre

Orientador: Maeli Dal Pai Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-05T10:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lopes_FrancisdaSilva_M.pdf: 7866898 bytes, checksum: ade20c607baab16a33f7564ca3630b10 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A insuficiência cardíaca (IC) é caracterizada pela intolerância ao exercício físico, devido à fadiga precoce e à dispnéia. Entre as alterações que podem contribuir para a dispnéia nesta síndrome, tem sido descrita a miopatia diafragmática com atrofia e mudanças na miosina de cadeia pesada (MHC) do tipo II "rápida" para a do tipo I "lenta". Entretanto, os mecanismos regulatórios músculos específicos que alteram a expressão das isoformas de miosinas no diafragma durante a IC não são conhecidos. O objetivo do presente trabalho foi determinar, no músculo diafragma (DIA) de ratos Wistar com IC induzida por monocrotalina, se a transição da expressão protéica das MHCs está associada com alterações na expressão do RNAm dos fatores de regulação miogênicos (MRF). A região costal do diafragma de ratos Wistar machos (3-4 semanas de idade; 80-100g) dos grupos IC (n= 09) e Controle (CT; n= 06) foi estudada quando os sinais de IC estavam evidentes, aproximadamente 22 dias após a administração da monocrotalina nos animais IC. A expressão de MyoD e miogenina foi determinada através da técnica de RT-PCR enquanto que a expressão das MHCs foi estudada através de eletroforese por gel de poliacrilamida. Os animais com IC apresentaram diminuição tanto na expressão protéica da MHC Ila/llx quanto na expressão gênica de MyoD, sem alterar a expressão das MHCs I e IIb e da miogenina. Em conclusão, na IC, a alteração na expressão do RNAm da MyoD pode, em parte, explicar a alteração na expressão protéica da MHC Ilalllx / Abstract: Heart failure (HF) is characterized bya reduced tolerance to exercise due to early fatigue and dyspnea. Alterations that may contribute to dyspnea in this syndrome are diaphragmatic myopathy with atrophy and shift from type 11 "fast" to type I "slow" myosin heavy chain (MHC). However, the skeletal muscle-specific molecular regulatory mechanisms that alter MHC expression in the diaphragm during heart failure have not been defined. The purpose of this investigation was to determine whether myosin heavy chain expression during heart failure is associated with changes in myogenic regulatory factors (MRFs) mRNA expression in Wistar rat diaphragm with heart failure (HF) induced by monocrotaline. Costal diaphragm (DIA) muscle from HF (n=09) and control (n=06) 3-4 week old, 80-100g male Wistar rats was studied when overt HF had developed in the HF animais 22 days after monocrotaline administration. MyoD and myogenin expression were determined by RT-PCR, MHC isoform expression was determined by polyacrylamide gel electrophoresis. HF animais presented decreased myosin heavy chain lIa/llx protein isoform and MyoD gene expression content, without altering MHC I & IIb and myogenin expression. In summary, our results show that in HF, alterations in MyoD mRNA expression may, in part, explain alterations in MHC lIalllx content / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2001. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 96-116).

Thesis (Ph. D.) -- University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, 2001. / Vita. Bibliography: 108-125.

