Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-27T14:20:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InfluenciaGlutationaRegistros.pdf: 1949816 bytes, checksum: 88ee69a9786d16f97049a6aaa7495461 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-04-10T15:01:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InfluenciaGlutationaRegistros.pdf: 1949816 bytes, checksum: 88ee69a9786d16f97049a6aaa7495461 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-10T15:01:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InfluenciaGlutationaRegistros.pdf: 1949816 bytes, checksum: 88ee69a9786d16f97049a6aaa7495461 (MD5) Previous issue date: 2014-03-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A glutationa (GSH) é uma molécula que intervêm em diversos processos biológicos, conhecida principalmente pela sua ação antioxidante. Atualmente, esse tripeptídeo constituído de glutamato, cisteína e glicina têm sido amplamente estudados pela sua possível ação como neurotransmissor e nuromodulador no CNS. No presente trabalho foi avaliada a ação dessa molécula através do eletrorretinograma, para avaliar a resposta em massa da retina, produzida após estimulação luminosa. Métodos: foram realizadas injeções intravítreas de GSH em diferentes concentrações (1, 5 e 10 mM) e de PBS (controle) em ratos Wistar. O protocolo de avaliação consistiu de 6 estímulos em diferentes condições de adaptação: resposta Escotópica de bastonetes e resposta Escotópica máxima, após adaptação ao escuro de pelo menos 12h; resposta Fotópica de cones, após 10 min de adaptação ao claro, com a utilização de filtros para a avaliação da subpopulações de cones UV e S; e a resposta ao estímulo de flicker em 12 Hz. Os principais parâmetros analisados foram as amplitudes das ondas –a e –b e seus respectivos tempos implícitos e a amplitude das ondas –b do flicker. RESULTADOS: os resultados mostram alterações nas respostas com a diminuição da amplitude da ondab do ERG em todos os estímulos. Quando realizado o teste de múltiplas comparações, foram observadas diferenças entre os grupos controle e GSH 5mM e GSH 10mM. Alterações na amplitude da onda-a só foram observados na resposta Escotópica máxima, com significativa diminuição da amplitude. Os tempo de latência das respostas não apresentaram alterações em nenhum grupo avaliado. DISCUSSÃO: as células de Muller na retina contém grande quantidade de GSH e podem atuar ativamente na modulação das respostas glutamatérgicas e glicinérgicas; além disso, já foi mostrado que a GSH induz a liberação de GABA na retina, o que pode explicar a diminuição das amplitudes observadas pela super-ativação de alguma via inibitória. CONCLUSÃO: o presente trabalho vem colaborar com a hipótese de que a GSH atue como neuromodulador no SNC, com significativas alterações inibitórias após sua administração na retina. / Glutathione (GSH) is a molecule involved in many biological processes, known primarily for its antioxidant. Currently , this tripeptide composed of glutamate , cysteine and glycine has been widely studied for its possible action as a neurotransmitter in the CNS and nuromodulador . The present study evaluated the action of this molecule through the electroretinogram, to evaluate the mass response of the retina, produced after light stimulation. Methods: GSH intravitreal injections were performed at different concentrations (1 , 5 and 10 mM) and PBS ( control) in Wistar rats. The assessment protocol consisted of 6 stimuli in different conditions of adaptation: Scotopic response of rods and Scotopic maximal response after dark adaptation of at least 12h ; photopic cone response after 10 min of adaptation to the course, with the use of filters subpopulations for the evaluation of UV and S cones , and the response to the stimulus flicker at 12 Hz. The main parameters were the amplitudes of the waves -a and- b and their implicit time, and b-wave amplitude of the flicker. RESULTS: The results show changes in response, with decrease in b-wave amplitude of the ERG in all stimuli . When done the test of multiple comparisons, differences were observed between the control group and 5 mM GSH and 10 mM GSH . Changes in the amplitude of a-wave only observed in Scotopic maximal response, with a significant decrease in the amplitude. The latency time of the responses showed no changes in any individual group. DISCUSSION: The retinal Muller cells contains a large amount of GSH and may act actively in the modulation of glutamate and glycinergic responses, also has been shown that GSH induces the release of GABA in the retina, which may explain the decrease of the amplitudes observed by over- activation of an inhibitory pathway. CONCLUSION: The present work supporting the hypothesis that GSH acts as a neuromodulator in the CNS, with significant inibitory changes in the retina after administration .

