Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: Marlene Tiduko Ueta / Banca: Elenice Messias do Nascimento Gonçalves / Banca: Silmara Marques Allegretti / Banca: Mara Cristina Pinto / Resumo: A estrongiloidíase é uma doença parasitária que tem distribuição mundial heterogênea, cuja prevalência é dividida em três categorias: esporádica (<1%), endêmica (1-5%) e hiperendêmica (>5%). Na região de Araraquara, estudos de frequência de enteroparasitoses vêm sendo conduzidos desde 1970 e mostram que a estrongiloidíase é endêmica na região. Com o intuito de realizar caracterização morfométrica de diferentes isolados humanos desse helminto, provenientes dos municípios de Araraquara, Américo Brasiliense, Gavião Peixoto, Motuca e Rincão foi feita a mensuração de larvas rabditóides e filarióides e sequenciamento da região ITS-1 do rDNA das larvas filarióides. Com o auxilio do programa de captura e mensuração de imagens Motic Images Advanced 3.2., os parâmetros das larvas rabditóides e filarióides propostos por TEIXEIRA, 1996, foram mensurados após fixação das mesmas em TAF. A extração do DNA genômico foi realizada segundo protocolo descrito por NILFOROUSHAN et al., 2007 e em seguida realizou-se a amplificação do ITS-1 por meio de NESTED-PCR. Os fragmentos de aproximadamente 680 pb obtidos foram purificados, sequenciados e a comparação de sequências foi realizada pelo programa ClustalW. Apenas com os resultados da análise morfométrica, não foi possível caracterizar diferentes cepas de S. stercoralis, uma vez que... (REsumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Strongyloidiasis is a parasitic disease that occurs worldwide heterogeneous, whose prevalence is divided into three categories: sporadic (<1%), endemic (1-5%) and hyperendemic (> 5%). In the region of Araraquara, studies the frequency of intestinal parasites have been conducted since 1970 and show that strongyloidiasis is endemic in the region. In order to perform morphometric characterization of different isolates of human intestinal worms, from the municipalities of Araraquara, Américo Brasiliense, Gavião Peixoto, Motuca and Rincão the measurement was made of rhabditiforms and filariforms larvae and sequencing of the ITS-1 rDNA filariform larvae. With the help of the program capture and measurement of images Motic Images Advanced 3.2., the rhabditiforms and filariforms larvae parameters proposed by TEIXEIRA, 1997, were measured after fixed on the TAF. The extraction of genomic DNA was performed according to protocol described by NILFOROUSHAN et al., 2007 and then held the amplification of ITS-1 by nested-PCR. Fragments of about 680 bp obtained were purified, sequenced and the sequence comparison was performed by the program ClustalW. Only the results of the morphometric analysis was not possible to characterize different S. stercoralis strains, since the values of the parameters measured were quite homogeneous in larvae... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Alvimar José da Costa / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Luciano Melo de Souza / Resumo: Utilizando-se de delineamentos experimentais apropriados, foi avaliada a atividade endectocida de uma nova associação medicamentosa, composta de dois piretróides (Scifenotrina e D-tetrametrina), butóxido de piperonila e ivermectina. Quatro experimentos foram conduzidos para avaliação terapêutica da nova associação, comparativamente à formulações adquiridas no mercado. Para avaliação carrapaticida e pulicida foram conduzidos dois experimentos. No primeiro ensaio, 21 cães naturalmente infestados por Rhipicephalus sanguineus, selecionados por meio de duas contagens consecutivas, foram randomizados e sorteados em três grupos de sete animais cada. No segundo ensaio, 21 cães selecionados foram randomizados e sorteados, também, em três grupos de sete animais cada. Infestações artificiais foram realizadas nos dias -4, -2, 6, 13, 20, 27 e 34 com Ctenocephalides felis felis (100 pulgas) e nos dias -1, 6, 13, 20, 27 e 34 com R. sanguineus (30 carrapatos). Nos dois experimentos a nova formulação foi comparada à associação D-fenotrina 78,125%+ piriproxifen 2,575%. A eficácia sarnicida da nova formulação experimental, comparativamente à selamectina 12%, foi avaliada em 15 cães naturalmente infestados por S. scabiei var. canis. Raspados cutâneos e avaliações clínicas (regressão das lesões de pele) foram realizados, em todos os cães experimentais. Para avaliação anti-helmíntica, 24 cães foram selecionados por meio de exames coprológicos e distribuídos em três grupos de oito animais cada. As contagens de ovos de nematódeos por grama de fezes (OPG) foram realizadas nos dias -3, -2, -1 (seleção dos animais) e 1, 3, 7, 10 e 14 pós-tratamento. A nova formulação experimental foi comparada à Selamectina 12%.Todos os dados foram avaliados estatisticamente, e as inferências devidamente extraídas...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Utilizing of the appropriate experimental design, was evaluated the anti-parasite activity of a new formulation, composed of two piretroids (S-cifenotrin and D-tetrametrin), piperonil butox and ivermectinn. Four experiments had been lead for therapeutical evaluation of the new association, comparativily to the formulation acquired in the market. For the evaluation against ticks and flea, two experiments had been lead. In the first assay, 21 dogs naturally infested by Rhipicephalus sanguineus, selected by means of two consecutive countings, were shuffted and randomly put into three groups of seven animals each. In the second assay, 21 selected dogs were allocated randomly, also, in three groups of seven animals each. Artificial infestations had been carried through in days -4, -2, 6, 13, 20, 27 and 34 with Ctenocephalides felis felis (100 fleas) and in days -1, 6, 13, 20, 27 and 34 with R. sanguineus (30 ticks). In the two experiments the new formulation was compared with the association D-fenotrin 78.125%+ piriproxifen 2.575%. The scabies’ effectiveness of the new experimental formulation, comparativily to selamectin 12%, was evaluated in 15 dogs naturally infested by S. scabiei var. canis. Cutaneous scrapings and clinical evaluations (regression of the skin injuries) had been carried through, in all the experimental dogs. For antihelmintic evaluation, 24 dogs had been selected by means of the coprology examinations and distributed in three groups of eight animals each. The egg countings of nematodes for gram of fezes (EPG) had been carried through in days -3, -2, -1 (election of the animals) and 1, 3, 7, 10 and 14 post-treatment. The new experimental formulation was compared with the selamectina 12%...(Complete abstract, acess undermentioned eletronic address) / Mestre

Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: Vera Lucy de Santi Alvarenga / Banca: Vera Lucia Pagliusi Castilho / Resumo: Blastocystis hominis é protozoário causador da infecção intestinal denominada blastocistose humana, cujo diagnóstico é realizado pelo exame coproparasitológico e por meio de técnicas de colorações permanentes que foram utilizadas neste estudo para avaliar a prevalência de Blastocystis hominis nos espécimes fecais de habitantes na região de Araraquara-SP. Foram estudadas 503 amostras de fezes submetidas às técnicas de exame direto a fresco, de Faust e cols., de Lutz e de Rugai, Mattos e Brisola, além das colorações pela hematoxilina férrica, tricrômio e de Kinyoun modificada. Do total das amostras analisadas 174 (34,6%) apresentaram-se positivas para a presença de parasitas intestinais. O protozoário e helminto mais freqüentes foram respectivamente: Entamoeba coli (14,6%) e Strongyloides stercoralis (6,7%). Blastocystis hominis foi observado em 23 (4,6%) amostras fecais com consistência predominantemente pastosa, não caracterizando quadro diarréico. Apesar da baixa prevalência de Blastocystis hominis encontrada na região de Araraquara, comparativamente a outras regiões brasileiras, é importante a realização do diagnóstico laboratorial desse protozoário. O encontro de Blastocystis hominis em material fecal é indicativo de contaminação de alimentos e água de consumo, desde que se admita a rota de transmissão oral-fecal deste parasita, o que implica na orientação da população sobre as medidas de saneamento básico e higiene como meio para se controlar problemas de saúde ocasionados pelos enteroparasitas. / Abstract: Blastocystis hominis is a protozoan which causes an intestinal infection called human blasticistosis. Its diganosis is perfomed by stool examination and permanent staining techniques. Such methodologies were carried out on the present study in order to evaluate the prevalence of Blastocystis hominis in faecal specimens from the Araraquara region inhabitants. A total of 503 faecal samples were evaluated by the following techniques: examination fo fresh specimens, Lutz, Faust et al. and Rugai et al. besides the iron hemotoxylin, trichrome and modified Kinyon staining. Out of 503 stool samples examined 174 (34,6) were found to be positive for intestinal parasites. The most prevalent protozoan and helminth parasites were Entamoeba coli (14,6%) and Strongyloides stercoralis (6,7%) respectively. Balstocystis hominis was present in 23 (4,6%) stool samples, most of all of soft consistence and without diarrheic reports. Blastocystis hominis laboratorial diagnosis is important althought its prevalence has been low in Araraquara region. Blastocystis hominis findings is faecal specimens indicates the food and water contamination and since the transmission of this parasite is iral-faecal it implies that the population needs orientation about hygiene and basic sanitation conditions in order to control health problems caused by enteroparasites. / Mestre

Resumo: O protozoário Giardia lamblia foi escolhido como tema de estudo, por ser um enteroparasita de prevalência significativa no mundo inteiro. Os objetivos desta pesquisa foram estudar a reprodutibilidade diagnóstica dos métodos Direto, Faust e cols., COPROTEST e Hematoxilina Férrica, bem como descrever a presença da Giardia lamblia, segundo a associação com algumas características da população de estudo como: grupo etário, gênero e distribuição dos casos segundo a variação sazonal nos meses em que se desenvolveu a pesquisa. Foram analisadas 200 amostras de fezes de crianças da região de Araraquara-SP e como resultados encontrou-se Giardia lamblia como o parasita mais freqüente, com 8,0%, não houve associação com o gênero; quanto à idade ocorreram mais casos no grupo de 03 a 05 anos e a maior freqüência de casos foi no mês de janeiro. Em relação as metodologias utilizadas chegou-se a conclusão que o melhor método diagnóstico para Giardia lamblia seria a associação de pelo menos, duas metodologias associadas de ótima reprodutibilidade que nesse estudo foram: COPROTEST - Faust; Direto-Faust e Coprotest-Direto (k > 0,81). / Abstract: Giardia lamblia protozoan was chosen as a study them due to its significant prevalence all over the world. The present dissertation aims to study the diagnostic reproductibility of Direct, Faust et al., COPROTEST and Ferric Hematoxiline methods. It also describes the presence of Giardia lamblia, according to the association with some characteristics of the population in study, such as group age, gender and distribution of cases according to seasonal variation in the month studied. 200 feces samples of children from the region of Araraquara-SP were analysed and to cach of them the four diagnostic methodolgies were applied and then compared. From the results obtained it was possible to conclude that Giardia lamblia was the most frequent parasite, with 8, 0% occurrence; there was no association with gender; most cases of parasites were found in the 3-5 year-old groups, the highest frequency of parasites occurred in january and the best diagnostic to detect Giardia lamblia was the association of at least two methodologies of optimum reproductibility. The associations of optimum reproductibility were COPROTEST- Faust, Direct- Faust and COPROTEST- Direct (k >0, 81). / Orientador: Maria Jacira Silva Simões / Coorientador: Vera Lucy de Santi Alvarenga / Banca: João Aristeu da Rosa / Banca: Ana Amélia Carraro Abrahão / Mestre

Resumo: O presente estudo foi realizado para investigar a prevalência de enteroparasitas em crianças e funcionários da creche do município de Pratânia, Estado de São Paulo, e caracterizar geneticamente os isolados de Giardia duodenalis obtidos dos indivíduos desse grupo empregando gdh e tpi como genes-alvo. Para isso, amostras de fezes de 141 crianças com idade de zero a seis anos e de 18 colaboradores foram colhidas e processadas pelo método de centrífugo-flutuação e pelo kit TF-test®. Nas 141 crianças, parasitas e/ou comensais intestinais foram diagnosticados em 64 (45,4%), das amostras, sendo Giardia (22%) e Cryptosporidium (22%) os parasitas mais freqüentes. Nos funcionários, Giardia foi diagnosticada em apenas uma amostra (5,5%) e o protozoário comensal Entamoeba coli (22,2%) foi o mais prevalente. Empregando técnicas baseadas em PCR, o DNA extraído de 86 (31 amostras positivas e 55 negativas para Giardia no exame microscópico) foi amplificado e os produtos obtidos foram seqüenciados. A análise de 35 seqüências revelou a ocorrência de infecção pelos genótipos A (28,6%) e B (71,4%), subtipos AI, AII, BIII/BSI e BIV, no entanto, associações entre os genótipos e fatores de risco para a infecção não foram observadas. O alinhamento das seqüências de gdh e tpi, revelou a presença de um a 12 SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) em isolados dos genótipos A e B, sendo que em alguns deles, as mutações foram responsáveis por alterações nas seqüências de aminoácidos. A infecção de seis crianças de um mesmo grupo e de uma funcionária por isolados classificados como genótipo B e apresentando seqüências nucleotídicas 100% idênticas entre si sugere a ocorrência de transmissão antroponótica na população estudada. Além disso, a maior prevalência do genótipo B, grupo predominante nas infecções humanas, reforça o fato de que a transmissão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study was conducted to investigate the prevalence of intestinal parasites in children and employees of a daycare center of Pratania, São Paulo State, and to evaluate the genotypes Giardia duodenalis isolates obtained from individuals in this group by using gdh and tpi genes as targets. Fecal samples of 141 children aged zero to six years and 18 employees were processed by a flotation method and the TF-Test® kit. Of the 141 children samples, parasites and/or commensal organisms were diagnosed in 64 (45.4%) samples, and Giardia (22%) and Cryptosporidium (22%) were the most frequent parasites. In employees, Giardia was diagnosed in only one sample (5.5%) and the commensal protozoan Entamoeba coli (22.2%) was the most prevalent. DNA extracted from 86 samples (31 samples positive and 55 negative for Giardia by microscopic examination) was amplified by PCR and the products were sequenced. The analysis of 35 sequences revealed the occurrence of infection with genotypes A (28.6%) and B (71.4%) subtypes AI, AII, BIII / BIV and BSI, however, associations between genotypes and risk factors for infection were not observed. The alignment of the sequences revealed SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) in both genotypes A and B, altering the amino acid sequence of some isolates. Among isolates identified as genotype B, six obtained from children of the same group and one from the only one employee infected with Giardia showed gdh and tpi sequences different from reference ones, but 100% identical to each other. This data is suggestive of anthroponotic transmission in the studied population. In addition this finding, the higher prevalence of genotype B, the main group associated to human infections, reinforces the fact that anthroponotic transmission has importance in collective environments that meet children at an age that they still have not practice the basic precepts of hygiene. / Orientador: Semíramis Guimarães Ferraz Viana / Coorientador: Teresa Cristina G. de Oliveira-Sequeira / Banca: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Banca: Marcelo Urbano Ferreira / Mestre

Orientador: Alvimar José da Costa / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Kátia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Heloísa Cristina da Silva / Banca: Marco Antônio de Andrade Belo / Resumo: Uma formulação medicamentosa inédita contendo fluazuron 3,0% + abamectina 0,5%*, administrada via tópica "pour-on" (1ml\10kg de peso corpóreo), foi avaliada em sete experimentos, incluindo segurança clínica e farmacocinética de resíduos, destes compostos, em bovinos medicados. A inocuidade e a segurança clínica da formulação supracitada foram aferidas por exames clínicos, hemogramas e dosagens bioquímicas. Quanto à atividade carrapaticida, foram conduzidos dois ensaios, um utilizando bovinos experimentalmente infestados e outro bovinos naturalmente parasitados por Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Em dois outros estudos, avaliou-se a eficácia contra Haematobia irritans e contra larvas de Dermatobia hominis em bovinos naturalmente parasitados. A atividade anti-helmíntica da associação foi avaliada em 12 animais necropsiados, os quais eram portadores de nematodioses gastrintestinais (infecção natural). Para determinação de remanescentes residuais em tecidos dos bovinos medicados foram necropsiados 26 animais. Nenhuma alteração significativa (P≥0,05) foi verificada nos parâmetros hematológicos (hemogramas) e bioquímicos mensurados nos bovinos medicados com nova associação, até o 10º dia pós-tratamento. A eficácia anti-ixodídica da associação fluazuron 3,0% + abamectina 0,5%* (stall test) atingiu índices de eficácia superiores a 80,00% em 78 datas experimentais. O fluazuron 2,5%** atingiu eficácia acima de 80,00% em 77 datas. Eficácia máxima (100,00%) foi atingida em 40 datas experimentais pela associação fluazuron 3,0% + abamectina 0,5%, enquanto que o fluazuron 2,5%** atingiu este índice em 51 datas. Estatisticamente as formulações fluazuron 3,0% + abamectina 0,5%* e fluazuron 2,5%** reduziram significativamente (P<0,05) as contagens de fêmeas de R. (B.) microplus (desprendidas), em relação ao grupo controle... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: A novel drug formulation containing fluazuron 3,0% + abamectin 0,5%* administered via topical pour-on (1ml\10kg body weight) was evaluated in seven experiments, including clinical safety and pharmacokinetics of waste, these compounds in cattle treated. The clinical safety and security of the above formulation were assessed by clinical examination, blood counts and biochemical measurements. As for anti-tick activity, two tests were conducted, using an experimentally infected cattle and other cattle naturally infested by Rhipicephalus (Boophilus) microplus. In two other studies evaluated the efficacy against Haematobia irritans, against larvae of Dermatobia hominis in cattle naturally infected. The anthelmintic activity of the association was evaluated in 12 animals necropsied, who suffered from gastrointestinal nematodiosis (natural infection). To determine the remaining waste in tissues of cattle treated 26 animals were autopsied. No significant change (P ≥ 0.05) was observed in blood parameters (blood counts) and biochemical measured in cattle treated with the new association, until the 10th day post-treatment. The effectiveness of combination anti-ticks fluazuron 3.0% + abamectin 0.5%* (Stall test) reached peak levels of efficiency exceeding 80.00% in 78 experimental days. The fluazuron 2.5%** reached efficiency above 80.00% in 77 dates. Maximum efficiency (100.00%) was achieved in 40 experimental days by the pool fluazuron 3.0% + abamectin 0.5%*, while the fluazuron 2.5%** this index reached in 51 dates. Statistically formulations fluazuron 3.0% + abamectin 0.5%* and fluazuron 2.5%** significantly reduced (P <0.05) scores of female R. (B.) microplus (detached) in the control group, the 5th to 100th DPT and 14th to 100th DPT, respectively. In cattle naturally infected by R (B) microplus, the association fluazuron 3.0% + abamectin 0.5%* and fluazuron 2,5%** efficiency reached over... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Nilton Carlos Machado / Banca: Nelson de Souza / Banca: Antonio Augusto dos Santos / Banca: Clovis Duarte Costa / Banca: Francisco de Agostinho Junior / Resumo: O estudo ocorreu com grupo inicial de 247 crianças de 12 a 72 meses, em 13 creches do município de Lins. Este grupo inicial apresentou 61,5% de anemia, as reservas de ferro, abaixo de 30 ng/mL, foram de 39,2% e as parasitoses intestinais tiveram prevalência de 29,2%, com predominância em 70% de Giardia lamblia. Foi feita a intervenção com fortificação com ferro aminoácido quelato em 2 grupos homogêneos, recebendo 3 mg ferro/dia (grupo A) e 6 mg ferro/dia ( grupo B ), no total de 132 crianças. Este estudo foi randomizado, longitudinal e duplo cego. Após a intervenção, durante 6 meses, o grupo A apresentou valores estatisticamente significantes para Hemoglobina (Hb) p<0,01 e Ferritina p <0,05 e, no grupo B, para a Ferritina p<0,05. A prevalência de anemia, através da Hb, foi no grupo A de 63,3% com queda para 38,3%,após a intervenção e, no grupo B, de 56,9% para 33,3% . Quando se utilizaram dois critérios para anemia (Hb + Ferritina), houve diminuição da anemia de 26,6% para 8,3% (p < 0,01) no grupo A e 23,6% para 9,7% (p< 0,01) no grupo B. A anemia grave se reduziu de 9,3% para 1,4%. O grupo dos menores de 24 meses apresentou prevalência de anemia de 91,3%, com 43,5% de crianças com Hb abaixo de 10g/dL, que é associada à lesão no sistema nervoso.Os indicadores Hb, Ferritina, Ht e VCM foram estatisticamente significantes na evolução dos anêmicos para não anêmicos e somente a Ferritina aumentou nos não anêmicos, que permaneceram não anêmicos. O tratamento antiparasitário foi ineficaz, pois a prevalência de parasitoses intestinais não apresentou diferença antes e após a intervenção, porém a fortificação com ferro melhorou a Hb nos parasitados do grupo A. / Abstract: This study screened 247 children between the ages of 12 and 72 months, from 13 child-care centers within the Lins region.Within this initial group, 61,5% had anemia, 39,2% iron reserves below 30 ng/ml, 29,2%intestinal parasites and 70% displayed Giardia lamblia. This study was designed as a double blind, longitudinal clinical trial for different treatment protocols. The sample was randomly divided into two homogenous groups, receiving iron aminoacid quelate. Group A received 3 mg of iron per day and group B received 6 mg. After 6 months, group A showed a significant rise in hemoglobin (Hb) (p<0,01) and Ferritin (p<0,05).In Group A, the prevalence of anemia, considering Hb only, dropped from 63,3% at baseline to 38,3% after treatment. In Group B, anemia dropped from 56,9% to 33,3%. When a combined criteria of anemia classification used, Hb+Ferritin, the prevalence of this condition in Group A dropped from 26,6% to 8,3% (p<0,01) and in Group B it dropped from 23,6% to 9,7% (p<0,01).Severe anemia cases were reduced from 9,3% to 1,4%.Within the group of children aged 24 months 91,3% had anemia with 43,5% of the children with Hb < 10g/dL.This level is associated with lesions within the nervous system. The indicators of Hb,Ferritin, MCV and hematocrit increased with significant statistical differences between anemic with evolution to non-anemic children. The only indicator present in non-anemic group children with evolution to non-anemic that showed increase after treatment was Ferritin. The prevalence of parasites was evaluated at baseline and after intervention and the treatment of parasites had no significant results. Nevertheless, the increase in iron improved the Hb in children with parasites from Group A. / Doutor