Orientador: Maeli Dal Pai Silva / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T16:06:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_RobsonFrancisco_D.pdf: 1253559 bytes, checksum: e244961263e728fe00882d5f5d14b262 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Introdução: A Insuficiência Cardíaca (IC) está associada a uma miopatia do músculo esquelético com aumento da expressão das isoformas rápidas da cadeia pesada de miosina (MHC) e alterações na matriz extracelular (MEC). Os mecanismos moleculares que controlam a expressão de MHC durante a IC ainda não foram descritos. Os fatores de regulação miogênica (MRF), uma família de fatores transcricionais que controlam vários genes músculo-específicos, podem estar relacionados com essa miopatia. As alterações da MEC podem estar associadas a um aumento na expressão de RNA mensageiro e na atividade das metaloproteinases da MEC (MMP), uma família de endopeptidases dependentes de zinco que degradam a maioria dos componentes da MEC e que são indispensáveis para a remodelação do tecido conjuntivo ao redor das fibras musculares. Objetivos: Analisar no músculo esquelético de ratos Wistar com IC induzida pela monocrotalina: 1) a expressão de RNA mensageiro para os MRF, as isoformas proteicas de MHC e a atrofia nos músculos Sóleo (SOL) e Extensor Longo dos Dedos (EDL); 2) a expressão de RNA mensageiro e a atividade das MMP nos músculos SOL, EDL e diafragma (DIA). Métodos: A expressão do RNA mensageiro para MyoD, miogenina, MRF4, MMP2 e MMP9 foi determinada por RT-PCR; as isoformas de MHC foram separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida e a atividade das MMP, por eletroforese em gel de poliacrilaminda contendo gelatina na presença de SDS em condições não redutoras. Resultados: 1) Embora a composição de MHC do músculo esquelético de ratos com IC não tenha sido alterada, a expressão relativa do RNA mensageiro para a MyoD nos músculos SOL e EDL, e a de MRF4 no músculo SOL foi significativamente diminuída, enquanto que a expressão relativa de RNA mensageiro para a miogenina não se alterou em ambos os músculos. A diminuição na expressão relativa de RNA mensageiro para o MRF4 está associada à atrofia do SOL em resposta à IC. 2) A IC aumentou a expressão de RNA mensageiro e a atividade da MMP9 nos músculos SOL, EDL e DIA, e aumentou a expressão de RNA mensageiro da MMP2 no músculo DIA. Conclusão: Nossos resultados sugerem um potencial papel para os MRF e para as MMP na miopatia do músculo esquelético na IC / Abstract: Background: Heart failure (HF) is associated with a skeletal muscle myopathy with increased expression of fast myosin heavy chains (MHC) and extracellular matrix (ECM) alterations. The skeletal muscle-specific molecular regulatory mechanisms controlling MHC expression during HF have not been described. Myogenic regulatory factors (MRF), a family of transcriptional factors that control the expression of several skeletal muscle-specific genes, may be related to these alterations. The ECM alterations may be associated with enhanced mRNA expression and activity of matrix metalloproteinases (MMP), a family of zinc-dependent endopeptidases that degrade most ECM components and appear indispensable for the breakdown of the connective tissue surrounding muscle fibers. Objectives: This investigation was undertaken in order to examine in Wistar rat skeletal muscle with monocrotaline-induced HF: 1) potential relationships between MRF mRNA expression and MHC protein isoforms and atrophy in Soleus (SOL) and extensor digitorum longus (EDL) muscles; 2) MMP mRNA expression and their potential relationships with changes in MMP activity in SOL, EDL, and diaphragm (DIA) muscles. Methods: MyoD, myogenin, MRF4, MMP2, and MMP9 were determined by using RTPCR; MHC isoforms were separated by using polyacrylamide gel electrophoresis, and MMP activity by electrophoresis in gelatin-containing polyacrylamide gel in the presence of SDS under nonreducing conditions. Results: 1) Despite no change in MHC composition of Wistar rat skeletal muscles with HF, the mRNA relative expression of MyoD in SOL and EDL muscles and that of MRF4 in SOL muscle were significantly reduced, whereas myogenin was not changed in both muscles. This down-regulation in the mRNA relative expression of MRF4 in SOL was associated with atrophy in response to HF. 2) HF increased MMP9 mRNA expression and activity in SOL, EDL, and DIA and MMP2 mRNA expression in DIA. Conclusion: Taken together; our results show a potential role for MRF and MMP in skeletal muscle myopathy during HF / Doutorado / Histologia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Maeli Dal Pai Silva / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T01:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barretto_JeaneMarleneFogacadeAssis_D.pdf: 16620509 bytes, checksum: f55fbc50c521ec1697bb9e56f7c70d08 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: o desenvolvimento da musculatura em animais utilizados como alimento tem importância na qualidade e no aumento da massa muscular. Esse