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Efeito do fipronil na fertilidade em ratos: efeitos oxidantes e proteção pela vitamina E / Effect of fipronil on the fertility in rats: oxidant effect and protection by vitamin EMazzo, Meiriele [UNESP] 21 February 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-02-21 / Fipronil é um inseticida de amplo-espectro de ação, utilizado para o controle de pragas nas lavouras e de ectoparasitas na medicina veterinária. O objetivo do trabalho foi avaliar os efeitos tóxicos do fipronil sobre a fertilidade de ratos machos por meio da avaliação da produção de espermatozoides e de danos oxidativos causados no homogenato de testículos, além de avaliar a ação protetora da vitamina E. Ratos Wistar machos pesando aproximadamente 200 g foram divididos em três grupos (n = 6): controle: DMSO (60%) mais salina (40%) por via intraperitoneal (i.p.); fipronil 5: fipronil dissolvido em DMSO (60%) mais salina (40%) (5 mg/kg de peso corporal i.p.); fipronil 5 + vitamina E: fipronil dissolvido em DMSO (60%) mais salina (40%) (5 mg/kg de peso corporal i.p.) e vitamina E (100 mg/kg de peso vivo via oral).Durante 14 dias os animais foram pesados e cada grupo recebeu seu respectivo tratamento conforme citado, sendo que no 15º dia os animais foram eutanasiados e os testículos e epidídimos foram isolados para realização das seguintes análises: concentração de espermatozoides nos epidídimos, atividade das enzimas glutationa peroxidase (GPx) e catalase (CAT), determinação das concentrações de glutationa reduzida (GSH), grupos tióis de proteínas e malondialdeído (MDA) no homogenato dos testículos. Os dados foram analisados por ANOVA seguido pelo teste de Tukey. O fipronil reduziu significantemente a produção de espermatozoides (P < 0,01) e a vitamina E apresentou efeito protetor sobre esse parâmetro. A atividade da enzima GPx aumentou e a da CAT foi significantemente reduzida pelo fipronil (P < 0,001 e P < 0,05, respectivamente) e a vitamina E reestabeleceu as atividades das enzimas para níveis similares aos do grupo controle. Observou-se uma redução significante na concentração de GSH nos testículos dos ratos tratados com fipronil (P < 0,001) em relação ao grupo controle e a vitamina E apresentou uma proteção parcial deste efeito. Não houve alteração na concentração de grupos tióis de proteínas. Houve um aumento significante na concentração de MDA (P < 0,05), indicador de lipoperoxidação, nos animais tratados com fipronil e esse efeito foi diminuído pela vitamina E. Conclui-se que o fipronil afetou a produção de espermatozoides em ratos por apresentar atividade oxidante e que este efeito foi revertido pela vitamina E. / Fipronil is an insecticide with a broad-spectrum of action, used largely in both agricultural crops and veterinary medicine to control pests and ectoparasites. The objective of this study was to evaluate the toxic effects of fipronil on the fertility of male rats by evaluating sperm production and oxidative damage caused in the testis homogenate, as well as the protective action of vitamin E. Male Wistar rats weighing approximately 200 g were divided into three groups (n = 6): control: corn oil orally and DMSO (60%) plus saline (40%) intraperitoneally (i.p.); fipronil 5: fipronil dissolved in DMSO (60%) plus saline (40%) (5 mg/kg body weight i.p.); fipronil 5 + vitamin E: fipronil dissolved in DMSO (60%) plus saline (40%) (5 mg/kg body weight i.p.) and vitamin E dissolved in corn oil (100 mg/kg body weight orally). During 14 days the animals were weighed and each group received its respective treatment as mentioned, and on the 15th day the animals were euthanized and the testicles and epididymis were isolated for the following analysis: sperm concentration in the epididymis, activity of the glutathione peroxidase (GPx) and catalase (CAT) enzymes, concentrations of reduced glutathione (GSH), protein thiol groups and malondialdehyde (MDA) in the homogenate of testicles. Data were analyzed by ANOVA followed by the Tukey test. Fipronil significantly reduced sperm production (P < 0.01) and vitamin E had a protective effect on this parameter. The activity of the GPx enzyme increased and that of CAT was significantly reduced by fipronil (P < 0.001 and P < 0.05, respectively) but the vitamin E reestablished the enzyme activities to levels similar to those of the control group. A significant reduction in GSH concentration was observed in the testis of rats treated with fipronil (P < 0.001) compared to the control group and vitamin E showed partial protection against this effect. There was no change in the concentration of thiol groups of proteins. There was a significant increase in the concentration of MDA (P < 0.05), indicative of lipoperoxidation, in the animals treated with fipronil and this effect was reduced by vitamin E. It was concluded that fipronil declined the sperm production of the rats because its oxidant activity and that this effect was reversed by vitamin E.
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Efeito dos herbicidas Roundup®, Primoleo® e Facet® sobre o metabolismo intermediário, o estresse oxidativo e a sobrevivência de Rhamdia quelen em diferentes fases de desenvolvimentoPersch, Tanilene Sotero Pinto January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / Agrochemicals are water contaminants, resulting from anthropogenic activities, having as main objective the elimination of some form of life and, therefore, being harmful even to non-target species. It is utmost importance the standardization and the use of bioindicators, especially of native organisms, besides the development of toxicity tests or bioassays to assess the impacts of the agroindustrial activities. Thus, it was sought to identify possible biochemical changes, to evaluate the oxidative balance and the survival of individuals of catfish Rhamdia quelen, in two aged groups, facing acute toxicity tests with different concentrations of Roundup® (glyphosate: 18, 36, 72 and 144μg/L), Primoleo® (atrazine: 2. 5, 5, 10 and 15μg/L) and Facet® (quinclorac: 1. 75, 3. 5, 7 and 14μg/L). The procedures were performed with fingerlings (individuals with total length between 6 and 8 cm) and sexually newly matured individuals, called young-adult (with total length of more than 18 cm). All the animals were purchased from a farm and were kept for 7 days in a period called Acclimatization. After, agrochemicals were applied individually, at concentrations similar to those reported for the natural environment and allowed by law in our country. After 7 days of exposuring to the agrochemical, the animals were euthanized by cervical spinal cord section and the gill, liver, kidney and muscle tissues were separated and frozen at -20ºC.In fingerlings, pools were performed, grouping the tissue from three individuals, due to their low weight; the tissues from young-adult were analyzed individually. It was estimated the effect of this agrochemicals on intermidiate metabolism, by determining the glycogen levels, total proteins, total lipids and triacylglycerols, on the two length ranges. It was also evaluated the effect of this agrochemicals on the oxidative status determining the activity of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), and levels of lipid peroxidation (TBARS) in all the tissues from the animals on the two length ranges. The experimental procedures and the biochemical readings were performed in triplicate. It was also observed the effect of this agrochemicals on the survival of the individuals in experimental culture conditions, in both aged groups, searching for confirmation of sublethallity of determined concentrations for testing. The results are organized into three articles. The first is entitled Metabolic parameters and oxidative balance Rhamdia quelen changed after exposure to herbicides of rice crops (Roundup®, Primoleo® and Facet®), for submission to the journal Archives of Environmental Contamination and Toxicology, which presents the results obtained for the metabolism and the oxidative balance of fingerlings, which seem to have been able to modulate their enzymes as not to suffer oxidative damage front to Roundup® herbicide (by increasing CAT) and Primoleo® (without changes in SOD and CAT). The Facet® led to the increase of lipid peroxidation, especially in the gill, kidney and muscle tissues, despite the higher SOD, prejudicing the species significantly.The biochemical composition tissue of juveniles of R. quelen changed significantly, which may cause damages, mainly in the gill tissue, leading to a loss of homeostasis and it may result the death of the animals and/or the decrease of the reproductive success, when chronically exposed to these substances and concentrations. The second article entitled Metabolic changes in silver catfish exposed to herbicide of rice crop Roundup®, Primoleo® and Facet®, is concerned to the young-adult metabolism, for submission to the journal Environmental Pollution. There were changes in the metabolic profile of all sampled tissues, showing a differentiated tissue responsiveness, being the gills and the kidneys the most affected organs by the exposure to agrochemicals. The herbicide Facet® changed the gill tissue significantly, and it was suggested that the relevant Brazilian agencies regulate its use in protective standards for the environment. Finally, the third manuscript Article Oxidative status and lipid peroxidation determined by the exposure to agrochemicals Roundup®, Primoleo® and Facet® in Rhamdia quelen approaches the oxidative stress suffered by young-adults to be submitted to the journal Ecotoxicology and Environmental Safety. In this work the liver and kidney tissues were the most affected, and it can be infered that the Facet® (quinclorac) was the most toxic herbicide to the sexually newly matured individuals, followed by Primoleo® (atrazine) and after by Roundup® (glyphosate). One can suggest, from this set of results, a review of the current legislation in our country, to include products with the quinclorac active principle into the toxic list to be controlled in the natural environment. / Os agroquímicos são contaminantes aquáticos decorrentes das atividades antropogênicas, tendo como principal objetivo a eliminação de alguma forma de vida, sendo, portanto, lesivos inclusive à espécies não-alvo. É de extrema importância a padronização e a utilização de espécies bioindicadoras, em especial de organismos autóctones, além do desenvolvimento de testes de toxicidade ou bioensaios para avaliação dos impactos decorrentes das atividades agroindustriais. Assim, buscou-se verificar possíveis alterações bioquímicas, avaliar o balanço oxidativo e a sobrevivência de indivíduos do jundiá Rhamdia quelen, em duas faixas etárias, frente a testes de toxicidade aguda com diferentes concentrações de Roundup® (glifosato: 18, 36, 72 e 144μg/L), Primoleo® (atrazina: 2,5, 5, 10 e 15μg/L) e Facet® (quinclorac: 1,75, 3,5, 7 e 14μg/L). Foram realizados os procedimentos com alevinos (indivíduos com comprimento total entre 6 e 8 cm) e indivíduos recém-maturados sexualmente, chamados alevinões (com comprimento total superior a 18 cm). Todos os animais foram comprados de uma piscicultura e permaneceram por 7 dias em um período denominado Aclimatação. Após, os agroquímicos foram aplicados individualmente, em concentrações semelhantes às relatadas para o ambiente natural e permitido pela legislação vigente em nosso país. Após 7 dias de exposição ao agroquímico, os animais foram eutanasiados por secção de medula cervical, e foram separados os tecidos branquial, hepático, renal e muscular, sendo congelados a -20ºC.Nos alevinos, foram realizados agrupamentos dos tecidos de três indivíduos, devido seu baixo peso; os tecidos dos alevinões foram analisados individualmente. Estimou-se o efeito destes agroquímicos sobre o metabolismo intermediário, através da determinação dos níveis de glicogênio, proteínas totais, lipídeos totais e triacilgliceróis, nas duas faixas de comprimento. Avaliouse também o efeito destes agroquímicos sobre o status oxidativo determinando a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), além dos níveis de lipoperoxidação (TBARS) nos quatro tecidos dos animais, das duas faixas de comprimento. Os procedimentos experimentais e as leituras biquímicas foram realizados em triplicata. Ainda observou-se o efeito destes sobre a sobrevivência dos indivíduos em condições de cultivo experimental, nas duas faixas etárias, buscando a confirmação da subletalidade das concentrações determinadas para os testes. Os resultados estão organizados em três artigos, sendo o primeiro intitulado Parâmetros metabólicos e balanço oxidativo de Rhamdia quelen alterado frente à exposição a herbicidas de lavoura de arroz (Roundup®, Primoleo® e Facet®), para a submissão à Revista Archives of Environmental Contamination and Toxicology, onde são apresentados os resultados obtidos para o metabolismo e o balanço oxidativo dos alevinos, que parecem ter conseguido modular suas enzimas a ponto de não sofrerem dano oxidativo frente aos herbicidas Roundup® (pelo aumento da CAT) e Primoleo® (sem alterações nas enzimas SOD e CAT). O Facet® provocou o aumento da lipoperoxidação, principalmente nos tecidos branquial, renal e muscular, apesar da elevação da SOD, agredindo significativamente a espécie.A composição bioquímica tecidual dos juvenis de R. quelen sofreu alterações significativas, podendo acarretar a danos principalmente no tecido branquial, conduzindo à perda da homeostase e podendo acarretar na morte dos animais e/ou a diminuição do sucesso reprodutivo, quando expostos cronicamente a estas substâncias e nestas concentrações. O 2º artigo, intitulado Alterações metabólicas em jundiás expostos aos herbicidas de lavoura de arroz Roundup®, Primoleo® e Facet®, versa sobre o metabolismo de alevinões, para submissão à Revista Environmental Pollution. Houve alterações no perfil metabólico de todos os tecidos amostrados, evidenciando uma responsividade tecidual diferenciada, sendo as brânquias e os rins os órgãos mais afetados com a exposição aos agroquímicos. O herbicida Facet® alterou significativamente o tecido branquial, sendo sugerido que os órgãos brasileiros competentes regulamentem o seu uso em normas protetivas ao meio ambiente. Por fim, o manuscrito do artigo Status oxidativo e lipoperoxidação determinados pela exposição aos agroquímicos Roundup®, Primoleo® e Facet® em Rhamdia quelen, aborda o estresse oxidativo sofrido pelos alevinões, a ser submetido à Revista Ecotoxicology and Environmental Safety. Neste trabalho os tecidos hepático e renal foram os mais afetados, e podemos inferir que o Facet® (quinclorac) foi o agroquímico mais tóxico aos indivíduos recém-maturados sexualmente, seguido do Primoleo® (atrazina) e após o Roundup® (glifosato). Podese, a partir deste conjunto de resultados, sugerir uma revisão na legislação vigente em nosso país, a fim de incluir produtos com o princípio ativo quinclorac na lista de tóxicos a serem controlados no ambiente natural.
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Estudo sazonal do metabolismo intermediário e do balanço oxidativo de Hyalella kaingang (Crustacea, Hyalellidae) em ambiente naturalBraghirolli, Fernando Machado January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / Currently, the execution of biological research that is able to classify and characterize the biodiversity and its ecological relations has been increasingly important and necessary in order to achieve environmental conservation. Conservation physiology is concerned about studying and qualifying many variables related to an organism, so that is possible to increase the knowledge about the functioning of a given species and to detail main environmental requirements or to establish periods of natural vulnerability. The genus Hyalella presents an American distribution and has a great importance on the food chain where it occurs, and becoming a fundamental link in processes of energy transference. The amphipod Hyalella kaingang, a very recent described species and so far not very studied, was used on this study of seasonal variation, and the objective of the present work was to analyze the metabolic behavior, the metabolic allocation, the levels of lipid peroxidation and the activity of antioxidant enzymes of the species. Thirty animals from each sex were used each season of the year, which were collected at Centro de Pesquisa e Conservação da Natureza (CPCN) Pró-Mata, located at São Francisco de Paula, Rio Grande do Sul. In the field, animals were euthanized by cryoanesthesia and in the laboratory they were homogenized in order to quantify levels of total proteins, glycogen, lipids, triglycerides, glycerol lipid peroxidation and the activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase, catalase and glutathione S- transferase. There was significative difference in the levels of glycogen, lipids, triglycerides, lipoperoxidation and in the activity of the enzymes superoxide dismutase and glutathione S-transferase over a full seasonal cycle in both males and females. The results of biomarkers from energetic metabolism and from oxidative stress indicate a feeding trend directed to the ingestion of proteins, and it is also suggested that the reproductive period of the species may be long-lasting, with this hypothesis being based also on the observation of pregnant females in many of the analyzed seasons. It is also suggested that there may be a reproductive peak during autumn. However, more studies must be done with this species so that the knowledge about its reproductive biology, general ecology and physiology can be increased. The present work also reinforces the idea that must be a greater interaction between different scientific fields so that a more precise profile of any given organism can be stated. / Atualmente, a realização de levantamentos biológicos que sejam capazes de classificar e caracterizar a biodiversidade e suas relações ecológicas tem sido cada vez mais importante e necessária na busca da conservação ambiental. A fisiologia da conservação preocupa-se em estudar e qualificar diversas variáveis relacionadas a um organismo, para que assim seja possível ampliar os conhecimentos acerca do funcionamento de determinada espécie e detalhar necessidades básicas ambientais ou estabelecer períodos de vulnerabilidade natural. O gênero Hyalella, de distribuição americana, tem uma grande importância nas cadeias tróficas onde ocorrem, tornando-se uma ligação fundamental em processos de transferência energética. O anfípodo Hyalella kaingang, uma espécie recentemente descrita e pouco estudada, foi utilizada nas pesquisas referentes às análises sazonais, e o objetivo do presente trabalho foi analisar o funcionamento metabólico, a alocação energética, os níveis de lipoperoxidação e atividades de enzimas antioxidantes da espécie. Foram utilizados 30 animais de cada sexo em cada estação do ano, os quais foram coletados dentro do Centro de Pesquisa e Conservação da Natureza (CPCN) Pró-Mata, no município de São Francisco de Paula, Rio Grande do Sul. Em campo, os animais foram eutanaziados por crioanestesia e no laboratório, homogeneizados para a quantificação dos níveis de proteínas, glicogênio, lipídios, triglicerídeos, glicerol, lipoperoxidação e a atividade das enzimas superóxido dismutase, catalase e glutationa S-transferase. Houve diferença significativa nos níveis de glicogênio, lipídios, triglicerídeos, lipoperoxidação e na atividade das enzimas superóxido dismutase e glutationa S-transferase ao longo de um ciclo sazonal, tanto em machos como em fêmeas. Os resultados encontrados a partir dos biomarcadores de metabolismo energético e do estresse oxidativo indicam tendências alimentares direcionadas ao consumo predominantemente de proteínas, e também que o período reprodutivo da espécie seja longo, hipótese baseada também na observação de fêmeas ovígeras em muitas estações. Sugere-se também, que exista um pico de atividade reprodutiva no outono. Contudo, mais estudos devem ser realizados com a espécie para que possam ser aprofundados os conhecimentos acerca da biologia reprodutiva, ecologia geral e fisiologia desta espécie. O presente trabalho reforça a ideia de que deve haver uma maior integração entre diferentes campos científicos para que se possa obter um perfil mais preciso de um determinado organismo.
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A influência do herbicida FACET® (Quinclorac) nos níveis de corticosterona, metabólitos plasmáticos e nas defesas antioxidantes do fígado de girinos de rã touro (Lithobates catesbeianus Shaw, 1802)Coltro, Mariana de Lima January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / Since the principles of management in agriculture by man, technology has increased exponentially, allowing rapid development of this sector. However, many improvements are linked to use of chemically synthesized compounds, with the environment and the human being exposed to these pollutants, often harmful. Nevertheless, the amount of these herbicides is increasing. The herbicide based on quinclorac, as Facet® acts as a growth inhibitor, immediately absorbed by germinated seeds, roots and leaves and then transported to the plant. This agent is commonly applied in rice fields and in southern Brazil, the quinclorac is most often detected in studies with agrochemical residues used on these crops and is considered a major water contaminant. Several animal studies have demonstrated the negative biological effect of this xenobiotic, as changes in behavior, development and production of corticosteroids, which may cause malformations, cell differentiation and reproduction problems. Given the high sensitivity of tadpoles to environmental stressors, we choose as model Lithobates catesbeianus species, which has, among ranídae family, a great plasticity and toughness, due probably to be an introduced species in Brazil. To perform this study were acquired 79 tadpoles with 4 months old, on stage 25 (pro metamorphic) of the Gosner table. Animals were divided into tanks of 60L of water with constant aeration in natural photoperiod and temperature, pH of 7. 4, fed ad libitum on chow. Since there was manipulation and euthanasia of animals, the study was submitted to the Ethics Committee on Animal Use (CEUA) of PUCRS. The herbicide was added at day 8 in X1 concentrations (0,05μg/L), X2 (0,1μg/L), X3 (0,2μg/L) and X4 (0,4μg/L). The objective of the research was to analyze the possible alterations in the activity of antioxidant enzymes and levels of lipid peroxidation (LPO) liver; as well as the levels of corticosterone (CORT), glucose and uric acid (UA) in plasma after exposure of the herbicide. Since there was no difference between groups control 7 days (C7) and control 14 days (14), except for the UA as the groups were compared with the C14, where they show the same development time of exposed. The results showed significant differences in LPO, especially in animals exposed concentration 0. 1 μ g/L (X1) of the herbicide; also induces the increased activity of GST, SOD and CAT; After it followed by a decrease in this activity where noticed in the case of SOD, CAT and GST, an inverse relationship between the concentration of the pesticide and the response of the enzyme system. However, these results did not determine an increase in lipoperoxidation and even cause death to the animal suggesting a high constitutive activity of these enzymes and / or the presence of a non-enzymatic antioxidant system rather desenvolvido. The plasma corticosterone levels showed differences between the groups X1 (0,05μg/L) and X4 (0,4μg/L), a decrease in X4, deducting a decreased responsiveness of animals to prolonged exposure front seven days, at higher concentrations of the pesticide; this response being coupled to increased glucose levels in X3. The UA levels showed a significant reduction in X4 group, however, for further findings on the use of this molecule and its role as an antioxidant by the non-enzymatic system will require new studies. / Desde os princípios do manejo com agricultura pelo homem, a tecnologia tem aumentado de modo exponencial, permitindo a rápida evolução deste setor. Porém, muitas melhorias estão atreladas a utilização de compostos quimicamente sintetizados, sendo o meio ambiente e o próprio ser humano expostos a estes poluentes, muitas vezes nocivos. Mesmo assim, a quantidade desses herbicidas é crescente. Herbicidas a base de quinclorac, como o Facet® atuam como inibidores do crescimento, sendo imediatamente absorvidos por sementes germinadas, raízes e folhas e então translocados para a planta. Este agente é comumente aplicado em lavouras de arroz e, no sul do Brasil, o quinclorac é o mais frequentemente detectado em estudos com resíduos de agroquímicos utilizados nestas lavouras, sendo considerado um grande contaminante de águas. Diversos estudos com animais tem demostrado o efeito biológico negativo de xenobiontes, como alterações no comportamento, desenvolvimento e produção de corticoides, podendo acarretar malformações, problemas de diferenciação celular e reprodução. Tendo em vista a alta sensibilidade de girinos a estressores ambientais, escolhemos como modelo a espécie Lithobates catesbeianus, que possui, dentre a família ranídea, uma grande plasticidade e resistência, sendo uma espécie introduzida no Brasil. Para a realização deste estudo foram adquiridos 79 girinos com 4 meses de vida, no estágio 25 (pró-metamórfico) da tabela de Gosner. Os animais foram divididos em aquários com 60L de água, com aeração constante em fotoperíodo e temperatura naturais, pH de 7,4, alimentados ad libitum com ração. Uma vez que houve manipulação e eutanásia dos animais, a pesquisa foi submetida à Comissão de Ética no Uso de animais (CEUA) da PUCRS.O herbicida foi adicionado no 8º dia nas concentrações X1(0,05μg/L), X2(0,1μg/L), X3(0,2μg/L) e X4(0,4μg/L). O objetivo da pesquisa foi analisar as possíveis alterações da atividade das enzimas antioxidantes e níveis de lipoperoxidação (LPO) hepática; assim como, dos níveis de corticosterona (CORT), glicose e ácido úrico (AU) no plasma frente à exposição do herbicida. Uma vez que não houve diferença entre os grupos controle 7 dias (C7) e controle 14 dias (C14), com exceção da medida de AU, assim os grupos foram comparados com o C14, onde os animais apresentam o mesmo tempo de desenvolvimento dos expostos. Os resultados mostraram diferenças significativas na LPO, principalmente nos animais expostos a concentração 0,1μg/L (X1) do herbicida; induzindo também, a aumento da atividade da GST, da SOD e da CAT; após seguiu-se uma diminuição desta atividade onde verificamos, no caso da SOD, CAT e GST, uma relação inversa entre a concentração do pesticida e a resposta do sistema enzimático. Porém, estes resultados não determinaram um aumento na lipoperoxidação e nem causam mortalidade aos animais o que sugere uma atividade constitutiva alta destas enzimas e/ou a presença de um sistema antioxidante não enzimático bastante eficiente. Os níveis de corticosterona plasmático apresentaram diferença entre os grupos X1(0,05μg/L) e X4(0,4μg/L), com decréscimo no X4, deduzindo uma diminuição da capacidade de resposta do animal frente à exposição prolongada, sete dias, a concentrações mais elevadas do pesticida; estando esta resposta aliada a um aumento da glicemia em X3. Os níveis de AU apresentaram uma redução significativa no grupo X4, porém, para maiores conclusões sobre o uso desta molécula como antioxidante e seu papel junto ao sistema não enzimático serão necessários novos estudos.
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Metabolismo oxidativo sérico em ratos diabéticos com lesão periapical /Prieto, Annelise Katrine Carrara. January 2014 (has links)
Orientador: Luciano Tavares Angelo Cintra / Coorientador: Paulo César Ciarlini / Banca: Eloi Dezan Júnior / Banca: José Flávio Affonso de Almeida / Resumo: Este trabalho teve como objetivo avaliar a influência da infecção endodôntica associada ou não à diabetes, nas concentrações séricas dos antioxidantes endógenos albumina, bilirrubina e ácido úrico, da capacidade antioxidante total (TAC) e do parâmetro oxidante malonaldeído (MDA) em soro sanguíneo de ratos Wistar. Foram utilizados 40 ratos divididos em 4 grupos: euglicêmicos (C); euglicêmicos com lesão periapical (LP); diabético (D) e diabético com lesão periapical (D+LP). A diabetes foi induzida quimicamente pela utilização da droga Aloxano, via intramuscular, na dose de 150 mg/kg, e a lesão periapical, por meio da exposição pulpar do primeiro molar superior direito ao meio bucal durante 30 dias. Após este período, foi coletado o sangue, através de punção cardíaca para obtenção do soro, e também, as hemimaxilas, para o processamento histológico. No soro foi realizada a mensuração da albumina pela técnica verde de bromocresol, bilirrubina por Van der Bergh, ácido úrico pela uricase, TAC pela captura do radical livre ABTS, e MDA pelo ensaio das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Na análise histológica foram avaliadas a intensidade e extensão da inflamação, reabsorção radicular e tamanho da lesão. Os valores foram analisados pelos testes de análise de variância (ANOVA) e de Tukey (p<0,05). Os valores obtidos em escores foram analisados estatisticamente, por meio dos testes de Kruskal-Wallis e Dunn (p<0,05). Nos ratos diabéticos (D e D+LP) houve um aumento da concentração de MDA e ácido úrico e uma diminuição de albumina em relação aos ratos euglicêmicos (C e LP). O grupo D+LP comparado ao D apresentou um aumento de ácido úrico e diminuição de albumina. A análise histológica mostrou que a lesão periapical de ratos diabéticos (D+LP) possui maior severidade quando comparada com a dos ratos euglicêmicos (LP). A lesão... / Abstract: This study aimed to evaluate the influence of endodontic infection associated with or without diabetes, in the serum concentrations of endogenous antioxidants albumin, bilirubin and uric acid, total antioxidant capacity (TAC) and oxidant parameter, malondialdehyde (MDA) in blood serum of the Wistar. It were used 40 rats in 4 groups: euglycemic (E); euglycemic with periapical lesion (PL); diabetic (D) and diabetic with periapical lesion (D + PL). Diabetes was chemically induced by alloxan intramuscularly at a dose of 150 mg/kg and periapical lesion by exposure right first molar to the oral environment for 30 days. After this period, blood was collected via cardiac puncture to obtain serum, and also the hemi-jaws for histological processing. Albumin measurement by bromocresol green technique, bilirubin by Van der Bergh, uric acid by uricase, TAC by capturing the free radical ABTS, and MDA by assay of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) were performed in serum. In the histological analysis, the intensity and extent of inflammation, root resorption and bone loss were evaluated. The values were analyzed by analysis of variance tests (ANOVA) and Tukey‟s test (p < 0.05). The values obtained for scores were statistically analyzed by the Kruskal- Wallis test and Dunn‟s tests (p < 0.05). In diabetic rats (D and D + PL) there was an increase in the concentration of MDA and uric acid while decrease in albumin compared to euglycemic rats (E and PL). D + PL group compared to D showed an increase of uric acid and decreased albumin. Histological analysis showed periapical lesion of diabetic rats (D + PL) has a greater severity when compared with the euglycemic rats (PL). Periapical lesion associated with diabetes changes the antioxidant status, reducing serum levels of albumin and increasing serum levels of uric acid / Mestre
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Influência da terapêutica hormonal estrogênica e do treinamento de força sobre o tecido muscular esquelético de ratas senis /Morais, Samuel Rodrigues Lourenço de. January 2016 (has links)
Orientador: Rita Cássia Menegati Dornelles / Coorientadora Patricia Chakur Brum / Coorientador: Antonio Musarò / Banca: Edilson Ervolino / Banca: Paulo Cesar Ciarlini / Banca: Luiz Carlos Carvalho Navegantes / Banca: Aline Villa Nova Bacurau / Resumo: A diminuição das concentrações plasmáticas de estrógeno está intimamente relacionada com o aumento do estresse oxidativo e a diminuição da massa muscular em idosos. A terapêutica hormonal estrogênica (THE) e o treinamento de força (TF) apresentam resultados efetivos sobre a manutenção do tecido muscular em idosos . N o entanto, os mecanismos responsáveis pelas melhorias induzias por ambas as i ntervenções são pouco elucidad o s. Nesse sentido, avaliamos os efeitos da THE, do TF e a associação sobre a manutenção do tecido muscular esquelético de ratas periestropausadas. Ratas Wistar (18 meses) foram distribuídas em: Grupo não treinado (NT - Veh), Grupo NT tratado com a THE (NT - E 2 ), Grupo TF (TF - Veh) e Grupo TF - E 2 . Os animais receberam a THE (17β estradiol; 2 x semana; 25 μg/kg/ administração ) e/ou praticaram TF (3 x semana; 80% sobrecarga) durante 16 semanas. A THE e o TF induzem benefícios ao tecid o muscular esquelético de ratas periestropausadas, no entanto, por diferentes maneiras. Enquanto a THE induziu diminuição do estresse oxidativo muscular (Dihidroetidina), o TF resultou em melhoras significativas na função muscular, no sistema antioxidante muscular (Catalase) e na expressão de miRNAs (206, 146b e 133a) . Já a interação das intervenções resultou em melhora no estado redox (Sirt1, Sirt3, PGC - 1α, COXIV), na responsividade dos receptores estrogênicos (ERα, ERβ e GPR30), e atividade de vias de sin alização do tecido muscular (IGF - 1/Akt - 1 /mTOR). Além disso, as intervenções de maneira isolada ou em associação, levaram ao aumento no percentual de fibras glicolíticas e redução das oxidativas. Sugerimos que a aderências das intervenções (associadas ou nã o) possa m minimizar/ atenuar a perda da massa muscular observada em fases tardias durante o processo de envelhecimento. / Abstract: The decrease of estrogen (E 2 ) circulating levels is strongly related to increased oxidative stress and the loss of muscle mass in elderly. The hormone replacement therapy (HRT) and strength training (ST) are the main effective interventions to prevent the loss of muscle mass, however, the mechanisms involved in interventions - induced benefits are not well e lucidated. In this sense we evaluate the effect of HRT, ST and association on skeletal muscle maintenance of periestropaused rats. Female Wistar rats (18 months old) were randomly assigned into: non - exercised and non - treated group (NE - Veh), NE treated group (NE - E 2 ), exercised and no n - treated group (ST - Veh) and ST - E 2 group. The animals received the HRT (17 β estradiol; 2 x week; 50 μg/kg/week) and/or performed ST (3 x week, 80% overload) for 16 weeks. The HRT and ST promoted beneficial effects on skeletal muscle of periestropaused rats, however, by different manners. While HRT treatment leaves the reduction of oxidative stress (Dihidroetidine), the ST resulted in significate improvement on skeletal muscle function, in skeletal muscle antioxidant system (Catalase) and in miRNAs expressio n (2016, 146b and 133a). Already, the association of interventions resulted in improvement of redox state (Sirt1, Sirt3, PGC - 1α, COXIV), in estrogen receptor responsiveness ( ER α, ER β and GPR30) and the activity of skeletal muscle signaling pathways (IGF - 1/ Akt - 1/mTOR ). In addition, the interventions, isolated or combinated, leaves an increase of the percentage of glycolytic fibers and reduced percentage of oxidative fibers. We suggest that the adherence to interventions (combinated or not) could minimize/att enuate the loss of skeletal muscle mass observed in later phases of aging process. / Doutor
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Atividade anti-inflamatória e antioxidante de flavonoides cítricos em camundongos submetidos a dieta indutora do estado pró-inflamatório /Ferreira, Paula Souza. January 2014 (has links)
Orientador: Thais Borges Cesar / Banca: Amanda Martins Baviera / Banca: Luis Carlos Spolidorio / Resumo: O estresse oxidativo e a inflamação na obesidade estão associados ao desenvolvimento de doenças crônicas, tais como o diabetes mellitus e as doenças cardiovasculares. A ingestão de dietas com alto teor de gorduras saturadas e açúcar, mas deficientes em compostos antioxidantes, contribui para o acúmulo de tecido adiposo e podem levar ao aumento de marcadores inflamatórios no sangue e tecidos. Os flavonoides cítricos possuem propriedades biológicas capazes de atenuar o estresse oxidativo e a inflamação, protegendo contra as desordens metabólicas decorrentes da obesidade e excesso de tecido adiposo. Neste trabalho foi avaliado o efeito da hesperidina, eriocitrina e eriodictiol sobre a inflamação, o estresse oxidativo e alterações no soro, fígado, coração e baço de camundongos induzidos à obesidade com dieta hiperlipídica, contendo 45% de calorias derivadas de lipídios, por quatro semanas. A hesperidina, eriocitrina e eriodictiol inibiram eficientemente o aumento dos níveis séricos de IL-6, MCP-1, proteína C-reativa, e de TBARS no fígado causado pelo consumo da dieta hiperlipídica e excesso de gordura visceral, impedindo o aumento da massa do baço e aumentando a capacidade antioxidante total no soro. A eriocitrina e eriodictiol reduziram também os níveis de TBARS no soro, enquanto o acúmulo de gordura e danos no fígado foram reduzidos pela hesperidina e eriocitrina, e a massa do coração pela hesperidina e eriodictiol. Esses resultados mostram que a hesperidina, eriocitrina e eriodictiol protegem contra a inflamação e estresse oxidativo causados pelo consumo de dieta hiperlipídica e acúmulo de gordura visceral, como indicado pela diminuição dos marcadores inflamatórios, da peroxidação lipídica, esteatose e danos hepáticos, e da massa do baço e coração, sendo bons candidatos para o tratamento das alterações primárias da obesidade, nas quais eles poderiam ajudar a prevenir o desenvolvimento de ... / Abstract: Oxidative stress and inflammation in obesity are associated with the development of chronic diseases such as diabetes mellitus and cardiovascular diseases. The ingestion of diets rich in saturated fatty acids and sugar, but deficient in antioxidants, contributes to adipose tissue accumulation and may lead to increased inflammatory markers in the blood and tissues. Citrus flavonoids have biological properties capable of attenuating oxidative stress and inflammation, protecting against metabolic disorders resulting from obesity and adipose tissue excess. In the present work we assessed the effect of hesperidin, eriocitrin and eriodictyol over inflammation, oxidative stress and the changes resulting from these process in the blood serum, liver, heart and spleen of mice fed a high-fat diet, which contained 45% of calories from fat, for a period of four weeks. Hesperidin, eriocitrin and eriodictyol supplementation efficiently inhibited the increase of serum IL-6, MCP-1 and C-reactive protein, and also the TBARS levels of the liver, caused by high-fat diet ingestion and excessive visceral fat, thus preventing the increase in spleen weight and increasing serum total antioxidant capacity. Eriocitrin and eriodictyol also reduced TBARS levels in the blood serum, while liver fat accumulation and damage were reduced by hesperidin and eriocitrin, and heart weight by hesperidin and eriodictyol. These results show that hesperidin, eriocitrin and eriodictiol have protective effect against inflammation and oxidative stress caused by high-fat diet feeding and visceral obesity, as indicated by reduced liver damage and fat accumulation, and reduced heart and spleen weight, making them good candidates for use in such conditions, in which they could possibly help to prevent cardiovascular diseases ... / Mestre
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Sementes de leguminosas forrageiras sob estresse salino tratadas com ácido salicílico e espermidina /Pizolato Neto, Antonio. January 2016 (has links)
Orientador: Durvalina Maria Mathias dos Santos / Banca: Sonia Cristina Juliano Gualtieri / Banca: Priscila Lupino Gratão / Resumo: A germinação de sementes é um processo crítico no ciclo vital das plantas superiores e muito susceptível às condições adversas do ambiente, as quais podem causar o estresse oxidativo, resultante do aumento de espécies reativas de oxigênio (ERO), que podem causar danos às proteínas e iniciar a peroxidação lipídica nas membranas celulares. A aplicação do ácido salicílico e espermidina e de grande importância na proteção do tecido vegetal dos efeitos prejudiciais dos estresses, restaurando os padrões normais de crescimento evidenciando a função essencial no metabolismo celular. Diante disso o objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos do estresse salino na germinação e no crescimento inicial de duas espécies de leguminosas forrageiras, guandu cv. BRS Mandarim e labe-labe cv. Rongai, avaliando-se os seguintes parâmetros bioquímicos-fisiológicos: i) efeito exógeno do ácido salicílico e da poliamina espermidina; ii) atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD), ascorbatoperoxidase (APX) e catalase (CAT). iii) peroxidação lipídica e iv) teores de glicina betaína. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado no esquema fatorial 2x2x4+1, sendo as duas cultivares, guandu, cv. BRS Mandarim (C1) e labe-labe cv. Rongai (C2); dois tipos de atenuadores (0,5 mM de AS ou Spd); quatro concentrações de cloreto de sódio (NaCl) para induzir diferentes níveis de estresse salino, expressos em mM: 0,0 (S1); 20 (S2); 40 (S3) e 60 (S4). Nas plantas sob salinidade, a Spd e o AS aumentaram o crescimento da parte aérea das espécies, mas diminuíram a germinação e o crescimento de raízes nas plântulas. A Spd aumentou a atividade da CAT, enquanto que o AS aumentou a atividade da SOD e da APX, nas plântulas sob estresse salino. O uso do AS e da Spd ocasionaram no decréscimo de glicina betaína. O labe-labe é menos sensível ao estresse salino... / Abstract: Seed germination is a critical process in the life cycle of superior plants and very susceptible to adverse environmental conditions which can cause oxidative stress, resulting from the increase of reactive oxygen species (EROS), which may cause damage to proteins and initiate lipid peroxidation in cell membranes. The application of salicylic acid and spermidine is a great importance in protecting the plant tissue from the harmful stress effects, restoring the normal growth standards showing the key role in cell metabolism. In view of that, the aim of this study was verify the effects of salt stress on germination and initial growth of two species of forage legumes, pigeonpea cv. BRS Mandarim and lablab bean cv. Rongai evaluating the following biochemical and physiological parameters: i) exogenous effect of salicylic acid and polyamine spermidine; ii) activity of the enzymes superoxide dismutase (SOD), ascorbate peroxidase (APX) and catalase (CAT); iii)lipid peroxidation; iv) content of glycine betaine. The statistics experimental design was randomized completely in a factorial scheme 2x3x4, the two cultivars, pigeonpea cv. BRS Mandarin (C1) and lablab bean cv. Rongai (C2); Two types of attenuators (0.5 mM AS or Spd); four concentrations of sodium chloride (NaCl) to induce different levels of salt stress, expressed in mM: 0.0 (S1); 20 (S2); 40 (S3) and 60 (S4) . In plants under salinity, the Spd and AS increased the aerial parts of the species, but decreased germination and root growth in seedlings. The Spd increased the CAT activity, while the AS increased the SOD and APX acitivity, in the seedlings under salt stress. The use of AS and Spd caused decrease in glycine betaine. The lablab bean is less sensitive to salt stress than Guandu studied in this experiment. The obtained results in this experiment showed that the compounds (Spd and AS) are beneficial for mitigation of salt stress in both ... / Mestre
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A lipoperoxidação plasmática como preditor de esteatohepatite não alcoólica em obesos mórbidos com doença hepática gordurosa não alcoólicaMaggioni, Lucas Spadari January 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / The pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is not completely elucidated. There is increasing evidence that oxidative stress is involved in this process. The objective of the present study was to evaluate the role of plasma markers of oxidative stress in morbidly obese patients with NAFLD. Forty-three morbidly obese patients were subjected to Roux-en-Y gastric bypass with a liver biopsy obtained during surgery. Plasma oxidative stress was measured by thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and superoxide dismutase (SOD) assays. Histologic analysis showed NASH in 65. 1% of patients and simple steatosis in 34. 9%. The plasma TBARS levels were significantly greater in the patients with NASH when compared to those with simple steatosis [1. 65 (1. 43-1. 82) nM/ml vs 1. 12 (1. 04-1. 42) nM/ml; P=0. 002]. There was a correlation of TBARS with NAS score (rs = 0. 470; P = 0. 001). Among the patients with NASH and simple steatosis, there was no difference in plasma antioxidant status measured by SOD. Our findings suggest that plasma lipid peroxidation is associated with the severity of NAFLD in the morbidly obese patients. / A patogênese da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) não está completamente esclarecida. Existem evidências cada vez maiores de que o estresse oxidativo participa desse processo. O objetivo do presente estudo é avaliar o papel de marcadores plasmáticos de estresse oxidativo em obesos mórbidos com DHGNA. Foram incluídos 43 obesos mórbidos submetidos ao bypass gástrico em Y-de-Roux, com biópsia hepática obtida durante a cirurgia. O estresse oxidativo plasmático foi mensurado por meio das substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e ao superóxido dismutase (SOD). A análise histológica evidenciou NASH em 65,1% dos pacientes e esteatose simples em 34,9%. Os níveis plasmáticos de TBARS foram significativamente maiores nos pacientes com NASH, quando comparados aos com esteatose simples [1,65 (1,43-1,82) nM/ml vs 1,12 (1,04-1,42) nM/ml; P=0,002]. Houve correlação da TBARS com o NAS score (rs= 0,470; P=0,001). Entre os pacientes com NASH e esteatose simples, não houve diferença no status antioxidante plasmático medido pela SOD. Nossos achados sugerem que a lipoperoxidação plasmática está associada com a gravidade da DHGNA em obesos mórbidos.
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Efeitos da variação sazonal sobre o metabolismo intermediário e o status oxidativo de Tropidurus catalanensis (Squamata, Tropiduridae)Oliveira, Maiara Rodriguez de January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / During the cycle of life of organisms, the food intake is crucial to maintenance and anticipation of biological events. One of the major events in terms of metabolic costs is reproduction. Indicators of oxidative status may become important tools in conservation biology, in order to evaluate survival and reproduction expectations on organisms, as well as to elucidate the effects of anthropic impacts among populations in their natural environment. Tropidurus catalanensis it is a dark-colored and medium size lizard that can be found in rocky outcrops, and has a day-light habit and territorial behavior. It´s reproductive period goes to September from January, with males defending its harem and females tend to be more sedentary. The objective of the present study was to analyze seasonal variations of the intermediate metabolism, body index and biomarkers of the oxidative status of males and females from a population of Tropidurus catalanensis from Pampa biome, which occurs in Argentina, Brazil and Uruguay. The study was developed in a farm located in the city of Alegrete, RS. The study lasted one year, and it was collected 73 animals by active search and manual capture. It was measured the snout-vent-length (SVL), the body weight and it was taken blood samples by cardiac puncture with heparinized syringes. It was analyzed total proteins, uric acid, glucose, total lipids, triglycerides, total cholesterol and VLDL cholesterol of the blood plasma. On the liver, it was analyzed the levels of total proteins, glycogen, total lipids and triglycerides. On the liver, kidneys and muscle tissue from the lizard´s tale it was analyzes the levels of lipid peroxidation (TBARS) and the activities of the following antioxidant enzymes: superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione S-transferase (GST). It was also measured the hepatosomatic and gonadosomatic index, as well as the abdominal fat. The present results indicate that this lizard has a clear pattern of seasonal variation on its metabolism, its oxidative stress biomarkers and its body indexes. The winter period seems to induce a hypometabolic state mainly in males, and the reproductive period seems to be the biological event that requires the largest energetic demands, especially in females. These costs caused by reproduction may increase the vulnerability of the species to any environmental disturbance. Thus, the present study can be considered important on the description and understanding of the effects of the seasonality on the intermediate metabolism and oxidative status of free-living lizards, providing resources for the conservation of herpetofauna. / Ao longo do ciclo de vida dos organismos, a entrada de nutrientes se faz necessária para a manutenção e antecipação de eventos biológicos. Um dos eventos com maiores custos para o metabolismo é a reprodução. Marcadores do status oxidativo podem tornar-se ferramentas importantes na biologia da conservação para avaliar expectativas de sobrevivência e reprodução nos organismos, bem como elucidar os efeitos de impactos antrópicos em populações em ambiente natural. Tropidurus catalanensis é um lagarto encontrado em afloramentos de rocha, de porte médio e cor escura, com hábito diurno e comportamento territorialista. O período reprodutivo inicia-se em setembro e se encerra em janeiro, onde machos defendem seus haréns e fêmeas tornam-se residentes. O objetivo do presente estudo foi analisar as flutuações sazonais do metabolismo intermediário, de índices corporais e marcadores do status oxidativo de machos e fêmeas de uma população de Tropidurus catalanensis, que habita os campos do Pampa, bioma que abrange os países Argentina, Brasil e Uruguai. O estudo foi desenvolvido em uma área localizada em Alegrete, RS. Foram coletados 73 animais ao longo de um ano, através de busca ativa e captura manual. Houve o levantamento do comprimento rostro-cloacal (CRC), da massa corporal e foram retiradas amostras de sangue através de punção cardíaca com o auxílio de seringas heparinizadas. No plasma foram analisados os níveis de proteínas totais, ácido úrico, glicose, lipídeos totais, triglicerídeos, colesterol total e colesterol VLDL. No fígado foram analisados os níveis de proteínas totais, glicogênio, lipídeos totais e triglicerídeos. Nos tecidos hepático, renal e porção do músculo caudal foram analisados os níveis de lipoperoxidação (TBARS) e a atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa S-transferase (GST). Também foram levantados os índices hepatossomático, gonadossomático e de gordura abdominal. Os resultados obtidos revelam que este sáurio apresenta um claro padrão de variação sazonal em seu metabolismo, dos marcadores de estresse oxidativo e nos índices corporais. Os meses de inverno parecem levar a um estado de hipometabolismo principalmente em machos, assim como o período reprodutivo parece ser o evento biológico que exige maior demanda energética, principalmente para as fêmeas. Estes custos ocasionados pela reprodução podem tornar a espécie mais vulnerável a alterações em seu meio ambiente. Sendo assim, o presente trabalho pode ser considerado importante na descrição e entendimento dos efeitos da sazonalidade no metabolismo intermediário e no status oxidativo de lagartos de vida livre, dando subsídios para a conservação da herpetofauna.
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