Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-13T17:12:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese completa final.pdf: 16433373 bytes, checksum: 4fb5e2d57332bcee63dcfd63d64a9b42 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T17:12:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese completa final.pdf: 16433373 bytes, checksum: 4fb5e2d57332bcee63dcfd63d64a9b42 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / O Sildenafil (Viagra®) é um inibidor potente e seletivo da fosfodiesterase-5 (PDE5), enzima responsável pela hidrólise do monofosfato de guanosina cíclico (GMPc). Tem sido demonstrado que Sildenafil tem potencial eficácia em desordens patológicas de carater neuroinflamatório e neurodegenrativo no sistema nervoso central (SNC). A inflamação cerebral é mediada/modulada por citocinas pró-inflamatórias e pelo NO e exerce um papel central em numerosas patologias do cérebro, incluindo a esclerose múltipla (EM). A EM é uma doença inflamatória crônica, com início típico durante os anos produtivos (entre 20 e 50 anos), caracterizada por desmielinização das células nervosas, que leva à severa deficiência psicomotora. Recentemente foi demonstrado que a administração de Sildenafil promoveu a inativação das células microgliais e astrocitária, reduziu os fenômenos inflamatórios e danos causados à mielina em modelo de EM. No entanto, o mecanismo de ação desse fármaco ainda é desconhecido. Desta forma, o presente estudo investigou os efeitos do Sildenafil sobre os mecanismos regulatórios do processso na neuroinflamação em modelo de desmielinização induzido por Cuprizona. Os resultados demonstraram que Sildenafil 25 mg/kg reduziu a expressão das citocinas inflamatórias IL-1β e TNF-α e aumentou a expressão da citocina antiinflamatória IL-10. Em adição, o tratamento com Sildenafil reduziu a expressão de de GFAP (gliose), NFκB (fator de transcrição nuclear para citocinas), AMPK inativo (proteina reguladora de metabolismo) e iNOS (sintase de óxido nítrico induzível) e aumentou o IKBα (proteína inibitória NFκB). Os efeitos do sildenafil sobre a remielinização foi observado através de imagens por ressonância magnética, que demonstrou recuperação de tecido neuronal degenerado (corpo caloso). Além disso, o tratamento aumentou a expressão de MMP-9,MCP-1/CCR-2, contribuindo possivelmente para a troca de fenótipo microglial, que favorece a limpeza de debris mielínicos. Em paralelo, a integridade da mielina foi demonstrada através do aumento da marcação para oligodendrócitos maduros (GST-pi), proteína básica da mielina (MBP) e organização de lamelas mielínicas. Em camundongos knockout iNOS-/-, Sildenafil reduziu os níveis de IL-1β, Iba-1, IFN-γ e não alterou a expressão de GFAP, TNF-α e COX-2. Sildenafil elevou os níveis GST-pi e melhorou a estrutura da mielina.Os efeitos do Sildenafil sobre as células astrocitárias demonstrou que o tratamento preventivo e terapêutico foram eficiente em reduzir a gliose astrocitária induzido por LPS. Além disso, os tratamentos com sildenafil promoveu diminuição das ondas de cálcio e do estresse fibras de actina. Diante disso, o presente estudo propõe que o mecanismo de ação envolve a via AMPK–eNOS-IKβα–NFκB, bem como ação de MMP-9 e MCP-1/ CCR-2 no processo de remielinização. O presente estudo abre novas possibilidades de investigação para o tratamento de doenças neurodegenerativas, tais como a esclerose múltipla / Sildenafil (Viagra) is a potent and selective inhibitor of phosphodiesterase type 5 (PDE5), the enzyme responsible for the hydrolysis of cyclic guanosine monophosphate (cGMP). It has been shown that sildenafil has potential efficacy in pathological disorders and neuroinflammatory character neurodegenrativo the central nervous system (CNS). Cerebral inflammation is mediated / modulated by pro-inflammatory cytokines and NO by and plays a central role in numerous pathologies of the brain including multiple sclerosis (MS). MS is a chronic inflammatory disease with typical onset during the productive years (20 to 50), characterized by demyelination of the nerve cells, which leads to severe psychomotor impairment. It has recently been shown that sildenafil promoted inactivation of microglial cells and astrocytes, reduced inflammatory phenomena and damage to myelin in MS model. However, the mechanism of action of this drug is still unknown. Thus, the present study investigated the effects of Sildenafil on the regulatory mechanisms in the processso in neuroinflammation model of demyelination induced cuprizone. The results showed that Sildenafil 25 mg / kg reduced the expression of inflammatory cytokines IL-1β and TNF-α expression and increased anti-inflammatory cytokine IL-10. In addition, treatment with sildenafil reduced expression of GFAP (glial), NFκB (nuclear transcription factor cytokines), inactive AMPK (regulating protein metabolism) and iNOS (nitric oxide synthase) and increased IKBα (protein NFκB inhibitory). The effects of sildenafil on remyelination was observed by magnetic resonance imaging, which showed recovery of degenerated neuronal tissue (corpus callosum). Furthermore, the treatment increased the expression of MMP-9, MCP-1 / CCR-2, possibly contributing to the exchange of microglial phenotype, which favors the cleaning of myelin debris. In parallel, the integrity of the myelin has been demonstrated by increasing the marking to mature oligodendrocytes (GST-pi), myelin basic protein (MBP) and myelin lamellae organization. In knockout mice iNOS - / - Sildenafil reduced IL-1β levels, Iba-1, IFN-γ and did not alter the expression of GFAP, TNF-α and COX-2. Sildenafil raised the GST-pi levels and improved the structure of mielina.Os effects of sildenafil on astrocytic cells demonstrated that the preventive and therapeutic treatment were effective in reducing astrocytic gliosis induced by LPS. In addition, treatment with sildenafil promoted reduction of calcium waves and actin stress fibers. Thus, the present study suggests that the mechanism of action involves the AMPK-eNOS-IKβα-NFκB and MMP-9 activity and MCP-1 / CCR-2 in the remyelination process. This study opens new possibilities for research into the treatment of neurodegenerative diseases such as multiple sclerosis

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-02T22:03:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Luciano Souza de Lima.pdf: 1641817 bytes, checksum: f53ff00d348037c5fbe3cafb7a300b82 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-07T20:41:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Luciano Souza de Lima.pdf: 1641817 bytes, checksum: f53ff00d348037c5fbe3cafb7a300b82 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-07T20:41:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Luciano Souza de Lima.pdf: 1641817 bytes, checksum: f53ff00d348037c5fbe3cafb7a300b82 (MD5) Previous issue date: 2017-05-25 / INTRODUÇÃO: Embriões de Gallus gallus (domesticus) são preferidos para avaliação de efeitos teratogênicos de produtos químicos ou naturais, pois nos primeiros estágios de desenvolvimento apresentam-se muito suscetíveis à ação de agentes tóxicos, podendo-se alterar o desenvolvimento embrionário normal. OBJETIVO: Avaliar o efeito do composto Riparina III sobre a morfogênese do sistema nervoso central em embrião de Gallus gallus. MATERIAL E MÉTODOS: Os ovos com um dia de fertilizados foram incubados em uma chocadeira a uma temperatura de 37,5°C e 60 ± 5% de humidade relativa durante 24 horas. Nos ovos do grupo controle foram injetados 0,1 ml de salina tamponada (PBS, pH 7,0) e nos do grupo experimental foram injetados com Riparina III nas concentrações de 25, 50 e 100 μg/mL. Os ovos foram fechados com fitas adesivas e a incubação continuou durante mais 24 horas. Posteriormente, os ovos foram, então, reabertos e os embriões dissecados, com retirada das membranas embrionárias e processados histologicamente para análise morfológica e morfométrica. RESULTADOS: Identificamos embriões de ave com desenvolvimentos nos estágios de nove a doze de acordo com a classificação de Hamburger e Hamilton (1951). Comparado com o grupo controle, a largura do tubo neural dos embriões foi modificada com todas as concentrações de Riparina III. O comprimento dos pares de somitos mais largos resultou das concentrações de Riparina III de 50 e 100 μg/mL. CONCLUSÃO: Embriões de Gallus gallus expostos a Riparina III nas concentrações de 50 e 100 μg/mL apresentaram aumento no comprimento dos somitos quando comparados com o grupo controle. Em relação à largura do tubo neural, o uso de Riparina III variou a estrutura independente das concentrações estudadas (25, 50 e 100μg/mL). / INTRODUCTION: Embryos of Gallus gallus (domesticus) are preferred for evaluation of the teratogenic effects of chemical or natural products, since in the early stages of development they are very susceptible to the action of toxic agents, being able to alter the normal embryonic development. AIM: To evaluate the effect of Riparin III on the central nervous system morphogenesis in the Gallus gallus embryo. MATERIAL and METHODS: One day fertilized eggs were incubated in a brooder at 37.5°C and 60 ± 5% relative humidity for 24 hours. In the eggs of the control group, 0.1 ml of buffered saline (PBS, pH 7.0) were injected and in the experimental group were injected with Riparin III at concentrations of 25, 50 and 100 μg / mL. The eggs were closed with adhesive tapes and the incubation continued for another 24 hours. Subsequently, the eggs were then reopened and the embryos dissected, with removal of the embryonic membranes and processed histologically for morphological and morphometric analysis. RESULTS: We identified bird embryos with development in stages from nine to twelve according to the classification of Hamburger and Hamilton (1951). Compared with the control group, the width of the neural tube of the embryos was modified with all concentrations of Riparin III. The length of the broader somite pairs resulted from the concentrations of Riparin III of 50 and 100 μg/mL. CONCLUSION: Embryos of Gallus gallus exposed to Riparin III at concentrations of 50 and 100 μg/mL presented increase in the somites length when compared to the control group. Regarding the width of the neural tube, the use of Riparin III varied the independent structure of the studied concentrations (25, 50 and 100 μg/mL).

Orientador: Ricardo Renzo Brentani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-21T09:57:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Graner_Edgard_D.pdf: 4098288 bytes, checksum: 90e9e5ee2f3fe892829a219199b0b25b (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Prions são partículas protéicas infecciosas, compostas por isoforma anormal (PrPsc) de uma proteína expressa constitutivamente no sistema nervoso central (PrPc), que causam doenças neurodegenerativas no homem e em animais. Estas doenças são caracterizadas pela deposição de material amilóide, degeneração espongiforme do tecido cerebral e perda neuronal (PRUSINER e cols., 1991). Baseado na presença de uma fase aberta de leitura na fita de DNA complementar àquela que codifica o PrPc e na teoria da hidropaticidade complementar dos amino ácidos (BLALOCK e SMITH, 1984), este trabalho descreve uma proteína de 60-66 kDa, presente na membrana celular de neurônios e células gliais de camundongos e ratos. Para isto utilizou-se um soro produzido em camundongos através da imunização com o peptídeo HVATKAPHHGPCRSSA, deduzido a partir da fita de DNA complementar ao gene que codifica o PrPc. Foi demonstrado também, através de experimentos de ligação in vi tro, que esta proteína tem a capacidade de se ligar ao PrPc. A distribuição da proteína de 60-66 kDa no cérebro de camundongos e ratos foi estudada através de reações imunohistoquímicas, que mostraram positividade principalmente no hipocampo, tálamo e nas células de Purkinje do cerebelo, áreas do cérebro freqüentemente afetadas pelas doenças causadas por prions, sugerindo sua participação na patogênese destas doenças. A glicoproteína de membrana basal laminina também foi detectada nestas mesmas regiões do cérebro, assim como a capacidade de interação desta com PrPsc demonstrada através de experimentos de ligação in vitro. Estes dados sugerem a participação desta proteína de matriz extracelular na formação dos depósitos amilóides das doenças causadas por prions / Abstract: Prions are slow infectious pathogens which cause transmissible neurodegenerative Jackob disease, diseases in both humans (kuru, Creutzfeldt-Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome and familial fatal insomnia) and animals (scrapie, bovine spongiform encephalopaty, transmissible mink encephalopaty and chronic wasting disease). The infectious prion protein (Prpsc) is an isoform of a cell membrane glycoprotein (Prpc) with unknown function. Prpsc probably induces conformational changes in Prpc resulting in intra and extracellular deposition of insoluble proteinaceous material. This material contains both protease resistant PrP (PrP 27-30) and PrPsc, shows amyloid properties (Congo red staining and birefringence under polarization microscopy) and induces vacuolar degeneration of the brain (PRUSINER, 1991). In this work we demonstrated the existence of a 60-66 neuron surface protein that binds prions in vitro, using the complementary hydropathy concept (BLALOCK e SMITH, 1984). This protein was detected in mouse and rat brain, by immunoperoxidase technique, in the tha1amus, hippocampus and Purkinje cells of the cerebellum, regions of the brain where PrPsc accumulates in prion diseases both infectious or inherited. This fact suggests a role for the 60-66 kDa protein in the pathogenesisof prion diseases. The same regions of the brain were strongly positive for the basement membrane glycoprotein laminin. In addition, we demonstrated that purified PrPsc binds to nondenaturated laminin in ligand blot assays. Our results suggest that the 60-66 kDa cell surface protein can play a role in the prion internalization and that laminin possibly mediates the PrP amyloid formation and deposition / Doutorado / Patologia / Doutor em Ciências

Orientador: Francesco Langone / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T11:50:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Levy_RobertodeOliveira_M.pdf: 3729978 bytes, checksum: afa36346c255bfa5cf2959e9d6f3ff94 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: A traquéia dos mamíferos tem sido utilizada como modelo experimental para simular os efeitos de medicamentos sobre as células musculares lisas brônquicas. Contudo, pouca atenção tem sido dada ao plexo neuronal ganglionar da traquéia, o qual desempenha importante papel na fisiologia deste órgão. Este trabalho teve como objetivo contribuir para o conhecimento de algumas características morfológicas e morfométricas do plexo neuronal ganglionar da traquéia da cobaia adufia. Foram utilizados 09 cobaias (Cavia apreia) adultas de ambos os sexos. A traquéia e brônquios de 06 animais foram utilizados para fazer preparados de membrana, corados pelo método de Giemsa (tampão Sõrensen, pH 6,98). Depois de adequadamente corados e diafanizados os trechos foram utilizados para estudo da morfologia e contagem de neurônios e gânglios, montados entre lâmina e lamínula. Outros 03 animais foram utilizados para fazer cortes histológicos transversais à musculatura traqueobrônquica, que foram corados pela hematoxilinaeosina e utilizados par medir sua espessura ao microscópio de luz. Os neurônios apresentaram intensa coloração azulada diferenciando-os da discreta coloração apresentada pelos feixes nervosos interganglionares, células adiposas, células musculares e alguns fibroblastos. As células satélites evidenciaram apenas seus núcleos pequenos ao redor dos neurônios. Os gânglios foram encontrados exclusivamente na porção membranosa da traquéia e brônquios. Não foram identificados gânglios na área de projeção das cartilagens traqueais e brônquicas nem no tecido intercartilaginoso ou na intimidade da parede traqueobrônquica. A peça foi dividida arbitrariamente nos seguintes segmentos: superior, médio, inferior e brônquios. Os gânglios apresentaram formas e tamanhos variados o mesmo acontecendo com os neurônios ao longo da traquéia e brônquios. O número médio de gânglios por região variou de 8,6 (segmento superior) até 1,0 (brônquio esquerdo). O número médio de naurônios traqueobrônquicos por cobaia foi de 231 e o número médio de neurônios por região variou de 98 no segmento superior até 5 no segmento do brônquio esquerdo (p<0,05). O número médio de neurônios por gânglio por região nos 06 animais variou de 12 (segmento superior) até 2 (brônquio esquerdo) (p<0,05). A espessura do músculo traqueal apesar de acompanhar a tendência de redução apresentada pelos neurônios no sentido crâniocaudal não apresentou diferenças estatisticamente significativas entre as regiões analisadas. Os resultados mostram uma diferença significativa do número de neurônios nas populações de gânglios situados nas porções superiores e inferiores do trato respiratório. Estes dados evidenciam a existência de uma correlação entre densidade populacional das células nervosas e a interação que as mesmas têm com seus tecidos alvo (músculo liso, glândulas e epitélio) / Abstract: The mammalian trachea have been used as an experimental pattern to simulate drug effects over the bronchial smooth muscle cells and has not being completely studied. In order to contribute to the comprehension of the tracheobronchial features we decided to perform a morphological and quantitative approach of guinea-pig tracheobronchial regions. It has been used nine adult animais, of both sexes. In six of them pieces frem different regions of trachea and bronchi were taken to make membrane preparations. After convenient staining and clarifying, the pieces were mounted and used to study the morphology and the density of ganglia. From the other three animais we took samples of tracheal and bronchial muscles to be measured. The average number of ganglia in each region varied from 8.6 (superior) to 1.0 (Ieft brenchus). The average number of neurons in each region varied from 98.1 (superior) to 4.6 (Ieft bronchus) (p<0.05). The average number of neurons per ganglion in each region varied from 11.9 (superior) to 2.2 (left bronchus). There was a clear degree among the numbers of ganglia and neurons of the several regions, and there was more ganglia and neurons in the upper than in the lower parto Tracheal and bronchial muscles go along with the graduation of ganglia and neurons, although not statistically significant. Results show an important difference in the number of neurons in the various regions of trachea and bronchi. This might be related to dissimilar extension of the innerved territory, including probably the tracheobronchial muscle / Mestrado / Mestre em Ciências

Orientador: Gil Lucio Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T21:33:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lerena_MarioAdrianMisailidis_M.pdf: 1925758 bytes, checksum: 218a68d898936dcfa09271e3edf6bb0c (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Este estudo propõe analisar as estratégias usadas pelo Sistema Nervoso Central para controlar os movimentos multiarticulares, assim como avaliar a importância das informações proprioceptivas na manutenção desta estratégia. Sujeitos. Participaram deste estudo cinco sujeitos normais e dois sujeitos portadores de neuropatia periférica. Método. Os sujeitos permaneciam sentados em uma cadeira estando com o tronco firmemente fIxado no encosto. Nesta condição os sujeitos realizavam movimentos de reversão no plano vertical com o membro superior dominante. Partindo da posição inicial os sujeitos moviam em direção a três alvos o mais rápido possível. Resultados. Os sujeitos normais obtiveram trajetórias retilíneas à custa de uma dissociação do padrão de deslocamento articular e torque muscular entre a articulação do ombro e do cotovelo. Este comportamento determinou baixos índices 'de correlação linear entre os torques musculares gerados nas articulações do ombro e do cotovelo. Por outro lado, sujeitos portadores de neuropatia periférica não puderam dissociar o comportamento cinemático e cinético das duas articulações, estabelecendo altos índices de correlação linear entre os torques musculares. O acoplamento destas duas articulações resultou na formação de trajetórias lineares com menor retilinearidade. Discussão. Portanto, os sujeitos portadores de neuropatia periférica não conseguiram dissociar o comportamento entre as duas articulações para executar uma trajetória retilínea. Estas observações destacam dois pontos fundamentais sobre o controle dos movimentos multiarticulares. Primeiro, o Sistema Nervoso Central íntegro tem como principal estratégia manter a retilinearidade da trajetória e, segundo, as informações proprioceptivas são de fundamental importância para adequar o comportamento de cada articulação envolvida na tarefa em função da trajetória linear / Abstract: This study aims amplify the understanding of the strategies launched by the Central Nervous System in the execution of multijoint tasks, as well as establish the differences in the motor behavior between subjects with neuropathies and normal ones. This differences can clarify the way the Central Nervous System integrates the proprioceptive afferent information in the programe configuration and motor commands. Subjects. Five neurologically normal subjects and two subjects with peripheral neuropathy volunteered themselves to participate in this study. Methods. The subjects made reversal movements in the vertical plan being seated in a chair with their upper bodies fnmily flXed to the back of the chairs. Starting from the initial position the subjects made movements in the three ta:çgets direction as fast as possible. No instructions were given as to the trajectory of the movement to be made. Results. The neurologically normal subjects obtained straighter trajectories differentiation in the articulate movement pattem between the shoulder and the elbow, differentiation in the musc1e torque pattem among the articulation and the index of linear correlation among the musc1e torque. However, the subjects with peripheral neuropathies could not make straight trajectories. They presented some compromise in the articulate movement of the elbow, similar to the shoulder pattem. They obtained an altemation in the muscle torque pattem of the elbow, establishing behavior similar to the one the shoulder presents. They determined high index of linear correlation. Discussion. Summarizing, the subjects could not dissociate the articulate dislocation patterns among the articulations of shoulder and elbow to guarantee the execution of a straight trajectory. This behavior would only be possible if the linear correlation index among the muscle torque was reduced. However, the subjects with peripheral neuropathy could not establish the same index present in the neur9logically normal subjects. It is possible that the proprioceptive information from a variety of muscle-skeletal structure would play an important role in elaborating motor programes that will command the sequence of muscle recruitment to establish adequate pattems of muscle torque / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores: Iscia Lopes Cendes, Anamarli Nucci / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T09:01:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FrancaJunior_MarcondesCavalcante_D.pdf: 2508603 bytes, checksum: 7aaebc55cfad4e78c5723f324d24e71a (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A ataxia espinocerebelar tipo 3 ou doença de Machado-Joseph (SCA3/DMJ) é a ataxia autossômica dominante mais freqüente em nosso meio e tem como causa a expansão anormal do tripleto (CAG) no 10º éxon do gene MJD1 situado no cromossomo 14q. Trata-se de uma doença neurológica crônica e incapacitante cuja principal manifestação é a ataxia cerebelar, usualmente associada a disfunções piramidais, extra-piramidais, alterações da motilidade ocular extrínseca e neuropatia periférica (NP). Habitualmente, ocorre o envolvimento de múltiplas populações neuronais, tanto no sistema nervoso central (SNC) quanto periférico (SNP). No entanto, o envolvimento dos nervos periféricos na SCA3/DMJ apesar de freqüente e descrito previamente, é ainda pouco estudado. Nesse contexto, o objetivo desta pesquisa foi estudar o envolvimento do SNP na SCA3/DMJ, com o intuito específico de estimar a relevância de suas repercussões clínicas, determinar seus fatores causais e caracterizar sua história natural. Inicialmente, investigamos manifestações habituais em enfermidades do SNP mas pouco exploradas na SCA3/DMJ, como dor, câimbras e fasciculações,além de queixas de disautonomia. Em uma coorte de 70 indivíduos com SCA3/DMJ, encontramos dor crônica em 47% dos pacientes, na maior parte das vezes de padrão músculo-esquelético. Entretanto, a disfunção periférica também foi um fator associado a esse sintoma já que dois casos apresentaram dor de padrão neuropático em associação com neuropatia sensitiva. Em seguida, direcionamos atenção às câimbras e fasciculações. Estas também foram manifestações comuns na doença, identificadas em 82% e 50% dos pacientes, respectivamente. As câimbras eram, em muitos casos, uma queixa significativa, dificultando o sono e o trabalho. A presença de NP esteve intimamente relacionada com o surgimento de fasciculações, mas aparentemente não com as câimbras. Entretanto, ambas estiveram associadas com anormalidades da excitabilidade dos motoneurônios, expressas por alterações nos parâmetros das ondas F e do reflexo H. Tal fato possivelmente está relacionado com os bons resultados que obtivemos no tratamento das câimbras mediante o uso da carbamazepina, um bloqueador de canais iônicos. Sintomas disautonômicos foram relatados com freqüência na SCA3/DMJ, em particular aqueles relacionados com os sistemas urogenital e sudomotor. O estudo da resposta simpática cutânea mostrou-se um bom instrumento para identificar pacientes com disautonomia significativa. Nesse grupo em particular, verificamos uma maior proporção de pacientes com fenótipo "parkinsoniano" e "neuropático". O próximo passo foi estabelecer o padrão de acometimento do SNP e sua evolução utilizando estudo de eletroneuromiografia (ENMG). NP foi diagnosticada em 54% dos pacientes com SCA3/DMJ; alguns com envolvimento exclusivamente sensitivo, outros sensitivo-motor e poucos exclusivamente motor. As anormalidades neurofisiológicas são compatíveis com uma dupla neuronopatia, afetando motoneurônios alfa e células ganglionares. No estudo pospectivo, verificamos que a neuropatia é um fenômeno idade-dependente na SCA3/DMJ, mas a progressão é mais rápida naqueles indivíduos com maior alelo expandido. De maneira contrária, verificamos que a progressão da ataxia cerebelar não está associada ao tamanho do alelo expandido, mas à idade de início. Isto sugere que os determinantes da progressão da NP e da ataxia possam ser diferentes. Em nossa amostra, o tamanho do alelo expandido foi responsável por quase 70% da variabilidade na idade de início da doença. Como descrito, ele também contribuiu para a evolução da NP, mas seu efeito ficou em torno de 40%. Portanto, outros fatores possivelmente genéticos também devem modificar o fenótipo na SCA3/DMJ. Averigüamos o efeito de dois possíveis candidatos, o alelo normal e a co-chaperona C-terminal heat shock protein 70-interacting protein (CHIP), em modelos de regressão com múltiplas variáveis utilizando a idade de início como dependente. Não observamos efeito que pudesse ser atribuído a proteína CHIP; entretanto, o alelo normal parece oferecer uma pequena, mas significativa contribuição para a determinação da idade de início (cerca de 2%). Resta definir se este efeito estende-se a outros elementos do fenótipo, como a expressão de NP. / Abstract: Machado-Joseph disease or spinocerebellar ataxia 3 (SCA3/MJD) is the most frequent autosomal dominant ataxia in Brazil and caused by an unstable trinucleotide (CAG) repeat expansion in the 10th exon of the MJD1 gene on chromosome 14q. It is a chronic and debilitating neurologic disorder characterized by cerebellar ataxia, pyramidal dysfunction, dystonia, gaze abnormalities and peripheral neuropathy. Different types of neurons both in the central and peripheral nervous system are usually damaged in the disease. Although there are previous reports of peripheral involvement in patients with SCA3/MJD, there are still many unanswered questions. Therefore, we have designed this study aiming to evaluate the damage to the peripheral nervous system in SCA3/MJD, with especial emphasis on its clinical relevance, causative factors and natural history. We first looked at manifestations typically found in peripheral neuropathies, such as pain, muscle cramps, fasciculations, and disautonomia, but frequently overlooked in SCA3/MJD. In a cohort of 70 individuals with SCA3/MJD, we found chronic pain in 47% of patients, most of them with musculoskeletal characteristics. Peripheral dysfunction was also a contributing factor since at least two patients reported neuropathic pain in association with a predominantly sensory polyneuropathy. We then assessed muscle cramps and fasciculations and found that these were also common complaints, present in 82% and 50% of patients, respectively. Cramps were often a major complaint, disturbing sleep or work hours. We reported positive results with carbamazepine in the treatment of cramps in patients with SCA3/MJD. Peripheral neuropathy was clearly related to fasciculations, but not to muscle cramps. However, both manifestations were associated to abnormal excitability of motor neurons, as expressed by F-wave and H-reflex responses. Dysautonomia was another typical feature of patients with SCA3/MJD, and symptoms related to genitourinary and sudomotor systems were particularly frequent. Sympathetic skin response proved to be useful in the screening of patients with severe dysautonomia. We found higher proportions of patients with either "parkinsonian"or "neuropathic" phenotypes among those with severe autonomic impairment. In addition, we used nerve conductions studies and electromyography to determine the pattern of damage to the peripheral nervous system and its course over the time. We showed that overall 54% of patients with SCA3/MJD had peripheral neuropathy. Some of those had exclusive sensory impairment, others sensory-motor, and a few restricted motor involvement. The neurophysiological studies showed that the peripheral neuropathy in SCA3/MJD resembles a double neuronopathy, involving alpha motor neurons and dorsal root ganglia. Prospective data indicate that the peripheral involvement is mostly age-dependent, but progression is faster in individuals with larger (CAG) expansions. By contrast, progression of ataxia was mostly driven by age at onset, rather than length of expanded (CAG) repeat. These findings suggest that the determinants of damage to peripheral and cerebellar neurons may be different. The length of the expanded (CAG) allele explained roughly 70% of the variability in age at onset of the disease. As reported previously, it also contributes to progression of peripheral neuropathy, but this effect is small (40%). Therefore, other factors could exist, possibly genetic factors, which could influence the phenotypic variability in SCA3/MJD. We tested two potential genetic factors as candidates, the normal allele and the gene for the co-chaperone CHIP. We used regression models with age at onset as the dependent variable in the statistical analysis. We failed to show any modulating effect due to the protein CHIP. Nevertheless, the normal allele had a small, but significant contribution to variability in age at onset (about 2%). It remains to be determined whether this effect extends to other aspects of the phenotype, such as the peripheral damage. / Doutorado / Neurologia / Doutor em Ciências Médicas

Orientadores : Maria Julia Marques, Humberto Santo Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T22:48:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pertille_Adriana_M.pdf: 4891333 bytes, checksum: b74b72de020a1053a52f77477edcf61d (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: No presente trabalho, avaliamos a regeneração axonal utilizando enxerto de músculo estriado esquelético imediatamente após o seu preparo com anestésico local. O nervo ciático de ratos Wistar adultos foi seccionado, obtendo uma falha de 1 cm de comprimento e seu reparo realizado através de enxerto muscular preparado com injeção de cloridrato de lidocaína 2%. O enxerto foi implantado 15 minutos ou 24 horas após o preparo e os animais foram sacrificados 60 e 120 dias pós-cirúrgico. O nervo ciático implantado foi preparado para análise através das microscopias de luz, eletrônica e confocal. A análise morfométrica mostrou diminuição no diâmetro do axônio e da fibra nervosa, como também na espessura da bainha de mielina nos dois tipos de enxerto, com diferença significativa do controle. Os valores da razão G no coto distal dos grupos 15 