estudo teve por objetivo avaliar as características morfológicas e o crescimento da musculatura miotomal em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) submetida à dieta com suplementação de vitamina C. O experimento foi realizado a partir da primeira alimentação exógena até 60 dias. As larvas foram distribuídas em cinco tratamentos, numa densidade de 10 indivíduos/L onde foram administrados os seguintes níveis de suplementação de vitamina C/ kg de ração balanceada: T1 = sem suplementação, T2 = 250 mg, T3 = 500 mg, T4 =1000 mg, T5 = sem suplementação até o vigésimo dia do tratamento, e com suplementação de 500 mg do vigésimo primeiro ao sexagésimo dia de experimento. Foram realizadas cinco repetições por tratamento com distribuição randômica. Cinco peixes de cada tratamento foram anestesiados com Ms-222 - SIGMA, sacrificados e a biometria foi efetuada após 20, 40 e 60 dias de experimento. Após isso, amostras de músculo foram congeladas em n-hexana resfriada em nitrogênio líquido e cortes histológicos foram submetidos à coloração HE (para análise da morfologia geral da musculatura), à reação mATPase, após pré incubação ácida (para a análise das características da ATPase miofibrilar) e à reação NADH-TR (para análise do metabolismo oxidativo das fibras). Aos 20 e 60 dias do experimento, cinco amostras de cada tratamento foram submetidos às reações imunohistoquímicas MyoD e miogenina (fatores de transcrição miogênica - para avaliar o grau de proliferação e diferenciação das celulas precursoras miogênicas). Também foram coletadas amostras de músculo para fixação em formalina neutra tamponada, processadas para serem embebidos em paraplast e os cortes histológicos foram submetidos à reação imunohistoquímica PCNA (Antígeno Nuclear de Proliferação Celular). A suplementação com os maiores níveis de vitamina C e após o período de restrição promoveu maior ganho de massa corpórea. O crescimento muscular em todos os tratamentos ocorreu principalmente por hiperplasia. Durante o experimento não foram observadas alterações morfológicas e histoquímicas nas fibras musculares. A suplementação de 500mg vit C kg-1da ração após a restrição por 20 dias promoveu a proliferação e a diferenciação das células precursoras miogênicas 500mg vit C kg-1 da ração foi o nível de suplementação apropriado para a miogênese e o desenvolvimento da Tilápia / Abstract: Muscle development in animais utilized for food has importance to muscle quality and mass increase. The aim of this study was evaluate the morphologic and the growth characteristics of the miotomal muscle in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to a vitamin C supplemented diet. The experiment was carried through from the first exogenous feeding up to 60 days. The larvae were distributed into five treatments, in aquaria at 10/L density. The levels of vitamin C supplement/kg of ration were: T1=no supplement, T2=250mg vit C kg-1 of diet, T3=500mg vit C kg-1of diet, T4= 1000mg vit C kg-1 of diet, T5= no supplement until 20 days and 500mg vit C kg-1 of diet on days 20 to 60. There were 5 repetitions for each treatment. After 20, 40 and 60 days, 5 fish from each treatment were anaesthetized with MS-222 - SIGMA, sacrificed and weighed. Muscle fragments were cooled in liquid nitrogen. Histological sections were submitted to the following reactions: Haematoxilin-Eosin (for analysis of the muscle morphology and to determine muscle fibers diameters); Nicotinamide Adenine Dinucleotide Tetrazolium Reductase (NADH-TR), for muscle fibre metabolic evaluation (oxidative and glycolitic); and miofibrillar ATPase (mATPase), in pH 9.4, after acid preincubation to study myosin ATPase characteristics. After 20 and 60 days, muscle samples from five fish of each treatment were immersed in n-Hexane cooled in liquid nitrogen and histological sections were submitted to the MyoD and myogenin immunohistochemical reaction to evaluate cell proliferation and differentiation. Another five fish per treatment were embedded in Paraplast and histological sections were submitted to PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) immunohistochemical reaction to evaluate the degree of cell proliferation per treatment. During the experiment, ali treatments increased in weight and length. Weight differences were significant only on day 60. Supplementation with high vitamin C levels and after a period of restriction promoted an increase in body mass. Muscle fiber morphology, metabolic and myosin ATPase characteristics were normal and similar in all treatments. Muscle growth in all treatments was predominantly by hyperplasia. Proliferation and differentiation of myogenic precursor cells was higher with 500mg vit C kg-1 of supplemented diets throughout the experiment. Restriction of this supplementation for 20 days did not harm differentiation and still promoted myogenic precursor cell proliferation. The appropriate levei of vitamina C to myogenesis and the development of the Tilapia was 500mg vit C kg-1 of the ration / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural