Orientador: Raquel Mantuanelli Scarel Caminaga / Banca: Silvana Regina Perez Orrico / Banca: Joni Augusto Cirelli / Banca: Raquel Alves dos Santos / Banca: Mario Taba Junior / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão gênica de indivíduos portadores de diabetes mellitus tipo 2 (DM2, compensados e não compensados metabolicamente), dislipidemia e/ou periodontite crônica, e avaliar se tais alterações metabólicas apresentam efeito mutagênico. Cento e cinquenta pacientes, divididos em 5 grupos (grupo 1 - diabetes descompensado, com dislipidemia e com doença periodontal; grupo 2 - diabetes compensado, com dislipidemia e com doença periodontal; grupo 3 - sem diabetes, com dislipidemia e com doença periodontal; grupo 4 - sem diabetes, sem dislipidemia e com doença periodontal; e o grupo 5 - sem diabetes, sem dislipidemia e sem doença periodontal), foram avaliados quanto ao exame periodontal completo, exame físico e avaliação laboratorial da glicemia de jejum e perfil lipídico. De cada paciente foi coletado sangue para investigar a expressão gênica e as lesões no DNA. A avaliação da expressão gênica foi realizada por microarray e validada por RT-qPCR (Transcrição Reversa seguida de Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real, ou quantitativo). As lesões no DNA foram avaliadas por meio do teste do micronúcleo. Os dados foram submetidos à análise bioinformática e estatística. Para verificar os resultados obtidos pelo microarray, os Grupos 1, 2 e 3 foram submetidos a comparações por pares. As análises de RT-qPCR confirmaram a expressão diferencial dos genes HLA-QA1, PDCD6, TRDV3, PPAP2B, HLA-DQB1, RIN3, VCAN, PPIC e SLC6A13. As frequências de micronúcleos foram significativamente mais elevadas em pacientes afetados por pelo menos uma das doenças sistêmicas, em comparação com aqueles sistemicamente saudáveis. Concluímos que foram identificados genes diferencialmente expressos em indivíduos portadores de DM2 também afetados por dislipidemia e periodontite crônica. Os resultados do micronúcleo confirmaram ser este teste útil como biomarcador para lesões no DNA, e demonstraram... / Abstract: The aim of this study was to evaluate the gene expression in individuals with type 2 diabetes (T2D, poor and well-controlled diabetics), dyslipidemia, and/or chronic periodontitis, and to assess whether these metabolic changes have mutagenic effect. One hundred and fifty patients were divided into 5 groups (group 1 - poor controlled diabetes with dyslipidemia and periodontal disease; group 2 - well-controlled diabetes with dyslipidemia and periodontal disease; group 3 - without diabetes with dyslipidemia and periodontal disease; group 4 - without diabetes, without dyslipidemia and with periodontal disease; and group 5 - without diabetes, dyslipidemia and periodontal disease), and were assessed a complete periodontal and physical examination, and laboratory evaluation of fasting glucose and lipid profile. From each patient, blood was collected to investigate gene expression and DNA damage. The gene expression was evaluated by microarray analysis and validated by RTqPCR (Polymerase Chain Reaction Real-Time, or quantitative). The DNA damage was evaluated using the micronucleus test. Data were subjected to statistical and bioinformatics analyses. To verify the results obtained by microarray, the Groups 1, 2 and 3 were submitted to pair comparisons. The RT-qPCR analysis confirmed the differential expression of HLA-QA1, PDCD6, TRDV3, PPAP2B, HLA-DQB1, RIN3, VCAN, PPIC and SLC6A13 genes. Significantly higher micronuclei frequencies were found in patients affected by any of the systemic diseases in comparison with the ones systemically healthy. We concluded that differentially expressed genes were identified in individuals with type 2 diabetes, dyslipidemia and chronic periodontitis. The results of the micronucleus confirmed that this test is useful as biomarker for DNA damage, and demonstrated that the three pathologies occurring simultaneously promoted an additional role in the production of DNA damage. / Doutor

Orientador: Silvana Regina Perez Orrico / Banca: Luis Carlos Spolidorio / Banca: Marcio Fernando de Moraes Grisi / Resumo: O presente estudo teve como objetivo avaliar possíveis alterações na densidade mineral óssea mandibular e femoral decorrentes da deficiência de estrógeno promovida pela ooforectomia (OVX), e a influência dessas alterações sobre a doença periodontal induzida em ratas. Quarenta e oito ratas, Holtzman, com idade de 90 dias, foram distribuídas em 5 grupos: Grupo controle (n=9), Grupo 1- "SHAM" sem indução de doença periodontal (n=11), Grupo 2- "SHAM" com indução de doença periodontal (n=10), Grupo 3- OVX sem indução de doença periodontal (n=9) e Grupo 4- OVX com indução de doença periodontal (n=9). Nove animais foram sacrificados no dia zero; 18 foram submetidos à cirurgia de OVX e 21 à cirurgia simulada ("SHAM"). Para os animais pertencentes aos grupos 2 e 4, após um período de 120 dias, foram colocadas ligaduras de fio de algodão nos primeiros molares inferiores as quais permaneceram por um período de 30 dias. Finalizado o período de 5 meses, os animais foram mortos sendo removidos a mandíbula, o fêmur e o útero. Foram efetuadas medidas de BMD global e de sub-regiões, da mandíbula e do fêmur, assim determinadas: hemimandíbula: global; R1 - região do côndilo mandibular; R2 - bordo inferior do corpo mandibular e R3 - região incisal da mandíbula e para o fêmur: global; R1 - epífise distal; R2 - epífise proximal e R3 - diáfise. Foram avaliadas, por meio de radiografias digitais, a presença ou ausência de perda óssea vertical, medindo-se a distância da crista óssea à junção cemento-esmalte na mesial do primeiro molar inferior. A análise dos resultados do fêmur diferença estatisticamente significativa entre os grupos "SHAM" e "OVX" quanto aos valores medianos de densidade óssea, para todas as regiões. A comparação entre os grupos Controle, "SHAM" e OVX em relação à BMD da mandíbula nas regiões R1, R2, R3 e Global... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: This study had the objective to assess possible changes in mandibular and femoral bone mineral density resulting from estrogen deficiency due to ovariectomized, and the influence of these alterations of the periodontal disease induced in rats. Forty eight rats Holtzman, at the age of 90 days, were distributed in 5 groups: control group (n=9), group 1- "SHAM" without inducement of periodontal disease (n=11), group 2- "SHAM" with inducement of periodontal disease (n=10), group 3- OVX without inducement of periodontal disease (n=9) and group 4- OVX with inducement of periodontal disease (n=9). Nine animals were sacrificed on day 0 (baseline); 18 of them were subjected to OVX surgery and to "SHAM" simulate surgery. For the animals belonging to group 2 and 4, after a period of 120 days, were placed ligatures first inferior molar, wich remained on for 30 days. At the end of 5 months, the animals were killed and the mandible, femur and uteri were excised. Measures of BMD global and sub-regions of the mandible and femur were taken such as, mandible: global; R1 - condylar region; R2 - inferior border of mandible, and R3 - incisal region of mandible and for femur: global; R1 - distal epiphysis; R2 - proximal epiphysis and R3 - diaphysis. The presence or absence of the vertical loss bone was assessed by digital radiography, measuring the distance of the bone crest to the cementodentinal junction in the mesial of first inferior molar. The analysis of the femur results gives us evidence that there is a significant difference in median values of bone density between the groups "SHAM" and OVX, for all the regions. The comparison between the groups control, "SHAM" and OVX in relation to BMD of mandible in the region R1, R2, R3 and global, didn't show any significant difference (p>0,05) between themselves. The measures of... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Orientador: Maria Aparecida Neves Jardini / Co-orientador: José Weber Ursi / Banca: Milton Santamaria Jr / Banca: Andrea Carvalho de Marco / Resumo: O objetivo do presente estudo foi analisar histomorfometricamente a influência da Diabetes Mellitus na movimentação dentária associada à doença periodontal induzida em ratos. Para tal, foram utilizados ratos da linhagem Wistar do gênero masculino com noventa dias de idade, pesando em média 300g. As variáveis estudadas foram: doença periodontal, Diabetes Mellitus e movimentação ortodôntica, analisando a perda óssea, densidade óssea e quantidade de movimentação dentária. A indução da Diabetes Mellitus foi realizada através da diluição de aloxana monohidratada em solução salina estéril, na concentração dose de 150 mg/peso em kg do rato. Após trinta dias da aplicação da aloxana para obtenção da diabetes mellitus experimental, os animais receberam a indução da doença periodontal, realizada através da instalação de um fio de seda preto 3-0 colocado na região cervical do primeiro molar inferior. Sete dias após a obtenção da doença periodontal experimental, os animais foram anestesiados para a aplicação da movimentação ortodôntica, com o aparelho posicionado entre o primeiro molar inferior e os incisivos inferiores. Em todas as análises microscópicas qualitativas e quantitativas, foram avaliados cortes histológicos longitudinais na região do osso alveolar onde o dispositivo ortodôntico foi instalado. Para a obtenção dos resultados de quantidade de movimentação dentária, foi utilizado um paquímetro medindo a distância entre a mesial do primeiro molar inferior e a distal do segundo molar inferior. Já para obtenção dos dados de perda óssea e densidade óssea, a morfometria foi realizada através um sistema de análise de imagem (ImageJ), avaliando a área de furca nos dentes com e sem as ligaduras. A estatística descritiva se baseou no cálculo de médias e desvio padrão, enquanto a estatística inferencial foi realizada através da análise de variância(ANOVA) e teste de Tukey, com nível.... / Abstract: The aim of this study was to analyze histomorphometrically the influence of Diabetes Mellitus on tooth movement associated with induced periodontal disease in rats. It were used rats of male Wistar ninety days old, weighing on average 300g. The variables studied were: periodontal disease, Diabetes Mellitus and orthodontic movement, analyzing bone loss, bone density and amount of tooth movement. Induction of Diabetes Mellitus was performed by dilution of alloxan monohydrate in sterile saline, at the concentration 150 mg/kg weight of rat. Thirty days after the alloxan application for obtaining the experimental diabetes mellitus, animals received induction of periodontal disease, carried out by installing a black silk thread 3-0 placed in the cervical region of the first lower molar. Seven days after obtaining the experimental periodontal disease, the animals were anesthetized for the application of orthodontic movement with the device positioned between the first lower molar and the lower incisors. In all quantitative and qualitative microscopic analysis, longitudinal histological sections were evaluated in the region of the alveolar bone where the orthodontic appliance is installed. To obtain the results of amount of tooth movement, were used a parking meter measuring the distance between the mesial of the mandibular first lower molar and the distal of the second molar. To obtaining the data bone loss and bone density, Morphometry was performed using an image analysis system (ImageJ), evaluating the furcation area on teeth with and without the bands. Descriptive statistics was based on the calculation of means and standard deviation while inferential statistics were performed by analysis of variance (ANOVA) and Tukey's test at 5% significance level. The results showed that diabetes mellitus has a deleterious effect on the animal, especially when associated with periodontal disease and orthodontic movement. It was noted also that periodontal... / Mestre

Orientador: Yasmin Rodarte carvalho / Banca: José Tadeu Tesseroli de Siqueira / Banca: Vanessa Soares Lara / Banca: Adriana Aigotti Haberbeck Brandão / Banca: Nelson Luiz de Macedo / Resumo: Este trabalho destinou-se a avaliar os efeitos dos diferentes períodos de início da terapia de reposição hormonal estrogênica na evolução da periodontite induzida em ratas ovariectomizadas. Para tanto foram utilizadas 65 ratas ovariectomizadas aos três meses de idade, compondo dois grupos, experimental e controle, que receberam 17ß estradiol ou placebo respectivamente, em diferentes períodos de início; possibilitando a formação de cinco subgrupos de cada situação, de acordo com o período de início do tratamento/placebo: imediato, uma, duas, três e quatro semanas após a ovariectomia. A formação de um terceiro grupo (grupo sham), em que foi realizada a simulação da ovariectomia, possibilitou a comparação dos eventos ocorridos entre as ratas estrógeno deficiente com as ratas estrógeno suficiente. Após quatro semanas da ovariectomia ou de sua simulação foi colocada uma ligadura com fio de algodão ao redor da coroa dos segundos molares da maxila, mantida por cinco semanas, quando as ratas foram sacrificadas. Realizaram-se análises macroscópicas, como grau de mobilidade dentária, envolvimento de furca ou perda óssea alveolar, radiográfica, onde foi avaliado o suporte ósseo, histológica e histomorfométrica. Os resultados revelaram que a depleção do estrógeno decorrente da ovariectomia, não teve efeito direto no osso alveolar adjacente às raízes dos segundos molares da maxila. De acordo com as condições experimentais, a terapia de reposição hormonal estrogênica não retardou a progressão da periodontite induzida / Abstract: The aim of this study was to investigate the effect of different periods of estrogen replacement therapy onset on the progression of experimental periodontitis in ovariectomized rats. Sixty five female Wistar rats were ovariectomized and divided into two groups, experimental and control that received 17ß estradiol or vehicle, respectively. Each group was subdivided into five subgroups that started the treatment immediately, one, two, three and four weeks after the ovariectomy. Another eight rats underwent sham surgery. A month after ovariectomy or sham surgeries, a cotton ligature was placed around the maxillary second molars. Thirty five days after ligature placement, the animals were killed. It was analyzed the macroscopic, radiographic, microscopic and histometric aspects of the periodontal area. The results indicated that estrogen-deficient state may not have a direct effect on the alveolar bone adjacent to the maxillary second molar roots. Under the conditions of this experiment, estrogen replacement therapy did not delay the progression of induced periodontitis / Doutor

Orientadora: Doris Hissako Sumida / Coorientador: Fernando Yamamoto Chiba / Banca: Suzely Adas Saliba Moimaz / Banca: Renato Moreira Arcieri / Resumo: O diabetes mellitus gestacional, caracterizado por alterações hormonais e metabólicas que resultam em intolerância à glicose durante a segunda metade da gestação, pode resultar de alterações na resistência celular à insulina. A resistência à insulina pode ser decorrente do aumento progressivo da concentração plasmática dos hormônios placentários progesterona, estrógenos, somatomamotropina coriônico humano e do hormônio de crescimento placentário e do hormônio hipofisário prolactina. O cortisol, que também apresenta concentração plasmática aumentada no terceiro trimestre gestacional, estimula a gliconeogênese hepática e inibe a capitação de glicose mediada pela insulina no músculo esquelético e tecido adiposo. Esse aumento de cortisol pode ser intensificado por fatores emocionais típicos das transformações que a gravidez produz, além do estresse cada vez mais exacerbado pela vida moderna, podendo promover a resistência insulínica. A doença periodontal, considerada a segunda patologia bucal mais prevalente no mundo, pode ser agravada na gravidez, devido às alterações hormonais. Objetivando avaliar se a doença periodontal, associada ao aumento de cortisol, pode alterar a sensibilidade à insulina, foi feito um estudo com 96 gestantes usuárias do Sistema Único de Saúde, em um município do interior paulista. Trata-se de um estudo caso-controle, com abordagem quali-quantitativa, em que as pacientes foram divididas em 3 grupos: periodonto saudável, gengivite e periodontite. Após análise estatística feita por análise de variância e teste de Turkey, verificou-se que o grupo com periodontite apresentou aumento significativo da glicemia, insulinemia, resistência à insulina e nível de estresse percebido quando comparado ao grupo de pacientes com periodonto saudável e gengivite. A detecção de fatores... / Abstract: Gestational diabetes mellitus, characterized in hormonal and metabolic changes that result in glucose intolerance during the second half of pregnancy may result from alterations in cellular resistance to insulin. Insulin resistance may be due to the progressive increase in the plasma concentration of placental hormone progesterone, estrogens, somatomammotropin human chorionic and placental growth hormone and pituitary hormone prolactin. Cortisol, which also features plasma concentration increased in the third trimester stimulates hepatic gluconeogenesis and inhibits the pickup of glucose mediated by insulin in skeletal muscle and adipose tissue. This increase in cortisol can be enhanced by typical emotional factors of the changes that pregnancy produces, in addition to stress increasingly exacerbated by modern life, and may promote insulin resistance. Periodontal disease, considered the second most prevalent oral disease in the world, can be exacerbated in pregnancy due to hormonal changes. To evaluate whether periodontal disease, associated with increased cortisol can alter insulin sensitivity, it was made a study of 96 pregnant women users of the Unified Health System, in a city of São Paulo. It is a case-control study, with qualitative and quantitative approach, in which patients were divided into 3 groups: healthy periodontal, gingivitis and periodontitis. After statistical analysis by ANOVA and Tukey's test, it was found that the group with periodontitis had significantly increased blood glucose, insulin, insulin resistance and perceived stress level when compared to the group of patients with gingivitis and periodontal health. The detection of factors that may contribute to insulin resistance is of paramount importance because a change in glucose homeostasis can configure maternal-fetal diseases such as lung maturation or late fetal macrosomia / Mestre

Orientador: Juliano Milanezi de Almeida / Coorientador: Valdir Gouveia Garcia / Coorientador: Edilson Ervolino / Banca: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Valmir Campos Macarini / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do consumo crônico de diferentes concentrações de álcool nos tecidos periodontais e na evolução da periodontite experimental (PE). Foram utilizados 160 animais divididos em 4 grupos experimentais: Grupo PE-NT (n= 40): Ratos normais, com PE; Grupo PE-A14° (n= 40): Ratos com PE e expostos ao álcool à 14%; Grupo PE-A25° (n= 40): Ratos com PE e expostos ao álcool à 25%; Grupo PE-A36° (n= 40): Ratos com PE e expostos ao álcool à 36%. Os animais dos Grupos PE-A14°, PE-A25° e PE-A36° foram submetidos às diferentes concentrações de álcool 30 dias antes da instalação da ligadura. Foram obtidas amostras sanguíneas previamente ao inicio da administração das soluções alcoólicas em todos os períodos experimentais. Dez animais de cada grupo foram eutanasiados aos 3, 7, 15 e 30 dias após a indução da PE. Foram obtidos cortes semi seriados de 4 μm de espessura no sentido mésio-distal e corados com Hematoxilina e Eosina ou Tricrômico de Masson. A porcentagem de osso na furca (POF) foi avaliada por análises histomorfométricas e foram realizadas analises histológicas, imunoistoquímicas e bioquímicas. As análises histológicas, histométricas e imunoistoquímicas demostraram que no grupo PE-NT a ligadura foi capaz de induzir perda óssea alveolar (p<0,05). Nos grupos PE-NT, PE-A14°, PE-A25° e PE-A36° o álcool exacerbou a perda óssea alveolar nos diferentes períodos experimentais (p<0,05). Na analise bioquímica, observou-se uma diminuição nos níveis da FA em todos os grupos experimentais após a PE, quando comparado ao baseline de cada grupo experimental, e na analise da ALT e AST, os níveis destes marcadores expressaram um incremento significativo em todos os grupos experimentais após a PE, quando comparado a seus respetivos baseline. Dentro dos limites... / Abstract: Aim: The aim of this study was to evaluate the influence of chronic intake of different alcohol concentrations on periodontal tissues and the evolution of experimental periodontitis (EP). One hundred sixty male rats were set into four experimental groups: GROUP EP-NT: normal rats with EP; GROUP EP-A14° (n=40): rats with EP exposed to alcohol with 14% concentration; GROUP EP-A25 (n=40): rats with EP exposed to alcohol with 25% concentration; GROUP Ep-A36% (n=40) rats: rats with EP exposed to alcohol with 36% concentration. The animals from groups EP-A14°, EP-A25° and EP-A36° were subjected to each respective alcohol concentration 30 days before the ligature placement. Blood samples were collected before beginning the administration of the alcoholic solutions in all experimental periods. Ten animals from each group were euthanized at 3, 7, 15 and 30 days after EP induction. Were obtained semi-serial sections with 4m thickness in mesio-distal direction and stained with hematoxylin-eosin or Masson Trichrome. The percentage of bone in the furcation area (PBF) was evaluated by histomorphometric analysis, and were realized histological, immunohistochemical and biochemical analyzes. The histological, histometrical and immuhistochemical analyzes showed that on EP-NT group the ligature was able to induce alveolar bone loss (p<0,05). On groups EP-NT, EP-A14, EP-A25 and EP-A36 the alcohol exacerbated the alveolar bone loss at each experimental periods (p<0,05). The biochemical analysis showed decreased levels of alkaline phosphatase (AP) in all experimental groups after EP when compared to the baseline of each experimental group. In ALT and AST analyzes, was observed that these markers expressed a significant increase in all experimental groups after EP when compared to each respective baselines. Within... / Mestre

Orientadora: Cristiane Duque / Banca: Sandra Maria Herondina Coelho Ávila de Aguiar / Banca: Ana Cláudia Okamoto / Banca: Michele Baffi Diniz / Banca: Natália Leal Vizoto / Resumo: A boca é um ecossistema complexo composto por centenas de espécies microbianas que apresentam características genotípicas e fenotípicas distintas que permitem sua adaptação e sobrevivência às adversidades desse ambiente. Streptococcus mutans é a espécie bacteriana mais relacionada à etiologia da cárie dentária, devido principalmente ao seu potencial acidogênico, acidúrico e na aderência e formação de biofilme dental. Outras espécies bacterianas, como as bifidobactérias, foram detectadas em diversos sítios bucais incluindo lesões cariosas iniciais ou cavitadas e estão sendo relacionadas à etiologia da cárie precoce da infância (CPI). Contrariamente, efeito benéfico na prevenção da doença periodontal tem sido observado para as bifidobactérias pelo fato dessas espécies competirem e interferirem na aderência e formação do biofilme de patógenos periodontais. Assim, ambiguidade em relação ao papel das bifidobactérias na etiologia ou prevenção de doenças bucais está sendo observada na literatura. Este trabalho foi dividido em três capítulos. Os objetivos foram: 1) avaliar a diversidade genotípica e as características fenotípicas de cepas de S. mutans, isoladas do biofilme dental de crianças CPI e CPI-severa (CPI-S) em comparação com crianças livres de cárie (LC); 2) avaliar a capacidade de produzir e tolerar ácidos, de formar biofilme e de induzir lesões iniciais de cárie in vitro por espécies de bifidobactérias comparadas à de espécies bacterianas já reconhecidas no contexto da cárie dentária e 3) investigar o efeito antagonista in vitro de algumas espécies de bifidobactérias sobre biofilmes de Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis e Streptococcus oralis. No capítulo 1, cepas de S. mutans de amostras de biofilme... / Abstract: The mouth is a complex ecosystem composed of hundreds of microbial species with different genotypic and phenotypic characteristics that allow their adaptation and survival in the adversity of that environment. Streptococcus mutans is the bacterial species more closely related to the etiology of dental caries, mainly due to its acidogenic and aciduric potential and adherence and formation of dental biofilm. Other bacterial species, such as bifidobacteria, have been detected in oral sites including initial and cavitated carious lesions and have been related to the etiology of early childhood caries (ECC). In contrast, beneficial effect of bifidobacteria in the prevention of periodontal disease has been observed because they compete and interfere with the adherence and biofilm formation by periodontal pathogens. Thus, ambiguity regarding the role of bifidobacteria in the etiology or prevention of oral diseases has been observed in the literature. This work was divided into three chapters. The objectives were: 1) to evaluate the genotypic diversity and phenotypic characteristics of S. mutans strains isolated from dental biofilm of ECC and severe-ECC (S-ECC) children compared to caries-free children (CF); 2) to evaluate the ability to produce and tolerate acids, to form biofilm and inducing in vitro initial carious lesions by species of bifidobacteria compared to the bacterial species already recognized in the context of dental caries and 3) to investigate the in vitro antagonistic effect of some bifidobacteria species on biofilms of Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis and Streptococcus oralis. In Chapter 1, S. mutans strains from biofilm samples of children with ECC, S-ECC and CF were isolated in Agar Mitis Salivarius... / Doutor

Orientador: João Carlos Callera / Banca: José Vanderlei Menani / Banca: Juliana Irani Fratucci De Gobbi / Resumo: Injeções no núcleo parabraquial lateral (NPBL) de muscimol, agonista de receptores GABAA, promove aumento de pressão arterial e induz ingestão de NaCl 0.3 M e água em ratos normovolêmicos, saciados e depletados de sódio. A doença periodontal é uma condição inflamatória que promove a liberação de citocinas próinflamatórias, tais como IL-6 e TNF-α e a destruição das estruturas de suporte do dente. As citocinas pró-inflamatórias podem modular a neurotransmissão GABAérgica e ativar neurônios do NPBL. Neste estudo, investigamos o efeito da ativação GABAérgica no NPBL com muscimol na ingestão de NaCl hipertônico e água e parâmetros cardiovasculares em ratos normovolêmicos, saciados e depletados pelo modelo FURO+CAP com doença periodontal. Foram utilizados ratos Wistar divididos em dois grupos: com doença periodontal induzida por ligadura (DP) e sem doença periodontal (grupo controle). Quinze (15) dias após a indução da doença periodontal em ambos os grupos foram implantadas cânulas bilaterais no NPBL. Ratos saciados controles que receberam injeções bilaterais no NPBL de muscimol tiveram aumento na ingestão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: GABAA receptor activation with muscimol in the lateral parabrachial nucleus (LPBN) induces water and hypertonic sodium chloride (NaCl) intake in rats. The purpose of this study was to investigate whether local inflammatory event, such as periodontal disease, is able to alter the effects of injections of muscimol (GABAA receptor agonist) into the LPBN on water and 0.3 M NaCl intake in fluid replete rats and in rats treated with diuretic furosemide (FURO) combined with a low dose of the angiotensin-converting enzyme inhibitor captopril (CAP) injected subcutaneously. Male Wistar rats were divided into two groups: with experimental ligature-induced periodontal disease (PD) and those without PD (control conditions). Fifteen days after application of the ligature, both groups had cannulas implanted bilaterally into the LPBN, and were given simultaneous access to water and 0.3 M NaCl intake. In fluid replete rats without PD, injections of muscimol (0.5 nmol/0.2 μl) into the LPBN induced 0.3 M NaCl intake (15.8 ± 2.4 vs. saline: 0.2 ± 0.05 ml/210 min), water intake (14.2 ± 1.2 vs. saline: 0.6 ± 0.3 ml/210 min) and pressor response (15 ± 3.3 mmHg, vs. saline: 0.6 ± 1.3 mmHg). In fluid replete rats (PD group), a decrease was observed in water intake (6.0 ± 1.4 ml/210 min), pressor response (7.5 ± 3.1 mmHg), but not in 0.3 M NaCl intake induced by muscimol. In rats with FURO + CAP-treatment (control group), injections of muscimol into the LPBN increased 0.3 M NaCl (25.9 ± 5.8 vs. saline: 5.7  1.0 ml/210 min) and water intake (19.9  1.2 vs. saline: 11.2  1.0 ml/210 min). In rats with FURO + CAP-treatment (PD group), a decrease was observed in 0.3 M NaCl intake (10.9 ± 2.9 ml/210 min) and water intake (13.4  2.3 ml/210 min) after... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Joni Augusto Cirelli / Banca: Paulo Sérgio Cerri / Banca: Ary dos Santos Pinto / Banca: Daniela Bazan Palioto Bulle / Banca: Marinella Holzhausen Caldeira / Resumo: Diversos estudos têm sido conduzidos para se entender os efeitos da doença periodontal e do movimento ortodôntico nos tecidos periodontais de forma isolada; porém, os efeitos da presença concomitante de ambos os processos ainda não foram totalmente elucidados. O objetivo destes estudos in vitro e in vivo foi investigar as interações de sinais microbianos e biomecânicos em modelos que mimetizam a influência de forças mecânicas ortodônticas na progressão da doença periodontal e destruição tecidual. Nos estudos in vitro, as células do ligamento periodontal humano (hPDL) foram tratadas de acordo com o grupo experimental I: células sem nenhum estímulo; II: células estimuladas com a bactéria inativada Fusobacterium nucleatum ATCC 25586; III e IV: células submetidas à força mecânica tensional baixa (III) e alta (IV); V e VI: células estimuladas com F. nucleatum ATCC 25586 e submetidas à força mecânica tensional baixa (V) e alta (VI). O estudo in vivo foi composto por 144 ratos que foram divididos nos grupos: 1-controle (C), 2- doença periodontal experimental induzida por ligaduras (P), 3- movimento ortodôntico (OM), 4- P seguida de OM (OMP). A doença periodontal foi induzida 5 dias antes da colocação dos aparelhos ortodônticos e os períodos de sacrifício foram de 1, 3, 7 e 15 dias após indução do OM. Expressão de citocinas inflamatórias e seus receptores foi avaliada por PCR array e seis citocinas com maior expressão tiveram seus resultados confirmados por PCR em tempo real. Blocos de hemimaxilas foram utilizados para análise de perda óssea por microtomografia computadorizada. Os resultados dos estudos in vitro demonstraram que as células hPDL são capazes de produzir visfatina e que F. 15 nucleatum aumentou significantemente essa produção. Após estímulo microbiano e mecânico houve redução significante na expressão e síntese de visfatina...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Several studies have been conducted to understand the effects of periodontal disease and orthodontic tooth movement on periodontal tissues, but the effects of both processes present together have not been fully elucidated. The aim of these in vitro and in vivo studies was to investigate the interactions of microbial and biomechanical signals in models that mimic the influence of orthodontic mechanical forces on the progression of periodontal disease and tissue destruction. In the in vitro study, human periodontal ligament cells (hPDL) were treated according to the following groups: Group I- cells without stimulation, II: cells stimulated with inactivated bacterium Fusobacterium nucleatum ATCC 25586, III and IV: cells subjected to cyclic tensile strain (CTS) of low (III) and high (IV) magnitudes, V and VI: cells stimulated with F. nucleatum ATCC 25586 and subjected CTS of low (V) and high (VI) magnitudes. The in vivo study was composed of 144 rats that were divided into four groups: 1- control group (C), 2- ligature-induced periodontal disease (P), 3- orthodontic movement (OM), and 4- P followed by OM (OMP). Periodontal disease was induced 5 days before orthodontic appliances placement and after 1, 3, 7, and 15 days of OM induction, animals were sacrificed. Expression of cytokines and their receptors was evaluated by PCR array, and the 6 most expressed inflammatory mediators had their results validated by real time PCR. Hemimaxillas blocks were used for bone volume fraction analysis by micro-computed tomography. The results of the in vitro study demonstrated that hPDL cells are able to produce visfatin and F. nucleatum significantly increased this production. After microbial and mechanical co-stimulation, there was a significant reduction in 18 the expression and synthesis of visfatin and significant increase in the expression and production of COX2 and PGE2...(Complete abstract eletronic acess below) / Doutor

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000418471-Texto+Completo-0.pdf: 941887 bytes, checksum: 83e65c46f62b9cf566ee10180ce3d11c (MD5) Previous issue date: 2009 / It has been demonstrated that kinin B1 receptors are highly upregulated under several stressful stimuli, such as infection. In spite of that, there is no evidence indicating whether Porphyromonas gingivalis LPS (Pg-LPS), a preferential TLR2 activator, might lead to B1 receptor upregulation. In this study, we demonstrate that Pg-LPS injection into the rat paw resulted in a marked functional upregulation of B1 receptors (as measured by an increase of B1 receptor-induced edema formation), which was preceded by a rapid raise in B1 receptor mRNA expression. The local administration of Pg-LPS also resulted in a prominent production of the proinflammatory cytokine TNF-G, followed by an increase of neutrophil influx; both events were observed at time periods prior to B1 receptor induction. The functional and molecular Pg-LPS-elicited B1 receptor upregulation was significantly reduced by the glucocorticoid dexamethasone, and to a lesser extent by the chimeric anti-TNFa antibody infliximab. Of high relevance, we show for the first time that a single administration of the pro-resolution lipid mediator Resolvin E1 was able to markedly down-regulate Pg-LPS-driven B1 receptor expression, probably by inhibiting TNFG production and neutrophil migration to the inflammatory set. Collectively, the present findings clearly suggest that TLR2 activation by Pg-LPS is able to induce the upregulation of B1 receptors, through mechanisms involving TNFa release and neutrophil influx, which are largely sensitive to Resolvin E1. It is tempting to suggest that kinin B1 receptors might well represent a pivotal pathway for the inflammatory responses evoked by P. gingivalis and its virulence factors. / O receptor B₁ para as cininas está normalmente ausente durante condições fisiológicas podendo ser rapidamente induzido em resposta a diversos estímulos, como os processos infecciosos. Apesar disso, não existem estudos indicando como o LPS de Porphyromonas gingivalis (Pg-LPS), um ativador preferencial de TLR2, pode induzir a expressão do receptor B₁. No presente trabalho, foi demonstrado que a injeção do Pg-LPS na pata de rato resulta na indução funcional tempo-dependente dos receptores B₁ (determinada pelo aumento marcante na resposta edematogênica), que foi precedida pelo rápido aumento na expressão do seu RNAm. A administração local de Pg-LPS produziu um aumento marcante na produção da citocina pró-inflamatória TNF-G e do influxo de neutrófilos. Ambos os eventos foram observados anteriormente à indução dos receptores B₁. A indução funcional e molecular do receptor B₁ pelo Pg-LPS foi reduzida significantemente pelo glicocorticóide dexametasona e pelo anticorpo monoclonal anti- TNF-G infliximab. De grande relevância, foi demonstrado pela primeira vez, que uma única administração de Resolvina E1, um mediador lipídico pró-resolução da inflamação, foi capaz de produzir uma redução marcante na expressão dos receptores B₁ mediada pelo Pg-LPS, provavelmente inibindo produção de TNF-G e a migração de neutrófilos para o sítio inflamatório. Analisados em conjunto, os dados obtidos permitem inferir que a ativação do TLR2 pelo Pg-LPS é capaz de induzir a expressão dos receptores B₁, através de mecanismos relacionados à produção de TNF-G e ao influxo de neutrófilos, que são sensíveis a Resolvina E1. Assim, é possível sugerir que os receptores B₁ representam uma via importante nas respostas inflamatórias desencadeadas pela P. gingivalis e seus fatores de virulência.