minutos e 24 horas não foram diferentes do nervo normal, mostrando que níveis apropriados de mielinização foram atingidos pelos axônios regenerados. A razão G foi maior na região do enxerto em ambos os grupos, sugerindo mielinização insatisfatória dos axônios. As características ultra-estruturais dos axônios regenerados e das junções neuromusculares, em todos os grupos, foram similares ao normal. Estes resultados sugerem que não existe restrição para o uso do enxerto muscular imediatamente após o seu preparo com cloridrato de lidocaína, pois este promove regeneração nervosa semelhante àquela observada quando este tipo de enxerto é utilizado 24 horas após a injeção do anestésico. A diminuição da espessura da bainha de mielina no enxerto sugere que a associação entre célula de Schwann, axônios regenerados e lâmina basal muscular pode ser melhor investigada / Abstract: We evaluated the potential of muscle autografts to perform primary nerve repair when used immediately after their preparation with lidocaine injection. The right sciatic nerve of adult Wistar rats was sectioned and muscle grafts were used 15 minutes or 24 hours after lidocaine injection, to repair a gap 1.0 cm longo Morphometric analyses showed a decrease in axon and nerve fiber diameter, as well as in myelin thickness, which were similar for both types of grafts and significantly different ftom the control. G-ratio values in the distal stump for both groups were not different ITom the normal sciatic nerve, showing that a proper leveI of mye1ination was attained by the regenerated axons. However, within the graft, the G ratio was increased in both groups, suggesting poorer myelination in the graft region. Ultrastructural profiles of intramuscular nerve bundles and neuromuscular junctions, for both 15 minutes and 24 hours after graft implantation were similar to the normal. These results suggest that there are no restrictions to the use of a muscle graft immediately after lidocaine injection, in primary nerve repair, since the results of nerve regeneration were comparable to those observed when this type of graft is used 24 hours after being prepared. The decrease in myelin thickness in the graft suggests that the associations between Schwann cells, regenerated axons and muscle basal lamina should be further investigated to improve muscle graft nerve regeneration / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador : Humberto Santo Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T14:15:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SabhaJunior_MarioJoseJorge_M.pdf: 6435667 bytes, checksum: 67b234a3d979480c872a267ba7d42c08 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Na reparação da lesão nervosa periférica, nem sempre é possível a simples sutura dos cotos nervosos quando há perda de tecido, pois pode submeter o nervo a uma tensão excessiva, o que prejudica sua irrigação e favorece a formação de tecido cicatricial. O nervo sural tem sido utilizado como auto-enxerto, unindo os cotos do nervo lesado. Sendo a maioria dos nervos de diâmetro superior ao do nervo sural, há necessidade de se unir paralelamente vários segmentos do nervo, para auto-implantar entre os cotos do nervo lesado (enxerto em cabo). Este procedimento tem o inconveniente de conter muitos pontos de sutura, provocando maior inflamação local, sendo que a cicatrização exagerada impede o crescimento axonal e compromete o sucesso da reparação nervosa. Além disso, ocorre perda de sensibilidade na área correspondente do nervo doador. Diversos materiais têm sido estudados, com o objetivo de substituir os auto-enxertos de nervo no reparo da lesão nervosa periférica. Dentre eles, destaca-se o músculo esquelético, cuja membrana basal, apresenta características químicas e composição molecular semelhante às das células de Schwann, atuando como guia mecânico para o crescimento axonal. No presente trabalho, o músculo sóleo direito de ratos, foi submetido a injeção de cloridrato de lidocaína a: 2% (anestésico), e em seguida, estocado em baixas temperaturas (- 4°C no grupo I e - 400C no grupo lI) e após 3(três) semanas foi dissecado para a confecção de um enxerto autólogo de 1 cm de comprimento. Utilizou-se um grupo controle de animais que teve seu músculo sóleo direito tratado com anestésico local, com 24 horas de antecedência ao auto transplante (grupo ID). Após 50 dias do auto- transplante, o nervo ciático foi exposto, fixado e dividido em 2 porções: região do enxerto e coto distal, que foram analisados em microscopia de luz. A avaliação da regeneração axonal, foi realizada através da contagem direta do número de axônios mielínicos (NAM) regenerados destas duas porções do nervo ciático nos três grupos, bem como a mensuração do diâmetro dos axônios mielínicos (DAM), diâmetro das fibras mielínicas (DFM) e espessura da bainha de mielina (EBM) e razão G (RG). O presente trabalho, mostra que a regeneração axonal foi semelhante nos três grupos experimentais, sugerindo que a criopreservação do IDÚScu1o-esquelético é potencialmente útil, por permitir a criação de um banco de auto-enxertos de músculo esquelético para o reparo das lesões do nervo periférico / Abstract: In peripheral nerve regeneration it is not always possible to simply suture nerve stumps when there is loss of tissue, as this may place excessive tension on the nerve and hinder irrigation, favoring the development of scar tissue. The sural nerve has often served as auto-graft, binding the stumps of the transected nerve. As most nerves have larger diameters than the sural nerve it is necessary to join several segments in parallel for self implantation among the stumps of the damaged nerve (autologous cable graft). This procedure has the drawback of having many suture points, promoting more local inflammation and exaggerated development of scar tissue that prevents axonal growth, inhibiting the successful nerve regeneration. Furthermore, there is loss of sensitivity in the area corresponding to the donor nerve. Several materials have been tested with the objective of replacing nerve autografts in the regeneration of peripheral nerve lesion. Among them the skeletal muscle stands out, as its basal membrane presents chemical and molecular composition characteristics that are similar to those of Schwann cells, acting as a mechanical guide for axonal growth. In the present paper, rats right soleus muscle was injected with 2% lidocaine hydrochloride (anesthetic) stored at low temperatures (- 4°C in group I and - 40°C in group 11) and 3 (three) weeks later it was dissected to prepare a 1 cm long autologous graft. A control group of animals had their right soleus muscle treated with a local anesthetic 24 hours prior to self-transplant (group li). Fifty days after the self transplant the sciatic nerve was exposed, fixated and divided into 2 parts: the graft site and the distal stump, analyzed by light microscopy. The axonal regeneration evaluation was carried out by direct counting of the number of myelinated axons (NMA) regenerated ftom these two pars of the sciatic nerve in the three groups, as well as the measurement of myelinated axon diameter (MAD), myelinated fiber diameter (MFD), myelinated sheath thickness (MST) and G ratio (GR). The present study shows that axonal regeneration was similar in the three experimental groups, suggesting that cryopreservation of skeletal musc1e is potentially useful, once it a11ows the development of a skeletal musc1e autografts storage to repair the peripheral nerve injuries / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular

Orientador : Iscia T. Lopes-Cendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T05:12:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camargo_MariaFranciscaAboinGomes_M.pdf: 3534931 bytes, checksum: e4a2a3fd9ac89defea2b3ec440bc4c3e (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: As ataxias espinocerebelares (AEC) formam um grupo heterogêneo de doenças degenerativas do sistema nervoso central, caracterizadas por degeneração do cerebelo e suas vias aferentes e eferentes. Clinicamente, a maior parte dos pacientes com AEC apresentam alterações do equilíbrio e disartria, que evoluem de forma progressiva. As AEC autossômicas dominantes se iniciam normalmente na idade adulta. Até o momento, existem 16 loci mapeados para as formas dominantes de AEC: tipo 1 (SCA1) no cromossomo (cr) 6p, tipo 2 (SCA2) no cr 12q, tipo 3 ou doença de Machado-Joseph (SCA3/MJD) no cr 14q, tipo 4 (SCA4) no cr 16q, tipo 5 (SCA5) na região centromérica do cr 11, tipo 6 (SCA6) no cr 19p, tipo 7 (SCA7) no cr 3p, tipo 8 (SCA8) no cr 13q, tipo 10 (SCA10) no cr 22q, tipo 11 (SCAll) no cr 15q, tipo 12 (SCA12) no cr 5q, tipo 13 (SCA13) no cr 19q, tipo 14 (SCA 14) no cr 19q, tipo 16 (SCA 16) no cr 8q, tipo 17 (SCA 17) na região TATA- box da proteína e a atrofia dentatorubropalidoluisiana (DRPLA) no cr 12p. Em sete formas autossômicas dominantes, cujos genes já foram identificados (SCA1, SCA2, SCA3/MJD, SCA6, SCA7, SCA12 e DRPLA), a expansão de trinuc1eotídeo CAG localizada na região codificadora dos genes, foi identificada como a mutação responsável pela neurodegeneração, já na SCA8 a mutação respónsavel é uma repetição do trinuc1eotídeo CTG. Algumas evidências experimentais apontam para um ganho específico de função que levaria a toxicidade neuronal nas doenças causadas pela expansão do trinuc1eotídeos CAG. O objetivo principal deste projeto de pesquisa foi a determinação da frequência e das características moleculares das mutações responsáveis pelas diferentes formas de AEC em uma amostra da população brasileira. Cento e sessenta e três indivíduos com ataxia espinocerebelar progressiva foram analisados clinicamente e as amostras de sangue periférico foram coletados para os estudos moleculares. Os 163 pacientes pertenciam a 123 famílias não relacionadas entre si. O DNA genômico foi extraído de cada indivíduo e as amostras foram genotipadas pela técnica da PCR utilizando pares de "primer" que flanqueiam as regiões adjacentes aos tripletos expandidos encontrados nos genes SCA1, SCA2, SCA3/DMJ, SCA6, SCA 7, SCA8 e DRPLA. Os produtos da PCR foram submetidos a eletroforese em géis de sequenciamento por aproximadamente 3 horas. A leitura dos alelos foi por auto-radiografia após 3 diasd de exposição a filmes de raio-X. Na amostra de 123 famílias encontraram-se: 7 indivíduos portadores da mutação SCAJ (5%),2 indivíduos portadores da mutação SCA2 (2%), 52 indivíduos portadores da mutação SCA3/DMJ (32%) e 2 indivíduos portadores das mutação SCA7 (2%). Não se encontrou nenhum indivíduo portador das mutações: SCA6, SCA8, DRPLA. Observa-se que na população estudada a forma mais ftequente de AEC é causada pela mutação SCA3/DMJ. Nesse estudo foi também importante para estabelecer quais as AEC autossômicas dominantes mais ftequentes em nosso meio e assim orientar o diagnóstico clínico e molecular / Abstract: The spinoeerebellar ataxias (SCAs) are a clinieally and genetieally heterogeneous group of late onset neurodegenerative disorders. Clinieally this group of diseases is earaeterized by eerebellar dysfuetion manifested by gait and limb ataxia, incoordination and dysarthria. There are a total of sixteen loei for autosomal dominant SCAs deseribed: spinoeerebellar ataxia type I (SCA1) on ehromosome (eh) 6p, spinoeerebellar ataxia type 2 (SCA2) on eh 12q, spinoeerebellar ataxia type 3 (SCA3) or Maehado- Joseph disease (MJD) on eh 14q, spinoeerebellar ataxia type 4 (SCA4) on ch 16q, spinoeerebellar ataxia type 5 (SCA5) on the eentromerie region of eh 11, spinoeerebellar ataxia type 6 (SCA6) on eh 19p, spinoeerebellar ataxia type 7 (SCA7) on eh 3p, spinocerebellar ataxia type 8 (SCA8) on eh 13q, spinoeerebellar ataxia type 10 (SCA10) on eh 22q, spinoeerebellar ataxia type 11 (SCAll) on ch 15q, spinocerebellar ataxia type 12 (SCAI2) on ch 5q, spinoeerebellar ataxia type 13 (SCA13) on eh 19q, spinoeerebellar ataxia type 14 (SCAI4) on eh 19q, spinoeerebellar ataxia type 16 (SCAI6) on eh 8q, spinocerebellar ataxia type 17 (SCAI7) on the region ofTATA- box protein and dentatorubropallidoluysian atrophy (DRPLA) on ch 12p. Are eight different genes causing autosomal dominant SCA have been mapped: SCAl, SCA2, SCA3/MJD, SCA6, SCA 7, SCA12 and DRPLA eaused by expansions of an unstable CAG repeat loealized in the eoding region of causative genes. SCA8 is eaused by expansions of an unstable CTG repeat. The frequeney of SCAl, SCA2, SCA3/MJD, SCA6, SCA7, SCA8 and DRPLA in brazilian patients and to compare their molecular and clinical charaeteristies for SCAs mutations. One hundred and sixty three individuaIs were genotyped in this study. Of 163 individuaIs belonging to 123 unrelated families. Genomie DNA was isolated from peripheral blood leukoeytes. Polymerase elain reaetion (PCR) amplieation of the CAG repeat and CTG repeat. PCR products we separated in eletrophoresis on 6% denaturing polyaerylamide gels. Polyaerylamide gels we transfered into Hybond H+ nylon membranes and hybridized with an a 32p 3'- end- labeled (CAG)n probe. Were determined allele by eomparing migration relative to an M13 sequeneing ladder and used as positive and negative eontrols in a1l analyses. Of the 123 famiIies studied: 7 positive individuaIs ofthe SCAl mutation (5%),2 positive