A transmissão sináptica é essencial para o funcionamento do sistema nervoso. A neuromodulação permite regular esse processo de forma precisa. Um desses mecanismos modulatórios é a regulação da liberação de neurotransmissores. A adenosina é um importante modulador da transmissão sináptica. Além disso, a ativação do subtipo A2a dos receptores para adenosina está envolvida com a facilitação da liberação de neurotransmissores no sistema nervoso central. O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos modulatórios da ativação do receptor A2a de adenosina sobre a liberação de neurotransmissores e sua via de sinalização intracelular em modelo in vitro. Além disso, a tese contempla a construção histórica dos conceitos abordados no trabalho permitindo uma visão clara de sua evolução. Esse projeto foi o pioneiro no Brasil a utilizar o sensor biossintético fluorescente de liberação de vesículas sinápticas (supereclipse sinapto-pHluorina), o qual foi gentilmente cedido pelo professor Gero Miensenboeck do Sloan-Kettering Institute for Cancer Research. Nossos resultados demonstraram que o tratamento com o agonista do receptor A A2a de adenosina aumentou a fluorescência do supereclipse sinapto-pHluorina, assim como os níveis de glutamato e noradrenalina. Além disso, foi demonstrado que o inibidor da proteína cinase dependente de AMPc aboliu o aumento nos níveis do glutamato e noradrenalina, tal como a fosforilação da proteína sináptica sinapsina I evocado pelo agonista do receptor A2a de adenosina. Desta forma, nossos dados sugerem que a ativação do receptor A2a de adenosina em cultura de células do bulbo de ratos Wistar modula a liberação de neurotransmissores e a fosforilação da sinapsina I, assim como a proteína cinase dependente do AMPc pode ser o modus operandi desse fenômeno modulatório / Synaptic transmission is a sine qua non process for nervous system physiology. Such precise process is accomplished in part due to modulation of neurotransmitter release. Adenosine is a putative synaptic transmission modulator. Moreover, adenosine A2a receptor facilitates neurotransmitter release in the Central Nervous System. The present study focuses on the modulation of neurotransmission by adenosine A2a receptor and its intracellular signaling pathway in in vitro model. Here, we provided evidence that adenosine A2a receptor agonist increases an optical biosynthetic sensor of synaptic vesicle release (supereclipct synapto-pHluorin), as well as glutamate and noradrenaline. Furthermore, it was demonstrated that cAMP-dependent protein kinase inhibitor abolished glutamate and norepinephrin increase, as well as synapsin I phosphorylation evoked by adenosine A2a receptor agonist. Therefore, our data suggest that adenosine A2a receptor activation modulates neurotransmitter release and synapsin I phosphorylation in cultured cells from medulla oblongata of Wistar rats, as well as cAMP-dependent protein kinase might be the modus operandi of this modulatory phenomenon

Introdução: Após décadas de experimentação em estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC), poucos protocolos alcançaram robusta aceitação científica. Protocolos de ETCC foram sugeridos para influenciar alterações no controle postural de indivíduos saudáveis e pacientes após acidente vascular cerebral. No entanto, a escassa literatura nesta área revela a indispensável investigação do efeito doseresposta das estimulações cerebrais a fim de elaborar protocolos mais eficazes. O presente trabalho teve por objetivo verificar o efeito dependente de polaridade e intensidade após o uso da estimulação transcraniana por corrente contínua de alta definição (HD-ETCC) na junção têmporo-parietal (JTP) do hemisfério cerebral direito na assimetria da postura espontânea. Métodos: Este é um ensaio clínico fatorial cruzado, randomizado, controlado por placebo e duplo cego. Foram incluídos 21 indivíduos saudáveis, com idade média de 24,2±4,1 anos, 61,9% mulheres. A intervenção consistiu na aplicação do HD-ETCC com um eletrodo central e 3 eletrodos periféricos posicionados sobre JTP no hemisfério cerebral direito. A descarga de peso corporal (DPC) na posição ortostática foi realizada utilizando uma plataforma de força sobre cada pé do participante, e avaliada durante 2 minutos na medida basal e 5 minutos após cada estimulação. A fim de melhorar a tolerância dos participantes à HD-ETCC, foi realizado um protocolo de acomodação composto por 3 repetições de estimulação com duração e intervalo de 5 segundos cada, nas intensidades fixas de 1, 2 e 3mA. Após um repouso de 5 minutos, foi aplicado o protocolo de estimulação