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Molecular genetic investigation of Shar-Pei fever : a disease similar to human Familial Mediterranean fever /Chen, Yi-wen, January 1998 (has links)
Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 1998. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves 81-91). Also available on the Internet.
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Untersuchungen zum immunhistologischen Nachweis verschiedener Strukturproteine des Felinen Infekiösen Peritonitis (FIP)-VirusWeber, Bianca January 2009 (has links)
Zugl.: Giessen, Univ., Diss., 2009
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Molecular genetic investigation of Shar-Pei fever a disease similar to human Familial Mediterranean fever /Chen, Yi-wen, January 1998 (has links)
Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 1998. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves 81-91). Also available on the Internet.
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Perfil clonal e fatores de patogenicidade de Staphylococcus spp. no prognóstico das peritonites em diálise peritonealCamargo, Carlos Henrique [UNESP] 30 November 2012 (has links) (PDF)
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camargo_ch_dr_botfm.pdf: 1393028 bytes, checksum: b29a82bb160a93a92debb8f7c83c05db (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As peritonites bacterianas se mantêm como a principal complicação do método de diálise peritoneal, sendo as espécies de Staphylococcus os agentes mais frequentes destas infecções. As infecções peritoneais devidas à espécie S. aureus apresentam pior evolução clínica, contrastando com a maior resistência antimicrobiana apresentada pelos estafilococos coagulase negativa. As características do agente, associadas às condições do hospedeiro, devem, portanto, estar relacionadas à evolução de um episódio. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do perfil clonal, dos fatores de virulência e da resistência antimicrobiana de Staphylococcus, juntamente com fatores do hospedeiro, no quadro clínico e evolução de peritonites em pacientes em diálise peritoneal, ocorridas na Unidade de Diálise do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu nos últimos 17 anos. Entre 1994 e 2011, 192 episódios, que ocorreram em 118 pacientes, foram analisados. Os dados clínicos foram obtidos dos prontuários e fichas médicas específicas. Nas amostras de Staphylococcus foram realizados testes específicos fenotípicos e/ou genotípicos, para detecção de fatores de patogenicidade e de susceptibilidade à oxacilina e vancomicina; o perfil clonal foi determinado pela técnica de pulsed-field gel electrophoresis. Modelo de regressão logística foi utilizado para avaliar a influência dos fatores clínicos e microbiológicos no desfecho das peritonites. Além de S. aureus, outras espécies de Staphylococcus foram identificadas (S. epidermidis, S. haemolyticus, S. warneri, S. hominis, S. capitis, S. cohnii, S. saprophyticus, S. lugdunensis, S. simulans e S. xylosus). As peritonites por S. aureus apresentaram maiores taxas de ocorrência hipotensão... / Bacterial peritonitis remains as the main cause of technique failure of peritoneal dialysis (PD) and Gram-positive cocci, namely Staphylococcus spp., are the main etiological agents of such infections. Peritonitis caused by Staphylococcus aureus presents poorer prognostic than infections due to coagulase negative staphylococci (CoNS), even the antimicrobial resistance is more pronounced in the last agents. Host and bacterial factors may influence, therefore, peritonitis outcome. The objective of this study was