Made available in DSpace on 2014-06-12T23:00:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4197_1.pdf: 1349446 bytes, checksum: 58b9877a8f5fdc90b603c194538353bc (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Faculdade Intergrada do Recife / Foram avaliadas as repercussões tardias da desnutrição multicarencial no período de aleitamento e os possíveis efeitos e/ou alterações tanto do processo de envelhecimento como do treinamento aeróbio moderado (TAM) sobre o diâmetro luminal e a área da túnica média da parede das artérias carótida comum esquerda, aorta horizontal e aorta torácica de ratos em processo de envelhecimento. Vinte e quatro ratos machos, Wistar, foram separados de acordo com a dieta recebida e o TAM em: GNS Nutrido Sedentário, GNT Nutrido Treinado, GDS- Desnutrido Sedentário e GDT Desnutrido Treinado. Aos 10 meses de vida, o GNT e o GDT foram submetidos ao TA, em meio aquático, durante 8 semanas. Em seguida, os ratos foram anestesiados, sacrificados e, posteriormente, foram coletados fragmentos arteriais para o processamento histológico. A área da túnica média dos vasos arteriais foi mensurada através da diferença entre as áreas externas e internas da parede arterial e o diâmetro luminal foi mensurada a partir da média de 2 diâmetros medidos a partir de 4 pontos marcados na camada interna do vaso. A área da túnica média apresentou diminuição na aorta horizontal quando comparamos os grupos GNS (335566,83 ± 58149,13) x GDS (259487,72 ± 51742,44), [p = 0,015] e um aumento da artéria carótida comum esquerda entre os grupos GNT (36531,42 ± 4164,45) e GNS (23663,72 ± 3036,43) [p = <0,001]. A aorta torácica apresentou um aumento significativo do diâmetro luminal ao compararmos o GDS (798,98 ± 69,83) com o GDT (980,35 ± 154,62) [p = 0,041]. Tanto a desnutrição multicarencial induziu alterações parciais na parede aorta horizontal, como também o TA, foi capaz de promover mudanças na área da túnica média da artéria carótida comum esquerda e no diâmtro luminal da aorta tórácica

A hipertensão arterial é uma condição clínica grave acompanhada por alterações estruturais do aparelho cardiovascular. Os antagonistas dos receptores 1-adrenérgicos são drogas usadas na terapêutica anti-hipertensiva. O nebivolol é um antagonista seletivo dos receptores 1 de terceira geração, que estimula a liberação endotelial de NO e diminui a ativação da -nicotinamida adenosina dinucleotído fosfato (NAD(P)H) oxidase. O metoprolol é um antagonista seletivo dos receptores 1de segunda geração, que não apresenta efeitos vasodilatadores. As metaloproteinases da matriz (MMPs), principalmente a MMP-2, são enzimas que participam ativamente do processo de remodelamento vascular. Elas passam de seu estado latente para seu estado ativo pela ação de proteases e espécies reativas de oxigênio (EROs). Como na hipertensão há aumento de EROs, de MMPs e remodelamento vascular, é possível que o nebivolol impeça o aumento dos níveis de MMPs vasculares e o remodelamento vascular hipertrófico associados à hipertensão, além do seu efeito de antagonismo do receptor 1. Primeiro, realizamos uma avaliação das alterações aórticas da hipertensão 2-rins,1-clipe (2R-1C), pois há poucas informações sobre essas alterações durante o desenvolvimento da hipertensão. Para isso, ratos hipertensos e controles foram estudados com 2, 4, 6 e 10 semanas após a indução da hipertensão. A pressão arterial sistólica foi monitorada semanalmente. As alterações na parede aórtica foram estudadas em hematoxilina/eosina (H&E), picrosirius e orceína. Foram avaliados também a atividade da NAD(P)H oxidase, a produção de ânion superóxido, a atividade gelatinolítica por zimografia in situ; os níveis e localização de MMP-2, MMP-14 e TIMP-2 por imunofluorescência zimografia e imunohistoquímica. No segundo protocolo, após 6 semanas de hipertensão foi iniciado o tratamento com metoprolol (Meto -20/mg/kg/dia) ou nebivolol (Nebi -10mg/kg/dia), realizado durante 4 semanas. Foram avaliados a pressão arterial sistólica, as alterações na parede aórtica por H&E, a atividade da NAD(P)H oxidase, produção de ânion superóxido, a atividade gelatinolítica, os níveis e localização de MMP-2 por imunofluorescência e zimografia em gel, e os níveis de nitrotirosina por imunohistoquímica. Observamos no protocolo temporal que a pressão foi gradualmente aumentada nos animais hipertensos quando comparado aos controles. Houve hiperplasia e hipertrofia da aorta, com aumento da deposição de colágeno e elastina. Observamos aumento nos níveis de estresse oxidativo, MMPs e atividade gelatinolítica em todas as semanas de estudo. Ao final do tratamento com metoprolol e nebivolol, observamos que a pressão diminuiu nos animais hipertensos, e que essa redução da pressão ocorreu de modo semelhante com os diferentes tratamentos. Os animais hipertensos apresentaram hipertrofia da aorta, aumento nos níveis de EROs, de MMP-2 e da atividade gelatinolítica. Essas alterações foram revertidas apenas pelo tratamento com nebivolol, mas não pelo metoprolol. Assim, o remodelamento da hipertensão 2R-1C parece estar estabelecido com duas semanas de hipertensão arterial, com elevados níveis de espécies reativas de oxigênio e MMPs, e o tratamento com nebivolol, mas não o metoprolol, atenuou o estresse oxidativo e o remodelamento vascular associado à hipertensão. / Hypertension is a serious clinical condition