constituído por 3 tipos de polaridade (anodo central; catodo central; placebo) realizadas randomicamente em 3 dias diferentes com intervalo mínimo de 24 horas. Cada sessão de estimulação incluiu 3 repetições de HD-ETCC com duração de 2 minutos em 3 diferentes intensidades (1, 2 e 3mA) com intervalo de 5 minutos. A ordem das intensidades de HD-ETCC foi randomizada. Escala visual analógica foi utilizada para avaliar o grau de desconforto de cada estimulação e efeitos adversos após cada sessão foram registrados. A aquisição de dados foi realizada no Laboratório de Biomecânica e Controle Motor na Escola de Educação Física e Esportes da Universidade de São Paulo-USP. Resultados: A aplicação do HD-ETCC sobre a JTP resultou em efeitos polaridade dependente, provocando assimetria corporal com descarga de peso para o lado direito quando usado condição catodo central em relação à condição placebo nas intensidades de 2mA (Kruskal Wallis: p=0,037; Tukey Post-hoc: p=0,029) e 3mA (Kruskal Wallis: 0,009; Tukey Post-hoc: p=0,049). A DPC mediana na condição cátodo central foi, respectivamente, medida basal de 1,78%[-1,76;4,67]; após 1mA: 2,12%[-0,63;7,08]; após 2mA: 2,33%[- 1,57;6,25]; após 3mA: 2,40%[-0,53;7,16]. Não foi observado efeito dependente de intensidade. Todos os participantes apresentaram boa tolerância dos protocolos de acomodação e estimulação. Conclusão: O protocolo aplicado revelou ser seguro e apresentar boa tolerância dos participantes. Esta é a primeira evidência de que HDETCC aplicada sobre a JTP pode influenciar no controle postural de forma polarizada, o pequeno efeito observado sugere a utilização de protocolos com maior tempo de estimulação. Os resultados deste trabalho favorecem a elaboração da hipótese de aplicação da HD-ETCC no tratamento de desequilíbrio postural / Introduction: After decades of experimentation in transcranial direct current stimulation (tDCS), few protocols achieved robust scientific acceptance. Stimulation protocols were suggested to influence postural control in healthy subjects and patients after stroke. However, the scarce literature in this area reveals imperative investigation of physiological and clinical effects of transcranial stimulations to elaborate more efficient protocols. The aim of the present study was to verify the polarity and intensity dependent effects of high-definition tDCS (HD-tDCS) over the right temporo-parietal junction (JTP) in the weight-bearing asymmetry (WBA). Methods: This is a randomized, double-blind, factorial, crossover controlled clinical trial. We included 21 healthy subjects, mean age of 24,2±4,1 years, and 61.9% women. The intervention consisted of the application of HD-tDCS over the right temporo-parietal junction (TPJ). The WBA in the upright static position was measured using one force plate under each participant\'s foot, assessed during 2 minutes at baseline and 5 minutes after each stimulation. In order to increase participants\' tolerance of the HD-tDCS, we applied an accommodation protocol consisted of 3 stimulation repetitions with 5 seconds of duration and interval, under fixed stimulation intensities of 1, 2 and 3mA. After 5 minutes of rest, the stimulation protocol consisted of 3 types of polarity (anode center; cathode center; sham) applied randomly in different days with a minimal interval of 24 hours. Each stimulation session comprised of 3 repetitions of 2 minutes HD-tDCS in different intensities (1, 2 and 3 mA). Visual analog scale was used to assess discomfort degree after each stimulation and adverse events after each session were registered. The evaluations were carried out in the Biomechanics and Motor Control Laboratory at the Ribeirão Preto School of Physical Education and Sport-USP. Results: The application of HD-tDCS over TPJ resulted in polarity-dependent effects, causing load bearing to the right leg when using central cathode condition in relation to sham at 2mA (Kruskal Wallis: p=0,037; Tukey Post-hoc: p=0,029) and 3mA Kruskal Wallis: 0,009; Tukey Post-hoc: p=0,049). The median WBA of cathode center condition was, respectively, 1,78% [-1,76;4,67] at baseline, 2,12% [-0,63;7,08] after 1mA; 2,33% [- 1,57;6,25] after 2mA; and 2,40% [-0,53;7,16] after 3mA. No intensity dependent effects were observed. Conclusion: The present protocol was feasible and presented good tolerance of participants. This is the first evidence that HD-TDCS over TPJ can influence postural balance. The small effect observed suggests the usage of longer protocols of HD-tDCS. The results of this study enable to hypothesize the application of HD-tDCS over TPJ to treat postural imbalance.

Objetivos: A dor neuropática crônica origina-se em consequência direta de uma lesão ou doença que afete o sistema somato-sensitivo. Pacientes que são refratários ao tratamento conservador são considerados candidatos a procedimentos invasivos, principalmente de ordem neuro-modulatória. A estimulação do gânglio da raiz dorsal é uma técnica recente de neuromodulação utilizada para o tratamento das dores neuropáticas crônicas de diferentes etiologias. Apesar do sucesso clínico da estimulação do gânglio da raiz dorsal no tratamento de dor neuropática já ter sido relatado em diversos trabalhos da literatura, os mecanismos neurofisiológicos responsáveis pelo alivio da dor ainda permanecem pouco esclarecidos. O presente trabalho avalia o efeito da estimulação do gânglio da raiz dorsal no processamento cortical da dor através do método de potenciais evocados a laser (PELs). Métodos: Avaliamos prospectivamente por 3 anos 34 doentes com dor inguinal (grupo 1), 62 doentes com dores neuropáticas diversas (grupo 2) que foram submetidos a estimulação do gânglio da raiz dorsal. Nestes 2 grupos foram analisadas variáveis relacionadas a intensidade da dor, incapacidade relacionada a dor, níveis de depressão e pensamentos catastróficos relacionados a dor. Adicionalmente, um subgrupo de 12 pacientes submetidos à cirurgia de estimulação do gânglio da raiz dorsal para tratamento de dor neuropática crônica unilateral da região inguinal, joelho ou perna por lesão direta de nervo periférico após procedimento cirúrgico, síndrome do insucesso da cirurgia espinhal ou síndrome dolorosa regional complexa tipo II foi avaliado de forma prospectiva (grupo 3). O lado normal foi utilizado como controle. PELs foram evocados por meio de estimulação a laser de CO2 na área desaferentada e normal. Latências e amplitudes dos componentes N2 e P2 e amplitudes do complexo N2-P2 foram correlacionados à intensidade da dor antes da terapia e após 1 e 6 meses de tratamento com estimulação do gânglio da raiz dorsal. Testes sensitivos quantitativos, escalas de intensidade da dor, incapacidade relacionada a dor, qualidade de vida, e depressão foram avaliadas. Resultados: Houve aumento significante das amplitudes do complexo N2-P2, igualando-se ao lado normal, e em paralelo diminuição significativa da intensidade de dor e na incapacidade relacionada à dor após 1 e 6 meses de tratamento em comparação com o estado pré-tratamento. Houve melhora significativa em 2 dos 8 itens de qualidade de vida avaliados. Não houve alteração significativa nos testes sensitivos quantitativos e na escala de depressão. Conclusão: A estimulação do gânglio da raiz dorsal restabeleceu as amplitudes dos PELs oriundos do giro do cíngulo anterior, ínsula e áreas temporais mediais, restaurando o processamento cortical fisiológico de dor em pacientes com dor neuropática crônica / Objectives: Chronic neuropathic pain originates as a direct consequence of an injury or disease that affects the somatosensory system. Patients who are refractory to conservative treatment are considered candidates for invasive procedures, mainly of neuro-modulatory order. Dorsal root ganglion stimulation is a recent neuromodulation technique used for the treatment of chronic neuropathic pain of different etiologies. Although the clinical success of dorsal root ganglion stimulation in the treatment of neuropathic pain has already been reported in several studies in the literature, the neurophysiological mechanisms responsible for pain relief remain unclear. The present study evaluates the effect of dorsal root ganglion stimulation on cortical pain processing through the use of laser evoked potentials (LEP). Methods: We evaluated prospectively during 3 years 34 patients with groin pain (group 1), 62 patients with various forms of neuropathic pain (group 2) who underwent dorsal root ganglion stimulation. In these 2 groups, variables related to pain intensity, pain-related disability, depression levels and painrelated catastrophic thoughts were analyzed. In addition, we prospectively analyzed a subgroup of 12 patients treated with dorsal root ganglion stimulation for treatment of chronic unilateral neuropathic pain of the groin region, knee or leg caused by direct injury of the peripheral nerve after surgical procedure, failed back surgery syndrome or complex regional pain syndrome type II (group 3). The healthy side was used as control. LEPs were evoked by means of CO2 laser stimulation in the deafferented and normal areas. Latencies and amplitudes of the N2 and P2 components and amplitudes of the N2-P2 complex were correlated to the pain intensity before therapy and after 1 and 6 months of treatment with dorsal root ganglion stimulation. Quantitative sensory testing, pain intensity scales, pain-related disability, quality of life, and depression were assessed. Results: There was a significant increase in N2-P2 complex amplitudes, matching the normal side, and in parallel a significant decrease in pain intensity and pain-related disability after 1 and 6 months of treatment compared to the pre-treatment state. There was a significant improvement in 2 out of 8 quality of life domains evaluated. There was no significant change in quantitative sensory testing and depression levels. Conclusion: Stimulation of the dorsal root ganglion reestablished the amplitudes of the LEPs originated from the anterior cingulate gyrus, insula, and medial temporal areas, restoring physiological cortical pain processing in patients with chronic neuropathic pain

Submitted by Marta Toyoda (1144061@mackenzie.br) on 2017-01-26T20:44:46Z No. of bitstreams: 2 Lucas Murrins Marques.pdf: 2701879 bytes, checksum: b5f36d94a292fe4b15b65a9807ae4616 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Eliezer Santos (eliezer.santos@mackenzie.br) on 2017-02-01T19:27:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Lucas Murrins Marques.pdf: 2701879 bytes, checksum: b5f36d94a292fe4b15b65a9807ae4616 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-01T19:27:27Z (GMT). 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Therefore, the aim of this study was to investigate the effect of inter-hemispheric balancing two regions of the PFC (Dorsolateral and Ventrolateral region) using different montages of tDCS on different strategies of emotional reapprasisal during the observation of negative images. The study purpose was to understand the specificity of the involvement of both structuresin healthy participants, with respect to the inter-hemispheric balance during emotion regulation, with respect to emotional experience, namely the behavioral aspect (valence and arousal judgement), and psychophysiological aspect (skin conductance response, and the cardiac interbeat interval). 180 undergraduate student (mean age 21,75±3,38) participated in this study, divided in two experiments (Dorsolateral PFC = n90; Ventrolateral PFC = n90). The result showed: i) the experimental task efficacy on the modulation of negative and positive affect; ii) cognitive reappraisal strategy efficacy on both emotional experience, behavioral (both experiments), and cardiac (only experiment 1); iii) Effect of anodal tDCS applied over left Ventrolateral PFC on increased valence evaluation of negative images, as well as on the decreased cardiac interbeat interval on earlier momentos of emotional processment. The findings suggest a main left Ventrolateral PFC role on selection and inhibition of negative content. Furthermore, the present study demonstrate for the very first time, modulation of cardiac recruitment due to: i) the cognitive reappraisal strategy used (experiment 1); and ii) the tDCS condition applied (experiment 2). Further studies are needed to confirm the hypotheses raised here. / Entende-se emoção por uma alteração comportamental, fisiológica e subjetiva do indivíduo em resposta a uma dada situação. Muitas vezes uma eficiente regulação destas emoções pode promover a sobrevivência social e psicológica do sujeito emocionado. Neste sentido, estudos recentes apontam que o Córtex Pré-frontal (CPF) apresenta relevante papel no controle cognitivo das emoções, principalmente durante a estratégia de reavaliação emocional. Paralelamente, a Estimulação Transcraniana por Corrente Contínua tem se mostrado uma eficiente técnica de neuromodulação no estudo causal entre estruturas corticais e funções cognitivas, tais como a regulação emocional. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo geral investigar o efeito do balanceamento inter-hemisférico de duas regiões do CPF (região Dorsolateral e Ventrolateral) com uso de diferentes montagens de ETCC, em diferentes estratégias de reavaliação cognitiva durante a avaliação de imagens de conteúdo negativo. Desta forma, buscou-se investigar a especificidade do envolvimento de ambas as estruturas em participantes saudáveis, com relação ao balanceamento inter-hemisférico durante a reavaliação cognitiva, sobre a experiência emocional comportamental (julgamento de valência e intensidade das imagens) e psicofisiológica (níveis da resposta de condutância da pele e o tempo do intervalo inter-batidas da resposta cardíaca). Participaram do estudo 180 estudantes universitários (média de idade 21,75±3,38) dividos em dois experimentos (CPF Dorsolateral = n90; CPF Ventrolateral = n90).Os resultados apontam: i) eficácia da tarefa na modulação de afetos positivos e negativos; ii) eficácia das estratégias de reavaliação cognitiva na modulação da experiência emocional comportamental (ambos os experimentos), e cardíaca (apenas experimento 1); iii) efeito de ETCC anódica em CPF Ventrolateral esquerdo no aumento do julgamento de valência emocional de imagens negativas, bem como na diminuição do intervalo inter-batidas nos primeiros momentos do processamento das imagens emocionais. Os achados sugerem influência do CPF Ventrolateral esquerdo no processo de seleção e inibição de conteúdo emocional negativo. Além disso, o presente trabalho demonstrou pela primeira vez modulação no recrutamento cardíaco em relação: i) a estratégia de reavaliação cognitiva utilizada (Experimento 1), e ii) a condição de ETCC aplicada (Experimento 2). Novos estudos se fazem necessários para confirmar as hipóteses aqui levantadas.