to evaluate the influence of host and bacterial factors (clonal profile, virulence and antimicrobial resistance determinants in strains of staphylococci) on peritonitis clinical findings and outcome in patients from dialysis unit of Botucatu Medical School, Brazil, from 1994 until 2011. A hundred ninety-two episodes due to Staphylococcus were assessed. Genotypic or phenotypic tests were carried out to evaluate virulence factors and antimicrobial susceptibility for oxacillin and vancomycin; clonal profile was determined by pulsed-field gel electrophoresis. Logistic regression was used for the analysis of demographic, clinical, and microbiological factors influencing peritonitis outcome. Several species besides S. aureus were identified: S. epidermidis, S. haemolyticus, S. warneri, S. hominis, S. capitis, S. cohnii, S. saprophyticus, S. lugdunensis, S. simulans, and S. xylosus. Patients with S. aureus related peritonitis presented higher hypotension rate compared to the episodes due to CoNS (p<0.05). Oxacillin resistance was more frequent among CoNS (p<0.05) strains and vancomycin resistance was not detected, neither on S. aureus nor CoNS. S. aureus strains also presented higher enzymes and virulence genes than the others species (p<0.05), except... (Complete abstract click electronic access below)
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CaracterizaÃÃo in vivo e in vitro da resposta inflamatÃria aguda induzida por uma fraÃÃo proteica isolada do lÃtex de Calotropis procera (Ait.) R. BrAlana Fonteles Lima Rabelo 09 June 2014 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Calotropis procera à uma planta laticÃfera pertencente à famÃlia Apocynaceae, encontrada na Ãsia, Ãfrica e AmÃrica do Sul. Seu lÃtex à constituÃdo por um grande nÃmero de molÃculas bioativas que apresentam relevantes propriedades farmacolÃgicas que inclui anti- e prÃ-inflamatÃria, antitumoral, cicatrizante, antimicrobiana, entre outras. As proteÃnas extraÃdas deste lÃtex possuem mÃltiplos efeitos imunomodulatÃrios, dependendo da via de administraÃÃo utilizada. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar a resposta prÃ-inflamatÃria da fraÃÃo proteica (PL) do lÃtex de Calotropis procera nos modelos de peritonite e bolsa de ar subcutÃnea; investigando a quimiotaxia de neutrÃfilos (in vivo e in vitro); o papel das cÃlulas residentes e os mediadores envolvidos. Foram utilizados camundongos Swiss (25-30 g). Verificou-se que PL induziu migraÃÃo de neutrÃfilos (MN) de forma dose-e-tempo dependente nos modelos de peritonite e bolsa de ar subcutÃnea. Foi demonstrado um aumento na permeabilidade vascular induzido pela administraÃÃo da PL (1 mg/cav) na cavidade peritoneal no modelo de Azul de Evans. O aumento na populaÃÃo de macrÃfagos residentes pelo prÃ-tratamento com tioglicolato, intensificou a MN induzida por PL, sendo observado um resultado semelhante com o grupo depletado de mastÃcitos pelo composto 48/80. Os mastÃcitos parecem exercer um papel modulador inibitÃrio sobre a quimiotaxia de neutrÃfilos, enquanto os macrÃfagos potencializam a MN, possivelmente por meio da liberaÃÃo de mediadores. Para investigaÃÃo dos mediadores envolvidos foram utilizados fÃrmacos bloqueadores especÃficos antes da administraÃÃo da PL. A modulaÃÃo farmacolÃgica com Dexametasona (0,5 mg/kg, s.c.), Pentoxifilina (100 mg/kg, s.c.), Talidomida (50 mg/kg, s.c.), Indometacina (3 mg/kg, s.c.) e Celecoxib (30 mg/kg, s.c.), mas nÃo com Meclizina (40 mg/kg, s.c.) e PCA (10 mg/kg; s.c.), inibiram a MN induzida por PL. Foi verificado por ELISA que os nÃveis dos mediadores IL-1 e IL-6 estavam aumentados no fluido peritoneal 4 h apÃs a administraÃÃo de PL (1 mg/cav, i.p.). Os nÃveis de nitrito tambÃm estavam aumentados no fluido da bolsa de ar subcutÃnea, demonstrando um envolvimento do Ãxido nÃtrico (NO) no efeito prÃ-inflamatÃrio da PL. A PL induziu rolamento e adesÃo de leucÃcitos ao endotÃlio vascular do mesentÃrio de camundongos, bem como quimiotaxia de neutrÃfilos in vitro. AlÃm disso, foi capaz de interagir diretamente com neutrÃfilos, induzindo a sÃntese dos mediadores prÃ-inflamatÃrios TNF-α, IL-1β, PGE2 e NO em cultura de neutrÃfilos. Em conclusÃo, PL induz uma resposta inflamatÃria aguda, caracterizada pela intensa migraÃÃo de neutrÃfilos e aumento da permeabilidade vascular. Promove quimiotaxia para neutrÃfilos de forma indireta, via macrÃfagos residentes, e de forma direta, interagindo com neutrÃfilos, induzindo rolamento e adesÃo no endotÃlio e liberaÃÃo de mediadores prÃ-inflamatÃrios. / Calotropis procera is a laticiferous plant belonging to the family Apocynaceae, found in Asia, Africa and South America. Its latex is comprised of a large number of bioactive molecules that show significant pharmacological properties including anti- and pro- inflammatory, antitumor, healing, antimicrobial, among others. The proteins extracted from this latex have multiple immunomodulatory effects, depending on the route of administration utilized. The objective of this study was to characterize the pro- inflammatory response of protein fraction PL latex Calotropis procera in models of peritonitis and subcutaneous air pouch; neutrophil chemotaxis (in vivo and in vitro); the role of resident cells and mediators involved. Swiss mice were used (25-30 g). It was found that PL induced neutrophil migration (MN) in a dose- and time - dependent in models of peritonitis and subcutaneous air pouch. An increase in vascular permeability induced by the administration of PL (1 mg / cav) in the peritoneal cavity in the Evans blue model was demonstrated. The increase in the population of resident macrophages after pre-treatment with thioglycolate intensified the MN induced by PL, with the similar result observed with the mast cell -depleted group by compound 48/80. Mast cells appear to exert an inhibitory modulatory role on neutrophil chemotaxis, whereas macrophages potentiate the MN, possibly through the release of mediators. For investigation of involved mediators, blocking drugs were used before administration of the PL. Pharmacological modulation Dexamethasone (0.5 mg/kg , s.c.), Pentoxifylline (100 mg/kg , s.c.), Thalidomide (50 mg/kg , s.c.), Indomethacin (3 mg/kg , s.c.) and Celecoxib (30 mg/kg , s.c.), but not with Meclizine (40 mg/kg , s.c.) and PCA (10 mg/kg, s.c.) inhibited the MN induced by PL. It was verified by ELISA, that levels of mediators IL-1 and IL-6 were elevated in the peritoneal fluid 4 hours after administration of PL (1 mg/cav, i.p.). The nitrite levels were also higher in the subcutaneous air pouch fluid, demonstrating the involvement of nitric oxide (NO) in the pro-inflammatory effects of LP. PL induced rolling and adhesion of leukocytes to the vascular endothelium of mesenteric mice and neutrophil chemotaxis in vitro. Furthermore, it can directly interact with neutrophils by inducing the synthesis of pro-inflammatory mediators TNF-α, IL- 1β, PGE2 and NO in neutrophilâs culture. In conclusion, PL induces an acute inflammatory response characterized by intense neutrophil migration and increase of vascular permeability. Promotes neutrophil chemotaxis indirectly, via resident macrophages and directly interacting with neutrophils, inducing rolling and adhesion to the endothelium and release of pro-inflammatory mediators.
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Condiciones de vivienda y el desarrollo de la primera peritonitis en pacientes que iniciaron diálisis peritoneal en el periodo 2002-2011 en un hospital de LimaVélez Segovia, Eduardo, Salazar Huayna, Lourdes, Alva Bravo, Edmundo, Mayta-Tristan, Percy 07 1900 (has links)
El texto completo de este trabajo no está disponible en el Repositorio Académico UPC por restricciones de la casa editorial donde ha sido publicado. / Introducción Las características de la vivienda son un factor importante para llevar a cabo adecuadamente el tratamiento de diálisis peritoneal (DP), sin embargo, no se conoce si estas condicionan la aparición de peritonitis. Métodos Se eligió una cohorte retrospectiva en pacientes que iniciaron DP dentro del periodo enero de 2002-diciembre de 2011 en el Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen. Se describieron los tiempos de seguimiento según la fecha de inicio de DP y la primera peritonitis u otros eventos (paso a hemodiálisis, trasplante, muerte o abandono). Las variables fueron evaluadas según su tipo, utilizando estadística descriptiva e inferencial. Resultados El análisis incluyó a 218 pacientes con una media de edad de 54 años ± 16. El principal lugar donde se realiza el procedimiento de DP es el dormitorio (77,3%), en su mayoría se encuentra limpio (54,3%), ordenado (71,3%) y despejado (61,8%). Los insumos para el procedimiento se almacenan bajo techo (95,7%) y el mismo paciente ejecuta el tratamiento en la mayoría de los casos (73,1%). La incidencia encontrada fue de 0,17 episodios/paciente-año. La media del tiempo de seguimiento fue de 975 días ± 750. De acuerdo al análisis realizado, no se encontraron resultados significativos que muestren la relación entre las variables de vivienda y el desarrollo de la primera peritonitis. Conclusión No se encontró asociación entre las condiciones de vivienda y el desarrollo de peritonitis en pacientes en tratamiento de DP. Es necesario evaluar y mejorar el programa de visitas domiciliarias.
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Begleiterkrankungen bei Kühen mit Dislocatio abomasi unter besonderer Berücksichtigung der PeritonitisZwengauer, Rainer 24 June 2010 (has links) (PDF)
Ziel der Untersuchungen war es, klinische Befunde und Laborparameter von Kühen mit Labmagenverlagerung (LMV) zu vergleichen. Dabei wurden besonders Begleit-krankheiten berücksichtigt. Trotz standardisierter Methoden, gibt es nach der Lab-magenreposition immer wieder Fälle, in denen keine oder eine verzögerte Genesung eintritt. Inflammatorische, intraabdominale Prozesse wurden vermutet, konnten aber nur schwer diagnostiziert werden. Deshalb galt der Untersuchung des Bauchpunkta-tes und der Peritonitisdiagnostik besonderes Interesse.
In die Untersuchung gingen 100 Kühe mit LMV ein. Zum Zeitpunkt der OP und bei der Nachuntersuchung nach 7-12 Tagen wurden Blut und Bauchpunktatproben ent-nommen. Die Blutproben dienten der hämatologischen Untersuchung und der Analy-se des Energiestoffwechsels (FFS, BHB, Bilirubin, Cholesterol), des Proteinstoff-wechsels (Gesamtprotein, Albumin, Haptoglobin, Harnstoff, Creatinin), der Leber-funktion (GLDH, GGT, AST, LDH) und des Mineralstoffwechsels (Ca, K, Mg, Cl, Na, P, Fe). Das Bauchpunktat wurde zytologisch, bakteriologisch (Gram-Färbung) sowie klinisch-chemisch (Protein, Albumin, Harnstoff, Glucose, Cholesterol, Haptoglobin, AP, AST, CK, LDH) analysiert.
Statistisch wurden die Gruppen LMV-links (n=80), LMV-rechts (n=20) und LMV-gesamt Gruppe (n=100) sowie die Gruppen ohne Begleitkrankheiten (n=31), Metritis (n=38), Erkrankungen des Bewegungsapparates (n=31), Mastitis (n=19), Enteritis (n=11), Pneumonie (n=6), Peritonitis (n=4) und Kühe mit Geburtsverletzung (n=3) zum Zeitpunkt der OP und zum Zeitpunkt der Nachuntersuchung verglichen.
Die Laborparameter im Bauchpunktat zeigten zum Zeitpunkt der OP keine auffälligen Abweichungen. Stärkere Veränderungen konnten bis zur Nachuntersuchung 7-12 Tage p. OP festgestellt werden. Die zur Peritonitisdiagnostik relevanten Parameter Gesamtleukozyten, neutrophile Granulozyten, eosinophile Granulozyten und Ge-samtprotein stiegen an (p<0,0001). Die Befunde der verschiedenen Begleitkrankhei-ten unterschieden sich nur unwesentlich (p>0,05). Der Nachweis von Bakterien im Bauchpunktat korrelierte nicht mit der Begleitkrankheit Peritonitis.
Der bei der hämatologischen Blutanalyse bestehende hohe Anteil an Kernlinksver-schiebungen zum Zeitpunkt der OP hing mit den diagnostizierten Begleitkrankheiten zusammen. Der Anteil stabkerniger Granulozyten lag bei allen Begleitkrankheiten Gruppen über dem Referenzwert, der der Metritis Gruppe mit 0,53 G/l signifikant (p<0,05) höher als bei der Gruppe ohne Begleitkrankheit (0,18 G/l).
Der Energiestoffwechsel der Kühe mit LMV war stark belastet. Die FFS- und BHB-Konzentrationen waren zurzeit der OP über den Referenzwert erhöht, fielen aber bis zur Nachuntersuchung bis in den Normbereich (p<0,0001). Der Vergleich der Be-gleitkrankheiten brachte keine signifikanten Differenzen.
Zurzeit der OP wurden für beide LMV-Gruppen über den Referenzwert erhöhte Hap-toglobinkonzentrationen sowie Creatinkinase-, AST- und LDH- Aktivitäten bestimmt.
Kalium und Magnesium zeigten bei Kühen mit LMV zum Zeitpunkt der OP erniedrigte Konzentrationen. Die Kaliumkonzentrationen beider LMV-Gruppen normalisierten sich bis zur Nachuntersuchung (p<0,0001).
Der Vergleich der Stoffwechselparameter bei den unterschiedlichen Begleitkrankhei-ten zurzeit der OP ergab nur für die Metritis-Gruppe gegenüber der Gruppe ohne Be-gleitkrankheit signifikante Differenzen: niedrigere Harnstoff- (p<0,05), Cholesterol-, Albumin- und Magnesiumkonzentrationen (p<0,0001) sowie höhere Bilirubin- und Haptoglobinkonzentrationen (p<0,05).
Schlussfolgernd ist festzustellen:
1. Kühe mit LMV leiden häufig an weiteren Erkrankungen, in erster Linie an Metritis und an Erkrankungen des Bewegungsapparates.
2. Häufig konnte eine Entgleisung des Energiestoffwechsels mit erhöhten FFS- und
BHB-Konzentrationen festgestellt werden, die sich nach Reposition des verlagerten Organs unter Therapie wieder normalisierte.
3. Die Anzahl der Begleitkrankheiten hatten keine statistisch nachweisbaren Auswirkungen auf den Behandlungserfolg der operierten LMV-Kühe, wobei für die Rekonvaleszenz der Kühe eine, den jeweiligen Begleitkrankheiten angepasste Behandlung von Bedeutung ist. Die Begleitkrankheit Metritis zeigte die deutlichsten Abweichungen bei der Untersuchung der Stoffwechselparameter. Es konnte kein statistischer Zusammenhang zwischen der Begleitkrankheit Peritonitis und der verstorbenen Patientengruppe nachgewiesen werden.
4. Die zur Peritonitisdiagnostik gewonnene Bauchhöhlenflüssigkeit war post OP starken Veränderungen unterworfen. Diese Veränderungen zeigten sich vor allem in stark gestiegenen Leukozytenzahlen und erhöhten Proteinkonzentrationen.
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Modelling recurrent episodes of peritonitis among patients who are in peritoneal dialysis at Pietersburg Provincial Hospital, Limpopo Province, South AfricaChavalala, Thembhani Hlayisani January 2019 (has links)
Thesis (M.Sc. (Statistics)) -- University of Limpopo, 2019 / Recurrent peritonitis is a major problem of peritoneal dialysis (PD) due to its association with technique failure in the dialysis process. The literature on peritonitis focused only on investigating major risk factors associated with the first episode of peritonitis. However, this dissertation investigates factors associated to multiple episodes of peritonitis, to a maximum of 6 episodes. The correlation of recurrent episodes of a patient is considered.
The univariate counting process, stratified, gap-time and marginal hazard regression models are applied to select the significant covariates to the multivariate regression hazard models. Regression coefficient for covariates are found to be statistically significant at 5% level. The application of Akaike information criterion (AIC) and Schwarz bayesian criterion (SBC) assisted to filter out the best method which is the stratified regression hazard model. The major risk factors associated with recurrent episodes of peritonitis are examined from the selected good fitting model.
In conclusion, the selected model identified two independent risk factors to be significantly associated with recurrent episodes of peritonitis: marital status and glomerularfiltrationrate. Twocategoriesofmaritalstatus, divorceandwidowerare the significant factors compared to married patients (when taking married patients as the reference category). / VLIROUC Programme
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Proteína C reactiva y recuento celular de líquido peritoneal como predictores de la respuesta al tratamiento de peritonitis asociado a diálisis peritonealVillavicencio Carranza, Mirko Moisés January 2009 (has links)
Objetivos: Determinar la asociación entre los niveles de PCR y el recuento celular del líquido peritoneal y el pronóstico de la respuesta al tratamiento de la peritonitis asociada a diálisis peritoneal ambulatoria crónica (DIPAC).
Método: Se analizaron retrospectivamente todos los pacientes que presentaron un episodio de peritonitis asociado a DIPAC, en el Hospital Nacional Edgardo Rebagliati Martins, Lima, Perú, durante el periodo Junio 2008 - Mayo 2009. Los episodios de peritonitis fúngica o por Mycobacterium sp. fueron excluidos del análisis. Se examinaron diversos parámetros demográficos, clínicos y de laboratorio que podrían predecir el pronóstico de un episodio de peritonitis. La proteína C reactiva (PCR) fue medida en el momento de diagnóstico de la peritonitis mientras que el recuento celular del líquido peritoneal (RCLP) fue obtenido en el día 1 y 3 de ocurrida la peritonitis. La respuesta al tratamiento de peritonitis asociada a DIPAC fue determinada como éxito o falla. La falla al tratamiento incluyó infección persistente, retiro del catéter de diálisis peritoneal con transferencia a hemodiálisis o muerte del paciente.
Resultados: La muestra estuvo constituida por un total de 39 episodios de peritonitis bacteriana, encontrándose una tasa de 0.49 episodios de peritonitis por paciente por año. Se logró aislar el germen en 19 (48.7%) de las muestras de líquido peritoneal tomadas, siendo negativo en el 20 (51.3%). En los casos en que se logró aislar el germen, 9 (47.4%) episodios fueron causados por gérmenes grampositivos mientras que 10 (52.6%) fueron debido a gérmenes gramnegativos. La correlación de PCR y el recuento celular del líquido peritoneal al 1er día fue de r = 0,18 (p es menor a 0,05) y la correlación de PCR y el recuento celular al 3er día fue de r es igual a 0,62 (p es menor que 0,05). Mediante las curvas de ROC, se determinó que el mejor rendimiento, área bajo la curva, es con un PCR mayor a 10 mg/dl que con PCR mayor a 5 [0.82 (95% IC 0.68 a 0.96) y 0.67 (95% IC 0.50 a 0.85), respectivamente (P es menor a 0,05)]. Con una PCR con un punto de corte mayor a 10 mg/dl, la sensibilidad fue 74% y la especificidad fue 90%, VPP 87,5% y VPN 78,2 % para predecir la falla del tratamiento. Mediante las curvas de ROC, se determinó que el recuento celular al 3er día mayor a 1000 tiene mejor rendimiento, área bajo la curva, que al 1er día [0.94 (95% IC 0.86 a 0.99) y 0.76 (95% IC 0.60 a 0.93), respectivamente (P es menor a 0,05)]. Para un recuento celular mayor o igual a 1000/mm3 en el 3er día, la sensibilidad fue 84% y la especificidad fue 100%, VPP 100 % y VPN 90 % para predecir la falla del tratamiento. En el análisis univariado se encontró que tanto sexo masculino (OR 0,08; 95% IC 0,017 a 0,383; P=0,002), PCR (OR 0,752; 95% IC 0,624 a 0,907; P=0,003) y recuento celular al 3er día (OR 0,997; 95% IC 0,995 a 0,999; P=0,004) tuvieron un efecto significativo en el pronóstico del fracaso del tratamiento de la peritonitis; sin embargo al interaccionar las variables en el análisis multivariado sólo el recuento celular del día 3 mayor 1000/mm3 resultó significativa (OR 0.997; 95% IC 0.994 a 0.999; P=0.041).
Conclusiones: El recuento celular del líquido peritoneal al 3er día resultó ser un factor predictivo independiente para la respuesta al tratamiento de la peritonitis asociada a DIPAC. Altos niveles de PCR también podrían predecir el pronóstico de un episodio de peritonitis. La medición de estos marcadores durante el curso de la peritonitis puede facilitar la identificación temprana de individuos con mayor riesgo de complicaciones.
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Can promotion of neutrophil apoptosis enhance repair in the infarcted myocardium and resolution of sterile peritonitis?Zhao, Xiaofeng January 2016 (has links)
Efferocytosis, the clearance of apoptotic cells including apoptotic neutrophils by macrophage phagocytosis, is a key cellular mechanism for resolution of inflammation and tissue repair. Cyclin-dependent kinases (CDKs) 7 and 9 phosphorylate RNA polymerase II that is vital for neutrophil transcriptional capacity. CDK inhibitors such as R-roscovitine, and the more selective inhibitor AT7519, induce neutrophil apoptosis and promote resolution of several mouse models of inflammation including acute lung inflammation. The hypothesis investigated here was that AT7519 would promote neutrophil apoptosis (i) in the infarcted heart, leading to macrophage polarisation, angiogenesis, reduced infarct expansion and retention of cardiac function and (ii) in the peritoneum, enhancing resolution of sterile peritonitis. AT7519 (1μM) induced apoptosis of mouse unstimulated-bone marrow derived neutrophils and thioglycollate-stimulated neutrophils in vitro in a time- and caspase-dependent manner, but did not alter activation assessed by calcium flux in response to the synthetic formyl peptide (fMLF) or platelet-activating factor (PAF). Only high concentrations of AT7519 (10 μM) induced monocyte/macrophage apoptosis and this was likely due to saturated phagocytosis of apoptotic neutrophils induced by high concentration of AT7519. Myocardial infarction (MI) was induced by coronary artery ligation in adult male mice and infarct volume was assessed 7 or 21 days later by in vitro optical projection tomography (OPT). The novel use of OPT for this purpose was validated by demonstrating correlation with infarct volume obtained by late-gadolinium enhanced magnetic resonance imaging in vivo and with infarct area assessed by histological staining (Masson’s Trichrome) in tissue sections. AT7519 (30 mg/kg i.p.) increased the number of apoptotic neutrophils (cleaved caspase-3 and Ly6G +ve) in the heart when administered after MI, but this was not associated with any subsequent alteration in macrophage polarisation, vessel density, infarct expansion or structural and functional remodelling of the left ventricle. In contrast, induction of neutrophil apoptosis by AT7519 (30mg/kg i.p.) successfully promoted macrophage polarisation and the resolution of inflammation associated with peritonitis elicited by either 10% thioglycollate or by 1mg zymosan. AT7519 treatment also reduced the number of CD19+ B cells, Foxp3+CD4+ T cells and eosinophils in peritoneal lavage, and prolonged the phase of monocyte recruitment in zymosan-induced peritonitis. In conclusion, AT7519 successfully induced mouse neutrophil apoptosis in vitro, as well as in vivo in experimental MI and peritonitis. Subsequent promotion of inflammation resolution in peritonitis was not matched by improved outcome following MI. Unexpected effects of CDK inhibition on monocytes, T cells and eosinophils that are necessary for myocardial infarct repair may have compromised any beneficial effects resulting from promotion of in situ neutrophil apoptosis. CDK inhibition may therefore have therapeutic potential for the treatment of peritonitis, but not for prevention of infarct expansion and detrimental ventricular remodelling after MI.
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