with structural changes in the cardiovascular system. Beta-adrenoreceptor antagonists are used in hypertension therapy. Nebivolol is a third-generation selective 1-adrenoreceptor antagonist that stimulates endothelial cell NO production and prevents vascular NAD(P)H oxidase activation. Metoprolol is a second-generation selective 1-adrenoreceptor antagonist, without vasodilatory effect. The matrix metalloproteinases (MMPs), especially MMP-2, participate actively in the vascular remodeling process, and are activated by reactive oxygen species (ROS). There are increases in ROS, of MMPs, and vascular remodeling in hypertension. Because of these, it´s possible that nebivolol prevent MMP increases and vascular remodeling associated with hypertension beyond its 1-receptorblocking properties. First, structural aortic changes in the development of two-kidney, one-clip hypertension (2K-1C) were evaluated. Sham or 2K1C hypertensive rats were studied after 2, 4, 6, and 10 weeks of hypertension. Systolic blood pressure (SBP) was monitored weekly. Morphometry of structural changes in the aortic wall was studied in hematoxylin/eosin, orcein and picrosirius red sections. Aortic NAD(P)H activity and superoxide production was evaluated. Aortic gelatinolytic activity was determined by in situ zymography, and MMP-2, MMP-14, and tissue inhibitor of MMPs (TIMP)-2 levels were determined by gelatin zymography, immunofluorescence and immunohistochemistry. Six weeks after surgery, hypertensive and sham rats were treated with metoprolol (20 mg/kg/ day) or nebivolol (10 mg/kg/day), for four weeks, in the second-protocol. Systolic blood pressure (SBP) was monitored weekly Aortic structural were studied in hematoxylin/eosin sections. NAD(P)H oxidase activity and ROS and nitrotyrosine production were evaluated. MMPs levels and activity were determined by zymography and in situ zymography. In the temporal study, 2K-1C hypertension was associated with increased aortic collagen and elastin content in the early phase of hypertension, which was associated with vascular hypertrophy, increased vascular MMPs levels, and increased gelatinolytic activity, possibly as a result of increased vascular NAD(P)H oxidase activity and oxidative stress. In the second-protocol, similar reductions in SBP were found with both metoprolol and nebivolol treatments. However, only Nebi reversed aortic hypertrophy, the increases in aortic NAD(P)H oxidase activity, in aortic ROS levels, in nitrotyrosine staining, in aortic MMP-2 levels and in aortic MMP activity. These results indicate that vascular remodeling of renovascular hypertension is an early process associated with increases in MMPs activities, enhanced matrix deposition and oxidative stress, and that treatment with Nebi attenuate the oxidative stress and the vascular remodeling associated with 2K-1C hypertension.

A matriz extracelular do endométrio (ECM) é constituída por moléculas secretadas que compõem o microambiente celular e são ativadas ou suprimidas principalmente pelos hormônios esteróides ovarianos, estradiol (E2) e progesterona (P4) durante o ciclo estral. A identificação de genes envolvidos no remodelamento e receptividade pode levar à descoberta de importantes processos biológicos ligados ao sucesso gestacional. Os objetivos foram: 1. identificar a relação de diferentes tamanhos de folículos pré-ovulatórios (FPO) e corpo lúteo (CL) e de seus respectivos hormônios E2 e P4 com a expressão endometrial de genes associados com o remodelamento da ECM durante o período de pré-implantação; e 2. analisar a relação entre a expressão gênica de determinados componentes da ECM avaliada no dia 6 após inseminação artificial (IA) com sucesso gestacional. Para tal, dois experimentos foram realizados. No experimento 1, estudo 1 e estudo 2, 42 e 74 vacas Nelore (Bos indicus) adultas, respectivamente foram sincronizadas obtendo-se ao final dois grupos com distintos tamanhos FPO e CL consequentemente, distintas concentrações de E2 no proestro e P4 no diestro. Os grupos foram: Folículo Grande-CL Grande (FG-CLG; estudo 1, n=20; estudo 2, n=35) e Folículo Pequeno-CL Pequeno (FP-CLP; estudo 1, n=22; estudo 2, n=39). Amostras de tecido endometrial foram coletadas por biópsia no D0 (estro) e pós-mortem no D4 (estudo 1) e D7 (estudo 2). Concentrações de E2 e P4 foram mensuradas por radioimunoensaio (RIA) obtendo- se menores concentrações no grupo FP-CLP. No experimento 2, vacas adultas, Nelore (Bos indicus; n=33) foram sincronizadas utilizando um protocolo a base de prostaglandina F 2&#945; (PGF2&#945;) e observação de estro. As vacas foram inseminadas artificialmente (IA) e seis dias após, uma biópsia endometrial coletada. O diagnóstico de gestação foi realizado após 30 dias por meio de ultrasonografia (US) e então as vacas foram divididas em grupo Prenhe e Não- Prenhe (P e NP) para análise retrospectiva. Abundância de transcritos foi avaliada por sequenciamento (RNAseq) assim como qPCR em amostras de ambos experimentos. Realizaram-se também exames histológicos em amostras do D4 e D7 (estudo 2) para avaliação de colágeno total assim como espessura de fibras colágenas. Resultados determinaram uma maior abundância de transcritos relacionados ao remodelamento de MEC, em destaque TGF&#946;, MMPs, TIMPs e colágenos em vacas pertencentes aos grupos NP e FP-CLP. O mesmo foi observado para abundância de colágeno. No entanto, não observou-se diferença na relação entre fibras grossas e finas entre os tratamentos. Análises de correlação e regressão indicaram que folículos pré-ovulatórios de maior tamanho geram CL maiores e assim maiores concentrações de P4, a qual está negativamente associada à abundância de colágenos. Assim, de acordo com resultados aqui descritos, assume-se que a alteração da homeostase da MEC devido ao incremento na abundância de colágeno pode ser prejudicial à gestação em bovinos. / The endometrial extracellular matrix (ECM) é build up of secretory molecules that make up the cellular microenvironment and suffer activation or suppression mainly by the ovarian steroid hormones, estradiol (E2) and progesterone (P4) during the estrous cycle. The identification of genes involved in endometrial remodeling and receptivity may reveal important biological processes linked to gestational success. The objectives were: 1. identify the relationship among preovulatory follicle (POF) size and corpus luteum (CL) and its respective hormones, E2 and P4 on the endometrial expression of genes related to extracellular matrix remodeling during the pre-implantation period; and 2. analyze the relationship between endometrial ECM gene expression evaluated on day 6 post artificial insemination (AI) with pregnancy outcome. For such, two experiments were carried on. On experiment 1, study 1 and study 2, 42 and 74, respectively, adult Nelore (Bos indicus) cows were synchronized aiming to manipulate the peri-ovulatory endocrine environment, obtaining at the end of the protocol, two groups with distinct pre-ovulatory follicle (POF) and corpus luteum (CL) sizes, leading to groups with distinct E2 and P4 concentrations. The groups were: Large Follicle/CL (LF/CL; study 1, n=20, study 2, n=35) and Small Follicle/Cl (SF/CL; study 1, n=22; study 2, n=39). Endometrial samples were collected by biopsy on D0 (Estrus) and post-mortem on D4 and on study 2 post-mortem on D7. P4 and E2 concentrations were measured by RIA with a significative difference between the groups, being lower hormonal concentrations in the SF- SCL group and higher concentrations in the LF-LCL group . In experiment 2, adult Nelore (Bos indicus) cows (n=33) were synchronized using a prostaglandin 2&#945; (PGF2&#945;) and heat detection based protocol. The cows were AI and six days after an endometrial biopsy was collected. Pregnancy diagnosis was performed on day 30 by ultrasound (US) examination and cows were divided into pregnant and non-pregnant (P vs. NP) groups for a retrospective analysis. Histology was performed on D4 and D7 samples for total collagen abundance as well as fiber thickness. Correlation and regression analysis indicate that larger preovulatory follicles as well as higher P4 concentrations have a negative effect on collagen content. RNA- Seq analysis and confirmation by qPRC was performed on selected samples from experiment 1, study 2 and experiment 2. Comparison of mRNA levels of ECM components samples revealed higher levels of transcripts envolved in ECM remodeling, highlighting TGF&#946; MMPs, TIMPs and collagens in NP cows when compared with P cows as well as in the SF- SCL compared to the LF-LCL group. The same was observed for collagen abundance. However, there was no difference between thin and thick collagen fibers between treatments. Correlation and regression analysis indicate that larger POF lead to larger CL and hence, higher P4 concentrations, which has a negative effects on collagen abundance. Therefore, according to the results presented here, we can imply that an alteration in ECM homeostasis due to increased collagen abundance may be harmful to pregnancy in cows.

A administração crônica de ouabaína (OUA) induz hipertensão arterial (HA) em ratos, alterações funcionais e remodelamento em artérias mesentéricas de resistência (AMR). A literatura sugere que a resposta pressórica da OUA pode ser bloqueada pelo antagonismo do receptor AT1 e pela inibição COX-2. No entanto, não se conhece a participação dessas vias no remodelamento arterial nesse modelo de HA. O presente estudo teve como objetivo investigar o papel do sistema renina-angiotensina (SRA) e da COX no remodelamento das AMR induzido pela OUA. Em AMR de ratos OUA, o SRA e a COX-2 participam da resposta pressórica, do remodelamento hipotrófico para dentro e da rigidez. Esses ajustes estão associados ao stress oxidativo e a deposição de colágeno na parede vascular estimulados pela capacidade da OUA em promover a ativação do receptor AT1 e da COX-2. / The chronic administration of ouabain (OUA) induces hypertension in rats, functional and structural alterations in mesenteric resistance arteries (MRA). It is well known that OUA-induced hypertension is blocked by AT1 receptor antagonism and the COX-2 inhibition. However, the participation of these pathways in MRA remodeling in this model of hypertension remains unknown. This study aimed to investigate the role of the renin angiotensin system (RAS) and COX pathways on MRA remodeling induced by OUA. In AMR from OUA rats, RAS and COX-2 participate in the pressor response, the inward hypotrophic remodeling and stiffness. These adjustments are the result of oxidative stressand increasing collagen deposition in the vascular wall stimulated by the OUA ability to stimulate the activation of AT1 receptor and COX-2.

A matriz extracelular do endométrio (ECM) é constituída por moléculas secretadas que compõem o microambiente celular e são ativadas ou suprimidas principalmente pelos hormônios esteróides ovarianos, estradiol (E2) e progesterona (P4) durante o ciclo estral. A identificação de genes envolvidos no remodelamento e receptividade pode levar à descoberta de importantes processos biológicos ligados ao sucesso gestacional. Os objetivos foram: 1. identificar a relação de diferentes tamanhos de folículos pré-ovulatórios (FPO) e corpo lúteo (CL) e de seus respectivos hormônios E2 e P4 com a expressão endometrial de genes associados com o remodelamento da ECM durante o período de pré-implantação; e 2. analisar a relação entre a expressão gênica de determinados componentes da ECM avaliada no dia 6 após inseminação artificial (IA) com sucesso gestacional. Para tal, dois experimentos foram realizados. No experimento 1, estudo 1 e estudo 2, 42 e 74 vacas Nelore (Bos indicus) adultas, respectivamente foram sincronizadas obtendo-se ao final dois grupos com distintos tamanhos FPO e CL consequentemente, distintas concentrações de E2 no proestro e P4 no diestro. Os grupos foram: Folículo Grande-CL Grande (FG-CLG; estudo 1, n=20; estudo 2, n=35) e Folículo Pequeno-CL Pequeno (FP-CLP; estudo 1, n=22; estudo 2, n=39). Amostras de tecido endometrial foram coletadas por biópsia no D0 (estro) e pós-mortem no D4 (estudo 1) e D7 (estudo 2). Concentrações de E2 e P4 foram mensuradas por radioimunoensaio (RIA) obtendo- se menores concentrações no grupo FP-CLP. No experimento 2, vacas adultas, Nelore (Bos indicus; n=33) foram sincronizadas utilizando um protocolo a base de prostaglandina F 2&#945; (PGF2&#945;) e observação de estro. As vacas foram inseminadas artificialmente (IA) e seis dias após, uma biópsia endometrial coletada. O diagnóstico de gestação foi realizado após 30 dias por meio de ultrasonografia (US) e então as vacas foram divididas em grupo Prenhe e Não- Prenhe (P e NP) para análise retrospectiva. Abundância de transcritos foi avaliada por sequenciamento (RNAseq) assim como qPCR em amostras de ambos experimentos. Realizaram-se também exames histológicos em amostras do D4 e D7 (estudo 2) para avaliação de colágeno total assim como espessura de fibras colágenas. Resultados determinaram uma maior abundância de transcritos relacionados ao remodelamento de MEC, em destaque TGF&#946;, MMPs, TIMPs e colágenos em vacas pertencentes aos grupos NP e FP-CLP. O mesmo foi observado para abundância de colágeno. No entanto, não observou-se diferença na relação entre fibras grossas e finas entre os tratamentos. Análises de correlação e regressão indicaram que folículos pré-ovulatórios de maior tamanho geram CL maiores e assim maiores concentrações de P4, a qual está negativamente associada à abundância de colágenos. Assim, de acordo com resultados aqui descritos, assume-se que a alteração da homeostase da MEC devido ao incremento na abundância de colágeno pode ser prejudicial à gestação em bovinos. / The endometrial extracellular matrix (ECM) é build up of secretory molecules that make up the cellular microenvironment and suffer activation or suppression mainly by the ovarian steroid hormones, estradiol (E2) and progesterone (P4) during the estrous cycle. The identification of genes involved in endometrial remodeling and receptivity may reveal important biological processes linked to gestational success. The objectives were: 1. identify the relationship among preovulatory follicle (POF) size and corpus luteum (CL) and its respective hormones, E2 and P4 on the endometrial expression of genes related to extracellular matrix remodeling during the pre-implantation period; and 2. analyze the relationship between endometrial ECM gene expression evaluated on day 6 post artificial insemination (AI) with pregnancy outcome. For such, two experiments were carried on. On experiment 1, study 1 and study 2, 42 and 74, respectively, adult Nelore (Bos indicus) cows were synchronized aiming to manipulate the peri-ovulatory endocrine environment, obtaining at the end of the protocol, two groups with distinct pre-ovulatory follicle (POF) and corpus luteum (CL) sizes, leading to groups with distinct E2 and P4 concentrations. The groups were: Large Follicle/CL (LF/CL; study 1, n=20, study 2, n=35) and Small Follicle/Cl (SF/CL; study 1, n=22; study 2, n=39). Endometrial samples were collected by biopsy on D0 (Estrus) and post-mortem on D4 and on study 2 post-mortem on D7. P4 and E2 concentrations were measured by RIA with a significative difference between the groups, being lower hormonal concentrations in the SF- SCL group and higher concentrations in the LF-LCL group . In experiment 2, adult Nelore (Bos indicus) cows (n=33) were synchronized using a prostaglandin 2&#945; (PGF2&#945;) and heat detection based protocol. The cows were AI and six days after an endometrial biopsy was collected. Pregnancy diagnosis was performed on day 30 by ultrasound (US) examination and cows were divided into pregnant and non-pregnant (P vs. NP) groups for a retrospective analysis. Histology was performed on D4 and D7 samples for total collagen abundance as well as fiber thickness. Correlation and regression analysis indicate that larger preovulatory follicles as well as higher P4 concentrations have a negative effect on collagen content. RNA- Seq analysis and confirmation by qPRC was performed on selected samples from experiment 1, study 2 and experiment 2. Comparison of mRNA levels of ECM components samples revealed higher levels of transcripts envolved in ECM remodeling, highlighting TGF&#946; MMPs, TIMPs and collagens in NP cows when compared with P cows as well as in the SF- SCL compared to the LF-LCL group. The same was observed for collagen abundance. However, there was no difference between thin and thick collagen fibers between treatments. Correlation and regression analysis indicate that larger POF lead to larger CL and hence, higher P4 concentrations, which has a negative effects on collagen abundance. Therefore, according to the results presented here, we can imply that an alteration in ECM homeostasis due to increased collagen abundance may be harmful to pregnancy in cows.

A hipertensão arterial é uma condição clínica grave acompanhada por alterações estruturais do aparelho cardiovascular. Os antagonistas dos receptores 1-adrenérgicos são drogas usadas na terapêutica anti-hipertensiva. O nebivolol é um antagonista seletivo dos receptores 1 de terceira geração, que estimula a liberação endotelial de NO e diminui a ativação da -nicotinamida adenosina dinucleotído fosfato (NAD(P)H) oxidase. O metoprolol é um antagonista seletivo dos receptores 1de segunda geração, que não apresenta efeitos vasodilatadores. As metaloproteinases da matriz (MMPs), principalmente a MMP-2, são enzimas que participam ativamente do processo de remodelamento vascular. Elas passam de seu estado latente para seu estado ativo pela ação de proteases e espécies reativas de oxigênio (EROs). Como na hipertensão há aumento de EROs, de MMPs e remodelamento vascular, é possível que o nebivolol impeça o aumento dos níveis de MMPs vasculares e o remodelamento vascular hipertrófico associados à hipertensão, além do seu efeito de antagonismo do receptor 1. Primeiro, realizamos uma avaliação das alterações aórticas da hipertensão 2-rins,1-clipe (2R-1C), pois há poucas informações sobre essas alterações durante o desenvolvimento da hipertensão. Para isso, ratos hipertensos e controles foram estudados com 2, 4, 6 e 10 semanas após a indução da hipertensão. A pressão arterial sistólica foi monitorada semanalmente. As alterações na parede aórtica foram estudadas em hematoxilina/eosina (H&E), picrosirius e orceína. Foram avaliados também a atividade da NAD(P)H oxidase, a produção de ânion superóxido, a atividade gelatinolítica por zimografia in situ; os níveis e localização de MMP-2, MMP-14 e TIMP-2 por imunofluorescência zimografia e imunohistoquímica. No segundo protocolo, após 6 semanas de hipertensão foi iniciado o tratamento com metoprolol (Meto -20/mg/kg/dia) ou nebivolol (Nebi -10mg/kg/dia), realizado durante 4 semanas. Foram avaliados a pressão arterial sistólica, as alterações na parede aórtica por H&E, a atividade da NAD(P)H oxidase, produção de ânion superóxido, a atividade gelatinolítica, os níveis e localização de MMP-2 por imunofluorescência e zimografia em gel, e os níveis de nitrotirosina por imunohistoquímica. Observamos no protocolo temporal que a pressão foi gradualmente aumentada nos animais hipertensos quando comparado aos controles. Houve hiperplasia e hipertrofia da aorta, com aumento da deposição de colágeno e elastina. Observamos aumento nos níveis de estresse oxidativo, MMPs e atividade gelatinolítica em todas as semanas de estudo. Ao final do tratamento com metoprolol e nebivolol, observamos que a pressão diminuiu nos animais hipertensos, e que essa redução da pressão ocorreu de modo semelhante com os diferentes tratamentos. Os animais hipertensos apresentaram hipertrofia da aorta, aumento nos níveis de EROs, de MMP-2 e da atividade gelatinolítica. Essas alterações foram revertidas apenas pelo tratamento com nebivolol, mas não pelo metoprolol. Assim, o remodelamento da hipertensão 2R-1C parece estar estabelecido com duas semanas de hipertensão arterial, com elevados níveis de espécies reativas de oxigênio e MMPs, e o tratamento com nebivolol, mas não o metoprolol, atenuou o estresse oxidativo e o remodelamento vascular associado à hipertensão. / Hypertension is a serious clinical condition with structural changes in the cardiovascular system. Beta-adrenoreceptor antagonists are used in hypertension therapy. Nebivolol is a third-generation selective 1-adrenoreceptor antagonist that stimulates endothelial cell NO production and prevents vascular NAD(P)H oxidase activation. Metoprolol is a second-generation selective 1-adrenoreceptor antagonist, without vasodilatory effect. The matrix metalloproteinases (MMPs), especially MMP-2, participate actively in the vascular remodeling process, and are activated by reactive oxygen species (ROS). There are increases in ROS, of MMPs, and vascular remodeling in hypertension. Because of these, it´s possible that nebivolol prevent MMP increases and vascular remodeling associated with hypertension beyond its 1-receptorblocking properties. First, structural aortic changes in the development of two-kidney, one-clip hypertension (2K-1C) were evaluated. Sham or 2K1C hypertensive rats were studied after 2, 4, 6, and 10 weeks of hypertension. Systolic blood pressure (SBP) was monitored weekly. Morphometry of structural changes in the aortic wall was studied in hematoxylin/eosin, orcein and picrosirius red sections. Aortic NAD(P)H activity and superoxide production was evaluated. Aortic gelatinolytic activity was determined by in situ zymography, and MMP-2, MMP-14, and tissue inhibitor of MMPs (TIMP)-2 levels were determined by gelatin zymography, immunofluorescence and immunohistochemistry. Six weeks after surgery, hypertensive and sham rats were treated with metoprolol (20 mg/kg/ day) or nebivolol (10 mg/kg/day), for four weeks, in the second-protocol. Systolic blood pressure (SBP) was monitored weekly Aortic structural were studied in hematoxylin/eosin sections. NAD(P)H oxidase activity and ROS and nitrotyrosine production were evaluated. MMPs levels and activity were determined by zymography and in situ zymography. In the temporal study, 2K-1C hypertension was associated with increased aortic collagen and elastin content in the early phase of hypertension, which was associated with vascular hypertrophy, increased vascular MMPs levels, and increased gelatinolytic activity, possibly as a result of increased vascular NAD(P)H oxidase activity and oxidative stress. In the second-protocol, similar reductions in SBP were found with both metoprolol and nebivolol treatments. However, only Nebi reversed aortic hypertrophy, the increases in aortic NAD(P)H oxidase activity, in aortic ROS levels, in nitrotyrosine staining, in aortic MMP-2 levels and in aortic MMP activity. These results indicate that vascular remodeling of renovascular hypertension is an early process associated with increases in MMPs activities, enhanced matrix deposition and oxidative stress, and that treatment with Nebi attenuate the oxidative stress and the vascular remodeling associated with 2K-1C hypertension.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-04-02T13:33:04Z No. of bitstreams: 1 Delsilene Borges. Avaliação...2013.pdf: 2874154 bytes, checksum: 062e7af1c2af767178820b1b4d1d1bc7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-02T13:33:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Delsilene Borges. Avaliação...2013.pdf: 2874154 bytes, checksum: 062e7af1c2af767178820b1b4d1d1bc7 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Na esquistossomose mansônica o fígado é o órgão alvo das agressões patogênicas, onde as lesões hepáticas caracterizam-se principalmente pela presença de granulomas periovulares e formação de fibrose periportal, além de alterações vasculares responsáveis pela hipertensão dentro do sistema venoso portal. A angiogênese precede a maioria dos casos de fibrose, onde se verifica participação direta das células estreladas hepáticas (CEH) e das células endoteliais sinusoidais (CES) que são estimuladas, principalmente por macrófagos do tipo II (M2) – ativados alternativamente. O tratamento para esquistossomose é feito pelo uso do praziquantel (PZQ), o qual é capaz de promover cura parasitológica e reparo das lesões hepáticas, todavia pouco se sabe sobre os componentes celulares envolvidos na angiogênese durante o reparo do fígado. Este trabalho teve como objetivo estudar o remodelamento das lesões hepáticas pós-tratamento e investigar a participação das CEH, CES e macrófagos M2 no processo de reparo das lesões. Após aprovação pela Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA-CPqGM), protocolo nº 006/2011, 80 camundongos Swiss Webstar foram utilizados, destes 70 foram infectados com 50 cercárias do Schistossoma mansoni e dez permaneceram intactos. Quatro meses após infecção foi realizado tratamento com PZQ (400mg/Kg) em parte dos animais infectados, formando assim três grupos: um controle, um infectado não tratado e outro infectado e tratado. Em diferentes intervalos de tempo foram realizadas três hepatectomias parciais: a primeira com quatro meses de infecção (antes do tratamento); a segunda com seis meses de infecção e dois meses de tratamento; a terceira com oito meses de infecção e quatro de tratamento. Os fragmentos hepáticos coletados foram submetidos a avaliações morfológicas e estudos imuno-histoquímicos para visualização de componentes celulares – macrófagos M2 (Ym1), CEH (α-SMA) e CES (CD31). Análises morfométricas foram realizadas para quantificação do percentual de tecido fibroso e das células imunomarcadas. Nossos resultados demonstraram que após dois meses de tratamento com PZQ foi possível observar reabsorção do tecido fibroso hepático com redução da expressão de macrófagos M2 e CEH. Quatro meses após a quimioterapia verifica-se aumento no número de células endoteliais. Esses resultados sugerem que macrófagos M2 e CEH têm participação ativa na formação do tecido fibroso, exercendo pouca influência na fase involutiva do granuloma. Todavia, a intensa proliferação de CES nos granulomas involutivos, confirma o importante papel da angiogênese no remodelamento das lesões hepáticas. / The liver is a target for pathogenic attacks during schistosomiasis, showing periovular granulomas and the formation of periportal fibrosis, besides vascular changes responsible for hypertension within portal venous system. Angiogenesis precedes most cases of fibrosis, which can be verified the presence of hepatic stellate cells (HSC) and liver sinusoidal endothelial cells (LSEC) stimulated mostly by macrophages type II (M2) – alternatively activated. Schistosomiasis treatment is based on praziquantel (PZQ), which enables parasitological cure and resolution of liver cells. However, knowledge regarding active cell components on angiogenesis during liver regeneration is scarce. Our goal was to study the remodeling of liver injuries during post-treatment phase and investigate the role of HSC, LSEC and macrophages (M2) on the process of resolution of injuries. After the approval of ethical committee for animal research of the CPQGM-FIOCRUZ, record number 006/2011, 80 mice Swiss Webstar were used, which 70 were infected by 50 cercariae of Schistossoma mansoni and ten remained intact. Four months after infection a treatment with PZQ (400mg/Kg) was started in part of infected animals, constituting three different groups: normal, non-treated infected and treated and infected. In different times three partial hepatectomias were made: the first on four months of infection (before treatment); the second with six months of infection and two months of treatment; and the third with eight months of infection and four months of treatment. In all liver fragments collected for morphological evaluations were performed and immunohistochemistry studies were made to visualize macrophages M2 (Yml), HSC (α-SMA) and LSEC (CD31). Morphometric analysis was performed to quantify percentage of fibrosis and the immunostainig cells. Our results show that after two months of PQZ treatment it is possible to observe fibrosis resorption in the liver, with reduction of macrophages M2 expression and HSC. Four months after chemotherapy an increase on the number of LSEC was verified. These results suggest that macrophages M2 and HSC are active on the formation of fibrosis tissue, playing little influence on the evolving phase of the granuloma. Nevertheless, intense proliferation of LSEC observed on involute granulomas confirm the important role for angiogenesis on remodeling of liver injuries.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-04-18T18:23:28Z No. of bitstreams: 1 Jamile Gomes Conceição Caracterizaçao clinico...pdf: 1293623 bytes, checksum: 81e290f73ff54554a4e039099727ca5b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-18T18:23:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jamile Gomes Conceição Caracterizaçao clinico...pdf: 1293623 bytes, checksum: 81e290f73ff54554a4e039099727ca5b (MD5) Previous issue date: 2012 / Universidade Federal da Bahia. Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz / Mucoceles são lesões comuns da cavidade oral, causadas por alterações nos ductos excretórios de glândulas salivares menores. A fim de contribuir para um melhor conhecimento do perfil biológico destas lesões, este trabalho teve como objetivo estudar os aspectos clínico-patológicos em uma amostra de mucoceles da boca, bem como componentes celulares como vasos sanguíneos (anti-CD34), mastócitos (triptase de célula mastocitária), macrófagos (anti-CD68) e da matriz extracelular (metaloproteinase de matriz -1 e -9), por meio da técnica imuno-histoquímica. Foram estudados 100 casos de mucocele de extravasamento, o seu conteúdo de fibrose (picrossirius) e 32 casos investigados para as proteínas propostas, adotando-se critérios morfométricos e semiquantitativos. As lesões de mucocele atingiram mais o lábio inferior e a segunda e terceira décadas de vida, com média de 23.2 anos de idade (DP±12,24), sendo os homens mais acometidos pela lesão (56%). O tamanho médio foi de 1,1 cm (DP±0,57). Os vasos sanguíneos CD34 positivos estavam presentes em todos os espécimes (média de 55 microvasos por mm2; DP±0,36), mas a medida que se aproximavam do lúmen cístico pareciam desaparecer. Os mastócitos estavam presentes em todos os casos (média= 7.4; DP±0,12), mais concentrados na região cápsula em torno do tecido de granulação, reduzindo-se neste último. Os macrófagos estavam presentes no tecido de granulação (média= 88; DP±0,52), também em todos os casos, mas especialmente concentrados na superfície luminal e dentro da cavidade cística, sugerindo um importante papel na fagocitose de muco. MMPs apresentaram marcação variável presentes em fibroblastos, células inflamatórias e matriz extracelular, sendo MMP-1 ausente em um caso e a MMP-9 em dois. A fibrose também mostrou-se variável entre os casos. Apesar de existir associação estatística ente macrófagos e MMP1 (p<0.05, Kruskal Wallis), diferença significativa entre os diferentes marcadores não foi encontrada (p> 0.05, Kruskal Wallis). Este estudo contribuiu para o conhecimento dos mucoceles da boca em uma amostra representativa da população da Bahia, destacando que a dinâmica de desenvolvimento de formação dessas lesões envolve migração e interação chaves entre componentes celulares e da matriz extracelular importantes para o remodelamento tecidual dos mucoceles. / Mucoceles are common lesions of the oral cavity, caused by damage to the excretory ducts of salivary glands. The present study investigated a sample of oral mucoceles in our population, to describe their clinical and histopathological features, and to assess cell components such as blood vessels, mast cells, macrophages, and matrix metalloproteinases (MMPs – 1 and -9), using immunohistochemistry, for a better understanding of biological profile of this lesion. Histochemistry using Picrossirius red staining was also included. The sample consisted of 100 oral mucoceles, 32 of which were included for investigating both cell components and MMPs, adopting morphometrical and semi-quantitative criteria. The lesions were located most often on the lower lip and second and third decades of life, with a mean of 23.2 years (SD±12,24). Males had a higher frequency (56%) and mean size of the lesions was 1.1cm ((DP±0,57). CD34-positive blood vessels were present in all specimens (mean, 55 microvessels per mm2), but as they approached the cystic lumen seemed to disappear. Mast cells were present in all cases (mean= 7.4; SD±0,12) and concentrated in the capsule surrounding the granulation tissue, although they were reduced in the latter. The macrophages were present in the granulation tissue (mean=88; SD±0.52), also in all cases, but they were especially concentrated on the luminal surface and within the cystic cavity, indicating a pivotal role in phagocytosis of mucus. MMPs showed variable immunostaining and were found in fibroblast and inflammatory cells, however, they were absent in one case of MMP1 and two cases of MMP9. Fibrosis was also variable in all of specimens. Although there was a statistical association between macrophages and MMP1 (P<0.05, Kruskal Wallis), significant difference between the different markers was not found (P<0.05, Kruskal Wallis). This study provides an important insight to the knowledge of oral mucoceles from a sample from Salvador, Bahia, Brazil. Furthermore, it highlights that the development dynamic of these lesions involves migration and interaction of key cellular and extracellular matrix components which are essential to the tissue remodeling of oral mucoceles.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T18:34:09Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Tainá Maria de Souza Vidal.pdf: 2193739 bytes, checksum: 143e8441cb5e7fc44d37a840fe39a34d (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T18:34:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Tainá Maria de Souza Vidal.pdf: 2193739 bytes, checksum: 143e8441cb5e7fc44d37a840fe39a34d (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-09-01 / CAPES / Contexto: Com a progressão da Insuficiência Cardíaca (IC), o agravamento da disfunção ventricular, associada à presença de hipertrofia do músculo cardíaco e à deterioração da capacidade cardiopulmonar, mesmo durante a realização de pequenos esforços podem levar a episódios de dispneia intensa e fadiga muscular precoce. Objetivo: Correlacionar a distribuição dos volumes no compartimento tóraco-abdominal com a capacidade cardiopulmonar de indivíduos com IC em diferentes graus de disfunção e remodelamento ventricular esquerdo. Métodos: Trata-se de um estudo de corte transversal envolvendo 32 pacientes provenientes de instituição de referência no atendimento cardiológico pelo Sistema Único de Saúde em Pernambuco que foram alocados em três grupos de acordo com o grau de disfunção sistólica. O estudo foi desenvolvido no Laboratório de Fisiologia Fisioterapia Cardiopulmonar da Universidade Federal de Pernambuco, onde foi realizado o teste de esforço cardiopulmonar (TECP) e a pletismografia ópticoeletrônica (POE). Resultados: A porcentagem do consumo de oxigênio máximo (VO2%máx) apresentou diferença significativa (p-valor = 0,021) quando os três grupos foram comparados, sendo o grupo 3 o que apresentou menor valor No grupo 1 foram observadas fortes correlações positivas entre volume corrente (VC) e equivalente ventilatório de dióxido de carbono (VE/VCO2) (r = 0,762) e no grupo 3 do diâmetro diastólico e da massa do ventrículo esquerdo indexados pela superfície corpórea (DDVE/SC e MaVE/SC) com o volume corrente abdominal (VCab) (r = -0,586), do VC com o consumo máximo de oxigênio (VO2máx) (r = 0,582), do volume corrente da caixa torácica abdominal e sua contribuição (VCcta e VCcta%) com VO2máx (r = 0,682; r = 0,539 respectivamente) e com Pulso de O2 (r = 0,557; r = 0,586 respectivamente). Conclusões: A disfunção ventricular parece contribuir para um maior remodelamento cardíaco, o que pode comprometer a cinemática da caixa tóraco-abdominal, além de apresentar correlação do volume corrente e sua distribuição nos compartimentos da caixa torácica com variáveis funcionais. Tal perspectiva aprimora o olhar clínico do profissional, aumentando a atenção e melhorando a conduta terapêutica e o prognóstico do paciente com IC.

A doença venosa crônica (DVC) é uma desordem complexa que compreende sinais e sintomas que variam das telangiectasias às úlceras ativas. A DVC é classificada de acordo com aspectos clínicos, etiológicos, anatômicos e fisiopatológicos (CEAP) em sete classes variando de C0 à C6. A principal causa da DVC é a hipertensão venosa que altera o fluxo venoso e, consequentemente, a força de cisalhamento que induz alterações fenotípicas nas células endoteliais que passam a expressar mediadores pró-inflamatórios e pró-trombóticos, que levam à adesão de leucócitos, ao aumento do estresse oxidativo, da permeabilidade vascular e do dano endotelial e ao remodelamento tecidual e vascular.Em virtude dos inúmeros mecanismos e da diversidade de moléculas envolvidas na patogênese e progressão da DVC, é essencial conhecer a interação entre elas e também saber quais são as moléculas (biomarcadores) que se correlacionam positivamente ou negativamente com a gravidade da doença. Foram avaliados os níveis de Interleucina-6 (IL-6), sL-selectina, sE-selectina, sP-selectina, molécula de adesão intercelular-1solúvel (sICAM-1), molécula de adesão das células vasculares-1 solúvel (sVCAM-1), ativador tecidual do plasminogênio (tPA), atividade do inibidor do ativador do plasminogênio-1 (PAI-1), trombomodulina solúvel (sTM), fator de von Willebrand (vWF), metaloproteinase de matriz (MMP)-2, MMP-3, MMP-9, inibidor tecidual das MMPs -1 (TIMP-1), angiopoietina-1 e -2, sTie-2 e s-Endoglina e fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) no sangue coletado da veia braquial de 173 mulheres com DVC primária divididas em grupos C2, C3, C4 e C4 menopausadas (C4m) e de 18 voluntárias saudáveis (grupo C0a). Foram também analisados os níveis urinários de ent-prostaglandina F2&#945; nesses grupos. Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas com relação às concentrações sanguíneas e urinárias de sE-selectina, sP-selectina, sICAM-1, atividade de PAI-1, MMP-3, razão TIMP-1/MMP-3, angiopoietin-2, razão angiopoietina-1/angiopoietina-2, s-Endoglina e ent-prostaglandina F2&#945; entre os grupos estudados, possivelmente devido à alta variabilidade na concentração desses biomarcadores entre as participantes do mesmo grupo. Entretanto, as concentrações sanguíneas de IL-6 sL-selectina, sVCAM-1, tPA, vWF, sTM, MMP2, MMP-9, TIMP-1, razão TIMP-1/MMP-2, razão TIMP-1/MMP-9, angiopoietina-1 e VEGF foram estatisticamente diferentes entre os grupos. Não foi identificado nenhum biomarcador que se correlacionasse diretamente ou inversamente com a progressão da DVC, provavelmente devido à diversidade de fatores envolvidos e à complexa interação entre eles durante o curso da doença. / Chronic Venous Disease (CVD) is a complex disorder, which encompasses signs and symptoms that vary from telangiectasias to active ulcers. The CVD is classified according Clinical, Etiologic, Anatomical and Pathophysiological (CEAP) aspects into seven classes varying from C0 to C6. The main cause of CVD is venous hypertension, which alters venous flow and consequently, shear stress. Abnormal shear stress induces phenotypic changes in endothelial cells that start to express pro-inflammatory and pro-thrombotic mediators that lead to leukocyte adhesion, oxidative stress, increased vascular permeability and endothelial cell damage and tissue and vascular remodeling. Due to several mechanisms and the diversity of molecules involved in the pathogenesis and progression of CVD, is essential to know the interplay between them and which are the molecules (biomarkers) that correlate positively and negatively with the severity of the disease. We investigated the levels of interleukin-6 (IL-6), sL-selectin, sE-selectin, sP-selectin, soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1), soluble vascular cell adhesion molecule-1 (sVCAM-1), tissue plasminogen activator (tPA), plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) activity, soluble thrombomodulin (sTM), von Willebrand factor (vWf), matrix metalloproteinase (MMP)-2, MMP-3, MMP-9, tissue inhibitor of metaloproteinases-1 (TIMP-1), angiopoietin-1 and -2, sTie-2, s-Endoglin, vascular endothelial growth factor (VEGF) in the blood taken from the brachial vein of 173 patients with primary CVD divided into C2, C3, C4 and menopaused C4 (C4m) groups and 18 healthy volunteers (C0a group).We also investigated the urinary levels of ent-prostaglandin F2&#945; in these groups. There was no statistically significant difference between groups with respect to blood or urinary levels of sE-selectin, sP-selectin, sICAM-1, PAI-1 activity, MMP-3, TIMP-1/MMP-3 ratio, angiopoietin-2, angiopoietin-1/angiopoietin-2 ratio, s-Endoglin and ent-prostaglandin F2&#945;, likely due to the high variability of these biomarkers concentration among participants within the same group. However, blood levels of IL-6, sL-selectin, sVCAM-1, tPA, vWF, sTM, MMP-2, MMP-9, TIMP-1, TIMP-1/MMP-2 ratio, TIMP-1/MMP-9 ratio, angiopoietin-1 and VEGF were statistically different between groups. It was not identified any biomarker that correlated directly or inversely with the progression of CVD, probably due to the diversity of factors involved and the complex interplay between them in the course of the disease.