individuaIs ofthe SCA2 mutation (2%),52 positive individuaIs ofthe SCA3/MJD mutation (32%) and 2 positive individuaIs ofthe SCA7 mutation (2%). We found no SCA6, SCA7, DRPLA and SCA8 mutations. The &equency of SCA3/MJD is substantially higher than that of SCAl, SCA2 and SCA 7 in individuaIs with SCAs / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Francesco Langone, Marcelo Augusto Marretto Esquisatto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:40:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scabora_JoseEduardo_M.pdf: 8650752 bytes, checksum: 092b5a116b39be2a38c7330cc49d94e2 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Os efeitos de soluções conservadoras de órgãos (SC) sobre a estrutura e a viabilidade de enxertos de nervos periféricos são pouco conhecidos. Neste estudo investigamos a organização histológica e ultra-estrutural de enxertos após sua manutenção em dois tipos de SC e após transplante autólogo. Ratos Wistar machos foram agrupados para obtenção de nervos ciáticos normais (NN), transplantados a fresco (NF), conservados em solução de Wisconsin/Belzer ou solução de Collins, por 24 ou 72 horas a 4°C (W1,W3;C1,C3), e conservados e transplantados (W1-T,W3-T;C1-T,C3-T). Após os períodos de conservação ou transplante, os espécimes foram processados para análise ao microscópio óptico e eletrônico. A morfologia dos segmentos de nervos conservados apresentou alterações na sua estrutura comparativamente aos segmentos de nervos frescos. Foi observada redução da basofilia tecidual em todos os segmentos conservados quando comparados ao nervo normal. Esta redução foi mais acentuada no grupo C3. Os grupos W1 e W3 apresentaram aspectos semelhantes entre si. Em todos os grupos não foram observadas alterações quanto à distribuição e organização das fibras colágenas. Após 50 dias de transplante a basofilia tecidual e a celularidade foram semelhantes entre os grupos W1-T, W3-T; C1-T, C3-T e NF. Por outro lado, a vascularização nos enxertos dos grupos tratados mostrou-se aparentemente mais densa que os enxertos do grupo NF. Não foram observadas alterações nas células do perineuro, mas em todos os grupos tratados foram detectadas áreas com abundante deposição de fibras colágenas entre as camadas de células perineurais. Este fato foi especialmente mais intenso nos grupos C 1- T e C3- T. A análise ultra-estrutural revelou no grupo C3 uma acentuada desorganização das fibrilas de colágeno do endoneuro quando comparado ao grupo NN. Os grupos C 1 e C3 apresentaram maior freqüência de alterações das lamelas da bainha de mielina, comparativamente aos grupos Wl e W3, e seus axônios exibiam clara desorganização dos neurofilamentos. Não foram detectadas alterações na lâmina basal das fibras mielínicas e dos feixes amielínicos. As células de Schwann mantiveram a integridade de sua estrutura nos grupos Cl e W1. Contudo, no grupo C3 foram observadas numerosas células de Schwann exibindo vacuolização e aumento de volume do citoplasma. Os grupos W1- T e W3- T apresentaram maior densidade de fibras mielínicas e organização tecidual semelhante ao grupo NF. Por sua vez, os grupos C1-T e C3-T apresentaram grande número de mini-fascículos e colágeno endoneural. O perineuro dos diferentes grupos apresentou-se semelhante ao observado nos grupos NN e NF. As análises estrutural e ultra-estrutural mostraram que a preservação das células de Schwann e demais elementos que suportam a regeneração axonal foi superior nos enxertos conservados na solução de Wisconsin/Belzer. Estes resultados embasam estudos em andamento para a formulação de SC que viabilizem a criação de bancos de nervos para transplantes heterólogos / Abstract: The effects of the organ conservative solutions (CS) on the structure and the viability of peripheral nerve grafts are largely unknown. We investigate the histology and the ultrastructure of peripheral nerve grafts after storage in two types of CS and/or used for autologous transplantation. A group of male Wistar rats was used to obtain sciatic nerve grafts that had been conserved in Wisconsin/Belzer (W) or Collins (C) solutions, for 24 or 72 hours 4°C (WI, W3; CI, C3). Another group of animals was used to obtain tibial nerve grafts that were immediately transplanted (NF) or conserved in W or C solutions, for 24 or 72 hours 4°C, and then transplanted (WI-T, W3-T, CI-T, C3-T). After the conservation periods (24 or 72 hours) or 50 days after the transplantation the nerve grafts had been processed for light and electronic microscope analysis. The basophilia was decreased in the specimens of the groups conserved in S or C solutions when compared to normal nerves (NN). This reduction was more prominent in the C3 group. The Wl and W3 groups presented similar aspects. No alterations were observed in the distribution and organization of collagen fibers. Fifty 50 days after transplantation a similar basophilia and cellularity were found in WI-T, W3-T, CI-T, C3-T and NF groups. On the other band, the vascularization of the conserved grafts was more conspicuous than in the NF grafts. No alteration was observed in the perineurium but some intense deposition of collagen fibers was similar to that observed in nerve fibrosis has detected in all the groups. This fact was more frequent in CI-T and C3-T groups. The ultra-structural analysis of the C3 group showed a higher degree of collagen fibrils derangement in the endoneurium in relation to the normal nerves. The C 1 and C3 groups presented a higher frequency myelin sheath alterations when compared to the WI and W3 groups and the axons exhibited neurofilament derangement. None alteration was detected in the basal lamina of the myelinated or unmyelinated nerve fibers. The integrity of Schwann cells structure was maintained in the Cl and WI groups, but exhibited vacuolization and cytoplasmatic edema in C3 group. The Wl- T and W3- T groups presented a higher density of the myelinated fibers and a similar tissue organization to the NF group. The CI-T and C3-T groups presented a large number of mini-fascicles and endoneural collagen. The perineurium structure was similar to the observed in NN and NF groups. The structural and ultrastructural analysis have shown that the preservation of the Schwann cells and the other elements which support the axonal regeneration was greater in the grafts that had been conserved in the Wisconsin/Belzer solution. Our observations contribute to better known the effects of conservative solutions on peripheral nerves and support the creation of a bank of nerve grafts for heterologous transplantation / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural