Depuis plusieurs années, la sénescence cellulaire a été majoritairement étudiée comme un processus causé par le vieillissement des cellules et un mécanisme pour limiter la propagation des cellules précancéreuses. Cette perspective a changé suite aux publications des groupes Serrano et Keyes, qui ont démontré la présence des cellules sénescentes très tôt durant le développement embryonnaire de la souris. Dernièrement, le laboratoire de Dr Roy a identifié le pronéphros, un organe transitoire qui est remplacé par le mésonéphros (homologue du rein chez les humains) à la maturité, les fascicules du nerf olfactif ainsi que les gencives comme des zones riches en cellules sénescentes durant le développement de l’axolotl. Ces évidences suggèrent que la sénescence est une réponse biologique survenant non seulement lors du vieillissement, mais est également une réponse physiologique pouvant être activée par différents signaux présents dans son environnement. À ce jour, bien que plusieurs chercheurs ciblent l’identification des points de contrôle de la sénescence cellulaire, on connaît peu de chose sur le rôle des cellules sénescentes durant le développement embryonnaire et la manière dont celui-ci pourrait influencer la croissance et la morphogenèse des organismes. Dans la présente étude, on cherche à identifier les gènes qui sont importants dans la sénescence développementale. Les résultats de séquençage d’ARN dans le pronéphros de l’axolotl ont démontré un enrichissement significatif du gène PEBP1, qui code pour une protéine surtout connue pour son rôle inhibiteur sur la kinase Raf. De plus, nos résultats semblent démontrer une diminution de l’activité bêta galactosidase dans le pronéphros de l’axolotl en développement lorsque celui-ci est traité à la Locostatin, un inhibiteur pharmacologique qui bloque l’interaction de PEBP1 avec RAF. Nous suggérons que PEBP1 pourrait être important pour soit l’activation ou le maintien du caractère sénescent dans les organes en développement de l’axolotl. Un phénomène qui semble être important pour conserver la fonctionnalité de l’organe en transition. / For several years, cellular senescence has been mainly studied as a process caused by the aging of cells and a mechanism to limit the propagation of precancerous cells. This perspective changed following the publications of Serrano and Keyes, who demonstrated the presence of senescent cells very early in the embryonic development of mice. Recently, the laboratory of Dr. Roy identified the pronephros, a transient organ which is replaced by the mesonephros (kidney counterpart in humans) at maturity, the olfactory nerve fascicles as well as the gums as areas rich in senescent cells during the development of axolotl. The evidence suggests that senescence is not only related to the aging process, but rather a physiological response which is activated by various signals present in its environment. To date, although several researchers are targeting the identification of control points for the activation of senescence, little is known about the role of senescent cells during embryonic development and how it could influence growth and morphogenesis. In the present study, we seek to identify the genes that are important in developmental senescence. The results of RNA sequencing in the axolotl pronephros have, among other things, demonstrated a significant enrichment of the PEBP1 gene which codes for a protein that acts as an inhibitor of the Raf kinase. Our findings support the idea that cellular senescence that occurs during the embryonic development of the axolotl is dependent on PEBP1 since the pharmacological inhibitor of PEBP1 (Locostatin), which blocks the interaction of PEBP1 with RAF, seems to affect the activity of senescent beta galactosidase. We suggest that PEBP1 is necessary for either the activation or the maintenance of senescence in the pronephros during embryogenesis. We further suggest that embryonic senescent is crucial for the morphogenesis of the developing organ perhaps by keeping the organ functional during the transition.

La sénescence cellulaire est typiquement étudiée dans le contexte du vieillissement, de la suppression de tumeurs ainsi que de la détérioration des fonctions cellulaires. Lorsqu’il y a une accumulation chronique de cellules sénescentes dû à un défaut avec leur élimination, il peut y avoir un effet pathologique avec le vieillissement de l’organisme. Cependant, deux études publiées par Storer et al. et par Muñoz-Espín et al. en 2013 suggèrent que la sénescence cellulaire joue également un rôle important lors du développement embryonnaire. Pour certains aspects du développement embryonnaire, la sénescence peut être avantageuse pour la morphogenèse étant donné que les cellules peuvent activement influencer la matrice extracellulaire par le phénotype sécrétoire associé à la sénescence (SASP) et elles sont éliminées plus lentement que des cellules apoptotiques. Parmi les gènes enrichis au niveau des pronéphros sénescents, le laboratoire Roy s’est intéressé au Raf kinase inhibitor protein (RKIP), qui fait partie de la voie des MAP kinases. Notre hypothèse est que RKIP est impliquée dans le contrôle de la senescence développementale et influence le développement des organes transitoires tels que les pronéphros et les fascicules olfactifs. Afin d’étudier son impact sur la morphogenèse de ces organes, des embryons d’axolotls ont été traités avec différentes doses d’un inhibiteur de RKIP, la locostatine, puis marqués à la β-galactosidase acidique associée à la sénescence cellulaire afin de quantifier son activité. Nos résultats semblent démontrer une diminution de cellules sénescentes comparée aux contrôles au DMSO au début du traitement. Ceci suggère que l’inhibition de RKIP empêche temporairement la régulation de la sénescence développementale dans les fascicules olfactifs et les pronéphros. De plus, un traitement à plus long terme de locostatine cause de l’oedème dans les embryons, ce qui peut être attribué à une dysfonction rénale. Nous supposons que RKIP joue un rôle dans l'orchestration des fonctions des fascicules olfactifs et des pronéphros au cours du développement de l'axolotl. / Typically, cellular senescence has been studied in the context of aging, tumor suppression as well as deterioration of cellular functions. When there is a chronic accumulation of senescent cells caused by a defect in their elimination, there may be a pathological effect as the organism ages. However, two studies published by Storer et al. and Muñoz-Espín et al. in 2013 suggest that senescence plays an equally important role during embryonic development. For certain aspects of embryonic development, senescence may be more advantageous for morphogenesis since senescent cells are able to actively influence the extracellular matrix through the senescenceassociated secretory phenotype (SASP) and are eliminated more slowly than apoptotic cells. Among the genes enriched in the senescent pronephros, the Roy laboratory is interested in the Raf Kinase Inhibitor Protein (RKIP), which is part of the MAP kinase pathway. Our hypothesis is that RKIP is implicated in the control of developmental senescence and influence the development of transitory organs such as the olfactory bulb fascicules and the pronephros. To study its impact on the morphogenesis of such organs, axolotl embryos were treated with different doses of a RKIP inhibitor, locostatin, and then stained by an acidic senescence-associated β-galactosidase assay to quantify its activity. Our results seem to indicate a decrease in senescent cells when compared to controls early in the treatment. This suggests that the inhibition of RKIP hinders the regulation of developmental senescence in the olfactory bulb fascicules. Additionally, long-term treatment with locostatin causes edema in embryos, which may be attributed to renal dysfunction. We suppose that RKIP plays a role in the orchestration of the functions of the olfactory bulb fascicules and the pronephros during axolotl development.